离体血管环的实验装置和方法

杜仲乙醇提取物对大鼠离体胸主动脉环的作用及机制岳晓洁1，，张炯炯1，许逸飞1 ，叶志孟1 ，张薇1，王会平2（1.浙江大学医学院临床二系，浙江杭州 310031; 2.浙江大学医学院生理学教研室，浙江杭州 310031）[摘要]：目的：探讨杜仲（Eucommia ulmoides Oliv.）醇提物对离体大鼠主动脉环收缩张力的作用及其可能机制。

方法：采用大鼠离体胸主动脉环灌流模型，采用累积加药法，观察杜仲醇提物对PE预收缩（苯肾上腺素组+E,-E）、氯化钾预收缩（氯化钾组+E,-E）的血管环的作用; 并检测杜仲对经无钙液预处理后的血管环的作用。

结果：不论是否有内皮，累计浓度杜仲对高浓度KCL及PE引起的血管环收缩均有明显的舒张作用。

格列苯脲（Glib），4－氨基吡啶(4－AP),四乙胺（TEA）,L-NAME,ODQ，吲哚（Indo）不能阻断杜仲对PE预收缩血管环的舒张。

胸主动脉环经无钙液孵育和杜仲处理后对PE的反应性降低。

结论：杜仲对胸主动脉环有非内皮依赖性的舒张作用，杜仲能通过抑制内钙释放而起到舒张血管环的作用。

[关键词]：杜仲乙醇提取物；胸主动脉环；内皮；钙通道Relaxant effect of Eucommia ulmoides Oliv On rat thoracic aorta YUE Xiao-jie, ZHANG Jiong-jiong, XU Yi-fei, YE Zhi-men, ZHANG Wei ,et al(The Second Department of Clinical Medicine, College of Medicine, Zhejiang University, Hangzhou 310031)[Abstract] Objective: To investigate the effect of Eucommia ulmoides Oliv on vascular circles and the underlying mechanisms. Methods: The study was performed with the model of isolate rat thoracic aorta rings in organ bath.The effect of accumulated of ethanol extract of the eucommia bark(EB) on aorta rings (+E,-E), pre-contracted with PE, and pre-contracted with KCl was observed. The effect of EB on aorta rings(-E) pre-contracted with PE(-E) with Ca2+ -free medium was also observed. Conclusion:With or without endothelium, communicative concentration EB has vasorelaxant effects on the thoracic aorta pre-contracted by KCL or PE. nitric oxide synthase inhibitor L-N (G)-nitroarginine methyl ester ( L-NAME), the Soluble guanylyl cyclase Inhibitor ODQ, voltage-dependent K+ channel inhibitor 4-AP, calcium-activated K+ channel inhibitor TEA, ATP-sensitive K+ channel inhibitor Glib, and cyclooxygenase inhibitor indomethacin can’t inhibit EB’s vasorelaxant effects. EB has no relaxation effect on aorta rings which are incubated with Ca2+ -free Kreb’s solution and pre-contracted with PE. Conclusion: EB can relax the rat thoracic aorta rings endothelium independent. And one mechanism is by inhibiting of intracellular calcium ions release .[Key words] :ethanol extract of the eucommia bark；The ring of thoracic aorta；endothelium；Ca2+ channel杜仲（Eucommia ulmoides Oliv.）是杜仲科植物，我国特有经济树种。

