发酵法生产α熊果苷及其分离纯化

酶法生产α-熊果苷的纯化工艺酶法生产α-熊果苷的纯化工艺主要包括以下几个步骤：1. 酶解反应：将含有α-熊果苷的底物与适当的酶混合，在适宜的温度和pH条件下进行酶解反应。

此步骤可得到粗产物。

2. 分离纯化：采用合适的分离方法，如沉淀、色谱分离等，对粗产物进行分离纯化。

此步骤可得到中间产物。

3. 转化反应：将中间产物与特定的化学试剂进行转化反应，生成目标产物α-熊果苷。

4. 产物纯化：采用合适的纯化方法，如色谱分离、结晶等，对目标产物进行精制纯化。

5. 质量检测：对最终产物进行质量检测，如含量、纯度等指标的测定。

6. 存储：将最终产物存储在干燥、阴凉、通风的地方，避免阳光直射和高温。

在实施该工艺时，需要注意以下几点：1. 底物浓度和酶浓度对酶解反应的影响。

在适宜的范围内，提高底物浓度和酶浓度可以促进反应速度和产量的提高。

2. 温度和pH对酶解反应的影响。

过高或过低的温度和pH都会影响酶的活性和稳定性，因此需要选择适宜的反应条件。

3. 分离纯化方法的选用。

针对不同的粗产物和目标产物，需要选择合适的分离纯化方法，以达到最佳的分离效果。

4. 化学试剂的选用。

在转化反应中，需要选择适当的化学试剂，以保证反应的顺利进行和目标产物的生成。

5. 质量检测方法的选用。

针对不同的目标产物，需要选择合适的质量检测方法，以确保产品质量符合要求。

6. 存储条件的控制。

在存储过程中，需要控制好温度、湿度等条件，以避免产物的变质和损失。

总之，酶法生产α-熊果苷的纯化工艺需要经过多个步骤的实施和控制，才能得到高质量的产品。

同时，对于不同的情况和需求，需要灵活调整工艺参数和方法，以达到最佳的生产效果。

专利名称：一种含α-熊果苷的提取物及其制备方法
专利类型：发明专利
发明人：马俊文,董汉玉,刘姝含,董佳勉,刘昌孝,黄璐琦,郭巍申请号：CN201810732315.3
申请日：20180705
公开号：CN110684061A
公开日：
20200114
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种含α‑熊果苷的提取物及其制备方法。

该制备方法包括如下步骤：(1)将梨皮、溶剂、pH调节剂和抗氧化剂混合得混合物A，所述混合物A的pH为3～6；(2)将步骤(1)所述混合物A真空超声，即可。

本发明采用食品工业中废弃的梨皮提取α‑熊果苷，实现了原料的有效利用，每kg原料中提取得到的α‑熊果苷的含量可达297.45～348.50mg，提取效率高，且提取方法工艺简单，绿色环保，适于工业化大生产。

申请人：大湾汉唯(广州)中药研究开发有限公司,大湾汉唯(广州)健康产业科技有限公司,大湾汉唯(广州)医药科技有限公司
地址：510000 广东省广州市中新广州知识城九佛建设路333号自编860室
国籍：CN
代理机构：上海弼兴律师事务所
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发酵法生产α-熊果苷及其分离纯化的开题报告1. 研究背景α-熊果苷是从熊果树的根、茎、叶等部位提取出来的一种天然二苷类化合物，具有多种药理活性，如降血脂、抗氧化、抗炎等作用。

