2019-2020年高中生物 4.2 分子生物学技术课后作业(含解析)苏教版选修1
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[随堂检测] [学生用书P59]知识点一多聚酶链式反应程序1. 多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。
PCR过程一般经历30多次下述循环:90~95 ℃下使模板DNA变性、解链→55~60 ℃下退火(引物与DNA模板链结合)→70~75 ℃下引物链延伸。
下列有关PCR过程的叙述中,不正确的是() A.变性过程中被切断的是DNA分子内碱基对之间的氢键B.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸C.退火过程中引物与DNA模板链的结合依靠碱基互补配对原则完成D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高解析:选B。
变性过程的目的是解链,与解旋酶的作用相同,所以变性过程中被切断的是DNA分子内碱基对之间的氢键,A项正确;PCR技术是在较高温度条件下进行的,该过程需要热稳定Taq DNA聚合酶,且由于该过程的产物是DNA,所以需要的原料是四种游离的脱氧核苷酸,故B项错误;退火过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的,C项正确;PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高,D项正确。
2.下图是PCR反应过程中哪次循环的产物()A.第一次循环B.第二次循环C.第三次循环D.第四次循环解析:选A。
在PCR反应中,以引物为标记,第一次循环时加入的DNA为模板,两条DNA链可分别由引物Ⅰ和引物Ⅱ与其结合并在DNA聚合酶的作用下延伸,所以形成的每个子代DNA中只有一种引物。
知识点二目的DNA片段的体外扩增与鉴定3.下列关于DNA双链的叙述,错误的是()A.通常将DNA的羟基末端称为5′端,而磷酸基团末端称为3′端B.通常将DNA的羟基末端称为3′端,而磷酸基团末端称为5′端C.通常DNA只能从3′端延伸DNA链D.通常DNA不能从5′端延伸DNA链解析:选A。
通常将DNA的羟基末端称为3′端,磷酸基团末端称为5′端。
4.下列关于操作过程的叙述中,错误的是()A.PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌B.PCR缓冲液和酶应分装成小份,在-20 ℃储存C.PCR所用缓冲液和酶从冰箱拿出之后,迅速融化D.在微量离心管中添加反应成分时,每吸取一种试剂后,移液器上的吸液枪头都必须更换解析:选C。
姓名,年级:时间:[随堂检测]知识点一DNA分子的结构1.如图为某同学在学习DNA的结构后画的含有两个碱基对的DNA片段(“○"代表磷酸基团),下列为几位同学对此图的评价,其中正确的是()A.甲说:“物质组成和结构上没有错误"B.乙说:“只有一处错误,就是U应改为T”C.丙说:“至少有三处错误,其中核糖应改为脱氧核糖”D.丁说:“如果说他画的是RNA双链则该图应是正确的"解析:选C。
DNA中含有的五碳糖应为脱氧核糖,而不是核糖,同时DNA不含碱基U,而是含碱基T,A错误;图中有三处错误:①五碳糖应为脱氧核糖,而不是核糖;②DNA不含碱基U,而是含碱基T;③两个相邻核苷酸之间的磷酸二酯键连接不正确,应是前一个核苷酸的脱氧核糖与后一个核苷酸的磷酸基团连接形成磷酸二酯键,B错误,C正确;如果是RNA双链,磷酸二酯键的连接不正确,D错误。
2.同源染色体上的DNA分子之间最可能相同的是( )A.脱氧核苷酸的种类B.磷酸二酯键的数目C.碱基对的排列顺序D.错误!的比值解析:选A。
DNA分子中含有4种碱基,则脱氧核苷酸的种类是4种,A正确;等位基因上脱氧核苷酸数目不一定相同,则脱水聚合形成的磷酸二酯键的数目不一定相同,B错误;同源染色体上的DNA分子中基因可能是相同基因,也可能是等位基因,所以二者碱基对排列顺序可能不同,C错误;不同DNA分子中(A+T)/(G+C)的比值可能不同,说明DNA分子具有特异性,D错误。
