抗性淀粉含量的测定

淀粉的国标测定方法公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]淀粉的国标测定方法测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法（酶-直接法）一、酶水解法1.原理样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成双糖，再用盐酸将双糖水解成单糖，最后按还原糖测定，并折算成淀粉。

2.适用范围，适用于所有含淀粉的食物。

3.仪器（1）回流冷凝器（2）水浴锅4.试剂除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。

（1）乙醚（3）碘溶液：称取 g碘化钾溶于20 ml水中，加入 g碘，溶解后加水稀释至100 ml。

（4） 85 %乙醇。

（5）其余试剂同《蔗糖测定方法》5.操作方法样品处理称取2～5 g样品，置于放有折叠滤纸的漏斗内，先用50 ml乙醚分5次洗除脂肪（注：如果脂肪含量少，此步骤可免），再用约100 ml85 %乙醇洗去可溶性糖类（注：此步骤目的是去除可溶性糖），将残留物移入250 ml烧杯内，并用50ml水洗滤纸及漏斗，洗液并入烧杯内，将烧杯置沸水浴上加热15 min，使淀粉糊化，放冷至60 ℃以下，加20ml淀粉酶溶液，再55～60 ℃保温1h，并时时搅拌（注：温度过高，淀粉酶的活性破坏）。

然后取1滴此液加1滴碘溶液，应不现兰色，若显兰色，再加热糊化并加20ml淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显兰色为止。

加热至沸，冷后移入250ml容量瓶中，并加水至刻度，混匀，过滤。

（注：此时淀粉已水解成双糖，过滤可去除残渣和纤维素）弃去初滤液，取50 ml滤液，置于250ml锥形瓶中，加5 ml 6 mol/L盐酸，装上回流冷凝器，在沸水浴中回流1h，冷后加2滴甲基红指示剂，用5mol/L氢氧化钠溶液中和至中性，溶液转入100 ml容量瓶中，洗涤锥形瓶，洗液并入100ml容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。

（淀粉在沸水浴条件下糊化是淀粉水解的第一步反应，然后在淀粉酶的作用下，分解成短链淀粉、糊精、麦芽糖等低聚合的糖，所以在淀粉酶解后需用酸进一步水解得到葡萄糖。

确定：马铃薯淀粉乳浓度35%、稀盐 酸用量为马铃薯淀粉重量的3%、酸 解 30min、沸水浴 1h、高温处理时 间30min、-18℃贮藏30h、60℃烘干。
高温处理时间不变，温度在100～ 120℃之间变化与抗性淀粉产率的关 系研究 :
结果分析
马铃薯淀粉乳浓 由线性上度升趋35势%可见，高温使淀粉分子 更充分
结果分析
冷藏的时间越长，抗性淀粉的得率越多，但是 在冷藏48h之后，抗性淀粉得率增加并不明显。这主 要是回为糊化后的马铃薯淀粉结晶分为两个阶段， 晶核生成及晶体生长：首先是直链马铃薯淀粉分子 构象发生变化，晶核形成；然后当冷却到一定温度 支链马铃薯淀粉分子开始缓慢结晶。所以，无论是 直链马铃薯淀粉还是支链马铃薯淀粉，其老化都需 要经历分子自动取向，相互靠拢，才逐步形成晶体， 这需要一个过程。而过长的冷藏时间抗性淀粉并没 有更多增加。
RS(%)＝残留物的重量（干重）/初始重量（干重） × 100 以下实验中抗性淀粉检测都以此方法测定
结果分析
马铃薯淀粉乳浓度及高热高压处理时
间与抗性淀粉产率关系的研究
调整马铃薯淀粉乳浓度(25～45%)。固定 稀 盐 酸 用 量 为 马 铃 薯 淀 粉 重 量 的 3% ， 酸 解 30min，恒温水浴锅中沸水浴 1h。高压灭菌锅 进行高压高热处理，处理温度120℃, 调整高 热高压处理时间（10～60min）。之后取出放 在-18℃冷冻室贮藏30h。 最后60℃烘干。
(2)高热高压处理时间对抗性淀粉产率的影响
35%马铃薯淀粉乳浓度条件下，高热高压处理时间影响着马 铃薯淀粉链充分伸展的程度，随着高热高压处理时间的延长，抗 性马铃薯淀粉的得率上升，但是高热高压时间过长，同样会产生 降解马铃薯淀粉链的作用，马铃薯淀粉链过短不利于抗性马铃薯 淀粉的形成。

