芽管形成试验标准操作程序

1 主题内容及运用范围本规程规定了中药材发酵、发芽岗位的标准操作程序。

本规程适用于中药饮片生产过程中的中药材发酵、发芽工序。

2 引用标准《中华人民共和国药典》2010年版一部《山东省中药炮制规范》2002年版3 职责操作员：严格按标准操作规程操作。

质量员：确保整个生产过程符合工艺质量要求。

车间主任：负责全过程的监督管理。

4 操作标准4.1 发酵、发芽前准备4.1.1 发酵、发芽前须作好车间内外,设备、工具的清场检查工作，在有效期内的“已清洁”、“完好”状态标识。

4.1.2 穿洁净卫生统一的工作服,戴工作帽；4.1.3 准备好发酵、发芽工具,调试好发酵设备。

4.1.4 将“已清洁”标识取下换上填有相关内容的“生产状态标识”。

4.2 操作过程4.2.1 按生产指令接上工序转来的原料，按规定领取定量的辅料。

检查原料的品名、规格、批号、数量、质量、产地，并填写原料标示卡。

4.2.2 根据生产指令要求,分别采用发酵法（分制曲法和制豆豉法）、发芽法。

4.2.3.1 制曲法将原料磨成粗粉，混合均匀，加适量用清水煮辅料的煎煮液，陆续加入面粉中，用和面机搅拌揉搓成颗粒状，以手握成团、掷之即散时，置模内压成扁平方块，外用粗纸和鲜荷叶包严，于室内铺一层整棵青蒿，放一层曲块，层层相间堆放，每块间要留有空隙，用麻袋盖平，关闭门窗，保持室温度30～37℃，一般经6～7天即能发酵，待曲块表面生满黄衣时，取出，除去粗纸，切成小方块，干燥。

4.2.3.2 制豆豉法取辅料加水煎汤，取过滤液与原料拌匀，待过滤液被吸尽后，置蒸煮锅内蒸透，取出，放凉。

再置容器内，上面覆盖煎汤剩下的药渣，闷使发酵，待生黄衣时，取出，除去药渣，洗净。

再置容器内，闷15～20天，至充分发酵，香气溢出时，取出，略蒸，干燥。

4.2.3.3 发芽法取饱满的种子或颖果，用清水浸泡6～7成透时，捞出，置于能排出水的容器中，用湿物盖护，每日淋水2～3次，保持一定温度，在18～25℃温度下，约经3天即能发芽，待芽长0.5～1厘米时，取出，干燥。

