一．填空题影响酶催化的作用因素：底物浓度、酶浓度、温度、PH、抑制剂、激活剂。
酶的组成：单纯酶、结合酶（全酶=酶蛋白+辅因子（辅因子：辅酶、辅基、金属激活剂））酶的结构：结合部位催化部位控制部位酶生物合成模式：同步合成型延续合成型中期合成型滞后合成型打破酶合成调节限制的方法：添加诱导物控制阻遏物的浓度添加表面活化剂添加产酶促进剂植物细胞培养产酶的工艺流程：外植体的选择与处理植物细胞的获取细胞悬浮培养分离纯化酶在提纯与分离纯化过程中细胞破碎的方法：有机械破碎法物理破碎法化学破碎法酶促破碎法生物热敏性材料的干燥方法：喷雾干燥器气流干燥沸腾干燥器鼓式干燥器冷冻干燥酶固定化的方法：吸附法结合法交联法包埋法热处理法非水介质体系：有机介质气相介质超临界流体介质离子液介质酶的有机介质体积催化特性：底物专一性对映体选择性区域选择性键选择性热稳定性ph值特性细胞的固定化的主要方法：吸附法包埋法二．名词解释抗体酶：又称催化性抗体，是一类具有催化功能的抗体，抗体有抗原诱导产生的与抗原具有特异结合功能的免疫球蛋白。
诱导与阻遏：（1）酶生物合成的诱导作用：加进某种物质，使酶的生物合成开始或加速进行的过程。
如β-半乳糖苷酶的作用底物乳糖诱导β-半乳糖苷酶的生物合成。
（2）分解代谢物阻遏作用：容易利用的碳源的分解代谢的产物阻遏某些酶（主要是诱导酶）生物合成的现象。
如葡萄糖阻遏 －半乳糖苷酶的生物合成机理：葡萄糖的大量存在，降低了胞内cAMP浓度。
最适生长温度：细胞的生长、繁殖和发酵产酶需要一定的温度条件。
在一定温度范围内细胞才能正常生长、繁殖和维持正常的新陈代谢。
如：枯草杆菌34～37℃，黑曲霉28～32℃。
最适生产温度：最适产酶温度低于最适生长温度，在较低温度下，提高酶的稳定性，延长细胞产酶时间。
如：采用酱油曲霉生产蛋白酶，在28℃的温度条件下，其蛋白酶的产量比在40℃条件下高2~4倍。
生长因子：细胞生长繁殖不可缺少的微量有机化合物，如aa, 嘌呤，嘧啶，激素提供生长因子的天然原料：玉米浆，麦芽汁，酵母膏等。
等电点沉淀：利用两性电解质在等电点时溶解度最低，以及不同的两性电解质有不同的等电点这一特性，通过调节溶液的pH 值，使酶或杂质沉淀析出，从而使酶与杂质分离的方法称为等电点沉淀。
盐析沉淀：是利用不同蛋白质在不同的盐浓度条件下溶解度不同的特点，通过在酶液中添加一定浓度的中性盐，使酶或杂质从溶液中析出沉淀，从而使酶与杂质分离的过程。
酶分子修饰：通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的某些特性和功能的技术过程称为酶分子修饰。
分子内交联修饰：含有双功能基团的化合物（双功能试剂）如戊二醛、己二胺、葡聚糖二乙醛等，可以在酶蛋白分子中相距较近的两个侧链基团之间形成共价交联，从而提高酶的稳定性的修饰方法称为分子内交联修饰。
酶的有限水解修饰：在肽链的限定位点进行水解，使酶的空间结构发生某些精细的改变，从而改变酶的特性和功能的方法，称为肽链有限水解修饰。
酶的定点突变技术：是指在DNA序列中的某一特定位点上进行碱基的改变从而获得突变基因的的操作技术。
侧链基团修饰：采用一定的方法(一般为化学法)使酶分子的侧链基团发生改变，从而改变酶分子的特性和功能的修饰方法称为侧链基团修饰。
酶固定化：采用各种方法将酶与水不容性载体结合，制备固定化酶的过程。
细胞的固定法：通过各种方法将细胞与水不溶性载体结合，制备固定化细胞的过程称为细胞固定化。
非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学。
