下载文档原格式
高效液相色谱法测定氯霉素泡腾片中氯霉素含量氯霉素泡腾片为《中国人民解放军医疗机构制剂规范》中收载的外用制剂，属于抗生素类药物，临床上主要用于阴道炎及宫颈糜烂。
本品现行质量标准为《中国人民解放军医疗机构制剂规范》[1]，该标准规定本品每片含氯霉素（C11H12Cl2N2O5）应为标示量的85.0%～115.0%，含量测定采用紫外分光光度法。
《中国药典》2010年版颁布后，氯霉素原料药的含量测定方法采用高效液相色谱法，为提高氯霉素泡腾片的质量标准，有效控制产品质量，本研究参考《中国药典》2010年版及文献方法[2-4]，拟建立高效液相色谱法测定氯霉素泡腾片中氯霉素的含量。
研究结果表明本方法操作简便，专属性好，精密度高，可作为氯霉素泡腾片的含量测定方法。
1 仪器与试药Agilent1100高效液相色谱仪；BT25S电子天平（赛多利斯）；UNICO-2102C型紫外分光光度计（上海UNICO仪器XX公司）；PHS-3E型pH计（上海雷磁）。
甲醇、乙腈为色谱纯（上海星可高纯溶剂XX公司）；庚烷磺酸钠为色谱纯（天津市科密欧化学试剂XX公司）；三乙胺、磷酸二氢钾为分析纯（北京化工厂）。
氯霉素（中国食品药品检定研究院，批号：130555-201203）；氯霉素二醇物（中国药品生物制品检定所，批号：130436-200704）；对硝基苯甲醛（中国药品生物制品检定所，批号：130562-200902）；氯霉素泡腾片（解放军总医院第一附属医院自制，批号130903、130904、130905）。
2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱：Kromasil 100-5 C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：0.01 mol/L庚烷磺酸钠缓冲溶液（取磷酸二氢钾6.8 g，用0.01 mol/L庚烷磺酸钠溶液溶解并稀释至1000 mL，再加三乙胺5 mL，混匀，用磷酸调pH值至2.5）-乙腈（70∶30）；柱温：室温；检测波长：274 nm；流速：1.0 mL/min；进样量：10 μL。
•药剂.氯霉素滴眼液的稳定性研究阮艺静鲁方圆谢峻2,韩晓东3,汪强姜泽慧14（1-马鞍山市食品药品检验中心，安徽马鞍山243302；2.马鞍山市师范高等专科学校食品工程系，安徽马鞍山233300；.内蒙古自治区植物逆境生理与分子生物学重点实验室，内蒙古呼和浩特010018）摘要：目的研究氯霉素滴眼液稳定性的影响因素。
方法设置不同的光照时间、温度和氧化剂浓度，对氯霉素滴眼液进行处理后按法定方法检测。
结果光照使氯霉素含量下降，对硝基苯甲醛含量升高，pH值下降，溶液颜色改变；温度升高使氯霉素含量下降，氯霉素二醇物含量升高；过氧化氢溶液使氯霉素含量下降。
结论光照、高温及氧化均会使氯霉素滴眼液含量下降，有关物质改变。
关键词：氯霉素滴眼液;稳定性；高效液相色谱法中图分类号：R94文献标识码：A文章编号：1006-3765（2021）-00-0000-04Research on Stability of Chloramphenicol Eye DropsRUAN Yi-jing1,LU Fang-yuan1,XIE Jun2,HAN Xico-dong3,WANG Qicng1,JIANG Ze-hul1*(0Ma'anshan Food and Drag Aspectlon CenteaMa'anshan233300,Chlna；2.Department of Food Engineeclng,Ma'ans-han Teacher's College,Ma'anshan243000,China；3.I nner Mongolic Key Laboratoc of Plont Stress PhysC ology and Moloculot Biology,Hohhot010010,China)ABSTRACT：OBJECTIVE To study factora affectina thu stdbility of caioramppeuicol eyu daps.METHODS Stirs staniarn methoPs were rseU to evalraic cOlorampPeuicol eyu yaps aftun beina treuteU with differeui light time, temperatrra ani oxiCaat coaceutatioa.RESULTS Sanlight decreuseU thu couteut of cOlorampPeuicol and pH,ia・creuseU thu cooteut of nitroUeuzaldeUyUe ant cOanaeU thu coloa of solutioa.Thu cooteut of caloramppeuicol decreuseU ant thu couteut of cOloramppeuicol glycol iacreuseU with thu incadso of temperatnrUi Thu couteut of cOloramppeuicol decreuseU with UyUrooeu peroxine solution.CONCLUSION Snnlight,Uigh temperatnre ant oxicatioo lean I o thu droppini of couteut of cOloramppeuicol ant cOanae relateU sunstaaceSlKEY WORDS:Chlorampheaicci Eye Droos;Stanility；HPLC氯霉素滴眼液为眼用处方药，主要用于治疗由大肠杆菌、流感嗜血杆菌、克雷伯菌属、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和其他敏感菌所致眼部感染，比如沙眼、结膜炎、角膜炎、眼睑缘炎等。
