T-Creating Cardiac Rate Effect

丹红合参麦注射液治疗慢性心力衰竭的临床效果【摘要】目的探讨分析对慢性心力衰竭患者采用丹红合参麦注射液治疗的临床疗效。

方法选取2020年3月到2022年3月期间我院收治的56例慢性心力衰竭患者为研究对象，根据数字表法对其分组，其中28例为参照组实施常规治疗，其余28例为研究组通过丹红合参麦注射液治疗，观察对两组的治疗效果。

结果比较两组的心功能改善效果，研究组优于参照组（P＞0.05）；比较两组的治疗有效率，研究组高于参照组（P＜0.05）。

结论慢性心力衰竭患者采用丹红合参麦注射液治疗能够取得理想的临床疗效，尤其是可以帮助患者改善心功能，减轻不适症状，从而改善生活质量。

【关键词】慢性心力衰竭；丹红注射液；参麦注射液；治疗效果；对比分析[Abstract] Objective To explore and analyze the clinical effect of Danhong and Shenmai Injection on patients with chronic heart failure. Methods 56 patients with chronic heart failure admitted to ourhospital from March 2020 to March 2022 were selected as the study subjects. They were pided into groups according to the digital table method. Among them, 28 patients were treated as the reference group and the other 28 patients were treated as the study group by Danhong and Shenmai injection. The treatment effects on the two groups were observed. Results the improvement of cardiac function in the study group was better than that in the reference group (P > 0.05); The effective rate of treatment in the study group was higher than that in the reference group (P < 0.05). Conclusion Danhong combined with Shenmai injection can achieve ideal clinical effect in patients withchronic heart failure, especially it can help patients improve cardiac function, alleviate discomfort symptoms and improve quality of life.[Key words] chronic heart failure; Danhong injection; Shenmai injection; Therapeutic effect; comparative analysis慢性心力衰竭属于多种心血管疾病的终末期表现，这也是导致患者死亡的主要原因。

·81·大 医 生D O C T O R2020年第19期美托洛尔联合硝酸异山梨酯治疗冠心病心绞痛的临床观察王秋阳1 张琦惠2 刘 佳1 （1.齐齐哈尔医学院附属第一医院，黑龙江齐齐哈尔 161005；2.齐齐哈尔市建华医院，黑龙江齐齐哈尔 161041）摘要：目的 观察在冠心病心绞痛的治疗中应用美托洛尔和硝酸异山梨酯的临床治疗效果。

方法 选取2018年10月至2019年7月齐齐哈尔医学院附属第一医院收治的患有冠心病心绞痛患者182例作为研究对象，根据就诊时间的先后顺序分为联合组和对照组，每组91例。

联合组采用硝酸异山梨酯和美托洛尔联合治疗，对照组仅采用硝酸异山梨酯治疗。

比较两组患者的临床治疗效果、心绞痛发作情况、心功能和血清指标及左心射血分数（LVEF）。

结果 联合组患者的治疗总有效率为95.60%，显著高于对照组的80.22%，组间比较差异有统计学意义（P ＜0.05）。

用药后，联合组患者心绞痛每周发作（1.52±0.35）次，每次发作时间为（2.35±0.56）min，均少于对照组的（3.65±1.13）次和（4.87±1.55）min，组间比较差异有统计学意义（P ＜0.05）。

治疗后，联合组患者的超敏C 反应蛋白（hs-CRP）水平为（9.76±2.68）mg/L，白介素6（IL-6）水平为（11.38±1.57）ng/L，LVEF 水平为（72.15±4.78）%，以上指标均优于对照组的（13.75±2.09）mg/L，（15.49±1.97）ng/L 和（63.39±5.37）%，组间比较差异有统计学意义（P ＜0.05）。

结论 应用美托洛尔和硝酸异山梨酯联合治疗冠心病心绞痛的临床实效性更强，能够更好地帮助患者控制病情，进一步提高患者的生活质量。

关键词：冠心病；心绞痛；美托洛尔；硝酸异山梨酯Clinical Observation of Metoprolol Combined With Isosorbide Dinitrate in the Treatment of Angina Pectoris of Coronary Heart DiseaseWANG Qiuyang 1 ZHANG Qihui 2 LIU Jia 1（1.The First Affiliated Hospital of Qiqihar Medical College，Qiqihar，Heilongjiang 161005，China；2.Jianhua Hospital of Qiqihar，Qiqihar，Heilongjiang 161041，China）Abstract：Objective To observe the clinical effect of metoprolol and isosorbide nitrate in the treatment of coronary heart disease and angina pectoris. Method A total of 182 patients with coronary heart disease and angina who were admitted to the First Affiliated Hospital of Qiqihar Medical College from October 2018 to July 2019 were selected as the subjects of the study. According to the specific time of admission，the patients were divided into a combined group and a control group，with 91 patients in each group. The combination group was treated with isosorbide nitrate and metoprolol，while the control group was treated with isosorbide nitrate only. The clinical treatment effect，angina attack，cardiac function and serum indicators and LVEF were compared between the two groups. Results The total effective rate of the combined group was 95.60%，which was significantly higher than that of the control group（80.22%），and the difference between the two groups was statistically significant（P ＜0.05）. After treatment，the angina attack of the combined group was（1.52±0.35）times per week，and the duration of each attack was（2.35±0.56）min，which was less than that of the control group（3.65±1.13）times and（4.87±1.55）min，and the difference between the two groups was statistically significant（P ＜0.05）. After treatment，the hS-CRP level，IL-6 level and LVEF level in the combined group were（9.76±2.68）mg/L，（11.38±1.57）ng/L and （72.15±4.78）%，all of which were better than those in the control group（13.75±2.09）mg/L，（15.49±1.97）ng/L and（63.39±5.37）%，with statistically significant differences between groups（P ＜0.05）. Conclusion Metoprolol combined with isosorbide dinitrate in the treatment of coronary heart disease and angina pectoris has stronger clinical efficacy，which can better help patients control the disease and improve the quality of life.Keywords：coronary heart disease；angina；metoprolol；isosorbide nitrate作者简介：王秋阳，本科，主治医师，研究方向：心血管疾病。

