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高效液相色谱串联质谱法测定大豆和玉米中的苯甲酰脲类农药残留i摘要：建立了大豆和玉米中苯甲酰脲类农药的反相高效液相色谱－电喷雾串联质谱(LC-ESI MS/MS) 检测方法。
样品经含0.1%醋酸的乙腈提取、浓缩，经阳离子固相萃取柱净化，液相色谱串联质谱测定。
9种苯甲酰脲类农药在5.0 ～200 µg/L范围内线性关系良好(r2> 0.995)。
在大豆和玉米基质中的检出限均为3.0 μg/kg，定量下限均为10.0 μg/kg。
在10.0、20.0、50.0 μg/kg3个添加水平下，9种苯甲酰脲类农药的回收率为45%～92%，精密度（RSD）小于14%。
方法准确、灵敏、简单，适用于大豆和玉米中9种苯甲酰脲类农药残留的同时测定。
关键词：液相色谱－质谱联用；苯甲酰脲类农药；大豆；玉米苯甲酰脲类化合物是一类使用非常广泛的农药。
该类化合物能通过抑制昆虫表皮几丁质合成酶和尿核苷辅酶的活化率，使卵内幼虫缺乏几丁质而不能孵化或孵化后随即死亡。
相比传统农药，苯甲酰脲类杀虫剂具有独特的作用机制、高的环境安全性、对鳞翅目昆虫极佳的杀虫活性或生长调节作用、易于人工合成等优点[1-2]。
我国由于高毒农药品种的淘汰促进了其它类杀虫剂的研发与应用，2002年昆虫生长调节剂用量增加了25.3％，占所有杀虫剂用量的9.4％，而其中苯甲酰脲类化合物占绝大部分。
苯甲酰脲类杀虫剂对水栖生物，特别是甲壳类（虾、蟹幼体）有毒性；在体内的持续期长，应该避免在作物接近成熟期使用。
鉴于此，研究苯甲酰脲类杀虫剂的毒性、代谢特点和在农产品中的残留非常必要。
由于该类药物对热不稳定，目前，对其的分析方法以HPLC-UV[3-8]和LC-MS/MS[9-16]方法为主，只有个别药物可以用GC-MS[17]检测。
HPLC-UV法对色谱分离的要求较高，因此限制了其在多种杀虫剂同时检测中的应用，目前多用于某种药物单独测定或少量药物同时测定。
当需要同时检测多种杀虫剂，且对限量要求较高时，LC-MS/MS方法成为首选。
固相萃取-液相色谱测定复杂基质蔬菜中9种烟碱类残留侯如燕;卞红正;赵秀霞;胡祎芳;苏婷;王孝辉;宛晓春【摘要】建立了韭菜、洋葱、大蒜等复杂基质蔬菜样品中呋虫胺、烯啶虫胺、氟啶虫酰胺、噻虫嗪、吡虫啉、噻虫胺、氯噻啉、啶虫脒、噻虫啉9种烟碱类农药残留的液相色谱检测方法.对比了几种常用溶剂的提取效率以及固相萃取材料对韭菜、洋葱样品中干扰基质的去除效果.研究结果表明,样品经微波处理后,用乙腈提取,Envi-Carb/PSA固相萃取柱净化,乙腈洗脱后,经反相高效液相色谱紫外检测器检测,在0.02～0.5 mg/kg加标水平下9种烟碱类农药的回收率为67%～110%,相对标准偏差均小于18.6%.所检测的3种蔬菜样品中除噻虫啉的定量下限为0.05 mg/kg外,其他8种农药的定量下限均不大于0.02 mg/kg.方法简便、快速,可满足复杂基质蔬菜中烟碱类农药多残留分析的要求.%A simple and sensitive high performance liquid chromatographic(HPLC) method was developed for the simultaneous determination of 9 nieotinoid insecticide residues, including dinotefuran,nitenpyram, flonicamid, thiamethoxam, imidacloprid, clothianidin, imidaclothiz, acetamiprid and thiacloprid, in sulphur-containing vegetables samples. The extract efficiencies of several solvent and the cleanup capacities of different SPE cartridges were compared. The vegetables were extracted with acetonitrile and cleaned up on an Envi - Carb/PSA cartridge. The nicotinoid insecticides were eluted with acetonitrile and detected with UV detector. The calibration curves showed good linearities in the range of 0.02 - 1.0 mg/L with correlative coefficient more than 0.999. The limits of quantitation (LOQ) were 0. 02 mg/kg for all 9 pesticide except for thiacloprid with LOQ of 0.05 rog/kg. The recoveriesof 9 pesticides from vegetable sample spiked at three concentration levels of 0.02 mg/kg,0.05 rog/kg and 0.5 mg/kg ranged from 67％ to 110％ with RSDs less than 18.6％. The established method was simple, sensitive and accurate, and was suitable for the routine detection of nicotinoid pesticides residues in vegetables.