干化学法测定血糖的样本选择及试验评价

血糖测定干化学法常用什么方法血糖测定是衡量血液中葡萄糖浓度的一种重要指标，对于糖尿病患者的管理至关重要。

干化学法是其中一种常用的方法，通过对血液中的葡萄糖与试剂发生化学反应，来测定葡萄糖的浓度。

在干化学法中，一般使用酶法或化学法来进行测定血糖浓度。

下面将详细介绍干化学法常用的几种测定方法：1. 葡萄糖氧化试剂法：这是最常用的葡萄糖测定方法之一。

其原理是使用含有葡萄糖氧化酶和辅酶的试剂，将血液样品与试剂混合后，在适当的温度和酸碱条件下，葡萄糖经氧化反应，生成葡萄糖酸和过氧化氢。

过氧化氢与另一种试剂发生化学反应，生成有色产物，其浓度与葡萄糖的浓度成正比。

通过比色法或光度计测定产物的吸光度，可以计算出葡萄糖的浓度。

2. 磷酸葡萄糖酸化试剂法：这种方法是另一种常用的干化学法，同样通过酶的作用和化学反应来测定葡萄糖浓度。

在这个方法中，血液样品与含有磷酸葡萄糖酸化酶和磷酸葡萄糖酸化试剂的混合物反应，在适当的温度和酸碱条件下，葡萄糖酸化生成葡萄糖-6-磷酸。

进一步与另一种试剂发生化学反应，生成有色产物，其浓度与葡萄糖的浓度成正比。

通过比色法或光度计测定产物的吸光度，可以计算出葡萄糖的浓度。

3. 动态酶法：这是一种可以连续测定血糖浓度的方法。

其原理是将血液样品与含有葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶的试剂混合后，在适当的温度和酸碱条件下，葡萄糖在氧化酶的作用下产生过氧化氢。

过氧化氢与染色剂反应生成有色产物，其浓度与葡萄糖的浓度成正比。

通过光度计测定产物的吸光度，可以实时监测葡萄糖的浓度变化。

4. 反应级联法：这是一种高灵敏度的血糖测定方法。

其原理是将血液样品与多个试剂按照一定的顺序加入，通过多个反应的级联效应，产生有色产物。

这些反应一般包括氧化、酰化、缩合等。

产生的有色产物的浓度与葡萄糖的浓度成正比。

通过比色法或光度计测定产物的吸光度，可以计算出葡萄糖的浓度。

除了上述常用的方法外，还有一些其他的干化学法可供选择，如胆甾-3-酮醇氧化法、酮糖酶法等。

1. 熟悉并掌握国标法测定糖分的基本原理和操作步骤。

2. 通过实验，验证国标法测定糖分的准确性和可靠性。

3. 培养实验操作技能和数据分析能力。

二、实验原理国标法测定糖分主要是通过滴定法，利用糖类物质在特定条件下与硫酸反应生成还原糖，再通过与标准氢氧化钠溶液反应，通过滴定计算出糖分含量。

本实验采用苯酚-硫酸法测定还原糖含量。

三、实验材料与仪器材料：1. 标准糖溶液（葡萄糖）2. 标准氢氧化钠溶液3. 苯酚溶液4. 硫酸溶液5. 蒸馏水6. 实验用糖样品仪器：1. 电子天平2. 滴定管3. 移液管4. 烧杯5. 试管6. 酒精灯7. 温度计1. 标准溶液的配制：- 准确称取一定量的标准糖溶液，用蒸馏水稀释至100 mL，配制成浓度为1 g/L的标准糖溶液。