总 之 ，消 化 可 溶 性 淀 粉 缓 冲 液 的 ｐ 值 为 ６ ０时 以及 蒸 煮 处 理 后 所 得 抗 性 淀 粉 含 量 的 变 异 系 数 最 低 ，重 现 性 好 ， Ｈ ． 重 复间差异小 。
关 键 词 ：水 稻 ； 性 淀 粉 ； 定 ：Ａ
分 子 育 种 重 点 实验 室 ／ 建 省 作 物 分 子 育 种 工 程 实 验 室 ／ 建 省 水 稻 分 子 育 种 重 点 实 验 室 ，福 建 福 福
３ ．福 建 省 作 物 种 质 创 新 与 分 子 育 种 省 部 共 建 国 家 重 点 实 验 室 培 育 基 地 ，福 建 摘
福 州 ３０ ０ ５０ ；
福 建 农业 学报 ２ （ ） ８ ２ ２ ，０ １ ６ ５ ：２ ～８ ６ ２ １
Ｆ ｊａ ｏ ｒ ａ ｆＡｇ ｉ ｌ ｒｌ ｃ ｎｅ ｕ ｉｎＪ ｕｎ ｌ ｒｃ ｔ ａ ｉ ｃｓ ｏ ｕｕ Ｓ ｅ
文 章 编 号 ：１ ０ — ０ ８ （０ １ ５ ８２ ５ 。８ ３ ４ ２ １ ）０ — ２ —０
ｐ ． Ｈ５ ２的 Ｒ Ｓ含 量 与 ｐ ． 、 ｐ ． Ｈ６ ９ Ｈ６ ０比较 呈 极 显 著 差 异 ， ｐ ． Ｈ６ ９与 ｐ ． Ｈ６ ０差 异 不 显 著 ； ３份 材 料 抗 性 淀 粉 含 量
大小 依 次 为 功 米 ３号 ＞ ９ １ ＞ 日本 晴 ，功 米 ３ 抗 性 淀 粉 含 量 明显 高 于 ９ １ ３１ 号 ３ １和 日本 晴 ，而 ９ １ ３ １略 高 于 日本 晴 。
Ｒｉｅ ｒ ｌ ｓ Ｃｒａ ｉｎａ ｄ Ｍ ｏｅｕ ａ ｒ ｅ ｉ ｇ／ ｊｎ ｇ ｎ ｅ ｉ ｇ Ｌ ｂ ｒ ｔｒ ｆ ｏ ｏｅｕ ａ ｃ ｍｐ ａ ｍ ｅ ｔｏ ｎ ｌｃ ｌ ｒＢ ｅａ ｎ Ｆｕ ｉｎＥｎ ｉ ｅｒｎ ａ ｏ ａｏ ｙ ｏ Ｃｒｐ Ｍ ｌｃ ｌ ｒ Ｇｅ

淀粉的国标测定方法 HUA system office room 【HUA16H-TTMS2A-HUAS8Q8-HUAH1688】淀粉的国标测定方法测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法（酶-直接法）一、酶水解法1.原理样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成双糖，再用盐酸将双糖水解成单糖，最后按还原糖测定，并折算成淀粉。

2.适用范围GB5009.9-85，适用于所有含淀粉的食物。

3.仪器（1）回流冷凝器（2）水浴锅4.试剂除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。

（1）乙醚（3）碘溶液：称取3.6 g碘化钾溶于20 ml水中，加入1.3 g碘，溶解后加水稀释至100 ml。

（4） 85 %乙醇。

（5）其余试剂同《蔗糖测定方法》5.操作方法5.1 样品处理称取2～5 g样品，置于放有折叠滤纸的漏斗内，先用50 ml乙醚分5次洗除脂肪（注：如果脂肪含量少，此步骤可免），再用约100 ml85 %乙醇洗去可溶性糖类（注：此步骤目的是去除可溶性糖），将残留物移入250 ml烧杯内，并用50ml水洗滤纸及漏斗，洗液并入烧杯内，将烧杯置沸水浴上加热15 min，使淀粉糊化，放冷至60 ℃以下，加20ml淀粉酶溶液，再55～60 ℃保温1h，并时时搅拌（注：温度过高，淀粉酶的活性破坏）。

