12.川西獐牙菜检验操作规程
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高效液相色谱法测定川东獐牙菜中獐牙菜苦苷的含量目的:建立川东獐牙菜中獐牙菜苦苷的含量测定方法。
方法:采用高效液相色谱法,Crest C18(4.6 mm×250 mm,5 μm) 色谱柱,流动相:甲醇-水(25∶75),流速:1 ml/min,检测波长:254 nm,柱温:25℃。
结果:獐牙菜苦苷在0.4~2.0 μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为99.78%,RSD=1.86%(n=6)。
结论:该方法简便、准确,重现性好, 可作为川东獐牙菜中獐牙菜苦苷的含量测定方法。
[Abstract] Objective: To establish a method for the determination of Swer-tiamarin in Swertia davidi Franch. by HPLC. Methods: High performance liquid chromatography was performed on C18 column. The chromatographic conditions were as follows: methyl alcohol-water (25∶75) as mobile phase,flow rate being 1.0 ml/min, the detecting wavelength at 254 nm and column temperature being 25℃. Results: Swertiamarin had good linear relation within the range from 0.4 to 2.0 μg (r=0.999 9). The average recovery was 99.78% with a RSD of 1.86% (n=6). Conclusion: This method is convenient, accurate, reproducible, and can be used for content determinaton of Swertiamarin in Swertia davidi Franch..[Key words] Swertia davidi Franch.; Swertiamarin; Content determination川东獐牙菜(Swertia davidi Franch.)又名水灵芝、鱼胆草、青鱼胆草、水黄连,为龙胆科獐芽菜属植物川东獐牙菜的干燥全草。
不同种獐牙菜中獐牙菜苦苷含量比较肖怀,宋玉林,王胤,张桢(云南大理学院药学院,云南大理 671000)摘要:目的比较不同品种獐牙菜植物中獐牙菜苦苷含量,为合理选择利用资源提供依据。
方法甲醇超声提取獐牙菜植物中的活性成分,通过HPLC测定其中的獐牙菜苦苷含量。
色谱条件: ZORBAX SB-C18(4.6 mm×150 mm,5 µm)色谱柱,流动相为水-乙腈(92∶8),流速1 mL·min-1,柱温25 ℃,检测波长为238 nm。
结果獐牙菜苦苷在检测范围内线性良好(r=0.999 4),加样回收试验的平均回收率为99.2%,重复性试验RSD为1.73%(n≥5)。
几种獐牙菜中獐牙菜苦苷含量在0.58%~12.86%。
结论獐牙菜苦苷含量在獐牙菜属植物中种间差别比较大。
