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3100型遗传分析仪的应用和维护

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应 中， 除了含有Ｄ Ａ Ｎ 聚合酶和四种正常的ｄ Ｔ ＃ 还有用 Ｎ Ｐｂ 非放射性荧光素标记的ｄ Ｎ Ｐ ｄ Ｔ 的３ Ｈ 取代了 ｄ Ｔ ，ｄ Ｎ Ｐ － 普通脱氧核糖 ３ Ｏ ，， Ｎ 链的延伸时ｄ Ｔ 与ｄ Ｎ Ｐ 在Ｄ Ａ Ｈ Ｎ Ｐ ｄＴ 展开竞争，如果是ｄ Ｔ ，延伸反应继续进行，如果是 ＮＰ
的聚丙烯酰胺平板进行Ｄ Ａ Ｎ 序列分析，繁琐的灌胶和上 样过程全部由泵和 自动进样器完成，实现了自动灌胶、 自动进样、 自动数据收集。但由于其一次只能进行单一
样 品测 定，凶此远远不 能满足我 院的使用 ，我们又于 ２ ０ 年购置 了Ａ Ｉ ｒ １ ０ ０４ Ｂ Ｐ ｉ ｍ ３ ０ 型遗传分析系统 ，它是 ｓ
ｄＮ Ｐ ｄ Ｔ ，由于缺少３ Ｏ 将会阻断后续ｄ Ｔ 形成磷脂二 一Ｈ ＮＰ 脂键 ，延伸进 一步 被终止 ，反应产 生大量 的寡核苷酸 链，这些产 物可用 凝胶 电泳分离 ，染料分子用激光激
种长度选择的 自动涂层毛细管 （ ２ ｍ ６ ｍ ０ ｍ ２ ｃ ，３ ｃ ，５ ｃ ，
８ ｃ ），可 以满足不 同的应用需求 （ ０ｍ 见表１ ）。
断分析软件 （ ｅ ｅ ａ ｐ ｒ 可以对结果进行 自动分析。 ＧｎＭｐｅ）
３ ３ Ｏ 型遗传分析仪的应用 ． １０
品，足以满足中高等样 品量实验室 的需要 ，与３ ０ １ 型遗 传分析仪相 比其 自动化程度更高，应用更广泛。
一
３ ０ ０ 型遗传分析仪能够完成对新基 因序列的测 定 １ 或比较测序工作。此外，还可进行多种片段分析，包括
表 １ ３ ０ １ ０遗传分析仪应 用举例
应用举例
快速 期序 Ｉ 标准 测序
性 能指 标
分离 毛 细管 电泳时 问和 分析 ２ 小时产 事 ４
介质 长度 ３０ ６ｍ 温度 长度
比较测序 ９． 测 序 ８５ ＳＰ 究 Ｎ研 精度 ＰＰ６ Ｏ
－
５ｃ ０ｍ ３Ｃ ６Ｂ ３ｃ ６ｍ
２５ ｒ６℃ ６０ｐ ｈ ０ ５ ｂ ４ｍ ｎ６ ℃ ４０ ｐ ５ｌ ０ ０ｂ
９，２ｂ ０ ？０ｐ ７６０ ，８ 枭
片 段大 撖卫星 分析 ４ ０ｐ 内 ０ｂ 以 ＰＰ Ｏ 小 分析 准偏 差 ０ １ ６ 标 ４ 突变 检测
维普资讯
中 砚代埘 装 国 各
２ ７ 第期总 ４ ） ０ 年 ｌ （第 ７ ０ 期
３ 型遗传分析仪的应用和维护 ０ １ ０
鲍 蕾
（北京师范大学 北京 １０７ ） ０ ８５
摘 要 ：随着分子 生物学的发 展 ，测序技 术以及 片断分析技 术的应 用越来越广泛 。本文简要 介绍 了 ３ ００遗 １