人体血液循环科学实验
本实验旨在探究人体血液循环的机理和过程。

实验将以模拟人体循环系统为基础，通过观察人体模型的运作过程，了解血液在循环系统中的流动情况和作用。

实验需要的材料：人体模型、洋红染液、注射器、细管、水桶。

实验步骤：
1. 将人体模型静置在实验台上，打开模型的血管系统，以保证血管畅通。

2. 在注射器中注入适量的洋红染液，再用细管将其连接到人体模型的动脉系统中。

3. 慢慢推动注射器，将染液注入人体模型的动脉系统中，观察染液在血管中的流动情况。

4. 模拟心脏收缩的作用，将水桶中的水泵入人体模型的心脏，观察血液在血管中的流动情况。

5. 观察染液在血管中的分布情况，了解血液在不同器官间的循环情况。

6. 在观察过程中，可以通过调整模型的角度和倾斜角度，模拟身体不同姿势下的血液循环情况。

实验结论：
通过实验，我们可以了解到人体循环系统的主要部分包括心脏、血管和血液。

在循环过程中，心脏是驱动血液流动的关键，血管则是血液流动通道，而血液则携带氧气和养分，通过循环系统向全身运输。

同时，我们也可以发现，血液在循环系统中的流动是有规律的，通过心脏的收缩和舒张，推动血液在血管中流动，并将氧气和养分输送到不同的器官中。

因此，保持心脏健康和血管畅通是维护人体健康的重要因素。

杜仲皮水提取物舒张大鼠离体胸主动脉环的作用及机制作者：戴胜合作者：方晶晶，陈赟，张丽，刘金炜（浙江大学医学院02级临床医学三系0203班2组，3021831086）[摘要]目的：研究杜仲（Eucommia ulmoides Oliv.）对离体大鼠胸主动脉环收缩张力的作用及其机制。

方法：采用大鼠离体胸主动脉灌流模型，累积加药，检测杜仲对去氧肾上腺素（PE）和KCL 预收缩的胸主动脉环收缩张力的影响。

结果：内皮完整时，杜仲皮水提取物（0.2、0.4、0.8、1.6、2.4、3.2 mg/mL）对PE（10-4mol/L）和KCL（60mmol/L）预收缩的血管环均产生舒张作用（p﹤0.01）；而用NO合酶（NOS）抑制剂L-NAME（10-4mol/L），鸟苷酸环化酶（GC）抑制剂ODQ（10µmol/L）以及环氧酶（COX）抑制剂Indo（10-5mol/L）处理血管后，杜仲皮水提取物的舒张血管效应均被阻断（L-NAME：p﹤0.05、ODQ：p﹤0.01、Indo：p﹤0.05）。

而用电压依赖性的K+ 通道阻断剂4-AP(1mmol/L)，Ca2+ 敏感性的K+ 通道阻断剂TEA(1mmol/L)以及ATP敏感性的K+ 通道阻断剂格列苯脲（Glib）(3µmol/L)处理后，对杜仲皮水提取物介导的内皮依赖性的舒血管效应阻断作用均不明显(p>0.05)。

