微生物转化合成瓜氨酸的研究

一２２一　江苏农业科学２０１０年第４期　

李东霄，常景玲，张志宏．微生物转化人参皂苷Ｒｃ和Ｒｄ的研究［Ｊ］．江苏农业科学，２０１０（４）：２２—２５　

微生物转化人参皂苷Ｒｃ和Ｒｄ的研究　

李东霄，常景玲，张志宏　

（河南科技学院生命科技学院，河南新乡４５３００３）　

摘要：人参皂苷尤其是稀有人参皂苷具有重要的药理活性，但在人参中含量极其稀少。通过运用薄层层析和高　效液相色谱分析技术，对４种真菌转化人参皂苷Ｒｃ和Ｒｄ生成稀有皂苷的代谢作用进行分析，结果显示４种真菌均具　

有较强转化人参皂苷Ｒｃ和Ｒｄ的能力。其中，转化人参皂苷Ｒｃ的主要代谢途径推测为Ｒｃ—Ｍｃ。一Ｍｃ—ｃＫ—ＰＰＤ；而　

在转化人参皂苷Ｒｄ的过程中可能存在２条代谢途径，其中主要途径推测为Ｒｄ—Ｆ　一ｃＫ—ＰＰＤ，而另一条途径则由人　

参皂苷Ｒｄ直接转化为Ｒｇ　。试验结果为进一步通过优化试验条件积累代谢产物Ｒｇ，或ＣＫ，以及分离纯化相应的人　

参皂苷糖苷酶提供了良好基础。　关键词：微生物转化；人参皂苷；高效液相色谱（ＨＰＬＣ）；薄层层析（ＴＬＣ）；代谢途径　

中图分类号：ｓ５６７．５　１０．１　文献标志码：Ａ　文章编号：１００２—１３０２（２０１０）ｏ４—０ｏ２２一Ｏ３　

人参是常见的补益中药，应用于中医临床已有２　００３多年　

的历史，具有广泛的药理作用和医疗用途。人参中主要的生理　

活性成分是各种人参皂苷，其中大多数属于原人参二醇类皂　

苷，主要包括人参皂苷Ｒａ　、Ｒａ：、Ｒｂ　、Ｒ１）：、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｇ３、Ｒｈ：等，　