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2011(030)001【总页数】6页(P58-63)【关键词】烟碱类残留;杀虫剂;高效液相色谱;固相萃取;蔬菜【作者】侯如燕;卞红正;赵秀霞;胡祎芳;苏婷;王孝辉;宛晓春【作者单位】安徽农业大学,茶与食品科技学院,教育部、农业部茶叶生物化学与生物技术重点开放实验室,安徽,合肥,230036;农业部农产品质量安全监督检验测试中心(合肥),安徽,合肥,230031;安徽农业大学,茶与食品科技学院,教育部、农业部茶叶生物化学与生物技术重点开放实验室,安徽,合肥,230036;安徽农业大学,茶与食品科技学院,教育部、农业部茶叶生物化学与生物技术重点开放实验室,安徽,合肥,230036;安徽农业大学,茶与食品科技学院,教育部、农业部茶叶生物化学与生物技术重点开放实验室,安徽,合肥,230036;安徽农业大学,茶与食品科技学院,教育部、农业部茶叶生物化学与生物技术重点开放实验室,安徽,合肥,230036;农业部农产品质量安全监督检验测试中心,合肥(安徽),合肥,230031;安徽农业大学,茶与食品科技学院,教育部、农业部茶叶生物化学与生物技术重点开放实验室,安徽,合肥,230036【正文语种】中文【中图分类】O657.72;F767.2Abstract:A simple and sensitive high perfor mance liquid chromatographic(HPLC)method was developed for the simultaneous determination of 9 nicotinoid insecticide residues,including dinotefuran,nitenpyram,flonicamid,thiamethoxam,imidacloprid,clothianidin ,imidaclothiz,acetamiprid and thiacloprid,in sulphur-containing vegetables samples.The extract efficiencies of several solvent and the cleanup capacities of different SPE cartridgeswere compared.The vegetableswere extracted with acetonitrile and cleaned up on an Envi-Carb/PSA cartridge.The nicotinoid insecticideswere eluted with acetonitrile and detected with UV detector.The calibration curves showed good linearities in the range of 0.02-1.0 mg/L with correlative coefficient more than0.999.The limits of quantitation(LOQ)were 0.02 mg/kg for all 9 pesticide except for thiacloprid with LOQ of 0.05 mg/kg.The recoveries of 9 pesticides from vegetable sample spiked at three concentration levels of 0.02 mg/kg,0.05 mg/kg and 0.5 mg/kg ranged from 67%to 110%with RSDs less than 18.6%.The established method was simple,sensitive and accurate,and was suitable for the routine detection of nicotinoid pesticides residues in vegetables.Key words:nicotinoid residue;insecticide;HPLC;SPE;vegetable烟碱类农药是一类新型高效、低毒、内吸性强、残效期长、残留量低的广谱性杀虫剂,在市场上占有很高的份额[1-2]。