关键词:獐牙菜;獐牙菜苦苷;含量测定;高效液相色谱法中图分类号:R284.1 文献标志码:B 文章编号:1007-7693(2009)09-0730-03Content Compareing of Swertiamarin in Different Species of SwertiaXIAO Huai, SONG Yulin, WANG Yin, ZhANG Zhen (Department of Pharmacy, Dali College, Dali 671000, China) ABSTRACT: OBJECTIVE To compare the content of swertiamarin in different species of Swertia for reasonable resourceexploitation. METHODS The components were extracted by ultrasonic methanol and swertiamarin content determined by HPLC. The chromatographic condition as follow: ZORBAX SB-C18(4.6 mm×150 mm, 5 μm) column, the detection wavelength was set at 238 nm with mobile phase of water-acetonitrile (92∶8), flow rate of 1.0 mL·min-1 and column temperature of 25 .℃RESULTS The calibration curve was in good linear relationship (r=0.999 4) with average recovery of 99.2%. The reproduction was 1.73%(n≥5). The content of swertiamarin varied from 0.58% to 12.86% in six Swertia herbs. CONCLUSION The content of swertiamarin was remarkable different in Swertia herbs.KEY WORDS:Swertia; Swertiamarin; content determination; HPLC獐牙菜苦苷(Swertimarin)是龙胆科(Gentianaceae)獐牙菜属(Swertia L.)植物中的主要成分之一。
制备型高效液相色谱法分离纯化川西獐牙菜提取物中的龙胆苦苷雷宇佳;高明哲;王莉;肖红斌【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2010(28)9【摘要】龙胆苦苷(GPS)是龙胆类药材及其相关制品质量控制的指标成分.本研究利用制备型高效液相色谱从川西獐牙菜提取物中分离纯化龙胆苦苷对照品.对制备色谱的流动相组成、流速、进样量和检测波长等制备参数进行了优化.采用的色谱柱为C18柱(200 mm×50 mm, 5 μm),流动相为甲醇和0.1%乙酸水溶液(体积比为30:70),流速为75 mL/min,检测波长为254 nm,进样体积为500 μL.在30 min 的运行时间内,龙胆苦苷与其他干扰成分得到了很好的分离,产品纯度达到了99%以上.此方法具有快速高效、产品纯度高的特点,可用于制备龙胆苦苷对照品和对龙胆苦苷制品的质量控制.【总页数】3页(P902-904)【作者】雷宇佳;高明哲;王莉;肖红斌【作者单位】中国科学院大连化学物理研究所,辽宁,大连,116023;中国科学院大连化学物理研究所,辽宁,大连,116023;中国科学院大连化学物理研究所,辽宁,大连,116023;中国科学院大连化学物理研究所,辽宁,大连,116023【正文语种】中文【中图分类】O658【相关文献】1.制备型高效液相色谱法分离纯化绿原酸 [J], 王锐2.制备型高效液相色谱法分离纯化山茱萸中马钱苷 [J], 赵新燕;周建民;秦学3.制备型高效液相色谱法从积雪草提取物中分离纯化积雪草甙和羟基积雪草甙对照品 [J], 高明哲;袁晓艳;肖红斌4.制备型高效液相色谱法从秦艽中分离制备龙胆苦苷 [J], 张兴旺;陶燕铎;梅丽娟;邵赟;文怀秀;赵晓辉5.半制备型高效液相色谱法分离纯化吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱 [J], 秦秀秀;李爱峰;孙爱玲;柳仁民因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
