细胞工程原理
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动物细胞工程制药导语动物细胞工程制药是一种利用动物细胞进行生物制药的技术。
该技术已经取得了显著的进展,并在医药领域发挥着重要作用。
本文将介绍动物细胞工程制药的原理、应用和前景。
一、动物细胞工程制药的原理动物细胞工程制药是利用动物细胞系统表达和生产药物的一种技术。
其主要原理包括以下几个步骤:1.动物细胞培养:首先需要选择合适的动物细胞系,并进行培养。
常见的动物细胞系包括CHO细胞、HEK293细胞等。
细胞培养的条件包括培养基、培养温度、培养时间等。
2.基因克隆和转染:将药物的基因通过基因克隆技术导入到动物细胞中,使其具有产生目标药物的能力。
转染的方式包括质粒转染、病毒转染等。
3.细胞培养和增殖:转染后的细胞需要在培养条件下进行生长和增殖。
通常会添加适当的生长因子和培养基来促进细胞的生长。
4.产物分离和提纯:最后,通过适当的方法分离和提纯目标药物,可以使用离心、超滤、层析等技术进行分离纯化。
二、动物细胞工程制药的应用动物细胞工程制药已经广泛应用于医药领域,为药物的研发和生产提供了重要的技术支持。
其主要应用包括以下几个方面:1.蛋白质药物生产:利用动物细胞工程制药技术可以生产多种重要的蛋白质药物,如抗体、细胞因子等。
这些蛋白质药物在治疗癌症、免疫性疾病等方面具有重要作用。
2.疫苗生产:动物细胞工程制药技术也可以用于疫苗的生产。
通过导入相应的病原体基因到动物细胞中,使其产生病原体相关的抗原,从而制备疫苗。
3.基因治疗:动物细胞工程制药技术还可以用于基因治疗。
通过将目标基因导入到患者的细胞中,实现对基因相关疾病的治疗。
4.抗病毒药物:某些动物细胞工程技术还可以用于抗病毒药物的生产。
通过将抗病毒基因导入到动物细胞中,使其产生抗病毒蛋白,从而对抗病毒感染。
三、动物细胞工程制药的前景随着基因工程和生物技术的不断发展,动物细胞工程制药在未来的前景十分广阔。
以下是动物细胞工程制药的一些未来发展趋势:1.技术的进一步成熟:随着技术的不断发展,动物细胞工程制药技术将变得更加成熟,能够更准确、高效地生产药物。
一、实验目的1. 掌握细胞工程的基本原理和实验技术。
2. 学习细胞培养、细胞融合、基因工程等细胞工程技术的操作方法。
3. 培养学生的实验操作能力和科学思维。
二、实验原理细胞工程是利用现代生物技术手段,对细胞进行改造、培养和应用的一门新兴学科。
本实验主要涉及以下原理:1. 细胞培养:在适宜的培养条件下,使细胞在体外生长、繁殖,为后续实验提供细胞材料。
2. 细胞融合:将两个或多个细胞合并成一个细胞的过程,可用于基因转移、细胞治疗等。
3. 基因工程:通过分子生物学技术对基因进行改造,实现特定性状的表达。
三、实验材料、试剂和仪器设备1. 实验材料:人胚胎肾细胞(HEK293)、小鼠成纤维细胞(NIH3T3)、小鼠血清、胰蛋白酶、DMSO等。
2. 试剂:DMEM培养基、胎牛血清、青霉素、链霉素、Hoechst 33342染料等。
3. 仪器设备:细胞培养箱、倒置显微镜、离心机、PCR仪、凝胶成像系统等。
四、实验步骤1. 细胞培养(1)将HEK293和NIH3T3细胞分别接种于培养瓶中,置于细胞培养箱中培养。
(2)待细胞长满瓶底后,用胰蛋白酶消化细胞,按1:1的比例将两种细胞混合。
(3)将混合细胞接种于新的培养瓶中,继续培养。
2. 细胞融合(1)将混合细胞培养至对数生长期,加入适量的聚乙二醇(PEG)诱导细胞融合。
(2)将融合细胞接种于新的培养瓶中,继续培养。
(3)用Hoechst 33342染料检测融合细胞。
3. 基因工程(1)设计并合成目的基因的引物,进行PCR扩增。
(2)将扩增的目的基因克隆到载体上。
(3)将重组质粒转化到HEK293细胞中。
(4)用荧光素酶报告基因检测目的基因的表达。
五、实验结果与分析1. 细胞培养HEK293和NIH3T3细胞在培养过程中生长良好,细胞形态规则,细胞活力较高。