液相色谱串联质谱法测定果蔬中的唑虫酰胺、氟啶虫酰胺、氯虫苯甲酰胺及氟虫双酰胺残留朱建华;赵莉【摘要】A high performance liquid chromatography - tandem mass spectrometric method was developed for the determination of tolfenpyrad, fionicamid, chlorantraniliprole and flubendiamide in vegetables and fruits. The samples were extracted with acetonitrile and purified by QuEChERS method after salting-out. The solution after purification was evaporated to dryness in a water bath at 40 ℃ under nitrogen and redissolved with 1 mL acetonitrile- water (20: 80, by volume). The compounds were analyzed by LC -MS/MS on an XBridgeTM C18 column using acetonitrile-0. 1％ formic acid as mobile phase by gradient elution. The mass spectrometer was operated under multiple reaction monitoring(MRM) mode with the positive ionization mode. Good linearities were obtained in the concentrations of 0. 075 -2.0 mg · L-1 for tolfenpyrad and flonicamid and 0. 015 -0. 40 mg· L-1 for chlorantraniliprole and fiubendiamide, with correlation coefficients not less than 0. 998. The detection limits of flonicamid, chlorantraniliprole, flubendiamide and tolfenpyrad were 0. 005, 0. 002, 0. 000 5,0. 000 8 mg · kg-1, respectively. The recoveries for the four pesticides in vegetables and fruits were between 80％ and 95％ at fortified levels of 0.05 - 5.0 mg · kg- 1 for tolfenpyrad and flonicamid,and 0. 01 - 1.0 mg · kg-1 for chlorantraniliprole and flubendiamide. The intra-assay and inter-assay RSDs of four compounds were in the ranges of 2. 0％ -6. 1％and 3.3％ -7. 6％ , respectively. The results indicated that the method was suitable for the determination of tolfenpyrad, fionicamid, chlorantraniliprole and fiubendiamide in vegetables and fruits sample.%建立了同时测定蔬菜和水果中唑虫酰胺、氟啶虫酰胺、氯虫苯甲酰胺和氟虫双酰胺残留量的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法.样品经乙腈提取,过滤后进行盐析,上层有机相经QuEChERS方法净化浓缩后,用乙腈-水(体积比20:80)定容进行分析.采用XBridgeTMC18色谱柱,以0.1%甲酸溶液-乙腈体系进行梯度洗脱,MRM方式测定,基质外标法定量.在优化条件下,唑虫酰胺和氟啶虫酰胺的线性范围为0.075～2.0 mg·L-1,氯虫苯甲酰胺和氟虫双酰胺为0.015～0.40mg·L-1,线性相关系数均不低于0.998.唑虫酰胺、氟啶虫酰胺、氯虫苯甲酰胺及氟虫双酰胺在蔬菜和水果样品中的检出限(S/N=3)为0.000 8、0.005、0.002、0.000 5 mg·kg-1.蔬菜和水果中4种农药在0.05～5.0 mg·kg-1(氟啶虫酰胺和唑虫酰胺)和0.01～1.0 mg·kg-1(氟虫双酰胺和氯虫苯甲酰胺)加标范围内的回收率为80%～95%,批内RSD为2.0%～6.1%,批间RSD为3.3%～7.6%.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2011(030)006【总页数】5页(P646-650)【关键词】唑虫酰胺;氟啶虫酰胺;氯虫苯甲酰胺;氟虫双酰胺;液相色谱串联质谱法;残留【作者】朱建华;赵莉【作者单位】上海市农业技术推广服务中心,上海,201103;上海市农业技术推广服务中心,上海,201103【正文语种】中文【中图分类】O657.63;S482.3唑虫酰胺(Tolfenpyrad)、氟啶虫酰胺(Flonicamid)、氯虫苯甲酰胺(Chlorantraniliprole)和氟虫双酰胺(Flubendiamide)是近年来批准使用的具有酰胺基团的新型杀虫剂［1－4］。
