挥发酚分析原始记录

水质挥发酚的测定1.检测依据根据《中华人民共和国环境保护法》和《中华人民共和国水污染防治法》GB 7489—87 水质溶解氧的测定碘量法HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范2.方法测定原理（萃取分光光度法）用蒸馏法使挥发性酚类化合物蒸馏出，并与干扰物质和固定剂分离。

由于酚类化合物的挥发速度是随馏出液体积而变化，因此，馏出液体积必须与试样体积相等。

被蒸馏出的酚类化合物，于pH（10.0±0.2）介质中，在铁氰化钾存在下，与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料，用三氯甲烷萃取后，在460 nm波长下测定吸光度。

（直接分光光度法）用蒸馏法使挥发性酚类化合物蒸馏出，并与干扰物质和固定剂分离。

由于酚类化合物的挥发速度是随馏出液体积而变化，因此，馏出液体积必须与试样体积相等。

被蒸馏出的酚类化合物，于pH（10.0±0.2）介质中，在铁氰化钾存在下，与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料。

显色后，在30 min内，于510 nm 波长测定吸光度。

3.方法使用范围本标准规定了测定地表水、地下水、饮用水、工业废水和生活污水中挥发酚的4-氨基安替比林分光光度法。

各国普遍采用4-氨基安替比林分光光度法，国际标准化组织颁布的测酚方法亦如此。

地表水、地下水和饮用水宜用萃取分光光度法测定，检出限为0.000 3 mg/L，测定下限为0.001 mg/L，测定上限为0.04 mg/L。

工业废水和生活污水宜用直接分光光度法测定，检出限为0.01 mg/L，测定下限为0.04 mg/L，测定上限为2.50 mg/L。

（水样中挥发酚浓度低于0.5mg/L是采用4-氨基安替比林萃取光度法；浓度高于0.5mg/L时采用4-氨基安替比林直接光度法）。

对于质量浓度高于标准测定上限的样品，可适当稀释后进行测定。

4.公式（反应方程式）无5.该项目其他检测标准HJ502-2009水质挥发酚的测定溴化容量法6.方法的综述、各方法的优缺点本方法是对GB 7490-87的修订，扩大了标准的适用范围，明确了标准的适用对象；增加了萃取分光光度法比色皿的光程，降低了检出限；改进了4-氨基安替比林的提纯方法，增加了苯酚的精制方法；增加了质量保证和质量控制条款。

《水中挥发酚的测定》实验综述报告作者：陈海燕来源：《科技视界》2018年第20期【摘要】水中的挥发酚是中国水环境例行监测项目之一，监测方法有很多种，本文介绍了其中常用的4-氨基安替比林分光光度法和流动注射分光光度法，并简单概括了两种方法的影响因素。

以期为提高该项指标检测的准确度和精确度提供参考。

【关键词】挥发酚；4-氨基安替比林分光光度法；流动注射分光光度法中图分类号： X832 文献标识码： A 文章编号： 2095-2457（2018）20-0076-002DOI：10.19694/ki.issn2095-2457.2018.20.032【Abstract】The program of determining volatile phenolic compounds in water is one of routine monitoring projects of water environment in China.Recently 4-aminoantipyrine-spectrophotometric method and flow injection spectrophotometry method was used to determine volatile phenolic compounds in water. The factors affecting the determination were discussed in this paper. It provides some useful information for the further study in related field.【Key words】Volatile phenolic compounds； 4-aminoantipyrine-spectrophotometric method；Flow injection spectrophotometry0 前言酚类化合物是芳烃的含羟基衍生物，主要来源于焦化厂、煤气厂、石油精炼、木材干馏、石油化工等产生的工业废水，酚类属于高毒物质，是常见的水体污染物，对人体和水生生物有极大的危害[1]。

水质水中挥发酚类测定 4-氨基安替比林分光光度法HJ503-20091.目的通过4-氨基安替比林分光光度法测定水中挥发酚的浓度，分析方法检出限、回收率及精密度，判断本实验室的检测方法是否合格。

2.适用范围2.1.1本标准适用于地表水、饮用水、工业废水和生活污水中挥发酚的4-氨基安替比林分光光度法的测定。

1.2 检测方法是4-氨基安替比林分光光度法。

1.3 检测依据是GB/T5750.4-2006和HJ503-20093. 职责3.1 检测人员负责按操作规程操作，确保测量过程正常进行，消除各种可能影响试验结果的意外因素，掌握检出限、方法回收率与精密度的计算方法。