是人参的主要活性成分之一…。上述人参皂苷单体的结构差　

异仅在于ｃ，和ｃ如位上的糖基侧链不同，但显示出的药理活性　却有不同。如人参皂苷Ｒｃ可减弱由辣椒碱和Ｐ物质诱导的疼　

痛　。　及延长溶血发生的滞后时间　；Ｒｄ具有促进Ｔ细胞增　

殖，提高天然杀伤细胞（ＮＫ）活性，提高机体免疫力并具有促进　

副肾皮质荷尔蒙分泌作用　；人参皂苷Ｒ＆和Ｒｈ　在抑制肿瘤　

第３０卷第６期　２０１１年１１月　岩石矿物学杂志　ｖＯ１．３０．Ｎｏ．６：１０３１～１０３８　ＡＣＴＡ　ＰＥＴＲＯＬＯＧＩＣＡ　ＥＴ　ＭＩＮＥＲＡＬＯＧＩＣＡ　Ｎｏｖ．，２０１１　硅藻土、石英砂和钾离子促进微生物转化酸性矿山　废水中亚铁成次生矿物的研究　王敏，周立祥　（南京农业大学资源与环境科学学院环境工程系，江苏南京２１００９５）　摘要：嗜酸性氧化亚铁硫杆菌（Ａｃｉｄｉｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｆｅｒｒｏｏｘｉｄａｎｓ）能够在低ｐＨ值条件下，迅速将Ｆｄ　氧化并产生大量　次生羟基硫酸铁沉淀，从而除去水中可溶性Ｆｄ　。这为富含Ｆｅ　的酸性矿山废水（ａｃｉｄ　ｍｉｎｅ　ｄｒａｉｎａｇｅ，ＡＭＤ）处理提　供了新的思路。本文从品种刺激和阳离子诱导两个方面，分别研究了固定化载体（硅藻土、石英砂）和具有强诱导能　力的成矾离子（Ｋ　）对微生物转化酸性体系中Ｆｅ２　成次生矿物的影响。结果表明，３种材料均有明显促进可溶性　Ｆｄ　向次生矿物转化的作用，且总铁（ＴＦｅ）沉淀率与３种材料的添加量呈正相关关系。在起始Ｆｅ２　浓度为１６０　ｍｍｏｌ／Ｌ，硅藻土、石英砂和钾离子最大添加量分别为１０　ｇ、１０　ｇ和８０　ｍｍｏｌ／Ｌ时，经过７２　ｈ反应后，ＴＦｅ沉淀率分别　比对照增加了８％、２４％和２０％。矿物中的Ｆｅ、Ｋ和ｓ元素含量与溶液中的起始Ｋ　浓度有非常密切的关系，随着　Ｋ　浓度的增大，矿物中的Ｋ和Ｓ含量逐渐增加，而Ｆｅ含量则相应减少。　关键词：酸性矿山废水；嗜酸性氧化亚铁硫杆菌；羟基硫酸铁矿物；晶种；钾　中图分类号：Ｐ５７９；Ｑ９３　文献标识码：Ａ　文章编号：１０００—６５２４（２０１１）０６—１０３１—０８　Ｔｈｅ　ｒｅｍｏｖａｌ　ｏｆ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｆｅｒｒｏｕｓ　ｉｒｏｎ　ｉｎ　ａｃｉｄ　ｍｉｎｅ　ｄｒａｉｎａｇｅ（ＡＭＤ）ｔｈｒｏｕｇｈ　ｔｈｅ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｉｏｇｅｎｉｃ　ｉｒｏｎ　ｏｘｙｈｙｄｒｏｓｕｌｆａｔｅ　ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｅｓ　ｆａｃｉｌｉｔａｔｅｄ　ｂｙ　ｄｉａｔｏｍｉｔｅ，ｑｕａｒｔｚ　ｓａｎｄ　ａｎｄ　ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ＷＡＮＧ　Ｍｉｎ　ａｎｄ　ＺＨＯＵ　Ｌｉ—ｘｉａｎｇ　（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｎａｎｊｉｎｇ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｎａｎｉｉｎｇ　２１００９５，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｃｉｄ　ｍｉｎｅ　ｄｒａｉｎａｇｅ（ＡＭＤ），ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｒｏｎ　ｐｙｒｉｔｅ（ＦｅＳ２）ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｓｕｌｆｉｄｅ　ｍｉｎ—　ｅｒａｌｓ，ｉｓ　ａ　ｍａｊｏｒ　ｐｒｏｂｌｅｍ　ｉｎ　ｃｏａｌ—ａｎｄ　ｍｅｔａｌ—ｍｉｎｉｎｇ　ｄｉｓｔｒｉｃｔｓ　ｉｎ　ｔｈａｔ　ｓｕｃｈ　ｗａｔｅｒ　ｏｆｔｅｎ　ｈａｓ　ａ　ｌｏｗｅｒ　ｐＨ　ａｎｄ　ｃｏｎｔａｉｎｓ　ｈｉ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　Ｏｆ　ｈｅａｖｙ　ｍｅｔａｌｓ　ａｓ　ｗｅｌ１　ａｓ　Ｆｅ　ａｎｄ　ｓｏ１４一．Ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｒ　ｍｉｇｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＡＭＤ　ｆｒｏｍ　ｉｔｓ　ｓｏｕｒｃｅ　ｉｓ　ｇｅｎｅｒａｌｌｙ　ｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄ　ｔｏ　ｂｅ　ｔｈｅ　ｐｒｅｆｅｒａｂｌｅ　ｏｐｔｉｏｎ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｄｕｅ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｐｒａｃｔｉｃａｌ　ｏｐｅｒａｔｉｏｎａｌ　ｄｉｆ—　ｆｉｅｕｌｔｉｅｓ　ｉｎ　ｍａｎｙ　１ｏｃａｔｉｏｎｓ，ｅｆｆｏｒｔｓ　ａｒｅ　ｄｉｒｅｃｔｅｄ　ｔｏｗａｒｄｓ　ｔｈｅ　ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｆｆｌｕｅｎｔ．Ｔｈｅｒｅ　ａｒｅ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｏｐｔｉｏｎｓ　ａｖａｉｌａｂｌｅ　ｆｏｒ　ＡＭＤ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ａｎｄ　ｌｉｍｅ　ｎｅｕｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎ　ｓｅｅｍｓ　ｔｏ　ｂｅ　ｔｈｅ　ｍｏｓｔ　ｗｉｄｅｌｙ—ｕｓｅｄ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｍｉｎｉｎｇ　ｉｎｄｕｓｔｒｙ．Ｕｎｌｉｋｅ　Ｆｅ３　，Ｆｅ２　ｉｓ　ｄｉｆｆｉｃｕｌｔ　ｔｏ　ｂｅ　ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｅｄ　ｕｎｌｅｓｓ　ｐＨ　ｉｓ　ｅｌｅｖａｔｅｄ　ｔｏ　８．５，ｔｈｕｓ，　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｅｃｏｎｏｍｉｃ　ｖｉｅｗｐｏｉｎｔ，ｔｈｅ　ｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｆｅ２　ｔｏ　Ｆｅ３　ｐｒｉｏｒ　ｔｏ　ｎｅｕｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎ　ｉｓ　ｒｅｑｕｉｒｅｄ　ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔ—　ｍｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｆｅ２　ｒｉｃｈ　ＡＭＤ．Ａｃｉｄｉｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｆｅｒｒｏｏｘｉｄａｎｓ　ｗａｓ　ｐｒｏｖｅｄ　ｔｏ　ｂｅ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｆｅ２　ｕｎｄｅｒ　ｌｏｗ　ｐＨ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．Ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｉｒｏｎ　ｏｘｉｄａｔｉｏｎ．ａｂｕｎｄａｎｔ　ａｍｏｕｎｔｓ　ｏｆ　ｆｅｒｒｉｃ　ｉｒｏｎ　ｏｘｙｈｙｄｒｏｓｕｌｆａｔｅ　（ｍａｉｎｌｙ　ｊａｒｏｓｉｔｅ）ｗｏｕｌｄ　ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｅ．Ｏｎｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｄｖａｎｔａｇｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｅ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｅａｓｉｎｅｓｓ　ｏｆ　ｆｉｌｔｒａ一　收稿日期：２０１０—１１—２５；修订日期：２０１１—０４—０８　基金项目：国家自然科学基金重点项目（４０９３０７３８）　作者简介：王敏（１９８４一），男，博士研究生，主要从事酸性矿山废水处理研究，Ｅ—ｍａｉｌ：ｗａｎｇｍｉｎ２３１１＠１６３．ｃｏｒｎ；通讯作者：周立祥，　教授，博士生导师，Ｅ．ｍａｉｌ：ｌ￣ｈｏｕ＠ｎｊａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ。

ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　ＡＮＤ　ＭＡＴＥＲＩＡ　ＭＥＤＩＣＡ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　２００７　ＶＯＬ．１８　ＮＯ．１２　时珍国医国药２００７年第１８卷第１２期　

栀子　中京尼平　苷的微生物转化研究　

王永宏，苏　建，王建芳，廖　勇，冯　杉，孙启玲　

（四川大学生命科学学院，生物资源与生态环境教育部重点实验室，四川成都６１００６４）　

摘要：目的通过筛选一株高产ｐ一葡萄糖苷酶菌株对栀子进行发酵，使得其中的京尼平苷转化为京尼平。方法通过底　

物特异显色筛选模型筛选茵株，并使用正交实验对发酵条件进行优化。结果筛选到一株产ｐ一葡萄糖苷酶酶活可达到　

８．２　ｕ／ｍｌ的青霉ＰｅｎｉｃｉＵｉｕｍ　ｎｉｇｒ／ｃａｎｓ，并优化了发酵转化条件，使得京尼平苷的转化率可达到９５％以上。利用波谱法对　

发酵产物进行了结构鉴定，证明转化产物为京尼平。结论通过微生物转化的方法可以使栀子中主要成分京尼平苷转化　

成具直接作用的有效成分京尼平。　

关键词：栀子；京尼平苷；青霉；京尼平；　

中图分类号：Ｒ２８５．５　文献标识码：Ａ　微生物转化　

文章编号：１００８－０８０５（２００７）１２－３００３－０２　

Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ　Ｔｒａｎｓｆｏｌｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｇｅｎｉｐｏｓｉｄｅ　ｉｎ　Ｇｏｒｄｅｎｉａ　