检测认证甘蓝中7种苯甲酰脲类农药的快速检测■ 周宏霞（威海市食品药品检验检测研究院）摘 要：本文建立了多壁碳纳米管净化-液质联用法检测甘蓝中7种苯甲酰脲类农药残留的方法。
用1%乙酸酸化乙腈提取样品后，MS-NANO-C管净化，过滤膜后用LC-MS/MS检测分析。
结果表明：除虫脲、灭幼脲、杀铃脲、氟铃脲、氟苯脲、氟虫脲和氟啶脲7种苯甲酰脲农药残留在1~100 ng/mL范围内线性良好，相关系数（r）均不小于0.99925，方法的检出限为2.0和5.0 μg/kg。
在加标浓度为5、10和50 μg/kg 的浓度水平下，7种苯甲酰脲类农药的平均回收率为86.8%~98.8%，相对标准偏差为1.21%~4.04%，满足农残检测的要求（n=6）。
该方法操作简单、检测快速、灵敏度和准确度高，适用于甘蓝中苯甲酰脲类农药残留的快速检测。
关键词：多壁碳纳米管，LC-MS/MS，甘蓝，农残DOI编码：10.3969/j.issn.1002-5944.2023.22.035Quick-Determination of Seven Benzoylurea Pesticide Residues in CabbageZHOU Hong-xia（Weihai Institute for Food and Drug Inspection and Detection）Abstract:A multi-residue method for the simultaneous determination of seven benzoylurea pesticide residues in cabbage by multiwalled carbon nanotubes purifi cation coupled with UPLC-MS/MS was established. The samples were extracted by 1% acetic acid acidifi ed acetonitrile solution, purifi ed by MS-NANO-C tube, and detected by LC-MS/MS. The results indicated that the linearity of seven pesticide residues including difl ubenzuron, chlorbenzuron, trifl umuron, hexafl umuron, tefl ubenzuron, fl ufenoxuron and chlorfl uazuron were good in the range of 1~100 ng/mL (r≥0.99925), and the limits of detection were 2.0 and 5.0 μg/kg. The spiking experiment was conducted at three levels of 5, 10 and 50 μg/ kg. The average recovery was 86.8%~98.8%, and the relative standard deviation was 1.21%~4.04%, (n=6). The method is simple, rapid, sensitive and accurate, which is suitable for the determination of benzoylurea pesticide residues in cabbage. Keyword: multi walled carbon nanotubes, LC-MS/MS, cabbage, pesticide0 引 言苯甲酰脲类农药作为一种昆虫生长调节剂，可以有效控制害虫侵害大范围的庄稼、水果、蔬菜[1]。
15Vol. 30， No. 4Apr. 2021第30卷，第4期 化学分析计量2021 年 4 月CHEMICAL ANALYSIS AND METERAGEdoi : 10.3969/j.issn.1008-6145.2021.04.004高效液相色谱-质谱联用法同时测定果蔬中丁醚腺、氟毗菌胺、氟唑菌酰胺、螺虫乙酯张思敏，梁跃，苏梅清,潘艳坤，江燕，黄艳洪,黄璐璐(广西壮族自治区分析测试研究中心，南宁530022 )摘要 建立高效液相色谱-质谱联用法同时测定果蔬中丁醚脲、氟吡菌胺、氟唑菌酰胺、螺虫乙酯4种农药残留 的分析方法。
样品经乙腈提取，QuEchERS 原则净化，以5 mmol /L 乙酸胺溶液(含0.1%甲酸)和乙腈体系为流动 相，采用电喷雾离子源正离子方式、选择离子反应监测模式进行测定，用外标法定量。
4种农药的质量浓度在2〜500l±g /L 范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系，相关系数均大于0.991,方法检出限为0.02〜1.25 |±g/kg ,定量限为 0.05-5.0 |±g /kg …在柑橘、菜心两种基质中的加标回收率分别为71.6%〜109%和82.0%〜109%,测定结果的相对标准偏差均不大于14.4%(n =6)。
该方法便捷、快速、准确、可靠，适用于蔬菜水果中丁醚脲、氟吡菌胺、氟唑菌酰胺、螺虫乙酯的测定。
