蟾蜍基本实验实验报告

生理科学实验报告

实验1：蟾蜍骨骼肌兴奋收缩实验

实验组成员：刘谨、杨莹莹、张敏霞

浙江大学医学院 临床医学（七年制）1008班

【摘要】实验目的：学习使用RM6240多道生理信号采集处理系统和换能器的使用。掌握制备具有正常兴奋收缩功能的蛙类坐骨神经-腓肠肌标本基本操作技术。观察不同刺激强度、频率对肌肉收缩的影响。观察神经-肌肉接头兴奋传递和骨骼肌兴奋的电变化与收缩之间的时间关系及其各自特点。

【关键词】神经-肌肉、刺激强度、频率、电位变化、张力变化

【实验原理】蛙类的某些基本生命活动和生理功能与哺乳类动物有相似之处，而且其离体组织的生活条件比较简单，易于控制和掌握。因此，蛙或蟾蜍的坐骨神经-腓肠肌标本常被用来观察神经-肌肉的兴奋性、刺激与反应的规律及肌肉收缩特点等实验。肌肉组织的兴奋主要表现为收缩活动，一个刺激是否能使组织发生兴奋，不仅与刺激形式有关还与刺激时间、强度、强度-时间变化三要素有关，若用方形电脉冲刺激则组织兴奋只与刺激强度、时间有关，终板电位可引起肌肉产生兴奋在宏观上表现为肌肉收缩。肌肉的收缩形式不仅与刺激本身有关而且还与刺激频率有关。若刺激频率较小，则表现为单收缩，逐渐增大刺激频率则变现为不完全强直收缩，继续增强则表现为完全强直收缩。

【实验步骤】

1. 实验材料

1.1 实验动物：蟾蜍

1.2 实验试剂：任氏液，甘油高渗任氏液

1.3 实验器材：一维微调器，BB-3G屏蔽盒，针形引导电极，张力换能器，RM6240多道生理信号采集处理系统

2. 实验方法

2.1 蟾蜍坐骨神经神经-肌肉标本的制作

取蟾蜍一只常规方法毁脑脊髓，剪断脊柱并且剪除蟾蜍躯干上部以及内脏，避开神经剥除蟾蜍的皮肤，于任试液中清洗，剪除骶骨分离坐骨神经于坐骨神经根部结扎，将标本固定于木板上，分离大腿部坐骨神经，直至分离至腘窝胫神经分叉处。然后剪断股二头肌腱、半腱肌和半膜肌肌腱，并绕至前方剪断股四头肌腱。用剪刀刮除股骨上的肌肉，在距膝关节约1cm处剪断股骨。在腓肠肌肌腱处结扎然后剪断分离出坐骨神经-腓肠肌，并置于任试液中待用。

实验目的

1. 学习暴露蟾蜍心脏的方法，熟悉心脏的结构。

2. 观察心脏各部分自律性活动的时相和频率特点，掌握在体蛙类心脏活动的描记方法。

3. 观察额外刺激对心脏收缩的影响，了解其产生机理。

实验原理

蟾蜍的心脏结构为两心房一心室，心脏的起搏点位于静脉窦，此处的自动节律性最高，心房次之，心室最低。正常情况下，心脏的活动节律以静脉窦的节律为主，其活动顺序为：静脉窦、心房、心室。这种有节律的活动可以通过张力传感器在生理信号采集系统中记录下来，形成心搏曲线。当来自自动节律性高的细胞的兴奋传播途径被阻断时，自律性较低的细胞的节律性将表现出来，引起心脏搏动。

心肌每兴奋一次，其兴奋性就发生一次周期性的变化。心肌属于横纹肌，但因其的有效不应期特别长，几乎占据了整个收缩期和舒张早期，在此期间任何刺激均不能引起心肌的收缩，因此心肌不会产生强直收缩，心脏总是有节律的舒缩。在心室舒张中、后期给以单个阈上刺激，则产生一次正常节律以外的收缩反应，即期前收缩（期外收缩）。当静脉窦传来的节律性兴奋恰好落在期外收缩的收缩期时，心室不再发生反应，需待静脉窦传来下一次兴奋才会收缩。因此在期外收缩之后，就会出现一个代偿间歇。

实验材料与仪器

1. 实验材料：蟾蜍、生理盐水、手术器械、生理信号采集系统、张力传感器、剪刀、镊子等。

2. 实验仪器：解剖显微镜、手术台、生理盐水浴槽、支架、电极等。

实验步骤

1. 杀死蟾蜍，打开胸腔，暴露心脏。

2. 将心脏置于生理盐水浴槽中，连接张力传感器。

3. 使用生理信号采集系统记录心脏活动曲线。

4. 观察心脏自律性活动的时相和频率特点。 5. 给予心脏额外刺激，观察其对心脏收缩的影响。

6. 分析实验结果，总结实验现象。

实验结果

1. 心脏自律性活动的时相和频率特点：正常情况下，蟾蜍心脏的自律性活动顺序为静脉窦、心房、心室。心搏曲线表现为规律性的收缩和舒张。

2. 额外刺激对心脏收缩的影响：给予心脏额外刺激后，出现期前收缩和代偿间歇。期前收缩表现为心脏在正常节律的基础上提前收缩，代偿间歇表现为心脏在期前收缩后暂停一段时间，待下一次节律性兴奋传来后再收缩。

