茶叶中茶多酚含量的测定方法比较_贾有青

实验四茶叶中茶多酚含量的测定——高锰酸钾直接滴定法一、目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作二、原理茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。

根据消耗1mL 0.318g/mL的高锰酸钾相当于5.82mg茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。

三、仪器与试剂仪器：分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL白瓷皿。

试剂：1、0.1%靛红溶液：称取靛红1g加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为1.84的浓硫酸50mL，冷却后用蒸馏水定容至1000mL，如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称取靛红1g，加浓硫酸50mL，在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h，用蒸馏水定容至1000mL，过滤后贮于棕色瓶中。

2、0.630%草酸溶液：准确称取草酸6.3034g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。

3、高锰酸钾标准溶液：称取AR的高锰酸钾1.27g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。

准确吸取0.630%草酸溶液10mL，放入250ml锥形瓶中（平行3份），加入蒸馏水50mL，再加入相对密度为1.84的浓硫酸10mL，摇匀，在70~80℃水浴中保温5分钟，取出后用高锰酸钾进行滴定。

开始慢滴，待红色消失后再滴第二滴，以后可逐渐加快，边滴边摇，待溶液出现淡红色保持1分钟不变即为终点。

计算高锰酸钾溶液的百分比浓度。

四、测定步骤1、供测试液的准备：准确称取茶叶磨碎样品1g，放在250mL锥形瓶中，加入沸蒸馏水80mL，在沸水浴中浸提30分钟，然后抽滤、洗涤，滤液倒入100mL容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至100mL，摇匀。

2、测定：取200ml蒸馏水放入白瓷皿中，加入0.1%靛红溶液5mL，再加入供测试液5mL，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以1滴/s为宜，接近终点时应慢滴。

直到溶液由深蓝色转变为亮黄色为止，记下消耗的高锰酸钾毫升数。

实验四茶叶中茶多酚含量的测定——高锰酸钾直接滴定法一、目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作二、原理茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。

根据消耗1mL 0.318g/mL的高锰酸钾相当于5.82mg茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。

三、仪器与试剂仪器：分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL白瓷皿。

试剂：1、0.1%靛红溶液：称取靛红1g加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为 1.84的浓硫酸50mL，冷却后用蒸馏水定容至1000mL，如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称取靛红1g，加浓硫酸50mL，在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h，用蒸馏水定容至1000mL，过滤后贮于棕色瓶中。

2、0.630%草酸溶液：准确称取草酸6.3034g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。

3、高锰酸钾标准溶液：称取AR的高锰酸钾1.27g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。

准确吸取0.630%草酸溶液10mL，放入250ml锥形瓶中（平行3份），加入蒸馏水50mL，再加入相对密度为1.84的浓硫酸10mL，摇匀，在70~80℃水浴中保温5分钟，取出后用高锰酸钾进行滴定。

开始慢滴，待红色消失后再滴第二滴，以后可逐渐加快，边滴边摇，待溶液出现淡红色保持1分钟不变即为终点。

计算高锰酸钾溶液的百分比浓度。

四、测定步骤1、供测试液的准备：准确称取茶叶磨碎样品1g，放在250mL锥形瓶中，加入沸蒸馏水80mL，在沸水浴中浸提30分钟，然后抽滤、洗涤，滤液倒入100mL容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至100mL，摇匀。

2、测定：取200ml蒸馏水放入白瓷皿中，加入0.1%靛红溶液5mL，再加入供测试液5mL，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以1滴/s为宜，接近终点时应慢滴。

直到溶液由深蓝色转变为亮黄色为止，记下消耗的高锰酸钾毫升数。

2009年第2期TIANJIN SCIENCE&TECHNOLOGY创新技术0引言茶多酚又叫茶单宁，茶鞣质，是茶叶中多羟基酚类及其衍生物的总称，主要包括儿茶素类、黄酮类、花青素和酚酸4类物质，其中儿茶素类的含量占80%左右。