芽管形成试验方法和结果
芽管形成试验是一种常见的细胞生物学试验方法，用于评估细胞的增殖和迁移能力。

该试验通过观察细胞在体外形成管状结构来评估其对血管新生的影响，是研究血管生成和肿瘤血管生成的重要方法之一。

一般来说，芽管形成试验需要一定的细胞和培养基。

首先，从培养皿中取出一定数量的细胞，然后将其悬浮在基质胶（如Matrigel）中。

接着，将混合物均匀涂在预先铺好的96孔板上，放入培养箱中孵育。

一段时间后，观察细胞在基质胶中的生长情况，如果形成了管状结构，则说明细胞具有较强的血管新生能力。

在实际操作中，芽管形成试验的结果需要通过显微镜来观察和计算。

一般来说，可以通过测量管状结构的长度、分支点数量和周长等指标来评估细胞的血管新生能力。

此外，还可以在试验前对细胞进行不同的处理，如添加药物或改变培养条件，来研究其对细胞生长和血管生成的影响。

总之，芽管形成试验是用于评估细胞血管新生能力的重要方法之一，可广泛应用于研究肿瘤血管生成、血管疾病等领域。

发酵管操作规程发酵管是一种用于进行微生物发酵的装置，它具有搅拌功能，能够提供适宜的氧气和营养物质供给微生物进行生长和代谢。

为了保证发酵过程的顺利进行和产品质量的稳定，我们需要制定一套发酵管操作规程。

通用规则1. 操作人员准备工作:a. 佩戴合适的个人防护设备，包括实验衣、手套、眼镜等。

b. 清洗双手，同时使用消毒液对手部进行消毒，并确保双手干燥。

2. 发酵管准备:a. 外部清洁：使用清洁剂对发酵管的外表面进行清洗，并用水冲洗干净，以去除各种细菌和污垢。

b. 内部清洁：使用适当的清洁剂或消毒剂对发酵管的内表面进行清洗，并按照要求进行冲洗或消毒。

c. 确保发酵管的密封性能，没有破损或漏气的情况。

3. 发酵管安装:a. 将发酵管放置在适当的固定架上，避免摇晃或倾斜。

b. 安装好发酵管的搅拌器，并确保其位置正确，与发酵管内部没有直接接触。

第二部分：发酵操作步骤1. 发酵培养基配制:a. 根据发酵所需菌种和菌种密度确定培养基的配方。

b. 准备好所需的原料和试剂，根据配方将其进行称量和混合。

c. 使用高温高压灭菌器对配制好的发酵基础培养基进行灭菌处理，确保培养基没有任何细菌污染。

2. 培养菌种:a. 选取活跃的菌种进行农化处理，快速培养并进行确认。

b. 预处理培养基，将培养基转移至接近菌液浓度的酒精洗涤瓶中。

c. 向发酵管中加入预处理培养基，保证组织工程的湿度。

d. 再得到已经发展完全的培养基，并移至菌种隔离所用的试管中。

e. 使用自动注射器将上述完成的菌种注入发酵管中。

3. 发酵管操作:a. 设置并调整好发酵管的温度、气体流量、搅拌速度等操作参数，确保发酵条件的稳定和适宜。

b. 启动发酵管的搅拌器，确保培养液均匀混合和氧气充分吸收。

c. 定期监测和调整温度、气体流量、搅拌速度等参数，以适应不同阶段的微生物生长需求。

d. 定期取样检测发酵液的生长特性、代谢产物等，以评估发酵的进展情况和产品质量。

e. 根据需要进行化学试剂的添加或调整，以提高发酵过程的效率和产物的质量。

芽管试验的操作方法芽管试验是一种常用的植物生理实验方法，旨在研究植物生长和发育过程中的影响因素。

下面将从实验前的准备工作、实验操作步骤和实验结果分析三个方面详细介绍芽管试验的操作方法。

1. 实验前的准备工作：1.1 材料准备：准备好需要进行试验的植物种子、芽管装置（通常由玻璃管和橡胶塞组成）、胶液（如琼脂）和生长基质（如琼土或温室土壤）。

根据实验的目的，还可以准备一些化学试剂。

1.2 实验条件：为了获得可靠的实验结果，需要控制试验的温度、光照、湿度和空气流通等因素。

一般情况下，实验室温度应保持在20-25，相对湿度要适宜（约60-70%），并且需要提供适当的光照强度（例如，在实验室中放置适当的光源）。

2. 实验操作步骤：2.1 准备植物种子：选择适合的植物种子，并进行消毒处理。

通常的做法是将种子放入含有适量消毒液（如稀释的次氯酸钠溶液）中浸泡一段时间，然后用纯净水冲洗干净。

2.2 准备芽管装置：将玻璃管和橡胶塞清洗干净，并消毒处理。

然后，用无菌棉芯将橡胶塞填塞紧密，以确保通气性。

2.3 装填胶液：将预先熔化的琼脂倒入芽管中，约充满2/3芽管容积。

等待琼脂凝固后，可在上面形成一层光滑的薄层凝胶。

2.4 装填基质：将适量的生长基质（如琼土或温室土壤）均匀地覆盖在凝固的琼脂上，厚度约1-2厘米。

保持基质表面水分适中。

2.5 植入种子：在基质上均匀撒布已经处理好的种子，注意保持适当的种植密度，以避免干扰植物的生长和发育。

2.6 实验条件的调节：将装有种子的芽管装置放置在恒温箱中或适当的环境中，并根据实验要求调节温度、光照和湿度等条件。

2.7 实验的观察与记录：定期观察芽管中种子的发芽情况、根生长和芽生长情况，并记录数据。

实验时间因实验目的而定，可以是几天到几周不等。

3. 实验结果的分析：3.1 发芽率：计算种子在芽管中的发芽率，即已经发芽的种子数目与总种子数目的比值。

发芽率可以作为评价种子活力的指标之一。

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芽管形成实验原理
芽管形成实验原理指的是利用植物幼胚的发育过程，通过体外培养的方法，观察芽管在培养基上的形成过程，以及芽管所在位置和形态特征的变化。

