§4.5毛细管电泳

扬子石油化工　２００６．２１（１）　分析测试　

毛细管电泳仪法同时测定ＰＴＡ中的　４一ＯＢＡ与Ｐ—ＴＯＬ　

徐　芸　（扬子石油化工股份有限公司质检中心）　

摘耍：根据精对苯二甲酸质量指标的要求结合毛细管电泳仪的发展进程和基本工作原理，提出了用毛细管电泳仪同　时测定样品中４一羧基苯甲醛（４一ｃＢＡ）和对甲基苯甲酸（Ｐ—ＴＯＬ）的方法。在设定的不同试验条件下测出标准溶液的　峰面积，求出了回归方程与相关系数，得出毛细管电泳仪同时分析２种物质的精密度与准确度　并根据试验结果讨论了　温度、分离电压、毛细管长度等对分析的影响，通过回收率试验，验证了用毛细管电泳仪同时测定样品中４一ＣＢＡ和Ｐ—　ＴＯＬ的可靠性。　关键词：毛细管　电泳法４一羧基苯甲醛对甲基苯甲酸　测定　扬子石油化工股份有限公司采用阿莫柯法　（即高温液相空气氧化法）生产精对苯二甲酸　（ＰＴＡ），在对二甲苯（ＰＸ）生成对苯二甲酸（ＴＡ）　的同时，还产生了一部分副产品，有４一羧基苯　甲醛、问苯二甲酸、邻苯二甲酸、苯甲酸、偏苯三　甲酸、均苯三甲酸等，它们对后续的聚酯生产有　着不良的影响。为了减少高浓度废水的排放量，　及时掌握工艺配比，优化反应条件，进一步提高　产品转化率，提高经济效益，就必须对原料到产　品反应过程中的４一ＣＢＡ，Ｐ—ＴＯＩ　等含量进　行测定。　此前。实验室对ＰＴＡ中的４一ＣＢＡ含量测　定采用过极谱法、液相色谱法。极谱法采用试剂　为汞，操作过程中汞时常会发生泄漏，长期使用　会对人体、环境产生危害，并且极谱法只能测出　ＰＴＡ中的４一ＣＢＡ含量。不能同时测出Ｐ—　Ｔ０Ｌ的含量。而液相色谱法中的色谱柱容易被　污染，而且污染后难于清洗，使柱的使用寿命缩　短，流动相与淋洗液中含有乙腈等有机化合物对　人体有害。且做样时间长，不适合中控分析连续　快速的要求。　实验室自引入毛细管电泳仪后，经过大量的　试验发现，它具有高效（正常理论塔板数在　５０　０００以上）、快速（分析时间一般为１Ｏ几　ｍｉｎ）、进样体积小、溶剂消耗少和抗污染能力　强等特点。高效毛细管电泳法（Ｈｉｇｈ　Ｐｅｒｆｏｒｍ—　ａｎｔｅ　Ｃａｐｉｌｌａｒｙ　Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，ＨＰＣＥ）是以弹　性石英毛细管为分离通道，以高压直流电场为　推动力，依据样品中各组分之间淌度和分配行　为上的差异而实现分离的电泳分离分析方法。　使用毛细管电泳仪测定化工样品时，较极谱法　与液相色谱法更为环保、简便，极大地减轻了　操作人员的工作负荷。　１　试验部分　１．１　主要仪器和试剂　仪器：毛细管电泳仪（美国ＷＡＴＥＲＳ公　司）；毛细管（河北永年光导纤维厂７５　ｆｆｍＸ　６０　ｃｍ熔融石英毛细管）。　试剂：氨水（分析纯）；正己烷磺酸钠（分析　纯）；ＯＦＭ试剂（ＷＡＴＥＲＳ公司供）；精对苯二　甲酸样品（扬子石油化工股份有限公司化工厂，　其中４－－ＣＢＡ含量１７．５０　ｆｆｇ／ｇ，Ｐ—ＴＯＬ含量　１２０．０　ｆｉｇ／ｇ）。　１．２毛细管电泳仪操作条件　分离电压为２０．０　ｋＶ；进样时间为３０　Ｓ；柱　箱温度为３０．０℃；进样方式为重力法；检测波长　为２５４　ｎｍ；量程选择为０．２；时间常数为０．１。　

