下载文档原格式
一、实验目的1. 熟悉紫外-可见分光光度计的原理和操作方法。
2. 掌握紫外-可见分光光度法的基本原理及其在定量分析中的应用。
3. 学会利用标准曲线法测定未知溶液中某物质的含量。
二、实验原理紫外-可见分光光度法是一种基于物质分子对紫外-可见光的选择性吸收而建立起来的分析方法。
当物质分子吸收紫外-可见光后，其外层电子会从基态跃迁到激发态，产生吸收光谱。
通过测定溶液在特定波长下的吸光度，可以计算出溶液中某物质的浓度。
朗伯-比尔定律（Lambert-Beer Law）是紫外-可见分光光度法的基础，其表达式为：A = εlc其中，A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，l为光程长度，c为溶液浓度。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外-可见分光光度计、容量瓶、移液管、比色皿、洗耳球等。
2. 试剂：标准溶液、未知溶液、溶剂等。
四、实验步骤1. 标准溶液的配制：准确称取一定量的标准物质，用溶剂溶解并定容至一定体积，得到一系列浓度的标准溶液。
2. 标准曲线的绘制：将标准溶液依次倒入比色皿中，在特定波长下测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
3. 未知溶液的测定：将未知溶液倒入比色皿中，在相同条件下测定吸光度。
4. 未知溶液浓度的计算：根据未知溶液的吸光度，从标准曲线上查得对应的浓度。
五、实验结果与讨论1. 标准曲线的绘制：绘制标准曲线后，发现吸光度与浓度呈线性关系，相关系数R²大于0.99，说明该实验符合朗伯-比尔定律。
2. 未知溶液的测定：将未知溶液的吸光度代入标准曲线，查得对应的浓度为xmol/L。
3. 实验误差分析：实验过程中可能存在的误差包括仪器误差、操作误差、环境因素等。
为减小误差，本实验采用以下措施：a. 选用高精度的容量瓶和移液管，确保溶液体积的准确性；b. 严格控制实验环境，避免外界因素对实验结果的影响；c. 重复实验，取平均值，以提高实验结果的可靠性。
六、实验结论通过紫外-可见分光光度法测定溶液中某物质的含量，可以快速、准确地得到结果。
仪器名称Name记录编号Record No紫外可见分光光度计校验记录QC人员起草/日期：QC部门审核/日期：QA部门审核/日期：质量负责人批准/日期：执行日期：记录审核人/日期: 检验时间：至QA发放人/日期: 发放号:【仪器信息】【100%T基线平直度】实验步骤：扫描速度（中速）、狭缝宽度：1nm、扫描波长范围：200nm-700nm，参比和样品光束皆为空白，进行全波段扫描。
图谱参见：可接受标准：测量谱图中透光率值应在99.7%-100.3%之间。
结果判定校验结果：符合规定□不符合规定□校验者/日期：复核者/日期：【准确度与重复性】试液信息：实验步骤：将仪器波长设置于700~200nm范围，狭缝宽度：1nm，以空气为空白，调节透光率为100%。
空白扫描图谱参见：取上述氧化钬溶液，置1cm石英吸收池中，放入样品光路，以适当的扫描速度绘制氧化钬溶液的吸收图谱并打印出峰值，与氧化钬的标准吸收峰241.13nm、278.10nm、287.18nm、333.44nm、345.47nm、361.31nm、416.28nm、485.29nm、536.64nm和640.52nm相比较。
重复测定三次，取平均值与标准吸收峰值比较，即为波长准确度的误差。
三次测定值的最大值减最小值即为重复性的误差。
可接受标准：波长准确度的误差在±1.0nm范围内；波长重复性的误差≤0.5nm。
结果判定校验结果：符合规定□不符合规定□校验者/日期：复核者/日期：【漂移】实验步骤：仪器经热平衡2小时后，将波长置于500nm处，狭缝宽度：1nm，参比和样品光束皆为空白，定波长扫描，扫描1小时，测量出谱图上0线的平行包络线的变化值，此即为仪器的漂移值。
图谱参见：可接受标准：漂移值应小于0.002A。
结果判定校验结果：符合规定□不符合规定□校验者/日期：复核者/日期：【100%T线噪声】实验步骤：波长置于230nm，狭缝宽度：1nm，扫描速度：中速，参比光束和样品光束皆为空白，扫描2min，观察100%线的变化。
NJTY/JS-JY10 南京泰宇环境检测有限公司
第 页共 页
分光光度法检测原始记录
受检单位 模 拟 样品受理编号 检测项目 检测依据 收样日期
检测日期
设备名称 紫外可见分光光度计
设备编号
NJTY/YQ126
选用波长
nm 比色皿规格（mm ）
标准溶液浓度 mg/L
标准溶液编号
1、绘制标准曲线 ：制备标准系列并测其吸光度。
2、曲线参数：
标准曲线方程： 回归系数r ： 3、样品测定：
样品编号 吸光度A 含量(μg) 浓度 C
(mg/L ）
样品编号 吸光度A 含量μg
浓度 C
(mg/L 3）
