NC膜,PVDF膜和尼龙膜的区别

过滤膜的选择1.尼龙膜(Nylon)特点：耐温性能良好，可耐121℃饱和蒸汽热压消毒30min，最高工作温度60℃，化学稳定良好，能耐受稀酸、稀碱、醇类、酯类、油类、碳氢化合物、卤代烃及有机氧化物等多种有机和无机化合物。

用途：电子、微电子、半导体工业水过滤、组织培养基过滤。

药液过滤、饮料过滤、高纯化学制品过滤、水溶液和有机流动相的过滤的过滤。

2.聚偏氟乙烯膜（PVDF）特点：膜机械强度高、抗张强度高，具有良好的耐热性和化学稳定性，蛋白吸附率低；具有较强的负静电性及疏水性；具有疏水和亲水两种形式。

但不能耐受丙酮，DMSO，THF，DMF，二氯甲烷，氯仿等。

用途：疏水性聚偏氟乙烯膜主要应用于气体及蒸汽过滤、高温液体的过滤; 亲水性聚偏氟乙烯膜主要应用于组织培养基、添加剂等除菌过滤溶剂和化学原料的净化过滤，试剂的无菌处理，高温液体的过滤等。

3.混合纤维素酯特点：孔径比较均匀，孔隙率高，无介质脱落，质地薄，阻力小，滤速快，吸附极小，使用价格成本低，但不耐有机溶液和强酸、强碱溶液。

用途：医药工业需热压灭菌的水针剂，大输液滤除微粒。

对热敏性药物(胰岛素ATP、辅酶A等生化制剂)的除菌，用0.45微米的滤膜(或0.2)溶液中微粒及油类不溶物的分析测定，及水质污染指数测定。

应用于体细胞杂交和线粒互补预测杂种优势研究等科研部门。

4.聚丙烯特点：无任何粘接剂，化学性能稳定，柔韧，不易破损，耐高温，能经受高压灭菌。

无毒无味，耐酸碱。

用途：适用于制作各种粗、精滤器，折叠式滤芯。

适用于饮料、医药等行业的板框压滤机滤膜。

适用于反渗透膜，超滤膜的支撑及预处理。

聚丙烯膜无毒性，可在医药、化工、食品、饮料等领域广泛应用；具疏水性，对气体过滤尤佳。

5.聚醚砜(PES)特点：醚砜材质的微孔滤膜，属于亲水性滤膜，具有高流率、低溶出物、良好的强度的特点，不吸附蛋白和提取物，对样品五污染。

用途：低蛋白质吸附及高药物相容性，专为生化、检验、制药以及除菌过滤装置而设计。

NC膜、PVDF膜、xx膜的应用及差别硝酸纤维素膜(nitrocellulosefiltermembrane，简称NC膜)，NC膜在NorthernBlot、SouthernBlot、WesternBlot中都需要用到，杂交技术有固相杂交和液相杂交之分。

固相杂交技术目前较为常用，先将待测核酸结合到一定的固相支持物上，再与液相中的标记探针进行杂交。

固相支持物常用硝酸纤维素膜。

PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜（polyvinylidenefluoride）是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。

PVDF膜是疏水性的，膜孔径有大有小，随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。

大于200的蛋白选用0.45um的膜，小于200的蛋白选用0.2um的膜。

PVDF膜使用是需预处理，用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团，使其更容易与带负电的蛋白结合。

PVDF膜具有较高的机械强度，是印迹法中的理想固相支持物材料。

尼龙膜是一种合成的长链聚酰胺薄膜，对核酸和蛋白质具有很强的结合能力，能代替硝酸纤维素薄膜用于分子印迹和杂交实验。

NC膜、PVDF膜、xx膜的差别：尼龙膜是较理想的核酸固相支持物，有多种类型；硝酸纤维素膜是目前应用最广的一种固相支持物，价格最便宜；PVDF膜介于二者之间。

1.就结合能力而言：尼龙膜结合DNA和RNA能力可达480－600μg/cm2，可结合短至10bp的核酸片段；硝酸纤维素膜结合DNA和RNA能力可达80－100μg/cm2，对于200bp 的核酸片段结合能力不强；PVDF膜结合DNA和RNA能力可达125－300μg/cm2。

2.就温度适应性而言：尼龙膜经烘烤或紫外线照射后，核酸中的部分嘧啶碱基可与膜上的正电荷结合；硝酸纤维素膜依靠疏水性相互作用结合DNA，结合不牢固；PVDF膜结合牢固，耐高温，特别适合于蛋白印迹。

就韧性而言：尼龙膜较强；硝酸纤维素膜较脆，易破碎；PVDF膜较强。

3.就重复性而言：⑴、尼龙膜可反复用于分子杂交，杂交后，探针分子可经碱变性被洗脱下来；硝酸纤维素膜不能重复使用；PVDF膜可以重复使用。

2. 针对样品的常见问题B. 做线粒体膜UCP2蛋白的Western Blot （以下简写成Western Blot），提取线粒体后冻存（未加蛋白酶抑制剂），用的博士德的一抗，开始还有点痕迹，现在越来越差，上样量已加到120μg，换了个santa cloz的一抗仍不行。

