天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(单试剂速率法)

天门冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒（天门冬氨酸底物法）适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）的活性。

1.1 产品型号/规格1×10mL；1×20mL；1×40mL；2×50mL；4×40mL；4×50mL；5×50mL；2×100mL；4×100mL；2×40mL；1×20L；1×10L；1×5L；1×1L。

1.2 主要组成成分试剂：Tris缓冲液 5.0mmol/L乳酸脱氢酶≥6000U/L苹果酸脱氢酶≥3000U/Lα-酮戊二酸 14.0mmol/LL-天门冬氨酸 210.0mmol/L烟酰胺嘌呤二核苷酸 0.18mmol/L2.1 外观和性状2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；中文包装标签应清晰、准确、牢固。

2.1.2 试剂应为无色至浅黄色澄清液体。

2.2 净含量不少于标示值。

2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在光径1cm、主波长340nm下，以纯化水为检测样本时，吸光度应不小于1.000。

2.3.2 试剂空白吸光度变化率在光径1cm、主波长340nm下，以纯化水为检测样本时，吸光度变化率(△A/min)应不大于0.004。

2.4 分析灵敏度AST含量为100U/L时，测定吸光度变化率（△A/min）应在0.030～0.090范围内。

2.5 线性范围2.5.1 在[5，500]U/L范围内，相关系数r应不小于0.990；2.5.2 在[5，100]U/L范围内，线性绝对偏差应不超过±10U/L；在（100，500]U/L 范围内，线性相对偏差应不超过±10%。

2.6 测量精密度2.6.1 重复性分别重复测定高、低值两个浓度样本，测定结果的变异系数（CV）均应不大于5%。

2.6.2 批间差用三个批号的试剂盒测定同一浓度样本，测定结果的相对极差（R）应不大于10%。

医疗器械产品技术要求编号:
天门冬氨酸氨基转移酶（AST）测定试剂盒
（IFCC法）
2、性能指标
2.1外观和性状
外观和性状应符合表2要求。

表2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2试剂空白
2.2.1试剂空白吸光度
试剂以蒸馏水为空白时，波长340nm，光径1.0 cm，温度37℃，吸光度≥ 1.0。

2.2.2试剂空白吸光度变化率
试剂以蒸馏水为空白时，波长340nm，光径1.0 cm，温度37℃，吸光度变化率≤0.004。

2.3分析灵敏度
试剂盒测试130 U/L被测物时，吸光度变化率≥ 0.02。

2.4线性范围
2.4.1试剂盒在10 ~800U/L区间（范围）内，其回归系数r≥0.990。

2.4.2相对偏差或绝对偏差应符合表3 要求。

表3 相对偏差或绝对偏差
2.5精密度
2.5.1试剂盒批内精密度CV 值应≤5.0%。

2.5.2试剂盒批间相对极差（R）应≤10.0%。

2.6准确度
1
相对偏差（Bias%）应在参考物质靶值±10%以内。

2.7液体装量
试剂盒不同规格的净含量应不少于其标示量。

2。

天门冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒（天门冬氨酸底物法）适用范围：本试剂用于体外定量测定人体血清中天门冬氨酸氨基转移酶的活性。

1.1 包装规格a) 试剂1：2×45 mL，试剂2：1×18mL；b) 试剂1：4×50 mL，试剂2：2×20mL；c) 试剂1：2×100mL，试剂2：2×20mL。

1.2 主要组成成分1.2.1试剂1主要组分Tris缓冲液100 mmol/LL-天冬氨酸240 mmol/L苹果酸脱氢酶>600 U/L乳酸脱氢酶﹥1200U/Lα-氧代戊二酸12mmol/LProClin300 适量1.2.2试剂2主要组份Tris缓冲液100 mmol/L还原型辅酶Ⅰ0.18mmol/LProClin300 适量2.1外观试剂1：无色澄清液体；试剂2：无色或淡黄色澄清液体。