第三部分医学英语的写作任务一标题的写作（Title）标题的结构1. 名词+介词Blindness（视觉缺失）after Treatment for Malignant Hypertension 2. 名词+分词Unilateral Neurogenic Pruritus Following Stroke中风后单侧神经性瘙痒3. 名词+不定式Suggestion to Abolish Icterus Index Determination（黄疸指数测定）where Quantitative Bilirubin Assay（胆红素定量）is Available建议能做胆红素定量的化验室不再做黄疸指数测定4. 名词+同位语Gentamicine, a Selelctive Agent for the isolation of Betahemolytic Streptocc ociβ-溶血性链球菌庆大霉素是分离β-溶血性链球菌的选择性药物5. 名词+从句Evidence that the V-sis Gene Product Transforms by Interaction with the Receptor for Platelet-derived Growth Factor血小板源性生长因子.V-sis 基因产物由血小板生成因子受体相互作用而转化的依据6. 动名词短语Preventing Stroke in patients with Atrial Fibrillation心房纤维性颤动心旁纤颤患者中风预防Detecting Acute Myocardial Infarction（急性心肌梗死）byRadio-immunoassay for Creative Kinase（酐激酶）用放射免疫法测定酐激酶诊断急性心肌梗死7. 介词短语On Controlling Rectal Cancer8. 陈述句Dietary Cholesterol is Co-carcinogenic协同致癌因素for Human Colon Cancer9. 疑问句Home or Hospital BirthsIs Treatment of Borderline Hypertension Good or Bad?注意副标题的作用1．数目：Endoluminal Stent-graft 带支架腔内搭桥for Aortic Aneurysms动脉瘤: A report of 6 cases带支架腔内搭桥治疗动脉瘤的六例报告2．重点：Aorto-arteritis 大动脉炎Chest X-ray Appearance and Its Clinical Significance大动脉炎胸部X线表现及临床意义3．方法：Gallstone Ileus（胆结石梗阻）: A Retrospective Study 4．作用：Carcinoembryonic Antigen in Breast-cancer Tissue: A useful prognostic indictor乳腺癌组织中癌胚抗原——一种有用的预后指示5．疑问：Unresolved—Do drinkers have less coronary heart disease? 6．连载顺序：Physical and Chemical Studies of Human Blood Serum: II. A study of miscellaneous Disease conditions人类血清的理论研究：II. 多种病例的研究7．时间：A Collaborative 综合Study of Burn Nursing in China: 1995-1999常见标题句式举例1. 讨论型：Discussion of/ on; An approach to; A probe into; Investigation of; Evaluation of / on汉语中的“初步体会”、“试论”、“浅析”之类的谦辞可以不译。

美国医学超声协会胎儿超声心动图操作指南-中文美国医学超声协会胎儿超声心动图操作指南I 简介先天性心脏病是导致胎儿死亡的主要原因，死亡率约为6‰。

准确的产前诊断能够改善婴儿的预后，尤其在需要前列腺素来维持动脉导管通畅的病例中更为重要。

胎儿超声心动图普遍认为是产前评价胎儿心脏畸形的最详细的检查手段。

其检查手段是在“基本”和“基本扩展”胎儿成像指南基础上延伸而出的，即胎儿心脏四腔心和流出道切面。

胎儿超声心动图只有在有确切的原因的情况下，并且最大限度的减少由于采集诊断信息而暴露在超声下的时间的情况下进行。

有时，额外或特殊的检查手段比如彩色多普勒是必须的。

但并不是所有的畸形都能够检出，以下指南将最大限度的探查大部分临床严重的先心病。

II人员的资质及责任参照AIUM官方文件《医师培训指南、诊断超声检查评估与解释、AIUM超声实践标准指南》III指征胎儿超声心动图指征基于先心病的亲代及胎儿危险因素。

然而，大多数病例并没有明确的已知的高位因素。

胎儿超声心动图的普通指征是(也不局限与此): 母体指征自身免疫抗体，抗Ro(SSA)/抗La(SSB)家族遗传疾病(如:马凡综合症)先心病家族史试管婴儿代谢性疾病(如:糖尿病和苯丙酮尿症)至畸源接触(如:类视黄醇和锂)胎儿指征心脏显像异常心脏心率心律异常胎儿染色体异常心外畸形胎儿水肿颈项透明层增厚单绒毛膜双胎无法解释的羊水过多IV检查申请书面或电子申请超声心动图检查应提供详细的信息以更好的完成检查。