3.如图为DNA测序仪显示的某真核生物DNA片段一条链的碱基排列顺序图片。
其中图1的碱基排列顺序已经解读,其顺序是:GGTTATGCGT,那么图2显示的碱基排列顺序应该是( )A.GCTTGCGTAT B.GATGCGTTCGC.TAGTCTGGCT D.GCTGAGTTAG解析:选B.图1为DNA测序仪显示的某真核生物DNA片段一条链的碱基排列顺序图片。
图1的碱基排列顺序已经解读,其顺序是:GGTTATGCGT,所以图中碱基序列应从下向上读,且由左至右的顺序依次是ACGT,所以图2中碱基序列为:GATGCGTTCG,A、C、D错误,B正确。
第二节分子生物学技术1.标准的PCR过程一般分为变性、退火、延伸三大步,这三大步需要的温度依次是( )A.94 ℃、55 ℃、72 ℃B.72 ℃、55 ℃、94 ℃C.55 ℃、94 ℃、72 ℃D.80 ℃、55 ℃、72 ℃解析:当温度上升到94 ℃(90~96 ℃)以上时,双链DNA解聚为单链,称之为变性;当温度下降到50 ℃(40~60 ℃)左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合;当温度上升到72 ℃(70~75 ℃)左右时,溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在Taq DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链,称为延伸。
答案:A2.DNA的复制需要引物,其主要原因是( )A.可加快DNA的复制速度B.引物可与DNA母链通过碱基互补配对结合C.引物的5'端有助于DNA聚合酶延伸DNA链D.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从3'端延伸DNA链解析:DNA的两条链是反向平行的,为了明确地表示DNA的方向,通常将DNA的羟基(—OH)末端称为3'端,而磷酸基团的末端称为5'端。
DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从3'端延伸DNA链。
因此,DNA复制需要引物。
当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的3'端开始延伸DNA链,DNA的合成方向总是从子链的5'端向3'端延伸。
答案:D3.下列有关PCR反应的叙述正确的是( )A.PCR反应所需要的引物只是RNAB.PCR反应所需要的材料是核糖核苷酸C.PCR反应所需要的酶在60 ℃会变性D.PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行解析:PCR反应需要的引物是DNA或RNA,反应所需要的材料是脱氧核苷酸,PCR所需要的酶是耐高温的,在60 ℃不会变性。
答案:D4.有关PCR技术,下列叙述不正确的是( )A.用于PCR的引物长度通常为15~40个核苷酸B.在用PCR技术扩增DNA时,DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似C. PCR反应只需一定的缓冲溶液、DNA模板以及四种脱氧核苷酸D. PCR一般经历三十多次循环,每次循环分为变性、复性、延伸解析:PCR反应中需要的条件有模板(DNA分子)、原料(4种脱氧核苷酸)、酶(耐高温Taq DNA 聚合酶)、引物(一段DNA或RNA)和一定的缓冲液等。
《分子生物学技术》同步练习张建尚 江苏省赣榆高级中学基础演练一、选择题1.下列有关使用PCR 仪的安全措施的叙述错误..的是 ( ) A.在PCR 仪运行的过程中不能打开池盖B.仪器运行过程中如果没有反应,应切断电源后进行检查C.可用蘸有体积分数为95%的酒精棉签擦拭相关部位D.可将PCR 仪放在教室做演示实验1.D 仪器必须放置在PCR 实验室里。
2.下列哪项不是PCR 所必需的 ( )A.DNA 聚合酶B.引物C.解旋酶D.四种脱氧核苷酸2.C DNA 在体外复制时利用一定的高温进行解旋,不需要解旋酶。
