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蜂胶乳化前后抑菌性能研究

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福建农林大学本科毕业论文论文题目蜂胶乳化前后抑菌性能的研究学院：蜂学学院专业年级：中药资源与开发2011级学号：3115603005姓名：吴小华指导教师、职称：程林斌副研究员2015 年 4 月 11日目录摘要 (1)1 引言 (2)1.1 蜂胶 (2)1.2 蜂胶的功效 (2)1.3 蜂胶抗菌性能 (2)1.4 蜂胶的乳化及抑菌性能研究状况 (4)1.5 乳化剂op-10的相关性能介绍 (4)1.6 蜂胶抑菌性能开发遇到的问题 (4)2 材料 (4)2.1 原料与试剂 (4)2.2 仪器与设备 (5)3 蜂胶最佳乳化条件研究 (5)3.1 标准曲线的的绘制 (5)3.2蜂胶乳化工艺研究 (6)3.2.1 探寻蜂胶溶于聚乙二醇-400的最佳比例 (7)3.2.2 蜂胶聚乙二醇溶液中op-10含量对蜂胶乳化的影响 (7)3.2.3 探究乳化温度对蜂胶聚已二醇提取液的影响 (9)3.2.4 探究乳化时间对蜂胶聚已二醇提取液的影响 (10)3.2.5 探究震荡频率对乳化结果的影响 (11)3.2.6 蜂胶乳化最佳条件正交实验 (12)3.2.7 蜂胶乳化工艺研究结果与分析 (16)4 蜂胶乳化前后抑菌性能研究 (16)4.1 培养基和生理盐水等实验所需试剂的配制 (16)4.2 细菌活化及菌悬液配制 (16)4.3 含菌培养皿的制作 (17)4.4 抑菌实验--打孔法 (17)4.5 结果分析 (18)5 讨论 (19)6 参考文献 (19)7 鸣谢 (21)摘要：蜂胶，在2010年中国药典第一版里面是这样定义的：本品为意大利蜂 Apis mellifera L. 的干燥分泌物。

主要在夏季从蜂箱中收集，除去杂质。

蜂胶中含有多种治疗疾病的有效成分，经吴悦[1]等人的研究表明，蜂胶具有治疗心血管、糖尿病、皮肤病、胃肠疾病、抗癌、增强免疫、抗菌消炎等都有重要的功效。

然而蜂胶中的有效成分主要是脂溶性和醇溶性物质，这些物质在水中的溶解度非常小，不利于对蜂胶的再开发和利用；就目前来看，对于蜂胶有效成分的提取和功能试验性研究主要是通过对蜂胶进行乳化形成稳定的乳化液再对蜂胶进行研究开发。

本实验通过用乳化剂op-10对蜂胶进行乳化，寻找最佳乳化条件。

并通过最佳乳化条件下乳化的蜂胶抑菌性能与乳化前蜂胶的抑菌性能进行对比，探究乳化后蜂胶的抑菌性能是否和乳化前蜂胶的抑菌性能有明显差别，从而为蜂胶在抑菌方面的开发提供实验理论依据。