鱼腥草质量标准文件类别SMP 起 草: 年 月 日 审 核: 年 月 日 批 准: 年 月 日 执行日期: 年 月 日文件名称鱼腥草质量标准 文件编码 SMP-QMP18302 1.目的:为了规范公司鱼腥草的质量标准,特制定此规程。
2.范围:本标准规定了鱼腥草的质量标准。
3.职责:质量部长、化验室主任对本标准的实施负责。
4.标准依据:《中国兽药典》2010年版二部5.内容: 本品为三白草科植物蕺菜Houttuynia cordata Thunb .的新鲜全草或干燥地上部分。
鲜品全年均可采割;干品夏季茎叶茂盛花穗多时采割,除去杂质,晒干。
【性状】鲜鱼腥草 茎呈圆柱形,长20~45cm ,直径0.25~0.45cm;上部绿色或紫红色,下部白色,节明显,下部节上生有须根,无毛或被疏毛。
叶互生,叶片心形,长3~lOcm ,宽3~llcm ;先端渐尖,全缘;上表面绿色,密生腺点,下表面常紫红色;叶柄细长,基部与托叶合生成鞘状。
穗状花序顶生。
具鱼腥气,味涩。
干鱼腥草 茎呈扁圆柱形,扭曲,表面棕黄色,具纵棱数条;质脆,易折断。
叶片卷折皱缩,占平后呈心形,上表面暗黄绿色至暗棕色,下表面灰绿色或灰棕色。
穗状花序黄棕色。
【鉴别】(1)取干鱼腥草粉末适量,置小试管中,用玻棒压紧,滴加品红亚硫酸试液少量至上层粉末湿润,放置片刻,自侧壁观察,湿粉末显粉红色或红紫色。
(2)取干鱼腥草25g (鲜鱼腥草125g )剪碎,照挥发油测定法加乙酸乙酯1ml 缓缓加热至沸,并保持微沸4小时,放置半小时,取乙酸乙酯液作为供试品溶液。
另取甲基正壬酮对照品,加乙酸乙酯制成每1ml 含10µl 的溶液,作为对照品溶液。
照薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液5µl 、对照品溶液2µl ,分别点于同一硅胶G 薄层板上,以正己烷—乙酸乙酯(9:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以二硝基苯肼试液。
供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同的黄色斑点。
川西獐牙菜中芒果苷的提取分离研究【摘要】目的从川西獐牙菜中提取分离芒果苷。
方式采用溶剂提取法及聚酰胺柱色谱分离法,经化学和光谱法肯定其结构。
结果提取产物经结构鉴定确证为芒果苷,平均收率为%。
结论该提取分离方式简便,易于操作,而且提取率较高。
【关键词】川西獐牙菜芒果苷提取分离川西獐牙菜主要散布在四川西北部和青海玉树地域,目前已大量人工栽培。
川西獐牙菜具有清热解毒、利胆退黄功效,全草用于医治肝胆疾病[1]。
研究资料表明,川西獐牙菜中主要含有獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、芒果苷、当药黄索、齐墩果酸等化学成份[2,3],其中抗肝炎有效成份主要为齐墩果酸和芒果苷[2]。
芒果苷在川西獐牙菜中的含量达%[4]。
芒果苷除具有保肝利胆、抗肝炎作用外,还具有多方面的生理活性和药理作用,包括止咳、祛痰、平喘、抗炎、免疫、抗脂质过氧化、抗病毒、抗菌、抗糖尿病和抗肿瘤等作用[5]。
由于芒果苷具有普遍的生理活性和药理作用,因此研究川西獐牙菜中的芒果苷的提取分离方式具有重要的意义。
笔者通过反复研究探索,找到了一种简便易行的提取分离方式。
该法芒果苷的收率为%(以生药计)。
现报导如下。