2.DNA 的复制需要引物,其主要原因是 ( )A.可加快DNA 的复制速度B.引物可与DNA 母链碱基互补配对结合C.引物的5′端有助于DNA 聚合酶延伸DNA 链D.DNA 聚合酶只能从3′端延伸DNA 链2.D DNA 聚合酶不能从头开始合成DNA ,只能从3’端开始合成,所以需要引物提供3’端。
3.下列哪项不是细胞内DNA 复制与PCR 的共同点 ( )A.都需要引物B.都必须是TaqDNA 聚合酶C.都需要解旋D.都需要模板3.B PCR 需要TaqDNA 聚合酶,细胞内DNA 复制必须有DNA 聚合酶,但不一定是TaqDNA 聚合酶。
4.下列哪项是PCR 技术与转录过程的相同之处 ( )A.都需要在DNA 解旋后才能进行B.都以脱氧核苷酸为原料C.都以相同的酶催化反应D.都以DNA 的一条链为模板4.A PCR 技术是在一定温度下进行解旋,转录是在RNA 聚合酶的作用下解旋,A 项正确,C 项错误;PCR 与转录的原料分别是脱氧核苷酸和核糖核苷酸,B 项正确;PCR 是以DNA 的两条链为模板,转录是以DNA 的一条链为模板,D 项错误。
5.DNA 分子经PCR 反应循环一次后,新合成的那条子链的脱氧核苷酸的序列应与( )A.模板母链相同B.模板母链的互补链相同C.两条模板母链相同D.两条模板母链都不相同5.B DNA 复制后形成的子链和模板链互补而和模板链的互补链相同。
1.引物的作用是( )A.打开DNA双链B.催化合成DNA子链C.使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始复制D.提供模板解析:选C。
引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始复制。
2.有关PCR反应的叙述中,正确的是( )A.PCR反应所需要的引物只是RNAB.PCR反应所需要的原料是核糖核苷酸C.PCR反应所需要的酶在60 ℃时会变性D.PCR反应需要在一定的缓冲液中进行解析:选D。
PCR反应所需要的引物是DNA或RNA;原料是四种脱氧核糖核苷酸;变性是在高温下进行的,所用Taq聚合酶的特点是耐高温,即在高温下不变性。
3.PCR技术扩增DNA新链之前必须合成( )A.DNA解旋酶B.引物C.新的脱氧核苷酸 D.核苷酸解析:选B。
DNA复制时,合成DNA新链之前必须合成引物。
4.标准的PCR过程一般分为变性、退火、延伸三大步,这三大步需要的温度依次是( )A.94 ℃、56 ℃、72 ℃B.72 ℃、50 ℃、92 ℃C.50 ℃、92 ℃、72 ℃D.80 ℃、50 ℃、72 ℃解析:选A。
当温度上升到94 ℃时,作为模板的双链DNA解旋成为单链DNA,称之为变性;当温度下降到56 ℃(40~60 ℃)左右时,两种引物通过碱基互补配对原则与两条单链DNA结合;当温度回升到72 ℃左右(Taq聚合酶的最适反应温度),在单链上4种脱氧核苷酸按照碱基互补配对原则连接在引物之后,使引物链延伸,形成互补的DNA双链,称为延伸。
5.(2012·徐州高二检测)下列关于DNA复制和PCR的描述中,正确的是( )A.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从5′端延伸DNA链B.DNA复制不需要引物C.引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合D.PCR扩增的对象是氨基酸序列解析:选C。
由于DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从3′端延伸DNA链,故DNA复制需要引物,而且它与DNA母链通过碱基互补配对结合。
2019-2020学年度高中生物《生物:遗传与进化》第四章遗传的分子基础第一节探索遗传物质的过程苏教版课后练习二十七第1题【单选题】用TMV型和HRV型病毒分别感染烟草,都会使烟草得花叶病,并都能从染病的烟草叶中分离出各自的子代病毒.将TMV型病毒的蛋白质与HRV型病毒的RNA结合到一起,组成一个组合型病毒,用这个病毒去感染烟草,则在烟草体内分离出来的子代病毒为( )A、TMV型蛋白质和HRV型RNAB、HRV型蛋白质和HRV型RNAC、TMV型蛋白质和TMV型RNAD、TMV型RNA和HRV型蛋白质【答案】:【解析】:第2题【单选题】某研究人员模拟赫尔希和蔡斯关于噬菌体侵染细菌的实验,进行了以下4个实验:①用^32P标记的噬菌体侵染未标记的细菌;②用未标记的噬菌体侵染^35S标记的细菌;③用^15N标记的噬菌体侵染未标记的细菌;④用未标记的噬菌体侵染^3H标记的细菌。
