两个批次的墨旱莲薄层色谱图

收稿日期:20050301作者简介:吴红霞(1976),女(汉族),湖北武汉人,硕士,主要从事药物分析工作,Tel .024********,E mail evahisun@ 。

文章编号:10062858(2006)02009704墨旱莲药材的高效液相指纹图谱及聚类分析吴红霞,高晓霞,赵云丽,刘 涛,于治国(沈阳药科大学药学院,辽宁沈阳110016)摘要:目的建立墨旱莲药材的指纹图谱研究方法并进行聚类分析。

方法色谱柱:Betasil C 18柱(250mm @416mm,5L m);流动相:体积分数为1%的磷酸水溶液和体积分数为1%的磷酸乙腈溶液,采用梯度洗脱;流速:110mL #min -1;检测波长:330nm;柱温:30e 。

结果精密度与重复性试验中各共有峰的相对峰面积RSD 小于510%,根据聚类分析结果,可将墨旱莲药材分为合格品和非合格品2类,合格品产地为浙江、江西、广东、武汉、江苏(苏州)、江苏(南京)、湖南、辽宁、河北、山西、北京、上海、安徽、海南,非合格品产地为河南、吉林、福建、山东、陕西(西安)。

结论该指纹图谱研究及聚类分析方法可用于控制墨旱莲药材质量。

关键词:墨旱莲;高效液相色谱法;指纹图谱;聚类分析;质量控制中图分类号:R 917;R 93115 文献标识码:A中药墨旱莲又称旱莲草,系菊科鳢肠属植物鳢肠(Eclip ta p rostrata L.)的地上干燥部分,是二至丸、天麻首乌片等的原料之一。

我国各省区均有分布,主产于江苏、江西、浙江、广东等地。

具有滋补肝肾、凉血止血之功效。

在我国,墨旱莲主要用于治疗牙齿松动、须发早白、眩晕耳鸣、腰膝酸软、阴虚血热、吐血、咳血、尿血、血痢、崩漏下血、外伤出血[1]。

在印度等国家,墨旱莲已被广泛用作治疗肝硬化、肝炎及胆囊疾病[2]。

墨旱莲中的化学成分包括三萜皂苷类、噻吩类、香草醚类及黄酮类等[3]。

由于受产地、气候和生态环境的影响,不同产地墨旱莲药材的所含主要指标成分的差异较大,为了更全面的控制药材的质量,作者对19个产地的墨旱莲药材进行了指纹图谱研究及聚类分析。

XXXXXXXXXX有限公司原料质量标准及检验操作规程1 品名：1.1 中文名：墨旱莲1.2 汉语拼音：Mohanlian2 代码：3 取样文件编号：4 检验方法文件编号：5 依据：《中国药典》（2020年版一部）。

6 质量标准：7 检验操作规程：7.1 试药与试剂：70%甲醇、墨旱莲对照药材、稀盐酸、甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、水、0.5%醋酸溶液、蟛蜞菊内酯对照品、70%乙醇。

7.2 仪器与用具：电子天平、烘箱、显微镜、马弗炉、硅胶G板、超声波清洗器、高效液相色谱仪。

7.3 性状：取本品适量，自然光下目测色泽，嗅闻气味。

7.4 鉴别：7.4.1 取本品制片置10×10显微镜下做显微观察。

7.4.2 取本品，浸水后，搓其茎叶，显墨绿色。

7.4.3 取本品粉末2g，加70%甲醇20ml，超声处理45分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。

另取墨旱莲对照药材2g，同法制成对照药材溶液。

再取旱莲苷A对照品适量，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法（附录7）试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各10µ1、对照品溶液5µ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（30 ：40 ：15 ：3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸试液，在105℃加热至斑点显色清晰。

供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

7.5 检查：7.5.1 水分不得过13.0%(附录15 第二法)。

7.5.2 总灰分不得过14. 0%(附录17)。

7.5.3 酸不溶性灰分不得过3.0%(附录17)。

7.5.4 二氧化硫残留量照二氧化硫残留量测定法（附录58）测定，不得过150mg/kg。

8.6 含量测定：照高效液相色谱法（附录8）测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以0.5%醋酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为351nm。