通过实验，结果表明乳化前后的蜂胶都有明显的抑菌作用，乳化后的蜂胶抑菌性能和乳化前的蜂胶抑菌性能来比相比，会显得差一些。

关键词：乳化剂op-10 蜂胶抑菌性能Abstract: Propolis, in Chinese Pharmacopoeia 2010 edition which is defined as the dried secretions for Italy bee Apis mellifera L. Mainly collected in the summer from the hive, the removal of impurities. The effective components of propolis contains a variety of treatment of diseases, the study shows that propolis has treatment of cardiovascular, diabetes, skin diseases, gastrointestinal diseases, cancer, immunity, anti-bacterial anti-inflammatory have important effects. However, the main effective components of propolis is fat soluble and alcohol soluble substances, these substances are very small solubility in water, is not conducive to the further development and utilization of propolis；At present, the experimental research on Extraction and effective components of propolis propolis is mainly through the emulsion formed stable emulsion for research and development of propolis.Propolis after emulsification, whether it has a significant effect on its antibacterial properties，This experiment through the emulsion of propolis with emulsifier OP-10, find the best emulsifying conditions, and by comparing the antibacterial properties of antibacterial properties of propolis and emulsion emulsified emulsion before under thecondition of propolis, propolis antibacterial properties of emulsion after the emulsion before and antibacterial properties of propolis have obvious difference，in order to provide theoretical basis for development of propolis in the inhibitory aspects. Through the experiment, results showed that theemulsion and propolis has obvious antibacterial activity of propolis,propolis antibacterial antibacterial properties after emulsificationproperties and emulsifying the ratio, is the differential of some.Key words:Emulsifier OP-10; Propolis; Antibacterial properties1 引言1.1 蜂胶蜂胶，在由意大利蜜蜂 (Apis mellifera L). 采集植物树脂和其唾液一起混合加工而成的干燥分泌物，因为产量稀少，功效显著，被誉为紫色黄金。

主要存在去于蜂巢表面和缝隙中，是蜂巢的主要保护物质，在蜂群中，蜂胶不仅可以填补蜂群空隙，修复巢脾、清洗巢房【2】，而且蜂胶具有的抗菌的作用为蜂巢创造了一个无菌的生活环境。

蜂胶含有多种化学物质，目前已经被鉴定的就有180多种，其中尤以黄酮类化合物、醛、醇、酯、醚、芳香类化合物居多；尽管蜂胶富含的多种化学物质，然后然而这些化学物质的含量受环境的影响很大，采集蜂胶的时间，气候和地区不同，都会影响蜂胶的化学物质含量不同，也正因为如此，蜂胶的化学成分标准很难得以建立【3】。

1.2 蜂胶的功效相比与其他药材，蜂胶中具有更多黄酮类化合物含量。

国内外研究表明，黄酮类化合物在活血化瘀，抗菌消炎，抗氧化、抗癌都有明显功效。

蜂胶中的芳香类化合物可以帮助促进调节人体形成代谢新陈代谢，使心情舒畅；蜂胶中含有多种维生素和矿物质，有助于人体新陈代谢[4]。

蜂胶中的酚类、甙类、萜烯类化合物有很好的抗氧化作用，可以有效的清除人体的自由基、保护细胞膜、调节细胞中的的（细胞中的什么东西啊？）组织功能【4】。

1.3 蜂胶的抗菌性能蜂胶的抗菌性能，自古就被人认识和使用，蜂巢就是一个验证，蜂箱中储存的花粉，蜂蜜不仅不易损坏，而且还可以保持新鲜。

从人类接触蜜蜂开始，就已经开始认识和使用蜂胶，。

利用蜂胶进行食物保全防腐，伤口的抗菌消炎等，都具有明显的效果。

特别是近年来，蜂胶在抗菌、抗癌和抗氧化性的作用得到越来越多人的重视，对蜂胶抑菌和的研究和有效成分开发也越来越多。

高建新[5]等人通过蜂胶的抑菌性能研究，发现了蜂胶具有选择性的抑制对人体无益的细菌比如金黄色葡萄球菌和大肠杆菌，而对于像酸牛奶中对人体有益的双歧杆菌乳酸菌并无影响。

这种来自蜂胶的部分选择性抑菌效果对于人类来说，将会使蜂胶更加有利人类的使用。

蜂胶在抑制细菌生长上面方面有着显著的作用、细菌无处不在，抗菌是人类面对的永恒话题。

黄文诚[4]等人通过对蜂胶提取物蜂胶中的抗菌和抗肿瘤成分--阿替匹林的研究发现阿替匹林在蜂胶的抗微生物和抗发炎活性方面起主导作用，可以抑制很多癌细胞的生长，具有很强的抗肿瘤作用。

从亚历山大·弗莱明 AlexanderFleming 发现青霉素以来，更高效率的抗菌药得到空前的发展和提升，也正是因为青霉素的出现，数以百万的患难着的性命得以保全。