关键词 高效液相色谱-质谱联用法；果蔬；丁醚脲；氟吡菌胺；氟唑菌酰胺；螺虫乙酯 中图分类号: O657.31 文献标识码: A 文章编号: 1008-6145(2021)04-0015-05Simultaneous determination of diafenthiuron, fluopicolide, fluxapyroxad and spirotetramatin fruits and vegetables by high performance liquid chromatography-mass spectrometryZhang Simin , Liang Yue , Su Meiqing , Pan Yankun , Jiang Yan , Huang Yanhong , Huang Lulu(Guangxi Zhuang Autonomous Region Research Center for Analysis and Test ， Nanning 530022, China)Abstract A high performance liquid chromatography-mass spectrometry(HPLC-MS) method was developedfor the simultaneous determination of four kinds of pesticide residues such as diafenthiuron, fluopicolide, fluxapyroxadand spirotetramat in fruits and vegetables. The samples were extracted with acetonitrile and purified by QuEChERS principle, and then were detected by HPLC-MS with 5 mmol /L ammonium acetate solution (containing 0.1%formic acid)and acetonitrile system as the mobile phase, performed by electrospray ion source positive ion mode and select reaction monitoring(SRM)mode. The results showed that the good linear relationship between the chromatography peak area and themass concentration of four pesticide residues in the range of 2-500 j g / L, the correlation coefficients were all more than 0.991, the detection limits were 0.02-1.25 j g /kg, and the quantitation limits were 0.05-5.0 j g /kg. In the two substratesof citrus and brassica campestris, the recoveries were 71.6%-109% and 82.0%-109%, respectively. The relative standard deviations were not more than 14.4% (n =6). The method is convenient, rapid, accurate and reliable. It is suitable for thedetermination of diafenthiuron, fluopicolide, fluxapyroxad and spirotetramat in vegetables and fruits.Keywords HPLC-MS; fruits and vegetables; diafenthiuron; fluopicolide; fluxapyroxad; spirotetramat丁醚脲属硫脲类杀虫、杀螨剂，主要用于棉花、虱、小菜蛾、菜青虫、蚜虫、叶蝉、潜叶蛾、蚧等害虫、果树、蔬菜、观赏植物、大豆等作物防治各种螨类、粉 害螨⑴；氟毗菌胺对霜霉病、疫病、晚疫病、猝倒病基金项目广西壮族自治区直属公益性科研院所基本科研业务费专项课题(2019ACZ03 )通讯作者 潘艳坤，硕士，高级工程师，主要从事分析测试研究工作,************ 收稿日期2021-01-11引用格式 张思敏，梁跃，苏梅清，等.高效液相色谱-质谱联用法同时测定果蔬中丁醚脲、氟毗菌胺、氟唑菌酰胺、螺虫乙酯[J ].化学分析计量，2021，30(4): 15.Zhang Simin, Liang Yue, Su Meiqing, et al. Simultaneous determination of diafenthiuron, fluopicolide, fluxapyroxad and spirotetramatin fruits and vegetables by high performance liquid chromatography-mass spectrometry [ J ] . Chemical Analysis and Meterage ， 2021 ， 30(4): 15.16化学分析计量2021年，第30卷，第4期等常见卵菌纲病害具有杰出防治效果［2-3］；氟唑菌酰胺是近几年发展起来用于防治广谱真菌病害的羧酰胺类杀菌剂，具有较好的预防、治疗活性作用，可防治近百种作物中至少26种真菌病害⑷；螺虫乙酯是季酮酸类化合物，是迄今具有双向内吸传导性能的现代杀虫剂之一，高效广谱，持效期长,有效防治期可达8周⑸。
