籽粒中脂肪及脂肪酸的测定41页PPT

• 要点：乙醚的沸点与人体温接近，注意防爆和中毒。
索氏提取器(Soxhlet)
索氏提取器为一回馏装置 （图）,由浸提管，小烧瓶及冷凝 管联接而成，浸提管两侧分别有 虹吸管及通气管。利用溶剂回流 及虹吸原理，使固体物质连续不 断地被纯溶剂萃取,富集在烧瓶中。 本法提取的物质，除中性 脂肪外，还会有游离脂肪酸、蜡、 磷脂、固醇及色素等脂溶性物质， 固提出的物质只能称粗脂肪。
酸/碱水解法——盖勃法
盖勃法的原理与巴布科克法相似，但该 方法用硫酸和异戊醇、硫酸消化酪蛋白 钙盐、碳水化合物，释放脂肪通过加热 保持液态脂肪。 盖勃法较巴布科克法简单快速，广泛应 用于不同的日用品中，使用异戊醇阻止 了糖的炭化，该法在欧洲比美国使用更 为广泛。
酸/碱水解法——洗涤剂法
洗涤剂法的原理是洗涤剂与蛋白质反应 形成复杂的酪蛋白盐一洗涤剂，而打破 了乳化液，释放脂肪。 该方法被首先用来测定牛奶中的脂肪。 牛奶装入巴布科克瓶中，加入阴离子洗 涤剂一二苯基磷酸钠，溶解稳定脂肪的 酪蛋白钙盐，释放脂肪;使用亲水性聚氧 乙烯洗涤剂，使脂肪和其它化合物分离， 通过容量法测定脂肪含量，以%计。
油脂和脂肪酸的分析
第一节 油脂的测定
油脂——高ห้องสมุดไป่ตู้脂肪酸与甘油所形成的脂类化合
物。
粗脂肪——用有机溶剂浸提的油脂因含有磷脂、
色素、蜡以及脂肪酸等物质，故而称之。
油 脂
游离态(油或脂)— 溶于有机溶剂。常用乙醚、氯仿、苯、 — 四氯化碳、二硫化碳等浸提。 结合态—— 不能被有机溶剂（如乙醚）完全浸提，可被盐酸 水解为脂肪酸和碱。用氯仿-甲醇浸提。
硫酸加入装有已知量的牛奶的巴布科克瓶中消 化脂肪膜，释放脂肪，离心，加热水使脂肪分 离至巴布科克瓶的刻度部分，以容量法测定但 结果用重量法来表示。巴布科克法是乳制品中 脂肪测定的最普通的方法，时间约为45min，平 行实验误差在0.1%之内。 巴布科克法无法测定乳制品中的磷脂，不适合 于测定包括巧克力、含糖食品和含糖乳制品等， 因为硫酸使巧克力中的糖发生炭化。

