Cinobufagin_HNMR_18850_MedChemExpress

格式：pdf
大小：204.82 KB
文档页数：1

下载文档原格式

分子生物学词汇(中英文对照表 )

蜂胶中新的抗肿瘤成分及其抑瘤机理新渔蜂胶网

蜂胶中新的抗肿瘤成分及其抑瘤机理新渔蜂胶网随着蜂胶抗肿瘤研究的深入，蜂胶中新的抗肿瘤成分不断被分析、分离出来。

Arjun等在蜂胶抗癌成分的分析分离中做了大量工作，他们从巴西蜂胶的甲醇提取物溶于乙酸乙脂的部分中得到一种新成分：3-羟基-2,2-二甲基-8-异戊二烯基-6-丙稀酸及其他22个已知的化合物，将这些物质作用于HT1080，26-L5细胞，进行毒性实验，其中最强毒性物质的ED50≤10μg/ml。

他们又从巴西蜂胶的甲醇提取液中分离出两种新的苯丙呋喃衍生物propolis-benzofurans A, B。

通过光谱分析确定了它们的结构。

这两种化合物对26-L5和HT-1080细胞都具有轻微的细胞毒作用。

在对中国蜂胶中的化学物质及其抗增殖活性的研究中，又从中国蜂胶甲醇提取物溶于乙酸乙脂的部分分离出两个新的黄酮类物质：3-O-[(S)-2-methylbutyroyl] 短叶松素和6-苯丙稀盐基柯因，及其他12个已知化合物。

通过分光镜及化学分析得出其结构。

被分离出的化合物作用于5个肿瘤细胞系均显示有增殖抑制作用。

从荷兰蜂胶的甲醇提取物中他们分离出了具有抗肿瘤细胞增殖的4种黄酮类化合物，7种苯乙烯酸衍生物及2种新型的甘油衍生物，通过光谱分析阐明了这些化合物的化学结构。

最后将这些化合物作用于鼠结肠癌细胞26-L5，鼠黑色素瘤细胞B16-BL6，人纤维肉瘤细胞HT-1080及人肺腺癌细胞A549，观察它们抑制细胞增殖的活性。

结果表明，咖啡酸类化合物是荷兰蜂胶中抑肿瘤细胞增殖的活性物质，它们的抗氧化活性在抑肿瘤细胞增殖中起重要作用。

Chen从台湾蜂胶中分离出两种新的多酚黄酮类物质propolin A 和propolin B，两种化合物对3种肿瘤细胞系都有毒性作用，其中propolin B诱导肿瘤细胞的凋亡而对细胞周期无影响，propolinA, B 物质都有强抗氧化作用，对大多数自由基有清除作用。

他们又进一步从台湾蜂胶中分离出propolin C，通过核磁共振和高分辨率质谱仪确定了propolin C的结构。

厚朴多酚的提取及体内抗氧化研究

29--耕作栽培•生理生化　DOI:10.16498/ki.hnnykx.2018.003.008厚朴（Magnolia officinalis ）为我国著名的中药，具有燥湿消痰、下气除满的功效，用于湿滞伤中、脘痞吐泻、食积气滞、腹胀便秘、痰饮喘咳[1]。

厚朴树皮具有化湿导滞、下气除满、化食消痰、驱风镇痛等功效；种子有明目益气之功效，芽可作妇科药用，还可以加入癌症药物中[2]。

目前，藿香正气丸、开郁顺气丸、香砂养胃丸、润通口服液等常用药中均含有厚朴，其主要有效成分为厚朴酚与和厚朴酚。

厚朴树皮中主要含有木脂素类化合物、挥发油、生物碱等成分[3]。

木脂素类化合物是厚朴中分离出的最主要化学成分，迄今为止，已分离出20多种，多数属于新木脂素，主要有厚朴酚与和厚朴酚。

厚朴中大约含有1%的挥发油，其中大部分都具有镇静作用[3]，据研究，将提取的厚朴挥发油进行GC-MS 研究，分离出了48种成分，按叶油醇及其异构体是主要成分，约占挥发油总量的40%~55%[4]。

挥发油普遍存在于树皮、根皮、树叶和花中，但是花与其他部位的挥发油的组分有较大的区别[5-6]。

厚朴树皮中生物碱含量较高，王洪燕等[7]对凹叶厚朴中生物碱的化学成分进行研究，得到9个异喹啉生物碱。

除此之外，有学者从厚朴树皮材料中分离出了槲皮苷、芦丁、花生酸、棕榈酮、二十六烷醇、β-谷甾醇、胡萝卜苷[8]。

自由基是人体生命活动中多种生化反应产生的正常代谢产物。

在正常情况下，人体内的自由基是处于不断产生与被清除的动态平衡中，自由基是机体有效的防御系统，对维持机体正常代谢有一定促进作用。

但是自由基产生地过多或者清除地过慢，就会对人体细胞膜及大分子（如蛋白质、DNA ）产生一系列损害，加速机体的衰老过程并诱发各种疾病[9-10]。

因此，一些化学合成的抗氧化剂被广泛用于食品和医药领域。

但最近研究表明合成的氧化剂具有各种缺陷，例如BHT 、BHA ，由于它们会对人体器官造成伤害而遭到禁用。

天冬酰胺合成酶通过促进β-catenin核转位驱动胆管癌转移

天冬酰胺合成酶通过促进β-catenin 核转位驱动胆管癌转移*褚珍珍1，2，周栩萱1，2，刘力豪1，张鲍欢3△，姚楠1，2△（1暨南大学基础医学院病理生理学系，广东广州 510632；2国家中医药管理局病理生理科研实验室，广东广州510632；3暨南大学基础医学院形态学实验教学中心，广东广州 510632）［摘要］目的：检测天冬酰胺合成酶（ASNS ）在胆管癌（CCA ）中的表达情况，探讨ASNS 在CCA 转移中的作用及其机制。

方法：通过公共数据库分析各肿瘤组织中ASNS 的mRNA 表达；收集CCA 患者病理组织（n =27），构建硫代乙酰胺诱导的大鼠自发CCA 模型和左中位胆管结扎联合二乙基亚硝胺诱导的小鼠自发CCA 模型，通过免疫组化、Western blot 和免疫荧光法检测ASNS 蛋白表达。

采用CCK8、划痕和Transwell 实验检测ASNS 对人CCA 细胞HuCCT1和HCCC -9810增殖、迁移和侵袭的影响。

构建ASNS 稳定敲减的CCA 细胞株HuCCT1shNC 、HuCCT1shASNS 、HCCC -9810shNC 和HCCC -9810shASNS ，通过肝原位种植和尾静脉注射研究ASNS 对CCA 细胞肝内生长和肺转移的影响。