2. 样品的预处理：- 准确称取一定量的糖样品，用蒸馏水溶解，定容至100 mL。

3. 苯酚-硫酸溶液的制备：- 称取苯酚10 g，溶于100 mL 95%乙醇中，加入少量硫酸，溶解后转移至棕色瓶中，备用。

4. 滴定：- 取5 mL样品溶液于试管中，加入2 mL苯酚-硫酸溶液，充分混合。

- 将试管置于沸水中加热5分钟，取出后迅速冷却至室温。

- 用标准氢氧化钠溶液滴定至溶液颜色变为浅红色，记录消耗的氢氧化钠溶液体积。

5. 计算：- 根据滴定结果，计算样品中糖分含量。

五、实验结果与分析1. 实验数据：- 样品1：糖分含量为5.2%- 样品2：糖分含量为4.8%- 样品3：糖分含量为5.5%2. 结果分析：- 通过实验测定，样品中的糖分含量与理论值基本相符，说明国标法测定糖分具有较高的准确性和可靠性。

六、实验结论本实验通过国标法测定糖分，结果表明该方法准确、可靠，可用于实际生产中糖分含量的测定。

七、实验注意事项1. 实验过程中应严格按照操作步骤进行，避免误差。

2. 实验用仪器应保持清洁，避免污染。

3. 实验过程中应注意安全，避免硫酸等腐蚀性物质的溅伤。

八、实验总结本次实验通过对国标法测定糖分的操作步骤进行学习和实践，掌握了该方法的基本原理和操作技巧，为今后的实验工作奠定了基础。

选手班级： 选手姓名： 选手学号： 标本号：血糖测定（葡萄糖氧化酶法）竞赛时间：15分钟一、说明1．本题满分100分，完成时间15分钟。

2．要求独立完成，不得相互询问或讨论。

3．考核成绩为操作过程评分、操作结果评分和考核时间评分之和。

4．全部操作过程时间和操作后处理时间计入时间限额。

二、实验原理葡萄糖氧化酶（GOD ）催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸（D-葡萄糖酸δ内酯），并产生过氧化氢：葡萄糖+2H 2O+O 2葡萄糖酸+2H 2O 2在色原性氧受体（如联大茴香胺、4-氨基安替比林偶氮酚）的存在下，过氧化物酶催化过氧化氢，氧化色原物质，生成有色化合物。

其颜色深浅与血清葡萄糖含量成正比。

三、实验器材721分光光度计、小号试管≤7支、试管架1个、手动可调式移液器5～50μl 、1ml 和10ml 刻度吸管各两支、记号笔1支、水浴箱、擦镜纸，废物容器等。

四、实验试剂葡萄糖标准液、生理盐水、0.1mol/L 磷酸盐缓冲液、酶试剂、酚试剂等组成的试剂盒。

五、实验标本 新鲜血清。

六、操作步骤取3支小试管，按表进行操作。

先配制10ml 酶酚混合试剂（试剂比例R1：R2=9:1）。

加入物（ml ） 测定管 标准管 空白管 血清0.03 葡萄糖标准应用液0.03 生理盐水0.03 酶酚混合试剂3.03.03.0混匀，置37℃水浴中，保温10min ，分光光度计波长500nm ，比色杯光径1.0cm ，以空白管调零，分别读取标准管和测定管的吸光度。

七、数据记录与计算1．数据记录标准管吸光度测定管吸光度裁判签名确认2．计算血清葡萄糖浓度（写出计算公式及过程）裁判签名确认八、报告（如：血清葡萄糖：△.△△ mmol/L）。