是什么原因？蛋白酶抑制剂单加PMSF行吗？解答：怀疑是样品问题，可能是：1，样品不能反复冻融；2，样品未加蛋白酶抑制剂。

同时，建议检查Western Blot过程，提高一抗浓度。

对于加蛋白酶抑制剂来说，一般加PMSF就可以了，最好能多加几中种蛋白酶抑制剂。

C.细胞水平要做western blot，多少细胞提的蛋白够做western blot？解答：一般5×10^6就足够了D.同一样品能同时提RNA又提蛋白么？这样对western blot有无影响？解答：能，没有问题，我们做过。

E. 同一蛋白样品能同时进行两种因子的Western Blot检测吗？解答：当然可以，有的甚至可以同时测几十种样品。

F. 如果目标蛋白是膜蛋白或是胞浆蛋白，操作需要注意什么？解答：如果是膜蛋白和胞浆蛋白，所用的去垢剂就要温和得多，这时最好加上NaF去抑制磷酸化酶的活性。

G. 我的样品的蛋白含量很低，每微升不到1微克，但是在转膜时经常会发现只有一部分蛋白转到了膜上，就是在转膜后染胶发现有的孔所有的蛋白条带都在，只是颜色变淡了，有什么办法可以解决？解答：你可以加大上样量，没有问题，还有转移时你可以用减少电流延长时间，多加5－10％甲醇。

H. 想分离的蛋白是分子量260kd的，SDS-PAGE电泳的分离胶浓度多大合适？积层胶的浓度又该用多少？这么大分子量的蛋白容易作Western Blot吗？解答：260kd的蛋白不好做，分离胶用6％，Stacking Gel 3.5％。

I. 如果上样量超载，要用什么方法来增加上样量？如果需要加大上样量使原来弱的条带能看清楚。

蛋白、核酸杂交转印膜（PVDF、尼龙膜）技术介绍转印膜：用于蛋白质和核酸的转移和检验过程的微孔膜。

Southern blot：又称Southern 印迹杂交，是研究DNA 图谱的基本技术。

Northern blot：又称Northern 印迹杂交，与Southern blot 方法类似，是检测RNA的基本技术。

Western blot：又称Western 印迹杂交，与Southern blot 方法类似，是蛋白质检测分析的基本技术。

转印膜在蛋白质和核酸的转移和检测过程中应用广泛，不同的转印膜规格和参数不同，选择正确、均一稳定的转印膜对达到最佳的实验结果起到关键性的作用。

常用的转印膜对比：常用的三种转印膜：硝酸纤维素膜（NC 膜）、带正电的尼龙膜（N66膜）、聚偏氟乙烯膜（PVDF膜）。

C ob e t t er三种转印膜结合DNA或RNA的能力：带正电尼龙膜>PVDF膜>硝酸纤维素膜。

三种转印膜机械强度比较：硝酸纤维素膜较脆，易破碎，不能重复使用；尼龙膜和PVDF 膜机械强度较高，可重复使用。

带正电的尼龙膜可结合短至10bp核酸片段，因此是最理想的核酸杂交转印膜。

PVDF膜机械强度高、耐高温，是蛋白印迹最理想的转印膜。

Cobetter专为蛋白核酸杂交研发了性能优良的转印膜，Cobetter杂交转印膜的种类如下：retteboC⏹N66尼龙转印膜⏹N66尼龙带正电荷转印膜⏹PVDF疏水转印膜⏹PVDF亲水转印膜Cobetter转印膜孔径有0.45um、0.22um 两种。