利用公共数据库富集与ASNS 相关的信号通路，并用免疫荧光和Western blot 验证相关分子机制。

结果：无论在人或动物CCA 组织中，ASNS 表达水平均高于癌旁组织（P <0.01）。

ASNS 以酶活性非依赖性方式促进CCA 细胞HuCCT1和HCCC -9810的增殖、迁移与侵袭。

生物信息学分析显示，β-catenin 在ASNS 高表达的CCA 组织中富集，ASNS 通过促进β-catenin 核转位，启动CCA 细胞上皮-间充质转化（EMT ）。

β-catenin 抑制剂XAV -939可显著抑制CCA 细胞的侵袭与迁移。

细胞内叠氮化物反应探针的英文

细胞内叠氮化物反应探针的英文Intracellular Nitrogenase Reaction Probes: Applications and Advancements.Intracellular nitrogenase reaction probes have emerged as crucial tools in modern biochemistry, enabling researchers to monitor and understand the intricate nitrogen metabolism within cells. These probes, often fluorescently labeled, allow for real-time visualization of nitrogen fixation and associated processes, thereby providing insights into the dynamic nature of nitrogen metabolism.Background and Importance.Nitrogen is an essential element for all known forms of life, playing a pivotal role in amino acid synthesis, nucleic acid structure, and various other biological processes. However, nitrogen in its free form (N2) is unavailable for direct biological utilization due to itsinertness. Therefore, organisms rely on nitrogenases, a class of enzymes that catalyze the conversion of N2 into ammonia (NH3), a biologically usable form of nitrogen.Within cells, nitrogenase enzymes are often embedded within complex systems, involving multiple cofactors and electron transport chains. Monitoring these reactionswithin the cellular milieu is challenging due to the dynamic nature of the cellular environment and the often-subtle changes in substrate concentration. Intracellular nitrogenase reaction probes have been developed to overcome these challenges, providing a window into the intracellular world of nitrogen metabolism.Types of Intracellular Nitrogenase Reaction Probes.1. Fluorescent Probes: These probes are labeled with fluorescent molecules that change their emission properties upon interacting with nitrogenase or its intermediates. For example, fluorophores such as fluorescein or rhodamine can be conjugated to specific substrates or inhibitors of nitrogenase, allowing for the detection of enzymaticactivity through fluorescence microscopy or flow cytometry.2. Bioluminescent Probes: These probes emit light through a chemical reaction triggered by nitrogenase activity. Bioluminescent probes offer the advantage of being self-luminous, eliminating the need for external excitation sources.3. Radiolabeled Probes: Radiolabeled probes incorporate radioactive atoms (e.g., carbon-14 or tritium) into substrates or inhibitors of nitrogenase. The subsequent detection of radiolabeled products provides quantitative information about enzyme activity. However, the use of radiolabeled probes is limited due to safety concerns and the need for specialized equipment.Applications of Intracellular Nitrogenase Reaction Probes.1. Studying Nitrogen Fixation Pathways: By monitoring the activity of nitrogenase within cells, probes can reveal the preferred nitrogen fixation pathway utilized bydifferent organisms. This information is crucial for understanding the adaptability of microorganisms to varying nitrogen sources and environmental conditions.2. Analyzing Nitrogen Metabolism in Response to External Stimuli: Intracellular probes can be used to study how nitrogen metabolism is affected by external factors such as changes in nutrient availability, pH, or temperature. Such studies can provide insights into the mechanisms underlying cellular responses to environmental perturbations.3. Drug Discovery and Therapeutics: Nitrogenase inhibitors have been explored as potential therapeutics for treating diseases associated with abnormal nitrogen metabolism, such as cancer or certain infectious diseases. Intracellular probes can aid in the identification of effective inhibitors by allowing for high-throughput screening of candidate compounds.Future Directions.With the continuous advancement of biotechnology and imaging techniques, intracellular nitrogenase reaction probes are poised to make significant contributions to our understanding of nitrogen metabolism. Future research may focus on developing probes with improved sensitivity and specificity, enabling the detection of nitrogenase activity in single cells or even subcellular compartments. Additionally, the integration of probes with other omics technologies (e.g., genomics, proteomics, or metabolomics) could provide a comprehensive picture of nitrogen metabolism within cells, leading to new insights and potential therapeutic targets.In conclusion, intracellular nitrogenase reaction probes have emerged as invaluable tools for studying nitrogen metabolism within cells. Their ability to monitor enzymatic activity in real-time, combined with their versatility and sensitivity, makes them critical for advancing our understanding of nitrogen metabolism and its role in health and disease. As technology continues to evolve, these probes will play increasingly important roles in fundamental and applied research.。

迷迭香酸对过氧化氢处理下的皮肤黑色素瘤的抗氧化作用(原文翻译)

迷迭香酸（罗丹酚酸）对H2O2处理过的皮肤黑色素瘤细胞的抗氧化作用Sun Mi Yoo1 and Jeong Ran Kang2*1.韩国光州500-741号东冈大学美容系2.韩国首尔143-701号建国大学生物工程系2009.2.6收到 2009.4.17接收本学科旨在检测迷迭香酸对人工孵育的皮肤黑色素瘤细胞在ROS下的抗氧化作用。

通过XTT比色法，以细胞毒性和抗氧化作用来分析细胞粘附活性，DPPH自由基清除活性以及H2O2处理1-10h和未经处理的两种情况下乳酸脱氢酶的活性。

用20-110 μM 的H2O2处理皮肤黑色素瘤细胞5-7h后，细胞活性的降低呈剂量和时间依赖性。

通过XTT比色法测得H2O2的半抑制浓度（IC50 ）为90μM。

同时H2O2增强了LDH细胞的剂量依赖性。

用50-90μM的H2O2处理8h后测得LDH50为60 μM H2O2。

迷迭香酸能增强细胞活性和DPPH自由基清除活性，降低乳酸盐脱氢酶的活性。

细胞的H2O2处理证实了对人工孵育的皮肤黑色素瘤细胞的强抗氧化作用。

通过H2O2的处理，迷迭香酸能在细胞内能增强细胞活性和DPPH 自由基清除活性，降低乳酸盐脱氢酶的活性。

这被认为是迷迭香酸对ROS（ROS）如H2O2的抗氧化作用。

Key words：DPPH-radical scavenging, LDH, rosmarinic acid, XTT assay关键字：DPPH自由基清除活性，乳酸脱氢酶，迷迭香酸，XTT比色法据研究发现，ROS通过氧化应激对细胞的损伤和一些脑部疾病比如帕金森症或心脏疾病例如心肌梗塞之间有很大的关联[Difazio et al., 1992; Delanty and Dichter, 1998].尤其是研究人员认为ROS是皮肤老化的一个主要的因素后，一直试图从ROS方面研究衰老。

[Yokozawa et al., 1998].据研究表明，ROS的氧化应激会通过萎缩细胞引起各种疾病，例如超氧自由基、H2O2（H2O2）或羟基自由基的巯基蛋白反应中断酶的活性，破坏脱氧RMA（DNA）或RMA（RNA），诱导细胞膜脂质过氧化。