芽管形成实验原理主要可以归纳为以下几个方面：
1. 植物幼胚的获取：幼胚是植物胚胎发育的早期阶段，可通过从果实中取出种子或胚乳，然后进行处理与消毒得到。

2. 培养基的制备：培养基是模拟自然环境中植物生长所需要的营养和生长因子的介质。

通常使用的培养基分为基础培养基和辅助培养基，前者主要提供植物生长所需的宽谱营养物质，后者通过添加一定的激素或调节剂来促进或抑制芽管的发育。

3. 芽管的诱导：在培养基中放置已消毒处理的幼胚，然后提供适宜的光照、温度和湿度条件，保持营养盐浓度适宜，营养液PH值合理，以及添加适宜的植物生长激素，如赤霉素、脱落酸等。

在这些条件的促使下，幼胚会发生分化和增殖，从而形成芽管。

4. 观察和记录：在培养基上形成的芽管可以通过显微镜进行观察，可以记录芽管的数量、位置和形态特征等。

芽管形成实验的原理是基于植物细胞和组织的再生能力，以及外界环境因素对于细胞分化和增殖的调节作用。

通过培养基中添加适宜的激素或调节剂，可以模拟植物在自然环境中生长时所受到的内外因素的作用，从而促进或抑制幼胚的发育。

在实验中，可以根据不同的目的和要求，调节培养基的成分和激素的浓度，进而控制芽管的形成和数量，以及芽管的分化方向和形态特征等。

芽管形成实验的原理及方法，在植物繁殖学研究中具有重要的理论和应用价值。

通过对芽管形成的研究，可以更深入地了解植物发育的分子和细胞机制，同时也为农业生产、园艺和林业等领域的繁殖和改良工作提供了可靠的实验依据和技术手段。

SOP_15-23 芽管形成试验标准操作程序
【目的】
鉴定白色念珠菌。

【适用范围】
念珠菌。

【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。

【试剂】
血清
【方法】
1、玻片法：在载物玻片上加1滴血清，接种少量被检菌，盖上盖片，放于湿润平皿内，置35℃
孵箱中，每隔1h检查1次，共检查3～4次。

2、试管法：用无菌试管，加血清0.2ml，接种被检菌，混匀后置37℃水浴箱中，每隔1h，用
白金耳取出含菌血清，置于载玻片上进行镜检。

3毛细吸管法：含有0.5ml小牛血清的毛细吸管，沾取鉴定菌落部分，乳化混匀，该毛细管置于试管中，35℃孵育2～4h，取出1滴，置显微镜下检测。

【注意事项】
1、有许多材料皆可用于芽管试验，如鸡蛋白、小牛血清、兔血清、羊血清及血库中血清，但
在许多实验室始终认为小牛血清最好，它可以解除潜在的白色念珠菌的抗体、肝炎病毒和AIDS病毒问题。

2、值得注意的是，芽管和芽生孢子出芽，两者区别在于白色念珠菌产生芽管和芽生孢于连接
处，不出现收缩现象，称为箭状；而其他念珠菌产生起始菌丝体和母体芽生孢子连接处呈紧缩现象。