CobetterN66尼龙转印膜：相比起硝酸纤维素膜而言，其机械强度高，在经历多次杂交、洗脱和标记后不易产生破损和变形，可重复使用，非常适用于核酸检测。

制模过程中通过特殊的表面改性方法嫁接了亲水性的基团，使用过程中不需要再做预润湿处理。

通过在膜表面嫁接羟基基团，改变其表面电荷性能（正电），使得其能紧密结合DNA 而降低背景，快速结合DNA。

NC膜与PVDF膜的区别材料科学领域中，膜材料是一种关键的功能性材料，广泛应用于许多行业。

NC膜（聚醋酸纤维素膜）和PVDF膜（聚偏氟乙烯膜）是两种常见的膜材料，它们在性能和应用方面存在着一些差异。

本文将探讨NC膜与PVDF膜的区别，并分析它们在不同领域的应用。

1. 化学性质：NC膜是由聚醋酸纤维素制成的，聚醋酸纤维素是一种天然纤维素。

NC膜具有较好的耐溶剂性和化学稳定性，能够在广泛的 pH 范围内使用，不易受到化学物质的影响。

而PVDF膜是由聚偏氟乙烯制成的，聚偏氟乙烯是一种合成高分子材料。

PVDF膜在酸、碱和溶剂等各种化学物质的环境下都具有较好的稳定性。

2. 物理性质：NC膜具有良好的热稳定性和机械强度，能够在高温和高压环境下使用。

它具有较高的热变形温度，能够在 200°C 以上的温度下保持稳定。

PVDF膜也具有较好的热稳定性和机械强度，但其热变形温度较NC 膜低，通常在 150°C 左右。

3. 水分通透性：NC膜在水分通透性方面具有优势，它具有较高的水分透过率，可以有效地过滤水溶性溶剂和溶剂蒸气。

而PVDF膜在水分通透性方面相对较低，透过率相对较小，适用于一些对水分透过性要求不高的应用场景。

4. 分离性能：NC膜和PVDF膜在分离性能上也有所不同。

NC膜具有较好的分离性能，能够有效地分离溶剂和其他溶液成分。

PVDF膜在分离性能方面相对较弱，适用于需要相对较低分离效率的应用。

根据以上的区别，NC膜和PVDF膜在不同领域有不同的应用。

1. NC膜的应用：NC膜广泛应用于水处理、药物输送、食品加工等领域。

由于其较高的耐溶剂性和化学稳定性，它被用于过滤和分离各种溶剂和溶液。

在水处理领域，NC膜可以有效地去除水中的悬浮物和杂质，实现净水的目标。

在药物输送领域，NC膜可用于控制药物释放速率，提高药物的疗效。

在食品加工领域，NC膜可用于浓缩果汁、分离乳制品中的乳脂等。

2. PVDF膜的应用：PVDF膜主要应用于微电子行业、化学工业和电池领域。

Western Blot详解(原理、分类、试剂、步骤与问题解答) Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。

对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。

本文主要通过以下几个方面来详细地介绍一下Western Blot技术:一、原理二、分类i.放射自显影ii.底物化学发光ECLECFiv.底物DAB呈色三、主要试剂四、主要步骤五、实验常见的问题指南1.参考书推荐2.针对样品的常见问题3.抗体4.滤纸、胶和膜的问题5.Marker的相关疑问6.染色的选择7.参照的疑问8.缓冲液配方的常见问题9.条件的摸索10.方法的介绍11.结果分析一、原理与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot 采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。

经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型与其生物学活性不变。

以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。

该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。

二、分类现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色，体同水平和实验条件的是用第一种方法，目前发表文章通常是用底物化学发光ECL。

只要买现成的试剂盒就行，操作也比较简单，原理如下（二抗用HRP标记）：反应底物为过氧化物+鲁米诺，如遇到HRP，即发光，可使胶片曝光，就可洗出条带。

三、主要试剂1、丙烯酰胺和N，N’-亚甲双丙烯酰胺，应以温热(以利于溶解双丙稀酰胺)的去离子水配制含有29%(w/v)丙稀酰胺和1%(w/v)N，N’-亚甲双丙烯酰胺储存液丙稀酰胺29g，N，N-亚甲叉双丙稀酰胺1g，加H2O至100ml。

Western转膜实用技巧，赶紧Get起来Western实验中，经过SDS-PAGE电泳分离后的蛋白质样品需经过“转膜”步骤，从PAGE 胶转移到膜上固定，才能用各种方法进行Western Blot的检测和显示，而且为了防止没有电场的情况下已经分离的蛋白条带扩散，转膜要尽快进行。

转膜是对Western最终结果影响最大的一步，转膜质量的好坏直接决定了实验结果的好坏。

下面介绍一些实用技巧，赶紧Get起来吧1. 膜的选择膜的选择主要从实验目的和实验要求来考虑，例如做分子量小于20kDa的小蛋白，0.45um的膜是不可取的，因为可能会使得蛋白因透过膜孔而造成膜结合的目的蛋白含量不确定，从而影响最终结果的可靠性。

通常小于20KDa的蛋白选择0.2um 的膜，而大于20KDa的蛋白选择0.45um的膜。

常见的膜有NC膜和PVDF膜，区别如下：2. 转膜条件不同分子量的蛋白质选择的凝胶浓度和转膜时间也是不同的，原则上高分子量蛋白用低浓度胶，转膜时间较长，而低分子量蛋白用高浓度胶分离，采用较短的转3. 转膜操作注意事项（1）避免直接接触膜，全程戴手套并使用镊子，手指上的油脂与蛋白会封闭转膜效率并易产生背景污斑；（2） PVDF膜具有疏水性，使用之前需用甲醇浸泡；（3）排列三明治时，尽量用干净的玻璃棒或试管赶走胶和膜之间的气泡，避免转膜不均匀；（4）确认裁剪的膜和滤纸与凝胶尺寸相同，否则会导致电流不能通过膜，从而转膜无效；（5）鸡来源的抗体与PVDF和尼龙膜有较强的结合能力，从而产生较高背景，故如果选择鸡来源的抗体，最好使用**纤维素膜（NC膜）4. 转膜后丽春红染色为检测转膜是否成功，可以用丽春红进行染色，将膜放入TBST洗一次，然后置于丽春红染色工作液中，室温下摇动染色5分钟，大量的水洗膜，直至水变清无色，蛋白条带清晰。