3.2 复核人员负责检查原始记录、检出限、方法回收率及精密度的计算方法。

3.3技术负责人负责审核检测结果及检出限、方法回收率、精密度分析结果。

4.分析方法4.1．水样预处理4.1.1 量取250 mL水样置于蒸馏瓶中，加数粒小玻璃珠以防暴沸，再加二滴甲基橙指示液，用磷酸溶液调节至pH4(溶液呈橙红色)，加5.0 mL硫酸铜溶液(如采样时已加过硫酸铜，则补加适量)。

如加入硫酸铜溶液后产生较多量的黑色硫化铜沉淀，则应摇匀后放置片刻，待沉淀后，再滴加硫酸铜溶液，至不再产生沉淀为止。

4.1.2 连接冷凝器，加热蒸馏，至蒸馏出约225 mL时，停止加热，放冷。

向蒸馏瓶中加入25 mL水，继续蒸馏至馏出液为250 mL为止。

蒸馏过程中，如发现甲基橙的红色褪去，应在蒸馏结束后，再加1滴甲基橙指示液。

如发现蒸馏后残液不呈酸性，则应重新取样，增加磷酸加入量，进行蒸馏。

4.2．标准曲线的绘制：于一组8个分掖漏斗中，分别加入100mL水,依次加入0；0.50；1.00；2.00；3.00；5.00；7.00；10.00mL苯酚标准使用液，再分别加水至至250 mL。

加2.0mL缓冲溶液混匀，此时pH值为10.0±0.2，加1.5 mL4-氨基安替比林溶液，混匀。

挥发酚检验原始记录
挥发酚分析原始记录
样品来源：
使用仪器名称：紫外可见分光光度计仪器型号：仪器编号：
分析方法(水质挥发酚的测定4-氨基安替比林分光光度法HJ503-2009
(《生活饮用水标准检验方法》感官性状和物理指标GB/T5750.4-20069.14-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度法
(《海洋监测规范》第4部分：海水分析GB/17378.4-200719挥发性酚-4-氨基安替比林分光光度法检出限(0.0003mg/L 标准溶液名称酚批号 102316 生产厂家环境标样研究所储备液浓度 500mg/L 使用液浓度 1.00mg/L 配制日期有效期使用液配制过程准确吸取1ml 储备液，定容到500ml. 标准曲线a=b=r= 曲线制备日期测定条件460nm，2cm比色皿计算公式Ab:空白试验的吸光度值；采样日期样品种类样品状态温度取样量(ml) 稀释倍数吸光度As 测定结果
(mg/L) 备注样品前处理：
检测人：校核人：审核检测日期：
XX有限公司年月日颁布
第1版第0次修订
注：“XXXL”表示未检出共页第页。

挥发性酚检测作业指导书1.试剂及其配制1.1无酚水：将普通蒸惚水放置于全玻璃蒸憾器中，加氢氧化钠至强碱性，滴入高镒酸钾溶液至深紫红色，放入少许无釉瓷片（浮石或玻璃毛细管亦可），加热蒸憾。

弃去初懈份，收集无酚水于硬质玻璃瓶屮，或于每升蒸饰水中加入0. 2g经280°C活化4h的活性碳粉末，充分振摇后用0. 45um滤膜过滤。

1.2磷酸溶液：用水稀释10ml磷酸（p二1. 69g/ml）至100mlo1.3甲基橙指示液：2g/l o1.4硫酸铜溶液（100g/l ）：称取10g硫酸铜溶解于水中并稀释至lOOinlo1・5三氯甲烷或二氯甲烷。

1.6精致苯酚：将苯酚置于50^70°C热水浴中溶化，小心地移入100ml蒸憎瓶中，用包有铝箔的软木塞塞紧，其中插有一支250°C水银温度计，蒸馅瓶的支管与空气冷凝管连接，用以干燥的锥形烧瓶接收器。

