微生物细胞大小地测定方法

微生物的大小测定胡雪芳 201300261033【实验目的】1.了解显微镜测定微生物大小的原理。

2.学习并掌握显微镜下测定微生物细胞大小的技术，包括目镜测微尺、镜台测微尺的校正技术与测定细胞大小的技术。

【实验原理】微生物细胞的大小，是微生物重要的形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。

由于菌体很小、只能在显微镜下来测量。

用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。

1.目镜测微尺目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10 mm长度刻成100等分（如图1所示）。

图1 目镜测微尺测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。

由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。

2.镜台测微尺镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将lmm等分为100格，每格长l0μm（即0.0lmm），是专门用来校正目镜测微尺的（如图2所示）。

图2 镜台测微尺校正时，将镜台测微尺放在载物台上，由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。

【实验材料】1.菌株酵母菌液，枯草芽孢杆菌斜面培养物2.仪器和用具普通光学显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、酒精灯、吸水纸、擦镜纸、结晶紫染液等。

【实验步骤】1.目镜测微尺的校正（1）把目镜的上透镜旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上，把镜台测微尺置于载物台上，刻度朝上。

微生物大小的测定报告微生物大小的测定报告微生物是生物界中一类非宏观、非个体、非生物和非细胞的微小生物的总称。

它们具有体积小、数量大、分布广、种类多、生命力旺盛等特点，与人类的生产、生活密切相关。

微生物大小的测定是微生物学研究中的一项基本技术，对于了解微生物的种类、生长和繁殖等方面具有重要意义。

本文将详细介绍微生物大小的测定方法、测定步骤以及结果分析等方面的内容。

一、测定方法微生物大小的测定方法有很多，如显微测量法、压滤法、离心法等。

其中，显微测量法是最常用的一种方法，其原理是利用显微镜对微生物的大小进行直接测量。

具体步骤如下：1.准备显微镜、血球计数板、盖玻片、吸管等实验器材。

2.用吸管吸取一定量的微生物培养液，轻轻滴在血球计数板上，然后盖上盖玻片。

3.在显微镜下观察并计数，记录每个视野中的微生物数量和大小。

4.重复以上步骤多次，求平均值，即可得到微生物的平均大小。

二、测定步骤1.准备试剂和器材（1）试剂：无菌水、生理盐水、无菌玻璃珠、无菌平皿等。

（2）器材：移液器、无菌吸管、无菌涂布器、无菌镊子、电子天平等。

2.制备菌悬液（1）用电子天平称取适量的细菌干粉，加入无菌生理盐水，摇匀。

（2）用移液器吸取上述菌悬液，加入无菌平皿中，加入无菌玻璃珠，摇匀。

（3）用无菌涂布器将上述菌悬液涂布到平皿表面，静置片刻，让细菌贴壁生长。

3.测定菌落大小（1）在上述平皿中加入无菌水，让水面覆盖平皿表面。

（2）用无菌镊子将平皿翻转，让细菌接种到无菌水表面，涂布均匀。

（3）静置约30分钟，让细菌形成单个菌落。

（4）用游标卡尺测量每个菌落的大小，记录数据。

4.数据处理和分析（1）对每个平皿中的菌落数量和大小进行统计，求出平均值。

（2）将平均值与对照组进行比较，判断细菌的生长情况。

三、结果分析通过上述测定步骤，我们得到了微生物的大小数据。

根据数据可以得出以下结论：1.同一时间内，不同微生物的大小有差异。

例如，细菌和原生动物的大小相差很大，这与它们的生物学特性有关。

微生物细胞大小测定一、实验目得了解目镜测微尺与镜台测微尺得构造与使用原理,掌握微生物细胞大小得测定方法. 二、实验原理微生物细胞得大小就是微生物重要得形态特征之一，由于菌体很小，只能在显微镜下来测量。