固相萃取-高效液相色谱法测定蔬菜中残留的敌菌灵和苯甲酰脲类杀虫剂徐秋生;刘俊;贺慧琳;吴爱红【摘要】建立了采用固相萃取-高效液相色谱法测定蔬菜中残留的敌菌灵和苯甲酰脲类杀虫剂(除虫脲、灭幼脲、杀铃脲、氟铃脲、氟苯脲和氟啶脲)的方法。
蔬菜样品用乙腈均质法提取盐析后脱水,经 Florisil 固相萃取柱净化,正己烷/丙酮(85/15,V/V)淋洗,洗脱液浓缩定容后经液相色谱分离与检测,外标法定量。
结果表明,各组分农药的加标回收率在83.5%~105.6%之间,变异系数(CV)在3.05%~9.56%之间,最低检出限0.02~0.04mg/kg,满足蔬菜中残留的敌菌灵和苯甲酰脲类杀虫剂的检测要求。
%The sample was homogeneously extracted by acetonitrile with salting out and dehydration. After purification on the Florisil solid phase extraction column,eluted with Hexane/Acetone (85/15,V/V),the eluent was concentrated and diluted for high performance liquid chromatography analysis,meas-ured by the external standard.The results showed that the recoveries of pesticides were between 83.5%-105.6%,and the coefficient of variation(CV)ranged from 3.05% to 9.56%,the lowest detection limit was 0.02-0.04mg/kg.The method can meet the detection requirements of anilazine and benzoylurea in-secticides residues in vegetables.【期刊名称】《分析仪器》【年(卷),期】2016(000)006【总页数】6页(P23-28)【关键词】固相萃取;高效液相色谱;蔬菜;敌菌灵;苯甲酰脲类杀虫剂【作者】徐秋生;刘俊;贺慧琳;吴爱红【作者单位】平湖市食品药品检测中心，平湖314200;平湖市食品药品检测中心，平湖314200;平湖市食品药品检测中心，平湖314200;平湖市食品药品检测中心，平湖 314200【正文语种】中文敌菌灵是由三聚氰酰氯与邻氯苯胺在脱酸剂存在下作用而得到的一种杀菌剂，其化工产品学名为2，4-二氯-6-(邻氯代胺基)均三氮苯，具有低毒、内吸性和杀菌谱较广等特点[1]，对交链孢属、尾孢属、葡柄霉属、葡萄孢属等真菌特别有效，广泛用于粮食、蔬菜等农作物，防治水稻胡麻叶斑病，瓜类的炭疽病、霜霉病、黑星病和各种农作物的灰霉病。
高效液相色谱法检测几种蔬菜中啶虫脒农药残留作者：张静来源：《农家科技下旬刊》2019年第04期摘要：随着人们生活水平的提高，对日常的衣食住行的质量要求也越来越高，尤其是对于食物方面。
在食物的食用方面，蔬菜瓜果是最普遍的，但是，目前我国的蔬菜瓜果的种植还是主要依赖于农药使用，而人们一般比价排斥用农药种植的蔬菜，原因有二：一是农药种植口味差;二是农药种植的果实残留多。
基于此种现状，本文就用高效液相色谱法检测蔬菜中啶虫脒的农药残留问题进行简单阐述。
关键词：高效液相色谱法;检测;杀虫剂;农药残留一、高效液相色谱法基本原理及啶虫脒的性质1.高效液相色谱法。
高效液相色谱法是农药检测常用的检测方法之一，相比其他检测方法，它具有色谱较为灵敏、反应快速、分辨率高、重复性好的特点。
首先，顾名思义，该方法检测的就是液体相，两相之间是互不相容的，会出现一个明显的界面，当开始试验的时候，由于分离检测极性强，所以当溶质开始测试的时候会相互分配，当即将达到平衡的时候，就可以很明显的发现所测成分的各种表观性质。
下文主要是讲述该方法在农药中检测啶虫脒中的应用。
另外，高效液相色谱主要分类有：高效凝胶色谱、高效离子交换液相色谱、反相高效液相色谱、疏水性高效液相色谱、高效亲和液相色谱以及高效聚焦液相色谱等类型。
用不同类型的高效液相色谱分离或分析各种农作物农药的原理基本上与相对应的普通液相层析的原理是相似的。
2.啶虫脒。
啶虫脒属中等的毒性农药，原来是对害虫以胃毒和触杀，对植物内部组织渗透性强，所以耐雨水冲刷，残效期长，对于害虫的防止有良好效果。
目前，大部分的作用是用来果黄蚜的防止，屡试不爽。
主要使用方法是：根据虫害发生的密集期，当温度提高之后，然后进行喷洒，有良好的治疗和防止效果。
但是在使用的时候，要注意不要在桑园附近喷洒，气雾会对于桑园产生不利影响，在使用过程中，不要与碱性农药混用，这样会减小药效。
二、实验部分1.仪器、试剂和材料。