1 仪器与材料YRT-3型药物熔点仪(温度未经校正,天津大学精密仪器厂);Agilent 1100可见紫外分光光度计(美国Agilent公司);IR-450型傅立叶变换红外光谱仪(KBr压片,Perkin-Elmer公司);Waters Quattro Micro质谱仪(美国Waters公司);AV超导核磁共振仪(TMS内标,瑞士布鲁克公司);薄层层析硅胶G(青岛海洋化工厂);聚酰胺薄膜及柱层析聚酰胺(浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂);芒果苷对比品(,购于中国药品生物制品检定所)。
川西獐牙菜200705收集四川小金新桥,经泸州医学院中药鉴定教研室鉴定为Swertia mussotii Franch,实验用全草。
2 提取分离方式取500 g川西獐牙菜粉碎成粗粉,60%乙醇回流提取3次,每次8倍量×2 h,归并提取液,减压浓缩至无醇味,加水混悬,依次用石油醚、醋酸乙酯,正丁醇萃取。
川西獐牙菜醇提水沉部位抗黄疸性肝损伤的活性研究吕坪;杜玉枝;李岑;魏立新【期刊名称】《时珍国医国药》【年(卷),期】2011(22)5【摘要】目的了解川西獐牙菜醇提水沉部位抗CCl4诱导大鼠肝损伤性黄疸的保肝作用。
方法设置空白对照组(20 ml/kg BW蒸馏水)、模型对照组(20 ml/kg BW蒸馏水)、低浓度川西獐牙菜醇提水沉部位组(0.9 g/kg BW),高浓度川西獐牙菜醇提水沉部位组(1.8 g/kg BW)、阳性对照组(80 mg/kg BW联苯双酯),灌胃大鼠8d。
末次给药2 h后,除空白对照组,其余各组腹腔注射0.6 ml/kg BW CCl4,建立大鼠肝损伤性黄疸模型;禁食22 h后,腹动脉采血,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性、总胆红素(TBIL)和胆汁酸(TBA)的含量。
结果川西獐牙菜醇提水沉部位可以显著降低血清ALT和AST活性,TBIL和TBA的含量,并且给药量在0.9 g/kg BW和1.8 g/kg BW时保肝活性具有一定的剂量关系。
结论川西獐牙菜的醇提水沉部位对CCl4诱导的肝损伤性黄疸具有显著的降酶退黄功效。
【总页数】2页(P1098-1099)【关键词】川西獐牙菜;醇提水沉部位;四氯化碳;肝损伤性黄疸【作者】吕坪;杜玉枝;李岑;魏立新【作者单位】中国科学院西北高原生物研究所;中国科学院研究生院【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.醇提水沉与水提醇沉提取杜仲叶活性成分的比较研究 [J], 夏循礼;陈勇2.铁钉菜水提醇沉上清液部分的抗氧化、抗酪氨酸酶活性及其冲剂的降糖作用 [J], 黄晓冬; 黄世英; 蔡建秀; 王玲平; 孙波; 谢秋燕3.夏枯草酶解水提液分级醇沉及其抗HSV-1活性 [J], 张群铄;谭红胜;付文卫;尚宇婧;徐宏喜4.绞股蓝水提醇沉液抗川楝子致小鼠慢性肝损伤的实验研究 [J], 彭心怡;倪锴文;丁阳阳;金红婷;王萍5.轮叶党参水提醇沉物对小鼠酒精性肝损伤的保护作用 [J], 刘智;韩春姬;韩颖;李莲姬;马莉因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
藏药“甲蒂(印度獐牙菜)”中龙胆苦苷和獐牙菜苷等10种成分的含量测定与质量评价目的:建立印度獐牙菜中龙胆苦苷、獐牙菜苷、芒果苷等10种成分的含量测定方法,确定其含量测定指标成分及其限量标准。
方法:用Welch materials AQ-C18色谱柱;以甲醇和0.4%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱;柱温30 ℃,流速1.0 mL·min-1,检测波长254 nm。
结果:线性关系良好,精密度高,重复性好,回收率均在97%~103%;市场商品中各成分含量变异较大。
结论:该方法简便、灵敏、重复性好,适用于印度獐牙菜中各主要成分的含量测定;建议以獐牙菜苷和芒果苷作为“甲蒂(印度獐牙菜)”的含量测定指标成分,其含量限量分别为不得低于0.1%,0.3%。
