奥昔布宁渗透泵控释片在狗体内的单剂量和多剂量药代动力学与生物等

奥昔布宁渗透泵控释片在狗体内的单剂量和多剂量药代动力学与生物等效性研究丁雪鹰1，刘罡一2,余琛2，马建国3，张仰眉1，刘善奎1，高申1*（1.第二军医大学药学院药剂学教研室，上海200433；2.上海市徐汇区中心医院，上海200031；3.北京中惠药业有限公司，北京100085）摘要: 目的研究自制奥昔布宁渗透泵控释片与市售普通片以及进口控释片在狗体内的单剂量和多剂量的药代动力学与生物等效性。

方法利用液相-质谱检测血药浓度，采用随机、交叉实验设计对自制控释片、进口控释片和市售普通片进行对照研究。

结果单剂量给药后奥昔布宁自制控释片、进口控释片和市售普通片的峰浓度 (Cmax )、达峰时间 (tmax) 、血药浓度曲线下面积AUC分别为：1.77±0.51ng/ml、1.67±0.27 ng/ml和5.89±2.04ng/ml、10±2.14h、10.50±2.07 h 和0.84±0.23h、50.69±11.83ng⋅h/ml、48.63±6.33 ng⋅h/ml和22.74±7.06ng⋅h/ml。

多剂量给药后分别为：2.39±0.55ng/ml、2.07±0.41 ng/ml和 7.80±1.56ng/ml、6.12±1.55h、8.12±1.88 h和0.62±0.19h、44.92±10.63ng⋅h/ml、41.50±9.05 ng⋅h/ml和21.92±4.37ng⋅h/ml，达稳态时血药浓度波动系数DF分别为0.76±0.17、0.52±0.17和2.55±0.39。

结论经方差分析和双单侧t检验，自制片与进口片和普通片生物等效。

关键词: 奥昔布宁；渗透泵片；药代动力学；生物等效性；狗SYUDY ON THE PHARMACOKINETICS AND BIOEQUIV ALENCE OF OXYBUTYNIN IN 8 DOGS AFTER A SINGLE AND MULTIPLE ORAL ADMINISTRATION OFOSMOTIC PUMP TABLETSDING Xue-ying1,GAO Shen1,LIU Gang-yi2,YU Chen2,MA Jian-guo3,ZHANGYang-mei1,LIU Shan-kui1(1.Department of Pharmaceutics,School of Pharmacy,Second Military MedicalUniversity,Shanghai 200433,China;2.Xuhui Central Hospotial, Shanghai 200031,China;Zhonghui Pharmaceutical Limited Company,Beijing,100085,China)作者简介：丁雪鹰,女，博士, E-mail：dingxueying@*通讯作者：高申，男，教授，博士生导师Tel：（021）25070392，Fax：（021）65491664ABSTRACT:AIM To study the pharmacokinetics and bioequivalence of self-prepared osmotic pump tablets(OPT) 、imported OPT and immediate-release（IR）tablets of oxybutynin in dogs.METHODS LC-MS method was developed to detect the plasma drug concentration in 9 dogs. Two one-sided T-test and analysis of variance were performed to evaluate the bioequivalence of the formulations.RESULTS The pharmacokinetic parametersof self-prepared OPT 、imported OPT and IR were listed below:for single-dose study: C max were 1.77±0.51ng/ml、1.67±0.27 ng/ml and5.89±2.04ng/ml, t max were10±2.14h、10.50±2.07 h and 0.84±0.23h, AUC were 50.69±11.83ng⋅h/ml、48.63±6.33 ng⋅h/ml and 22.74±7.06ng⋅h/ml respectively; for multiple-dose study：C max were 2.39±0.55ng/ml、2.07±0.41 ng/ml and 7.80±1.56ng/ml, t max were 6.12±1.55h、8.12±1.88 h and 0.62±0.19h, AUC were 44.92±10.63ng⋅h/ml、41.50±9.05 ng⋅h/ml and 21.92±4.37ng⋅h/ml，DF were 0.76±0.17、0.52±0.17 and 2.55±0.39 respectively.CONCLUSIONS The results showed that two preparations were bioequivalent.KEY WORDS:oxybutynin; osmotic pump tablet; pharmacokinetics; bioequivalence; dog尿频和尿失禁是常见的老年病，约有5~15%的老年人患有不同程度的尿失禁。

盐酸奥昔布宁（Oxb）为中度抗胆碱能药物，是目前临床治疗膀胱过度活动症首选药物，对泌尿道平滑肌有很强的松弛作用，使病人的症状得到控制[1]，1999年6月在我国上市。