Western Blot 常见问题汇总分析。

Western Blot详解(原理、分类、试剂、步骤及问题解答)Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。

对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。

本文主要通过以下几个方面来详细地介绍一下Western Blot技术:一、原理二、分类i.放射自显影ii.底物化学发光ECLECFiv.底物DAB呈色三、主要试剂四、主要步骤五、实验常见的问题指南1.参考书推荐2.针对样品的常见问题3.抗体4.滤纸、胶和膜的问题5.Marker的相关疑问6.染色的选择7.参照的疑问8.缓冲液配方的常见问题9.条件的摸索10.方法的介绍11.结果分析一、原理与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。

经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。

以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。

该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。

二、分类现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色，体同水平和实验条件的是用第一种方法，目前发表文章通常是用底物化学发光ECL。

只要买现成的试剂盒就行，操作也比较简单，原理如下（二抗用HRP标记）：反应底物为过氧化物+鲁米诺，如遇到HRP，即发光，可使胶片曝光，就可洗出条带。

三、主要试剂1、丙烯酰胺和N，N’-亚甲双丙烯酰胺，应以温热(以利于溶解双丙稀酰胺)的去离子水配制含有29%(w/v)丙稀酰胺和1%(w/v)N，N’-亚甲双丙烯酰胺储存液丙稀酰胺29g，N，N-亚甲叉双丙稀酰胺1g，加H2O至100ml。

玻璃纤维膜 nc膜原理
玻璃纤维膜和NC膜（硝酸纤维素膜）的原理如下：
1. 玻璃纤维膜的原理：
玻璃纤维膜是一种由连续玻璃纤维组成的非织造布，其原理基于玻璃纤维的优异性能和结构特点。