儿茶素中的主要成分有4种：表儿茶素（EC）、表没食子儿茶素（EGC）、表儿茶素没食子酸酯（ECG）、表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）。

茶多酚是茶叶中的主要生物活性物质[1]，具有优异清除自由基、抗衰老、抗氧化、抑制肿瘤细胞等药理功能，在日用化工、食品加工、医药等领域具有重要的应用。

我国的茶叶制品应用历史悠久，但高附加值的茶多酚生产工艺还有很大的改进空间。

本文对茶多酚的提取、含量检测，以及应用方向加以总结，其中一些新技术具有相当的发展潜力和推广价值。

1茶多酚的提取1.1溶剂萃取法溶剂萃取法[2]是目前工业化生产的主要方法，该方法将茶叶用极性溶剂浸渍，浸取液进行液液萃取分离，浓缩得到产品，收率为5%～10%，产品纯度为80%～98%。

萃取剂主要为乙酸乙酯。

萃取剂最终残留量是茶多酚产品的主要技术指标。

通常采用紫外－可见分光光度法测定乙酸乙酯的含量，为了达到较高的检出限和准确度，冯信平等人[3]采用气相色谱法进行检测乙酸乙酯含量，该方法成本较高，使用的有机试剂易造成环境污染和茶多酚自身污染。

1.2离子沉淀萃取法该方法主要是利用金属离子沉淀茶多酚而使其与咖啡碱分离。

茶叶经热水浸透后，加入沉淀剂即可得到茶多酚与金属离子的结晶性沉淀物，由于沉淀剂的选择性较高，产品的纯度较好，可达85%以上[4]。

韦星船等人[5]研究了利用微波和离子沉淀联合提取茶多酚的方法。

采用复合方法将微波提取和离子沉淀法结合起来，用联合离子的方法沉淀茶多酚萃取液。

该方法使用微波加热时间短，可以改善加热的质量，防止了有效成分的损失。

联合离子沉淀法沉淀茶多酚沉淀率高、速度快，防止了茶多酚在沉淀阶段的氧化，增加收率。

茶叶中茶多酚的检测方法，我们必须对茶多酚有一个比较详细的了解茶多酚因为其独特的分子结构，有很强的氧化性以及螯合性，所以能很好的清除人体内的自由基，起到抗氧化、抗衰老的效果；同样也因为其分子结构中的酚羟基，所以茶多酚有很好的螯合性能，能够与蛋白质，金属离子相结合。

据了解，茶多酚能与20多种离子产生络合，与其中10多种产生沉淀，再者，络合产物很多会产生明显的色泽变化。

所以茶多酚的检测方法有很多：1，蛋白质沉淀法：利用与蛋白质的络合沉淀特征检测茶多酚的含量；2，金属例子螯合法：就像GB/T8313-2002茶叶和GB/T21733-2008茶饮料中的检测方法一样，利用多酚羟基与铁离子的螯合变成蓝紫色的特性，在540nm出进行检测；3，氧化法：高锰酸钾与茶多酚的氧化滴定，但是这种方法误差较大，所以目前已经用的很少了；再就是GB/T8313-2008的福林酚法，利用福林酚能将茶多酚氧化然后自己被还原呈蓝色的特征。

目前使用的比较多的就是GB/T8313-2002的酒石酸亚铁法与GB/T8313-2008中的福林酚试剂法！酒石酸亚铁法作为茶多酚检测的经典方法在国内被应用了几十年，采用3.913的经验系数进行茶多酚的检测，但是在“食品添加剂茶多酚”的检测标准中则是以没食子酸作标准曲线，系数2.78。