2.2试剂装量应不低于试剂瓶标示装量。

2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度：在340nm处测定试剂空白吸光度，应≥1.5。

2.3.2试剂空白吸光度变化率：在340nm处测定空白吸光度变化率|△A/min|应≤0.05。

2.4分析灵敏度测定AST含量为40U/L样本时，其|△A/min|应≥0.01。

2.5线性范围2.5.1测试浓度在[0，600] U/L范围内，线性回归的相关系数（r）应不低于0.990；2.5.2测试浓度在[0，60] U/L范围内，线性绝对偏差应不超过±6 U/L；测试浓度在(60，600] U/L范围内，线性相对偏差应不超过±10%。

2.6 测量精密度2.6.1重复性：重复测试三个水平的样本，所得结果的变异系数（CV）应不大于5％。

2.6.2批间差：抽取3个不同批号的试剂，对同一份样本进行重复测定，相对极差≤10％。

2.7准确度以国家标准物质为检测样本时，测定结果相对偏差不超过±10％。

2.8 稳定性取在2℃～8℃条件下贮存达到18个月的试剂进行检测，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

天门冬氨酸氨基转移酶（AST）测定试剂盒（天门冬氨酸底物法）适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中天门冬氨酸氨基转移酶的含量1.1规格试剂1（R1）:4×80mL, 试剂2（R2）：4×16mL；试剂1（R1）:5×60mL, 试剂2（R2）：5×12mL；试剂1（R1）:3×40mL, 试剂2（R2）：3×8mL；试剂1（R1）:2×80mL, 试剂2（R2）：2×16mL；试剂1（R1）:2×400mL, 试剂2（R2）：2×80mL；试剂1（R1）:5×45mL, 试剂2（R2）：5×15mL；试剂1（R1）:2×70mL, 试剂2（R2）：1×70mL；试剂1（R1）:1×20mL, 试剂2（R2）：1×6mL。

1.2试剂组成见表1：试剂1（R1）（以下简称R1）,试剂2(R2)（以下简称R2）。

表1 试剂组成2.1 外观液体双试剂：R1（缓冲液）：无色液体，R2（启动液）：无色液体。

2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。

2.3 试剂空白2.3.1 空白吸光度在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度＞1.0 ABS。

2.3.2空白吸光度变化率在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，用去离子水作为样品加入试剂测试时，试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）应<0.004 ABS/min。

2.4 分析灵敏度浓度为50U/L时，吸光度变化率绝对值≥0.014。

2.5 线性范围在[1-600]U/L线性范围内，线性相关系数r2≥0.996。

在（100-600]U/L,范围内的相对偏差不超过10%；测定结果为[1-100]U/L时绝对偏差不超过10U/L。

2.6 精密度试剂盒测试项目精密度CV< 5 %。

天门冬氨酸氨基转移酶测定标准操作程序1. 摘要本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人血清或血浆中天门冬氨酸氨基转移酶的活力，作辅助诊断用。

2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中天门冬氨酸氨基转移酶的浓度。

3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定天门冬氨酸氨基转移酶浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒采用的是紫外-苹果酸脱氢酶法。

5. 原理底物L-天门冬氨酸与α-酮戊二酸在天门冬氨酸氨基转移酶（AST ）作用下生成草酰乙酸，生成的草酰乙酸在苹果酸脱氢酶（MDH ）作用下转化成L-苹果酸，同时伴随着NADH 的氧化，引起在波长340 nm 处吸光度下降，下降速率与血清中AST 活力成正比。

谷氨酸草酰乙酸酮戊二酸天门冬氨酸---L L AST +−−→−+α酮戊二酸苹果酸草酰乙酸-++-−−→−++++αNAD L H NADH MD H6. 仪器日立7600自动生化分析仪7. 试剂7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2 试剂瓶内主要成分：Tris 缓冲液、β-NADH 、乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶（MEDH ）、L-天门冬氨酸、α-酮戊二酸7.3 试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。