2. 细胞融合Hoechst 33342染料检测结果显示,部分细胞核融合,表明细胞融合实验成功。
3. 基因工程荧光素酶报告基因检测结果显示,目的基因在HEK293细胞中成功表达。
细胞工程育种的原理
细胞工程育种是一种通过改变植物或动物的基因来实现育种的
技术,它的原理主要是利用细胞和分子生物学的方法来改变目标生物的遗传特征。
细胞工程育种的关键步骤是基因编辑,通常使用基因剪切技术来删除、插入或替换目标基因。
这种技术可以通过使用不同的酶来进行,例如CRISPR-Cas9,TALEN和ZFN等。
一旦目标基因被编辑,就需要对其进行筛选和评估。
这通常涉及到对转基因生物进行多种测试,例如生长速度、营养含量、耐旱性和抗病性等等。
通过评估转基因生物的各种特征,可以确定哪些特征被成功编辑,哪些需要进一步优化。
细胞工程育种技术已经被广泛应用于许多领域,例如农业、医学和工业生产等。
它不仅可以提高农作物的产量和品质,还可以开发新型疫苗和药物,并提高工业生产的效率。
然而,尽管细胞工程育种有很多潜在的优势,但也存在着一些风险和争议。
例如,一些人认为转基因生物可能对环境和人类健康造成潜在的风险,因此需要更多的研究来评估这些风险。
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植物细胞工程原理、方法和应用一.植物细胞工程的原理及方法植物细胞具有全能性,即具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞,都具有发育成完整生物体的潜能。
而让细胞发挥出全能性的方法,就是细胞脱分化。
细胞脱分化,就是让已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成为未分化细胞,进而形成愈伤组织。
愈伤组织在一定的培养条件下,分化出幼根和芽,进而形成完整小植株,这就是愈伤组织再分化。
归结起来,植物细胞工程的主要原理是植物细胞的全能性,以及单倍体育种、植物的低温储藏等。
现在我们就来着重谈一谈植物细胞全能性,一个植物体的全部细胞,都是从受精卵经过有丝分裂产生的。
受精卵是一个特异性的细胞,它具有本种植物所特有的全部遗传信息。
因此,植物体内的每一个体细胞也都具有和受精卵完全一样的D NA序链和相同的细胞质环境。
当这些细胞在植物体内的时候,由于受到所在器官和组织环境的束缚,仅仅表现一定的形态和局部的功能。
可是它们的遗传潜力并没有丧失,全部遗传信息仍然被保持在DNA的序链之中,一旦脱离了原来器官组织的束缚,成为游离状态,在一定的营养条件和植物激素的诱导下,细胞的全能性就能表现出来。
于是就象一个受精卵那样,由单个细胞形成愈伤组织然后成为胚状体,再进而长成一棵完整的植株。
所以离体培养之所以能够成功,首先是由于植物细胞具有全能性的缘故。
一.植物组织培养技术植物的组织培养广义又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
狭义是指组培指用植物各部分组织,如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株,也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养,愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
细胞工程实验室常用的灭菌方法和原理细胞工程实验室常用的灭菌方法有湿热灭菌、干热灭菌、紫外线灭菌、过滤除菌等。
以下是这些方法的原理和特点:
1. 湿热灭菌:是利用高温高压的水蒸气进行灭菌。
该方法能够有效地杀灭细菌、真菌和病毒等微生物,常用于培养基、实验器具等的灭菌。
其原理是在高温高压下,水蒸气的穿透力增强,能够使微生物的蛋白质变性,从而达到灭菌的效果。
2. 干热灭菌:是利用高温干燥空气进行灭菌的方法。
常用于玻璃器皿、金属器械等的灭菌。
其原理是在高温下,微生物的蛋白质和核酸会发生变性,从而失去生物活性。