抗细菌药除了现在医学上常见的青霉素，四环素等抗生素外还包括其他真菌药和黄胺类。

然后这些药物副作用强，对于我们的神经系统，造血系统和肝肾都有很大的破坏作用。

而且，有很大一部分人对于青霉素等相关的抗生素有较为严重的过敏反应，导致他们在和细菌的斗争中遭受着常人难以想象的痛苦。

对于青霉素等抗菌药物严重的可能会让人死亡或者瘫痪。

寻找一种高效副作用小的抗生素显得尤为重要[5]。

1.4 蜂胶的乳化及抑菌性能研究状况乞永艳[6]等人通过对乳化剂对蜂胶抑菌作用的影响，通过用RH40、吐温80作为乳化剂得出蜂胶浓度低于5%时均无抑菌圈出现，当蜂胶浓度为10%时其抑菌效果才与未乳化的0.1%～0.5%蜂胶液抑菌作用相当。

这表明蜂胶乳化后其抑菌作用降低近100倍。

实验选用的是样芽孢杆菌作为研究。

刘颖[7]等人通过587例手外伤感染患者伤口致病菌分布及对抗生素敏感性分析得出了感染伤口的主要细菌分布中，大肠埃希氏菌金黄色葡萄球菌是外伤感染的主要病原菌，主要的细菌包括金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠～（这是什么东西啊？）对于在伤口的临床抑菌治疗研究提供了强有力的依据。

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蜂胶的微乳化及抗菌性能研究

蜂胶的微乳化及抗菌性能研究


ＯＹＵＵ 显微镜，Ｏｙｕｕ ＣＡＴ． ＬＭＰＳ ｌｍｐｓ Ｄ ｏ ２３４实验方法 ．．
蜂胶 的微 乳化及抗菌性能研 究
２３４１菌悬液的制备 ．．．
将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、 大肠埃希氏菌、枯草芽抱杆菌用营养琼脂培养； 啤酒酵母、黑曲霉分别用 Ｙ Ｐ Ｅ Ｄ培养基、察氏培养
基混合， 倒入已灭菌的培养基中，每平皿合计培养基２ｍ 。每一不同浓度反复操作两次，并做两个 ０］
纯培养基对照平板。 （ ）按照纯蜂胶与培养基的比分别为４ ２ １ ０ ％， ５ ２ ％， ％， ％， ． ０ ％浓度，将蜂胶微乳液和培养 ５ ． ２
基混合，倒入己 灭菌的培养基中， 每平皿合计培养基 ２ｍ 。 ０ ｌ 每一不同浓度反复操作两次， 并做两个 纯培养基对照平板。
的吐温８ 无菌去离子水溶液５ｍ 和 １ ｇ 的十二烷基硫酸钠无菌去离子水溶液５ｍ 混合均匀得到 ０ ０ｌ ０ ／ ０１ ０１ 表面活性剂的水溶液，然后在高速搅拌的条件下 将蜂胶乙醇溶液加入到上述含表面活性剂的 水溶液 中， 得到稳定的５ ％ ｐ 蜂胶微乳液， 没有粘性物质生成。 取样用动态激光散射粒度分布测试仪器测试微
（ ）待培养基凝固后，在每个平板中倒入 ０ 试菌相适宜的温度下倒置培养：细菌３｀， ； ７ ２ｈ Ｃ ４ 酵母菌、霉菌２０， 。 ８ ４ｈ 观察结果。 Ｃ ８
３ ．结果与分析
３１ ． 实验结果 表 １蜂胶乙醇液及蜂胶微乳液的最小抑制浓度 Ｃ ％） ＭＩ （
性能， 初步证实蜂胶微乳液对细菌的抑菌效果比蜂胶乙醇液更好， 而对酵母菌、 霉菌的抑菌效果效
果相同，与刘富海等的研究结果 （神奇蜂胶疗法：世纪健康话题》刘富海主编，中国农业出版社， 《
蜂胶的抗氧化及抑菌作用