3、上述试验必须用白色念珠菌、热带念珠菌、光滑球拟酵母菌做质量控制。

试验孵育时间，
不超过4h，因为其他产生假菌丝的念珠菌在上述时间之后开始发芽，出现起始菌丝体。

【意义】
芽管试验是一种价值大又简单的快速推断性鉴定白色念珠菌方法。

一、实验目的1. 掌握芽接技术的原理和方法。

2. 熟悉芽接的操作步骤和注意事项。

3. 通过实验，提高学生对植物繁殖技术的实际操作能力。

二、实验原理芽接是植物繁殖的一种常用方法，通过将一个植物体的芽（接穗）与另一个植物体的枝条（砧木）接合，使接穗和砧木生长在一起，从而实现繁殖。

芽接技术具有操作简便、繁殖速度快、成活率高、成本低等优点。

三、实验材料1. 砧木：苹果、梨、桃等果树。

2. 接穗：与砧木同种或近缘的优良品种。

3. 工具：芽接刀、塑料薄膜、麻绳等。

四、实验步骤1. 准备接穗和砧木：选取生长健壮、无病虫害的果树作为砧木和接穗。

将砧木和接穗的枝条修剪至适当长度。

2. 切割接穗：用芽接刀在接穗的芽上方1-2厘米处切一斜面，斜面长度约2-3厘米，斜面角度约30°-45°。

3. 切割砧木：在砧木的适当位置（距离地面约30-40厘米）切一斜面，斜面长度与接穗斜面相同，角度也相同。

4. 插入接穗：将接穗斜面插入砧木斜面，使两者的形成层对齐。

5. 固定接穗：用塑料薄膜将接穗和砧木紧密包裹，然后用麻绳固定。

6. 恢复生长：将接穗和砧木固定在支架上，保持直立，避免倾斜或倒伏。

7. 观察与记录：定期观察接穗的生长情况，记录成活率、生长速度等数据。

五、实验结果与分析1. 成活率：经过一段时间的观察，芽接的成活率较高，达到了90%以上。

2. 生长速度：成活的接穗生长迅速，新叶和枝条逐渐增多，表明芽接技术能够有效地促进植物生长。

3. 影响因素：实验过程中发现，砧木和接穗的品种、生长状况、操作技术等因素都会影响芽接的成活率和生长速度。

六、实验结论1. 芽接技术是一种简单、有效的植物繁殖方法，具有操作简便、繁殖速度快、成活率高等优点。

2. 在芽接过程中，应注意砧木和接穗的品种、生长状况以及操作技术，以提高成活率和生长速度。

3. 本实验表明，芽接技术在果树繁殖中具有广泛的应用前景。

七、实验心得通过本次实验，我深刻认识到芽接技术在植物繁殖中的重要性。

芽管形成试验原理
芽管形成试验是一种常用的植物生长实验，通过观察和记录植
物芽管的形成过程，可以对植物的生长发育情况进行分析和研究。

芽管形成试验原理主要包括试验材料准备、试验条件设定、观察记
录和数据分析等几个方面。

首先，进行芽管形成试验需要准备好实验材料，通常选择一种
适合进行芽管形成观察的植物种子，比如小麦、玉米等。

然后，根
据试验的目的和要求，设置好试验条件，包括种子的处理方式、生
长环境的温度、湿度和光照等因素。

在实验进行过程中，需要严格
控制这些条件，以确保实验结果的准确性和可靠性。

观察记录是芽管形成试验中至关重要的环节，通过对种子发芽
和芽管生长的观察记录，可以及时了解植物的生长情况。

在观察过
程中，需要注意记录种子的发芽率、发芽时间、芽管的生长速度和
形态特征等参数。

这些记录将为后续的数据分析提供重要的依据。

数据分析是芽管形成试验的最后一步，通过对观察记录所得数
据的整理和分析，可以得出对植物生长发育情况的客观评价。

比如，可以计算出种子的平均发芽时间、平均芽管长度、芽管生长速率等
指标，从而对不同处理条件下植物生长的影响进行比较和分析。

总的来说，芽管形成试验是一种简单而有效的植物生长实验方法，通过对试验原理的了解和实践操作，可以更好地认识植物的生长发育规律，为农业生产和科学研究提供重要的参考依据。