3. 紫外线灭菌:是利用紫外线的杀菌作用进行灭菌的方法。
常用于实验室空气、操作台等的灭菌。
其原理是紫外线能够穿透微生物的细胞膜,使其DNA 发生损伤,从而阻止微生物的繁殖。
4. 过滤除菌:是利用过滤器过滤掉空气或液体中的微生物。
常用于不能耐受高温灭菌的液体或气体的灭菌。
其原理是过滤器能够阻止微生物通过,从而达到除菌的效果。
这些灭菌方法各有优缺点,在细胞工程实验室中,需要根据不同
的物品和实验要求选择合适的灭菌方法。
同时,为了确保灭菌效果,需要严格按照操作规程进行灭菌操作,并对灭菌效果进行检测和验证。
细胞工程原理与技术
细胞工程是一门综合性学科,涉及生物学、化学、物理学、工程学等多个领域。
其原理和技术主要包括以下几个方面:
1. 细胞培养技术:细胞培养是细胞工程的基础,包括细胞的培养基、培养条件、培养器具等方面的技术,用于维持细胞的生长和繁殖。
2. 细胞分离和纯化技术:细胞分离和纯化技术是细胞工程的重要手段,包括离心、滤过、渗透压等技术,用于分离和纯化细胞。
3. 基因工程技术:基因工程技术是细胞工程的核心技术,包括基因克隆、基因转染、基因编辑等技术,用于改变细胞的基因组成和表达。
4. 蛋白质工程技术:蛋白质工程技术是细胞工程的另一个重要技术,包括蛋白质表达、纯化、修饰等技术,用于生产和改良蛋白质。
5. 细胞生物反应器技术:细胞生物反应器技术是细胞工程的关键技术,包括反应器设计、操作、控制等技术,用于实现大规模细胞培养和生产。
细胞工程的发展将有助于解决许多医学、工业和环境等领域的问题,例如制造生物药物、生产工业酶、清除污染物等。
高中生物细胞工程技术知识点总结
高中生物细胞工程技术知识点总结如下:
1. 细胞工程是指利用细胞生物学技术和方法,对细胞进行人为操作,从而获得人类需要的产品或实现植物、动物、微生物的遗传改良。
2. 细胞工程的基本原理:将2个不同物种的细胞融合,或对某个物种的细胞进行显微操作、遗传操作(转导、转化、转化因子)、人工授精等,使融合后的细胞或个体表现出不同于原来2个细胞的杂种细胞或杂种个体的特性。
3. 细胞工程包括:
(1) 细胞融合技术:
①概念:使两个或多个不同物种的细胞融合成一个杂种细胞。
②举例:杂交水稻、“骨髓灰质炎”疫苗的生产、单克隆抗体的制备。
(2) 细胞器移植技术:
①概念:将某种细胞器或组织从一细胞中分离出来,移植到另一细胞中去。
②举例:将人工染色体移入酵母菌细胞、巨噬细胞中的人工染色体。
(3) 细胞核移植技术:
①概念:将一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组出一个新的胚胎。
这个新的胚胎最终发育成动物个体(克隆动物)。
②举例:多莉羊的培育。
(4) 染色体移植技术:
①概念:将一种生物的一个或几个染色体移入另一种生物的卵细胞中,使其重组出一个新的胚胎。
这个新的胚胎最终发育成动物个体(克隆动物)。
②举例:小鼠“昆明株”的繁育。
(5) 干细胞移植技术:
①概念:将某种动物的胚胎干细胞移植到其他动物胚胎的卵黄囊内,使其发育成器官或组织。
该器官或组织可供原宿主动物使用。
②举例:将人体胚胎干细胞移植到羊的卵黄囊中,培养出人体器官。
第2章细胞工程细胞工程1.定义:以细胞生物学和分子生物学为基础,结合现代工程技术手段,在细胞或亚细胞水平、组织水平上进行设计与操作,是构建优良细胞、组织、器官以及生物体的综合性生物工程。
2.分类:植物细胞工程:植物组织培养技术、植物细胞培养、植物体细胞杂交技术动物细胞工程:动物细胞培养技术、动物细胞融合技术、核移植技术、干细胞技术1、细胞的全能性①定义:离体的植物细胞在合适的条件下能够发育成为完整的植株。
②物质基础:细胞中具有本生物的全套遗传信息。
③表达条件:含有全套遗传信息的活细胞;处于离体状态;提供适宜的营养和环境条件。
④全能性大小:分化程度越高,全能性越低2、植物组织培养①定义:将离体的植物细胞、组织或器官(外植体)在适宜的培养条件下经脱分化形成愈伤组织,然后经过再分化,形成芽、根并最终发育成完整植株,这一过程称为植物组织培养。