然后取1滴此液加1滴碘溶液，应不现兰色，若显兰色，再加热糊化并加20ml 淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显兰色为止。

加热至沸，冷后移入250ml容量瓶中，并加水至刻度，混匀，过滤。

（注：此时淀粉已水解成双糖，过滤可去除残渣和纤维素）弃去初滤液，取50 ml滤液，置于250ml锥形瓶中，加5 ml 6 mol/L盐酸，装上回流冷凝器，在沸水浴中回流1h，冷后加2滴甲基红指示剂，用5mol/L氢氧化钠溶液中和至中性，溶液转入100 ml容量瓶中，洗涤锥形瓶，洗液并入100ml容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。

稻米及制品中抗性淀粉的测定
抗性淀粉是指由食物中摄入而对消化酶无效的完整淀粉结晶体，抗性淀粉主要来源于稻米，是作为一种天然存在的有机物质，有营养价值但不参与营养转化过程。

随着国内稻米和制品消费的不断增加，抗性淀粉的存在日益受到广大消费者的重视，因此如何准确地测定抗性淀粉是重要的事情。

首先，根据研究所需的实验材料，我们需要准备净稻米或其他制品样品，然后用实验室常规技术对样品进行脱水和研磨，将样品中的抗性淀粉提取出来。

然后将提取出来的抗性淀粉分别加入不同浓度的葡萄糖溶液中通过琼脂糖凝胶电泳法将抗性淀粉分离成不同粒径的抗性淀粉结晶体，以计算抗性淀粉含量。

之后，可以将抗性淀粉以元素计数的方式测定出抗性淀粉的原子质量，并对其计算抗性淀粉的含量，从而得出最终的抗性淀粉测定结果。

抗性淀粉的准确测定对于评估稻米及制品中营养素的品质有重要意义，只有正确测定其中抗性淀粉的含量，才能了解营养物质的水平，为稻米及制品的进一步发展奠定坚实的基础。

抗性淀粉的制取与检测精品课件(一)随着人们生活水平的提高，越来越多的人开始注重健康饮食。

而淀粉则是人们日常饮食中不可缺少的营养物质之一。

但是淀粉也有一些缺点，如容易被消化吸收，引起身体健康问题。

于是，人们开始研究抗性淀粉的制取与检测。

一、什么是抗性淀粉抗性淀粉是淀粉的一种形式，经特殊制备后，不容易被消化吸收。

相比普通淀粉，抗性淀粉在人体内能起到更好的保健作用，如降低血糖、降低胆固醇、增加益生菌等。

二、抗性淀粉的制取方法目前，抗性淀粉的制取主要有以下方法：1.化学法。

通过酸或酶的作用来使淀粉变成抗性淀粉。

2.物理法。

如高压处理、超声波处理等。

3.生物法。

利用乳酸菌等微生物来发酵淀粉，制备出抗性淀粉。

三、抗性淀粉的检测方法抗性淀粉的检测方法主要有以下几种：1.酶解法。

将抗性淀粉样品用酶解液处理，然后测定样品中的葡萄糖含量。

2.显微镜法。

将淀粉样品烘干后加入碘液，用显微镜观察淀粉颗粒的大小和形状。

3.分子筛法。

通过分子筛分离方式来检测淀粉样品中的抗性淀粉含量。

四、抗性淀粉的应用抗性淀粉目前被广泛应用于食品、药品、保健品等领域。

在食品方面，抗性淀粉能够增加食品的纤维素含量，提高食品的口感和营养价值。

在药品方面，抗性淀粉可用于治疗肠道疾病、调节血糖和血脂等。

在保健品方面，抗性淀粉可补充肠道内的益生菌，改善肠道微生态平衡。

综上所述，抗性淀粉是一种非常重要的营养物质，对人们的健康有着重要的保健作用。

而在抗性淀粉的制取和检测过程中，科学家们也在不断地探索创新，为人们提供更好的健康食品。

几种常见饲料原料中抗性淀粉含量的测定Resistant starch,简称RS，这一概念由Englyst提出，国内大多数文章译为抗性淀粉，也有的将其译为抗淀粉及抗消化淀粉，1993 年，欧洲抗性淀粉研究协会（EURESTA）将其定义为“健康者小肠中不被吸收的淀粉及其降解产物的总称”。