ＷＡＮＧ　Ｙｏｎｇ—ｈｏｎｇ，ＳＵ　Ｊｉａｎ，ＷＡＮＧ　Ｊｉａｎ—ｆａｎｇ，ＬＩＡＯ　Ｙｏｎｇ，ＦＥＮＧ　Ｂｉｎ，ＳＵＮ　Ｑｉ—ｌｉｎｇ　

（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｂｉｏ—ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ　ａｎｄ　Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｓｉｃｈｕａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，　

Ｃｈｅｎｇｄｕ　６１００６４，Ｃｈｉｎａ　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｇａｒｄｅｎｉａ（Ｇａｒｄｅｎｉａ　ｊａｓｍｉｎｏｉｄｅｓ　Ｅｌｌｉｓ）ｗａｓ　ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ　ｔｏ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｂｙ　１３－ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ　ｓｔｒａｉｎ　ｔｏ　

考研药学综合（生物化学）历年真题试卷汇编5 (题后含答案及解析)

题型有：1. 判断题请判断下列各题正误。 2. 简答题 3. 名词解释题 4. 填空题 5. 单项选择题 6. 多项选择题

1． 人体及哺乳动物能制造多种脂肪酸，但是不能向脂肪酸引入超过△9的双键。( )

A．正确

B．错误

正确答案：A

解析：该考点主要考查大家对必需脂肪酸的概念，必需脂肪酸主要包括两种，一种是(1)一3系列的α一亚麻酸(18：3)，一种是ω一6系列的亚油酸(18：2)。只要食物中α一亚麻酸供给充足，人体内就可用其合成所需的ω一3系列的脂肪酸，如EPA、DHA(深海鱼油的主要成分)。也就是说α一亚麻酸是ω—3的前体。ω—6系列的亚油酸亦同理。 知识模块：生物化学

2． 已知填鸭或猪的储存脂肪很丰富，而他们的饲料以糖为主，所以动物体内能将糖转化为脂肪的。( )

A．正确

B．错误

正确答案：A

解析：填鸭和猪能将多余的糖类转化为脂肪。 知识模块：生物化学

3． 以干重计量，脂肪比糖完全氧化产生更多的能量。( )

A．正确

B．错误

正确答案：A

解析：甘油三酯完全氧化为9．3kcal／g，糖或蛋白质为4．1kcal儋，则脂类产能约为糖或蛋白质的二倍。 知识模块：生物化学

4． 鸟氨酸循环的基本过程。

正确答案：过程：二氧化碳和氨在线粒体中经氨基甲酰磷酸合成酶Ⅰ催化下生成氨基甲酰磷酸，再与鸟氨酸缩合成瓜氨酸，瓜氨酸在胞液中与天冬氨酸经精氨酸代琥珀酸合成酶催化下生成精氨酸代琥珀酸，后者裂解为精氨酸和延胡索酸，而精氨酸进一步分解为尿素和鸟氨骏形成循环。 涉及知识点：生物化学

5． 尿素循环

正确答案：肝脏是动物生成尿素的主要器官，由于精氨酸酶的作用使精氨酸水解为鸟氨酸及尿素。精氨酸在释放了尿素后产生的乌氨酸，和氨甲酰磷酸反应产生瓜氨酸，瓜氨酸又和天冬氨酸反应生成精氨基琥珀酸，精氨基琥珀酸被酶裂解，产物为精氨酸及延胡索酸。由于精氨酸水解在尿素生成后又重新反复生成，故称尿素循环。 涉及知识点：生物化学