试剂不可冰冻。

7.4 试剂准备：试剂为即用式。

8. 标准品和质量控制8.1 校准程序：使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。

按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。

8.2质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。

每日在测定前做一次质控。

天门冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒（IFCC 推荐法） 使用说明书【产品用途】本试剂用于人血清或血浆中天门冬氨酸氨基转移酶（AST ）的体外定量测定。

【测定原理】L-天门冬氨酸+α-酮戊二酸AST草酰乙酸 + L-谷氨酸草酰乙酸+ NADH + H ＋MDHL-苹果酸 + NAD ＋+ H 2O 在波长340nm 处测定NADH 降低速率，可计算出AST 活性。

【产品规格】R 1：60ml×2 R 2：15ml×2 R 1：80ml×2 R2：20ml×2【试剂成分及浓度】R 1 每1000ml 内含 100mmol Tris 缓冲液；15mmol α-酮戊二酸； 0.24mmol NADH ；3.0KU MDH ；R 2每1000ml 内含 3.0KU L-天门冬氨酸。

【样品和仪器要求】不溶血血清或肝素抗凝血浆。

样品中AST 在2-8℃可稳定3天。

各类全自动生化分析仪和半自动生化分析仪。

【试剂贮存条件与稳定性】试剂2-8℃避光密封保存，自生产之日起可稳定12个月。

避免污染在2-8℃下，试剂瓶开启后稳定14天；单试剂工作液稳定7天。

【测定方法】主/副波长：340nm/405nm 反应方法：速率法 反应方向：负【结果计算】AST(U/L) =（ΔA 测定/min -ΔA 空白/min ）× 3376 3376为在波长340nm/405nm ，比色杯光径1cm 下的理论K 值，其中NADH340nm 处的毫摩尔消光系数取6.22，建议各实验室根据实测K 值计算。

【正常参考值范围】37℃ 成人：5-49U/L建议各实验室建立自已的正常参考值范围。

【注意事项】1.试剂与样品用量可根据不同仪器要求，按比率改变，计算公式不变。

2.试剂请于2-8℃贮存，避免冷冻、污染，否则将导致失效。

3.高脂或黄疸样品在340nm 处有较高的吸收值，应稀释后再测定。

4.试剂若不慎溅到人体表面如皮肤、眼睛等，必须用清水冲洗；如果误服则需要到医院治疗。

天门冬氨酸氨基转移酶(AST)测定操作规程（SOP文件）1实验原理和检验目的本试剂用于人血清或血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)的体外定量测定。

AST门冬氨酸+ α-酮戊二酸谷氨酸+ 草酰乙酸MDH草酰乙酸+ NADH + H+ 苹果酸+ NAD+在波长340nm处测定NADH降低速率，计算出AST活力。

2标本采集和处理2.1标本种类和采集方法标本：新鲜无溶血血清。

受检者（体检对象或病人）的准备：对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯。

静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布。

2.2标本处理方法标本要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。

样品采集后要离心标本，吸出血清。

标本应立即测定。

处理样品时要将其当成生物污染品。

3试剂3.1试剂组成3.2试剂准备试剂为液体双试剂，开瓶即可使用，用后及时置于2～8℃避光保存。

3.3试剂稳定性试剂在2-8℃避光保存可稳定12个月，试剂开盖后稳定7天。

R1和R2以2：1混匀，即为单一工作试剂。

单一工作试剂稳定1周。

4校准4.1校准品每日进行试剂空白校准操作。

使用朗道（RONDOX）进行全点校准操作。

4.2校准品准备朗道（RONDOX）校准物复溶30分钟，充分溶解混匀后即可使用。

4.3校准品稳定性朗道（RONDOX）冻干校准物2～8℃密闭保存稳定至有效期，复溶后校准物15℃～25℃稳定8小时，2℃～8℃稳定2天，-15℃～-25℃稳定2周。