标签:藏药;甲蒂;印度獐牙菜;HPLC;含量测定;含量限量“蒂达”(俗称“藏茵陈”)为藏医临床上主要用于肝胆疾病的一类常用药材,具有清肝利胆、利尿、续筋骨、止血等多种功效,临床广泛用于急性黄疸性肝炎、病毒性肝炎、胆囊炎、赤巴病、流行性感冒等多种疾病的治疗,约有10%的经典和现代藏药制剂,如二十五味珊瑚丸、二十五味獐芽菜丸、甘露灵丸、八味獐芽菜丸、五味獐芽菜散等中均使用有“蒂达”类药材。
藏医根据”蒂达”的来源、产地、功效等的差异,将“蒂达”分为“甲蒂”、“松蒂”、“桑蒂”、“机合蒂”等多个品种,其基原涉及到龙胆科、虎耳草科等的多属多种植物,其中“甲蒂”是藏医传统使用的“蒂达”类药材的代表性品种之一,来源于龙胆科植物印度獐牙菜Swertia chirayita (Roxb.ex Flemi)Karsten,以全草入药,目前药材主要从尼泊尔、印度等进口[1-3]。
关于“蒂达”类药材的质量标准,目前《中国药典》(2010年版)[4]、《部颁标准·藏药》(第一册)[5]、《藏药标准》[6]及《青海省药品标准》[7]中分别收载有唐古特虎耳草Saxifraga tangutica Engl.(迭达)[4]、印度獐牙菜S. chirayita(甲蒂)[5]、川西獐牙菜S. mussotii Franch.(桑蒂、藏茵陈)[5,7]、抱茎獐牙菜S. franchetiana S. Smith.(藏茵陈)[7]、普兰獐牙菜S. purpurascens Wall.(蒂达)[6]、椭圆叶花锚Halenia elliptica D.Don.(甲地然果)[5-7]、湿生扁蕾Gentianopsis paludosa(Mum.)Ma(加蒂那布)[5,7]、伞梗虎耳草S. pasumensis Marq. et Shaw、聚叶虎耳草S. confetifolia Engl.、虎耳草S. candelabrum Franch.(松蒂)[6],但上述标准中均无成分对照的【鉴别】和【含量测定】项规定,标准不完善。
川西獐芽菜中三种山酮成分的含量测定摘要】目的利用反相高效液相色谱法建立川西獐芽菜中3种山酮的含量测定,即用Kromasil-C18 (250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以流动相甲醇和水(含0.04%磷酸)的比例在0~20min内由65%至85%线性梯度洗脱,流速0.80ml?min-1,检测波长为254nm,柱温30℃。
结果山酮成分达到基线分离,山酮的线性范围为0.05~6.25μg(r=0.9997)。
结论测定方法快速、结果准确、可靠。
【关键词】山酮川西獐芽菜龙胆科反相高效液相色谱川西獐芽菜(S. mussotii Franch)系龙胆科(Gentianaceae)獐芽菜属(Swertia)植物,主要产于青海、西藏及四川等地,是藏族民间常用的单方草药,俗名“藏茵陈”。
具有清热解毒,利胆退黄之功能,可治疗肝炎,黄胆型肝炎,肝胆等疾病[1]。
山酮又叫苯丙色原酮,是一种特殊型的黄酮类化合物,在自然界中分布有限,主要分布于龙胆科、藤黄科及远志科等高等植物及一些低等植物中[2]。
山酮类化合物具有广泛的生理活性,是良好的中枢神经抑制剂,心血管兴奋剂,具有利胆和抑制结核杆菌,抑制鼠脑腺体单胺氧化酶等作用[3、6]。
近来对山酮物质的研究已愈来愈引起人们的重视,国内外有学者采用薄层色谱、气相色谱、高效液相色谱等方法对山酮及其衍生物进行过研究[4、5]。
本文利用HPLC测定川西獐芽菜中山酮类有效成分的含量,对评价药材质量及材料源的研究具有重要意义。
1.仪器Agilent1100高效液相色谱仪,配置:手动进样器、在线脱气机、高压二元梯度泵、恒温柱温箱、DAD检测器、Agilent1100色谱工作站Kromasil-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱;KQ3200超声波清洗器;SZ-97自动三重纯水蒸馏器。
2. 试剂甲醇为高效液相色谱专用试剂;水为自制三重蒸馏水;磷酸为AR级。
山酮对照品分析得到(归一化法测定,纯度大于98%)。