抗性淀粉一般分为4类：ＲS1型（生理不可消化性截留淀粉）；ＲS2型(抗性淀粉颗粒)；ＲS3型(老化淀粉)；ＲS4型(化学改性淀粉)，杨光和丁霄霖(2002)分别就抗性淀粉的测定方法进行了讨论，但测定结果却不尽一致，本文通过参考 Megazyme公司试剂盒提供的方法，结合国内实际情况，研究出一套准确，方便、快捷测定饲料中抗性淀粉含量的方法，为饲料行业测定抗性淀粉提供一种新的方法。

1 原理先用胰α-淀粉酶（Pancreatic α-amylase）将非抗性淀粉水解成葡萄糖，再利用抗性淀粉能溶于KOH中的性质，用淀粉葡萄糖苷酶（Amyloglucosidase,AMG）使其水解成葡萄糖，然后测定糖的含量，从而推算出非抗性和抗性淀粉的含量。

2 仪器与试剂2.1 仪器GILSON移液枪，DSHZ-300多用途水浴恒温振荡器（江苏太仓王秀实验设备厂），分析天平（0.000 1g），Beckman Synchron CX4/Pro全自动生化分析仪，WH-1微型旋涡混合仪（上海沪西分析仪器厂），离心机（Eppendorf Centrifuge 5810 R）。

2.2 溶液的配制2.2.1 马来酸缓冲液（0.1M，pH=6.0）将23.2g马来酸溶解于1 600ml蒸馏水中，用4M（160g/l）NaOH调pH至6.0，加入0.6g CaCl22H2O和0.4g叠氮钠，蒸馏水定容至2L，室温保存。

2.2.2 醋酸钠缓冲液（1.2M，pH=3.8）取69.6ml冰醋酸于800ml蒸馏水中，用4M NaOH调PH至3.8，蒸馏水定容至1L，室温保存。

抗性淀粉及总淀粉测定方法采用Megazyme抗性淀粉试剂盒法，测定方法见试剂盒说明书（下附）原理（AOAC法 2002.02 ;AACC法32-40）抗性淀粉的测定方法：样品使用α-胰淀粉酶和淀粉葡糖苷酶（AMG）37℃振荡水浴孵育16小时，在这期间，通过两种酶的联合作用，非抗性淀粉被溶解，水解成D-葡萄糖，孵育结束后，加入等体积的乙醇或工业甲基化酒精（IMS,变性乙醇）终止反应。

离心上述溶液，收集上清勿弃，底部残留絮状团即为样品中的RS，用含水的IMS或乙醇（50%v/v）洗涤絮状团，洗涤后离心，再重复一次洗涤离心，收集离心后获得的上清，与之前收集的上清混合。

小心倒出试管残留的液体，将絮状团置于冰水浴中，加入2M KOH溶解，溶解的同时用磁力搅拌机剧烈搅拌。

用醋酸盐缓冲液将这个溶液调至中性，用AMG将淀粉定量水解成葡萄糖。

D-葡萄糖用葡糖氧化酶/过氧化物酶试剂（GOPOD）测定，这也是对样品中RS含量的测定。

非抗性淀粉（可溶性淀粉）的测定可通过集中的上清液并定容至100mL，再用GOPOD测定D-葡萄糖完成。

总淀粉测定方法：即抗性淀粉与非抗性淀粉总和。

抗性淀粉检测试剂盒K-RSTAR（100次分析）应用性和精确性这个方法需要样品中RS含量多于2% w/w。

如RS含量多于2% w/w，常规标准误差为±5%。

少于2% w/w RS的误差更高。

试剂盒瓶子1：淀粉葡糖苷酶AMG，12 mL，3300U/ mL，条件为pH4.5，40℃下，底物为可溶性淀粉，[单位或为200U/mL，条件为pH4.5，40℃下，底物为对硝基苯基β-麦芽糖苷]。