4.4试剂校准周期校准周期为2天。

当试剂批号更换时应重新校准。

5质控5.1质控品采用朗道（RONDOX）（正常范围质控）和朗道（RONDOX）（病理范围质控）两个水平的血清进行室内质控。

5.2可接受性判断质控物的检测值应在给定质控范围，或可以通过参加卫生部室间质评对实验室的运作情况进行系统评估。

5.3质控操作每日进行样本检测之前首先应进行质控操作，以考察系统的在控情况。

如果检测结果符合质控要求则进行样本操作；如果不符合质控要求，则应重复质控操作，以排除可能发生的偶然误差；如果仍不符合质控要求，则应考虑质控品的重新准备、试剂的重新校准或更新、仪器的维护等。

天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(单试剂速率法)简介：Leagene 天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(单试剂速率法)其检测原理是天门冬氨酸氨基转移酶(AST)催化天门冬氨酸与α-酮戊二酸之间的氨基转移反应，草酰乙酸与NADH 经LDH 催化生成NAD +，上述方法实际为AST 速率法，其反应公式如下：在上述偶联反应中，NADPH 的氧化速率与样本中酶活性呈正比。

对于单试剂比色法，血清与试剂完整成分的底物溶液混匀，ALT 催化反应立即启动，进而计算酶的活性单位。

该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：操作步骤(仅供参考)：1、 准备样品：① 血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃保存1个月有效，用于AST/GOT 的检测。

② 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃保存1个月有效，用于AST/GOT 的检测。

③ (选做)样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的AST/GOT 含量。

2、 分光光度计检测：按照下表设置对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。

如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

编号 名称TE0135 100TTE0135 200TStorageALT 检测液(R)成分 终浓度 2×50ml 2×100ml 4℃ 避光Tris 缓冲液 100mM L-天门冬氨酸 240mM 酮戊二酸 12mM NADH 0.22mM LDH 2500U/L 防腐剂 15mM使用说明书1份加入物空白管 测定管 AST 检测液(R)(μl)900900混匀孵育。

蒸馏水(μl) 45 －待测样品(μl) －45混匀，孵育，在340nm处各管吸光度变化，计算各管ΔA/min。

3、生化分析仪检测：按照下表设置主要参数。

天门冬氨酸氨基转移酶（AST）测定方法操作程序【产品名称】通用名称：天门冬氨酸氨基转移酶（AST）测定试剂盒（IFCC法）【预期用途】该试剂盒采用IFCC法，用于体外定量测定人血清中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）的活力。

【检验原理】在AST催化下，从天门冬氨酸转移氨基到α-酮戊二酸，生成产物L-谷氨酸和草酰乙酸。

草酰乙酸通过苹果酸脱氢酶催化下生成苹果酸，在340nm波长条件下测定到NADH吸光度的变化率，与AST的活力成比例。

L—天门冬氨酸+α-酮戊二酸草酰乙酸+ L-谷氨酸O草酰乙酸+NADH+H+L-苹果酸+NAD++H【主要组成成份】R1：Tris缓冲液100mmol/LL-天门冬氨酸300 mmol/L苹果酸脱氢酶（MDH）≥600U/L乳酸脱氢酶≥900U/LNADH 0.4mmol/LR2：α-酮戊二酸60mmol/LNADH 0.9mmol/L*不同批号试剂盒各组分请勿混用。

【储存条件与有效期】未开启的试剂盒在2℃~8℃保存有效期为一年。

试剂开瓶后应避光保存，在2℃~8℃可稳定28天。

试剂不可冰冻。

【适用仪器】迈瑞BS系列全自动生化分析仪、日立7180型全自动生化分析仪、日立7060型全自动生化分析仪、日立7600P自动生化分析仪、奥林巴斯AU400型全自动生化分析仪、奥林巴斯AU2700型全自动生化分析仪、贝克曼库尔特AU680型全自动生化分析仪。