检查申请必须由临床医生或其他有资格的健康中心出具，并提供相关临床资料，并且因遵守相关法律和当地健康结构规定。

V 检查说明以下部分为胎儿超声心动图详细或选择性推荐。

A(综述胎儿超声心动图通常在孕18到22周进行。

有些先心病可能在更早孕周发现。

最佳的图像是胎儿心尖向前或朝向孕妇腹壁。

由于声影(如:孕妇肥胖或胎儿俯卧体位)使得全面的检查十分困难，特别是在晚孕期更是如此。

所以由于心脏显像欠佳多次观察是必要的。

CARD6通过调控ASK1表达抑制炎症反应和细胞凋亡保护心肌缺血再灌注损伤赵海燕,严金龙,班努㊃库肯摘要目的:探讨胱天蛋白酶募集域蛋白6(CARD6)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中炎症反应和细胞凋亡的影响,并分析其相关分子机制㊂方法:将60只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)㊁模型组(MIRI组)㊁MIRI+空载慢病毒(LV-NC)组㊁MIRI+CARD6过表达慢病毒组(MIRI+LV-CARD6组),每组15只㊂除Sham组外,其他各组大鼠采用手术结扎冠状动脉左前降支的方法构建MIRI 模型㊂采用全自动生化分析仪检测心肌损伤指标含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测炎性细胞因子水平,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织形态学变化,原位末端标记测定(TUNEL)染色法检测大鼠心肌细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠心肌组织中凋亡相关蛋白表达,实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法和Western Blot法检测大鼠心肌组织中CARD6㊁细胞凋亡信号调节激酶1(ASK1)mRNA和蛋白表达㊂结果:与Sham组比较,MIRI组大鼠心肌细胞水肿变性,大量间质炎性细胞浸润,存在明显心肌组织病理损伤;大鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)㊁肌酸激酶(CK)㊁肌酸激酶同工酶(CK-MB)㊁心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)㊁白细胞介素-6(IL-6)㊁白细胞介素-1β(IL-1β)㊁单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平均升高;心肌细胞凋亡率升高,B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白表达量降低,Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达量均升高;心肌组织中CARD6蛋白和mRNA表达水平均降低,ASK1蛋白和mRNA表达水平均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)㊂与MIRI组比较,MIRI+LV-CARD6组大鼠心肌细胞水肿减轻,间质炎性渗出减少,心肌组织病理损伤明显减轻;大鼠血清LDH㊁CK㊁CK-MB㊁cTnT㊁TNF-α㊁IL-6㊁IL-1β㊁MCP-1水平均降低;心肌细胞凋亡率降低,Bcl-2蛋白表达量升高,Bax和Caspase-3蛋白表达量均降低;心肌组织中CARD6蛋白和mRNA表达水平均升高,ASK1蛋白和mRNA表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)㊂结论:CARD6通过抑制炎症反应和细胞凋亡保护MIRI,其作用机制与调控ASK1表达有关㊂关键词心肌缺血再灌注损伤;胱天蛋白酶募集域蛋白6;细胞凋亡信号调节激酶1;炎症反应;细胞凋亡;实验研究d o i:10.12102/j.i s s n.1672-1349.2023.14.010CARD6Protects Against Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury by Regulating ASK1Expression to Inhibit Inflammation and ApoptosisZHAO Haiyan,YAN Jinlong,BANNU KukenThe Seventh Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University,Urumqi830063,Xinjiang,ChinaCorresponding Author YAN Jinlong,E-mail:****************Abstract Objective:To investigate the effect of caspase recruitment domain protein6(CARD6)on inflammatory response and apoptosis in myocardial ischemia-reperfusion injury(MIRI).Methods:A total of60Sprague-Dawley(SD)rats were randomly divided into sham operation group(sham group),model group(MIRI group),MIRI+empty lentivirus group(MIRI+LV-NC group),MIRI+CARD6 overexpression lentivirus group(MIRI+LV-CARD6group),with15rats in each group.Except for the sham group,rats in other groups MIRI modelswere established by surgical ligation of the left anterior descending coronary artery.An automatic biochemical analyzer was used to detect the content of myocardial injury