去内皮时，杜仲皮水提取物（0.2、0.4、0.8、1.6、2.4、3.2 mg/mL）对PE（10-4mol/L）预收缩的血管环舒张作用不显著（p>0.05）。

结论：杜仲皮水提取物通过NO-鸟苷酸环化酶途径和环氧合酶途径两条通路使大鼠离体胸主动脉环产生内皮依赖性的舒张效应。

[关键词] 杜仲；NO；胸主动脉环；内皮；血管舒张aqueous extracts of Eucommia ulmoides Oliv. induced endothelium dependent relaxation of rat thoracic aortaDAI Sheng ，FANG jing-jing，CHEN Yun，et alCollege of Medicine，Zhejiang University，Hangzhou 310003[Abstract]Objective：To investigate the effect of aqueous extracts of Eucommia ulmoides Oliv. on rat thoracic aorta rings and the underlying mechanisms. Methods: The study was performed with the model of isolate rat thoracic aorta rings in organ bath, we investigate the effects of accumulated aqueous extracts of Eucommia ulmoides Oliv. on the constriction of high KCL and Phenylephrine(PE) preconstricted rat thoracic aorta with or without endothelium. Results: Aqueous extracts isolated from eucommia bark (B) （0.2、0.4、0.8、1.6、2.4、3.2 mg/mL）concentration dependently caused endothelium-dependent relaxation in vessels precontracted both with 10-4mol/L phenylephrine (PE) and 60mmol/L KCL, but it had no effect. on de-endothelialized vessels precontracted with PE. The endothelium-dependent relaxation evoked by B was either abolished or substantially inhibited by 10-4mol/L NG-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME)，10µmol/L guanyly cyclase inhibitor 1H-[1,2,4] oxadiazolo [4,3-alpha] quinoxalin-1-one (ODQ) and 10-5mol/L Indomethacin（Indo）, indicating the involvement of the nitric oxide (NO) synthase pathway in the vasorelaxant action of B. The relaxation to the aqueous extract of eucommia bark was not inhibited by 1mmol/L tetraethylammonium (TEA) 、 1mmol/L 4-aminopyridine（4-AP）and 3µmol/L Glibenclamide （Glib）. This suggests that the endothelium-dependent, NO-mediated relaxation evoked by the aqueous eucommia extracts may not involve the activation of K+ -channels. Conclusion:The results incated that aqueous extracts of Eucommia ulmoides Oliv.can relax the rat thoracic aorta rings with endothelium-dependent . The mechanism may include the activation of NO-GC pathway and COX pathway in vascular endothelium cells.[Key Words] Eucommia ulmoides Oliv. ；NO；thoracic aorta rings；endothelium；vascular relaxation- 1 -杜仲（Eucommia ulmoides Oliv.；Du-zhong）是传统中药，祖国医学认为其具有补肝肾，强筋骨，安胎之功效[1] 。

一、实验目的1. 了解离体血管实验的基本原理和方法。

2. 观察和分析血管在不同理化因素作用下的变化。

3. 掌握实验数据的记录和分析方法。

二、实验原理离体血管实验是研究血管生理和病理生理的重要方法。

通过模拟体内环境，将血管取出体外，观察和分析血管在不同理化因素作用下的变化，从而揭示血管的生理和病理机制。

三、实验材料1. 动物：成年大鼠2. 实验仪器：手术显微镜、剪刀、镊子、注射器、针头、试管、离心机、CO2培养箱、显微镜等3. 实验试剂：生理盐水、肝素钠、RPMI-1640培养基、EDTA、NaOH、HCl等四、实验方法1. 取成年大鼠，处死并迅速取出心脏，将心脏放入含有生理盐水的容器中，清洗血管。

2. 使用手术显微镜和剪刀，将心脏周围的脂肪和结缔组织去除，暴露血管。

3. 使用镊子将血管从心脏上分离下来，剪成约2-3mm的血管段。

4. 将血管段放入含有肝素钠的生理盐水中，防止血管内血栓形成。

5. 将血管段放入含有RPMI-1640培养基的培养皿中，置于CO2培养箱中培养。

6. 根据实验目的，分别对血管进行以下处理：a. 调整培养基的pH值b. 调整培养基的温度c. 添加EDTAd. 添加NaOH或HCle. 添加不同浓度的药物7. 观察血管在不同处理下的变化，包括血管收缩、舒张、通透性等。

8. 使用显微镜观察血管的形态变化。

9. 收集实验数据，进行统计分析。

五、实验结果1. 调整培养基的pH值后，血管收缩程度明显增加。

2. 调整培养基的温度后，血管舒张程度明显增加。

3. 添加EDTA后，血管通透性增加，红细胞渗出。

4. 添加NaOH后，血管收缩程度增加。

5. 添加HCl后，血管舒张程度增加。

6. 添加不同浓度的药物后，血管收缩或舒张程度发生改变。

六、实验结论1. 离体血管实验可以模拟体内环境，研究血管在不同理化因素作用下的变化。

2. pH值、温度、EDTA、NaOH、HCl和药物等理化因素可以影响血管的收缩、舒张和通透性。

第15卷　第3期 医学研究生学报 V ol.15　N o.3　2002年6月 Journal of Medical P ostgraduates Jun.2002・论 著・介绍一种离体血管环的实验装置和方法刘　沙,　萧明第,　薛　松,　卢成宝(上海市第一人民医院心血管外科,上海200080)摘要:　目的:介绍一种离体血管环的实验装置和方法。