用于测量微生物细胞大小得工具有目镜测微尺与镜台测微尺。

目镜测微尺（图－1)就是一块圆形玻片,在玻片中央把5ｍm长度刻成50等分，或把10 mｍ长度刻成1０0等分。

测量时，将其放在接目镜中得隔板上（此处正好与物镜放大得中间像重叠)来测量经显微镜放大后得细胞物象。

由于不同目镜、物镜组合得放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示得长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上得镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小方格所代表得相对长度.镜台测微尺（图２0-2）就是中央部分刻有精确等分线得载玻片，一般将ｌmm等分为10０格，每格长l0μm(即０、0ｌmm）,就是专门用来校正目镜测微尺得.校正时,将镜台测微尺放在载物台上，图1目镜测微尺图2 镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本就是处于同一位置,都要经过物镜与目镜得两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数得放大而放大，因此从镜台测微尺上得到得读数就就是细胞得真实大小，所以用镜台测微尺得已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表得长度,然后移去镜台测微尺，换上待测标本片,用校正好得目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。

三、实验器材1.活材料：酿酒酵母（Sacchaｒomyces ｃerｅvisｉae)、枯草杆菌（Bacｃiｌlｕｓｓubｔili ｓ)染色标本片。

2。

器材：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。

四、实验方法１．目镜测微尺得校正把目镜得上透镜旋下，将目镜测微尺得刻度朝下轻轻地装入目镜得隔板上，把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上.先用低倍镜观察，对准焦距，视野中瞧清镜台测微尺得刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺得刻度平行,移动推动器,使两尺重叠，再使两尺得“0”刻度完全重合,定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合得刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺得格数与镜台测微尺得格数.因为镜台测微尺得刻度每格长ｌ0μｍ,所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表得长度.例如目镜测微尺5小方格正好与镜台测微尺5小方格重叠,已知镜台测微尺每小方格为l0μm，则目镜测微尺上每小方格长度为=5×10μｍ/5＝10μm用同法分别校正在高倍镜下与油镜下目镜测微尺每小方格所代表得长度。

微生物细胞大小测定一、实验目的了解目镜测微尺与镜台测微尺的构造与使用原理,掌握微生物细胞大小的测定方法。

二、实验原理微生物细胞的大小就是微生物重要的形态特征之一,由于菌体很小,只能在显微镜下来测量。

用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺与镜台测微尺。

目镜测微尺(图-1)就是一块圆形玻片,在玻片中央把5mm长度刻成50等分,或把10 mm长度刻成100等分。

测量时,将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。

由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正,以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小方格所代表的相对长度。

镜台测微尺(图20-2)就是中央部分刻有精确等分线的载玻片,一般将lmm等分为100格,每格长l0μm(即0、0lmm),就是专门用来校正目镜测微尺的。

校正时,将镜台测微尺放在载物台上,图1目镜测微尺图2 镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本就是处于同一位置,都要经过物镜与目镜的两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大,因此从镜台测微尺上得到的读数就就是细胞的真实大小,所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺,即可求出目镜测微尺每格所代表的长度,然后移去镜台测微尺,换上待测标本片,用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。

三、实验器材1.活材料:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、枯草杆菌(Baccillus subtilis)染色标本片。

2.器材:显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。

四、实验方法1.目镜测微尺的校正把目镜的上透镜旋下,将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上,把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上。

先用低倍镜观察,对准焦距,视野中瞧清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行,移动推动器,使两尺重叠,再使两尺的“0”刻度完全重合,定位后,仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数与镜台测微尺的格数。

01.试述在普通光学显微镜下测定微生物细胞大小的基本方法。

测定微生物细胞的大小主要使用目镜测微尺。

其方法如下:1.先用长度已知的镜台测微尺校正目镜测微尺。

校正的方法是让台尺与目尺重叠,看台尺的X格正好与目尺的Y格重叠,然后用x10my⋅μ计算目尺每格的长.分别校正目镜测微尺在低倍镜,高倍镜及油镜下每格所代表的实际长度。

2.将待测微生物制成水浸片或染色涂片置载物台上,调焦找到微生物后用目镜测微尺测量其宽几格,长几格,然后乘上相应放大倍数下的校正值。

3.一般测10个微生物,然后以平均值表示。

4.若是酵母、细菌等单细胞微生物,通常测其宽和长,然后以平均宽⨯平均长表示,单位为μm。

02．以测苏云金杆菌工业菌粉中的活菌数为例,试述稀释平板计数的基本方法。

1.测数前先准备好测数用的1ml无菌吸管,9cm无菌平板,9ml试管无菌水和牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。