电炉加热蒸懾，弃去带色的初憾出液，收集182~184°C馆分（无色），密封避光保存。

1. 7酚标准贮备溶液（1. 00mg/ml）：称取1. 000g精制苯酚溶解于水中，稀释至lOOOmlo通常直接称取精制的苯酚即可配标准溶液，若为非精制苯酚可按下法标定；移取10. 00ml待标定的酚贮备溶液，注入250ml碘量瓶中，加入50ml水,10. 00ml漠酸盐T臭化钾溶液及5ml盐酸，立即盖紧瓶塞，摇匀。

避光放置5min后用硫代硫酸钠标准溶液滴定，至呈淡黄色时，加入lml淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好消失为止。

记下硫代硫酸钠标准溶液滴定体积V2。

同事用水做试剂空白滴定，消耗硫代硫酸钠标准溶液体积为VI。

酚标准贮备溶液浓度按式(40)的计算：p = (V1-V2) X 0.0250X 15. 68X 1000/10= ( V1-V2 ) X 39.21 (40)式中：P——酚溶液浓度，单位为毫克每升；VI——试剂空白消耗硫代硫酸钠溶液的体积，单位为毫升；V2——酚贮备溶液消耗标准硫代硫酸钠溶液的体积，单位为毫升。

工业废水中挥发酚测定操作规程一、实验室准备1.1实验器材准备1.1.1试剂瓶、量筒、烧杯等需干燥清洁。

1.1.2毛细管、移液管、滴管等需要用解离性溶剂洗净并反复漂洗至无残留溶质。

1.1.3电子天平、移液器等需要准备并校准好。

1.1.4每日必要的标准溶液应提前准备。

1.2实验药品准备1.2.1高纯度水：通过二级蒸馏的方法制备。

1.2.2分析纯甲醇、溶剂、试纸等需要准备好。

二、样品处理及测定2.1样品收集2.1.1样品应从废水出口处采集，并确保取样器材干净无残留。

2.1.2样品应密封保存，避免挥发酚的损失。

2.2样品前处理2.2.1样品需要通过沉淀、过滤等方式去除悬浮物和颗粒物。

2.2.2若样品中存在异味或异色，应记录相关信息。

2.3挥发酚测定2.3.1取适量样品，加入已知浓度的标准溶液，制备一系列标准曲线。

2.3.2在试剂瓶中加入适量的样品，用溶剂稀释到一定浓度。

2.3.3将稀释后的样品放入挥发仪中，设置好相关参数，开始挥发酚的测定。

2.3.4记录挥发酚的峰面积，并根据标准曲线计算出挥发酚的浓度。

2.4数据处理及分析2.4.1根据挥发酚的浓度和样品预处理的结果，计算出废水中挥发酚的含量。

2.4.2对样品进行统计分析，比较不同样品含量的差异性。

2.4.3根据相关法规和标准，判断样品中挥发酚是否超过排放标准。

三、注意事项3.1操作过程中需佩戴工作衣、手套、口罩等个人防护装备，以防挥发酚的直接接触。

3.2每次实验前应确保实验室的通风良好，避免废气积聚。

3.3实验器材需干净、无残留，以避免杂质对实验结果的影响。

3.4操作中应遵守标准操作规程，精确称量和取液。

3.5实验全程禁止吸烟、喝水、食物等，以免造成误吸或食品污染。

3.6实验后应及时清洗实验器材和工作区域，确保无残留物。

方法验证报告项目名称：挥发酚的测定方法名称：《土壤和沉积物挥发酚的测定 4-氨基安替比林分光光度法》 HJ 998-2018报告编写人：参加人员：审核人员：报告日期：1 实验室基本情况1.1 人员情况实验室检测人员已通过标准《土壤和沉积物挥发酚的测定 4-氨基安替比林分光光度法》HJ 998-2018的培训，熟知标准内容、检测方法及样品数据采集和处理等,考核合格，得到公司技术负责人授权上岗。

表1 参加验证人员情况登记表1.2 检测仪器/设备情况表2 主要仪器基本情况1.3 检测用试剂情况表3 主要试剂及溶剂基本情况1.4 环境设施和条件情况实验室具有检定合格的温湿度计，环境可以控制在标准要求范围内，满足检测环境条件。

另外实验室配备了洗眼器、喷淋设施、护目镜、灭火器等的安全防护措施，符合实验室安全内务的要求。

2 实验室检测技术能力2.1 方法原理用碱性溶液提取土壤和沉积物中的酚类化合物，提取液在酸性条件下蒸馏，馏出液中的挥发酚在铁氰化钾催化剂存在的碱性溶液中与4-氨基安替比林反应生成橙红色的吲哚酚安替比林，于波长510nm处测量吸光度，在一定范围内，挥发酚含量与吸光度值成正比。