希望本文所述内容能够对相关领域的研究者和实践者有所帮助。

第二十八章真菌检验本章内容真菌的基本特性真菌的基本微生物检验方法病原性真菌一、真菌的基本特性真菌是真核细胞型微生物，属于真菌界。

具有典型细胞核，有完整细胞器，不含叶绿素；寄生或腐生方式生存，由单细胞或多细胞组成；细胞壁含几丁质和（或）纤维素；能进行有性生殖和（或）无性生殖。

分类绝大多数对人类有益，如食用真菌及能产生抗生素的真菌等。

能引起人类和动物疾病的真菌仅150余种。

分为黏菌、真菌两个门。

其中与医学有关的真菌主要属于接合菌亚门、子囊菌亚门、担子菌亚门和半知菌亚门，鞭毛菌门中仅腐霉属在医学上有重要性。

绝大部分致病性真菌属于半知菌亚门。

结构基本结构为菌丝和孢子。

菌丝：真菌在适宜环境中，由孢子生出芽管逐渐延长或呈丝状，称为菌丝。

菌丝继续生长并向两侧分支，交织成团，称为丝状体。

营养菌丝：伸入到培养基内的菌丝。

气中菌丝：露出培养基表面的（部分气中菌丝可产生有性或无性孢子的称为生殖菌丝）。

孢子有性孢子：同一个菌体或不同菌体上的两个细胞融合形成。

无性孢子：菌丝直接生成，并不发生细胞融合。

致病性真菌多为无性孢子。

真菌孢子与细菌芽孢区别区别要点真菌孢子细菌芽孢形态大小大小产生数目一条菌丝可产生多个一个细菌只形成一个形成部位细胞内、外均可形成只在细胞内形成热耐受性不强，60～70℃短时死亡强，煮沸短时间内不会死亡生物功能重要的繁殖方式非繁殖方式真菌与细菌区别特征真菌细菌结构核真核细胞（有核仁和核膜）原核细胞（无核仁和核膜）细胞浆有线粒体和内质网无线粒体和内质网,有中介体细胞膜含固醇缺少固醇（除支原体）细胞壁几丁质或葡聚糖为主肽聚糖为主孢子或芽孢有性和无性孢子，是繁殖方式芽孢，是一种生存方式双相性有（某些真菌）无代谢需碳有机物；无专性厌氧菌某些不需要碳有机物；某些为专性厌氧培养与繁殖气体环境：需要较高的湿度和氧气。

温度酸碱：22～28℃，某些深部病原性真菌在37℃生长良好，pH 5.0～6.0。

培养特点：最常用沙保弱培养基，生长缓慢。

芽管形成试验方法和结果芽管形成试验（Germination tube formation assay）是一种研究植物种子发芽过程的实验方法。

这种实验通常用于评估种子的发芽能力、研究植物生长调节剂对种子发芽的影响以及探究发芽过程中的生理生化变化。

以下是芽管形成试验的方法和结果：实验方法：1. 预处理种子：将种子浸泡在水中或者生长调节剂溶液中进行预处理。

预处理的时间和浓度因种子和生长调节剂不同而有所改变。

2. 实验设置：将预处理过的种子分别放置在相应的实验组和对照组中。

实验组通常使用不同浓度的生长调节剂溶液，而对照组使用水或者无生长调节剂的培养基。

3. 培养环境：将实验组和对照组放置在适宜的温度、湿度和光照条件下进行培养。

这些条件需要根据所研究的物种来进行调整。

4. 观察记录：在培养过程中定期观察并记录种子的发芽情况，主要包括发芽率、发芽时间、芽管长度等指标。

5. 结果分析：对实验结果进行统计分析，比较不同处理之间的巠植物生长调节剂对种子发芽的影响以及探究发芽过程中的生理生化变化。

实验结果：1. 发芽率：实验结果会显示出不同处理下的发芽率，通常生长调节剂的浓度和种子发芽率之间会呈现出一定的规律。

例如，适当浓度的生长调节剂可以促进种子发芽，而过高或者过低的浓度可能会抑制种子发芽。

2. 发芽时间：实验结果还会反映出不同处理下种子的发芽时间，生长调节剂可能会影响种子的发芽速度。

例如，一些生长调节剂可以缩短种子的发芽时间，使其更快地发芽。

3. 芽管长度：实验结果还会展示出不同处理下芽管的生长长度。

这个指标可以帮助研究者了解生长调节剂对种子萌发阶段生长的具体影响。

4. 生理生化指标：通过分析实验结果，研究者还可以探究发芽过程中的生理生化变化，如酶活性、激素含量等。

这些指标有助于更深入地了解植物种子发芽过程中的调控机制。

综上所述，芽管形成试验是一种研究植物种子发芽过程的有效方法，实验结果有助于了解生长调节剂对种子发芽的影响以及发芽过程中的生理生化变化。