2.称取10克工业菌粉加入90ml无菌水中置摇床上或用手振荡20-30分钟,让菌体分散。

3.将上述振荡过的菌液按无菌操作法进行十倍稀释直到10-8。

4.取9cm无菌平板9套用记号笔在平板底编号,10-8编3套,10-7编3套,10-6编3套。

5.用1支1ml的无菌吸管,取1ml10-8的稀释菌液放入编号10-8的平板中,如此将三个重复做完.同法取10-7稀释菌液放入三个编号为10-7平板中.同法取10-6稀释菌液放入三个编号为10-6平板中.(均要按无菌操作法做)。

6.将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基熔化冷至45-50℃后,在酒精灯火焰边按无菌操作法倒入上述9套平板中,每个加入量大约15-20ml,边加边摇动平板,使培养基与菌液充分混匀。

7.待培养基凝固后,将平板倒过来,置28-30℃下培养48小时后计数。

03.试述划线分离的操作方法。

1.取9ml无菌平板一套在火焰旁按无菌操作法倒人15-20ml营养琼脂,让其冷凝成平板。

2.左手拿上述平板,右手拿接种环在火焰上灭菌后沾取原始分离物在平板上平行划线三条3.将接种环在火焰上灭菌,左手平板转动大约70度,用灭菌接种环通过第一次划线的地方作二次划线,亦划三条。

试述在普通光学显微镜下测定微生物细胞大小的基本方法。

普通光学显微镜是一种常用的观察微生物的工具，通过该显微镜可以测定微生物细胞的大小。

其基本方法如下：
1. 准备样品：将待测微生物细胞制备成透明的薄片，例如将培养基中的细胞均匀涂于载玻片上，晾干后进行热固定或染色处理。

2. 调整显微镜：将载玻片放到显微镜上，调整光学系统，使显微镜成像清晰、亮度适中。

3. 选择目镜、物镜：根据样品大小，选择适当倍数的目镜和物镜。

一般情况下，使用40x或100x的物镜即可，目镜的倍数通常为10x。

4. 调节焦距：通过调节焦距，使细胞的图像清晰，可以清晰地观察到细胞形态。

5. 测量细胞大小：在目镜中进行标尺校准，然后在物镜下用标尺测量细胞大小，即可得到微生物细胞的尺寸。

需要注意的是，在使用光学显微镜观察细胞大小时，由于细胞形态不规则，测量尺寸时需要选择多个不同的位置进行测量，以取得更为准确的数据。

同时，在进行比较时，要注意使用相同倍数的目镜和物镜，以避免数据误差。

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试述在普通光学显微镜下测定微生物细胞大小的基本方法试述在普通光学显微镜下测定微生物细胞大小的基本方法
普通光学显微镜下测定微生物细胞大小一般采用光学标定法，主要是利用显微镜观察宏观大小来测定微生物细胞的大小，即实际测量它们的长度和宽度，进而推断出它们的体积。

测量微生物细胞大小的基本方法如下：
1.首先，将微生物细胞完整地安装到显微镜底片上，然后将显微镜放大50-100倍，开始观察它们的形状。

2.用微米尺观察和测量细胞的大小，按以下方法测量：
（1）将测量细胞的真实大小的微米尺放到观察显微镜的视台上，在微米尺上测量细胞的长度；
（2）将显微镜移动90度，在微米尺上测量细胞的宽度；
（3）根据细胞的实际大小推断出细胞的体积；
（4）用酒精吹出细胞，用微米尺测量细胞的尺寸；
3.然后，记录测量得到的细胞长度、宽度和体积，为了提高测量的精度，可以对单个细胞测量多次，再平均多次测量值就能得到细胞的实际大小。

通过以上方法，便可以完成普通光学显微镜下测定微生物细胞大小的基本方法。

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微生物大小的测定微生物学是生物学一个主要分支，研究的是微生物的结构、生长、代谢、遗传等方面。