AMG 溶液应完全没有可检测到的游离D-葡萄糖。

4℃下稳定性> 3年。

瓶子2：α-胰淀粉酶(胰酶，10g，3Ceralpha U/mg)。

4℃下稳定性> 3年。

瓶子3：GOPOD 试剂缓冲液。

磷酸钾缓冲液（1M，pH7.4），对羟基苯甲酸（0.22M）和叠氮化钠（0.4%W/V）。

三种降糖米中抗性淀粉含量的测定1982年Englyst等人在进行膳食纤维定量分析时，发现在不溶性膳食纤维中包埋有淀粉成分，称之为抗性淀粉(Resistant Starch，RS)，至此，抗性淀粉引起学者们研究其营养特性的兴趣。

1992年FAO(世界粮农组织)将其定义为“健康者小肠中不吸收的淀粉及其降解产物”。

近年的研究已经初步证明，抗性淀粉不能被小肠消化吸收和提供葡萄糖，但在大肠中能部分被肠道微生物菌群发酵，产生多种短链脂肪酸，改善肠道环境；抗性淀粉本身含热量极低，作为低热量添加剂添加到食物中，可起到与膳食纤维相似的生理功能。

更重要的是，抗性淀粉还具有调节血糖、防止心脑血管疾病、预防结肠直肠癌的作用，故抗性淀粉有着比膳食纤维更为广泛的保健意义。

本文通过参考Megazyme公司试剂盒提供的方法，结合国内实际情况，研究一套准确、方便、快捷测定原料中抗性淀粉含量的方法，为研究人员测定抗性淀粉提供一种新的方法。

1原理（AOAC法 2002.02 ;AACC法32-40）先用α-胰淀粉酶（Pancreaticα-amylase）将非抗性淀粉溶解成D-葡萄糖，再利用抗性淀粉能溶解于 KOH中的性质，用淀粉葡萄糖苷酶（Amyloglucosidase,AMG）使其水解成葡萄糖，然后测定糖的含量，从而推算出抗性淀粉的含量。

2 试验仪器与试剂2.1 仪器水浴恒温振荡器，移液枪、分析天平、涡旋混匀器、离心机、磁力搅拌器2.2 溶液的配制2.2.1顺丁烯二酸钠（马来酸钠）缓冲液(0.1M，pH6.0)用1600mL蒸馏水溶解23.2g顺丁烯二酸，用4M（160g/L）氢氧化钠调节pH 至6.0，加入0.74g二水氯化钙和0.4g叠氮化钠，溶解定容至2L。

2.2.2 醋酸钠缓冲液（1.2M，PH3.8）将69.6mL的冰醋酸（1.05g/mL）加至800 mL的蒸馏水中，用4M氢氧化钠调节pH至pH3.8。

用蒸馏水定容至1L，室温下可保存一年。

标准评析《高抗性淀粉小麦籽粒抗性淀粉含量指标和检测方法》标准解读■ 邓志英1 迟松岐1 于海霞1 胥 倩1 彭 莉2 田纪春1,2*（1.山东农业大学农学院 小麦品质育种研究室；2.山东华田农业科技有限公司）摘 要：《高抗性淀粉小麦籽粒抗性淀粉含量指标和检测方法》（T/Cl 005-2022）是中国国际科技促进会于2022年2月8日发布的团体标准，标准明确规定了高抗性淀粉小麦籽粒中抗性淀粉含量指标及其测定方法，旨在指导育种家培育更好的高抗性淀粉小麦新品种，满足人民群众对生活质量和健康水平的新需求。

文章重点解读《高抗性淀粉小麦籽粒抗性淀粉含量指标和检测方法》标准制定的背景、含量指标制定的依据及其测定方法的核心技术内容，对《高抗性淀粉小麦籽粒抗性淀粉含量指标和检测方法》标准的应用及推广具有重要的指导意义。