栽培与野生川西獐牙菜有效成分的研究拉本;陈志;马永贵【期刊名称】《青海师范大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2010(026)004【摘要】目的:测定野生与栽培川西獐牙菜中3种有效药用成分.即龙胆苦苷、芒果甙和齐墩果酸的含量.方法:采用高效液相色谱法分离和测定川西獐牙菜中龙胆苦苷、芒果甙和齐墩果酸的含量.流动相:甲醇-水-0.5%乙酸(25:75:0.8)、甲醇-0.5%乙酸(25:75)和甲醇-水(90:10);检测波长:270nm、254nm和215nm;流速:1.0mL/min;进样量:10μL.结果:栽培川西獐牙菜中龙胆苦苷、芒果甙和齐墩果酸含量与野生种基本相同.结论:栽培川西獐牙菜完全可以代替野生种.【总页数】4页(P57-60)【作者】拉本;陈志;马永贵【作者单位】青海师范大学,青藏高原环境与资源教育部重点实验室;青海师范大学,生命与地理科学学院,西宁,810008;青海师范大学,青藏高原环境与资源教育部重点实验室;青海师范大学,生命与地理科学学院,西宁,810008;青海师范大学,青藏高原环境与资源教育部重点实验室;青海师范大学,生命与地理科学学院,西宁,810008【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.野生与栽培川西獐牙菜和椭圆叶花锚药效学的比较研究 [J], 何卫华2.野生和栽培川西獐牙菜醇提物红外光谱分析及药效比较研究 [J], 杨红霞;李岑;高婷婷;耿卢婧;魏立新;杜玉枝3.藏药川西獐牙菜人工栽培与野生品种有效成分比较研究 [J], 李冬鸣;曾阳4.不同月龄林下仿野生栽培金线莲有效成分含量研究 [J], 孙加焱; 余红伟; 方锡平5.人工栽培与野生肉苁蓉有效成分及种子质量研究 [J], 黄晶;郑雷因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
川西獐牙菜及制剂中齐墩果酸的高效液相色谱测定
王天勇;杨文远
【期刊名称】《分析测试技术与仪器》
【年(卷),期】1995(001)003
【摘要】中药及制剂中齐墩果酸分离测定的色谱方法的色谱条件是:ODS柱,
甲醇一水(90:10V/V)为流动相,紫外检测器检测波长207nm。
本研究为中药资源开发制剂的质量控制提供了简便、灵敏、准确、快速的分离测定方法。
【总页数】4页(P31-34)
【作者】王天勇;杨文远
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定巴旦木青皮提取物中齐墩果酸和熊果酸 [J], 李维霞;魏佳;苏玉红;吴斌;张平
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3.高效液相色谱法测定中药制剂中齐墩果酸的含量 [J], 游勇基;张桂凤
4.分散液液微萃取-高效液相色谱法同时测定大枣中白桦脂酸、齐墩果酸及熊果酸[J], 崔毅轩;刘迪;周齐齐;高敬林;马海艳;李梦娇;蒋晔
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青海川西獐牙菜的高效液相指纹图谱研究吴启勋;宋萍;祁米香;包锦渊;于军【期刊名称】《西南民族大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2006(032)006【摘要】利用高效液相色谱法建立了青海川西獐牙菜的色谱指纹图谱,色谱条件:KromasilC18柱(250mm×4.6mm×5μm),乙醇:0.04%磷酸水梯度洗脱,流速为1 mL/min,检测波长260nm.通过比较,发现川西獐牙菜样品的9个主要共有峰,可作为鉴别青海川西獐牙菜药材的主要依据.对13批青海川西獐牙菜进行了相似度计算和聚类分析,结果表明,所建立的指纹图谱可用于青海川西獐牙菜药材的真伪鉴别和质量评价.