同样的茶多酚检测，为什么会有不同的系数呢，很多人或许会疑惑？！但实际上3.913的的系数是以茶叶的乙酸乙酯分离物作为标定物质作标准曲线的，因为乙酸乙酯分离物中不仅仅包括了多酚类物质，还包括了一些其他内涵成分，所以检测结果会偏大，目前主要用于饮料行业中，而2.78的系数则主要用在植物提取物茶多酚领域，其主要区别在于采用的标定物不一致！当然酒石酸亚铁法也有自身的缺点：茶多酚是一种复合物，并非单一组分，其中包括了儿茶素，黄酮类，花青素等等，不同的组分与铁离子络合颜色并非完全一致，所以对于一般成分比较复杂的植物多酚并不适用！再来谈谈福林酚法：福林酚法主要利用福林酚的强氧化性，与多酚反应变蓝，在765nm处进行检测，当然了，福林酚还用于蛋白质的检测中，正是因为这点，所以福林酚并不能有效区分茶多酚，一些还原性氨基酸，植物中非多酚类酚性物质，抗坏血酸等等，这也是它的局限性。

茶多酚的检测方法茶多酚是指茶叶中的一类重要营养成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降低胆固醇等多种保健作用。

茶多酚的检测方法可以分为传统方法和现代方法两种。

1. 传统方法：传统方法主要是基于化学反应原理进行测定，如铁离子还原法、显色法、比色法和滴定法等。

铁离子还原法：茶多酚具有还原性，可以通过与铁离子反应生成蓝色络合物的程度来测定其含量。

该方法操作简单，但结果受干扰较大，准确性较差。

显色法：茶多酚可以与某些试剂发生着色反应，形成显色产物，如费林试剂、氢氧化钠等。

该方法操作简单，但灵敏度较低。

比色法：茶多酚可以通过与某种标准溶液进行比色来测定其含量。

这种方法简单易行，但需要标准溶液的配制和标定。

滴定法：通过滴定法测定茶多酚的总酚含量，常用的滴定剂有高锰酸钾溶液、亚硫酸钠溶液和硫酸铁溶液等。

这种方法操作简单，但耗时较长，准确性受到影响较大。

2. 现代方法：现代方法主要是基于仪器分析的方法，如色谱法、质谱法、光谱法和电化学法等。

色谱法：茶多酚可以通过色谱柱进行分离，然后使用紫外光检测器进行测定。

常用的色谱方法有高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱法（GC）。

这些方法操作复杂，但精确度和灵敏度较高。

质谱法：茶多酚可以通过质谱仪进行分析鉴定，如气质联用质谱（GC-MS）和液质联用质谱（LC-MS）。

质谱方法准确性高，但设备成本较高。

光谱法：茶多酚的检测可以通过紫外-可见光谱法（UV-Vis）进行，茶多酚在紫外光区域有特征吸收峰，可以通过测定吸光度来定量。

该方法快速、简单，但对样品的要求较高。

电化学法：茶多酚可以通过电化学方法进行检测，如循环伏安法、方波伏安法和电化学阻抗法等。

这些方法操作相对简单，较具灵敏度和准确性。

无论是传统方法还是现代方法，茶多酚的检测都需要一定的样品处理过程，如提取茶多酚、去除干扰物、浓缩和分离等。

不同的检测方法在选择上需要考虑实验条件、设备要求、样品种类和检测精度等因素。

目前，现代方法在茶多酚检测上具有准确性高、快速性好、灵敏度高的特点，逐渐取代了传统方法成为主流。

茶多酚的测定方法茶多酚（tea polyphenols）是指茶叶中所含的一类天然化合物，属于类黄酮类化合物，具有很强的抗氧化和抗癌作用。

茶多酚在茶叶中的含量与茶叶品种、制作工艺、生长环境等因素有关，因此，需要进行茶多酚的测定来评估茶叶的品质和营养价值。

目前常用的茶多酚测定方法主要包括显色法、比色法、高效液相色谱法（HPLC）和紫外分光光度法。

下面将详细介绍这些方法的原理和操作步骤。

1. 显色法：显色法是一种简单快速测定茶多酚含量的方法。

其原理是茶多酚与铁离子（Fe3+）在酸性条件下形成可见光吸收的蓝色络合物，通过检测吸光度来测定多酚的含量。

操作步骤：a. 将茶叶样品加入酸性溶液中（如硫酸）。

b. 加入一定浓度的铁离子。

c. 加热反应液，在紫外可见光谱仪上设置波长（一般为760 nm）进行吸光度检测。