以上4个实验,经短时间保温后离心,检测到放射性的主要部分是( )A、沉淀物、沉淀物、沉淀物和上清液、沉淀物和上清液B、沉淀物、沉淀物、沉淀物和上清液、沉淀物C、沉淀物、上清液、沉淀物、沉淀物和上清液D、上清液、上清液、沉淀物和上清液、上清液【答案】:【解析】:第3题【单选题】肺炎双球菌的转化实验中,促使R菌转化为S菌的“转化因子”是( )A、S菌蛋白质B、R菌蛋白质C、R菌的DNAD、S菌的DNA【答案】:【解析】:第4题【单选题】关于肺炎双球菌的描述,正确的是( )A、DNA是主要的遗传物质B、基因的表达离不开核糖体C、嘌呤碱基和嘧啶碱基数目相等D、遗传信息不能从DNA流向DNA【答案】:【解析】:第5题【单选题】20世纪30年代之前,人们认为蛋白质是生物体的遗传物质,但通过实验充分证明了,DNA才是遗传物质,蛋白质不是遗传物质。
下列关于遗传物质DNA的实验发现的表述,正确的是:A、发现DNA是遗传物质的经典实验有:烟草花叶病毒的转化实验、噬菌体侵染细菌的实验、烟草花叶病毒感染烟草的实验B、要证明什么是遗传物质,必须设法将蛋白质与DNA分开,单独、直接观察它们的作用C、肺炎双球菌的转化实验证明了DNA是主要的遗传物质,蛋白质等不是遗传物质D、格里菲思通过肺炎双球菌的转化实验得出DNA 是遗传物质的结论【答案】:【解析】:第6题【单选题】下列叙述与生物学史实相符的是( )A、达尔文利用琼脂和胚芽鞘为实验材料,揭示了植物向光性的原因B、萨克斯利用斐林试剂证明植物在光下可以合成淀粉C、格里菲斯的肺炎双球菌转化实验证明了DNA 是遗传物质D、沃森和克里克通过物理建模构建了DNA的双螺旋结构【答案】:第7题【单选题】S型肺炎双球菌是人类肺炎和小鼠败血症的病原体,而R型菌却无致病性。
(第二节DNA分子的结构和复制~XT 1学习目标:1.DNA分子结构的探究历程2. DNA分子的主要结构特点3. DNA分子的复制过程及特点4•米西尔森和斯塔尔证明DNA分子复制方式的实验设计1 ——自主填一填,理清本节主于知识I I 1I! 设计2 —尝试樹一做•发现预习中的薄剧环节■[教材梳理]一、DNA分子的结构1. DNA分子结构的探索历程时期科学家成果20世纪30年代后期瑞典科学家证明DNA是不对称的1951 年查哥夫(美)定里分析DNA分子的碱基组成,发现腺嘌呤(A)的量总是等于也腺嘧啶(T)的量,鸟嘌呤(G)的量总是等于胞嘧啶(C)的量1952 年富兰克琳(英)确认DNA为螺旋结构,而不是由一条链构成的1953 年沃森(美)和克里克(英)提岀DNA分子的双螺旋结构模型2. DNA分子的基本组成单位DNA的基本组成单位是脱氧核苷酸:如图所示:预习导引区iiiAtlJLhitl /fluf 1 ftJUJfl:* 白主学习梳用王千'⑴组成:①磷酸;②脱氧核糖;③含氮碱基。
(2)碱基:A :腺嘌呤;G:鸟嘌呤;C :胞嘧啶;T :胸腺嘧啶。
3. DNA分子的立体结构(1) 整体:由两条脱氧核苷酸链反向平行盘旋而成的双螺旋结构。
(2) 外侧——基本骨架:由脱氧核糖和磷酸交替连接构成。
(3) 内侧碱基对:由两条链上的碱基通过氢键连接成碱基对,是按碱基互补配对厘则连接而成的,即A与T配对、G与C配对。
4. DNA分子的多样性和特异性(1) 多样性:碱基对排列顺序的千变万化。
⑵特异性:特定的碱基对排列顺序构成了每一个DNA分子的特异性。
二、DNA分子的复制1. DNA复制的概念、时期、场所及条件(1) 概念:以亲代DNA分子为模板合成子代DNA分子的过程。
⑵时期:细胞有丝分裂间期和减数分裂的间期。
(3) 场所:细胞核(主要)。
⑷DNA复制的条件:①模板:DNA分子的两条链。
②原料:游离的四种脱氧核苷酸。
《分子生物学》课后习题第1章绪论1.简述孟德尔、摩尔根和Waston 等人对分子生物学发展的主要贡献。
孟德尔是遗传学的奠基人,被誉为现代遗传学之父。
他通过豌豆实验,发现了遗传学三大基本规律中的两个,分别为分离规律及自由组合规律。
摩尔根发现了染色体的遗传机制,创立染色体遗传理论,是现代实验生物学奠基人。