indicators;enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)was used to detect the level of inflammatory cytokines;hematoxylin-eosin(HE)staining was used to observe the morphological changes of myocardial tissue in rats;the terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling(TUNEL)assay was used to detect cardiomyocyte apoptosis;Western Blot was used to detect the expression of apoptosis-related proteins in rat myocardial tissue;the real-time reverse transcriptase-polymerase chain reaction(RT-qPCR)and Western Blot were used to detect CARD6,apoptosis signal-regulated kinase1 (ASK1)mRNA,and protein expression in rat myocardial tissue.Results:Compared with the sham group,the rats in the MIRI group myocardial cell edema and degeneration,a large number of interstitial inflammatory cell infiltration,and obvious myocardial histopathological damage;the serum levels of lactate dehydrogenase(LDH),creatine kinase(CK),creatine kinase isoenzyme(CK-MB), cardiac troponin T(cTnT)levels,tumor necrosis factor-α(TNF-α),interleukin-6(IL-6),interleukin-1β(IL-1β)and monocyte chemoattractant protein-1(MCP-1)levels increased;cardiomyocyte apoptosis rate increased,B lymphocytoma-2gene(Bcl-2)protein expression decreased.Bcl-2-associated X protein(Bax)and Caspase-3protein expressions both increased;CARD6protein and mRNA expression levels in myocardial tissue decreased,ASK1protein and mRNA expression levels increased,and the difference was statistically significant(P<0.05).Compared with the MIRI group,the MIRI+LV-CARD6group Showed less myocardial cell edema,less interstitial inflammatory exudation,and significantly less myocardial pathological damage;the levels of LDH,CK,CK-MB,cTn-T,TNF-α,IL-6,IL-1β, and MCP-1in serum decreased;the apoptosis rate of cardiomyocytes decreased,the protein expression of Bcl-2increased,and the protein expression of Bax and Caspase-3decreased;CARD6protein and mRNA expression level in myocardial tissue increased,the expression levels of ASK1protein and mRNA decreased,and the difference was statistically significant(P<0.05).Conclusion:CARD6 could protect MIRI by inhibiting inflammatory response and apoptosis,and its mechanism is related to the regulation of ASK1 expression.Keywords myocardial ischemia-reperfusion injury;Caspase recruitment domain protein6;apoptosis signal-regulated kinase1;inflammation; apoptosis;experimental research基金项目新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(No.2021D01A173)作者单位新疆医科大学第七附属医院(乌鲁木齐830063)通讯作者严金龙,E-mail:****************引用信息赵海燕,严金龙,班努㊃库肯.CARD6通过调控ASK1表达抑制炎症反应和细胞凋亡保护心肌缺血再灌注损伤[J].中西医结合心脑血管病杂志,2023,21(14):2587-2593.