【总页数】5页(P1148-1152)【作者】吴启勋;宋萍;祁米香;包锦渊;于军【作者单位】青海民族学院化学系,西宁,810007;青海民族学院化学系,西宁,810007;青海民族学院化学系,西宁,810007;青海民族学院化学系,西宁,810007;青海民族学院化学系,西宁,810007【正文语种】中文【中图分类】Q946.91;O657.7+2【相关文献】1.康艾注射液中间产品人参提取液中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量测定方法及高效液相指纹图谱研究 [J], 李建英; 李晓彤; 翁红; 王道新; 纪丽岩; 祁宇祥; 王波;米广明2.滇产红花的高效液相指纹图谱研究 [J], 吴晶; 杨怀镜; 周萍3.金莲花颗粒的高效液相指纹图谱研究 [J], 孙秀漫; 周楚娟; 杨佳彬; 杜淑雯; 曾彩芳4.尖叶假龙胆薄层色谱特征图谱及高效液相指纹图谱的研究 [J], 李玉华;刘晶晶;李景清;关金凤5.祖师麻注射液的高效液相指纹图谱研究 [J], 刘妍;王胜利;毕慧敏;游富英;孙秀欣因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
小鼠高血脂快速造模法以及川西獐牙菜提取物对高血脂症作用的研究川西獐牙菜(Swertia mussotii Franch)在青藏高原有野生品也可大量引种,在现代临床上被广泛用于治疗各种肝病,本研究就其对高血脂症的作用进行了研究。
川西獐牙菜传统的用法是用水提取后使用,也多见用醇提物的,但尚无石油醚提取物的相关药理报道。
本研究中选用水及与水极性相差很大的石油醚为溶剂,对川西獐牙菜分别进行提取,以最终提取物为药物进行动物实验,是希望在有效成分不明确的情况下,先进行有效部位的筛选,而良好的高血脂动物模型的建立是研究高血脂症的基础,本研究采用小鼠,先就小鼠快速稳定造模方法进行研究。
由此本研究包含以下两个方面:(1)小鼠高血脂快速造模法的研究设立三种不同造模方法,分别饲养小鼠,实验结束借助组织形态学切片和生化指标的测定来评价实验结果。
结果表明,一次性注射超生理剂量的维生素D3,后高脂饮食饲养21天即可得到较稳定的高血脂小鼠;若注射维生素D3后高脂饮食饲养42天,可得到更成熟的、产生明显实质性病变的小鼠。
(2)川西獐牙菜两种溶剂提取物对高血脂症作用的研究造模6周后灌胃给药2周,检测小鼠血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-c)、低密度脂蛋白(LDL-c);丙二醛(MDA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)。
结果表明,川西獐牙菜水提取物和石油醚提取物,对这7个有代表性的高血脂生化指标,都有治疗作用,且一半以上指标呈现随剂量增加功效随之增强。
川西獐牙菜水提取物用量为1230 mg/kg·d和石油醚提取物用量为410mg/kg·d时,有明确降血脂作用。
但两种提取物同剂量给药后,都有作用,且作用有差异,但不具统计学意义。
由此推断川西獐牙菜确有降血脂功效,至少有两个活性部位,可能作用机制不同。
这为民族药的发展开拓了市场,为有效成分提取提供了捷径,为高血脂症的预防和治疗提供了新的科学依据。
HPLC法测定川西獐牙菜中獐牙菜苷的含量
赵小军;王涛;柯君
【期刊名称】《青海草业》
【年(卷),期】2014(23)4
【摘要】目的:测定川西獐牙菜中獐芽菜苷的含量.方法:采用高效液相色谱法进行测定.色谱条件:SunfireTMC18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相A为甲醇,B为超纯水,分析时间为60min,(梯度洗脱:0min 时,A∶B体积比为25∶75;25min
时,A∶B体积比为60∶40;26min时,A:B体积比为90∶10;36min时,A∶B体积比为25∶75,持续至60min),流量为0.8ml/min,检测波长:为254nm,柱温:25℃;进样量为10μl.结论:本研究所建立的检测方法可快速有效地测定川西獐牙菜中獐牙菜苷的含量.