②原理:植物细胞的全能性③条件:离体、适宜的营养物质、植物激素、无菌、温度、湿度、光照、氧气。
④相关概念脱分化在一定条件下,分化后的细胞重新获得类似于胚胎细胞一样的分裂和分化能力的过程。
愈伤组织脱分化后的细胞经过细胞分裂,会形成无组织结构的、松散的细胞团。
再分化愈伤组织在一定条件下可以重新分化为各种类型的细胞,并进一步发育成完整的植株。
影响脱分化和再分化俩步骤的原因:多种内部因素和外部因素⑤过程:a.取材与消毒:取离体的植物器官、组织或细胞进行消毒b.接种:将外植体插入MS培养基中(不要倒插)。
c.培养:外植体(记得消毒)↓脱分化愈伤组织↓再分化(需光,利于叶绿素合成)芽、根↓植物体d.移栽:先炼苗,再移栽。
影响脱分化和再分化俩步骤的原因:多种内部因素(如植物遗传性状和生理状况等)和外部因素(如营养和环境条件等)生长素和细胞分裂素的浓度比对愈伤组织的生长和分化产生不同的影响。
⑥植物激素的浓度控制:(使用顺序)生长素的浓度>细胞分裂素,有利于诱导植物根的生成;生长素的浓度<细胞分裂素,有利于诱导植物芽的生成;生长素的浓度≈细胞分裂素且都较高时,(外植体脱分化形成愈伤组织)有利于愈伤组织的形成。
细胞工程原理细胞工程原理一、名词解释1、生物工程:是以生命科学为基础,利用生物体系和工程原理生产生物制品和创造新物种的一门综合技术。
2、细胞工程:是指应用细胞生物学和分子生物学的方法,通过类似工程学的步骤,在细胞整体水平或细胞器水平上,有目的地利用或改造生物遗传性状,以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。
3、细胞全能性:是指分化细胞保留着全部的核基因组,具有生物个体生长、发育所需要的全部遗传信息,具有发育成完整个体的潜能。
4、细胞多能性:有些细胞能分化出多种组织的潜能,却失去了发育成完整个体的潜能。
5、植物组织培养:是指在无菌的条件下,将离体的植物器官、组织、细胞、胚胎、原生质体等培养在人工配制的培养基上,给予适当的培养条件,诱发产生愈伤、潜伏等,或者生长成新的完整植株的一种实验技术。
6、愈伤组织:脱分化后的细胞经过细胞分裂产生无组织结构、无明显极性的松散的细胞团,称之为愈伤组织。
7、继代培养:是愈伤组织在培养基上生长一段时间后,由于培养基枯竭、水分散失、并已积累了一些代谢产物,此时将组织继续转入新的培养基上培养。
8、胚状体:在培养过程中由外植体或愈伤组织产生的与正常受精卵发育的方式或类似的胚胎结构现象。
9、脱分化:已分化的细胞在一定因素作用下重新恢复分裂机能并改变原来的发展方向而沿着一条新的途径发育的过程。
10、再分化:脱分化的细胞团或组织经重新分化而变为具有未分化细胞特性的过程。
11、人工种子:又称合成种子或体细胞种子,是指将植物离体培养的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中的类似种子的颗粒。
12、看护培养:是指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞,使其持续分裂和增殖的一种培养方法。
13、饲养层培养:是把处理过的(如X射线处理)无活性的或分裂很慢的细胞来饲养所需培养的细胞,使其分裂和生长的方法。
14、固定化培养:将游离的细胞包埋在多糖或多聚化合物制备成的网状支持物中,培养液呈流动状态进行无菌培养的一种技术。
15、两相培养技术:是在培养体系中加入有机溶剂或者具有吸附作用的多聚化合物。
细胞在水相中生长,合成次级代谢物质,分泌出来后转移至有机相中。
16、微细胞:又称为微核体,是指含有一条或n条染色体(即含有部分基因组),外有一薄层细胞质和一个完整质膜的核质体。
17、胚胎干细胞:是从着床前胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外分化抑制培养分离的一种全能性细胞。