微生物学的研究对于人类的健康、环境保护、工业发展等领域有着重要的意义。

微生物的大小是微生物学中比较基础、重要的一个特性，下文将介绍微生物大小的测定。

测定微生物大小的方法有很多种，下面介绍几种常用的方法:1.显微镜测量法显微镜观察是目前测定微生物大小的主要方法。

显微镜可以将微生物放大数百到数千倍，使得我们能够清晰地观察微生物形态和大小。

显微镜测量法的步骤如下：(1)将微生物样本制备成透明薄片，常用的制片方法有磨片法、盖玻片法等。

(2)将制好的透明薄片置于显微镜下，用高倍镜观察微生物的形态和大小。

(3)在显微镜中使用目镜目盖尺或称为目镜刻度尺，来测量微生物的大小。

根据测定微生物的具体情况可以选择使用不同倍数的物镜进行测量。

2.流式细胞仪测量法流式细胞仪是一种自动化仪器设备，可快速高效地测量微生物的大小和形态。

其工作原理是将微生物悬液通过一组激光束，利用不同大小、不同形态的微生物对激光产生的散射光进行测量，从而得到微生物的大小和形态。

流式细胞仪测量法的优点是速度快、准确度高。

但是设备成本较高，需要进行适当的预处理，操作较为复杂。

但是，电子显微镜的设备成本较高，需要专业操作和维护，使用起来较为困难。

二、微生物大小受哪些因素影响微生物的大小受到很多因素的影响，其中比较主要的因素有：1.生长状态微生物的大小会随着它们处于生长周期的不同阶段而发生变化。

2.环境条件微生物生长的不同环境条件（如温度、酸碱度、营养等）也会影响微生物的大小。

3.微生物种类不同种类的微生物在形态和大小方面也具有很大的差异，如原核生物和真核生物之间的差异。

微生物大小的测定在微生物学研究和应用中都有很重要的意义。

例如，对于药物研发和制造方面，测定微生物的大小可以用于确定药物对微生物的作用范围，寻找合适的药物治疗手段。

在工业中，测定微生物的大小可以用于微生物发酵过程的控制和监测，提高工业产品质量和产量。

实验七微生物细胞大小测定实验目的1．了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造。

2．掌握用显微测微尺测量微生物细胞大小的方法。

实验材料1．菌种啤酒酵母菌24h液体培养物；2．其它光学显微镜、镜台测微尺、目镜测微尺、盖玻片、载玻片、香柏油、擦镜纸。

实验原理在一定条件下，各种微生物细胞的大小，是微生物形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。

由于微生物细胞很小，只能在显微镜下测量，一般采用显微测微尺来测量。

显微测微尺有镜台测微尺和目镜测微尺两个部件。

镜台测微尺是在中央部分刻有精度等分线的载玻片。

一般将1mm等分为100格，每格长度为10 m，用于校正目镜测微尺。

目镜测微尺是一块可放在目镜内的圆形玻片，其中央一般有100等分的小格。

目镜测微尺可直接用于测量细胞的大小。

由于不同的显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目镜测微尺每小格代表的实际长度也不一样。

因此，用目镜测微尺测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度，然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数，即可计算出细胞的相对大小。

球菌用直径来表示大小，杆菌用宽和长的范围来表示。

如金黄色葡萄球菌直径约为0.8微米，枯草芽孢杆菌大小为0.7-0.8*2-3微米。

实验内容（一）目镜测微计的校正1．放置目镜测微尺取出目镜，旋开目镜，将目镜测微尺放在目镜的隔板上（有刻度的一面向下），然后旋上目镜，最后将此目镜插入目镜镜筒内。

2．放置镜台测微尺把镜台测微计放在显微镜载物台上（有刻度的一面向上）。

3．校正目测微尺用低倍物镜观察，对准焦距，通过调焦能看清镜台测微计的刻度；移动镜台测微尺和转动目测微尺使两者刻度平行；转动推进器从而使两测微尺某段起、止线完全重合，数出两条重合线之间的格数。

用同法分别校正在高倍镜和油镜下目镜测微尺每小格所代表的长度。

观察时光线不宜过强，否则难以找到镜台测微尺的刻度；换高倍镜和油镜时，防止物镜压坏镜台测微尺和损坏镜头。