于 1933 年由于发现染色体在遗传中的作用,赢得了诺贝尔生理学或医学奖。
W atson于1953年和克里克发现DNA双螺旋结构_(包括中心法则),获得诺贝尔生理学或医学奖,被誉为“D N A之父”。
2.写出 DNA、RNA、mRNA 和 siRNA 的英文全名。
DNA:d eo x yr i bo nu cl ei c ac i d脱氧核糖核酸RNA:ri bo nu cl eic aci d核糖核酸mRNA:m e ss enge r RN A信使RNA tRNA:transfer RNA 转运 RNA rR NA:r i bo s o ma l RN A核糖体RNA s i R NA:s ma lli n terf erin g R NA干扰小RN A3.试述“有其父必有其子”的生物学本质。
其生物学本质是基因遗传。
子代的性状由基因决定,而基因由于遗传的作用,其基因的一半来自于父方,一般来自于母方。
4.早期主要有哪些实验证实 DNA 是遗传物质?写出这些实验的主要步骤。
1)肺炎链球菌转化实验:外表光滑的S型肺炎链球菌(有荚膜多糖→致病性);外表粗糙R 型肺炎链球菌(无荚膜多糖)。
① 活的 S 型→注射→实验小鼠→小鼠死亡② 死的 S 型(经烧煮灭火)→注射→实验小鼠→小鼠存活③ 活的 R 型→注射→实验小鼠→小鼠存活④ 死的 S 型+活的 R 型→实验注射→小鼠死亡⑤ 分离被杀死的 S 型菌体的各种组分+活的R 型菌体→注射→实验小鼠→小鼠死亡(内只有死的 S 型菌体的DNA 转化R 型菌体导致致病菌)*DNA 是遗传物质的载体2)噬菌体侵染细菌实验①细菌培养基 35S 标记的氨基酸+无标记噬菌体→培养 1-2 代→子代噬菌体几乎不含带有 35S 标记的蛋白质② 细菌培养基 32N 标记的核苷酸+无标记噬菌体→培养 1-2 代→子代噬菌体含有 30以上 32N 标记的核苷酸*噬菌体传代过程中发挥作用的可能是DNA 而不是蛋白质。
第二节分子生物学技术一、选择题1.关于PCR技术的应用,错误的一项是()A.古生物学、刑侦破案、DNA序列测定B.诊断遗传病、基因克隆、古生物学C.DNA序列测定、基因克隆、刑侦破案D.诊断遗传病、合成核苷酸、DNA序列测定2.下图是PCR反应过程中哪次循环的产物()A.第一次循环B.第二次循环C.第三次循环D.第四次循环3.下列关于DNA双链的叙述错误的是()A.通常将DNA的羟基末端称为5′端,而磷酸基团的末端称为3′端B.通常将DNA的羟基末端称为3′端,而磷酸基团的末端称为5′端C.通常DNA只能从3′端延伸DNA链D.通常DNA不能从5′端延伸DNA链4.PCR利用了DNA的热变性原理,PCR仪实际上也是一种能自动调控温度的仪器。
下列对PCR过程中“温度的控制”的说法,错误的是()A.PCR反应需要高温,是为了确保模板是单链B.延伸的温度必须大于复性温度,而小于变性温度C.要用耐高温的DNA聚合酶D.需要耐高温的解旋酶5.DNA体内复制和PCR分别利用了DNA的哪种特性原理来控制DNA的解聚与结合()A.酶催化、特异性B.热变性、稳定性C.酶催化、热变性D.热变性、多样性6.DNA扩增过程中,DNA片段经若干次扩增,与其数目的理论值变化相符的图是()7.复性温度是影响PCR特异性的较重要因素。
变性后温度冷却至40~60 ℃,可使引物和模板发生结合。
PCR的结果可不考虑原来解旋开的两个DNA模板链的重新结合,原因不包括()A.由于模板DNA比引物复杂得多B.引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞C.加入引物的量足够多而模板链数量少D.模板链加热解旋已经变性不可能再次结合8.如图为DNA变性和复性示意图,下列相关说法正确的是()A.向右的过程为加热(80~100 ℃)变性的过程B.向左的过程是DNA双链迅速制冷复性C.变性与在生物体内解旋过程的条件、实质都相同D.图中DNA片段共有4个游离的磷酸基、4个3′端9.PCR实验中用到微量离心管、缓冲液和蒸馏水,使用前必须进行的关键步骤是()A.反复洗涤B.用酒精擦洗C.高压灭菌D.在-20 ℃保存10.在PCR扩增DNA的实验中,预计一个DNA分子经过30次循环后,应该得到230个DNA分子,但是结果只有约210个DNA分子,那么出现该现象的原因不可能是()A.Taq DNA聚合酶的活力不够,或活性受到抑制B.系统设计欠妥C.循环次数不够。