裁判签名确认选手班级：选手姓名：选手学号：标本号：血糖测定（葡萄糖氧化酶法）评分标准序号项目考核内容分值扣分标准扣分得分1 准备工作报告参赛项目及序号5漏缺一项 1 着白大衣、帽、口罩、手套并按要求佩戴参赛签着装不整、漏缺某一项 1 仪表端庄、头发符合要求仪容、着装不整 1 小号试管、试管架、移液器及配套吸头、记号笔1支缺选及多选、台面凌乱 1检查仪器、试剂、标本状态并摆在操作台合理位置无检查 12 操作①试管编号②空白管加蒸馏水30µl③标准管加葡萄糖标准液30 µl④测定管加血清30µl⑤各管分别加酶工作液3ml⑥各管置37℃水浴保温10分钟取出比色12试管无编号 1空白管加蒸馏水 1标准管加葡萄糖标准 1测定管加血清30µl 1各管分别加酶工作液 1加液顺序错 1加错液 1加液量不准确 1无混匀 1混匀不规范 1无水浴 1水浴时间不准确 1反应液无倒回原试管 23 用722分光光度计比色①调波长（500nm）②清洗比色杯，将各管溶液倒入比色杯，置比色槽中③调“T 100%”和“T 0”，重复2次④进行比色测定，记录读数，反应液倒回原试管⑤回位至显示器出现“100.0”13无调波长 1调波长不准 1无调T100% 1无调T0 1分光光度计闭盖预热 1双手碰触变色杯光滑面 1比色后无洗干净比色杯 1未用擦镜纸擦拭比色杯 1比色杯未正确放比色槽 1显示器未稳定时读数 1⑥洗干净比色杯（三次）比色液体未达杯高一半 1反应液无倒回原试管 1读数不准确 14 数据与报告原始记录完整、规范5不完整、不规范 1 单位正确不正确 1 公式正确不正确 1 计算方法正确不正确 1 报告完整、正确不完整、不正确 15 计数结果相对误差=(︱X－T︱/T)（X为计数值，T为靶值）56(︱X－T︱/T)×56分、相对误差≥20%扣56分6 文明操作操作完成后台面的处理 1 摆放无序，用物随意放 1 将使用过的一次性物品弃入污物缸或指定位置。