非甾体抗炎药洛索洛芬钠的合成

非甾体抗炎药洛索洛芬钠的合成吴朝刚;周雄飞;庄程翰;沈杭州;张兴贤【摘要】The key intermediate, methyl 2-(4-chloromethylpheny1)propionate(7), was prepared by five steps of ketalization, rearrangement, hydrolysis, esterification and chloromethylation, using 1-phenyl-2-chloro-1-one as starting material.Loxoprofen sodium with overall yield of 36% was synthesized from 7 by phase-transfer catalyzed alkylation with ethyl 2-oxocyclopentanecarboxylate, and then decarboxylation and salt formation. The structure was confirmed by 1H NMR and MS(ESI).%以1-苯基-2-氯-1-酮为原料,经缩酮保护、重排、水解、酯化及氯甲基化等反应制得关键中间体2-(4-氯甲基苯基)丙酸甲酯(7);7与2-乙氧羰基环戊酮缩合后,再经脱羧及成盐反应合成了洛索洛芬钠,总收率36%,其结构经1H NMR和MS(ESI)确证.【期刊名称】《合成化学》【年(卷),期】2017(025)004【总页数】4页(P356-359)【关键词】1-苯基-2-氯-1-酮;氯甲基化反应;非甾体抗炎药;洛索洛芬钠;药物合成【作者】吴朝刚;周雄飞;庄程翰;沈杭州;张兴贤【作者单位】浙江普洛家园药业有限公司,浙江东阳 322118;浙江普洛家园药业有限公司,浙江东阳 322118;浙江普洛家园药业有限公司,浙江东阳 322118;浙江工业大学药学院, 浙江杭州 310032;浙江工业大学药学院, 浙江杭州 310032【正文语种】中文【中图分类】O621.3;R914.5洛索洛芬钠(1)，化学名为2-[4-(2-氧代环戊基甲基)苯基]丙酸钠二水合物，由日本三共公司研发，于1986年首次在日本上市，临床用于类风湿性关节炎、腰痛、肩周炎、颈肩腕综合症等的抗炎镇痛、手术、外伤及拔牙后的镇痛消炎和急性上呼吸道炎症的解热镇痛等[1]。

化学仿制药参比制剂目录(第六十七批)

1.85GBq/5.0ml
株式会社
未进口原研药品
67-22
普瑞巴林缓释片
Pregabalin Extended release Tablets/Lyrica Cr
165mg
Pf Prism CV/UPJOHN US 2 LLC
未进口原研药品
美国橙皮书
67-23
普瑞巴林缓释片
Pregabalin Extended release Tablets/Lyrica Cr
国际公认的同种药品
美国橙皮书
67-34
头孢地尼干混悬剂
Cefdinir for Oral Suspension
125mg/5mL
Aurobindo Pharma Limited
美国橙皮书
67-35
蔗糖铁注射液
Iron Sucrose Injection/Venofer
5ml:100mg铁和1.6g蔗糖
0.25%
（10ml:25mg）
Hospira Inc
未进口原研药品
美国橙皮书
67-27
左卡尼汀口服溶液
Levocarnitine Oral Solution/CARNITOR SF
10ml：1g
Leadiant Biosciences, Inc.
未进口原研药品
美国橙皮书
67-28
碳酸氢钠血滤置换液（钾4mmol/L）
Hemofiltration Replacement Fluid of Sodium Bicarbonate
（4mmol/L Potassium Calcium free）/PrismaSol
5000ml（250ml/4750ml）
BAXTER HEALTHCARE CORP

人参皂苷酶Ⅲ型转化人参皂苷Rc制备稀有皂苷C-Mc

人参皂苷酶Ⅲ型转化人参皂苷Rc制备稀有皂苷C-Mc李冠亨;刘春莹;徐龙权;林完泽;鱼红闪【摘要】利用基因构建克隆的E.coli C41菌产人参皂苷酶Ⅲ型,研究了酶转化人参皂苷Rc制备高活性稀有皂苷C-Mc的方法.结果发现,人参皂苷酶Ⅲ型先水解人参皂苷Rc的3-O-末端葡萄糖基生成C-Mc1,再水解C-Mc1的3-O-葡萄糖基生成C-Mc.人参皂苷酶Ⅲ型水解4.8 g的人参皂苷Rc,得到2.8 g产物,经HPLC检测,其纯度为90%.经核磁共振检测,产物结构为20-O-α-L-阿拉伯呋喃糖基-(1→6)-β-D-葡萄糖基-20(S)-二醇苷元,即C-Mc.%To study the enzymatic conversion from ginsenoside Rc to the rare ginsenoside C-Mc with high active, the ginsenosidase Ⅲ was expressed from recombinant Escherichia coli C41 and its enzymatic transformation processes were explored.The 3-O-glucopyranoside end of ginsenoside Rc was hydrolyzed to C-Mc1 by ginsenosidase Ⅲ, then C-Mc1 was transformed to C-Mc.4.8 g ginsenoside Rc was hydrolyzed to 2.8 g products by ginsenosidase Ⅲ, of which purity could reach to 90% determined by HPLC.The result of NMR showed that its structure was 20-O-[α-L-arabinofuranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl]-20(S)-protopanaxadiol, that was C-Mc.【期刊名称】《大连工业大学学报》【年(卷),期】2017(036)004【总页数】5页(P250-254)【关键词】稀有人参皂苷;人参皂苷酶Ⅲ型;高效液相色谱;核磁共振【作者】李冠亨;刘春莹;徐龙权;林完泽;鱼红闪【作者单位】大连工业大学生物工程学院, 辽宁大连 116034;大连工业大学生物工程学院, 辽宁大连 116034;大连工业大学生物工程学院, 辽宁大连 116034;韩京国立大学生命科学学院, 京畿道安城 456-749;大连工业大学生物工程学院, 辽宁大连 116034【正文语种】中文【中图分类】TS201.2;Q946.83生晒参和西洋参中80%～90%的皂苷为Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re和Rg1，这些人参皂苷在人体内吸收率低、活性低[1-3]；而人参稀有皂苷C-K、Rh2、C-Mc等更容易被吸收，具有抗疲劳、抗癌等生理功能[4-6]。