2019-2020年高中生物 4.2 分子生物学技术课后作业(含解析)苏教版选修11.标准的PCR过程一般分为变性、退火、延伸三大步,这三大步需要的温度依次是( )A.94 ℃、55 ℃、72 ℃B.72 ℃、55 ℃、94 ℃C.55 ℃、94 ℃、72 ℃D.80 ℃、55 ℃、72 ℃解析:当温度上升到94 ℃(90~96 ℃)以上时,双链DNA解聚为单链,称之为变性;当温度下降到50 ℃(40~60 ℃)左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合;当温度上升到72 ℃(70~75 ℃)左右时,溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在Taq DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链,称为延伸。
答案:A2.DNA的复制需要引物,其主要原因是( )A.可加快DNA的复制速度B.引物可与DNA母链通过碱基互补配对结合C.引物的5'端有助于DNA聚合酶延伸DNA链D.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从3'端延伸DNA链解析:DNA的两条链是反向平行的,为了明确地表示DNA的方向,通常将DNA的羟基(—OH)末端称为3'端,而磷酸基团的末端称为5'端。
DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从3'端延伸DNA 链。
因此,DNA复制需要引物。
当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的3'端开始延伸DNA链,DNA的合成方向总是从子链的5'端向3'端延伸。
答案:D3.下列有关PCR反应的叙述正确的是( )A.PCR反应所需要的引物只是RNAB.PCR反应所需要的材料是核糖核苷酸C.PCR反应所需要的酶在60 ℃会变性D.PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行解析:PCR反应需要的引物是DNA或RNA,反应所需要的材料是脱氧核苷酸,PCR所需要的酶是耐高温的,在60 ℃不会变性。
答案:D4.有关PCR技术,下列叙述不正确的是( )A.用于PCR的引物长度通常为15~40个核苷酸B.在用PCR技术扩增DNA时,DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似C. PCR反应只需一定的缓冲溶液、DNA模板以及四种脱氧核苷酸D. PCR一般经历三十多次循环,每次循环分为变性、复性、延伸解析:PCR反应中需要的条件有模板(DNA分子)、原料(4种脱氧核苷酸)、酶(耐高温Taq DNA聚合酶)、引物(一段DNA或RNA)和一定的缓冲液等。
答案:C5.PCR技术扩增DNA,需要的条件是( )①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体A.②③④⑤B.①②③⑥C.①②③④D.①③④⑤解析:PCR技术需要目的基因作为扩增的模板,耐高温DNA聚合酶催化反应的进行,而引物是满足DNA聚合酶起作用的需要,四种脱氧核苷酸是该过程的原料。
答案:C6.多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。
PCR过程一般经历下述三十多次循环;94 ℃下使模板DNA变性、解链→55 ℃下退火(引物与DNA模板链结合)→72 ℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。