【总页数】3页(P19-21)
【作者】赵小军;王涛;柯君
【作者单位】青海师范大学生命与地理科学学院,青海西宁810008;青海师范大学生命与地理科学学院,青海西宁810008;青海师范大学生命与地理科学学院,青海西宁810008
【正文语种】中文
【中图分类】S812
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第 1 页共 3 页PLT青海普兰特药业有限公司
企业GMP文件
建立原料检验操作规程,规范原材料的检验,确保生产用原料符合规定。
责任
QC主管起草,质量部经理、质量授权人审核,总经理批准,质量部执行。
依据
《青海省藏药炮制规范》2010年版
操作步骤
1 仪器与用具
1.1仪器:电子分析天平、显微镜、恒温水浴锅、三用紫外分析仪、高效液相色谱仪、电热鼓风干燥箱。
1.2用具:药匙、具塞锥形瓶(100ml)、烧杯(100ml)、移液管(25ml)、滤纸、滴管C18硅胶小柱、展开缸、硅胶G板、定量点样器、喷瓶。
2 试药与试液
2.1试药:乙醇(分析纯)、无水乙醇(分析纯)、甲醇(色谱纯)、磷酸(色谱纯)、环己烷(分析纯)、三氯甲烷(分析纯)、乙酸乙酯(分析纯)、甲酸(分析纯)。
2.2试液:
水合氯醛试液:取水合氯醛50g,加水15ml与甘油10ml使溶解,即得。
1%乙酸镁甲酸溶液:取乙酸镁1g,加甲酸是溶解成100ml,即得。
1%三氯化铁乙醇溶液:取三氯化铁1g,加乙醇使溶解成100ml,即得。
10%硫酸乙醇溶液:取硫酸57ml,加乙醇稀释至1000ml,即得。
本液含H2SO4应为9.5%~10.5%。
3 操作方法
3.1性状
本品为不规则的段,根呈圆锥状,表面淡黄色或土黄色,易折断,断面不平整,类白色。
茎近四棱,粗细不等,有节,节上有对生的枝,淡绿色至淡黄色。
叶片多脱落破碎,完整叶片长1~5㎝,长矩圆形或披针形,先端钝尖,基部渐狭,全缘、花皱缩,花冠4或5深裂,淡黄色至淡蓝色。
气清香,味苦。
3.2鉴别
(1)本品粉末黄绿色。
色素块随处散在,绿色或黄绿色。
木纤维甚多,成束散在,多已破碎,末端倾斜,纤维壁具斜纹孔。
导管以梯纹导管为主,直径12~39μm,偶见螺纹和网纹导管。
(2)取本品粗粉2g,加75%的乙醇20ml,回流提取半小时,滤过,滤液浓缩至10ml。
取滤液一滴,点于滤纸上,置紫外光灯(365nm)下观察,显淡橙黄色荧光;滴加1%乙酸镁甲酸液1滴,荧光明显加强,呈亮金黄色。
另取滤液1滴,点于滤纸上,烘干后,滴加1%三氯化铁乙醇液1滴,呈浅墨绿色。
(3)取本品粗粉3g,加无水乙醇30ml,回流30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加无水乙醇5ml使溶解,作为供试品溶液。
另取川西獐牙菜对照药材3g,同法制成对照药材溶液。
再取齐墩果酸对照品,加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。
照“薄层色谱法检验操作规程”(PLT.C09—8010—02)试验,吸取供试品溶液5μl、对照药材溶液2μl、对照品溶液2μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环己烷—三氯甲烷—乙酸乙酯—甲酸(20:5:8:0.2)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。
供试品色谱中,在与对照药材、对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
3.3含量测定
照“高效液相色谱法检验操作规程”(PLT.C09—8012—02)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇为流动相A;以0.02%磷酸为流动相B。
按下表程序洗脱,检测波长为240nm,理化塔板数按獐牙菜苦苷峰计算,不低于4000。
时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)
0~25 20 80
25~30 100 0
对照品溶液的制备精密称取獐牙菜苦苷0.18mg,用甲醇定容至10ml容量瓶中,摇匀,即得(每1ml含獐牙菜苦苷0.18mg)。
供试品溶液的制备取本品粉碎,取0.5g,精密称定,置50ml三角瓶中,加甲醇20ml于80℃水浴回流1小时,放冷至室温,滤液用甲醇定容至25ml容量瓶中,摇匀,用微孔滤膜(0.45μm)滤过,取续滤液,即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl。
注入液相色谱仪测定即得。
本品含獐牙菜苦苷(C
16H
22
O
10
)计,不得少于0.15%。
4 记录与计算
按要求详细、清晰、明确、真实记录。
并按各检验操作规程的计算公式进行计算。
5 结果与判断
操作方法中各项均呈正反应或在规定限度内,判为符合规定,否则,判为不符合规定。
培训
1 培训部门:质量管理部。
2 培训对象:QA、QC检验员。
3 培训时间:0.5小时。