美国Waters液相色谱仪;德国eppendrf5810离心机;德国IKA匀浆机;涡旋混合器;美国N-EVAP112氮吹仪;电子天平;食品捣碎机。
氟定脲、除虫脲、虫酰肼、氟苯脲、氟虫脲、氟铃脲和氟丙氧脲检测方法1．分析目标化合物农药等成分物质 分析目标化合物 氟定脲 氟定脲除虫脲 除虫脲虫酰肼 虫酰肼氟苯脲 氟苯脲氟虫脲 氟虫脲氟铃脲 氟铃脲氟丙氧脲 氟丙氧脲2．仪器设备带紫外分光光度检测器的高效液相色谱仪和液相色谱--质谱仪。
3．试剂除下列试剂外，使用附录2所列试剂。
柱色谱用硅胶：将柱色谱用涡胶（粒径63～200μm）在130℃加热12小时后，转移到干燥器中冷却，加入5％的水。
凝固液：2g氯化铵和4mL磷酸中加入水至400mL。
4．标准品氟定脲：含氟定脲99％以上，熔点为228℃。
除虫脲：含除虫脲99％以上，熔点为230℃～232。
虫酰肼：含虫酰肼99％以上，熔点为191℃。
氟苯脲：含氟苯脲99％以上，熔点为219℃～222℃。
氟虫脲：含氟虫脲99％以上，熔点为169℃～172℃。
氟铃脲：含氟铃脲97％以上，熔点为202℃～205℃。
氟丙氧脲：含氟丙氧脲99％以上，熔点为165℃～168℃。
5．试验溶液的制备a 提取方法① 谷类、豆类和种子类将样品粉碎通过420μm标准网筛后，称取其10.0g，加入20mL水，放置2小时。
加入100mL丙酮，搅拌3分钟后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸，抽滤到磨口减压浓缩器中。
取出滤纸上的残留物，加入50mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，合并滤液于减压浓缩器瓶中，40℃以下浓缩至约30mL。
将其转移到预先加有100mL 10%氯化钠溶液的300mL分液漏斗中。
用100mL正己烷洗涤上述减压浓缩的茄型瓶，合并洗液于上述分液漏斗中。
用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，正己烷层移入300mL三角瓶中。
水层中加入50mL正己烷，按上述同样操作，合并正己烷层于上述三角瓶中。
加入适量无水硫酸钠，不时摇动、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器瓶中。
再用20mL正己烷洗涤三角瓶，以此洗液洗涤滤纸上的残留物，重复操作2次。
高效液相色谱测定蔬菜中氟铃脲氟苯脲氟虫脲和氟啶脲
氟铃脲（hexaflumuron）[1]、氟苯脲（teflubenzuron）、氟虫脲（flufenoxuron）和氟啶脲（chlorfluazuron）[2]这四种农药是农业生产中广泛使用的杀虫剂，都属于苯甲酰脲（benzoylureas）类农药。
其主要成分是苯甲酰脲类化合物，该种类农药具有抗蜕皮激素的生物活性，能抑制靶标害虫的表皮几丁质合成和尿核苷辅酶的活化率，兼有杀卵作用，能防治鳞翅目、鞘翅目和同翅目等许多种农业害虫，被誉为第三代杀虫剂或新型昆虫控制剂。
该类农药在粮食、蔬菜和水果上得到广泛的应用，但该农药的残留对人类存在潜在的危险[3]。
美国、欧盟和日本等国家对该类农药都制定了相应的最大残留限量，尤其是日本，自2006年5月29日执行肯定列表制度以来，对蔬菜中苯甲酰脲类农药残留限量大多执行一律标准，即10μg/kg[4]。
我国农业部于2009年4月23日发布的《中华人民共和国农业行业标准》中规定：氟苯脲在柑橘中最大残留限量为0.5mg/kg；氟虫脲在梨中限量为1mg/kg，在柚子、柑橘中为0.5mg/kg；氟啶脲在萝卜、芋头、芜菁等中限量为0.1mg/kg[5]。
丁慧瑛等[6]采用近几年流行起来的农药残留分析前处理方法—QuECHERS方法对蔬菜样品进行前处理，虽然该方法快速、简便，但其中加入的PSA（N-丙基乙二胺）和GCB（石墨化碳黑）的量对回收率的影响较大，会导致某些农药的添加回收率降低，而且为了改善检测结果而加入的分析保护剂对色谱系统的长期影响也需要进一步论证[7]。
目前对于农药的分析方法多采用液质[8]和气质联用法[9]，但这些方法涉及的仪器昂贵，不适合在中小企业推广，因此要制定出一种前处理简便可行，费用价格低廉，检测手段易于掌控的方法十分必要。
为此，笔者建立了一种以乙腈为提取溶剂，采用自制的弗罗里硅土柱为净化柱的高效液相色谱法测定该4种苯甲酰脲类农药残留。
1 材料和方法
1.1 实验仪器与试剂
仪器：美国Agilent 1200 Series 高效液相色谱仪（具紫外可变波长检测器）；色谱柱：Alltima C18柱（5μm），规格150mmⅹ4.6mm（内径）；Metter Toledo AB265-S型分析天平，感量0.1mg。
KQ－250DB型数控超声清洗仪，昆山超声仪器有限公司；R-205旋转蒸发仪，瑞士BUCHI有限公司；T18 basic高速匀浆分散器，美国IKA公司；HW-2旋涡振荡器，金坛市环保仪器厂。
试剂：甲醇和乙腈（色谱纯）；石油醚、丙酮、氯化钠和无水硫酸钠（分析纯）；弗罗里硅土：60-100目，即0.250mm—0.150mm粒径，上海化学试剂采购供应站。
水为Rios-Gradient 超纯水系统制得，电阻率为18.2Ω·m。
标准品：氟铃脲、氟苯脲、氟虫脲和氟啶脲均购自德国Dr. Ehrenstorfer公司，纯度均大于98.5%。
1.2 色谱条件