　方法:通过心桥软件将血管环的等长张力和内壁周长数据绘成长度2张力曲线,据此将血管环拉伸至最适长度后进行实验。

　结果:本实验装置和方法稳定、可靠、准确、灵敏。

　结论:这套装置能够更准确地反映血管的特点,可用于各种血管环实验。

关键词:　血管环;　张力测量;　长度2张力曲线中图分类号:　R443.8 文献标识码:　A 文章编号:　100828199(2002)0320199203ΞAn apparatus and method for the experiment of vessel ring ex vivoLI U Sha,XI AO Ming2di,X UE S ong,LU Cheng2bao(Department o f Cardiovascular Surgery,Shanghai Fir st People’s Hospital,Shanghai200080,China)Abstract:　Objectives:An apparatus and method for the experiment of vessel ring ex vivo was discussed.　Methods:Individual length2tension curves for each vessel ring were established via coropass s oftware by relat2 ing the is ometric tension with the corresponding internal circum ferential length.The vessel ring was investigat2 ed after being set at an optional point according to its own length2tension curve.　Results:The apparatus and method was stable,exact and sensitive.　Conclusions:The apparatus and method reflected the properties of vessels m ore accurately and therefore was suitable for the experiment of all types of vessel rings.K ey w ords:　Vessel ring;　T ension measurement;　Length2tension curve 我们参照国外资料[1,2]研制了一套离体血管环的实验装置,现简介如下。

浅谈离体血管环实验作者：程香孙霞刘英光来源：《科技视界》2019年第23期【摘要】2016年，中国心血管病死亡率居首位，高于肿瘤及其他疾病。

脑血管病、冠心病、外周动脉疾病等血管性疾病在心血管病中占据着重要地位。

离体血管环实验是研究血管舒缩功能的一种实验方法。

通过对血管舒缩功能研究，探讨血管疾病的本质，从而为心血管疾病的防治提供科学依据。

本文从离体血管环实验简介、实验设备、实验步骤及实验中的经验总结等方面进行阐述，希望对即将开展该实验的研究人员提供一些帮助。

【关键词】离体血管环实验;血管功能;收缩;舒张中图分类号： TH776.2 文献标识码： A 文章编号： 2095-2457（2019）23-0220-002DOI：10.19694/ki.issn2095-2457.2019.23.104【Abstract】In China， Cardiovascular Disease（CVD） was the leading cause of death in 2016， more than tumors or any other diseases.Cerebrovascular disease， coronary heart disease，and peripheral arterial disease occupy an important position in cardiovascular disease.The vascular ring experiment in vitro is an experimental method for the study of vasomotor contraction and relaxation.Through the study of vasomotor function， the nature of vascular diseases is explored to provide a scientific basis for the prevention and treatment of cardiovascular diseases. This article describes the introduction， devices， procedures and experience of the vascular ring experiment in vitro， hoping to provide some helps for researchers to conduct the experiment.【Key words】The vascular ring experiment in vitro; Vascular function; Contraction; Relaxation心血管系統疾病是世界范围内死亡的主要原因，但其发病机制尚不清楚[1]。

图1DMT620离体血管张力测定仪离体血管环实验是研究血管舒缩功能的一种实验方法。

实验装置不断推陈出新,目前使用较广泛的是DMT620多通道离体微血管张力测定系统(丹麦)(图1)。

首科技视界Science &Technology VisionScience &Technology Vision 科技视界先分离血管,清除周围结缔组织和脂肪组织,切成2-3mm 长的血管环,再用金属丝或钨丝穿过血管环并悬挂于张力浴槽内,连接张力换能器和计算机,测定并记录离体血管的舒缩活动,常用于研究大鼠肠系膜动脉[4]、大鼠脑基底动脉[5]、小鼠肠系膜动脉[6]、小鼠主动脉、髂动脉、颈动脉、肾动脉[7]等微小血管的功能。