Academic Forum /学术论坛毛细管电泳法检测饮料及雪糕中的 五种色素♦山西省纤维质量监测中心云凯摘要：建立了毛细管电泳法同时测定饮料和雪糕中亮蓝、曰落黄、新胭脂红、苋菜红、柠檬黄5 种色素含量的分析方法。研究了波长、电压、缓冲溶液浓度配比、pH值等条件对分离效果的影响。 结果表明：在波长 250 nm,电压 25kV,pH=11.5, 10mmol/LNa2B4O7-5mmol/LNaH2PO^i_冲溶液中， 以上5种色素得到较好分离。该实验方法的线性范围为5~1000 (xg/mL, R2> 0.9926，最小检出限为 1.0~8.2|xg/mL，平均回收率在94.40%〜101.37%之间。此方法操作简便、灵敏准确、分离效果良好， 在饮料及雪糕中色素的检测上取得了较为满意的结果。关键词：饮料雪糕食用合成色素高效毛细管电泳紫外检测器1弓丨言1.1毛细管电泳简介毛细管电泳是一种兴起于20世纪80年代的新型 液相微分离技术，也被叫作毛细管电分离法或高效毛 细管电泳。毛细管电泳与分析化学中广泛应用的气相 色谱法和高效液相色谱法相比，具有分离效率高、分 离速度快、分离模式众多、微量、分析样品范围广泛、 经济、自动、环保等较为显著的优点，被认为是目前 分析化学中最有发展前景的分析分离方法之一。1.2毛细管电泳的基本原理毛细管电泳是指在毛细管通道里，样品中具有不 同电泳迁移率以及分配系数的粒子受直流高压电场的 驱动而被分离开来的一种新型液相微分离技术。在毛 细管电泳中，带电粒子所受的驱动力有两种：电泳力和电渗力。电泳是溶液中的带电粒子在电场中定向移 动的现象。电泳迁移率即电泳淌度，受离子所带有效 电荷、电场强度、缓冲溶液的动力学黏度、离子的有 效半径等因素的影响。电渗是指在电场的作用下，溶 液表面积累的正电荷向负极移动，受溶剂化作用的影 响，使得毛细管中的溶液随之一起向阴极迁移，形成 电渗流。在毛细管电泳中，荷电离子实际迁移速率可表示 为：▽_=乂(；13+乂6。队。>乂_。由此可知，对正离子而 言，其移动与电渗流同向，有vapp=vep+ve。，将会首先 流出；中性粒子不发生电泳移动，有vapp=ve。，将在正 离子之后流出；负离子的迁移方向和电渗流相反，有 vapp=ve。-vep，而由于一般情况下都有veci>vep，故负 离子会在中性粒子之后流出。可见，不同的带电微粒

Journal of Pharmaceutical 药物分析杂志

Chinese·718· 药物分析杂志Chin J Pharm Anal 2017,37(4) 生物检定全柱成像毛细管等电聚焦电泳法测定4种生物制品等电点周朝明，张高峡（上海博唯生物科技有限公司，上海201321）摘要　目的：采用全柱成像毛细管等电聚焦电泳法（WCID-CIEF），测定多肽样品、胰岛素、融合蛋白疫苗和HPV病毒样颗粒的等电点。方法：采用50 mm×100 μm石英涂层毛细管。聚焦方法设置：1.5 kV聚焦1 min，3 kV聚焦4 min/8 min；检测波长：280 nm。结果：多肽样品、激素样品胰岛素和融合蛋白疫苗的等电点分别为10.98、5.87和5.86；病毒样颗粒样品HPV 31L1、HPV 33L1、HPV 45L1、HPV 52L1和HPV 58L1的实测等电点分别为8.17、7.86、7.77、7.91和7.69，并且实测等电点与理论等电点基本一致。全柱成像毛细管等电聚焦法测定生物制品专属性和精密度均符合验证要求。结论：该方法可用于生物制品的等电点分析。关键词：全柱成像毛细管等电聚焦；WCID-CIEF；等电点；多肽；激素；融合蛋白疫苗；病毒样颗粒；胰岛素；重组人乳头瘤病毒中图分类号：R 917 文献标识码：A 文章编号：0254-1793（2017）04-0718-06doi：10.16155/j.0254-1793.2017.04.25Determination of isoelectric point of 4 kinds of biological products by whole column imaging detection capillary isoelectric focusingZHOU Chao-ming，ZHANG Gao-xia（Shanghai Bovax Biotechnology Co.，Ltd，Shanghai 201321，China）Abstract　Objective：To determine the isoelectric points of polypeptide，insulin，fusion protein vaccine and HPV virus-like particle（VLPs）by whole column imaging detection-capillary isoelectric focusing（WCID-CIEF）．Methods：Cartridges of 50 mm×100 μm i．d．internally fluorocarbon-coated fused-silica capillary was used with the following settings：pre-focusing for 1 min under 1．5 kV，followed by focusing at 3 kV for 4 min or 8 min；detection wavelength：280 nm．Results：The isoelectric points（pI）of the polypeptide，the hormone sample（insulin）and the fusion protein vaccine were 10．98，5．87 and 5．86，respectively．The five virus-like particles displayed pI values of 8．17（HPV 31L1），7．86（HPV 33L1），7．77（HPV 45L1），7．91（HPV 52L1）and 7．69（HPV 58L1）．The obtained pI values were substantially consistent with the theoretical pI values．The specificity and precision of WCID-CIEF were validated．Conclusion：The method can be used for determing the isoelectric point of biological products．Keywords：whole column imaging detection-capillary isoelectric focusing；WCID-CIEF；isoelectric point；polypeptide；hormone；fusion protein vaccine；virus-like particles；insulin；recombinant human papillomavirus * 第一作者　Tel：（021）68036087；E-mail：zhouchaoming@药物分析杂志