急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)是世界范围内心血管疾病病人住院㊁死亡的常见原因之一,其发病是由于冠状动脉供血供氧中断,导致心肌细胞内能量下降,最终致使心肌细胞坏死[1-2]㊂当前,及时恢复缺血心肌的血流是有效减少梗死范围并降低病人死亡率的方法,然而,这种治疗可能对心肌造成复合损伤,称为心肌缺血再灌注损伤(myocardialischemia-reperfusion injury,MIRI)[3]㊂MIRI的发生严重影响AMI病人预后,但由于MIRI发病机制的复杂性,临床上尚无有效治疗MIRI的靶点或药物[4]㊂因此,探索MIRI的发病机制,寻找减轻MIRI的有效途径或方法,对于改善AMI预后至关重要㊂胱天蛋白酶募集域蛋白6(caspase recruitment domain protein6, CARD6)是CARD结构域蛋白的典型成员,属于同型蛋白质-蛋白质相互作用模块,其通过连接参与细胞凋亡或先天免疫的信号转导通路的组成部分,调节细胞凋亡和炎症反应[5]㊂CARD6最初被认为与细胞生长期间核转录因子-κB(NF-κB)信号的激活有关[6]㊂近年来有研究发现CARD6可有效减轻肝脏缺血/再灌注损伤[7]㊂Li等[8]研究报道,压力过载增加了CARD6的表达,可防止心肌肥厚㊂但CARD6在MIRI中的作用效果和机制尚少有报道,因此,本研究旨在探讨CARD6对MIRI中炎症反应和细胞凋亡的影响,并分析其相关作用机制㊂1材料与方法1.1实验动物选取无特定病原体(SPF)级SD雄性大鼠60只,8周龄,体质量220~240g,由新疆医科大学实验动物中心提供,生产许可证:SCXK(新)2018-0002㊂所有动物均严格按照动物饲养规则,置于室温22~26ħ㊁相对湿度50%~60%㊁12h光暗交替的标准环境饲养,自由饮水和进食㊂1.2主要试剂空载慢病毒(LV-NC)和CARD6过表达慢病毒(LV-CARD6)均购自上海吉凯基因公司;肌酸激酶(CK)㊁肌酸激酶同工酶(CK-MB)㊁心肌肌钙蛋白T (cTnT)㊁乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒均购自南京建成科技有限公司;肿瘤坏死因子-α(TNF-α)㊁白细胞介素-6(IL-6)㊁白细胞介素-1β(IL-1β)㊁单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒购自武汉赛培生物科技有限公司;苏木精-伊红(HE)染色试剂盒购自武汉博尔夫生物科技有限公司;原位末端标记测定法(TUNEL)凋亡检测试剂盒购自塞维尔生物技术有限公司;Trizol提取试剂㊁反转录试剂盒㊁实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测试剂盒均购自上海翌圣生物科技股份有限公司;二喹啉甲酸(BCA)蛋白定量试剂盒㊁放射免疫沉淀分析(RIPA)裂解液㊁增强化学发光试剂(ECL)均购自上海碧云天生物技术有限公司;CARD6㊁细胞凋亡信号调节激酶1 (ASK1)㊁B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)㊁Bcl-2相关X蛋白(Bax)㊁半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)㊁甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)一抗购自英国Abcam公司;辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗购自美国Cell Signaling Technology公司㊂1.3实验方法1.3.1分组给药与MIRI模型建立将饲养1周的60只大鼠随机分为假手术组(Sham组)㊁模型组(MIRI组)㊁MIRI+LV-NC组㊁MIRI+ LV-CARD6组,每组15只㊂其中MIRI+LV-NC组大鼠经尾静脉注射LV-NC慢病毒,MIRI+LV-CARD6组大鼠经尾静脉注射LV-CARD6慢病毒,注射剂量均为每只10μL;Sham组和MIRI组大鼠均尾静脉注射等剂量生理盐水㊂于注射给药2周后,MIRI组㊁MIRI+LV-NC组和MIRI+LV-CARD6组大鼠采用手术结扎冠状动脉左前降支的方法构建MIRI模型㊂操作如下:大鼠禁食不禁水12h,腹腔注射戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉,仰卧位固定于实验台上,给予气管插管,连接心电图和小动物呼吸机后,沿大鼠左侧第3肋㊁第4肋间切开皮肤,打开胸腔暴露心脏,于左心耳下方约2mm处钝性分离冠状动脉左前降支血管并以0号手术线进行活结结扎,30min后打开活结恢复血流进行再灌注2h㊂大鼠缺血时心肌局部组织发绀㊁心电图显示ST段持续抬高,再灌注时心肌组织恢复红润且ST段下降表示造模成功㊂Sham组大鼠同上述操作,但不进行冠状动脉左前降支血管结扎㊂1.3.2大鼠心肌损伤指标检测再灌注2h后,麻醉大鼠,经腹主动脉取血,静置30min后以3000r/min离心15min,收集上层血清,应用全自动生化分析仪检测大鼠血清LDH㊁CK㊁CK-MB㊁cTnT含量㊂1.3.3大鼠血清炎性细胞因子水平检测取制备的大鼠血清,按照ELISA试剂盒说明书操作,检测大鼠血清TNF-α㊁IL-6㊁IL-1β㊁MCP-1水平㊂1.3.4HE染色观察大鼠心肌组织形态学变化腹主动脉取血结束后立即处死大鼠,摘取大鼠心脏,部分置于4%多聚甲醛中固定,制作4μm厚度的石蜡切片;部分置于-80ħ冰箱中保存备用㊂取大鼠心肌组织石蜡切片,常规HE染色,显微镜下观察㊂1.3.5TUNEL染色法检测大鼠心肌细胞凋亡情况取大鼠心肌组织石蜡切片,常规脱蜡至水,用0.5%Triton X-100溶液孵育20min,磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤后,滴加50μL含有荧光素-12-dUTP的TUNEL试剂,37ħ避光孵育60min,PBS洗涤3次, DAPI显色,苏木素复染,封片后荧光显微镜下观察,凋亡阳性细胞呈绿色,正常细胞核呈蓝色㊂1.3.6RT-qPCR法检测大鼠心肌组织中CARD6和ASK1mRNA表达取大鼠心肌组织,加入Trizol提取心肌组织中总RNA,以紫外分光光度计测定RNA含量㊂以反转录试剂盒将RNA反转录为cDNA,以cDNA为模板进行RT-qPCR扩增实验,反应体系为20μL㊂引物序列:CARD6正向引物为:5'-AGCACTCTGT A TCT ACA