18、细胞融合:两个或多个相同或不同细胞通过物理、化学、生物的方法使膜融合形成单个细胞的过程。
二、填空题1、生物工程的六大组成:发酵工程、酶工程、蛋白质工程、基因工程、生物化学工程、细胞工程。
2、基因工程(DNA重组技术)的一般步骤:(1)目的基因的获得,(2)将目的基因与质粒重组,(3)将重组DNA引入到宿主细胞,(4)筛选能表达的目的基因。
3、植物组织培养再生植株的途径:器官发生途径:(1)先发芽后生根,(2)先生根后发芽,(3)同时生根发芽体细胞胚发生途径:(1)直接途径,(2)间接途径。
4、植物培养基的成分:(1)水分(2)无机盐(大量元素、微量元素、Fe盐)(3)有机物(碳源、含氮物质(维生素类、氨基酸、天然复合物)、植物生长调节物质(生长素、细胞分裂素、赤霉素))生长素:IAA、2,4-D、NAA、IBA;细胞分裂素:BA、KT、玉米素(4)培养材料的支持物(0.5%~1%)(5)培养基的pH值(6)其他成分(活性炭、抗生素物质、抗氧化剂、诱变剂、生长抑制剂)MS培养基包括:大量元素、微量元素、铁盐、有机物5、培养室组成包括:洗涤室、药品储藏室、称量室、培养基配制室、培养基灭菌室、培养基存放室、过渡室(缓冲室)、接种室、培养室、细胞学实验室、暗室、物品存放室、大棚6、人工种子的结构、优点及制作过程(后两者较重要)人工种子的结构包括:人工种皮、人工胚乳、胚状体或芽。
人工种子的优点:(1)便于运输和储藏(2)人工胚乳可根据不同植物的要求配制,通过加入植物激素、有益微生物或抗病、抗虫成分,使人工种子优越于天然种子。
(3)可以固定杂种优势,可保存珍贵稀有植物品种。
(4)有利于快速繁殖,生产效率高。
人工种子制作过程:(1)高质量体细胞胚状体诱导(2)体细胞胚发生的同步化控制(3)人工胚乳制作(4)人工种皮制作(5)人工种子包埋7、病毒的传播方式:介体传播、接触传播病毒在植物体内的传播途径:通过维管系统和胞间连丝8、植物细胞培养方法:悬浮培养、液体培养、固体培养、固定化培养9、细胞融合的方法包括:生物法、化学法及物理法。
生物法:仙台病毒(HVJ)法原理:病毒诱导细胞融合主要是由于病毒会与宿主细胞膜直接融合,同时进入两个细胞就会打破两个细胞膜的隔阂,引发细胞质的交流,进而达到细胞融合的目的。
化学法:高Ca离子、高pH结合PEG诱导融合,NaNO3诱导物理法:显微操作、电场刺激(电融合)法电融合原理:在直流电脉冲的刺激下,细胞膜或原生质体质膜表面的电荷和氧化还原电位发生改变,使异种细胞或原生质体粘合并发生质膜瞬间破裂,进而连接,直到闭合成完整的膜形成融合体。
10、杂种细胞筛选方法:选择性培养基筛选法、遗传互补筛选法、抗性互补筛选法、利用物理特性筛选法、利用生长特性筛选法11、杂交瘤技术是将骨髓瘤细胞和淋巴细胞融合。
12、培养细胞的最适温度为37°C,pH:7.2~7.4之间,需血清。
调节pH的物质有NaHCO3、HEPES溶液。
细胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、抗生素溶液13、细胞重组方式(1)胞质体与完整细胞重组形成胞质杂种(2)微细胞与完整细胞重组形成微细胞异核体(3)胞质体与核体重组形成重组细胞14、干细胞分类(1)根据分化能力强弱分:单能干细胞、多能干细胞、全能干细胞(2)根据来源分:成体干细胞、胚胎干细胞三、简答题1、细胞工程的应用(1)优良植物快速繁殖和细胞培养生产代谢产物(2)优良、濒危动物的快速繁殖(3)动物细胞培养生产活性产物和药物(4)新品种培育(5)多倍体、单倍体育种(6)试管动物与婴儿(7)供医学器官修复或移植组织(8)珍惜动植物资源的保存与保护(9)在能源、环境保护等领域的应用2、培养动物优良品种的方法(1)根据细胞融合、杂交等手段建立新品种(2)人工诱变,即用辐射或电化学诱变剂等手段改变遗传性状,诱导新品种的产生(3)采用多倍体诱导等染色体工程技术(4)通过转基因技术转入外源基因在体内表达,制造新品种(5)通过组织培养、胚胎移植、克隆等手段实现快速育种3、有什么方法可以防止或缓解褐变?当外植体处于机械损伤等逆境时,细胞膜的结构遭到破坏,酚酶催化多酚类化合物,使其发生氧化形成棕褐色的醌类物质和水;醌类物质经过非酶促聚合,形成黑褐色物质(羟醌和黑色素等),引起褐变的发生。