2离体血管环实验设备、器材离体血管环实验所需设备、器材包括:(1)动物解剖台;(2)手术解剖显微镜;(3)DMT620多通道离体微血管张力测定系统;(4)氧气瓶;(5)微型真空泵;(6)培养皿;(7)水浴锅;(8)常用动物手术器械;(9)移液器等。

3离体血管环实验步骤及操作注意事项(1)打开仪器设备,检查仪器状态。

(2)在DMT620多通道离体微血管张力测定系统张力浴槽内填充5ml 预冷的(4℃)Krebs -Henseleit 溶液(KHS ),KHS 成分(浓度/mM ):NaCl115,NaHCO 325,KCl 4.6,NaH 2PO 4.2H 2O1.2,MgCl 2.6H 2O1.2,CaCl 22.5,Glucose.H 2O10,充95%O 2+5%CO 2后用NaOH 调至pH7.4[8]。

注意此时不可加热。

(3)处死动物,解剖并分离组织,轻轻取出拟研究的血管组织,放置于含预冷的(4℃)KHS 的容器中,稍微冲洗血管表面及管腔内部分血液。

(4)将血管组织转移至含预冷的(4℃)KHS 的专用培养皿中,轻轻撑开血管并分离血管表面的脂肪及结缔组织等,尽量分离干净。

(5)剪切一段长约2mm 的血管环,建议取中间段的或分支,两端的不要。

Ａｐｅｌｉｎ．13对离体大鼠主动脉环舒张作用的实验研究目的研究新发现的小分子活性肽Apelin-13对离体大鼠主动脉环的舒张作用及其可能的作用途径。

方法采用累计加药法，检测Apdm-13对去甲肾上腺素(NE)预收缩的内皮完整的胸主动脉环及去内皮后胸主动脉环张力的变化。

结果浓度范围内对内皮完整的离体大鼠胸主动脉环具有浓度依赖性的舒张作用，最大舒张率为(44.43+11.1)％，其对内皮完整的血管的舒张作用显著大于去内皮血管(P ＜0.05)，Apelin-13对去内皮的主动脉环的最大舒张率仅为(6.36±2.40)％。

结论Apelin-13具有显著的舒张主动脉的作用，其舒张作用依赖于内皮的完整性。

标签：Ape]in；主动脉；舒张作用；内皮；大鼠Apelin是近年新发现的小分子活性肽，为G蛋白偶联受体一血管紧张素Ⅱl 型受体相关蛋白(putativereceptor protein related t0 the anglotensinⅡtype 1 recep—tor，APJ)的内源性配体。

研究发现Apelin及其受体APJ广泛分布于心血管组织，参与正常心血管组织的胚胎发育，对正常和病变心血管都具有正性肌力、舒张血管、降低血压的保护作用。

给麻醉的正常大鼠静脉注射Apelin可导致平均动脉压迅速降低，并且发现给清醒的大鼠静脉注射Apelin后亦引起降压效应，而Apelin的降压作用可被L-NAME阻断。

Lee，D.K等还发现Apelin对自发性高血压大鼠也有降低血压的作用。

但是其降低血压、舒张血管的机制尚未完全清楚。

本实验旨在通过观察Apdln—13对离体大鼠主动脉环的影响，探讨Apelin-13的舒张血管作用及其机制。

1材料与方法1.1药品与试剂：Apelin-13购自美国Phoenix Dhamla．ceuficals Pharmaceuticals hc；乙酰胆碱(acetyleholine，ACh)购自Sienna公司；去甲肾上腺素(Norepinephfine，NE)购自上海禾丰制药有限公司。