TGAC-3',反向引物为:5'-ATGATGCCATTATAAGACCGA-3',扩增产物长度为154bp;ASK1正向引物为:5'-GATCGACCCTAACCAAGGCT-3',反向引物为:5'-ACCAGTTCTTCTGAGGCACA-3',扩增产物长度为113bp; GAPDH正向引物为:5'-GAACAGTGTGGTCGGTGAGG-3',反向引物为:5'-TTACCGGGCCCAAGTGTAGC-3',扩增产物长度为169bp㊂反应条件为:95ħ60s,95ħ30s,65ħ30s,72ħ30s,共40个循环㊂以GAPDH 为内参基因,按公式2-әәCt计算目的基因mRNA表达的相对水平㊂1.3.7蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠心肌组织中凋亡相关蛋白㊁CARD6和ASK1蛋白表达取大鼠心肌组织,用RIPA裂解液裂解,提取心肌组织中总蛋白质,应用BCA法确定蛋白浓度,将蛋白煮沸变性后,取定量蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,湿法转移至PVDF膜上,5%的脱脂牛奶中常温封闭1h,洗膜后,加入一抗Bcl-2 (1ʒ1000)㊁Bax(1ʒ1000)㊁Caspase-3(1ʒ1000)㊁CARD6(1ʒ2000)㊁ASK1(1ʒ2000)㊁GAPDH(1ʒ1000), 4ħ孵育过夜,洗膜,加入二抗(1ʒ5000),室温孵育2h, ECL发光液显影成像,以GAPDH为内参,采用Image J 软件对蛋白条带进行分析㊂1.4统计学处理采用SPSS25.0软件进行统计学分析,定量资料符合正态分布采用均数ʃ标准差(xʃs)表示,多组间比较采用单因素方差分析(One-Way ANOVA),进一步两两比较采用LSD-t检验,以P<0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1MIRI大鼠心肌组织中CARD6表达水平与Sham组比较,MIRI组大鼠心肌组织中CARD6蛋白和mRNA表达水平均降低(P<0.05);与MIRI组比较,MIRI+LV-NC组大鼠心肌组织中CARD6蛋白和mRNA表达水平无明显变化(P>0.05),MIRI+ LV-CARD6组大鼠心肌组织中CARD6蛋白和mRNA 表达水平均升高(P<0.05)㊂详见图1㊂图1MIRI大鼠心肌组织中CARD6表达水平(A为CARD6mRNA相对表达量;B为蛋白表达条带图;C为CARD6蛋白相对表达量㊂与Sham组比较,*P<0.05;与MIRI组比较,#P<0.05)2.2CARD6对MIRI大鼠心肌损伤指标水平的影响与Sham组比较,MIRI组大鼠血清LDH㊁CK㊁CK-MB㊁cTnT水平均升高(P<0.05);与MIRI组比较,MIRI+ LV-NC组大鼠血清LDH㊁CK㊁CK-MB㊁cTnT水平均无明显变化(P>0.05),MIRI+LV-CARD6组大鼠血清LDH㊁CK㊁CK-MB㊁cTnT水平均降低(P<0.05)㊂详见表1㊂表1CARD6对MIRI大鼠心肌损伤指标水平的影响(xʃs)组别只数LDH(U/L)CK(U/L)CK-MB(U/L)cTnT(μg/L) Sham组15121.73ʃ13.61175.49ʃ18.21135.22ʃ13.250.08ʃ0.03 MIRI组15752.36ʃ72.14①344.28ʃ35.06①358.21ʃ32.71① 1.39ʃ0.34①MIRI+LV-NC组15748.25ʃ72.66342.67ʃ34.15354.27ʃ33.42 1.37ʃ0.35 MIRI+LV-CARD6组15380.59ʃ37.99②237.28ʃ21.50②185.37ʃ20.45②0.49ʃ0.20②注:MIRI组与Sham组比较,①P<0.05;与MIRI组比较,②P<0.05㊂2.3CARD6对MIRI大鼠心肌组织形态学变化的影响Sham组大鼠心肌细胞排列整齐㊁形态规则,细胞核结构正常,无明显细胞水肿㊁坏死;MIRI组和MIRI+ LV-NC组大鼠心肌细胞连接松散,排列紊乱,细胞核固缩,细胞水肿变性,间质炎性细胞浸润明显增多; MIRI+LV-CARD6组大鼠心肌排列较为整齐,细胞水肿减轻,间质炎性渗出减少,较MIRI组和MIRI+LV-NC 组心肌组织病理损伤明显减轻㊂详见图2㊂图2CARD6对MIRI大鼠心肌组织形态学变化的影响(HE染色,ˑ400)2.4CARD6对MIRI大鼠血清炎性细胞因子水平的影响与Sham组比较,MIRI组大鼠血清TNF-α㊁IL-6㊁IL-1β㊁MCP-1水平均升高(P<0.05);与MIRI组比较,MIRI+LV-NC组大鼠血清TNF-α㊁IL-6㊁IL-1β㊁MCP-1水平均无明显变化(P>0.05),MIRI+LV-CARD6组大鼠血清TNF-α㊁IL-6㊁IL-1β㊁MCP-1水平均降低(P< 0.05)㊂详见表2㊂表2CARD6对MIRI大鼠血清炎性细胞因子水平的影响(xʃs)单位:pg/mL 组别只数TNF-αIL-6IL-1βMCP-1 Sham组1549.15ʃ5.6353.62ʃ7.11113.28ʃ14.62207.35ʃ20.61 MIRI组15213.65ʃ20.37①328.16ʃ31.28①422.59ʃ43.35263.01ʃ25.81①MIRI+LV-NC组15215.59ʃ20.45325.77ʃ32.57425.38ʃ42.18270.41ʃ24.12 MIRI+LV-CARD6组1591.64ʃ10.74②169.54ʃ15.71②236.28ʃ24.09②235.17ʃ23.52②注:MIRI组与Sham组比较,①P<0.05;与MIRI组比较,②P<0.05㊂2.5CARD6对MIRI大鼠心肌细胞凋亡率和凋亡相关蛋白的影响与Sham组比较,MIRI组大鼠心肌细胞凋亡率升高,凋亡相关蛋白Bcl-2表达量降低,Bax和Caspase-3表达量均升高(P<0.05);与MIRI组比较,MIRI+LV-NC组大鼠心肌细胞凋亡率㊁凋亡蛋白Bcl-2㊁Bax和Caspase-3表达量均无明显变化(P>0.05),MIRI+ LV-CARD6组大鼠心肌细胞凋亡率降低,凋亡相关蛋白Bcl-2表达量升高,Bax和Caspase-3表达量均降低(P<0.05)㊂详见图3㊁图4㊂图3 CARD6对MIRI 大鼠心肌细胞凋亡的TUNEL 染色(ˑ400)图4 CARD6对MIRI 大鼠心肌细胞凋亡率和凋亡相关蛋白的影响(A 为细胞凋亡率;B 为凋亡相关蛋白表达条带图;C 为蛋白相对表达量㊂与Sham 组比较,*P <0.05;与MIRI 组比较,#P <0.05)2.6 