(VLCAD)、中链酰基辅酶A脱氢酶缺陷(MCAD)、肉碱棕榈酰转移酶Ⅱ缺陷(CPT lI)和MADD 等；上述几种脂肪酸代谢疾病血清游离肉碱水平均可有减低，但同时伴有不同长度的脂酰基肉碱 升高，而PCD患者游离肉碱和酰基肉碱均降低可资鉴别； • ②其他原因引起的继发性肉碱缺乏，包括环孢素、丙戊酸等药物，肾小管重吸收障碍，早产，长 期全肠外营养和肾脏透析等，可根据病史、用药史来鉴别； • ③对于发现血清游离肉碱降低而鉴别困难的患者，可实行诊断陛治疗：先给予左旋肉碱每千克体 重100 mg／d，2周后检测血游离肉碱，若仍低于正常参考值，即可诊断PCD；若在正常范围， 则停用左旋肉碱2周后再次检测，血游离肉碱再次降低者即可诊断为PCD，正常者基本可排除 PCD的可能。
意义突变、剪切突变、插入或缺失突变。国外报道的常见突变是c．136C>T(p．P46S)。
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三、诊断依据
• 1．骨骼肌受累表现：肌无力、易疲劳、肌张力减退、肌痛等症状。 • 2．多脏器受累的表现：肝脏肿大、扩张性或肥厚性心肌病、Rye综合征样发作。 • 3．血清学检查：示低血糖、高血氨和高乳酸血症等代谢性紊乱。 • 4．肌肉病理：可见肌纤维内大量脂肪沉积。 • 5．血酰基肉碱分析：示游离肉碱(<5～10umol／L，正常25～50umoL／L，国内文献采用的
LMS的病因分型
• 晚发型多酰基辅酶A脱氢缺陷（multiple acyl coenzyme A dehydrogenation deficiency ,MADD，即戊二酸尿症Ⅱ型 glutaric aciduria typeⅡ，GA II)]、
• 原发性系统性肉碱缺乏(primary earnitine deficiency，PCD)、
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ml——接受瓶的质量，g；
m——样品的质量(如为测定水分后的 样品质量计)，g。
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(五) 注意及说明
①
a.样品应干燥后研细
B.装样品的滤纸筒一定要严密，不能往
外漏样品，但不要包得太紧影响溶剂渗 透。
C.滤纸筒高度不要超过回流弯管
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② 对含糖及糊精多的样品，要先以冷水使糖及糊精溶解，
二）酸水解法 (一）原理
将试祥与盐酸溶液一同加热进行水解，使结 合或包藏在组织里的脂肪游离出来，再用乙醚 和石油醚提取脂肪，回收溶剂，干燥后称量， 提取物的重量即为脂肪含量。
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二） 适用范围与特点
此法适用于各类、各种状态的食品中脂肪测定。特
别是加工后的混合食品，易吸湿，不好烘干的，用索氏 提取法不行的样品，效果更好。
脂 瓶
② 盖 勃 氏 乳 脂 计
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（三）测定方法
吸取20℃牛乳17.6ml，注入巴氏乳脂瓶中，加
等量硫酸，小心倒入乳脂瓶中，硫酸流入牛乳下面成 一层，摇动乳脂瓶使牛乳和硫酸混合，即成棕黑色，
继续摇动2~3min，将乳脂瓶放入离心机中，离心 5min(1000r/min)，取出后向瓶中加60℃热水至分离 的脂肪层在瓶颈部刻度处，再用同样的转速旋转2min， 取出置60℃水浴中保温5min，取出，立即读数。所 得数值即为脂肪的百分数。
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（三） 测定方法
1. 滤纸筒的制备 2. 样品处理
固体样品：精密称取干燥并研细的样品 2～ 5g（可取测定水分后的样品)，必要时拌以海砂 ，无损地移入滤纸筒内。
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半固体或液体样品：

D
• C、绿色 D、紫色 • 4、在鉴定可溶性糖的实验中，对试管的溶液进行加热时，操作不正确是（ ） • A、将这支试管放在盛开水的大烧杯中 • B、试管底部不要触及烧杯底部 • C、试管口不要朝向实验者
D
• D、试管底部紧贴烧杯底部
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，使 倍物镜对准
(物镜的前端与载物台要保持2厘米的距离)。 2．调
整
，把一个
的光圈对准通光孔。
眼注视
目镜内(右眼睁开，便于以后同时画图)。转动
，使光
线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜，可以看到白亮的视
野。 （三）用低倍镜观察 1．把所要观察的玻片标本放在载
物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心。 2．转
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随堂练习
• 1、下列可用脂肪鉴定的实验材料是（ ） • A、苹果 B、梨 C、卵白 D、花生种子 • 2、可溶性还原糖的鉴定中，制备生物组织样液时加入少许石英砂，目的是（ • A、研磨充分 B、防止糖被破坏 • C、防止反应 D、无作用
D
）
A
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• 3、蛋白质稀释液中加入双缩脲试剂后，颜色是（ ） • A、浅蓝色 B、砖红色
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二、显微镜的结构：
目镜
镜筒
压片夹 载物台 遮光器与光圈 反光镜
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粗准焦螺旋 细准焦螺旋 镜臂
物镜
镜柱
镜座
（一）取镜和安放
1．取镜：
手握住镜臂，
手托住镜座，轻拿轻
放。 2．安放：把显微镜放在实验台上，略偏左（显微镜放
在距实验台边缘7厘米左右处）。安装好