锌对SiO2致大鼠肺泡巨噬细胞氧化损伤的保护作用

高氧致新生大鼠肺损伤中氧化应激与基质金属蛋白酶的关系目的探讨氧化应激和基质金属蛋白酶－9(MMP-9)／基质金属蛋白酶抑制物－1(TIMP-1)在高氧肺损伤新生大鼠的肺组织中动念变化以及两者的相互关系。

方法将足月新生大鼠存出生后，分别持续吸入90％～95％高氧或空气，1、3、7、14、21 d取肺组织进行HE染色，应用分光光度计比色法检测肺组织丙二醛(MDA)含量、免疫组化技术检测MMP-9和TIMP-1动态表达。

结果病理观察高氧3d时出现炎症反应，7d时出现肺泡发育阻滞，最终纤维化；高氧3、7、14d 后MDA含量高于空气组(P＜O.05，P＜0.01，P＜0.05)；MMP-9表达主要在上皮细胞胞浆，高氧3d时较空气组增强(P＜O.05)；TIMP-I表达主要往上皮细胞、内皮细胞和肺泡巨噬细胞胞浆，3d后各时间点的表达均高于空气组(P＜O.05，P＜0.05，P＜0.Ol，p＜O.01)；MDA含量与MMP-9、TIMP-1白表达旱正相关(P＜0.05，P＜0.01)。

结论高氧暴露后可能通过氧化应激上调MMP9和TIMP－1表达引起基膜的破坏，从而导致毛细血管通透性的增加和以后呼吸道重塑的发生。

标签：高氧；肺损伤；氧化应激；基质金属蛋白酶-9；基质金属蛋白酶抑制物-1但长时间吸入高浓度氧(简称高氧)会导致不同程度的急、慢性肺损伤，严重者可导致早产儿慢性肺疾病(chronic lung disease，CLD)。

有研究发现，急性肺损伤中炎症反应可以引起基质金属蛋白酶类(matrix metalloproteinases，MMPs)的释放，可能在CLD的发生、发展中有重要作用，而且氧化府激与炎症反应也有一定关联。

本研究以高氧致肺损伤的新生大鼠为研究现象，动态观察肺组织中内二醛(nMondialdehvde，MDA)的变化以及MMP-9、TIMP-l(tissue inlibitots or metalloproteinase-1，TIMP-1)的同步表达，以探泔氧化应激和MMP-9／TIMP-1在高氧肺损伤发生中的作用和相互关系。

细胞氧化损伤的保护作用林羽（福建中医药大学药学院…福州……350122）HT22…细胞的保护作用。

方法：建立H 2O 2诱导HT22细细胞活性的影响及形态变化。

水溶性四唑蓝法（WST ）测定超氧MDA ）含量，比色法测定还原型谷胱甘肽（GSH ）含量。

相关因子（Nrf2）蛋白表达水平。

结果：与H 2O 2模型组相比，P <0.05或P <0.01），减少MDA…的产生（P <0.05或P<0.01），增加增加Bcl-2蛋白的表达。

此外，黄精多糖还能够上调细胞提高HT22…细胞的存活率，从而保护细胞抗氧化损伤，其作by…hydrogen…peroxide…(H 2O 2).…Methods:…The…oxidative…damage…model…of…HT22…cells…induced…by…H 2O 2…was…established.…The…effect…of…Polygonatum…Polysaccharides…on…the…activity…and…morphological…changes…of…HT22…cells…were…observed.…The…levels…of…malondialdehyde…(…MDA)…activity…and…antioxidant…enzyme…activities…of…superoxide…dismutase…(SOD)…and…glutathione…(GSH)…activity…were…determined…by…respective…kits.…Meanwhile,…western…blot…was…used…to…detect…the…protein…expressions…of…Bax,…Bcl-2…and…NF-E2-related…factor…2…(Nrf2).…Results:…Polygonatum…Polysaccharides…(100,…200,…400…µg/mL)…could…enhance…the…cell…vitality…(P <0.05…or…P <0.01),…significantly…reduce…the…cell…damage…caused…by…H 2O 2.…And…it…could…significantly…reduce…the…production…of…MDA…(P <0.05…or…P <0.01),…increase…the…activities…of…SOD…and…GSH…(P <0.05…or…P <0.01).…In…addition,…Western…blot…results…showed…that…Bcl-2…and…Nrf2…protein…expressions…were…up-regulated.…Bax…protein…expression…were…down-regulated…by…Polygonatum…Polysaccharides. Conclusions: Polygonatum…Polysaccharides…can…enhance…the…intracellular…antioxidant…activity…to…improve…the…survival…rate…of…HT22…cells,…thus…protect…the…cells…from…oxidative…damage.…And…the…mechanism…is…related…to…Nrf2…pathway.…[Key words] Polygonatum…Polysaccharides ；Oxidative…Stress ；HT22…Cell ；Nrf2基金项目：福建中医药大学科研平台校管项目（X2017017-平台）。