下列有关PCR过程的叙述中不正确的是( )A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现B.复性过程中引物与DNA模板链的结合依靠互补配对原则完成C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸D. PCR与细胞内DNA复制相比,所需要酶的最适温度较高解析:变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现;复性过程中引物与DNA模板链的结合依靠互补配对原则完成;延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种脱氧核糖核苷酸;PCR与细胞内DNA复制相比,所需要酶的最适温度较高。
答案:C7.下面关于DNA对高温的耐受性的说法,不正确的是( )A.DNA对高温的耐受性一般要比蛋白质强B.超过80 ℃后DNA将变性,即使恢复到常温,生物活性也不能恢复C.不同生物的DNA“变性”温度不一定相同D.深海热泉附近生活的生物的DNA对高温的耐受性更强,其DNA中鸟嘌呤所占的比例更高解析:蛋白质一般不能忍受80 ℃以上的高温,一旦达到此温度,其结构往往会发生不可逆转的破坏,而DNA一般在80 ℃以上情况下才会变性,一旦温度降低,其在高温下解开的两条链又会重新结合成双链,恢复其活性。
由于G—C碱基对通过三个氢键相连,所以更稳定。
答案:B8.关于PCR的说法不正确的是( )A.PCR是体外复制DNA的技术B.Taq聚合酶是一种热稳定的DNA聚合酶C.模板DNA只能来源于人工合成D.PCR利用的是DNA双链复制原理解析:模板DNA既可来源于动物、植物、微生物,也可来源于人工合成。
答案:C9.PCR操作中,从第二轮循环开始扩增的DNA片段( )A.长度固定B.一端固定C.都不固定D.不能确定解析:PCR扩增产物可分为长产物片段和短产物片段两部分。
短产物片段的长度严格地限制在两个引物链5'端之间,是需要扩增的特定片段。
进入第二轮循环后,引物除与原始模板结合外,还要同新合成的链(即“长产物片段”)结合,引物在与新链结合时,由于新链模板的5'端序列是固定的,这就等于这次延伸的片段3'端被固定了终点,保证了新片段的起点和终点都限定于引物扩增序列以内,形成长短一致的“短产物片段”。
答案:A10.使用PCR仪的具体实验操作顺序应为( )①设计好PCR仪的循环程序②按配方准备好各组分③用微量移液器在微量离心管中依次加入各组分④进行PCR反应⑤离心使反应液集中在离心管底部A.②③⑤④①B.①⑤③④②C.②③⑤①④D.④②⑤③①解析:使用PCR仪进行DNA扩增前,首先按照PCR体系配方,依次将各组分加入微量离心管离心,使反应液集中于试管底部,然后再设计好PCR仪的循环程序进行PCR反应。
答案:C11.(xx·山东高考理综)玉米是重要的粮食作物,经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。
流程如下:(1)玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。
培养酵母菌时,该水解产物为酵母菌的生长提供。
发酵过程中检测酵母菌数量可采用法或稀释涂布平板法计数。
(2)玉米胚芽油不易挥发,宜选用法或法从玉米胚芽中提取。
(3)玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。
利用技术可使葡萄糖异构酶重复利用,从而降低生产成本。
(4)利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时,需用耐高温的催化。
PCR一般要经历三十次以上的循环,每次循环包括变性、和三步。
解析:本题解题的关键是熟悉相关的实验操作。
(1)纤维素的水解产物是葡萄糖,可为酵母菌的生长提供碳源。
酵母菌计数时,如果种群密度较小,则可通过显微镜直接计数;如果种群密度较大,可以采用稀释涂布平板法计数。
(2)易挥发的芳香油主要采用蒸馏法提取,而提取不易挥发的玉米油,可采用压榨法或萃取法。
(3)将葡萄糖异构酶固定化,可使其重复利用,从而降低生产成本。
(4)PCR技术中,需在高温下将DNA分解成单链,因而需耐热的(Taq)DNA聚合酶;PCR技术中的每次循环都包括三个步骤:变性→复性→延伸。