Oxb消除半衰期短（2~5h），普通片一天给药四次，不良反应有口干、少汗、视力模糊、心悸、嗜睡、头晕、恶心、呕吐等，很多患者因此中断治疗。

作者设计了一种一天一次的Oxb口服渗透泵控释片，能以零级速率释放药物，不受胃肠道pH、食物以及蠕动的影响，极大避免普通口服制剂引起的血药浓度波动较大的现象，增加治疗的顺应性，提高用药的安全性和有效性。

本文以美国Alza 公司生产的进口控释片和市售普通片为对照，研究了三种制剂在狗体内的单剂量和多剂量的药代动力学和生物等效性。

材料与方法仪器、药品与试剂 API3000质谱仪（美国应用生物系统有限公司），Angilen 1100系列高效液相色谱仪，LL—9901激光打孔机（北京来福来德科技发展有限公司），Oxb对照品(青岛制药股份有限公司，含量99.6%)，进口片（美国Alza公司，批号10/13/01，10mg/片），自制片（自制，批号：20020428，10mg/片），普通片（湘江药业股份有限公司，批号：011201，5mg/片），维拉帕米（上海九福药业有限公司，含量99.5％），乙腈、甲酸为德国Merck公司生产的色谱纯试剂，三醋酸甘油酯（上海恒信化学试剂有限公司）,聚氧乙烯(美国ACROS公司),羟丙基甲基纤维素(上海运宏化工有限公司)，氯化钠（上海试四赫维化工有限公司），硬脂酸镁（大连制药厂），醋酸纤维素（CA-398-10美国EASTMAN公司）。

试验对象成年、健康比格狗9条，体重9~11.0kg，雄性，由第二军医大学实验动物中心提供。

1Oxb渗透泵片的制备将处方中各组分分别过80目筛，置60℃烘干。

将Oxb、聚氧乙烯、羟丙基甲基纤维素、氯化钠、硬脂酸镁（组分1）和聚氧乙烯、羟丙基甲基纤维素、氯化钠、氧化铁、硬脂酸镁（组分2），分别混合均匀。

将组分1填充于冲模内，轻压一下，再将组分2填充于冲模内，压制成片芯。

三醋酸甘油酯、醋酸纤维素溶解于丙酮和异丙醇的混合溶剂中，得到包衣液。

将片芯置糖衣锅内，40℃加热15分钟，喷入包衣液包衣，包衣结束后将片子置60℃放置24小时，去除溶剂。

将包衣的片子在含药层打一小孔，孔径0.4mm。

2 血浆样品测定方法[2]2.1血浆样品预处理••••静脉血样置于3.0ml 塑料离心管中(加肝素抗凝)，2500r/min离心5min分离血浆。

取血浆50μl 置于1.5ml塑料离心管中，加入5μl内标液（含维拉帕米20ng/ml），旋涡混合10秒，加入100μl乙腈，旋涡混合30秒，高速离心，取上清液50μl，加入20μl水，旋涡混合10秒，取20μl进样分析。

2.2 色谱分离条件••••质谱条件：离子选择通道分别为：Oxb m/z 358.4→142.2、维拉帕米（内标）m/z 455.6→165.4；离子源温度：400℃，电压：4000V；液相条件：色谱柱：Aquasil C18 5μm 50×2.1mm ，流动相：乙腈-水-甲酸（40:60:0.02），流速0.2ml/min，室温（25±1℃）。

测得空白血浆、空白血浆添加标准品及实测血浆样品的典型谱图见图1。

ABC图1 oxb血浆样品色谱图A.空白血浆样品；B.空白血浆中加入oxb（1ng/ml）；C.给药后血浆样品色谱图（0.754ng/ml）Fig1 Chromatogram of oxb of plasma sampleA.blank plasma samples；B. plasma added oxb(1ng/ml)；C. plasma after administration of oxb（0.754ng/ml）以Oxb对照品与内标(维拉帕米)峰面积比(A s/Ai)对相应的浓度(C，ng/ml)进行线性回归，得血浆标准曲线方程为：As/Ai=0.106C-0.00483 (r= 0.9963，1/x2权重，n=5)，线性范围0.25~64.00ng/ml。

本法相对回收率99.41%，日间和日内相对标准差分别为2.58％和4.92%，最低检测浓度为0.25ng/ml（S/N=4:1）。

3试验设计受试狗随机分成三组，采用自身对照、交叉实验设计，每次试验间隔一周，试验前禁食12小时。