玻璃纤维具有高强度、高模量、耐高温、耐腐蚀等特性，因此玻璃纤维膜具有优良的抗拉强度、抗撕裂性、耐磨损性和化学稳定性。

此外，玻璃纤维膜还具有良好的透气性和过滤性能，能够有效地过滤和分离气体、液体中的固体颗粒和杂质。

玻璃纤维膜的应用范围广泛，包括工业过滤、环保治理、医疗卫生、食品加工等领域。

在过滤和分离过程中，玻璃纤维膜通过其独特的纤维结构和表面性质，实现对固体颗粒和杂质的拦截和吸附，从而达到过滤和净化的目的。

2. NC膜（硝酸纤维素膜）的原理：
NC膜是一种由硝酸纤维素制成的薄膜材料，其原理基于硝酸纤维素的溶解和再生过程。

硝酸纤维素是一种高分子化合物，具有良好的溶解性和成膜性。

在制造过程中，硝酸纤维素溶解在适当的溶剂中，形成均匀的溶液。

然后，通过流延、刮涂或喷涂等方法，将溶液涂布在基材上，经过干燥和固化后形成薄膜。

NC膜具有优良的机械性能、化学稳定性和生物相容性，因此广泛应用于生物分离、免疫检测、药物筛选等领域。

在生物分离和免疫检测中，NC膜作为固相支持体，能够固定和吸附生物分子（如蛋白质、核酸等），从而实现生物分子的分离、纯化和检测。

总之，玻璃纤维膜和NC膜的原理分别基于玻璃纤维的优异性能和硝酸纤维素的溶解再生过程。

这两种膜材料具有不同的特点和应用领域，但都能够在过滤、分离和检测等方面发挥重要作用。

尼龙膜是什么材料
尼龙膜是一种由聚酰胺树脂制成的薄膜材料，具有良好的物理性能和化学性能，广泛应用于包装、建筑、医疗等领域。

尼龙膜具有高强度、耐磨损、耐腐蚀、耐高温等特点，因此备受青睐。

首先，尼龙膜的主要成分是聚酰胺树脂，它具有优异的机械性能和化学稳定性。

聚酰胺树脂是一种高分子化合物，具有较高的结晶性和熔点，因此尼龙膜具有较高的强度和刚度，能够承受较大的拉伸力和压力，适用于各种复杂的包装形式和工程应用。

其次，尼龙膜具有良好的耐磨损性能，能够长时间保持表面光滑和清洁。

这使
得尼龙膜在包装行业中得到广泛应用，尤其是在食品包装领域，能够有效保护食品的新鲜度和品质，延长货物的保质期，符合现代人们对食品安全和卫生的需求。

另外，尼龙膜还具有良好的耐腐蚀性能，能够抵御化学品和腐蚀性气体的侵蚀。

这使得尼龙膜在建筑行业中得到广泛应用，可以作为防水材料、隔热材料、防腐蚀材料等，保护建筑结构的安全和稳定。

此外，尼龙膜还具有良好的耐高温性能，能够在高温环境下保持稳定的物理性
能和化学性能。

这使得尼龙膜在医疗行业中得到广泛应用，可以作为手术包装材料、医用敷料材料等，保护医疗器械和患者的安全和健康。

综上所述，尼龙膜作为一种优异的薄膜材料，具有高强度、耐磨损、耐腐蚀、
耐高温等优良性能，广泛应用于包装、建筑、医疗等领域。

随着科技的不断发展和进步，尼龙膜的应用领域将会更加广泛，为人们的生活和工作带来更多的便利和安全保障。

各种包装薄膜介绍EVA薄膜的性能与醋酸乙烯（VA）的含量有关。

VA含量越高，薄膜的弹性、耐应力开裂性、耐低温性以及热封性越好。

当VA含量达到15%~20%时，薄膜的性能接近软质PVC薄膜。

VA含量越低，薄膜的弹性越小，其性能越接近LDPE薄膜。

一般EVA薄膜中VA的含量10%~20%。

EVA薄膜的低温热封性和夹杂物密封性好，是优良的密封膜，常用作复合薄膜的热封层。

EVA薄膜的耐热性差，最高使用温度为60℃，其气密性不良，且易粘连，有异味等。

所以单层EVA薄膜一般不直接用于包装食品。

聚乙烯醇薄膜PVA薄膜分耐水性薄膜和水溶性薄膜。

用聚合度在1000以上并完全皂化的PVA制成的是耐水性薄膜。

而由低聚合度部分皂化的PVA制成的是水溶性薄膜。

在包装上使用的主要是耐水PVA薄膜。

PVA薄膜具有良好的透明度和光泽度，不易积累静电，不易吸附灰尘，印刷性能好。

在干燥状态下具有极佳的气密性和保香性，耐油性好；有较好的机械强度、韧性和耐应力开裂性；可以热封合；PVA薄膜的透湿率大，吸收性强，尺寸不稳定。

所以通常采用聚偏二氯乙烯涂布，又称K涂布。

这种涂布后的PVA薄膜在高湿度下亦能保持非常好的气密性、保香性和防潮性，很适合于包装食品。

PVA薄膜常用作复合薄膜的阻隔层，其复合薄膜主要用于快餐食品、肉制品、奶油制品等食品的包装。

PVA单膜还大量用于纺织品、服装的包装。

水溶性PVA薄膜可用于消毒药品、洗涤剂、漂白剂、染料、农药等化工产品的计量包装及病人衣物洗涤袋等，不必开封直接投入水中即可使用。

尼龙薄膜尼龙薄膜主要有双向拉伸薄膜和未拉伸薄膜两种，其中以双向拉伸尼龙薄膜(BONY)使用较多。

未拉伸尼龙薄膜具有突出的伸长率，主要用于深拉伸真空包装。

尼龙薄膜是一种非常坚韧的薄膜，无毒无味，透明性好，有光泽，不易积累静电，印刷性能好。

其机械强度高，抗张强度是PE薄膜的三倍，耐磨性、耐戳穿性优良。

尼龙薄膜的耐热、耐汗性以及耐油性好，但热封较困难。

以下信息来源于百度文库首先来比较下这几种膜的特点1. 硝酸纤维素膜硝酸纤维素膜是蛋白印迹最广泛使用的转移介质，对蛋白有很强的结合能力，而且适用于各种显色方法，包括同位素，化学发光（Luminol类）、常规显色、染色和荧光显色；背景低，信噪比高。

NC膜的使用也很简便，比如不需要甲醛预处理，只要在无离子水面浸润排出膜内气泡，再在电泳缓冲液中平衡几分钟就可以了；比如NC膜很容易封闭，也不需要特别严谨的清洗条件。

转移到NC膜上的蛋白在合适的条件下可以稳定保存很长时间，Schleicher & Schull公司的一个实验表明，转移到NC膜上的几种蛋白4度条件下保存5年依然保持免疫识别特性，依然可以得到清晰可信的Western Blot结果。

不过要注意的是纯的硝纤膜在比较脆，又容易卷，操作要小心，不适合用于需要多次重复清洗的用途——因为经不起多次“折磨”。

选择硝纤膜时要注意的是选择合适的孔径，通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔径的膜，小于20KD的话建议选择0.2um的，如果小于7KD的话最好选择0.1um的膜。

另外还要注意选择纯的NC膜——混有含醋酸纤维（CM）的NC膜结合力会有所降低。

另外提醒一句：由于NC膜上结合的蛋白会因为一些去污剂而被代替，因此在封闭时最好使用较温和的Tween20，而且浓度不要超过0.3%（据说0.05%效果最好）。

硝纤膜最为大家熟悉和认可的品牌就是 Schleicher & Schull；Millipore；PALL，另外罗氏、Invitrogen、GE（Amersham）、Santa Cruz等公司都有提供各式的硝纤膜（估计OEM的可能性比较大，不过有时挺奇怪的，OEM的有时比生产厂家卖的还便宜）。