答案:(1)碳源显微镜直接计数(2)压榨萃取(注:两空可颠倒)(3)固定化酶(4)(Taq)DNA聚合酶复性(或退火) 延伸12.多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。
请回答下列有关PCR技术的基本原理及应用问题。
(1)DNA的两条链是反向平行的,通常将的末端称为5'端,当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的开始延伸DNA链。
(2)PCR利用DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题,但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。
到20世纪80年代,科学家从一种Taq细菌中分离到,它的发现和应用解决了上述问题。
要将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来,所用的培养基叫。
(3)假设在PCR反应中,只有一个DNA片段作为模板,请计算在5次循环后,反应物中大约有个这样的DNA片段。
(4)简述PCR技术的主要应用。
解析:(1)DNA聚合酶只能把新的核苷酸加到已经存在的核酸的3'羟基上,与DNA母链结合的RNA引物就提供这个羟基。
(2)因PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题,所以用于催化DNA复制过程的DNA聚合酶要具有耐高温的特性。
在高温环境中培养微生物,只有耐高温的微生物才能生存,其他微生物因高温下酶变性而死亡。
用这样的选择培养基可将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来。
(3)DNA复制两条链均作为模板,进行半保留复制,所以复制5次后得到的子代DNA分子数为25=32个。
(4)PCR技术可以对DNA分子进行扩增,所以可用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等方面。
答案:(1)磷酸基团3'端(2)耐高温的Taq DNA聚合酶选择培养基(3)32(4)病原体鉴定、遗传学诊断、免疫学研究、癌基因探索及治疗、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等13.随着研究的不断深入,PCR方法被不断改进。
到目前它从一种定性的分析方法发展到定量测定;从原先只能扩增几个kb(千碱基对)的基因到目前已能扩增长达几十个kb的DNA片段。
现在PCR技术已有十几种之多。
它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断等。
PCR需要模板DNA、引物、脱氧核糖核苷酸和DNA聚合酶、ATP等条件,其简要过程如图所示。
请分析回答下列有关问题。
(1)PCR技术能把某一DNA 片段进行扩增,依据的原理是。
PCR与体内DNA复制的不同之处主要表现在环境温度的不同,在PCR中先用94 ℃高温处理的目的是,而这一过程中在细胞内是通过实现的。
(2)通过分析得出新合成的DNA分子中,A=T,C=G,这个事实说明DNA分子的合成遵循。
(3)若将1个DNA分子拷贝10次,则需要在缓冲液中至少加入个引物。
(4)DNA子链复制的方向是,这是由于。
(5)PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利,而且改进了检测细菌和病毒的方法。
若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒,你认为可以用PCR扩增血液中的。
解析:PCR技术又称多聚酶链式反应,扩增过程中遵循的原理就是DNA复制;分析得出新合成的DNA 分子中,A=T,C=G,这个事实说明DNA分子的合成遵循碱基互补配对原则;在PCR中选用94 ℃高温处理的目的是在解旋酶的催化下将DNA分子中的氢键断裂,两条链解开,使DNA分子变性。
引物是一种单链DNA或RNA分子,它能与解开的DNA母链的3'端结合,为DNA聚合酶提供吸附位点,使DNA聚合酶从引物的3'端开始连接脱氧核糖核苷酸,从而决定了DNA子链复制的方向是从5'端到3'端。