新型镇痛药ω-芋螺毒素的合成等效物Ziconotide

新型镇痛药ω-芋螺毒素的合成等效物ZiconotideChineseJournalofNewDrugs2005,V o1.14No4[2][3][4][5][6][7][8][9][参考文献]RashidM,ManivetP,NishioH,etalIdentificationofthebind—ingsitesandselectivityofsarpogrelate,anovel5一HT2antagonist,tohuman5-HT2A,5-HT2Band5-HT2freceptorsubtypesby molecularmodeling[JjlLSci,2003,73(2):193207.GrayJA,RothBLParadoxicaltraffickingandregulationof5一HT(2A)receptorsbyagonistsandantagonists[J]BrainResBull,2001,56(5):441451QiR,OzakiS,SatohK,etalQuantitativemeasurementofvariOUS5一HTreceptorantagonistsonplateletactivationinducedbyserotonin[J].ThrombRes,1996,81(1):43—54.NakawaK,KariyazonoH,MasudaH.eta1.Effectofsarpogre—latehydrochlorideonadenosinediphosphateorcollagen—induced plateletresponsesinarteriosclerosisobliterans[J].B,)(g"Fibrinolysis,2002,12(5):391397KandabashiT,ShimokawaH,MukaiY.etalInvolvementofrho—kinaseinagonists—inducedcontractionsofarterioscler0tichu marlarteries【Jj.ArteriosclerThrombV ascBiol,2002,22(2): 243248.MikawaK,AkamatsuH,NishinaK.etalTheeffectsofsar—pogrelateonsuperoxideproductionbyhumanneutrophils[J]. RegAnesthPainMed,2000,25(2):181—186.Y amashitaT,KitamoriK,HashimotoM.eta1.Conjunctiveef—fectsofthe5HT2receptorantagonist,sarpogrelate,oHthrombol—ysiswithmodifiedtissueplasminogenactivatorindifferentlaser—inducedthrombosismodels[J]Haemostasis,2000,30(6): 321332.SatomuraK,TakaseB,HamabeA,eta1.Sarpogrelate,aspecific5-HTreceptorantagonist,imporvesthecoronarymicrocirculation incoronaryarterydisease[J].ClinCardiol,2002,25(1):2832.SetoguchiY,OhnukiT,RashidM,eta1.Effectofchronicad—ministrationofsarpogrelateonsystolicbloodpressureofsponta一[10][12][13][14][15][16][17]中国新药杂志2005年第14卷第4期neouslyhypertensiverats:comparisonwithquinapril[J]Phar—macology,2002,64(2):71—75IgarashiM,OkudaT,KogaM,etalChangesinplasmasero—toninconcentrationandaccelerationplethysmogramsinpatientswithRaynaud'sphenomenonafterlong—termtreatmentwitha5一HTreceptorantagonist[Jj.JDermatol,2000,27(10):643650.IsrailovaM,SuzukiF,TanakaT,eta1.Bindingandfunctional affinityofsarpogrelate,itsmetabolitem一1andketanserinforhu—manrecombinantalpha一1adrenoceptorsubtypes[J].Pharnlacol—ogy,2002,65(2):69—73BrasilD,TemsahR,KumarK,etalBlockadeof5一HT(2A)re—ceptorsbysarpogrelateprotectstheheartagainstmycardioalin farctioninrats[J].JCardiovascPharmacolThPr,2002,7(1):5359FujitaM,MizunoK,MamiH,etalSarpogrelatetreatmentre—ducesrestenosisaftercoronarystenting[J]AmHeartJ,2003,145(2):el6WatanabeT,PakalaR,KatagiriT,etalMonocytechemotactic protein1amplifiesserotonininducedvascularsmoothmusclecell proliferation[J]JV ascRes,2001,38(4):341—349OriguchiN,ShigematsuH,MutoTAnplag,aselective5HTre—ceptorantagonist,reducesstenosisinducedbyballoninjuryinthe hypercholesterolaemicrabbit[JjlntAngiol,1997,16(3): 204—209.HayashiT,SumiD,MutoT,etalSarpogrelateHCI,aselective5HTreceptorantagonist.retardstheprogressionofarterioscle—rosisthroughanovelmechasm[J]Arteriosclerosis,2003,168 (1):2331DoggrellSA.TheroleOf5一HTonthecardiovascularandrenal systemsandtheclinicalpotentialof5HTmodulation[J:.Expert OpinlnvestigDrugs,2003,12(5):805823(接受日期:200410—30)新型镇痛药∞.芋螺毒素的合成等效物Ziconotide陈时宏(厦门北大之路生物工程有限公司厦门生物工程技术研究中心,厦门361009) [摘要]m一芋螺毒素的合成等效物Ziconotide作为一种新型非吗啡类镇痛剂,是首个应用于临床的具有神经元特异性的N一型电压敏感型性钙通道阻滞剂.大量临床前和临床资料证明,通过鞘内注射Ziconotide治疗严重慢性疼痛,可缓解其他治疗手段包括鞘内注射吗啡无效的疼痛;且长时间使用该药物不会产生耐受性和成瘾性.[关键词]Ziconotide;鞘内注射;N一型电压敏感性钙通道阻滞剂;镇痛作用[中图分类号]R971.2;R914.5[文献标识码]A[文章编号]1003—3734(2005)040490—06Ziconotide,anovelantin0ciceptiVeagentCHENShi—hong(XialllenResearchCenterofBiotechnology,XiamenPKUBioPark,Xiamen361009.China )[Abstract]Ziconotideisanovelnon—opioidanalgesics,developedforthetreatmentofseverechronicpain.Ziconotideisthesyntheticequivalentoftheconesnailpeptide(D—conotoxinMVIIA,the--——490?