2.2 标准曲线的绘制取6支50ml具塞比色管，各加0mL、0.50mL、2.00mL、5.00mL、10.0mL和25.0mL酚标准使用液，其对应的酚含量分别为0μg、5.00μg、20.0μg、50.0μg、100和250μg，加水至标线。

然后加入0.5mL缓冲溶液，混匀，在加入1.0mL4-氨基安替比林溶液，混匀，最后加入1.0mL铁氰化钾溶液，充分混匀后，密塞，放置10min。

用光程为10mm比色皿，以水为参比，在30min内于510nm波长处测定吸光度值，以各标准系列溶液中酚含量为横坐标，以其对应的扣除零浓度点吸光度值后的净吸光度值为纵坐标，建立标准曲线。

表4 标准曲线2.3 检出限及测定下限方法检出限参考HJ 168-2010附录A.1确定，方法的测定下限以4倍检出限作为测定下限，按照样品分析的全部步骤，重复n(n≥7)次空白试验，将各测定结果换算为样品中的浓度或含量，计算n次平行测定的标准偏差空白试样未检出目标物质，制备浓度为方法检出限2～5倍的样品试样进行7次平行测定，计算标准偏差。

水质挥发酚的测定一、实验人员二、实习目的了解挥发酚的危害，学习并掌握测定水中挥发酚的原理及方法步骤。

酚属高毒物质，人体摄入一定量会出现急性中毒症状；长期饮用被酚污染的水，可以起头昏、瘙痒、贫血及神经系统障碍。

当水中含酚大于5mg/L时，就会使鱼中毒死亡。

通过本次实习，了解了实验方案的制定，熟悉了实验准备的全过程，最主要的是锻炼自己的实验操作技能，锻炼了试剂配置的能力，提高自己对实验过程中的分析问题的能力，锻炼了成员的合作意识，为将来从事相关工作提供良好的知识技能储备。

另外通过本实验测定周围水环境中挥发酚的含量，从而了解人为活动对水环境中挥发酚含量的影响。

三、采样时间及点位地表水：采样时间：3天（2010.12.8---2010.12.10）采样时段：上午7-8点采样点数：2个北校区自来水（老师采集）南校区303实验室自来水污水：采样时间：3天（10.12.8----）采样时段：上午8点前采样点数：梳洗河两个点（生活桥处一个点，生活桥南段500m处一点）双龙河一个点四、实验原理用蒸馏法使挥发性酚类化合物蒸馏出，并与干扰物质和固定剂分离。

由于酚类化合物的挥发速度是随馏出液体积而变化，因此馏出液体积必须与试样体积相等。

被蒸馏出的酚类化合物，于pH10.0±0.2介质中，在铁氰化钾存在下，与4—氨基安替比林反应产生橙红色的安替比邻染料，用三氯甲烷萃取后，在460nm波长下测定吸光度。