Schleicher & Schull的名字拗口——那大概需要舌头在口腔里经过若干次不同弧度和不同速度的上下往返精确运动再配合适当的吐气才能读得准确优雅，不过作为第一个提供硝纤膜的厂家依然广为人知，其NC膜分为纯NC膜和强化NC膜两种：Protran nitrocellulose membrane和Optitran nitrocellulose membrane。

印刷膜材料分类印刷膜是一种广泛应用于包装、标签和印刷行业的材料。

它们具有多种特性，如高强度、耐磨损、防潮、防氧化等，使其成为包装材料的首选之一。

根据不同的应用和要求，印刷膜可以分为以下几类：一、聚乙烯（PE）膜聚乙烯是一种常见的塑料材料，具有较高的韧性和柔软性。

PE膜通常用于食品包装、农药包装等领域。

根据不同的密度，PE膜可以分为低密度聚乙烯（LDPE）、线性低密度聚乙烯（LLDPE）和高密度聚乙烯（HDPE）三种类型。

二、聚丙烯（PP）膜聚丙烯是一种具有优异耐化学性能和耐温性能的材料。

PP膜通常用于制作食品包装袋、药品包装袋等。

根据不同加工方式，PP膜可以分为单向延伸聚丙烯（OPP）和双向延伸聚丙烯（BOPP）两种类型。

三、聚酯（PET）膜聚酯是一种具有优异的机械性能和化学稳定性的材料。

PET膜通常用于制作标签、电子产品包装等。

根据不同的加工方式，PET膜可以分为单向延伸聚酯（OPET）和双向延伸聚酯（BOPET）两种类型。

四、尼龙（PA）膜尼龙是一种具有良好耐磨损性和耐温性能的材料。

PA膜通常用于制作高档包装袋、防震垫等。

根据不同的加工方式，PA膜可以分为单向延伸尼龙（OPA）和双向延伸尼龙（BOPA）两种类型。

五、氧化聚乙烯（EVOH）膜氧化聚乙烯是一种具有优异阻隔性能的材料，可以有效隔绝氧气和水汽。

EVOH膜通常用于制作高档食品包装袋、医药包装袋等。

六、铝箔复合膜铝箔复合膜是由铝箔和塑料层复合而成的一种材料。

它具有优异的阻隔性能和保温性能，通常用于制作高档食品包装袋、药品包装袋等。

七、生物降解膜生物降解膜是一种可以在自然环境中分解的材料，对环境污染较小。

目前市场上常见的生物降解膜主要有淀粉基生物降解膜和聚乳酸（PLA）生物降解膜两种类型。

综上所述，不同类型的印刷膜具有不同的特性和应用领域。

在选择印刷膜时，需要根据具体要求进行选择。

Western Blot时最常用的两种膜是硝酸纤维素膜（nitrocellulose，NC膜）和PVDF 膜（又称Positively charged nylon）（Polyvinylidene fluoride，聚偏二氟乙烯膜）。

这两种膜各自有什么特点？我们的实验中该选择哪一种呢？来看下面的文字。

（摘自《Making and using Antibodies》）A study of the performance of nitrocellulose, mixed ester, nylon, andcovalent-binding PVDF memberanes after passive protein adsorption and also after electrotransfer was done with several different proteins labeled with125Iodine.The membranes exhibited different binding capacities in passive adsorption tests with labeled bovine serum albumin.The PVDF showed the least, and the regenerated cellulose and nylon membranes showed the most protein binding.Nitrocellulose and mixed ester membranes were midway between.In tests measuring protein retention, PVDF retained the most bound protein when washed with detergents or 5% skimmed milk.All the membranes showed virtually the same binding capacity as measured by autoradiography when tested under electrotransfer conditions with Towbin's buffer.In passive adsorption tests, the membranes wxhibited a broad range of capacities but gave similar results in electrotransfer tests. These differences were ascribed to active migration of protein into the membrane matrix instead of simple diffusion and the increased hydrophobicity of Towbin's transfer buffer because of the inclusion of methanol.上面这段文字指出在被动扩散转移蛋白时，几种膜之间结合蛋白的能力差别明显；但是当使用转膜仪转移蛋白时，各种膜之间的差别就很小了。

一、特氟龙薄膜又称之为聚四氟乙烯薄膜、铁氟龙薄膜、f4薄膜，是由悬浮聚四氟乙烯树脂经模压、烧结、冷却成毛坯，再经车削，压延制成。

车削成的薄膜为不定向薄膜，不定向薄膜经压延后即成定向薄膜。

不定向薄膜压延1.1-1.8倍为半定向薄膜。

特氟龙薄膜用于电容器介质，作导线绝缘，电器仪表绝缘，密衬垫。

它结晶度高，分子定向紧紧排列，空隙率小，因而特氟龙薄膜有较大提高。

聚四氟乙烯薄膜分聚四氟乙烯彩色薄膜，聚四氟乙烯活化膜和F46薄膜。

聚四氟乙烯彩色薄膜是由悬浮聚四氟乙烯树脂加入一定量的着色剂后经模压、烧结制成坯料再经车削，压延制成红、绿、蓝、黄、紫、棕、黑、橙、白等十三种颜色的聚四氟乙烯定向或不定向彩色薄膜。