血糖测定实验报告
实验目的，通过实验，掌握血糖测定的原理和方法，了解血糖在人体内的重要
作用。

实验仪器和试剂，血糖仪、血糖试纸、酒精棉球、无菌针头、手套、生理盐水。

实验原理，血糖是人体内最主要的能量来源，其正常范围维持着人体的生理平衡。

血糖测定的原理是利用血糖仪和试纸，通过一定的化学反应来测定血液中的葡萄糖浓度。

实验步骤：
1. 实验前准备，戴上手套，用酒精棉球擦拭手指，以消毒手指。

2. 用无菌针头在手指上抽取一滴血液，将血滴放在试纸上。

3. 将试纸插入血糖仪中，等待片刻，血糖仪会显示血糖浓度的数值。

4. 记录测得的血糖数值，并将使用过的试纸和无菌针头丢弃。

实验结果，根据实验测得的数据，我们可以得出血糖浓度的数值。

正常成年人
的空腹血糖浓度应在3.9-6.1mmol/L之间，餐后两小时血糖浓度应在3.9-7.8mmol/L
之间。

若血糖浓度超出正常范围，可能意味着患有糖尿病或其他疾病。

实验结论，通过本次实验，我们深入了解了血糖测定的原理和方法，掌握了正
确的操作步骤。

血糖浓度的测定对于人体健康至关重要，我们应该注意饮食健康，定期监测血糖浓度，及时发现并处理血糖异常情况。

实验注意事项：
1. 在实验过程中，一定要注意无菌操作，避免感染。

2. 使用完毕的试纸和无菌针头要妥善处理，避免伤害他人。

3. 实验结束后，要及时清洁仪器和工作台面，保持实验环境整洁。

通过本次实验，我们不仅掌握了血糖测定的基本原理和方法，也深刻认识到了血糖对人体健康的重要性。

希望大家能够重视血糖的检测，保持良好的生活习惯，预防疾病的发生。

最新血糖的测定实验报告
实验目的：
本实验旨在通过最新的血糖测定技术，对样本中的血糖水平进行准确测量，以评估该技术在临床诊断和疾病监控中的应用潜力。

实验方法：
1. 样本准备：选取10名健康志愿者和10名糖尿病患者，分别采集其空腹静脉血液样本。

2. 测定技术：采用电化学生物传感器技术进行血糖测定，该技术利用特定的酶或氧化还原聚合物作为生物识别元素，通过电流的变化来测定血糖浓度。

3. 数据收集：记录每位受试者的血糖测定值，并与标准生化分析仪的测定结果进行对比。

4. 统计分析：使用SPSS软件进行数据分析，计算两种方法的一致性及相关性。

实验结果：
1. 健康志愿者的血糖水平在3.9至6.1mmol/L之间，平均值为
5.2mmol/L。

2. 糖尿病患者的血糖水平在7.0至22.5mmol/L之间，平均值为
13.5mmol/L。

3. 最新电化学生物传感器技术的血糖测定值与标准生化分析仪的测定值具有高度一致性（相关系数r=0.985）。

4. 实验误差分析显示，新方法的误差范围在±5%以内，满足临床应用的精度要求。

讨论：
本实验结果表明，采用电化学生物传感器技术进行血糖测定具有高准
确性和可靠性。

与传统的生化分析方法相比，该技术具有操作简便、快速响应和低成本的优势，适合在资源有限的环境中使用。

此外，由于其便携性，该技术也适合于家庭自我监测血糖，有助于糖尿病患者的日常管理。

结论：
最新血糖测定技术展现出良好的临床应用前景，能够为糖尿病患者提供更为便捷的血糖监测手段。

未来的研究将进一步探索该技术的长期稳定性和在不同人群中的适用性。

干化学法测定血糖的样本选择及试验评价
陈建文;汤依群;钱明珍
【期刊名称】《蚌埠医学院学报》
【年(卷),期】2002(027)001
【摘要】目的:探讨小型血糖仪采用不同样本方式对测定结果的影响.方法:随机采集体检者的标本用干化学法测定,同时与大型生化分析仪的测定结果进行对照,并作统计学分析.结果:用小型血糖仪测定时,其末梢血与静脉全血和静脉血清测定值相近( P＞0.05),但静脉全血与静脉血清测定结果差异有显著性(P＜0.01),小型血糖仪与大型生化分析仪的测定结果差异均有显著性(P＜0.01),但结果间相关性均较好 (P＜0.001).结论:小型血糖仪测定方便、快捷,但其不能替代大型生化分析仪的测定结果,因此使用时必须掌握其使用技能.
【总页数】2页(P62-63)
【作者】陈建文;汤依群;钱明珍
【作者单位】蚌埠医学院附属医院,检验科,安徽,蚌埠,233004;蚌埠医学院附属医院,检验科,安徽,蚌埠,233004;蚌埠医学院附属医院,检验科,安徽,蚌埠,233004
【正文语种】中文
【中图分类】R446.112
【相关文献】
1.离子选择电极法与干化学法测定血清钾的方法学比较 [J], 雷达;李丽华;张知洪
2.氟化钠对三种干化学法测定血糖的影响 [J], 池胜英;袁谦;徐克
3.氟化钠对三种干化学法测定血糖的影响 [J], 池胜英;袁谦;
4.干化学法、电极法与湿化学法测定血糖抗干扰实验对比 [J], 沈凌炜;何晓晖;秦光明;
5.干化学法与酶法测定血糖、淀粉酶、尿素氮结果比较 [J], 李春伟;杨艳;刘淑延因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

一、实验背景血糖作为人体重要的代谢产物，对于维持生命活动具有重要意义。

血糖浓度过高或过低都会对人体健康产生严重影响。

因此，准确测定血糖浓度对于糖尿病患者的诊断、治疗及预后评估具有重要意义。

近年来，随着科技的不断发展，血糖测定方法逐渐多样化，其中葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法、离子选择电极法等被广泛应用于临床检测。

本文将对血糖测定实验报告进行分析，以期为临床血糖检测提供参考。

二、实验目的1. 掌握血糖测定的原理和方法；2. 了解不同血糖测定方法的优缺点；3. 分析实验结果，提高实验操作技能。

三、实验原理1. 葡萄糖氧化酶法：利用葡萄糖氧化酶催化葡萄糖与氧反应生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的催化下分解产生水和新生态氧，新生态氧将色原氧化成有色物质，根据颜色深浅判断血糖浓度。

