组培实验复习

名词解释1、微绒毛：是上皮细胞游离面的细胞膜和细胞质共同形成的细小指状突起，电镜下可见。

2、同源细胞群：在软骨组织深部，软骨细胞逐渐长大成熟，变为椭圆形，多成群分布，每群2~8个细胞，这些细胞是由一个软骨细胞分裂增殖而来的，故称同源细胞群。

3、软骨囊：软骨陷窝周围的基质因富含硫酸软骨素,呈强嗜碱性，染色深，称为软骨囊。

4、结间体：相邻两个朗飞结之间的一段有髓神经纤维称结间体，一个结间体的髓鞘由一个胶质细胞形成。

5、动脉周围淋巴鞘：位于脾的白髓中，是环绕在中央动脉周围的弥散淋巴组织，主要是T淋巴细胞和一些巨噬细胞。

在细胞免疫应答时可增大变厚。

6、浆膜：浆膜由疏松结缔组织和外表面被覆的间皮构成。

7、皱壁：皱壁是小肠粘膜层和粘膜下层共同向肠腔突出所形成的突起。

8、泡心细胞：位于胰腺外分泌部腺泡腔内的一些扁平或立方形细胞，是闰管上皮伸入腺泡腔内形成的。

9、门管区：在相邻肝小叶之间的结缔组织内，常伴行小叶间动脉和静脉及小叶间胆管3种管道，该区域称为门管区。

10、肺小叶:每一细支气管连同它的各级分支和肺泡，组成了肺小叶。

11、气血屏障：肺泡腔内O2与肺泡隔毛细血管内血液携带的CO2间进行气体交换所通过的结构，即肺泡表面液体层，Ⅰ型肺泡细胞及基膜，薄层结缔组织，毛细血管基膜与连续内皮。

12、滤过屏障（滤过膜）：当血液流过血管球毛细血管时，管内血压较高，血浆内的某些物质，经有孔内皮、基膜、裂孔膜滤过到肾小囊腔，这三层结构称为滤过屏障。

13、分泌类固醇激素细胞：分泌类固醇激素，胞质内有丰富的滑面内质网，管泡状嵴线粒体和大量脂滴，无分泌颗粒。

14、分泌含氮激素细胞：分泌含氮素激素，细胞内有丰富的粗面内质网，高尔基体和膜包颗粒。

15、精子形成：精子细胞不再分裂，经过复杂的形态变化演变成精子，这一过程称为精子形成。

16、黄体：排卵后，残留于卵巢内的卵泡壁随同血管一起向卵泡腔塌陷，在促黄体生成素的作用下，逐渐发育成一个体积较大又富有血管的内分泌细胞团，新鲜时呈黄色，故称黄体。

组培复习材料一、名词解释1、培养基：是离体植物（外植体）赖以生长、分化的基础，是根据植物的需求，人工配制的含有各种营养成分的营养液。

2、液体培养：把细胞或生物体的一部分，置于液体培养基中使其发育，并不断振荡，使之均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法。

3、种子培养：是成熟种子和发育不全的未成熟种子的无菌培养。

4、叶培养：从母体植株上将叶组织（包括叶原基在内）切下，放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。

5、热处理脱毒：在一定范围内，用高温处理可部分或完全钝化植物组织中的某些病毒而不伤害或很少伤害植物本身的脱毒方法。

6、花药培养：是把花粉发育到一定阶段的花药接种到培养基上，来改变花粉的发育程序，使其分裂形成细胞团，进而分化成杯状体，然后再生植株，或形成愈伤组织，由愈伤组织再分化成植株。

7、连续培养：是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。

（培养过程中，不断注入新鲜培养基，排掉等体积用过的培养基，或者抽取悬浮培养物，使培养物的营养物质得到不断补充，从而保持其恒定体积的培养。

——8、分批培养：指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养，建立单细胞培养物的培养方式。

（细胞生长在固定体积的培养基中，当主要营养物质耗尽时，细胞的分裂和生长即停止。

）二、简答题1、MS培养基特点。

答：MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，具有高含量的氮、钾，尤其是硝酸盐用量大，还有一定数量的铵盐，其养分的数量和比例合适，不需要添加更多的有机附加物，就能满足植物组织对矿质营养的要求，加速愈伤组织和培养物的生长，当培养物就不转移时仍可维持其生存。