CARD6对MIRI 大鼠心肌组织中ASK1表达的影响与Sham 组比较,MIRI 组大鼠心肌组织中ASK1蛋白和mRNA 表达水平均升高(P <0.05);与MIRI 组比较,MIRI +LV -NC 组大鼠心肌组织中ASK1蛋白和mRNA 表达水平无明显变化(P >0.05),MIRI +LV -CARD6组大鼠心肌组织中ASK1蛋白和mRNA 表达水平均降低(P <0.05)㊂详见图5㊂图5 CARD6对MIRI 大鼠心肌组织中ASK1表达的影响(A 为ASK1mRNA 相对表达量;B 为ASK1蛋白表达条带图;C 为ASK1相对表达量㊂与Sham 组比较,*P <0.05;与MIRI 组比较,#P <0.05)3 讨 论近年来,AMI 发病率呈上升趋势的同时也趋于年轻化,尽管临床推广应用经皮冠状动脉介入㊁溶栓治疗等技术治疗AMI ,但AMI 治疗中无法有效避免MIRI 的发生,MIRI 逐渐成为临床面临的主要难题之一[9]㊂研究表明MIRI 与细胞内离子超载㊁线粒体膜损伤㊁氧自由基产生㊁内皮功能障碍㊁免疫激活㊁细胞凋亡等多种病理机制相关[10-11]㊂目前临床上无确定药物治疗MIRI,常以针对性应用抗血小板聚集等药物为治疗策略,故而探索治疗MIRI的新方法至关重要㊂CARD6定位于细胞质中,在调节炎症反应和细胞凋亡方面发挥着重要作用㊂Wang等[12]报道,CARD6基因敲除小鼠在脊髓损伤后表现出较强的炎症反应和氧化应激,而CARD6基因过表达小鼠则表达出相反的效果,并抑制细胞凋亡,提示CARD6过表达可通过抑制细胞凋亡㊁减轻炎症和氧化应激来减轻小鼠的脊髓损伤㊂刘安祥[13]研究报道,CARD6可能通过抑制神经炎症反应过程减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,保护大鼠神经功能㊂本研究结果发现,MIRI大鼠中CARD6表达量下调,提示CARD6参与MIRI发生㊁发展㊂与Sham组大鼠相比,MIRI组大鼠心肌损伤指标LDH㊁CK㊁CK-MB㊁cTnT水平均升高,而CARD6过表达慢病毒的干预则降低了MIRI大鼠心肌损伤指标LDH㊁CK㊁CK-MB㊁cTnT水平,并减轻大鼠心肌细胞水肿㊁减少心肌间质炎性细胞浸润,改善MIRI大鼠心肌组织病理损伤,表明CARD6可有效减轻MIRI㊂心肌梗死引起无菌炎症反应,导致梗死心肌面积扩大和心力衰竭,加重心肌损伤㊂有研究证实,炎症反应是MIRI发生的病理机制之一[14],TNF-α㊁IL-6㊁IL-1β是巨噬细胞㊁淋巴细胞等分泌的主要促炎因子,其表达水平变化可直接反映机体炎症反应程度㊂相关研究报道,在MIRI中,降低炎性因子TNF-α㊁IL-6㊁IL-1β的水平可提高心肌细胞的存活率[15-16]㊂MCP-1是一种趋化因子,参与动脉粥样硬化的起始炎症反应,促进动脉粥样硬化斑块的破裂㊂研究发现MCP-1在AMI病人外周血中表达升高,在AMI发生后心室重塑中起着重要作用[17]㊂Zhang等[18]报道,MCP-1在MIRI中表达升高,参与并介导缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡㊂本研究结果显示,MIRI大鼠血清中炎性细胞因子TNF-α㊁IL-6㊁IL-1β㊁MCP-1水平均升高,CARD6降低MIRI大鼠血清中TNF-α㊁IL-6㊁IL-1β㊁MCP-1水平㊂提示CARD6可抑制MIRI中的炎症反应㊂细胞凋亡是参与各种疾病发生㊁发展和预后的程序性细胞死亡形式之一,受体内抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax㊁Caspase-3等介导的一系列信号通路调控㊂过度的细胞凋亡可以促进冠状动脉疾病㊁MIRI㊁缺血后心脏重构和冠状动脉粥样硬化等一系列病理过程,因此,靶向细胞凋亡的治疗对于减轻MIRI 具有重要意义[19-20]㊂既往研究证实,抑制细胞凋亡可改善MIRI[21]㊂本研究检测MIRI大鼠心肌细胞凋亡率和凋亡相关蛋白表达,结果显示,MIRI大鼠心肌细胞凋亡率升高,Bcl-2蛋白表达量下调,Bax和Caspase-3蛋白表达量上调㊂CARD6则降低MIRI大鼠心肌细胞凋亡率,上调Bcl-2蛋白表达量,下调Bax和Caspase-3蛋白表达量㊂该结果提示CARD6能够通过抑制细胞凋亡减轻MIRI㊂ASK1是一种广泛表达的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,其被激活可响应内质网应激㊁钙信号㊁G蛋白偶联受体信号等多种信号通路㊂研究发现,ASK1不仅在应激诱导的细胞死亡中起着关键作用,而且在促进细胞适应或对抗各种应激的生物活动中也发挥着重要作用[22]㊂研究报道,ASK1参与了肾脏㊁肝脏MIRI的发生,抑制ASK1激活可在一定程度上抑制MIRI引起的炎症反应和细胞凋亡[23-24]㊂Xu等[25]发现抑制ASK1介导的c-Jun氨基端激酶(JNK)/p38信号转导通路可减轻MIRI的发生㊂本研究检测MIRI大鼠中ASK1表达发现,MIRI大鼠心肌组织中ASK1蛋白和mRNA表达水平均明显上调,提示ASK1参与MIRI发生㊁发展㊂Sun等[26]研究报道,CARD6与ASK1及其介导的JNK/p38信号通路具有相互作用,ASK1可介导CARD6的功能㊂本研究探索MIRI中CARD6与ASK1的关系,结果发现,慢病毒介导的CARD6过表达能下调MIRI大鼠心肌组织中ASK1蛋白和mRNA 表达水平㊂表明在MIRI中,CARD6通过抑制ASK1表达发挥保护作用㊂综上所述,本研究证实CARD6可通过抑制炎症反应和细胞凋亡减轻MIRI,其作用机制可能与调节ASK1表达相关㊂本研究为临床治疗MIRI提供了新的靶点和方向㊂参考文献:[1]TIBAUT M,MEKIS D,PETROVIC D.Pathophysiology ofmyocardial infarction and acute management strategies[J].Cardiovasc Hematol Agents Med Chem,2017,14(3):150-159. 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- 85 -①江西省抚州市妇幼保健院　江西　抚州　344000通信作者：郑风慧性激素联合比索洛尔治疗围绝经期功能性心律失常的疗效分析郑风慧①【摘要】　目的：探讨性激素疗法联合比索洛尔治疗围绝经期功能性心律失常的临床效果。