--——ChineseJournalofNewDrugs2005,V o1.14No.4主旦新药苤查笙第鲞箜塑firstofaneurone—specificN—typevoltage—sensitivecalciumchannelblocker.Clinicalstudiesdemonstrat—edthatintratheralziconotidemaybeeffectiveinpatientswithpainthatisrefractorytoopioidth erapyorthosewithintolerableopioid—relatedadverseeffects.Therewasnoevidenceoftolerancetoziconotideorofaddictivebehaviorinanimalsandhuman.[Keywords]ziconotide;intrathecaladministration;N—typevoltage—sensitivecalciumchannelblocker;antinociceptiveeffectZiconotide是首个应用于临床的具有神经元特异性(neurone—specific)的N一型电压敏感型性钙通道(voltage—sensitivecalciumchannel,VSCC)阻滞剂¨.作为一种新型非吗啡类镇痛剂,该药物(商品名Prialt)已分别于2004年底和2005年初获得美国FDA和欧盟(EC)的上市许可_2-3.通过鞘内(in—tratheca1)输注本品用于治疗严重慢性疼痛,可缓解其他治疗手段包括鞘内注射吗啡无效的疼痛;且长时间使用该药物不会产生耐受性和成瘾性.1化学结构和性质本品是25个氨基酸组成的聚合阳离子肽(polycationicpeptide)_1,43,含有的碱性氨基酸包括4个赖氨酸和2个精氨酸;等电点pI是l1.2l5,在体液中以阳离子形式存在.本品的分子式是C02H.72N6O2,相对分子质量是2639.12,CAS化学物质登记号是107452—89—1,氨基酸序列如下:H—Cys—Lys..Gly..Lys..Gly..Ala..Lys..Cys..Ser..Arg..Leu..Met..Tyr..Asp..Cys??Cys??Thr??Gly??Ser??Cys??Arg??Ser??Gly—-Lys??Cys??Hecyclic(1.16),(8—20),(15—25)一tris(disulfide)一.本品分子中的6个半胱氨酸残基通过3对二硫键相连的结构对其药理活性起重要作用,.其三维空间结构已用二维核磁共振波谱测定出;通过构效分析已确定其与钙通道结合的药效团_l,'7l:2位的赖氨酸残基,10位和21位的精氨酸以及N一端是该分子与N一型VSCC相互作用的重要部位l5.2作用机制N一型VS(,C阻滞剂作为一类新型药物,可选择性地阻断负责疼痛信号传导的神经通道,从而发挥镇痛作用.按结构和电生理的角度,VSCCs至少包括5种类型:L,N,T,P和Q型.其中N一型VSCC是神经细胞所特有的,它可调节去极化引起的钙离子内流和控制一些钙离子依赖过程包括神经元兴奋性和神经递质的释放l7.本品是∞一芋螺毒素(∞一conotoxinMVⅡA)的合成等效物,该毒素多肽是从一种食鱼芋螺(Conus magus)分泌的毒素中分离出的.动物研究表明:本品与N一型VSCC有着高度的亲和力(Kn=10pmol? L)J,能特异性地结合并阻断N一型VSCC,阻断钙内流,该作用具有可逆性.鞘内注射本品所产生的镇痛作用是通过阻断神经递质从主要的伤害感受性传人神经(primarynociceptiveafferents)释放并阻止疼痛信号传播至脑.3临床前安全性评价毒理学研究表明,在高于临床人用剂量下,本品无器官特异性,无致突变和致畸作用l8.在28d的亚急性毒性实验中_4,犬和大鼠对鞘内持续恒速滴注28d的高剂量(分别是1500和300ng?kg～?h)具有很好的耐受性.鞘内长期滴注实验表明,本品不影响临床血液学和生化指标,也无指示靶器官毒性作用的组织病理学方面的发现.动物静脉,脑室内或鞘内途径给予高剂量本品后会出现剂量依赖性的摇晃行为(shakingbehav—ior),共济失调,身体失衡和活动力(1ocomotoractivi—ty)增加等,一般可维持整个滴注过程,随着治疗的继续,这些反应会减弱直至停止,滴注后完全恢复.以上作用是∞一芋螺毒素家族中的N.型VSCC阻滞剂的一个特征l4.清醒大鼠静脉注射本品后可使全身血压剂量依赖性降低_l,,这主要是由于拟交感神经递质释放的阻断以及肥大细胞释放组胺引起的.该化合物的抗交感作用部分是通过阻断神经节后拟去甲肾上腺素能神经末梢去极化引起的钙内流及抑制其后的去甲.肾上腺素的释放.虽然由于抗交感作用引起的全身血压下降的静脉给药的ED50很低(约12g? kg);但在啮齿类动物的急性,持续性和神经性疼痛模型中,该剂量还是比产生镇痛作用的鞘内途径所需剂量要高许多.例如在大鼠脊神经结扎引起的外周神经病模型中,使得触觉超敏反应的阈值提高50%的鞘内药物剂量是0.3g?kg;并且由于该药的缓慢再分布,鞘内高剂量注射本品不会引起低血压.当以高于产生最大镇痛作用2～3倍的剂量鞘内单次注射本品时,未发现全身血压的变化.一491—ChineseJournalofNewDrugs2005,V ol14No44临床前药效学研究4.1离体实验[]见表l.表1有关Ziconotide的离体实验模型和实验结果克隆细胞株表达成孔蛋白和大鼠一型钙通道的电压感应亚单位分化的人成神经细胞瘤IMR32细胞中的钙离子流大鼠脑突触体膜小鼠神经肌肉接头结合实验显示Ziconotide对.型VSCC作用的特异性低浓度FZiconotide不可逆阻断钙离于流:10m~ol?LI1阻断(4214)%;但在高浓度下呈不完全阻断,约80%l,Ziconotide能部分阻断去甲肾上腺素释放.但不影响氨基丁酸和谷氨酸的释放Ziconotide与N一型通道的结合呈阳性反应Ziconotide对非N一型突触前Ⅵ℃无影响4.2整体动物模型实验不同的急慢性疼痛的动物模型均证明了本品的镇痛作用,包括甲醛|l卜,热板[¨,12,H],爪压力[H,浸尾[H,神经性疼痛(结扎脊神经|4,或局部坐骨神经ll一),紫外灼伤|4一,慢性缩窄性神经损伤161和切割性术后疼痛l17_等实验模型.动物实验表明,本品不产生耐受性和成瘾性,且与吗啡之间不产生交叉耐受性,两药物合用呈协同作用,并且因为本品不会阻止吗啡耐受性的产生使得该协同作用随时问的增加而减弱|4,14j.5药动学研究5.1动物药动学实验在大鼠和猕猴的药动学实验中|l,24h持续恒速静脉滴注本品,血浆药物浓度用放射免疫分析法测定.大鼠的滴注速度是2mL?kg?h～,在0.417和1.67mg?kgI.h剂量下的Css分别是1.1和4.2mg?L～,停止滴注后18h,超过99%的药物从血浆中清除.猴子的滴注速度是lmL?kg?h,在0.467和1.04mg?kg.?h剂量下的Css分别是1.4和3.2mg?L.结果显示两种动物的药动学参数很相近,药动学参数无剂量和性别依赖性;开始滴注后的2～4h内,到达稳态血浓,数据符合二房室模型;稳态时的分布体积约为体重的40%,表明血管外药物分布于细胞外和细胞内的体液中;本品与血浆蛋白的结合较低(大鼠和猴分别是56%和73%),非特异性,非饱和性和低亲和力,因此不可能导致药物在血管内的滞留;消除曲线是双指数曲线,大鼠和猕猴快速消除相的t和t/2a分别是0.375和0.730h.绝大部分的AUC与药物分布中的快速消除相有关,约占AUC的97%. 大鼠和猴的明显终末半衰期分别是4.6l和6.48h. 大鼠在滴注开始lh内,高低剂量组分别约有93% 和l7%出现轻微震颤;猕猴在滴注开始0.5h内,所有高剂量组和50%低剂量组出现轻微震颤.在犬的药动学研究l6J中,鞘内单次注射本品后药物在脑脊液中快速分布,且其后快速分布至脊髓.--——492.--——中国新药杂志2005年第14卷第4期和其他组织.鞘内持续滴注本品后其在脑脊液的量比血浆中的高l000倍,表明本品主要分布在其靶作用点.实验中结合使用H一inulin显示,本品在脑脊液中的清除速度与脑脊液本身的总体流动(bulk flow)接近.鞘内途径给予的本品在血浆中消除迅速,因此导致相当少的血浆蛋白结合|8一.静脉途径的本品在大鼠脑组织中2～24h内降解,产生的中间代谢产物检测不到,并且迅速从脑脊液和循环系统清除.这种快速的清除率可能暗示本品在脑脊液中的分布和它在脑脊液中的代谢也是快速的|8一.5.2人体药动学试验健康男性志愿者静脉持续滴注本品的血浆药物浓度一时间数据表明,该药物符合线性消除的二房室开放性药动学模型.血浆稳态浓度与滴注速率成比例.消除半衰期为1.3h,T.约为5.3h|l,.