关键词：高抗性淀粉小麦，抗性淀粉含量，检测方法，标准DOI编码：10.3969/j.issn.1002-5944.2023.04.025Interpretation of Association Standard on the Index and DetectionMethod of Resistant Starch Content in High Resistant Starch WheatGrainDENG Zhi-ying1 CHI Song-qi1 YU Hai-xia1 XU Qian1PENG Li2 TIAN Ji-chun1, 2*（1. Wheat Quality Breeding Research Group, Agronomy College of Shandong Agricultural University;2. Shandong Huatian Agricultural Technology Co., Ltd.）Abstract: In order to help wheat breeders cultivate better new varieties with high resistance starch content, China International Association for Promotion of Science and Technology issued the association standard on the index and detection method of resistant starch content in high resistant starch wheat grain (T/Cl 005-2022) on February 8, 2022. The standard clearly stipulates the index and determination method of resistant starch content in high resistant starch wheat grain, which will meet the new needs of the people for life quality and health level. This article mainly explains the background of the standard, the basis for the content index and the core technical content of the determination method, which has important guiding signifi cance for the application and promotion of the standard.Keywords: high resistant starch wheat, content of high resistant starch, detection method, standard基金项目：本文受泰安市科技特派员项目（项目编号：2021PTY022）和国家自然科学基金项目（项目编号：31871613）资助。

中 图分 类 号 ： ５２ １１ ｓ１． ０ 文 献标 识 码 ： Ａ
抗性 淀粉 （ｅｉａ ｔ ｔｃ ， Ｓ 本身 仍 是 淀粉 ， ｒ ｓ ｎ ｓ ｒｈ Ｒ ） ｓｔ ａ 哺 乳 动物在食 用淀 粉 类 食 物后 ， 一部 分 淀 粉避 开小 肠 中淀粉 酶 的水解 作 用进 入 大 肠 ， 微 生 物 菌群 的作 在 用 下发酵 产生短 链脂 肪 酸 （ Ｃ Ａ）ｌ， 一 部 分加 速 Ｓ Ｆ ｊ另 肠道 残渣 的运 动排 出 体 外 。 １８ ９ ２年 Ｅ ｇ ｓ 发 现 这 ｎｌ ｔ ｙ
维普资讯
第２ ６卷
第２ 期
２０ ０ ８年 ４月
石河子大学学报 （ 自然 科 学 版 ） Ｊｕ ａ ｏ Ｓ ｉ ｚ Ｕ ｉ ｒ ｔ（ ａ ｒ ｃ ｎｅ ｏｒｌ ｆ ｈ ｅｉ ｎｖ ｉ ｕｌ ｅ
粉 及 其降解 物 的含量 ， 方法包 括 氢气 呼吸法 、 回肠造 口术法 和插 管法 Ｅ 。 自 １８ 抗 性 淀 粉 被发 现 以 ５ 』 ９ ２年
来 ， 种体外 测 定 法 被建 立 。Ｅｇ ｓ等 Ｊ 多 ｎｌｔ ６最早 建 立 ｙ
抗 性淀 粉测定 方法 ， 胰 ａ淀粉 酶对试 样进行 水解 ， 用 一 然后 直 接 测 定 残 留 的 淀 粉 。 以 后 又 陆 续 出 现 了 Ｂ ｒ 法 Ｉ 和 Ｂｏ ｋ法 ｌ Ｃ ａ ｐ法 及 其 改 良法 Ｌｌ ｅｒ ｙ ’ ］ ｊｃ ｒ 、 ｈｍ 、 ９
Ｇ ｎ 法 ｌ ］ ， 到 ２０ ｏｉ ｍ 等 直 ０２年 Ｍ Ｃｅｒ ［ Ｊ 多 种 方 ｃ ｌ ｙ等 ¨ 对 ａ 法进行 研究 后 ， 合得 出 的测 定 方 法 被 Ａ Ａ 综 Ｏ Ｃ批 准
类 淀粉并 将 其 命 名 为 抗 性 淀 粉 。 １９ ９３年 欧 洲 抗 性

专利名称：批量测定水稻抗性淀粉含量的方法专利类型：发明专利
发明人：罗嘉锐,竺正航,郝晴文,杨维丰,姚惠珂申请号：CN202111450144.3
申请日：20211201
公开号：CN114136960A
公开日：
20220304
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种批量测定水稻抗性淀粉含量的方法，利用双酶水解法测定水稻中抗性淀粉含量，即先用胰α‑淀粉酶将非抗性淀粉水解成葡萄糖，再用钢珠和KOH溶解抗性淀粉，然后用淀粉葡糖苷酶(AMG)溶液使抗性淀粉水解成葡萄糖，并利用GOPOD法测定葡萄糖含量，从而根据标准曲线计算出抗性淀粉的含量。