2. 己糖激酶法：己糖激酶催化葡萄糖与ATP反应生成葡萄糖-6-磷酸和ADP，ADP 在ADP激酶的催化下生成ATP和无机磷酸，ATP在ATP激酶的催化下生成ADP和无机磷酸，ADP激酶和ATP激酶的活性与血糖浓度成正比，通过检测ADP激酶和ATP 激酶的活性，可以计算出血糖浓度。

3. 离子选择电极法：利用离子选择电极测定血液中葡萄糖浓度，电极对葡萄糖具有选择性响应，根据电极电位变化计算血糖浓度。

四、实验步骤1. 样本采集：采集患者静脉血或毛细血管血，加入抗凝剂，混匀。

2. 样本处理：按照不同测定方法进行样本处理，如分离血浆、制备滤液等。

3. 检测：将处理后的样本按照仪器说明书进行检测，记录结果。

4. 结果分析：根据实验数据，计算血糖浓度，并与正常值进行比较。

五、实验结果与分析1. 实验结果：实验结果显示，三种测定方法得到的血糖浓度均与正常值相符，但存在一定差异。

2. 结果分析：（1）葡萄糖氧化酶法：操作简便、快速，但易受氧化剂、还原剂等干扰，准确性较差。

（2）己糖激酶法：准确性高，但操作复杂、耗时较长，成本较高。

（3）离子选择电极法：操作简便、快速，但受电极性能、温度等因素影响较大，准确性较差。

中图分类号:R446.11+2 文献标识码:A干化学法、电极法与湿化学法测定血糖抗干扰实验对比沈凌炜,何晓晖,秦光明(浙江大学医学院附属第二医院检验科,浙江杭州310009)摘要:目的　实验探讨采用干化学法、电极法与湿化学法三种方法检测血糖(G lu)的抗干扰能力。

方法　在Vitros250、BECK2 M AN Synchron CX3、Olypums AU22700上分别用维生素C、胆红素、血脂作为干扰物对葡萄糖测定的干扰进行分析。

结果　维生素C≥7.8mg/dl、Hb≥250mg/dl、胆红素>2.00mg/dl时对干化学法有明显干扰;甘油>400mg/dl、胆红素>8.00mg/dl时对湿化学法有干扰;Hb≥1000mg/dl时对电极法略有干扰。

结论　电极法是一种快速、稳定、抗干扰能力强的检测方法,适合急诊检验;湿化学法干扰因素少,适合常规大批量检验;干化学法灵活、简便,但抗干扰能力差,可作急诊检验的辅助手段。

关键词:干化学;电极法;湿化学法;血糖 血糖(G lu)是急诊检验的常规项目。

随着多学科高新技术在干化学领域的融合与应用,干化学技术与配套仪器的长足发展,使其成为急诊生化检测的常用方法[1]。

但是传统的湿化学法、电极法仍然在广泛应用。

由于干化学法、电极法与湿化学法测定G lu的原理各不相同,为了正确地评价G lu测定的结果,笔者探讨了三种方法的抗干扰能力。

1　材料与方法1.1　材料1.1.1　仪器　美国强生Vitros250全自动干化学分析仪、美国BECK MAN Synchron CX3急诊生化分析仪、日本Olypums AU22700全自动生化分析仪。

1.1.2　试剂　(1)干化学法(G OD法)　美国强生公司生产G lu干片(批号0019-0615-5195)、定标液(批号0191);电极法:BECK MAN公司生产G lu试剂(批号M202080)、定标液(批号0302202);湿化学法(HK法):日本和光纯药工业株式会社生产G lu试剂(批号DG925)、定标液(批号104);(2)质控血清由BECK MAN公司生产(批号M807072);上海生物制品研究所生产(批号970302);实验室自配质控混合血清(批号20020612)。

・实验研究・文章编号　1007-9564(2004)01-0089-02干化学法与酶法测定血糖、淀粉酶、尿素氮结果比较271000　山东省泰安市中心医院检验科　李春伟　杨　艳　刘淑延关键词　干化学法;酶法;生化检测;血糖;淀粉酶;尿素氮中图分类号　R446.11 文献标识码　A 血糖、淀粉酶、尿素氮的测定是临床检验中非常重要的项目。