３ ０ ０ 型遗传分析仪操作简单，仅需安装毛细管、 １
注射器，将装有预处理样品的样 品板放置于 自 动进样器
上后便可运行。在 自动进样器上一次可放置２ ６ Ｌ 个９ ；或 ｆ ３ 孔板。一旦样 品板放好后，样品被 自动吸入毛细 ４ ８
的遗传变异信息。但由于在公司进行样品测序及片断分 析存在着耗时耗力 以及准确性较差等缺点，因此很 多高 等院校及科研院所为了满足 自身教学科研发展 的需要， 都购置 了遗传分 析仪 。我 院于 １ 引进 了ＡＢＩ ９９年 ９
２ ７第期总 ４ ０ 年 １ （第 。 ０
微卫星Ｄ Ａ Ｎ 分析 （ Ｓ ）、限制性片段长度多态性分析 ＳＲ
、
３ Ｏ 遗传 分析仪 的应用 １ 型 Ｏ
１ 工作原理 ． 在合成的寡核苷酸引物同单链 Ｄ Ａ 模板退火的反 Ｎ
（Ｆ Ｐ Ａ Ｌ ）、比较基因型分析、单核苷酸多态性 （Ｎ ） ＳＰ、
单链构象多态性分析 （ Ｓ Ｐ Ｓ Ｃ ）等。３ Ｏ 遗传分析仪有 １０ 两种专利液体分离胶，分别 为Ｐ Ｐ ￣Ｐ Ｐ ，并且有多 Ｏ ４ ＩＯ ６
ｓ 检测 舯
１ ｂ 以内 ． ０ ｐ ０ 四色判 定 ＰＰ４ Ｏ
１１ ，５ ２十样 ２ ｎｎ６ ℃ １ ｂ ０ｉ ０ ０ ｐ ０ 品
（ 下转 １ 页） ８
／ ６
嘲 睇 固
维普资讯
中 砚代皋 装备 目
袁 ２ 类ｌ 型 ｉ放电电压值 ‘ ． Ｉ ｆ 螅髓）
８ｍａ ０ ０ ｉ６℃ ５０ ｐ １４ ３０ｐ ０ｂ ８ ２ ｂ
活，并且荧光信号被放大再被光 电倍增管捕获，根据每
种不 同染料的颜色来判断不同的核苷酸，根据荧光峰的 形状 和连续峰之间 的距离识别每一个碱基。
２ 主要 特 点 ．
Ｄ＾ Ｎ 测序
９ ． 测序 ８５ 精度 ＰＰ ６ Ｏ
传分析仪 的特点 ，并对 ３１ＯＯ遗传分析仪 的正 确使用及 日常维护提 出了 自己的观点 。
关键词 ：Ａ Ｉ Ｒ Ｍ １ 遗传分析仪 应用 维护 Ｂ Ｉ ３ ０ ｓ Ｏ
２ 世纪末 ，分子生物学技术 的发展极大 的促进了 ０
生物科学各个领域的研究。与形态学、细胞学和同工酶 提供的信息相比，Ｄ Ａ￣ Ｎ ｆ够提供更直接，更准确和更多
Ｐ Ｉ ＭＭ１ 型遗传分析仪，其采用毛细管技术取代传统 ＲＳ Ｔ ０ ３
管，在电场作用下泳动，并根据用户设定的参数进行分 析，可连续分析多达７ ８ ６ 个样品。每一轮１ 个样品的测 ６ 定工作均为自动完成 。直至测完样品盘中的所有样品 ３ Ｏ 型遗体分析仪采用光栅Ｃ Ｄ １ Ｏ Ｃ 荧光检测技术
光源发出的光线被光学元件分成两股，１ 根毛细管被一 ６
束激光 同时从两面照射，有效提 高荧光检测灵敏度和均
一
性。
３ ０ 型专用 的序列分析软件 （ｅ Ａ ａ ｙ ） １０ Ｓ ｑ ｎ ｌ ｓ ａ 和片 ｉ
个全 自动化多泳道 的操作平 台，可 同时分析 １ 个样 ６