PH记忆：有机溶剂中的酶能够“记忆”它冷冻干燥前所在缓冲液中的pH。
这种现象为“pH记忆”(pH-imprinting)。
三．问答题什么是工业生物技术，工业生物技术产业的主要形式有哪些，现阶段工业生物技术发展的关键技术是什么？（1）工业生物技术是以微生物或酶为催化剂进行物质转化，大规模生产人类所需的化学品、医药、能源、材料等，是解决人类目前面临的资源、能源及环境危机的有效手段。
它为医药生物技术提供下游支撑，为农业生物技术提供后加工手段。
（2）1生物能源产业：燃料乙醇、生物柴油、沼气、生物制氢2生物材料产业3生物质资源产业（3）1微生物资源库和微生物功能基因组学技术2生物催化剂快速定向进化技术3重要工业微生物的代谢工程4生物反应器工程与过程放大5生物分离技术今欲生产糖化酶液体精制酶产品，试拟出合理的工艺步骤，并说明下游工程的主要工艺条件。
絮凝罐（絮凝）→空气罐→板框压滤机（一滤）→板框压滤机（二滤）→超滤膜（超滤）→储罐→板框压滤机（精滤）→储罐（成品）（1）絮凝的目的：除杂酶杂菌，将酶分布于液体层，使固液分离。
（2）一滤：除去料液中菌体,絮凝剂，大分子颗粒，及少量胶状物质。
（3）二滤工序：①消毒：NaOH溶液（PH10~11）②过水：调节PH值③预投:硅藻土和水的混合物在滤布上形成过滤介质，即滤膜;观察水流出的速度和流量，判断滤布是否破损和过滤介质是否涂抹均匀。
④过滤：主要除胶状物质，果胶。
⑤卸饼（4）超滤：一种物质被透过或截留于膜的过程，近似于筛分过程，依据滤膜孔径的大小而达到物质分离的目的。
用于分离纯化和浓缩一些大分子物质，如在溶液中或亲合聚合物相连的蛋白质（亲合超滤），多糖，抗生素以及热原，也可以用来回收细胞和处理胶体悬浮液。
什么是抗体酶？试述应用单克隆抗体法制备抗体酶的机理。
⑴抗体酶又称为催化性抗体，是一类具有催化功能的抗体。
抗体是由抗原诱导产生的与抗原具有特异结合功能的免疫球蛋白。
如果在抗体与抗原结合部位引入催化基团，就有可能成为具有催化功能的抗体酶。
抗体酶可以通过诱导法或修饰法产生。
⑵酶活性中心与底物过渡态结合的理论。
酶的活性中心的主要功能是与底物的过渡态结合，并起稳定作用。
⑶以激发态的分子为半抗原激发免疫系统产生抗体，那么这种抗体反过来可能催化经过此过渡态的化学反应。
什么是酶的最适pH，它影响酶反应的机理是什么。
（1）在一定的pH 下, 酶具有最大的催化活性,通常称此pH 为最适pH(optimum pH)。
（2）1过酸或过碱影响酶蛋白的构象，使酶变性失活。
2影响酶分子中某些基团的解离状态（活性中心的基团或维持构象的一些基团）3影响底物分子的解离状态试述磺胺类药物的作用机理（竞争性抑制）磺胺类药物是对氨基苯磺酰胺或其衍生物，它是对氨基苯甲酸的结构类似物，竞争性抑制二氢叶酸合成酶动物体内的叶酸可从食物中获取，细菌体内的叶酸只能在二氢叶酸合成酶作用下，利用对氨基苯甲酸合成（细菌生长因子）。
如果动物体内含有大量的对氨基苯磺酰胺，可与对氨基苯甲酸竞争二氢叶酸合成酶的活性中心，抑制细菌二氢叶酸合成。
简述酶活力测定方法要求：快速、简便、准确两个阶段：酶在一定条件下与底物反应一段时间然后再测定反应物中底物或产物的浓度变化量。
步骤：（1）配制底物溶液。
（2）确定反应条件。
（3）反应开始，记时间（4）反应完毕注意终止反应。
（5）测定产物的生产量或底物的减少量。