若需自动生化分析仪应用参数，请随时和公司联系。

建议用户在不同仪器上使用本产品时，根据实验室情况进行验证。

【样本要求】新鲜血清，采集后及时测定，应避免污染和溶血。

样本3天内的活性损失：（2℃~8℃保存）<8%；（15℃~25℃保存）<10%。

【检验方法】试剂准备R1：即用液体试剂R2：即用液体试剂测定条件波长340nm温度37℃分析类型动力学法反应方向下降反应操作步骤* ΔA/min=ΔA/min样本管—ΔA/min空白管* 试剂和样本量可根据不同生化分析仪要求按比例适当增减。

天门冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒（天门冬氨酸底物法）适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中天门冬氨酸氨基转移酶的活性。

1.1产品规格试剂1:3×80ml，试剂2:3×20ml；试剂1:4×60ml，试剂2:4×15ml；试剂1:6×40ml，试剂2:3×20ml；试剂1:2×80ml，试剂2:2×20ml 1.2产品组成成分试剂1：L- 天门冬氨酸200mmol/L，LDH 1200U/L，MDH 800U/L。

试剂2：NADH 0.18mmol/L，α-酮戊二酸12mmol/L。

2.1 外观试剂1为无色透明溶液；试剂2为无色或略带黄色透明溶液。

2.2 装量液体试剂的净含量应不少于标示值。

2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度A≥1.0(光经1.0cm，波长340nm)。

2.3.2 试剂空白吸光度变化率△A/5min≤0.01。

2.4分析灵敏度测定92.9U/L被测物，吸光度变化率在0.0225/min～0.0325/min范围内。

2.5 准确度相对偏差在±10%范围内。

2.6 精密度2.6.1 重复性变异系数CV≤5.0%。

2.6.2 批间差批间相对极差≤6.0%。

2.7 线性区间a）线性区间为（0，600]U/L（37℃）。

在规定的线性区间内，测定值与样本浓度值的相关系数（r）应≥0.990。

b（0，80]U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±8U/L；（80，600]U/L 区间内，线性相对偏差应不超过±10%。

2.8稳定性原包装试剂2～8℃避光保存，有效期12个月，有效期满后两个月内测定结果应符合2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

小鼠天门冬氨酸氨基转移酶（AST）试剂盒使用方法检测范围：96T2U/L - 55U/L使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平。

用纯化的小鼠天门冬氨酸氨基转移酶（AST）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入天门冬氨酸氨基转移酶（AST），再与HRP标记的天门冬氨酸氨基转移酶（AST）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的天门冬氨酸氨基转移酶（AST）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠天门冬氨酸氨基转移酶（AST）浓度。

试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品（96 U/L）0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

48U/L 5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液32U/L 4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液16U/L 3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液8U/L 2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液4U/L 1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

血清天门冬氨酸氨基转移酶速率法测定1.实验原理Vitros AST试剂是一种干燥，多涂层的，在聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。

将一滴患者样品滴于干片上，样品就被分布层均匀地分布并渗透到下面的试剂层。

在磷酸吡哆醛的催化作用下，谷草转氨酶使天门冬氨酸的氨基向α-酮戊二酸转移生成谷氨酸和草酰乙酸，草酰乙酸在草酰乙酸脱羟酶的作用下生成丙酮酸和二氧化碳。

随后丙酮酸被丙酮酸氧化酶氧化生成乙酰磷酸酶和过氧化氢。

最后是过氧化氢与白色染剂在过氧化物酶的催化下生成一种有色染剂。

在37℃用反射仪可以测定白色染剂的氧化率，然后再将某一线性范围内反射强度变化率转化为以U/L为单位的酶活性度。

干片支撑层上的短波滤光剂可以减少入射光在有色染剂形成过程中的影响。

测定方式：速率法波长：670nm测试时间和温度：37℃约５分钟反应过程：AST，磷酸吡哆醛天门冬氨酸 + α-酮戊二酸————————→草酰乙酸 +谷氨酸草酰乙酸脱羟酶草酰乙酸————————→丙酮酸+二氧化碳丙酮酸氧化酶丙酮酸+磷酸盐+O2————————→过氧化氢+乙酰磷酸酶过氧化物酶过氧化氢+白色染剂————————→有色染剂2. 标本：2.1 病人准备：无特殊。