临床测定方法较多,使用的仪器也多种多样,它们的灵敏度、准确性也存在众多差异,导致测定结果之间的可比性较差,给临床诊断和治疗带来了诸多不便。

为此,我们2002年1—3月采用干化学法与酶法测定血糖(B G)、淀粉酶(AMS)、尿素氮(BUN),并就干化学法测定的价值和质量控制与酶法做比较分析。

现将结果报告如下。

1　材料与方法1.1　仪器　采用德国宝灵曼公司提供的干化学法快速生化分析仪Reflotron。

1.2　B G、AMS、BUN干化学法测定　试纸条由上述公司提供。

按说明开机预温,将标本32μl加在红色条块上,在15s之内进行测定。

仪器自动识别测定编码。

1.3　B G、AMS、BUN酶法(K it)测定试剂　由温州东欧生物工程有限公司提供。

按说明在荷兰生产的ISP—2半自动生化分析仪、速率法进行测定。

1.4　血液标本　为我科保存的正常和异常的混合血清。

2　结果2.1　时间的影响　将定值质控血清(No:000801,由卫生部临检中心提供)进行干化学法测定,结果B G定值为(6.74±0.26)mmol/L,第一试纸条每隔2min测定1次,2～12min的结果为6.59,7.43,7.67,7.67,7.28,6.51mmol/L,第二试纸条结果为6.60,6.98,6.92,6.89,6.89,6.83mmol/L。

当延至25min时结果呈明显下降。

AMS[定值为(751±45)U/L]干化学法:第一试纸条结果3min为2180U/L、6min为<30U/ L。

一、实验目的本次实验旨在通过血糖检测方法，了解实验对象在不同时间点的血糖水平，为糖尿病的诊断、治疗和监测提供参考依据。

二、实验原理血糖检测是通过测定血液中葡萄糖的含量来判断血糖水平的方法。

实验中常用的血糖检测方法有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法等。

本实验采用葡萄糖氧化酶法进行血糖检测。

三、实验材料1. 试剂：葡萄糖氧化酶试剂盒、缓冲液、洗涤液等。

2. 仪器：血糖检测仪、离心机、移液器等。

3. 样品：实验对象空腹静脉血、餐后2小时静脉血。

四、实验方法1. 样品处理：将空腹静脉血和餐后2小时静脉血分别注入抗凝管中，充分混匀后，3000r/min离心10分钟，取上清液备用。

2. 血糖检测：按照葡萄糖氧化酶试剂盒说明书，将处理好的样品和试剂按照比例加入反应杯中，置于血糖检测仪上，按照仪器提示操作进行检测。

五、实验结果1. 实验对象空腹血糖检测结果：6.1mmol/L。

2. 实验对象餐后2小时血糖检测结果：10.2mmol/L。

六、结果分析1. 根据世界卫生组织（WHO）血糖诊断标准，空腹血糖≥7.0mmol/L，餐后2小时血糖≥11.1mmol/L，可诊断为糖尿病。

本实验中，实验对象的空腹血糖和餐后2小时血糖均未达到糖尿病诊断标准，但餐后2小时血糖水平较高，提示实验对象可能存在血糖异常。

2. 实验对象空腹血糖水平正常，说明实验对象在未进食状态下，血糖水平处于正常范围。

餐后2小时血糖水平较高，可能与以下因素有关：a. 实验对象饮食中糖分摄入过多；b. 实验对象胰岛素分泌不足或作用减弱；c. 实验对象存在胰岛素抵抗现象。

七、结论本次实验通过对实验对象血糖水平的检测，发现实验对象餐后2小时血糖水平较高，提示可能存在血糖异常。

建议实验对象进一步检查，明确是否存在糖尿病。

同时，实验对象应注意调整饮食结构，控制糖分摄入，加强锻炼，降低血糖水平。

八、实验建议1. 在进行血糖检测时，应严格按照实验操作规程进行，确保实验结果的准确性。