方法：选取2021年1月—2022年10月抚州市妇幼保健院的80例围绝经期功能性心律失常患者，按照治疗方法的不同将其分为性激素治疗组和联合组，每组40例，性激素治疗组予以小剂量雌激素替代治疗，联合组在性激素治疗组的基础上口服比索洛尔。

比较两组治疗效果、心功能指标及心率变异性（HRV）、雌二醇（E 2）和卵泡刺激素（FSH）等指标变化。

结果：联合组的临床总有效率明显高于性激素治疗组，差异有统计学意义（P <0.05）。

治疗后，两组左室收缩末内径（LVESD）、左室舒张末期内径（LVEDD）均较治疗前缩短，联合组上述指标均短于性激素治疗组，两组心率（HR）均较治疗前下降，联合组低于性激素治疗组；两组左室射血分数（LVEF）较治疗前均显著上升，且联合组高于性激素治疗组；两组相邻窦性心搏R-R 间期差值大于50 ms 所占百分比（PNN50）、窦性心搏R-R 间期平均值标准差（SDANN）、窦性心搏R-R 间期标准差（SDNN）和相邻窦性心搏R-R 间期差值均方根（RMSSD）均较治疗前显著上升，且联合组均高于性激素治疗组；两组FSH 均较治疗前显著下降，且联合组低于性激素治疗组；两组E 2均较治疗前显著上升，且联合组高于性激素治疗组，差异均有统计学意义（P <0.05）。

结论：对围绝经期功能性心律失常患者采用性激素和比索洛尔联合治疗时疗效显著，能有效改善患者心功能、HRV 和性激素各指标水平。

【关键词】　性激素疗法　比索洛尔　围绝经期　心律失常　心率变异性　性激素 Efficacy Analysis of Sex Hormone Combined with Bisoprolol in the Treatment of Perimenopausal Functional Arrhythmia/ZHENG Fenghui. //Medical Innovation of China, 2023, 20(34): 085-089and prevention of acute and recurrent ankle sprain: an overview of systematic reviews with meta-analysis[J].Br J Sports Med，2017，51（2）：113-125.[12]李慧，李达，李晓芳.不同方法治疗急性踝关节外侧副韧带损伤的效果比较[J].当代医学，2022，28（13）：156-158.[13]邹庆芳，邵宏斌，许杰男，等.急性外侧踝扭伤保守治疗的研究进展[J].中国医学创新，2023，20（15）：179-183.[14]丁阳胜，姜从玉.体外冲击波治疗用于肌肉骨骼康复的研究进展[J].上海医药，2022，43（23）：17-21，25.[15] BOXBERG W，PERLICK L，GIEBEI G.Shockwave treatment oftherapy refractory soft tissue pain[M].Chirurg，1996，67（11）：1174-1178.[16]张隆浩，黄广林，满立波.放散状与聚焦状冲击波治疗肱骨外上髁炎的疗效比较[J].中国康复医学杂志，2013，28（2）：151-153.[17] ELISABETTA S，CALUM C，ANDREA S，et al.Image qualityevaluation of ultrasound imaging systems: advanced B-modes[J].J Appl Clin Med Phys，2019，20（3）：115-124.[18] MARSHALL A N，SNYDER VALIER A R，YANDA A，et al.The impact of a previous ankle injury on current health-related quality of life in college athletes[J].J Sport Rehabil，2020，29（1）：43-50.[19] LAUCIS N C，HAYS R D，BHATTACHARYYA T.Scoring theSF-36 in orthopaedics: a brief guide[J].J Bone Joint Surg Am，2015，97（19）：1628-1634.[20] ALIZAMANI S，GHASEMI G，LENJAN NEJADIAN S.Effectsof eight week core stability training on stable- and unstable-surface on ankle muscular strength, proprioception, and dorsiflexion in athletes with chronic ankle instability[J].J Bodyw Mov Ther，2023，34：6-12.[21] MAR ÍN FERM ÍN T，AL-DOLAYMI A A，D'HOOGHE P.Acute ankle sprain in elite athletes: how to get them back to the game?[J].Foot Ankle Clin，2023，28（2）：309-320.（收稿日期：2023-10-17）　（本文编辑：白雅茹） 围绝经期是指40周岁后的女性，因卵巢功能的下降，机体性激素和促性激素水平降低，引发的一系列代谢紊乱而出现的围绝经期症状，心律失常是其中常见的病症之一[1]。