2.2 样品类型：血清；肝素锂/钠抗凝血浆。

2.3 标本采集与处理：样品采集后3天内以1000g最少离心10分钟，然后吸出血清。

特别要注意：样品不能含细胞物质，因为血小板中AST活性也很高，既使离心不足10分钟的新鲜血浆与新鲜血清的测试结果相比都有很大差异。

处理样品时要将其当成生物污染品。

3. 标本的存放：血清、血浆室温下最多3天；4～8℃冷藏最多1周；样品冷冻保存可达3个月。

4. 标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。

5. 标本拒收的标准：由于用草酸钾/氟化钠，枸掾酸和EDTA抗凝的标本结果负偏差>50%，因此不能使用。

此外，因为红细胞中AST活性很高，溶血标本也不能使用。

6. 试验材料：6.1 测试AST所需的物品包括：Vitros化学定标物Kit3；Vitros特制质控液；Vitros 7%BSA 稀释液。

小鼠天门冬氨酸氨基转移酶（AST）试剂盒使用方法检测范围：96T2U/L - 55U/L使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平。

用纯化的小鼠天门冬氨酸氨基转移酶（AST）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入天门冬氨酸氨基转移酶（AST），再与HRP标记的天门冬氨酸氨基转移酶（AST）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的天门冬氨酸氨基转移酶（AST）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠天门冬氨酸氨基转移酶（AST）浓度。

试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品（96 U/L）0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

48U/L 5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液32U/L 4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液16U/L 3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液8U/L 2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液4U/L 1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

天门冬氨酸氨基转移酶测定标准操作规程1.检验原理：（IFCC法）L-天冬氨酸和α-酮戊二酸在AST的作用下生成草酰乙酸和L-谷氨酸。

草酰乙酸在苹果酸脱氢酶作用下生成L-革果酸，同时还原型辅酶【（NADH）被氧化为氧化型辅酶I（NAZr）,在340nm处测得吸光度呈下降趋势与AST活性成正比。

根据NADH吸光度下降程度计算AST的活力单位。

试剂内不含磷酸弼哆醛。

1.-天冬氨酸+α-酮戊二酸谷氨酸+草酰乙酸草酰乙酸+NADH+/T迎＞L-苹果酸+Λ¼O'2.试剂主要组成成分时,-20°C保存7天，样本不可反复冻融！4.检验方法；仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：6.检验结果的解释：6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W∕V）的氯化钠溶液稀释样本。

6.2.单位换算：ukat∕L=U∕L*16.67×10^37.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。

7.2若试剂浑浊，或以水空白在34Onm处吸光度小于LoOO时不能使用。

7.3检验结果仅供参考，不作为临床诊断唯一依据。

8.试剂性能指标8.1试剂外观：无色透明液体，无悬浮物及沉淀。

8.2装量：不低于标识值。

8.3试剂空白8.3.1试剂空白吸光度：在34Onm处，光径ICm时，空白吸光度A2L0008.3.2试剂空白吸光度变化率:在34Onm处，光径ICm时，ΔA∕min≤0.0049.4线性区间:试剂的线性区间为[10-500]U∕L,在此线性区间内:a）线性相关系数r应不小于0.9900；b）[10-50]U∕L区间内，线性绝对偏差不超过±5U∕L;（50-500）U/L区间内，线性相对偏差不超过±10机8.5准确度：相对偏差应不大于±15%。

8.6分析灵敏度：在340nm处，光径Icm时，测量W/L的天门冬氨酸氨基转移酶时，吸光度变化4AU∕L∕min22Xl（Γ48.7精密度8.7.1批内精密度：CV≤5%8.7.2批间精密度：R≤10%9.临床意义：天门冬氨酸氨基转移酶（AST）亦称谷草转氨酶（GOT）属于转氨酶类，它能够通过氨基转移催化氨基与酮酸之间的相互转换。