相比于传统AOAC法耗时长、效率较低、费用高等缺点，本发明所提供一种批量测定水稻抗性淀粉含量的方法，具有成本低，重复性好，正确度较高，能实现批量操作等优势。

申请人：华南农业大学
地址：510640 广东省广州市天河区五山
国籍：CN
代理机构：杭州中成专利事务所有限公司
代理人：金祺
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蚕豆抗性淀粉的测定,制备和性质研究蚕豆抗性淀粉是一种在低pH条件下仍能保持结构完整的淀粉类物质，具有较高的热稳定性和凝胶性。

它在食品加工、医药和化妆品等领域有广泛的应用前景。

本文将介绍蚕豆抗性淀粉的测定、制备和性质研究。

1.蚕豆抗性淀粉的测定
蚕豆抗性淀粉的测定主要通过两种方法：放射性标记法和酶解法。

放射性标记法利用二碘葡萄糖（2-HG）作为放射性标记剂，使用放射性探测仪对蚕豆抗性淀粉含量进行测定。

酶解法则使用葡萄糖酶测定法或肠道菌群酶解法对蚕豆抗性淀粉含量进行测定。

2.蚕豆抗性淀粉的制备
蚕豆抗性淀粉的制备主要通过蒸煮法、微波辐照法和双氧水法三种方法。

蒸煮法是将蚕豆粉煮熟后冷却、滤清、干燥得到。

微波辐照法是将蚕豆粉放入微波辐照器中进行辐照处理，再加入氯化钠溶液使pH值下降到4.6，再进行干燥处理。

AOAC2002抗性淀粉（中文翻译）抗性淀粉的测量C.实验试剂(a)马来酸钠缓冲液：0.1M,pH6.0.取23.2g的马来酸溶解在1600ml的蒸馏水中，用4M(160g/L)的NaOH调节pH值到6.0 ，加入0.6gCaCl2.2H2O和0.4g的叠氮化钠，然后定容到2L。

4℃保存1年。

(b)马来酸钠缓冲液：1.2M,pH3.8,69.6ml的冰醋酸溶解在800ml 的蒸馏水中，用4M的NaOH调节pH值到3.8.用蒸馏水定容到1L。

室温下保存1年。

(c)马来酸钠缓冲液：100mM,pH4.5.5.8ml的冰醋酸溶解在900ml的蒸馏水中，用4M的NaOH调节pH值到4.5，最后用蒸馏水定容到1L,4℃下保存1年。

(d)氢氧化钾溶液：2M,取112.2KOH溶解在900ml的去离子水中，定容到1L(e)IMS溶液：50%V/V。

取500ml的乙醇（95%或99%）或工业甲基化酒精（IMS,变性乙醇；95%乙醇加5%的甲醇），用水定容到1L,密封保存1年。

(f)AMG储备液：12ml,3300U/ml溶解在50%的甘油中，呈粘性。

在4℃下保存5年。

（注：1U:在40℃，pH4.5的条件下，AMG分解可溶性淀粉产生1μmol 的葡萄糖所需要的酶量）。

(g)淀粉葡萄糖苷酶稀释液：300U/ml，将2ml的AMG储备液用0.1M,PH马来酸缓冲液C(a)稀释到22ml,等分为5ml冷冻保存在聚丙烯管中，使用时可以反复冻融，-20℃下保存5年。

(h)胰a-淀粉酶（10mg/ml）+AMG(3U/ml)：1g的胰a-淀粉酶加100ml马来酸缓冲液C(a),搅拌5min,加1.0mlAMG（300U/ml），搅拌离心，＞1,500g,10min。