由于其良好的药理作用，因此引起了人们的广泛关注。

目前，α-熊果苷的生产方法主要有体外合成、萃取提取和发酵法。

其中，发酵法是一种更加经济有效的生产方法，已得到了广泛的应用。

2. 研究目的本研究旨在建立一种高效的发酵法生产α-熊果苷的方法，并对其进行分离和纯化。

3. 研究内容本研究包括以下内容：（1）建立适合α-熊果苷生产的菌种筛选方法，选取高效产生α-熊果苷的菌株。

（2）针对选定的菌株，优化其培养条件，如培养基成分、温度、pH值等。

通过研究生物量和α-熊果苷产量的变化，确定最佳发酵条件。

（3）利用色谱等技术对α-熊果苷进行分离和纯化，得到高纯度的α-熊果苷。

4. 研究方法（1）菌种筛选：选取具有高效产生α-熊果苷能力的菌株，通过对多种菌株的培养和分析研究，筛选出最佳菌株。

（2）发酵条件的优化：通过对菌株的培养条件进行优化，确定最佳发酵条件，包括选用合适的培养基、温度、气氛、pH值等。

（3）分离和纯化α-熊果苷：利用柱层析、高效液相色谱等技术，对发酵液中的α-熊果苷进行分离和纯化，获得高纯度的α-熊果苷。

5. 预期结果本研究预计将得到以下结果：（1）选取出最佳的α-熊果苷生产菌株，并确定其最佳发酵条件。

（2）通过分离和纯化技术，得到高纯度的α-熊果苷。

（3）建立一种高效稳定的发酵法生产α-熊果苷的方法。

6. 研究意义本研究将建立一种高效稳定的发酵法生产α-熊果苷的方法，有助于逐步实现α-熊果苷的规模化生产，提高其利用价值。

此外，本研究对于发掘熊果树的药理活性成分、深入研究其药理作用等具有重要的现实意义和应用价值。

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810350597.0(22)申请日 2018.04.18(71)申请人 山东众山生物科技有限公司地址 276800 山东省日照市岚山区岚山西路98号(72)发明人 王朋田　张建勇　相茂功　邢仕杰　孙运兴　王新志　殷晓崴　田洪果　(74)专利代理机构 济南舜昊专利代理事务所(特殊普通合伙) 37249代理人 宋玉霞(51)Int.Cl.C07H 15/203(2006.01)C07H 1/06(2006.01)(54)发明名称一种α-熊果苷的纯化方法(57)摘要本发明公开了一种α-熊果苷的纯化方法，采用纯化水溶解，乙醇改变体系极性，乙酸乙酯或乙酸甲酯萃取残留对苯二酚，乙醇逼晶，降温结晶等方法，高收率的得到对苯二酚残留为零的α-熊果苷，操作与设备简单，成本较低。

权利要求书1页 说明书6页 附图5页CN 108558964 A 2018.09.21C N 108558964A1.一种α-熊果苷的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取α-熊果苷粗品，溶解于纯化水中；(2)向步骤(1)得到的体系中加入95％乙醇，体系保温70-90℃，冷凝回流搅拌0.5-5h；(3)向步骤(2)得到的体系中加入乙酸乙酯或乙酸甲酯，体系保温70-90℃，冷凝回流搅拌1-10h，然后体系降温至10-40℃；(4)停止搅拌，待步骤(3)得到的体系彻底分层后，将水相转移至结晶罐中，降温至5-10℃，继续加入95％乙醇，搅拌结晶6-36h；(5)将结晶混悬液离心，干燥，粉碎，得到对苯二酚残留为0的α-熊果苷产品。

2.根据权利要求1所述的一种α-熊果苷的纯化方法，其特征在于，步骤(1)中，α-熊果苷粗品中对苯二酚残留100-1000ppm，纯化水温度为70-90℃。

3.根据权利要求1所述的一种α-熊果苷的纯化方法，其特征在于，步骤(1)中，原料质量与纯化水体积比为1：0.8-1：2.0。

专利名称：自絮凝发酵生产α-熊果苷专利类型：发明专利
发明人：陈礼明,王璐
申请号：CN201510002687.7
申请日：20150106
公开号：CN105821098A
公开日：
20160803
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明属于微生物工程技术领域，涉及一种制备α-熊果苷的新型发酵法——自絮凝法。

本发明采用野油菜黄单胞菌发酵生产α-熊果苷，当菌株接种到摇瓶培养时能在4~8小时内自絮凝形成毫米级颗粒，并在之后的放大培养中保持颗粒形态生长，实现了该菌株在发酵液中的固定化，从而减少后期处理过程，无需离心分离菌体，能够降低α-熊果苷的生产成本。

采用本发明生产的α-熊果苷产量高，产品能够抑制黑色素的产生和沉积，去除色斑，在浓度较低时有效抑制酪氨酸酶活性。

申请人：陈礼明
地址：210096 江苏省南京市玄武区四牌楼2号
国籍：CN
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专利名称：一种α-熊果苷的合成方法专利类型：发明专利
发明人：史鲁秋,苏桂珍,薛虹宇
申请号：CN201110416761.1
申请日：20111214
公开号：CN103159805A
公开日：
20130619
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种α-熊果苷的合成方法，即将底物、三氟化硼乙醚及一定量的反应介质加热至30～80℃反应48h以上，中和、洗涤、干燥、浓缩，即得较高纯度α-型熊果苷中间体，再经过水解、重结晶即制得α-熊果苷。

本发明方法能够提高α/β-糖苷的比例，或将β-型熊果苷中间体转化为α-型熊果苷中间体，所制得的中间体产物中α-型异构体纯度高（≥92%），纯化容易，制得的α-熊果苷产品的纯度达到98%以上。