聚四氟乙烯彩色薄膜虽加入一定量着色剂后，仍有良好的电绝缘性，适用于电线、电缆、电器件的绝缘和分类识别。

聚四氟乙烯彩色薄膜虽加入一定量着色剂后，仍有良好的电绝缘性，适用于电线、电缆、电器件的绝缘和分类识别。

聚四氟乙烯活化膜是由聚四氟乙烯薄膜、填充薄膜及彩色薄膜,再经表面活化处理而成的薄膜。

制品中加入颜料、玻璃纤维、碳纤维、石墨、青铜粉等填料,经活化处理后进一步改善了性能,可与橡胶、金属等复合,也可制作特种胶带,达到设计规定的要求。

广泛应用于轻工、军工、航天、油田等领域。

F4薄膜具有抗电压强度最为显著、击穿电压的优点。

用于电容器介质，作导线绝缘，电器仪表绝缘，密封衬垫。

聚四氟乙烯车削薄膜用压延机经热辊滚压定向而成的一种定向薄膜，它结晶度高，分子定向紧紧排列，空隙率小，因而聚四氟乙烯薄膜有较大提高，特别是抗电压强度更为明显。

图1：特氟龙薄膜来源：深圳丹凯二、尼龙与聚四氟乙烯的区别聚四氟乙烯(PTFE俗称铁氟龙、塑料王)材料挤压烧结后，经干燥、高温烧结、定型等工序而制成的特种管材。

铁氟龙又叫铁弗龙、特弗龙、特福龙、特氟隆、特氟龙、聚四氟乙烯、塑料王，英文为Teflon，广泛应用于机械、电子电器、汽车、航天、化工、电脑、电热、军事、通讯等重要科技工业，如微型变压器等。

各种膜材料之间的比较1.中空纤维超滤膜的主要材料有聚丙烯腈（PAN）、聚砜（PSF）、聚醚砜（PES）、聚偏氟乙烯（PVDF）、聚氯乙烯（PVC）等2.聚氯乙烯（PVC）湿膜机器里面的芯要用酒精浸泡来保持湿润状态，保持滤芯的性能3.聚偏氟乙烯（PVDF）膜是抗高温最高140度的温度，过滤开水都可以，还有耐酸碱强酸强碱都不怕（新加坡美能）4.安达康用的材质是UPAN ，是最好的一种膜材料PAN/PVDF/PES/PS比较1. 材料：PAN为亲水性材质，PVDF,PES与PS为疏水性材质；所以做成超滤膜，PVDF与PES、PS的跨膜压差要远高于PAN，PVDF与PES、PS更容易污堵；2. PES与PS的抗氧化能力非常强，PVDF次之，PAN再次之；3. PES与PS材料属于刚性材料，比较容易破损，断丝。

所以PES与PS通常设计成内压式，如Norit,Hydracap,Koch 等，PES与PS对进水的要求相对较高，需要进水更干净。

另外，PES 与PS的超滤通常不设计风机气洗，更重要的原因是造成断丝（刚性材料）。

若有厂家宣称设计风机气洗或者外压式，工程公司或业主需要小心；4. 就跨膜压差（TMP-Transfer Membrane Pressure）来说，越低的跨膜压差意味着清洗越容易；5. 就抗污染能力而言，PAN比较好；PES与PS次之；6. 就材料的抗拉伸强度而言，PVDF，PES及PS比较好，PAN次之；7. PAN与PVDF通常都可以设计成外压式，配风机气洗；但Omexell例外，以前的设计没有风机气洗，最近据说有风机的设计，但是否稳定，还需要时间考验；8. 就价格而言，PAN比PVDF、PES及PS要便宜很多；综合来讲，不管经济成本上，还是技术层面上，PAN的优势是在地表水及非重度污染的水处理中；PVDF，PES及PS更适合于废水处理。

每种材料膜的生产厂家都竭力避免材料的缺点，尽可能进行材料的改性。

Western Blot时最常用的两种膜是硝酸纤维素膜（nitrocellulose，NC膜）和PVDF 膜（又称Positively charged nylon）（Polyvinylidene fluoride，聚偏二氟乙烯膜）。