西地那非对高氧所致肺损伤模型新生鼠的保护作用【摘要】目的：观察西地那非对高浓度氧暴露后新生大鼠肺组织形态学改变的影响,并探讨其机制。

方法：80只足月新生SD大鼠随机分为空气加生理盐水对照(A)组、空气加西地那非(B)组、高氧加生理盐水对照(C)组和高氧加西地那非治疗(D)组4组。

C、D组输入高体积分数氧(FiO2 0.85),B、D组每天予西地那非100mg?kg－1背部皮下注射。

在实验第14天观察肺组织病理改变、放射状肺泡计数(RAC),并且用免疫组化法测定肺组织内皮型一氧化氮合酶（eNOS）蛋白水平。

结果：D组肺组织病理改变减轻,RAC和肺微血管数目高于C组(7.340±0.620 vs 5.013±0.738，P＜0.001；3.855±0.717 vs2.375±0.705，P＜0.001)，且B、D两组肺组织eNOS表达明显增加(均P＜0.001)。

结论：西地那非对高氧所致肺损伤具有一定的保护作用，其机制可能与西地那非降低肺内血管压力及促进肺微血管生成并增加eNOS的表达有关。

【关键词】西地那非；高压氧；肺；新生大鼠氧疗是儿科常用的治疗措施,可提高动脉血氧分压,改善组织缺氧。

但在肺发育不成熟的早产儿中,长时间高浓度的氧疗易造成肺损伤,甚至导致患儿病死率增加,其中常见的慢性肺部疾病支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD) 即与氧疗密切相关。

该病以肺发育停滞为主要病理表现，但其发病机制尚未完全阐明,治疗也在探索中。

西地那非为5′- 磷酸二酯酶选择性抑制剂，临床主要用于治疗勃起功能不良及中重度肺动脉高压。

有研究表明［1］，在婴幼儿肺动脉高压动物模型中,西地那非能高选择性地扩张血管,降低肺血管阻力,从而有效地降低肺动脉压力,增加心输出量。

由于对这些新功能的认识,临床上对西地那非的新用途产生了浓厚的兴趣。

本实验予足月新生Sprague- Dawley (SD)大鼠持续吸入高浓度氧(FiO2=0.85)14d造成高氧肺损伤模型［2］，同时予西地那非皮下注射治疗,通过观察对比各组间肺组织形态学改变、肺放射状肺泡计数(RAC)、肺内微血管计数等，观察西地那非对高氧肺损伤大鼠模型肺组织形态学的影响,并进一步探讨西地那非的作用机制。

纳米二氧化硅对呼吸系统毒性及NF-κB在其中的作用摘要：纳米二氧化硅（SiNPs）作为纳米二氧化硅外观为白色无定形粉末，粒子尺寸在1~100nm之间，比表面积大且化学性质稳定，作为纳米技术消费产品中最常用的五种纳米材料之一，接触纳米SiO2的机会不断增加，有关暴露于其的健康危害的证据也在不断增加[1]，因此其安全性问题也逐步被大众所关注。

相关工矿职业人群通过呼吸道、皮肤、消化道等多种途径摄入体内，一般人群也可通过生物医疗、食品添加等途径将其摄入体内[2]。

SiNPs在体内、外均可诱导炎症和氧化应激反应，而长期接触SiNPs粉尘后，会引起以肺组织慢性持续性炎症与进行性纤维化为主要病理特点的全身性疾病[3]。

肺部由于其特殊的解剖结构及生理功能，使得呼吸系统成为重要的入侵途径之一。

核因子κB（nuclear factor kappa B, NF-κB）作为一种重要的转录因子，对于研究细胞功能、机体对疾病的反应和机体健康发展十分重要，有证据表明，NF-κB参与SiO2诱导的矽肺鼠模型的炎症纤维化发生发展过程，且抑制NF-κB后肺部炎症和纤维化均有所缓解。

因此，从SiNPs毒作用机制和NF-κB在其中发挥的作用两部分整理相关的研究进展。

关键词：纳米二氧化硅；肺毒性；NF-κB与常规颗粒相比，纳米颗粒更容易进入肺间隙，并在肺间隙中滞留更长的时间，纳米SiO2颗粒可通过多种途径进入机体，由于肺部特殊的解剖结构及生理功能，使得呼吸系统成为重要的入侵途径之一。

由于纳米SiO2具有较小的粒径及较大的比表面积，可逃避呼吸系统中细胞的吞噬作用，在肺泡中沉积和传播，也可透过气血屏障进入循环系统，对肺部以外的器官产生毒性作用。

NF-κB存在于绝大多数动物细胞内，参与细胞对刺激的反应，它的错误调节会引发许多疾病。

在纳米SiO2诱导的肺纤维化中，NF-κB信号通路一方面可能通过刺激巨噬细胞产生TNF-α、转化生长因子-β（Transforming growth factor-β，TGF-β）等炎性因子引起肺部炎症，另一方面可能通过调控肺泡上皮细胞中肺表面活性物质的表达以及调控EMT过程来影响肺纤维化的发展，是纳米SiO2的肺毒性研究中的关键靶点。