申请人：南京华狮化工有限公司
地址：210009 江苏省南京市鼓楼区新模范马路5号南京科技创新大厦A-20楼
国籍：CN
代理机构：南京知识律师事务所
代理人：韩朝晖
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专利名称：α-熊果苷的制备方法
专利类型：发明专利
发明人：李丽,刘红勇,梁晓军,刘默飞申请号：CN201510991581.4
申请日：20151225
公开号：CN105400851A
公开日：
20160316
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开α-熊果苷的制备方法，以淀粉类物质和对苯二酚为原料，加入生物酶进行酶法转化反应；反应液经过除酶后，加入酵母菌发酵去除反应液中的葡萄糖；发酵液除菌后，通过一次结晶得到α-熊果苷粗品，溶解α-熊果苷粗品进行二次或多次重结晶可得到纯度99％以上的α-熊果苷。

本发明使用酶法转化生产α-熊果苷，转化效率高；使用酵母菌发酵除糖替代了传统的柱层析除糖工艺，避免了柱层析过程中使用的酸、碱或者有机溶剂，而且大大节约了纯水的使用量；使用多次结晶工艺纯化α-熊果苷方法简便，产品纯度可控。

申请人：天津宏顺科生物科技有限公司
地址：300384 天津市滨海新区滨海高新区华苑产业区(环外)海泰发展二路二号5号楼115室国籍：CN
代理机构：天津创智天诚知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：王秀奎
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专利名称：一种酶法生产α-熊果苷的工艺系统专利类型：实用新型专利
发明人：钱敏帆,杨卫华,张飞龙,金力,严燕兵,华超申请号：CN201820536903.5
申请日：20180416
公开号：CN208308840U
公开日：
20190101
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：一种酶法生产α‑熊果苷的工艺系统，包括发酵罐、循环反应柱和连续浓缩结晶装置；所述发酵罐、循环反应柱和连续浓缩结晶装置依次连接，发酵罐与循环反应柱之间设有三个管道，三个管道分别为第一管道、第二管道和第三管道；所述循环反应柱上下端分别设有精密过滤网，第二管道上连接有物料循环泵，且第二管道连接循环反应柱底部的精密过滤网；与现有技术相比，通过发酵罐与循环反应柱之间的循环连接，使得发酵产生的酶化产物得到充分循环，同时在连续浓缩结晶装置的作用下，使得原料得到多次循环浓缩，从而提高了原料的使用率，使得单位原料能产生更多的产品，有效降低了生产成本。

申请人：长兴制药股份有限公司
地址：313100 浙江省湖州市长兴县经济技术开发区
国籍：CN
代理机构：杭州千克知识产权代理有限公司
代理人：黎双华
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酶法生产α-熊果苷的纯化工艺杨祥开;成春燕;欧娜;周志鹏;韦星明;许黎明;周兴【期刊名称】《华中农业大学学报》【年(卷),期】2017(0)3【摘要】采用乙醇发酵去除酶法合成α-熊果苷反应液中大部分糖类杂质,以活性炭纤维吸附分离α-熊果苷,选择甲醇-乙酸乙酯混合溶剂重结晶精制。

结果表明,50%乙醇溶液洗脱部分α-熊果苷含量最高,此部分经甲醇-乙酸乙酯混合溶剂反复重结晶精制,可制备得到α-熊果苷无色针状结晶,HPLC检测纯度达到99%以上,收率达到80%。

该工艺简单可行,稳定性高、重复性好,适合大规模制备高纯度α-熊果苷。

【总页数】6页(P57-62)【关键词】酶合成法;α-熊果苷;活性炭;HPLC;重结晶【作者】杨祥开;成春燕;欧娜;周志鹏;韦星明;许黎明;周兴【作者单位】广西科学院生物研究所【正文语种】中文【中图分类】TQ464.3【相关文献】1.环糊精葡萄糖基转移酶生产α-熊果苷的反应条件优化及分子改造 [J], 张文蕾;宿玲恰;陶秀梅;吴敬2.蔗糖磷酸化酶的分离纯化及其催化合成α-熊果苷的研究 [J], 侯顾伟;马江锋;隋姗姗;徐冰;刘嵘明;姜岷3.蔗糖磷酸化酶的半理性设计及生产α-熊果苷的条件优化 [J], 沈洋;吕雪芹;林璐;李江华;堵国成;刘龙4.亲水作用液相色谱法同时测定美白化妆品中的α-熊果苷和β-熊果苷 [J], 简龙海;茹歌;陈丹丹;郑荣;王柯5.酶法转苷生产双歧因子啤酒技术研究图1各种糖含量液相色谱仪图谱23结论及讨论231以麦芽、大米为主要原料,运用麦芽及转苷酶转苷法生产双歧因子啤酒,产品的理化指标与普通啤酒无较大差异,酒精度较同类普通啤酒低,有开发低醇啤酒的可能。

232以麦芽及转苷酶法生产的双歧因子功能 [J], 汪芳安;潘从道;熊友枝;董佳;赵三红;郑孝平;魏晓辉;胡劲松因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。