这两种膜各自有什么特点？我们的实验中该选择哪一种呢？来看下面的文字。

（摘自《Making and using Antibodies》）A study of the performance of nitrocellulose, mixed ester, nylon, andcovalent-binding PVDF memberanes after passive protein adsorption and also after electrotransfer was done with several different proteins labeled with125Iodine.The membranes exhibited different binding capacities in passive adsorption tests with labeled bovine serum albumin.The PVDF showed the least, and the regenerated cellulose and nylon membranes showed the most protein binding.Nitrocellulose and mixed ester membranes were midway between.In tests measuring protein retention, PVDF retained the most bound protein when washed with detergents or 5% skimmed milk.All the membranes showed virtually the same binding capacity as measured by autoradiography when tested under electrotransfer conditions with Towbin's buffer.In passive adsorption tests, the membranes wxhibited a broad range of capacities but gave similar results in electrotransfer tests. These differences were ascribed to active migration of protein into the membrane matrix instead of simple diffusion and the increased hydrophobicity of Towbin's transfer buffer because of the inclusion of methanol.上面这段文字指出在被动扩散转移蛋白时，几种膜之间结合蛋白的能力差别明显；但是当使用转膜仪转移蛋白时，各种膜之间的差别就很小了。

硝酸纤维素膜(ＮC膜）得简介与生产原理概念硝酸纤维素膜(nitroceｌlulose filter mｅmｂraｎe，简称NC膜），在胶体金试纸中用做Ｃ/T线得承载体，同时也就是免疫反应得发生处。

NC膜就是生物学试验中ｚui重要得耗材之一。

ＮＣ膜得生产原理匀浆配比购买回来得原料硝酸纤维素粒子就是一种非常普遍得有机化学物,溶解形成混浆，在该浆体内,通过加入一定比例得试剂来调整zuｉ后形成得膜得性质，一般主要包含表面活性剂/高分子聚合物/盐离子/成型剂等溶解得一个缓冲体系内。

不同得厂家加入得溶液配方不一样,导致了产品得差异。

滚筒铺膜配好得匀浆通过滚筒，形成了一张薄膜，平摊在十分光滑得平面载体上。

过程与造纸非常相似。

成型当匀浆内得成型剂开始挥发，膜逐步干燥成型。

同时在这个过程中由于温度比较高，有些厂家在这个过程采取了在密闭腔体内成型,同时补充配方溶液得形式，来避免一些有效成分得蒸发.切割通过以上步骤生产出来得膜就是呈一个宽度极大得产品,宽度得大小直接与滚筒得大小相关,滚筒越大生产越方便,但设备得成本也越高、宽膜要经过切割才能成为我们购买到得25mm或18mｍ(或2０mm）宽得膜，而长度上,成品卷膜与宽膜得长度就是相同得、理论上可以让厂家切成您需要得任意宽度，但这样会造成原料得浪费与人力成本得增加，后来厂商在与试纸生产厂家得协调过程中,综合用料成本与生产便利性基本确定了上面说得宽度，以次为标准。

从生产过程,我们可以得知,NC膜本身已经添加了表面活性剂来改善亲水能力,而且已经存在有一定得缓冲系统(虽然对纸条测试影响不会很大)。

ﻫNC膜得选择膜得选择涉及到一个膜得分类标准问题，一个供应商可能提供这个膜就是8um,但另一个供应商告诉您膜就是135ｓ得。

这之间得区别与就是什么?uｍ指得就是膜孔径，而从上面膜得生产过程,我们可以瞧出，膜得孔径实际上就是没有办法界定得。

由于干燥成型等过程得非均一,膜得孔径也就是非均一得、膜孔径得说法实际上就是沿用了一直以来得一个形象称呼、而以秒为单位得定义为，每4cm膜,水得层析时间就是＊＊*s、该单位已经越来越被各大厂商所接受，成为了一个通用得比较标准、以下我们将采用s单位来进行交流。

Western Blot详解(原理、分类、试剂、步骤及问题解答)Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。

对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。

本文主要通过以下几个方面来详细地介绍一下Western Blot技术:一、原理二、分类i.放射自显影ii.底物化学发光ECLECFiv.底物DAB呈色三、主要试剂四、主要步骤五、实验常见的问题指南1.参考书推荐2.针对样品的常见问题3.抗体4.滤纸、胶和膜的问题的相关疑问6.染色的选择7.参照的疑问8.缓冲液配方的常见问题9.条件的摸索10.方法的介绍11.结果分析一、原理与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。

经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。

以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。

该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。

二、分类现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色，体同水平和实验条件的是用第一种方法，目前发表文章通常是用底物化学发光ECL。

只要买现成的试剂盒就行，操作也比较简单，原理如下（二抗用HRP标记）：反应底物为过氧化物+鲁米诺，如遇到HRP，即发光，可使胶片曝光，就可洗出条带。

三、主要试剂1、丙烯酰胺和N，N’-亚甲双丙烯酰胺，应以温热(以利于溶解双丙稀酰胺)的去离子水配制含有29%(w/v)丙稀酰胺和1%(w/v)N，N’-亚甲双丙烯酰胺储存液丙稀酰胺29g，N，N-亚甲叉双丙稀酰胺1g，加H2O至100ml。