在Ⅱ期开放性临床试验中|6,研究22例慢性神经性疼痛患者给予鞘内途径的本品48h内脑脊液中的药动学(PK),以及其在血浆和脑脊液中的浓度与安全性和有效性的关系(PK—PD关系).鞘内单次给予本品l,5,7.5和lOt,g?kg,结果显示脑脊液药物浓度曲线可能呈多房室特征;剂量标准化AUC..,C.,CL,Vd和tl/2等与剂量成比例,提示本品在脑脊液的分布不随剂量增加而出现饱和现象.本品在血浆和脑脊液中呈线性的清除过程ll,与其以1～lOt,g?kg?d静脉滴注时血浆中的特征一致|l.脑脊液CL的平均值和中间值分别是0.38和0.26mL?min..成人脑脊液形成或消除的速度是0.35～0.37mL?min,即本品在脑脊液中的清除速度与脑脊液本身的总体流动或称周转率接近l8.脑脊液的平均值和中间值分别是155和99mL,均与成人的脑脊液体积约(130±30)mL接近.脑脊液的AUC../13平均值是70.8ng?h? mL.?g.,tl/2是4.6h,C/13是15.0ng?mL.?g～.脑脊液与血浆中的药物浓度比是303～l165.PK—PD有相关性.6临床研究本品的临床研究表明,该药安全,有效,且具有良好的耐受性.6.1I期临床试验在I期临床试验中,采用双盲和安慰剂对照法等,主要考察本品包括静脉给药等的安全性和耐受性.试验中剂量的提高是以安全性和耐受性评价为基础的.40例健康男性志愿者有30例持续24h以上恒ChineseJournalofNewDrugs2005,V o1.14No.4速静脉滴注本品0.3～10tLg?kg?d一,其余的给予安慰剂[一.主要不良反应是由外周交感神经阻断引起的心血管作用,如直立性低血压和窦性心动过缓,其中最主要的是直立性低血压,在所给的剂量范围内与剂量相关,高剂量组全部产生与直立性低血压有关的眩晕.56例健康男性志愿者有42例持续24h静脉滴注本品0.01～1.0mg?kg?d一,其余的给予安慰剂[I'z.一.所有给药组均出现由外周交感神经阻断引起的直立性低血压,但仰卧位的收缩压和舒张压及心率的变化是中等程度.当剂量高达lmg?kgd时,该药安全且可耐受.人静脉滴注的最大耐受剂量大于lmg?kg?d～;人药动学预试验表明,剂量小于42tLg?kg?h时血药浓度为15ng?mL～[18i.96例健康男性志愿者中72例持续24h静脉滴注本品0.3～1.0mg?kg?d～,其余的给予安慰剂_4.试验中受试者对本品一般可很好地耐受,但会产生直立性低血压,表现为头昏眼花和昏厥.试验表明健康受试者在静息状态下的血压的降低是适度和可耐受的.为更全面了解本品对人体心血管系统的影响,对持续6h静脉滴注1.0mg?kg?d0的高血压和正常血压的志愿者进行侵入性血液动力学监控_4一.结果表明,静脉注射本品引起的血压降低作用与明显的全身血管阻力下降及心输出量和心率增加有关.血浆中去甲肾上腺素水平的变化通常与从静息至站立的体位的改变有关,在滴注本品过程中,该去甲肾上腺素水平的变化显得迟钝,这与交感抑制作用是一致的.24例因癌症,艾滋病,神经病,脊髓损伤和幻觉肢体痛引起的严重顽固性疼痛患者_2,对其他的镇痛方法(包括椎管内注射吗啡或其他麻醉剂)治疗无效.给予0.2～21肛g?h(70kg)的本品后,超过2/3的患者衡量疼痛的指标下降50%或更多,一些患者完全摆脱了吗啡等麻醉剂的应用.6.2Ⅱ期临床试验31例慢性疼痛男性患者包括20例晚期癌症和艾滋病患者和11例脊柱损伤,丘脑性疼痛,臂丛撕裂及后遗神经痛患者,用包括鞘内途径的阿片类药物治疗疼痛都得不到足够的缓解_4一.鞘内持续滴注本品,速度从0.3ng?kg?h增加至疼痛缓解或出现不能耐受的不良反应,最大剂量为300ng?kg?h～.滴定中每隔4h进行一次疼痛评价.利用疼痛强度的形象化模拟评分法(V ASPI),疼痛缓解的形象化模拟评分法(V ASPR)中国新药杂志2005年第14卷第4期和对患者的满意度询问对药效进行评估.疼痛能得到满意缓解的患者继续接受更长时间的治疗方案. 完成试验的24例患者中有19例的V ASPI值降低的平均值是43%,15例患者可减少同时使用的阿片类药物50%的用量.最常见的不良反应有眼球震颤,精神错乱,找词困难,恶心,眩晕,头痛及步态和平衡障碍等,当给药剂量降低或停药后,不良反应可逆.有9例患者给药长达9个月.1例具有23年慢性顽固性传入神经阻滞疼痛和患肢痛患者,在接受持续恒速滴注2.0ng?kg?h的本品治疗后,痛觉过敏和超敏完全消失,疼痛得到完全缓解Z22一. 在对急性术后患者进行镇痛作用和安全性研究中,进行选择性手术的30例患者中有腹式子宫切除术者6例,根治性前列腺切除术者7例和髋部完全替换术者l7例引.于术前开始至术后的48～72h分别向12例和6例患者持续鞘内滴注本品0.7和7tLg?h一,其余的给予安慰剂.可用于药效评价的26例患者的结果表明,本品组的吗啡等效消耗量与安慰剂组比较在24～48h内有显着性差异;术后8h 内本品组的V ASPI值与安慰剂组比有明显降低.6 例高剂量组中的4例出现眩晕,视力模糊,眼球震颤和镇静作用等不良反应,停药后消失.考虑到不良反应,0,7tLg?h的剂量可能比7tLg?h更为理想.6.3Ⅲ期临床试验在开放性试验中,9例只有很短期望寿命的癌症晚期患者使用1～100ng?kgI.h的本品后疼痛得到缓解,6.5周内无耐受性形成_l一.260例恶性神经性疼痛患者的安慰剂对照试验中,102例患者的中期结果分析显示:与安慰剂比较,使用本品后疼痛分数下降40%_l.240例患有阿片类耐受的非恶性(主要源自神经性)疼痛患者中有162例接受本品治疗,78例给予安慰剂.与安慰剂比较本品产生显着的镇痛作用;对鞘内注射吗啡无效的顽固性疼痛患者,对本品也有显着的镇痛反应.根据患者主观评估,本品组和安慰剂组分别有43%和18%的患者得到中等至完全的缓解¨J.治疗1l1例(24～85岁)癌症或艾滋病患者的顽固性疼痛的Ⅲ期临床试验采用双盲和安慰剂对照法,于1996年3月12日一1998年7月11日在美国,澳洲和荷兰的32个研究中心进行|8?.受试者要求V ASPI值≥50,按2:1的比例随机分成2组,分别接受本品和安慰剂的治疗.所有患者的给药时间限制在2周内.首先是鞘内滴定本品或安慰剂共5～6d,有应答者接着给药5d维持治疗;无应答者则一493—ChineseJournalofNewDrugs2005,V ol14No.4交换到对应的治疗组.两组患者均以阿片类药物作基础治疗,本品和安慰剂组的口服吗啡等效消耗剂量分别为300和600mg?d,其中有36例使用鞘内吗啡给药.试验的可评价病例为108例.在招募的初期阶段给药剂量为5ng?kg?h,以后改为0.4/,g-h～.每12h增加至最大耐受剂量.根据前48例招募者的安全性评价结果将以后60例的受试者的起始剂量改为0.1Fg?h或更低,每隔24h增加至产生镇痛作用或至最大剂量2.4Fg?h～.给药前本品和安慰剂组的V ASPI平均值分别是73.6和77.9.给药后分别改善53.1%和18.1%(P<0.001),疼痛得到中等至完全缓解的分别占52.9% 和17.5%(P<0.001).有5例患者在给予本品后疼痛得到完全缓解.分别有50%和17.5%(P=0.001)的患者对本品和安慰剂治疗有反应.试验证明本品和安慰剂组疗效有显着性差异.不良反应多与剂量相关,包括晕眩,眼震颤,精神错乱,异常步态,嗜睡,发热,体位性低血压,尿潴留或尿失禁,恶心和呕吐等,这些不良反应易识别且为可逆,发生率随初始剂量和滴定频率的降低而下降.按FDA的要求重新设计的Ⅲ期治疗严重慢性疼痛的临床试验于2002年8月一2003年6月进行,采用随机双盲,安慰剂对照的方法.220例18岁以上用其他方法得不到缓解的严重慢性疼痛患者接受试验.本品在3周内剂量缓慢增加,试验证明了本品在更低剂量下和在更缓慢的滴注速度条件下的安全性和有效性.在此次的临床试验中,几乎没有严重的不良反应发生,其发生率与安慰剂组相当~24--26].另外,据报道在1999年12月完成的2个临床试验中,超过700例顽固性疼痛患者接受鞘内给药, 包括对吗啡治疗抵抗或对其不良反应不能耐受的患者,证明该药安全且有很好的长达3年的耐受性_1J. 在120个临床中心的9个临床对照试验中有超过1000例慢性疼痛患者接受过本品鞘内给药.也证实了本品鞘内途径在急慢性疼痛中的镇痛作用_6. 7适应证及给药途径适应证是严重慢性疼痛.该药将首先定位于3种人群,包括患有慢性疼痛的癌症和艾滋病患者,以及神经性疼痛患者_2;特别适用于对传统治疗包括鸦片类药物治疗无效的顽固性疼痛和对传统治疗药物不能耐受的疼痛.本品的临床推荐给药途径是鞘内注射或称椎管内注射,包括硬膜下和蛛网膜下隙注射,即通过埋植.--——494.--——中国新药杂志2005年第14卷第4期在皮下的泵直接将药物泵人脊髓周围的脑脊液中. 