蜂胶的抗氧化及抑菌作用

蜂胶抗氧化和抑菌作用的研究进展蜂胶(Propolis) 是蜜蜂从植物花苞及树干上采集的树胶，并混入颚腺分泌物和蜂蜡等物质加工而成的一种具有芳香气味的胶状固体物质，是防护病原微生物、修补巢房和内环境消毒杀菌的高效清洁剂[1-3]。

蜂胶素有“自然界中的紫色黄金” 之称，是一种对健康有很大作用的天然营养品。

大量研究表明：蜂胶中起药理作用的主要有效成分是黄酮类化合物，其具有增强免疫功能、抗菌消炎、排除毒素、增强免疫、软化血管、净化血液、改善微循环、抗氧化、抗病毒、抗癌作用，此外，还能调节大鼠的血糖水平，调节体内蛋白质代谢，对肾脏有保护作用，促进组织再生等广泛的生物学作用。

我国已有将蜂胶作为主要原料的准字号药品，2005 版《中国药典》第一部已经收录蜂胶。

随着蜂胶的多种神奇医疗作用逐渐揭示，国际蜂胶消费量迅速增长，国内外学者对蜂胶的功能研究日益深入，尤其在蜂胶的抗菌活性方面进行了广泛的研究。

经研究蜂胶提取物对革兰阳性菌的抑制效果较好。

而有关蜂胶抗氧化作用报道也较多，均表明蜂胶及所含黄酮类化合物对动物体内的多种自由基有显著的抑制或直接清除作用。

文章综合近几年蜂胶研究进展对蜂胶的抗氧化和抑菌作用综述如下。

1. 蜂胶的主要化学成分及其提取方法1.1 蜂胶的主要化学成分目前，已从蜂胶中分离鉴定出的化学成分有黄酮类、萜烯类、醌类、酯类、醇类、酚类、醚类、有机酸和大量的氨基酸、酶类、维生素B1、维生B2、维生素B6、维生素E和维生素 A 以及各种矿物质等。

蜂胶总酚含量很高，要高出蔬菜、水果、植物药材的几万倍至几百万倍。

蜂胶中的酚类化合物主要包括黄酮类化合物和酚酸类化合物以及它们的缩合体。

含有大量的黄酮类、萜烯类化合物是蜂胶的重要特征。

现已从蜂胶中分离鉴定的黄酮类化合物135 种，其中黄酮及黄酮醇类化合物46 种，二氢黄酮及二氢黄酮醇类36 种, 11 种异黄酮类化合物。

查耳酮和二氢查耳酮类17 种，以及最近几年从蜂胶中鉴定出的新黄酮类似物25 种。

长白山蜂胶的生物活性分析

长白山蜂胶的生物活性分析

长白山蜂胶的生物活性分析摘要：对长白山蜂胶的抗氧化、抗疲劳和抑菌能力进行了分析。

结果表明，该蜂胶清除羟基、dpph和超氧阴离子3种自由基的能力随其浓度的增大而增强；蜂胶可显著延长小鼠游泳、爬杆力竭时间，小鼠的肝糖原和肌糖原储备显著增加，血乳酸变化幅度很小；蜂胶对细菌的抑制作用明显强于真菌，对9种细菌的最小抑制浓度mic 为25～1 600 μg/ml。

长白山蜂胶具有较强的生物活性。

关键词：蜂胶；生物活性；抗氧化；抗疲劳；抑菌中图分类号：s896.6 文献标识码：a 文章编号：0439-8114（2013）02-0430-05蜂胶（propolis）是由蜜蜂采集植物树脂、叶芽及伤愈组织分泌物并混入蜂蜡、花粉等经咀嚼加工而成的一种黏稠物质，蜂胶中含有蜜蜂上颚腺、蜡腺等的分泌物，属于动植物双源性物质[1]。