线粒体天门冬氨酸氨基转移酶(m-AST)校准品
适用范围：与北京利德曼生化股份有限公司的线粒体天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒配套使用，用于检测系统的校准。

1.1 规格
1×1mL；1×3mL。

1.2 主要组成成分
单水平液体校准品：含线粒体天门冬氨酸氨基转移酶的Tris缓冲液（20mmol/L，pH=7.50/25.0℃）（水基质），叠氮钠<0.1%。

靶值浓度范围：（60-100）U/L，靶值批特异性，校准品靶值见瓶签。

2.1外观
无色至浅黄色澄清液体。

2.2装量
不得低于标示体积。

2.3准确度
与选定试剂盒进行比对试验，样本浓度在［1-400]U/L范围内，相关系数（r）≥0.975。

样本测定结果在（100-400]U/L范围内的相对偏差应在±10%范围内；样本测定结果为［1-100]U/L时绝对偏差应在±10U/L范围内。

2.4重复性
批内重复性CV＜8%。

2.5 溯源性
根据GB/T 21415及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容，该校准品溯源至企业参考测量程序。

2.6稳定性
2.6.1效期稳定性
校准品在（2～8）℃条件下保存有效期为12个月。

在效期满后进行检测,结果应符合2.1、2.3、2.4的要求。

2.6.2 开瓶稳定性
校准品开瓶后，在（2～8）℃密封避光保存，可以稳定14天，在第15天进行检测，相对偏差应在±10%范围内。

小鼠天门冬氨酸氨基转移酶AST试剂盒使用方法小鼠天门冬氨酸氨基转移酶（AST）试剂盒是一种用于测量小鼠体内AST活性的实验试剂盒。

AST是一种重要的酶，存在于多种组织和器官中，尤其是心肌、肝脏、肌肉和肾脏。

AST活性的测量可以用于评估这些组织和器官的功能及其受损程度。

下面是小鼠AST试剂盒的使用方法：材料：1.小鼠AST试剂盒2.取自小鼠尾静脉的血液样本3.显微孔板4.吸光度计5.定量移液器和相应的移液管尖头6.离心机7.试剂盒中的稀释缓冲液（DB）8.试剂盒中的显色缓冲液（BC）9.试剂盒中的辅助酶液（AK）试剂准备：1.将试剂盒中的稀释缓冲液（DB）和显色缓冲液（BC）平衡至室温。

2.检查试剂盒中的辅助酶液（AK）的透明度和颜色是否符合要求。

样本制备：1.采集小鼠的血液样本，将其加入离心管中。

2.在3000g的离心机中离心血液样本10分钟，以分离血浆。

3.用定量移液器将血浆移至新的离心管中。

酶活性测定：1.取出所需数量的试剂盒，并在显微孔板上设置标准曲线和样本孔。

2.标准曲线的制备：用试剂盒中的辅助酶液（AK）配制不同浓度的AST标准品，通常为0、10、20、40、80和160U/L。

分别用稀释缓冲液（DB）稀释AST标准品至不同浓度，并加入到标准孔中。

每个浓度的标准曲线孔各加入100μL。

3.样本孔的制备：将150μL的稀释缓冲液（DB）加入到样本孔中。

4.各样本离心管中的血浆样本离心6000g10分钟，以去除任何可能存在的沉淀。

5.将从离心管中分离的血浆样本（100μL）加入到样本孔中。

6.向标准孔和样本孔中分别加入100μL的显色缓冲液（BC）。

7. 以灵敏度为450 nm的吸光度计读取孔的吸光度值，并记录下来。

结果计算：1.建立标准曲线后，使用曲线上的吸光度值和相应的AST标准品浓度进行直线插值计算出样品中AST的活性。

2.根据样品的吸光度值计算出AST活性（U/L）。

注意事项：1.所有试剂和样本应在室温下使用，并在适当的温度下保存。