制药工程专业基础实验《药物分析》部分氯霉素眼药水的HPLC分析一、实验目的1.学习内标法和外标法测定组分的含量。
2.了解高效液相色谱仪的结构及正确使用。
二、实验内容和要求（一）实验原理高效液相色谱是在经典液相色谱的基础上由于引入了气相色谱的理论而发展起来的。
以液体作为流动相，根据柱填料不同。
可分为吸附，分配，离子交换，凝胶渗透四种高效液相法、本实验采用ODS柱进行反相高效液相色谱。
通过本实验应掌握内标法，外标法定量的原理，方法及优缺点并加强高效液相色谱仪的操作技能训练。
内标物可以消除仪器与操作或制备样本时带来的误差，精密称取样品后，加入一定量的内标物，然后制成适当溶液进样分析。
根据样品和内标物的重量及其相应的峰面积比，求出某组分的含量。
外标法又称校正法或定量进样法。
本法要求能准确地定量进样，配制一系列已知浓度的标准液，在同一操作条件下，按同量注入色谱仪，测量其峰面积（或峰高），作峰面积（或峰高）与浓度的标准曲线.然后在相同条件下，注入同量样品溶液，测量待测组分的峰面积（或峰高），根据标准曲线，计算样品中待测组分的浓度。
氯霉素是抗生素类药物，微溶于水，且具苯环结构，所以可以用反相高效液相色谱法进行分离，并用UV254nm进行检测，甲醇-水作流动相。
三、实验主要仪器设备和材料试剂及仪器高效液相色谱仪，柱ODS柱（15cm×5mm），电子天平，100ml容量瓶，氯霉素标准品，2mg/ml对硝基苯酚（内标）标准贮备液，氯霉素眼药水样品，甲醇等。
氯霉素：广谱抗生素，原在土壤中。
1947年从南美洲委内瑞拉的委内瑞拉链霉菌中提取，1949年实现人工合成四、实验方法、步骤及结果测试（一）实验条件高效液相色谱仪柱ODS柱（15cm×5mm）流动相：内标法甲醇:水（60:40）；外标法甲醇:水（80:20）流速：0.7ml/min波长：254nm采样时间设置：5min进样量：10ul（二）标准贮备液的制备（待修改）1mg/ml氯霉素标准贮备液的配制：精密称取氯霉素100mg至100ml容量瓶中，以甲醇溶解，并稀释至刻度。
HPLC法测定氯霉素滴眼液含量的不确定度分析目的建立HPLC 法测定氯霉素滴眼液含量的不确定度分析的一般方法。
方法建立计算氯霉素滴眼液含量的不确定度的数学模型，找出影响不确定度的因素，并对各个不确定度分量进行评估。
结果计算各变量的不确定度分量，最终给出测量结果的扩展不确定度和置信水平。
含量测定的标准不确定度为0.522%，扩展不确定度为1.0%。
含量测定结果表示为（94.64±1.0）%，包含因子k=2。
結论建立的不确定度评估方法适用于对HPLC 法测定的氯霉素滴眼液含量进行不確定度分析。
[Abstract] Objective To establish the general method of determination of chloramphenicol eye drops by HPLC. Methods A mathematical model for calculating the uncertainty of chloramphenicol eye drops content was established. Factors affecting uncertainty was selected. The uncertainty components were evaluated. Results The uncertainty components of each variable were calculated，and the extended uncertainty and confidence level were given. The standard uncertainty of measurement was 0.522%，and the expanded uncertainty was about 1%. The results were expressed as （94.64±1）%，including factor k = 2. Conclusion The method of uncertainty evaluation is suitable for the determination of the content of Chloramphenicol Eye Drops by HPLC.[Key words] Measurement uncertainty；Chloramphenicol eye drops；HPLC近年来广东省省级及以上食品药品检验实验室均开展了大量的测量不确定度评定工作，但地方市级食品药品检验检测室则对测量不确定度评定工作了解不多。