空白吸光度：A 0=
计算公式： 管号 标准溶液
（mL ） 含量 （μg ） 吸光度 Ⅰ Ⅱ Ⅲ 平均值 0 1 2 3 4 5 6 7 8
检测： 校核： 环境条件：室温 ℃， 相对湿度 %。
紫外-可见分光光度计(UVPROBE)一(实验目的: 紫外可见分光光度计是一种历史悠久、覆盖面很广、在有机化学、生物化学、药品分析、食品检验、医药卫生、环境保护、生命科学等各个领域的科研、生产工作中都得到了极其广泛的应用。
因此通过此实验，可以了解 UVPROBE 仪器的实验结构和实验原理，简单操作步骤和注意事项，会用光度计仪器来分析样品镀膜的透射率，来达到工作上对镀膜性质分析的需要。
二(实验原理: 物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。
由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。
分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
物质在光的照射下会产生对光的吸收效应，而且物质对光的吸收是具有选择性的。
各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱。
因此不同波长的单色光通过溶液时其光的能量就会被不同程度的吸收，光能量被吸收的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也就是紫外可见分光光度法的定量分析基础是朗伯 - 比尔Lambert-Beer定律。
即物质在一定浓度的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比。
三(实验器材: 台式电脑，紫外-可见分光光度计 UV2550，干净的玻璃片，镀膜的玻璃片。
四(实验步骤: 1. 首先打开电源的总开关，然后打开电脑，等电脑待机状态的时候再打开光度计仪器的开关。
2. 要预热五到十分钟，然后打开软件，进入软件的操作界面。
3. 然后初始化，点击菜单的“M” ，在“测定”菜单中中的波长范围中改变参数，开始选择 900，结束选择 300。
然后选择吸收或者透射，点击“baseline”按键，然后点击“connect”按键，开始初始化。
紫外可见分光光度法测定氨氮原始记录执行标准 HJ 535-2009 仪器名称型号紫外可见光分光光度计检验人标准浓度C （mg/L）C = + A相关系 r=420 nm吸光A结mg/L吸光A备样品名日稀释倍mL取样体mL定容体检测浓mg/L紫外可见分光光度法测定硝酸盐原始记录执行标准 HJ/T 346─ 2007仪器名称型号紫外可见光分光光度计检验人标准浓度C （mg/L）C = + A220 nm吸光度Ar=相关系数 275 nm 吸光度AA 220 nm /275 nm 吸光度mg/Lmg/LmL样品名称日期取样体积结果备注定容体积mL稀释倍数检测浓度 //录记始原氮总定测法度光光分见可外紫执行标准 GB11894 ─ 89仪器名称型号可见光分光光度计检验人标准浓度C （mg/L）C = + A吸光度220 nmA相关系 r=275 nm吸光A220 nm /275 nm吸光A检测浓mLmg/L结mg/LmL定容体样品名日备稀释倍取样体紫外可见分光光度法测定总磷原始记录执行标准 GB 11893-89 仪器名称型号紫外可见光分光光度计检验人mg/L标准浓度C （） C = + A相关系数 r= 吸光度700 nm A结果mg/L日期 mg/L稀释倍数备注吸光度AmLmL取样体积样品名称定容体积检测浓度pH 值检验原始记录检验人玻璃电极法分析方式仪器名称型号GB/T 6920 - 86执行标准．样品标准缓冲溶液校准 pH值备注日期/样品名称日期标准缓冲溶液校准 pH值备注日期名称生化需氧量（BOD）检验原始记录分析方*仪器型号名BO测定检验样mg/L出样时取样体mL进样时读数结日名日日时月日分时分月容量法测定化学需氧量（CODcr）检验原始记录分析方式密闭消解滴定法 KCrO浓度 C = mol/LKCrO体积 V = mL12272217检验人标定浓度计算公式 = V * C / V 结果公式COD = （V—V）* C * 8000/ V2Cr 1021CV mol/L标定浓度 mL 滴定体积V mg/L结果检测浓度mg/L备注 mL 滴空白体积V取样体积 mL02样品名称日期（ mol/L）重量法测定悬浮物检验原始记录样品浓度(g)试样重称量瓶+ 恒重(g)恒重(g) 滤膜称量瓶滤膜悬浮物+GB 11901 - 89 + 执行标准C (mg/l)检验人平均21平均21称量V试样体积样品名称/日期(ml)瓶号污泥沉降比及污泥浓度分析原始记录表称量称量净泥MLSSSVI坩滤坩滤MLVSS灰检验S日样品名3mL/gg干mg/L 残mLg滤 g干mg/。