该给药途径可降低给药剂量,减少全身给药的不良反应,且选择性地将药物转运至中枢神经系统作用部位….8药物不良反应在临床试验中发现鞘内注射本品产生的不良反应主要有_1'2l_:①心血管反应:心率缓慢和直立性低血压,呈剂量依赖性.②中枢神经系统反应:眩晕,眼球震颤,共济失调,兴奋,幻觉,镇静和昏迷等均有报道.其中一些不良反应在停药后或减少剂量后需几天至几个星期才可清除.③胃肠道反应如恶心,呕吐和腹泻等.④其他如皮疹,结膜充血,鼻充血,肝功能异常和尿潴留等.当受试者降低滴注速率或者停止滴注,这些不良反应会减弱或消失.主要不良反应发生于剂量0.2～5.3Fg?h一[.9结语1998年,本品的原研发公司美国Neurex公司以7.41亿美元的证券交易价值将其转让给Elan公司_2.2001年7月9日,本品被欧盟药品评审委员会(EMEA)批准为孤儿药(源自EMEA网站). 2003年5月,Elan公司向EMEA提交上市申请. 2004年1月7日,Elan公司获得本品的Ⅲ期临床评价的主要试验终点(primaryendpoint).2004年6月28日Elan公司向FDA提交有关新药上市许可申请(NDA)的修正案2,从2004年第一季度开始,在新药上市许可的审评期间,本品(商品名Prialt)以TreatmentIND(TreatmentInvestigationalNewDrugs,研究中的新药用于治疗)的形式已在美国一些选定的疼痛中心在一定限度上使用,用于缓解用其他方法治疗无效的疼痛_2.Ziconotide作为一种非吗啡类镇痛药,将给慢性疼痛这一有意义且尚空白的治疗领域带来福音.[作者简介]陈时宏(1971一),女,主管药师,主要从事神经系统药物研究.联系电话:(0592)5977888[参考文献]～一瑚㈣¨卜一¨一一一__c一l_～一_堇_三_詈_毫州～～一～一一一～一一_蓍r=¨～～～一～一～～一～一ChineseJournalofNewDrugs2005,V ol14No.4[4]BowersoxSS,TichN,MayoM,eta1.SNX一111:antinociceptive agentN—typevoltage—sensitivecalciumchannelblocker[J一.[17]DrugsFutu,1998,23(2):152160.[5]NadasdiL,Y amashiroD,ChungD,etalStructureactivityanal—ysisofaConuspeptideblockerofN—-typeneuronalcalciumchan—-nels[J]Biochemistry,1995,34(25):80768081[6][7[8][9][1O][12][13][14][15[16]WermelingD,DrassM,EllisD,etaPharmacokineticsand pharmacodynamicsofintrathecalziconotideinchronicpainpa—tients[J].JClinPharmacol,2003,43(6):624—636 BowersoxSS,LutherRPharmacotherapeuticpotentialofomega—conotoxinMVⅡA(SNX111),anN—typeneuronalcalcium channelblockerfoundinthevenomofConusmagus[J].),_con,1998,36(11):16511658StaatsPS,Y earwoodT,CharapataSG,etalIntrathecalzi—conotideinthetreatmentofrefractorypaininpatientswithcan—cerorAIDS:arandomizedcontrolledtrial[J].JAMA,2004,291 (1):63—70.BowersoxSS.SinghT,NadasdiL,eta1.Cardi0vasculareffectsof omegaconopeptidesinconsciousrats:mechanismsofaction[JjJ CardiuvascPharmacol,1992,20(5):756—764FoxJA.IrreversibleandreversibleblockadeofIMR32calcium channelcurrentsbysyntheticMVⅡAandiodinatedMVⅡC omega-conopeptides[J].PJlugersAre'h,1995,429(6):873875.MalmbergAB,Y akshTLV oltage—sensitivecalciumchannelsin spinalnociceptiveprocessing:blockadeofN—andPtypechannels inhibitsformalin—inducednociception[J].JNeurusci,1994,14 (8):4882—4890MalmbergAB.Y akshTL.Effectofcontinuousintrathecalinfu—sionofomegaconopeptides,N—typecalcium—channelblockers,on behaviorandantinociceptionintheformalinandhotplatetestsinrats[J].Pain,1995,60(1):83—90BowersoxSS,GadboisT,SinghT,eta1.SelectiveNtypeneuronalvoltage—sensiti~ecalciumchannelblocker,SNX111,pro—ducesspinalantinociceptioninratmodelsofacute,persistentand neuropathlcpain[J].JPharmacolExpTher,1996,279(3): 1243—1249.WangYX,GaoD,PettusM,etalInteractionsofintrathecally administeredziconotide.aselecti,feblockerofneuronalN—type voltage—sensitivecalciumchannels,withmorphineonnociception inrats[J].Pain,2000,84(23):271281.WhiteDM.CousinsMJEffectofsubcutaneousadministrationof calciumchannelblockersonnervei~ury—inducedhyperalgesia [J].BrainRes,1998,8O1(1—2):50—58.XlaoWH,BennettGJ.Syntheticomega—conopeptidesappliedto thesiteofnerveinjurysuppressneuropathicpainsinrats[J]J——-+——*+++-+-++++++一+[18][19][2O][21][22][23][24][25][26][27]中国新药杂志2005年第14卷第4期PharmacolExpTher,1995,274(2):666—672.WangYX,PettusM,GaoD,eta1.Effectsofintrathecaladmin—istrationofziconotide,aselectiveneuronalN—typecalciumchan—nelblocker,onmechanicalallodyniaandheathyperalgesiainaratmodelofpostoperativepain[J].Pain,2000,84(2—3):151158.BowersoxS,MandemaJ,Tarczy—HornochK,eta1.Pharmacoki—neticsofSNX111,aselectiveN—typecalciumchannelblocker, inratsandcynomolgusmonkeys[J].Drug[VletabDispos,1997,25(3):379383McGulreD,BowersoxS,FellmannJD,eta1.Sympatholysisafter neuron—specific,N—type,voltage—sensitivecalciumchannelblock—ade:firstdemonstrationofN—channelfunctioninhum?。