目前应用最广泛。

2、植物组培生产特点。

答：①和传统的生产方式相比，具有不占耕地、生产不受季节限制而且能够整年连续进行、不受灾害性天气和病虫害影响的特点；②具有人为可控性，可采用更适合于植物生长的“培养基”代替土壤提供养分和生长调节物质；③具有很高的生产效率。

一、名词解释1、组织培养：在无菌条件下，将离体的植物器官（根、茎、叶、花、果实、种子等）、组织（形成层、花药组织、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞和生殖细胞）以及原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，使其长成完整的植株的过程。

（P1）2、基本培养基：培养基中若只含有大量元素与微量元素，常称为基本培养基。

(P19)3、完全培养基：需要添加各种各样的附加物如：维生素、氨基酸、生长调节物质的培养基。

4、“煮化”培养基：使琼脂溶解于90℃以上的热水。

(P22)5、灭菌：指用理化方法杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体，即把所有生命的物质全部杀死。

(P31)6、无菌操作：在通过严格灭菌的操作空间（接种室、超净台等）和使用的器皿内，以及操作者外表都不带任何活着的微生物条件下进行操作。

（P31）7、初代培养：旨在获得无菌材料和我无性繁殖系，即接种某种外植体后，最初的一代培养。

8、褐变：外植体褐变是指在接种后，其表面开始褐变，有时甚至会使整个培养基褐变的现象。

9、继代培养：继初代培养之后的连续数代的扩繁培养过程，旨在繁殖出相当数量的无根苗，最后能达到边繁殖边生根的目的。

10玻璃化：当植物材料不断地进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明水迹状，这种现象通常被称为玻璃化。

11、驯化：植物由一种生长环境转到另一种差异较大的生长环境的适应过程12、植物组培苗工厂化生产：指在人工控制的最佳环境条件下充分利用自然资源和社会资源，采用标准化、机械化、自动化技术，高效优质地按计划批量生产健康植物苗木13、外植体：从母体上切下来用于进行组织培养的材料称为外植体。