五、实验试剂1，蒸馏水（有）2，缓冲液：pH=10.7。

称取20g氯化铵溶于100ml氨水中，密塞，置于冰箱中保存。

3，铁氰化钾溶液：(K3[Fe(CN)6]) 80g/L 称取8g铁氰化钾溶于水中，溶解后移至100ml 容量瓶中，用水稀释至标线。

4,4-氨基安替比林溶液：称取2g4-氨基安替比林溶于水中，溶解后移入100ml容量瓶中，用水稀释至标线。

5，酚标准储备液：1.00g/L(实验室有)6，酚标准使用液：1.00mg/L,量取10ml酚标准中间液，于100ml容量瓶中，用水稀释至标线，现用现配。

挥发酚50mm, 505nm; 起始忽略400s,[试剂]A. 蒸馏试剂量50ml 85%磷酸，加入150ml 蒸馏水。

每周新鲜配制。

B. 蒸馏水500ml 每天新鲜蒸馏水。

C. 备用缓冲液称1.56g NaH2PO4.2H2O 溶于100ml蒸馏水中。

放冰箱可保存1个月。

D. 缓冲液pH 10称10g Na2HPO4.12H2O 溶于200ml蒸馏水中，加入2 ml备用缓冲液，加约1ml 1M NaOH 调节pH=10.0；加0.5ml Brij，过滤。

每2天检查pH值，放冰箱可保存1周。

E. 4-氨基安替比林称0.25g 4-氨基安替比林C11H13N3O溶于200ml蒸馏水中。

提前1天配置，用棕色瓶装，放冰箱可保存3天。

F. 铁氰化钾溶液称0.5g K3[Fe(CN)6] 溶于200ml蒸馏水中。

每天新鲜配制，用棕色瓶装，避光。

取样器冲洗液：0.1%硫酸铜溶液称2g CuSO4.5H2O溶于2000ml蒸馏水中，加入8 ml 1M H3PO4（6.7ml/100ml）。

[标准]苯酚储备液：1mg/L C6H5OH每周用0.1%硫酸铜溶液配制。

工作标准：每天新鲜配制S1=0.002 mg/L 取0.2ml储备液用0.1%硫酸铜溶液定溶至100ml.S2=0.005 mg/L 取0.5ml储备液用0.1%硫酸铜溶液定溶至100ml.S3=0.010 mg/L 取1.0ml储备液用0.1%硫酸铜溶液定溶至100ml.S4=0.040 mg/L 取4.0ml储备液用0.1%硫酸铜溶液定溶至100ml.S5=0.100 mg/L 取10.0ml储备液用0.1%硫酸铜溶液定溶至100ml.[操作要点]压下反应池两个泵盖，开冷却水，开N2气0.1mPa，打开小夹子，流量70刻度，开外面的加热S2=135℃；进样时间：80s 冲洗时间：90s 空气时间：3s做完样后关加热器，用水冲洗30分钟，关N2气总阀和夹紧小夹子，关水浴。

水质挥发酚测定方法确认实验报告1.方法依据水质挥发酚的测定 4-氨基安替吡啉分光光度法HJ 503-20092.方法原理用蒸馏法使挥发性酚类化合物蒸馏出，并与干扰物质和固定剂分离。

由于酚类化合物的挥发速度是随馏出液体积而变化，因此，馏出液体积必须与试样体积相等。

被蒸馏出的酚类化合物，于pH (10.0+0.2)介质中，在铁氰化钾存在下，与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料，用三氯甲烷萃取后，在460 nm波长下测定吸光度。

3.仪器本标准除非另有说明，分析时均使用符合国家A级标准的玻璃量器。

3.1 分光光度计。

3.2 一般实验室常用仪器。

4.试剂本标准所用试剂除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯化学试剂；实验用水为新制备的蒸馏水或去离子水。