影响酶催化作用的因素是什么（1）底物浓度对酶促反应速度的影响（2）酶浓度对酶反应速度的影响（3）温度的影响（4）pH 的影响（5）抑制剂的影响（6）激活剂对酶反应速度的影响举例说明研究抑制剂对酶的作用的重大意义（1）药物作用机理和抑制剂型药物的设计与开发：抗癌药（2）对生物体的代谢途径进行人为调控，代谢控制发酵（3）研究酶的活性中心的构象及其化学功能基团，不仅可以设计农药，而且也是酶工程和化学修饰酶、酶工业的基础酶的催化作用专一性与高效性的机理是什么？（1）酶的专一性：Specificity又称为特异性，是指酶在催化生化反应时对底物的选择性，即一种酶只能作用于某一类或某一种特定的物质。
亦即酶只能催化某一类或某一种化学反应。
1绝对专一性:有些酶对底物的要求非常严格，只作用于一个特定的底物。
2有些酶的作用对象不是一种底物，而是一类化合物或一类化学键。
（2）酶的高效性：酶可以使反应所需的活化能显著降低。
酶的发现及研究历史酶的发现：（1）人们对酶的认识起源于生产与生活实践。
夏禹时代，人们掌握了酿酒技术。
公元前12世纪周朝，人们酿酒，制作饴糖和酱。
春秋战国时期已知用曲治疗消化不良的疾病。
（2）西方国家19世纪对酿酒发酵过程进行了大量研究。
直到1897年，德国巴克纳Buchner兄弟用石英砂磨碎酵母细胞，制备了不含酵母细胞的抽提液，并证明此不含细胞的酵母提取液也能使糖发酵，说明发酵与细胞的活动无关。
从而说明了发酵是酶作用的化学本质，为此Buchner获得了1911年诺贝尔化学奖。
（3）1896年,日本的高峰让吉首先从米曲霉中制得高峰淀粉酶,用作消化剂,开创了有目的的进行酶生产和应用的先例。
（4）1878年, 给酶一个统一的名词，叫Enzyme，这个字来自希腊文，其意思“在酵母中”。
后来对酶的作用机理及酶的本质做了深入研究，1930年，证实酶是一种蛋白质；80年代初发现了具有催化功能的RNA——核酶(ribozyme)，这一发现打破了酶是蛋白质的传统观念，开辟了酶学研究的新领域。
现已鉴定出4000多种酶，数百种酶已得到结晶，而且每年都有新酶被发现。
酶的研究：（1）1908年,德国的罗姆制得胰酶,用于皮革的软化。
1908年,法国的波伊登(Boidin)制备了细菌淀粉酶,应用于纺织品的退浆。
1911年,美国的华勒斯坦(Wallestein)制得木瓜蛋白酶,用于除去啤酒中的蛋白质浑浊。
此后,酶的生产和应用逐步发展。
然而在50年代以前停留在从微生物，动物或植物中提取酶,加以利用阶段.由于当时生产力落后,生产工艺较繁杂,难以进行大规模工业化生产（2）1949年,用液体深层培养法进行细菌淀粉酶的发酵生产,揭开了近代酶工业的序幕。
50年代以后,随着生化工程的发展,大多数酶制剂的生产已转向微生物流体深层发酵的方法。
酶的应用越来越广泛。
50年代：开始了酶固定化研究。
1953年德国科学家首先将聚氨基苯乙烯树脂与淀粉酶,胃蛋白酶,羧肽酶和核糖核酸酶等结合,制成了固定化酶。
60年代，是固定化酶技术迅速发展的时期。
1969年,日本的千烟一郎首次在工业上应用固定化氨基酰化酶从DL-氨基酸生产L-氨基酸。
出现了“酶工程”这个名词来代表有效利用酶的科学技术领域。
1971年第一届国际酶工程学术会议在美国召开,当时的主题即是固定化酶，进一步开展了对微生物细胞固定化的研究。
1973年,千烟一郎首次利用固定化的大肠杆菌细胞生产L-天冬氨酸。
1978年,日本的铃木等固定化细胞生产α-淀粉酶研究成功.所以说,70年代是固定化细胞技术取得进展的时期.80年代，固定化细胞已能用于生产胞外酶,因此,80年代又发展了固定化原生质体技术,排除了细胞壁这一障碍。
（3）在酶的固定化技术发展的同时,酶分子修饰技术也取得了进展。