解决途径:(1)选择适宜的外植体(2)选择适宜的培养条件(低盐、低pH、低温、弱光照)(3)细胞筛选和材料预处理(黑暗条件下,5°C,12~14h)(4)使用抑制剂和吸附剂(抗坏血酸、PVP、少量活性炭等)(5)连续转移4、玻璃化的防治措施有哪些?玻璃化是指组织培养过程中特有的一种生理失调或生理病变,试管苗呈半透明状、外观形态异常的现象,又称过度水化现象。
采取的措施:(1)适当提高光照强度(2)注意通气,尽可能降低培养容器内的空气相对湿度和改善氧气供应情况(3)适当降低培养基中铵根离子浓度(4)注意细胞分裂素和生长素的配合以及激素和钾离子之间的配合使用(5)控制温度,适当进行低温处理,避免过高的培养温度(6)利用固体培养基,增加琼脂浓度,降低培养基衬质势,造成细胞阻遏(7)适当增加蔗糖浓度,降低渗透势5、胚状体同步发育方法及原理(1)抑制剂法:在细胞培养初期加入细胞分裂抑制剂,去除抑制剂后细胞可同步发育。
(2)低温法:低温处理抑制细胞分裂,再恢复正常温度使细胞分裂同步化。
(3)渗透压法:不同发育时期的胚状体对渗透压的要求不同,用一定的渗透压使胚状体停止在某一阶段,然后再使其同步发育。
(4)通气法:细胞分裂旺盛时有大量气体(如乙烯)生成。
可以通过在培养基中通入乙烯或氮气控制细胞同步分裂。
(5)分离筛选法:用不同孔径的筛网将不同发育时期的胚状体分离开来,也可以采用密度梯度离心法来选择不同发育时期的胚状体。
6、茎尖培养脱毒的原理:病毒在感染植物上分布不一致,即在老叶片及成熟的组织和器官病毒含量较高,而幼嫩的及未成熟的组织和器官病毒含量较低,生长点(0.1~1mm区域)则几乎不含或很少。
茎尖(分生组织)无病毒可能存在的原因:(1)在一个植物体内,病毒易于通过维管系统而移动,但分生组织中不存在维管束系统。
(2)病毒在细胞间移动的另一个途径是胞间连丝,然而,它的速度很慢,难以追上活跃生长的茎间。
分生组织分化速度大于病毒传播速度。
(3)在茎尖中存在高水平的内源生长素,可抑制病毒的增殖。
7、什么叫细胞固定化培养,有什么优点?固定化培养是将游离的细胞包埋在多糖或多聚化合物制备成的网状支持物中,培养液呈流动状态进行无菌培养的一种技术。
优点:(1)细胞生长较为缓慢,利于次级代谢产物的积累(2)利于保持培养液流体性质(3)细胞经包埋后使所受的剪切力损伤减小(4)有利于进行连续培养和生物转化8、生物反应器存在的问题?植物细胞培养在放大培养时往往产量会比实验室摇瓶培养或小型反应器培养下降许多,次级代谢产物合成能力也会下降许多,可能是由于以下因素引起的:(1)通气和搅拌引起的流体压力易造成细胞损伤、有益气体的散失、大量泡沫的生成等,这些均会对细胞生长和产物积累产生影响。
(2)高密度引起培养液粘度增加,造成营养吸收、气体传递的抑制。
(3)反应器结构缺陷(如死角等)导致细胞黏附,引起细胞死亡、腐败以及营养和气体吸收限制等。
(4)对产物生物合成机制、途径等不了解,因此,很难维持最佳培养条件。
9、原生质体的用途(1)提供相关生理生化研究(2)利用原生质体可摄取如病毒、细菌、细胞器、蛋白质、核酸等外源物质的特点而用作基因调控和表达、遗传工程研究的材料。
(3)进行原生质体融合,改变遗传物质,建立杂交品种;同时还可以用于研究染色体行为、基因定位等。
(4)用于细胞器的分离,或进行相关细胞器的遗传试验。
11、动物细胞体外培养有哪些类型?(一)贴附型细胞(1)成纤维型细胞细胞大致呈梭形,多数细胞间排列松散,有较大的细胞间隙,起源于胚肺细胞。
(2)上皮型细胞细胞扁平状,形态较为规则,排列紧密,呈“铺路石状”,起源于内胚层与外胚层的细胞。
(3)游走型细胞外形不规则且不断变化,生长位置不固定。
如具有吞噬作用的单核巨噬细胞系统的细胞。
(4)多形型细胞形态不规则,一般分胞体和胞突两部分,如神经元和神经胶质细胞。