一、实验目的

1. 观察蟾蜍肌肉的收缩现象，了解肌肉收缩的基本原理；

2. 研究刺激强度、频率等因素对蟾蜍肌肉收缩的影响；

3. 掌握蟾蜍肌肉标本的制作和观察方法。

二、实验原理

肌肉收缩是生物体运动的基础，是生命活动的重要组成部分。蟾蜍肌肉实验是生理学中常用的实验之一，通过观察蟾蜍肌肉的收缩现象，可以了解肌肉收缩的基本原理。肌肉收缩是由肌纤维的收缩引起的，肌纤维收缩是由于肌动蛋白和肌球蛋白之间的相互作用。当神经冲动到达肌肉时，肌细胞膜上的电位变化会导致钙离子从肌浆网释放到肌浆中，从而促进肌动蛋白和肌球蛋白的结合，使肌纤维缩短，肌肉收缩。

三、实验材料与仪器

1. 实验材料：蟾蜍、生理盐水、酒精、玻璃针、镊子、剪刀、解剖刀、培养皿、电极、刺激器、张力计等；

2. 实验仪器：显微镜、生理信号采集处理系统、计算机等。

四、实验方法

1. 蟾蜍肌肉标本的制作：

（1）取蟾蜍，用玻璃针进行双毁髓处死，剥去皮肤，暴露腰骶丛神经；

（2）游离大腿肌肉之间的坐骨神经及小腿的腓肠肌，注意不要将胫神经与腓神经分离；

（3）神经端结扎后，剪去无关分支，游离至膝关节处；

（4）肌肉端结扎在肌腱上，将腓神经也一起结扎，结扎线留长；

（5）保留膝关节，剪去腿骨，将标本离体；

（6）用生理盐水清洗标本，去除多余的组织和杂质。

2. 蟾蜍肌肉标本的观察：

（1）将标本的膝关节固定于标本盒R2和R3两记录电极之间的石蜡凹槽内； （2）神经中枢端接触刺激电极S1和S2，肌肉接触记录电极R3和R4，之间接触接地电极；

（3）连接张力换能器，注意连线尽量短，以减小阻力；

（4）打开生理信号采集处理系统，设置实验参数，开始实验。

3. 实验观察：

（1）观察不同刺激强度对蟾蜍肌肉收缩的影响；

（2）观察不同刺激频率对蟾蜍肌肉收缩的影响；

（3）观察蟾蜍肌肉收缩的潜伏期、缩短期和舒张期。

五、实验结果与分析

1. 不同刺激强度对蟾蜍肌肉收缩的影响：随着刺激强度的增加，蟾蜍肌肉收缩的幅度也随之增大，但当刺激强度超过一定范围时，肌肉收缩幅度不再增加。

蟾蜍坐骨神经实验报告

蟾蜍坐骨神经实验报告

一、引言

在生物学研究中，动物模型的使用是不可或缺的。蟾蜍作为一种常见的实验动物，其神经系统的研究一直备受关注。本实验旨在通过观察和分析蟾蜍坐骨神经的结构和功能，深入了解神经系统的运作机制。

二、实验方法

1. 实验材料准备

本实验所需材料包括：蟾蜍、手术刀、显微镜、显微摄像机、生理记录仪等。

2. 实验操作步骤

（1）蟾蜍麻醉：将蟾蜍置于麻醉盒中，使用适量的麻醉剂使其进入麻醉状态。

（2）手术准备：用手术刀小心地在蟾蜍的背部切开一小段皮肤，暴露出坐骨神经。

（3）神经刺激：使用细电极刺激坐骨神经，并记录下相应的电信号变化。

（4）数据记录与分析：使用生理记录仪记录下坐骨神经的电信号，并通过显微摄像机观察和记录蟾蜍的反应。

三、实验结果

通过实验观察和数据记录，我们得到了以下结果：

1. 坐骨神经的结构：坐骨神经是蟾蜍神经系统中的重要组成部分，由多个神经纤维组成。在显微镜下观察，我们可以清晰地看到这些纤维的排列和分布情况。

2. 神经刺激的效果：通过对坐骨神经进行电刺激，我们发现蟾蜍会出现明显的反应，如肌肉的收缩和腿部的运动。这表明坐骨神经对蟾蜍的运动起到了重要的调控作用。

3. 神经信号的记录与分析：通过生理记录仪，我们成功地记录下了坐骨神经的电信号，并进行了进一步的分析。这些信号的变化可以反映出蟾蜍神经系统的活动状态。

四、实验讨论

1. 坐骨神经的功能：坐骨神经是蟾蜍神经系统中的一条重要神经通路，它负责传递运动指令和感觉信号。通过实验观察，我们可以看到坐骨神经的刺激会引起蟾蜍的运动反应，这进一步验证了其在运动调控中的重要性。

2. 神经信号的传导：通过记录和分析坐骨神经的电信号，我们可以了解神经信号的传导过程。这有助于我们深入了解神经系统的工作原理，并为神经疾病的治疗提供参考。

五、实验结论

通过本实验，我们深入了解了蟾蜍坐骨神经的结构和功能。坐骨神经在蟾蜍的运动调控中起到了重要的作用，通过对其电信号的记录和分析，我们可以更好地理解神经系统的运作机制。这对于研究神经疾病和开发相关治疗方法具有重要意义。