二、填空题、判断题或选择题1、植物组织培养的原理是：植物细胞的全能性2、植物组培发展简史：1902年德国植物学家哈布兰特（Haberlandt）提出植物细胞全能性的理论；1943年White出版了《植物组织培养手册》；1962年，Muraskige和Skoog发表了关于促进烟草组织快速生长的培养基组成的论文，文中提及的培养基就是目前广泛使用的MS培养基；1958年首次证实植物细胞具有全能性;1983年成功在烟草上实现了根癌农杆菌的转化，是第一个转基因（P3）3 、植物脱毒和离体快速繁殖是目前植物组培应用最多、最有效的一个方面（P5）4、保持植物组织培养实验室洁净是组织培养成败的最基本要求（P8）5、无菌条件的好坏对组织培养成功与否起重要作用（P12）6、培养室最重要的因素是温度，一般保持在20℃-27℃左右，相对湿度保持在70％-80％为好，一般需要每天光照10h-16h(P15)7、培养基的成分主要有：水、无机营养素、有机化合物、天然复合物、培养体的支持材料等五大类（P18）8、最常见的碳源有：蔗糖、葡萄糖、果糖（P19）9、在培养基的各成分中，植物激素是培养基的关键物质，对植物组织培养起着决定性作用（P20）10、生长素与细胞分裂素的比例决定着发育的方向，是愈合组织、长根还是长芽（P21）11、母液配制时可分别配成大量元素母液、微量元素母液、铁盐母液、有机物母液、激素类母液（P24）12、培养基的pH一般是5.0-6.0，当高于6.0时培养基会变硬，低于5.0时，琼脂不能很好地凝固（P25）13、继代培养中扩繁的方法包括：切割茎段、分离芽丛、分离胚状体、分离原球茎等（P47）14、组培苗移栽苗的基质要求具备：透气性、保湿性好和一定的肥力，容易灭菌处理，不利于杂菌滋生，常选用：珍珠岩、蛭石、河沙、泥炭等（P49）15、病毒粒体有：杆状、线状、球状三种（P55）16、热处理的两种方法：一、温汤浸渍处理；二是高温空气处理（P58）17、生产规模的大小受两个因素的影响：组织培养试管苗的增殖率和生产种苗所需时间（P76）三、解答题1、常用培养基的配方有哪些？并且按培养基的成分和浓度可分为哪四种类型？(P28)答：常用培养基配方有：MS培养基，B5培养基，SH培养基，N6培养基，马铃薯简化培养基四个类型：①：含盐量较高的培养基；②：硝酸钾含量较高的培养基；③：中等无机盐含量的培养基；④：低无机盐含量的培养基（P30）2、外植体材料的预先栽培要做到什么？(P35)答：要做到：不连作；栽培基质要灭菌和消毒；多施腐熟的有机肥，少施化肥；及时预防病虫害；尽量创造较好的生长环境等3、外植体消毒剂有何要求(P38)答：具有良好的消毒效果，容易被水冲洗或能自行分解，不损伤材料，不影响组织培养物的生长4、简述初代培养时考虑的要素有哪些？(P45)答：①：无菌；②：一些条件（包括）：1、材料种类的选择与培养部位；2、合适的培养基，尤指激素；3、合适的培养条件③：技术高5、简述褐变产生的原因及减轻褐变的方法(P46)答；原因：它的出现是由于植物组织中的多酚氧化酶被激活，而使细胞的代谢发生变化所致减轻方法：“三选择，二加入，一连续”；选择分生能力强的外植体；选择合适的无机盐成分浓度、蔗糖浓度和激素水平；选择适宜的温度加入活性炭；加入抗氧化剂；连续将材料进行转移6、简述玻璃化发生原因与解决方法（P47）答；原因：主要是由于培养容器中空气湿度过高，透气性较差造成的方法：①：增加培养基琼脂的含量②：增加培养基中的溶质水平，以降低培养基的水势③：减少培养基中含氮化合物的用量④：增加光照⑤：增加容器通风，最好进行CO2施肥，这对减轻试管苗玻璃化的现象有明显的作用⑥：降低培养温度，进行变温培养，有助于减轻试管苗玻璃化的现象发生⑦：降低培养基中细胞分裂素的含量，可以考虑加入适量脱落酸7、植物病毒的鉴定与检测方法（P55）答；①；指示植物法②；抗血清鉴定法③；电子显微镜鉴定法④；酶联免疫鉴定法（ELISA 法）另：补充基本知识真菌性污染主要指霉菌引起的污染。

4 茎尖分生组织培养
概念：
茎尖分生组织：切取茎的先端部分或茎的分生组织部分（小至几十微米）进行无菌培养，使其发育成无菌植株的过程。

体细胞无性系变异：
表观遗传变异、
种质超低温保存
●利用茎尖培养生产无病毒苗木的主要步骤。

●影响茎尖培养脱毒效果的因素
●简述体细无性系变异的概念及变异来源。

●影响植物体细胞无性系变异的因素，如何筛选变异株系。

●植物种质资源离体保存有何意义？比较低温保存和超低温保存的差异。

●超低温保存的原理是什么？它的基本操作程序有哪些？
●影响种质离体保存遗传稳定性的因素有哪些？如何减少种质离体保存过程中的变
异？
5 单倍体细胞培养
●概念：单倍体培养、孤雄生殖、孤雌生殖、单倍体加倍
●单倍体的发生途径及在育种中的作用
●离体培养中小孢子发育途径
●比较花药和花粉培养的特点，说明单倍体产生的关键因素。

●单倍体的加倍途径及在育种中的应用
6 细胞培养
●简述植物单细胞分离的方法
●比较单细胞培养方法的特点。

●悬浮细胞培养的关键技术。

●如何使悬浮培养的细胞同步化？
●简述植物细胞培养的应用。

7原生质体培养与体细胞杂交
8 植物遗传转化
●简述植物转基因方法的主要方法。

●农杆菌介导的转化体系原理与方法。

●以拟南芥为例，设计可行的转基因方案。

●转基因瞬时表达和稳定表达的特点。

●如何进行转基因植物的筛选与鉴定？
9 植物基因克隆
●基因克隆的含义
●简述基因克隆的“分、切、接、转、筛”。

●基因克隆的载体及特点
●基因克隆中的工具酶及用途。