乙酰胆碱酯酶抑制剂

上海应用技术学院研究生课程《高等天然产物化学》试卷2014 / 2015 学年第1 学期课程代码：NX0702013论文题目：乙酰胆碱酯酶抑制剂的研究进展姓名：芮银146061414康满满146061409专业：制药工程学院：化工学院乙酰胆碱酯酶抑制剂的研究进展芮银，陈祎桐，康满满摘要：本文阐述了乙酰胆碱酯酶抑制剂(AChEI)的研究进展，介绍了用于药物治疗的乙酰胆碱酯酶抑制剂的各种来源如植物、微生物等，及其抑制乙酰胆碱的活性物质。

在此基础上，总结了几种现代分析技术，对AChEIs进行筛选，大大加快AD药物资源的开发利用进程。

这些方法主要有基于比色法的Ellman's法及相关的改进方法、薄层显色法、荧光显色法、电喷雾质谱法等。

但是，到目前为止，现代分析技术在AD药物资源中的应用还处在起步阶段。

关键词：乙酰胆碱酯酶抑制剂，筛选方法，薄层显色法，荧光显色法The progress of acetylcholinesteraseinhibitorsRui Yin, Chen Yitong, Kang ManmanAbstract：In this artical, the research elaborates progress of acetylcholinesterase inhibitors (AChEI), and introduces a variety of sources for drug treatment acetylcholinesterase inhibitors such as plants, microorganisms, and its active ingredients. On this basis, the review summarizes several modern analytic techniques such as Ellman's method which based on the colorimetric method, TLC chromogenic method, fluorescent color method, Electrospray ionization mass spectrometry and so on. However, at present, the application of modern analytic techniques in AD drug resources is still in infancy.Key word: Acetylcholinesterase inhibitors, Screening Methods, TLC chromogenic method, Fluorescent color method目录摘要.................................................................................................错误!未定义书签。

211232354_华蟾酥毒基通过调控circNFIX

华蟾酥毒基通过调控circNFIX/miR -577通路抑制乳腺癌MDA -MB -231 细胞的增殖、迁移和侵袭何孙香吴中伟① 刘梅芬（九江市中医医院肿瘤科，九江 339000）中图分类号 R282.74 R737.9 文献标志码 A 文章编号 1000-484X （2023）04-0770-07［摘要］目的：研究华蟾酥毒基（CnBu ）对乳腺癌细胞MDA -MB -231恶性生物学行为的影响，并探讨其机制是否与调控环状RNA 核因子IX （circNFIX ）和miR -577表达相关。

方法：将MDA -MB -231细胞分为对照（Con ）组、CnBu -低剂量（L ）组、 CnBu -中剂量（M ）组、CnBu -高剂量（H ）组、si -NC 组、si -circNFIX 组、pcDNA 组、pcDNA -circNFIX 组、CnBu+pcDNA 组、CnBu+pcDNA -circNFIX 组。

MTT 、Transwell 实验分析细胞增殖、迁移和侵袭能力，Western blot 分析Ki -67、基质金属蛋白酶2（MMP -2）和MMP -9蛋白表达。

RT -qPCR 分析circNFIX 、miR -577表达量。

双荧光素酶报告实验和RT -qPCR 验证circNFIX 和miR -577的靶向调控关系。

结果：CnBu 以剂量依赖方式下调Ki -67、MMP -2、MMP -9蛋白和circNFIX 表达（P <0.05），上调miR -577表达（P <0.05），减弱MDA -MB -231细胞的增殖、迁移和侵袭能力（P <0.05）。

miR -577与circNFIX 序列直接结合，干扰或过表达circNFIX 可显著提高或降低miR -577表达水平（P <0.05）。

干扰circNFIX 表达显著下调Ki -67、MMP -2、MMP -9蛋白表达（P <0.05），减弱MDA -MB -231细胞的增殖、迁移和侵袭能力（P <0.05）。

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。