d. 通过标准曲线法计算样品中茶多酚的含量。

2. 比色法：比色法是一种简化的茶多酚测定方法，它使用标准化学品来检测茶叶中的茶多酚含量，适用于快速测定大批量样品。

操作步骤：a. 将茶叶样品加入醇/酸混合溶液中，并进行超声处理，使茶多酚溶解。

b. 加入一定量的比色试剂（如费尔林试剂）。

c. 在紫外可见光谱仪上设置波长（一般为760 nm）进行吸光度检测。

d. 通过标准曲线法计算样品中茶多酚的含量。

3. 高效液相色谱法（HPLC）：HPLC是一种常用的茶多酚测定方法，它通过分离和定量各种茶多酚组分，能够提供更准确的结果。

操作步骤：a. 提取茶叶样品中的茶多酚。

b. 茶多酚提取物通过色谱柱进行分离，选择合适的流动相体系（如乙腈-水溶液），并设定合适的流速。

c. 通过检测波长（一般为280 nm）对各组分进行定量。

d. 通过标准曲线法计算茶叶样品中茶多酚的含量。

4. 紫外分光光度法：紫外分光光度法是一种通过茶多酚在紫外光区域（200-400 nm）的吸光特性来测定茶多酚含量的方法。

操作步骤：a. 将茶叶样品提取得到茶叶样品溶液。

实验七 茶叶中茶多酚含量的测定——高锰酸钾直接滴定法一、实验原理茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。

根据消耗1ml0.318g/ml 的高锰酸钾相当于5.82mg 茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。

二、实验试剂0.1%靛红溶液：称取靛红1g 加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为1.84的浓硫酸50ml ，冷却后用蒸馏水定容至1000ml ，如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称取靛红1g ，加浓硫酸50ml ，在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h ，用蒸馏水定容至1000ml ，过滤后贮于棕色瓶中。

0.630%草酸溶液：准确称取草酸6.3034g ，用蒸馏水溶解后定容至1000ml 。

高锰酸钾标准溶液：称取AR 的高锰酸钾 1.27g ，用蒸馏水溶解后定容至1000ml 。

准确吸取0.630%草酸溶液10ml ，放入250ml 锥形瓶中（平行2份），加入蒸馏水50ml ，再加入相对密度为1.84的浓硫酸10ml ，摇匀，在70~80℃水浴中保温5分钟，取出后用高锰酸钾进行滴定。

开始慢滴，待红色消失后再滴第二滴，以后可逐渐加快，边颠边摇，待溶液出现淡红色保持1分钟不变即为终点。

按下式计算高锰酸钾溶液的浓度：三、仪器分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500ml 白瓷皿。

四、测定步骤⑴供测试液的准备：准备称取茶叶磨碎样品1g ，放在200ml 三角烧瓶中，加入沸蒸馏水80ml ，在沸水浴中浸提30分钟，然后抽滤、洗涤，滤液倒入100ml 容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至100ml ，摇匀。

⑵测定：取200ml 蒸馏水放入白瓷皿中，加入0.1%靛红溶液5ml ，再加入供测试液5ml ，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以1()44KMnO 63.100%KMnO =浓度ω滴/s 为宜，接近终点时应慢滴。

茶叶中茶多酚的提取工艺及其含量测定一、本文概述本文旨在探讨茶叶中茶多酚的提取工艺及其含量测定方法。

茶多酚是茶叶中的重要成分，具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种生物活性，对人体健康具有显著的益处。