北温带的蜂胶主要来源于杨树、桦树和针叶树等植物的树脂[2]。

蜂胶是蜜蜂用于维持整个群体健康的有效物质，是蜜蜂献给人类的一种最独特、最神奇的天然物质，被称为“紫色黄金”。

蜂胶是不透明的固体，表面光滑或粗糙，折断面呈沙粒状。

味微苦，略带辛辣味，嚼之粘牙，低于15 ℃时变硬、变脆，易粉碎；高于36 ℃时质软，有黏性和可塑性[3]。

蜂胶的化学成分复杂，目前已发现200多种组分，主要包括黄酮类、酚醛类、萜类、酯类和有机酸类等，另外还有多种维生素、氨基酸以及镁、镉、铁、锌、锶、钴等微量元素[4]，其中黄酮类化合物达70多种，是蜂胶质量的主要评价依据。

蜂胶味苦、辛，性寒，归脾、胃经。

内服补虚弱，化浊脂，止消渴；外用解毒消肿，收敛生肌。

近年来，大量研究发现蜂胶具有抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、抑制肿瘤以及双向调节血糖等重要的生理功效[5]。

近年来，随着生活水平提高，人们保健意识日益增强，具有营养和保健功能的蜂产品越来越受到青睐[6]。

本试验以长白山蜂胶为原料，通过抗氧化、抗疲劳、抑菌等能力的研究，对其生物活性进行了分析，以期为长白山蜂胶的开发与应用提供参考。

蜂胶有广谱的抗菌作用

蜂胶有广谱的抗菌作用

蜂胶有广谱的抗菌作用1．抗菌作用1967年，美国的林登佛尔塞（Lindenfelser）的研究证明，蜂胶对25种细菌有抑制作用。

1980年，中国的贺天笙等通过试验证明，蜂胶对14个菌种，包括肺炎双球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌…等，有抑制作用。

1994年，日本的松野哲也通过试验证明，蜂胶对16种菌，包括肺炎菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、鼠伤寒杆菌…等，有抑制作用。

1996年，中国的程文显等通过试验证明，蜂胶对于牙周疾病的致病菌，有明显的抑制作用（此后便研制出了蜂胶牙膏）。

2．抗癣菌作用1975年，中国的房柱等通过试验证明，蜂胶对至少10种癣菌有较强的抑菌作用。

同一期间，房柱等试用蜂胶治疗牛皮癣（银屑病）160例。

一般在服食蜂胶2—4个星期后才开始见效。

显著疗效大部分在服用蜂胶后两个月左右出现。

有效率70%。

病程短的疗效较好。

蜂胶能增强某些抗生素的作用蜂胶不仅能单独使用，对致病细菌、病毒、原虫等，有抑制或杀灭作用，而且还能和某些抗生素和青霉素（Penicilin）等合用，提高这些抗生素的抗菌力量及延长其抗菌活性。

蜂胶有抗炎镇痛的作用1．抗炎作用英国牛津大学的考尔德博士等进行的试验显示，蜂胶有抗炎作用，而且蜂胶的抗炎作用又比传统药物阿司匹林强。

（试验细节省略。

）1992年，日本峰下哲等进行的实验也证明，蜂胶有抗炎作用。

在实验中，把大鼠分为三组。

1组给口服阿司匹林，叫阿司匹林组，1组给口服蜂胶，叫蜂胶组。

1组不给吃任何药物，叫对照组。

服药后1小时，在各组大鼠后脚皮下注射化学物质，诱发炎症水肿，然后，每小时检测发炎肿胀的程度。

实验到了第7小时的时候，各组大鼠后脚的肿胀体积分别为：对照组0.60ml 阿司匹林0.48ml 蜂胶组0.46ml实验显示，蜂胶和阿司匹林都有相似的抗炎作用。

南京医学院的李子平教授等，用蜂胶片治疗42个胆固醇和甘油三脂都很高的病人。

结果证明，蜂胶片对甘油三脂偏高症有持续的、累进的、使之降到正常水平的作用。