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botest-3100操作手册

botest-3100操作手册

Botest-3100全自动血液细胞分析仪说明书桂林高新区宝利泰医疗电子有限公司版序:1.0目 录版权及声明 (I)如何使用本说明书 (1)第1章仪器介绍 (2)1.1仪器概述 (2)1.1.1仪器前面板 (2)1.1.2仪器后面板 (3)1.1.3仪器右侧板 (4)1.2测量参数 (4)1.3仪器组成 (5)1.3.1主机部分 (5)1.3.2显示部分 (5)1.3.3试剂 (7)第2章仪器测量原理 (9)2.1测量原理 (9)2.1.1电阻抗法测量血液细胞数量、体积 (9)2.1.2流动比色法测量HGB (10)2.2试剂的作用 (10)2.3仪器参数测量的方法 (10)第3章安装及样本分析 (12)3.1开箱并检查 (12)3.2安装要求 (12)3.3电源检查 (13)3.4试剂导液管连接 (13)3.4.1溶血剂（LYSE）导液管连接 (14)3.4.2稀释液（DILUENT）导液管连接 (14)3.4.3废液（WASTE）导液管连接 (14)3.5记录仪纸安装 (14)3.6打印机的安装（如装备） (15)3.7条形码扫描器的安装（如装备） (15)3.8键盘、鼠标垫、鼠标的安装 (15)3.9电源线连接 (16)3.10开机启动 (16)3.11本底测试 (17)3.12质量控制 (17)3.13标定 (18)3.14血液样本的采集 (18)3.14.1静脉血（全血）的采集 (18)3.14.2末梢血（预稀释）的采集 (18)3.15血样计数、分析 (19)3.15.2血样计数、分析过程 (20)3.16测量结果分析、处理 (21)3.17报告输出 (22)3.18分析结果修改 (23)3.19关机 (23)3.20检测结果查询 (24)3.20.1历史样本数据的选择、浏览、修改、输出、删除 (25)3.20.2检测数据的全部删除 (26)第4章仪器设置 (27)4.1仪器设置 (27)4.1.1我的仪器 (27)4.1.2时间/日期 (28)4.1.3记录/打印 (28)4.1.4传输 (28)4.1.5选项 (28)4.1.6我的报告 (30)4.1.7报告参数 (30)第5章质量控制 (31)5.1质控编辑 (31)5.2质控运行 (34)5.3质控图 (35)5.4质控数据 (36)第6章标定 (38)6.1标定准备 (39)6.1.1本底测试 (39)6.1.2仪器重复精度的评估 (39)6.2标定系数修改 (40)6.3标定浏览 (42)第7章参数界限 (43)7.1参数界限的浏览 (43)7.2参数界限的调整 (44)第8章保养与维护 (46)8.1每日保养、维护 (46)8.2每周保养、维护 (46)8.3每月保养、维护 (47)8.4每年保养、维护 (47)8.5仪器长期不用或运输前的保养、维护 (48)第9章故障处理 (49)9.1故障处理指引 (49)9.3故障处理方法 (50)9.3.1WBC堵孔或RBC堵孔（WBC CLOG 或RBC CLOG） (50)9.3.2WBC测试数值异常变大 (51)9.3.3WBC气泡或RBC气泡（WBC BUBBLES RBC BUBBLES） (51)9.3.4真空度低（VACUUM LOW） (51)9.3.5温度低（WBC TEMP LOW） (51)9.3.6废液满（WASTE FULL） (52)9.3.7HGB故障（HGB LAMP F AILURE） (52)9.3.8HGB 气泡（HGB BUBBLES） (52)9.3.9无稀释液（DILUENT EMPTY） (52)9.3.10无溶血剂（LYSE EMPTY） (52)9.3.11记录仪缺纸（RECRDER NO P APER） (53)9.3.12记录仪温度高（RECRDER TEMP OVER） (53)9.3.13记录仪头位置错（RECRDER HEAD ERROR） (54)9.3.14记录仪故障（RECRDER ERROR） (54)9.3.15记录仪卡纸（RECRDER P APER OUT） (54)第10章预防、限制和危害 (55)10.1使用限制 (55)10.2安装限制 (55)10.3人身防护和传染控制 (56)附录1：产品规格 (57)附录2：简体中文输入方法 (59)附录3：符号 (60)版权及声明版权©桂林高新区宝利泰医疗电子有限公司2001，保留所有权利。

ABI3100简介及其常见问题解析

ABI3100简介及其常见问题解析


实际原因：
气泡引起的峰 使信号达到饱 和，显示不通 过。
解决方案：
尽量保证胶及 通道中没有气 泡。
（下图是放大 图）
3. 软件提示：Bad dye order detected. 表现：
实际原因：引物峰过高，检测范围包括引物峰部分。 解决方案：调整检测范围到引物峰之后，包括所有目的峰。
4. 软件提示：Failed quality check: q=0.93807 is less than minQ threshold (0.95000) 表现：
ABI3100简介 及 其常见问题解析
姜艳艳 2007.3.9
主要内容
ABI遗传分析仪简介 ABI3100相关简介
ABI 3100构造及毛细管工作原理 数据收集软件的简介 数据分析软件的简介 常见问题解析
一. ABI遗传分析仪系列
ABI测序仪和遗传分析仪系列： 377 DNA 测序仪
所采用的是板胶
3100为16道毛细管
3100Avant为4道毛细管
使用96孔板或384孔板进 行电泳
使用注射器将胶注入毛细 管，且有两支注射器
3130 和 3130xl 基因分析仪
3130为四道， 3130xl为16道。
从胶瓶中自动吸胶 注入毛细管。
软件方面与3100基 本相同。
3730 和 3730xl 基因分析仪
310 是单道 的毛细管，不 能使用96孔板， 而是使用 0.5ml 的离心 管上样。
2.毛细管工作原理
毛细管两端：
阳极有电极插在buffer中
阴极没有电极，而是在毛细管外包裹着一层金属， 插在buffer中。
与3100不同，310在毛细管旁边有一根金属电极插在buffer中。
ABI-310使用说明