因此，研究茶叶中茶多酚的提取工艺和含量测定方法，对于茶叶的品质控制、新产品开发以及茶产业的可持续发展具有重要意义。

本文将首先介绍茶多酚的基本性质及其在茶叶中的分布情况，为后续提取工艺和含量测定方法的研究提供理论基础。

接着，将详细阐述茶多酚的提取工艺，包括提取原料的选择、提取溶剂的选用、提取条件的优化等方面，以期获得高效、环保、经济的提取方法。

在此基础上，本文还将探讨茶多酚的含量测定方法，包括紫外可见光谱法、高效液相色谱法、气相色谱法等常用的分析方法，并对各种方法的优缺点进行比较和评价。

通过本文的研究，旨在为茶叶加工企业、科研机构以及广大茶叶爱好者提供一套科学、实用的茶多酚提取工艺和含量测定方法，为茶叶的品质控制和新产品开发提供技术支持，推动茶产业的健康发展。

二、茶多酚的提取工艺茶多酚（Tea Polyphenols）是茶叶中的重要活性成分，具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎、抗癌等。

因此，提取茶多酚的工艺研究对于茶叶深加工和茶多酚的开发利用具有重要意义。

选择品质优良、无污染的茶叶作为提取原料。

通常，绿茶中茶多酚的含量较高，因此绿茶是提取茶多酚的首选。

将选好的茶叶进行粉碎处理，以提高后续提取过程中的传质效率。

茶多酚的提取通常采用有机溶剂提取法，常用的溶剂有乙醇、丙酮、甲醇等。

其中，乙醇因其毒性低、安全性高、提取效果好而被广泛应用。

乙醇的浓度、温度以及提取时间等因素都会影响茶多酚的提取效果。

常用的茶多酚提取方法包括浸提法、回流提取法、超声提取法等。

其中，回流提取法因其提取效率高、操作简便而被广泛应用。

回流提取法是将茶叶粉末与乙醇混合后，在加热条件下进行回流提取，使茶多酚充分溶解在乙醇中。

提取液经过浓缩后，可采用大孔树脂吸附法、柱层析法等方法进行纯化，以去除杂质，提高茶多酚的纯度。

茶叶中茶多酚的含量测定1、实验目的：掌握实验操作的趣味性，了解实验内容在实际生活中的应用，充分理解和掌握茶多酚含量在现实生活中的作用，进一步熟悉茶叶中茶多酚测定的原理及操作。

2、实验原理：茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物。

用分光光度法测定其含量。

3、仪器和用具：分析天平 (感量. 分光光度仪及实验常用仪器4、试剂和溶液：所用试剂应为分析纯(AR),水为蒸馏水。

在茶叶水浸出物中与亚铁离子产生络合反应的酚性化合物，均称茶多酚。

5、操作方法：秤取5g茶叶加入100mL水煮沸，静止冷却20分钟，加压过滤，量酒石酸亚铁溶液：称取1g (准确至0.0001g) 硫酸亚铁和5g 取滤液体积记为V1(准确至0.0001g)酒石酸钾钠，用水溶解并定容至1L(溶液应避光，低温保存，有效期一个月)。

6、磷酸盐缓冲液：磷酸氢钠: 称取23.377g磷酸氢二钠，加水溶解后定容至1L。

磷酸二氢钾：称取9.078g磷酸二氢钾，加水溶解后定容至1L。

取上述磷酸氢二钾溶液85ml和磷酸二氢钾溶液15ml混合均匀。

7、准确称取上述试液1mL ，注入25mL容量瓶中加水4mL和酒石酸亚铁溶液5ml 充分混合，再加入pH=的缓冲溶液至刻度，用10mm比色皿，在波长等于540nm出，以试液空白溶液做参比溶液，测定吸光度为A.8、茶叶中茶多酚的含量，以干态质量百分率表现，按下式计算：A××2 V1茶多酚(％)＝────────× --------- ×100结果=1000 1×m式中——滤液体积记为VmL1m——试样的质量，g；A——试样的吸光度；此次实验测定A=——用10mm比色杯，当吸光度等于时，每毫升茶汤中含茶多酚相当于。

注意：a. 应取两次测定的算术平均值作为标准。

同一样品的两次测定值之差，每100g试样不得超过。

b.应用的法子；用分光光度法测定其含量.c.测定的结果 (取小数点后一位)；化学化工学院环境工程XX班学生：XXX2010/11/03。