第２１卷第１期　２ｏｏ８－（）１　聚酯工业　Ｐｏｌｙｅｓｔｅｒ　Ｉｎｄｕｓｔｒｙ　Ｖｏ１．２１　Ｎｏ．１　Ｊａｎ．２００８　

毛细管电泳法测定ＰＴＡ中４一ＣＢＡ和Ｐ—ＴＯＬ　

含量不确定度评定　

薛月霞　，李德宏　

（１．江苏仪征化纤公司ＰＴＡ生产中心，江苏仪征２１１９００；江苏仪征化纤公司技术开发中心，江苏仪征２１１９００）　

摘要：对用毛细管电泳法测定ＰＴＡ中４－ＣＢＡ和ｐ－ＴＯＬ的不确定度进行了评定，结果说明，增加样品重复测定次数，增加标准　曲线校正点，可以达到减少不确定度的目的。　关键词：ＰＴＡ；４一羧基苯甲醛；对甲基苯甲酸；毛细管电泳法　中图分类号：ＴＱ２４５．１２　文献标识码：Ｂ一　文章编号：１００８￣２６１（２００８）０１－００１３－０３　

采用中国石油化工行业标准ＳＨ／Ｔ１６８７－２０００　《工业用精对苯二甲酸（ＰＴＡ）中对羧基苯甲醛（和　对甲基苯甲酸含量的测定高效毛细管电泳法（Ｈ　

ＰＣＥ）》　测定ｍ中对羧基苯甲醛（４．ＣＢＡ）和对　甲基苯甲酸（ｐ－ＴＯＬ）含量。将一定量的ＰＴＡ样品溶　解在稀氨水溶液中，溶解后的样品注入毛细管电泳　

仪的毛细管柱中。由于ＰＴＡ样品中的对二甲苯、４一　ＣＢＡ和ｐ－ＴＯＬ电迁移速度不同，因此在毛细管柱中　得到分离，且４一ＣＢＡ和ｐ－ＴＯＬ在２５４　ｎｍ处有较大　

的吸收，其峰面积与含量成正比，因此利用紫外监测　器进行检测，即可求得ＰＴＡ样品中４．ＣＢＡ和ｐ－ＴＯＬ　的含量。　

１测试过程　

称取１　ｇ（精确到０．０００１　ｇ）ＰＴＡ样品于５０　ｍＬ　烧杯中，加入３０　ｍＬ　Ｗ（ＮＨ　）＝５％的氨水并于磁力　

搅拌器上搅拌溶解，待样品完全溶解后，转移到５Ｏ　ｍＬ容量瓶中，用Ｗ（ＮＨ　）＝５％的氨水稀释到刻度　待测。　

分别取１　ｇ不含４一ＣＢＡ和Ｐ—ＴＯＬ的ＰＴＡ　４份于　４个５０　ｍＬ烧杯中，加入３０　ｍＬ　Ｗ（ＮＨ　）＝５％的氨　水于磁力搅拌器上搅拌溶解，待ＰＴＡ完全溶解后，