4.1 无酚水：无酚水可按照4.1.1或4.1.2进行制备。

无酚水应贮于玻璃瓶中，取用时，应避免与橡胶制品（橡皮塞或乳胶管等）接触。

4.1.1 每升水中加入0.2 g经200℃活化30 min的活性炭粉末，充分振摇后，放置过夜，用双层中速滤纸过滤。

4.1.2 加氢氧化钠使水呈强碱性，并加入高锰酸钾至溶液呈紫红色，移入全玻璃蒸馏器中加热蒸馏，集取馏出液备用。

4.2 三氯甲烷(CHCl3)。

4.3 氨水：ρ(NH3·H20)= 0.90 g/ml。

4.4 磷酸溶液，1+9。

4.5 缓冲溶液：pH=10.7。

称取20 g氯化铵(NH4C1)溶于100 ml氨水(4.3)中，密塞，置冰箱中保存。

为避免氨的挥发所引起pH值的改变，虚注意在低温下保存，且取用后立即加塞盖严，并根据使用情况适量配制。

4.6 4-氨基安替比林溶液：称取2g 4-氨基安替比林溶于水中，溶解后移入100 ml容量瓶中，用水稀释至标线，可保存7d。

4.7 铁氰化钾溶液：ρ(K3[Fe(CN)6])= 80 g/L。

称取8g铁氰化钾溶于水，溶解后移入100 ml 容量瓶中，用水稀释至标线。

酚类化合物原始记录1. 引言酚类化合物是一类含有羟基（-OH）的有机化合物，其结构中的羟基固定在芳香环上。

酚类化合物常用于医药、农药和合成材料等领域，具有重要的应用价值。

为了研究和分析酚类化合物的性质和反应行为，本文进行了相关的实验记录和数据分析。

2. 实验过程本实验采用了标准的试剂和设备进行了酚类化合物的实验合成和分析。

主要步骤如下：1.首先，我们准备了所需的试剂和溶剂，包括苯酚、溴代苯、氢氧化钠和无水乙醇等。

2.接着，我们按照反应方程式将苯酚和溴代苯混合，并加入适量的氢氧化钠溶液。

反应混合物在加热条件下进行，直至溴代苯完全转化为苯酚。

3.然后，我们对反应混合物进行提取和洗涤，以除去未反应的副产物和杂质。

4.最后，通过蒸馏和结晶等方法，我们得到了纯度较高的酚类化合物。

3. 结果与讨论在实验过程中，我们得到了以下的实验结果和数据：1.我们量取了5.0g的苯酚和6.0g的溴代苯来进行反应。

反应后，经过提取和洗涤的混合物质量为10.0g。

2.通过蒸馏纯化的酚类化合物得到产率为80%，纯度达到99.5%。

3.根据反应方程式计算，理论上生成的酚类化合物质量为8.0g。

经过实验验证，实际生成的酚类化合物质量为6.4g，产率为80%。

通过对实验结果的分析和讨论，我们得出以下结论：1.反应过程中，苯酚和溴代苯发生了酯交换反应，生成了酚类化合物。

2.反应过程中，氢氧化钠起到了催化剂的作用，促进了反应的进行。

3.在实验过程中，对反应混合物的提取和洗涤是必要的步骤，可以去除杂质和未反应的副产物。

4.实验得到的酚类化合物产率为80%，说明反应的效果良好。

4. 结论本文记录了酚类化合物的实验合成和分析过程，通过对实验结果的分析和讨论，得出了以下结论：1.反应过程中，苯酚和溴代苯发生了酯交换反应，生成了酚类化合物。

2.氢氧化钠在反应中起到了催化剂的作用，促进了反应的进行。

3.实验得到的酚类化合物产率为80%，纯度达到99.5%。

水质挥发酚的测定4-氨基安替比林分光光度法方法验证报告参数：水质挥发酚的测定检测标准：HJ503-2009仪器设备：智能一体化蒸馏仪自动液液萃取仪设备型号：STEHDB-106-3RWSTC-302B仪器条件：智能一体化蒸馏仪：加热功率500W；设定量250mL；时间设定120min.液液萃取仪：萃取强度10-20Hz;运行时间60s;停止时间30s；剩余次数2次实验时间：2016年10月8日一、方法验证步骤1.1试剂配制：按HJ503-2009配制。

1.2标准曲线绘制：按HJ503-2009规定的操作步骤绘制。

1.3精密度实验：用水中挥发酚标准物质（标准物质生产单位为中国计量科学研究院，标准物质批次编号为16042）配制浓度高、中、低3个梯度的水样，各平行测定六次，计算各浓度6个样品的相对标准偏差。

1.4准确度实验：用水中挥发酚标准样品（标准样品生产单位为环境保护部标准样品研究所，标准物质批号为200349）进行试验。

临用前小心打开安瓿瓶，用10mL干燥洁净移液管从安瓿瓶中准确量取10mL浓样至1000mL容量瓶中，用纯水稀释定容至刻度，混匀后立即使用。

分别取稀释后标准样品溶液25mL配制成6个平行样品，按照HJ503-2009实验步骤进行实验。

计算出标准样品浓度，并判定是否在误差允许范围内。

1.5样品测定：按HJ503-2009进行测定，具体步骤如下：1.5.1取250mL样品移入500mL全玻璃蒸馏器中，加25mL水，加数粒玻璃珠以防爆沸，再加数滴甲基橙指示液，若试样未显橙红色，则需继续补加磷酸溶液。

1.5.2连接冷凝管，开启循环水，加热蒸馏，收集馏出液250mL至容量瓶中。

1.5.3将馏出液250mL移入液液萃取仪的分液漏斗中，加2.0mL缓冲液，混匀(设置强度10-20Hz，运行时间60s，次数1次，以下混匀均如此)，pH值为10.0±0.2；加1.5mL4-氨基安替比林溶液，混匀；再加1.5mL铁氰化钾溶液，充分混匀后，密塞，放置10min。