ABI-310使用说明

ABI PRISM310型基因分析仪说明书发布日期：2010-11-17 来源：丁香通浏览次数：1487DNA序列测定分手工测序和自动测序，手工测序包括Sanger双脱氧链终止法和Maxam-Gilbert化学降解法。

自动化测序实际上已成为当今DNA序列分析的主流。

美国PE ABI公司已生产出373型、377型、310型、3700和3100型等DNA测序仪，其中310型是临床检测实验室中使用最多的一种型号。

本实验介绍的是ABI PRISM 310型DNA测序仪的测序原理和操作规程。

DNA序列测定分手工测序和自动测序，手工测序包括Sanger双脱氧链终止法和Maxam-Gilbert化学降解法。

自动化测序实际上已成为当今DNA序列分析的主流。

美国PE ABI公司已生产出373型、377型、310型、3700和3100型等DNA测序仪，其中310型是临床检测实验室中使用最多的一种型号。

本实验介绍的是ABI PRISM 310型DNA测序仪的测序原理和操作规程。

【原理】ABI PRISM 310型基因分析仪(即DNA测序仪)，采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳，应用该公司专利的四色荧光染料标记的ddNTP(标记终止物法)，因此通过单引物PCR测序反应，生成的PCR产物则是相差1个碱基的3'末端为4种不同荧光染料的单链DNA混合物，使得四种荧光染料的测序PCR产物可在一根毛细管内电泳，从而避免了泳道间迁移率差异的影响，大大提高了测序的精确度。

由于分子大小不同，在毛细管电泳中的迁移率也不同，当其通过毛细管读数窗口段时，激光检测器窗口中的CCD(charge-coupled device)摄影机检测器就可对荧光分子逐个进行检测，激发的荧光经光栅分光，以区分代表不同碱基信息的不同颜色的荧光，并在CCD摄影机上同步成像，分析软件可自动将不同荧光转变为DNA序列，从而达到DNA测序的目的。

分析结果能以凝胶电泳图谱、荧光吸收峰图或碱基排列顺序等多种形式输出。

3100-Avant遗传分析仪操作规程及注意事项

3100-Avant遗传分析仪操作规程及注意事项

ZX/C-001-20053100-Avant遗传分析仪操作规程及注意事项1 概述本仪器是用于核酸和蛋白质序列分析和片段分析的专业毛细管电泳设备。

2 操作程序2.1 仪器的启动2.1.1 打开Dell电脑，进入win2000操作系统。

2.1.2 等win2000完全启动后，开启3100主机电源开关，仪器进入自检状态。

2.1.3 等仪器的绿色状态灯亮后，双击Run 3100-Avant Data Collection（V2.0）快捷键进入数据收集软件。

3 片段分析步骤3.1 样品扩增结束后，将一次上样的PCR产物转移到96孔板上，每孔各加10ul。

每孔上样量是：8.8μl甲酰胺+0.2μl分子量内标+（1-1.5）μl各座位混合PCR 产物（试剂盒或标准品的上样按照说明书进行），先将96孔板放入9700PCR 仪中95℃变性5min，4℃保存10min，取出后将板放到仪器的自动进样器上。

3.2 编辑样品表。

在Data Collection 窗口中，点击Protocol Magager，再点击Instrument protocol窗口中的New按钮，打开protocol Editor，新建一个protocol，在Name栏为新建的protocol 命名，Type中选Regular，然后根据使用的试剂的要求，分别在Run module、DyeSet（微卫星选D，亲子鉴定选F）中选出正确的程序，选择完毕后，点击OK。

每一种荧光组合的protocol 运行过一次以后，下次再用该组合，调出相应的protocol确认一下即可。

3.3 设置Result Group。

在其窗口的第一个format中，选择date of run, plate name,sample name, well position, capillary number；第二个format中，选择date of run, plate name，指定结果保存的路径，设置完成后，点击OK。