小心倒出上清液。

现配现用。

(i)葡萄糖氧化酶-过氧化物酶-氨基安替比林溶液（GOPOD）:制备GOPOD通过稀释50ml的缓冲液到1.0L,用部分稀释缓冲液溶解冻干的GOPOD混合液，将小瓶内的酶液转移到1.0L的容量瓶中，用稀释缓冲液定容到1.0L.葡萄糖氧化酶＞12000U/L;过氧化物酶＞650U/L;4-氨基安替比林溶液0.04mM4℃保存2~3月，-20℃保存＞2年缓冲液的制备：溶解136gkH2PO4,42gNaOH,30g的4-羟基苯甲酸，溶解在900ml水中，用1MHCL和2MNaOH调节pH7.4,稀释到1L,添加0.4g 叠氮化钠混合至溶解。

几种测定香蕉抗性淀粉含量方法的比较
程燕锋;王娟;李尚新;郭卫芸;杨公明
【期刊名称】《食品与发酵工业》
【年(卷),期】2007(033)008
【摘要】抗性淀粉具有膳食纤维所不能及的生理功能和加工特性,是近年来变性淀粉和功能食品研究的热点,其定量分析方法目前仍没有统一的标准.文中选用了3种比较有代表性的抗性淀粉(RS)测定方法:TSA法、Berry法和Goni法,对青香蕉、生马铃薯和玉米淀粉3种原料中的RS和总淀粉含量的测定进行了比较.结果表
明:Goni法模拟了人体胃肠道的生理条件,具有重复性好,操作简单等明显优势而更适合于富含抗性淀粉颗粒的青香蕉原料中RS含量的测定,用该法测得的RS含量为80.12%,其中RS2占96.63%.
【总页数】5页(P153-157)
【作者】程燕锋;王娟;李尚新;郭卫芸;杨公明
【作者单位】华南农业大学食品学院,广东广州,510642;华南农业大学食品学院,广东广州,510642;华南农业大学食品学院,广东广州,510642;华南农业大学食品学院,广东广州,510642;华南农业大学食品学院,广东广州,510642
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
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2.几种用于肽粉中蛋白质含量测定方法的比较 [J], 贾维宝;刘良忠;黄婷;曹宇翔;朱哲;李文杰
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基于近红外光谱的甘薯抗性淀粉含量的快速测定方法唐忠厚;李洪民;陆国权【摘要】长期以来,淀粉一直被认为可以为人体完全消化吸收.1983年英国生理学家Englyst首次发现一种在健康人体小肠及胃中不能消化的淀粉,并将其定义为抗性淀粉(Resistant Starch,简称RS)[1].【期刊名称】《江苏农业学报》【年(卷),期】2011(027)006【总页数】4页(P1426-1429)【关键词】甘薯;抗性淀粉;快速测定;近红外光谱分析法(NIRS)【作者】唐忠厚;李洪民;陆国权【作者单位】中国农业科学院甘薯研究所,江苏徐州221121;浙江大学农业生物学院,浙江杭州310029;中国农业科学院甘薯研究所,江苏徐州221121;浙江大学农业生物学院,浙江杭州310029;浙江农林大学薯类作物研究所,浙江临安311300【正文语种】中文【中图分类】S531.034长期以来，淀粉一直被认为可以为人体完全消化吸收。

1983年英国生理学家Englyst首次发现一种在健康人体小肠及胃中不能消化的淀粉，并将其定义为抗性淀粉(Resistant Starch，简称 RS)［1］。

抗性淀粉作为备受关注的植物功能性多糖类物质，具有防止便秘，减少结肠癌和心脏病的患病率，改善心血管，调节血糖并具有减肥等功能，有着广泛的应用前景［2-5］，其对人类的健康作用得到越来越深刻的认识，也是广大科研人员研究的重要课题。

但如何较准确地测定淀粉或食品中的抗性淀粉含量，是研究人员必须首先要解决的一个重要课题。

由于抗性淀粉的特殊性，对其的测定具有一定难度，处理过程也较复杂，测定成本高，耗时耗力［6-7］。

甘薯(Ⅰpomoea batatas Lam.)作为一种高产稳产、耐旱、耐瘠、易种易繁的粮食作物早已为我们所熟悉，但其独特的营养保健作用曾一度被人们所忽视。

甘薯富含直链淀粉，原料成本低，是制备抗性淀粉的重要来源，同时可以生食，能充分利用天然抗性淀粉功能。