色谱柱为Alltima C18 5μm不锈钢柱,规格：150mmⅹ4.6mm（内径）；流动相为甲醇、水以体积比80:20混合；流速：1.0 mL／min；柱温：25℃；检测波长：254nm；进样量：10μL。
1.3 标准溶液配制
称取氟铃脲、氟苯脲、氟虫脲和氟啶脲标准品各0.02g（精确至0.0001g）于100 mL容量瓶中，混合后加入甲醇定容至100mL，所配标准溶液浓度为200mg/L，放入冰箱保存。
用甲醇将上述标准溶液分别稀释成0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L、2mg/L、5mg/L系列浓度的标准使用液，制作标准曲线。
1.4 自制弗罗里硅土柱的制备
在65mmⅹ15mm（直径）的一次性针管中，底部垫少许高脱脂棉，依次装入0.2g左右无水硫酸钠和0.6g左右弗罗里硅土，上层再装入0.2 g左右无水硫酸钠，使用前用石油醚和丙酮的混合溶液（体积比9:1）5mL活化该硅土柱。
其中无水硫酸钠和弗罗里硅土装柱前在650℃马弗炉中灼烧4个小时左右，放于干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。
弗罗里硅土使用前一天在130℃环境中活化4个小时左右，在干燥器内冷却至室温，加1%的超纯水脱活备用。
1.5 测试样品的处理
1.5.1 试样的提取
蔬菜经捣碎机捣碎成浆状，称取2g左右精确至0.001g捣碎的蔬菜试样于50mL烧杯中，加入乙腈20mL,经匀浆机匀浆5min,用10mL乙腈分两次洗涤匀浆机机头部分，合并洗涤液至烧杯中，过滤；烧杯中加入适量NaCl,静置分层后移取乙腈层至250mL旋转蒸发瓶里，旋转蒸发浓缩至近干，N2吹干，用10mL石油醚+丙酮（90+10，V/V）溶渣。
1.5.2 试样提取液的净化
先以5mL石油醚+丙酮（90+10，V/V）活化弗罗里硅土柱，弃去流出液，然后以10mL试样提取液转移上弗罗里硅土柱，上样完毕后再用20mL石油醚+丙酮（80+20，V/V）洗脱，洗脱液收集于250mL旋转蒸发瓶里，旋转蒸发浓缩至近干，N2吹干，后用1mL甲醇+水（80+20，V/V）溶液溶解残渣，过0.45μm滤膜后进行液相色谱分析。
2 结果与分析
2.1 色谱条件的选择
用甲醇溶解氟铃脲、氟苯脲、氟虫脲和氟啶脲标准品，于190—400nm波长范围内进行扫描测定，在波长254nm处该四种物质皆有强吸收，同时在该波长处杂质等吸收干扰影响也不大，因此实验选择波长254nm。
以甲醇-水为流动相，以不同体积比进行调试，发现若甲醇所占比例大于80%则氟铃脲出峰过早，易与溶剂峰产生叠加，不能达到分离效果；若水在流动相中所占比例过大，则氟啶脲在30分钟之后出峰，出峰时间过晚。
结果经调试发现甲醇-水比例为80:20、流速为1.0mL/min时可达到较好的分离效果，且该四种物质的出峰时间均控制在25分钟之内。
2
3
4
1. 氟铃脲
2. 氟苯脲
3. 氟虫脲
4. 氟啶脲
图1 氟铃脲、氟苯脲、氟虫脲和氟啶脲4种农药的液相色谱图
2.2 确定线性关系
氟铃脲、氟苯脲、氟虫脲和氟啶脲的标准曲线浓度为0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L、2mg/L、5mg/L，对该4种农药进行色谱测定，以农药溶液的浓度为横坐标，以测得的峰面积为纵坐标绘制标准曲线，求得回归方程，线性范围为0.05 mg/L -5.0 mg/L。
表 1 线性方程
农药标准曲线相关系数氟铃脲Y=13.5316544X+1.248273 0.99918 氟苯脲Y=10.5198761X+1.0791943 0.99925 氟虫脲Y=10.8671072X+1.2009956 0.99914 氟啶脲Y=13.980066X+1.0882834 0.99925
2.3 回收率实验及精密度
准确称取相同实际蔬菜样品两份，其中一份加入已知量待测农药标样，另一份不加，在相同条件下测定5次，通过加入待测农药的测出量计算回收率，并计算5次平行测定相对标准偏差，结果见表2。
表2 方法精密度及回收率 (n=5)
农药本底值(mg/kg) 加标值(mg/kg)) 加标回收值
(mg/kg))
回收率(%) RSD(%)
氟铃脲0 0.05 0.0416 83.2 12.3
氟苯脲0 0.05 0.0452 90.4 11.8 氟虫脲0 0.05 0.0422 84.4 13.9 氟啶脲0 0.05 0.0437 87.4 14.7
2.4 实际样品检测
由于一般超市里面的蔬菜购买前存放时间较长，且由于运输等环节的问题，蔬菜里面的农药残留量很低。
为了准确的反映部分蔬菜的农药残留情况，笔者于靠近农田的近郊农贸市场购得芹菜、芜菁、萝卜和卷心菜这四种新鲜蔬菜，应用以上的方法进行检测。
表3 蔬菜样品中4种苯甲酰脲类农药残留检测结果（mg/kg）
氟铃脲0.06 ——0.08 氟苯脲—0.05 ——
氟虫脲—0.06 0.07 —
氟啶脲0.05 ———
—：表示小于定量检出限
从表3可见，目前该类农药在使用过程中控制得较好，没有出现残留量超出国家规定标准的问题。
3 小结
本试验建立了蔬菜中氟铃脲、氟苯脲、氟虫脲和氟啶脲该四种苯甲酰脲类农药的提取、净化和测定
方法。
该方法具有分离效果好、操作简便、成本低廉、检测手段易于掌控、定量准确、重现性好等优点，
有利于作为标准化方法推广使用。
参考文献（略）。