㊀基金项目:国家重点研发计划(Ｎｏ.２０１９ＹＦＣ１７１１００８)ꎻ∗同为通信作者㊀作者简介:焦广洋ꎬ男ꎬ研究方向:生药学ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｊｉａｏｇｕａｎｇｙａｎｇ＠ａｌｉｙｕｎ.ｃｏｍ㊀通信作者:陈军峰ꎬ男ꎬ博士研究生ꎬ副研究员ꎬ研究方向:中药学ꎬＴｅｌ:０２１－５１３２２４０３ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｃｊｆ１２３４７８３１＠ｆｏｘｍａｉｌ.ｃｏｍꎻ张凤ꎬ女ꎬ博士研究生ꎬ副主任药师ꎬ研究方向:生药学㊁临床药学ꎬＴｅｌ:０２１－５１３２２４０３ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｆｅｎｇｚｈａｎｇｋｙ＠ａｌｉｙｕｎ.ｃｏｍ墨旱莲及其化学成分的药理作用㊁体内代谢及质量控制研究进展焦广洋１ꎬ２ꎬ李澍坤３ꎬ邓易４ꎬ殷军１ꎬ陈万生２ꎬ４ꎬ陈军峰２∗ꎬ张凤４∗(１.沈阳药科大学中药学院ꎬ辽宁沈阳１１００１６ꎻ２.上海中医药大学中药研究所ꎬ上海２０１２０３ꎻ３.海军军医大学基础医学院学员六大队十七队ꎬ上海２００４３３ꎻ４.中国人民解放军海军军医大学第二附属医院药材科ꎬ上海２００００３)摘要:墨旱莲为菊科植物鳢肠(ＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａＬ.)的干燥地上部分ꎬ作为传统药用植物在世界范围内均有广泛的临床应用ꎮ本文基于近年来公开发表的文献ꎬ对墨旱莲及其化学成分的药理作用㊁体内代谢及质量控制研究进展进行归纳总结ꎬ以期为墨旱莲的临床应用及质量研究提供参考ꎮ关键词:墨旱莲ꎻ药理作用ꎻ体内代谢ꎻ质量控制中图分类号:Ｒ２８５㊀文献标识码:Ａ㊀文章编号:２０９５－５３７５(２０２１)１０－０６７３－００６ｄｏｉ:１０.１３５０６/ｊ.ｃｎｋｉ.ｊｐｒ.２０２１.１０.０１１ＲｅｖｉｅｗｏｆｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｅｆｆｅｃｔｓꎬｍｅｔａｂｏｌｉｓｍａｎｄｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａＬ.ａｎｄｉｔｓｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓＪＩＡＯＧｕａｎｇｙａｎｇ１ꎬ２ꎬＬＩＳｈｕｋｕｎ３ꎬＤＥＮＧＹｉ４ꎬＹＩＮＪｕｎ１ꎬＣＨＥＮＷａｎｓｈｅｎｇ２ꎬ４ꎬＣＨＥＮＪｕｎｆｅｎｇ２∗ꎬＺＨＡＮＧＦｅｎｇ４∗(１.ＳｃｈｏｏｌｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａꎬＳｈｅｎｙａｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＳｈｅｎｙａｎｇ１１００１６ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＳｈａｎｇｈａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＳｈａｎｇｈａｉ２０１２０３ꎬＣｈｉｎａꎻ３.ＳｅｖｅｎｔｅｅｎｔｈＴｅａｍꎬＳｉｘｔｈＢｒｉｇａｄｅꎬＢａｓｉｃＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅꎬＮａｖａｌＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＳｈａｎｇｈａｉ２００４３３ꎬＣｈｉｎａꎻ４.ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｙꎬＳｅｃｏｎｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＳｈａｎｇｈａｉ２００００３ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:ＥｃｌｉｐｔａｅＨｅｒｂａꎬｔｈｅｄｒｙａｅｒｉａｌｐａｒｔｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａＬ.(Ｆａｍｉｌｙａｓｔｅｒａｃｅａｅ).Ａｓａｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｍｅｄｉｃｉｎａｌｐｌａｎｔꎬｉｔｈａｓｂｅｅｎｗｉｄｅｌｙｕｓｅｄｉｎｃｌｉｎｉｃａｌａｌｌｏｖｅｒｔｈｅｗｏｒｌｄ.Ｂａｓｅｄｏｎｔｈｅｌｉｔｅｒａｔｕｒｅｐｕｂｌｉｓｈｅｄｉｎｒｅｃｅｎｔｙｅａｒｓꎬｔｈｉｓｐａｐｅｒｒｅ￣ｖｉｅｗｅｄｔｈｅｐｒｏｇｒｅｓｓｉｎｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｅｓｏｆｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｅｆｆｅｃｔｓꎬｍｅｔａｂｏｌｉｓｍａｎｄｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａＬ.ａｎｄｉｔｓｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓꎬｉｎｏｒｄｅｒｔｏｐｒｏｖｉｄｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｃｌｉｎｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎａｎｄｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａ￣ｔａＬ..Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａＬ.ꎻＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｅｆｆｅｃｔｓꎻＭｅｔａｂｏｌｉｓｍꎻＱｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌ㊀㊀墨旱莲又称旱莲草㊁水旱莲ꎬ为一年生菊科植物鳢肠(ＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａＬ.)的干燥地上部分ꎬ在我国各地均有分布ꎮ墨旱莲所含化学成分丰富ꎬ主含噻吩㊁黄酮㊁香豆草醚㊁三萜皂苷及挥发油类成分ꎬ临床主要用于肝肾阴虚㊁牙齿松动㊁外伤出血等疾病的治疗[１]ꎬ在我国及印度㊁巴西等地拥有悠久的用药历史ꎬ现已被«中国药典»«英国药典»«欧洲药典»等收载[２－３]ꎬ也是国家卫健委批准的可用于保健食品的中药[４]ꎮ因其具有较高的药用价值ꎬ近年来ꎬ国内外学者对墨旱莲的药理作用㊁体内代谢及质量控制方面做了大量研究ꎬ本文就上述研究内容进行整理和分析ꎬ以期为墨旱莲的进一步深入研究及临床应用提供参考ꎮ１㊀药理作用研究表明墨旱莲具有多种药理作用ꎬ其中保肝㊁凉血止血㊁抗蛇毒等作用属于墨旱莲的传统功效ꎬ而现代研究也在墨旱莲丰富的化学成分[５]中发现其具有降血脂㊁抗肿瘤㊁抗炎㊁抑菌等多种药理活性ꎬ这使人们对墨旱莲药用价值有了更为清晰的认识ꎬ也为墨旱莲的临床应用提供了极具价值的参考ꎮ１.１㊀保肝作用㊀保肝作用为墨旱莲的传统功效ꎬ现代药理学研究从细胞及动物等多个层面探究了墨旱莲的保肝作用及其可能机制ꎮ墨旱莲不具有肝毒性ꎬ但能通过抑制ＣＣｌ４诱导的肝细胞脂质过氧化㊁调节氨基比林Ｎ－脱甲基酶及膜结合葡萄糖６－磷酸酶等肝微粒体药物代谢酶的水平来发挥保肝作用[７－８]ꎮ其所含成分蟛蜞菊内酯已被证明能够通过ＮＦ－κＢ信号通路缓解小鼠肝炎症状ꎬ保护肝细胞[９]ꎮ墨旱莲在治疗非酒精性脂肪肝上同样具有较好的活性ꎬＨｅｌｍｙ等[１０]发现高剂量(３００ｍｇ ｋｇ－１)的墨旱莲甲醇提取物对非酒精性脂肪肝大鼠的肝功能和血脂水平有明显改善作用ꎬ利用靶向代谢组学技术证实墨旱莲及所含有的槲皮素[１１]及蟛蜞菊内酯[１２]可通过调节肠道菌群及脂质代谢来改善脂肪肝症状ꎮ体外研究证实ꎬ墨旱莲对丙型肝炎病毒[１３]㊁Ｈｅｐ－Ｇ２肝癌细胞[１４]等同样有较好的抑制作用ꎮ１.２㊀降血脂作用㊀墨旱莲是印度等地的传统降血脂药物ꎮＧｕｐｔａ等[１５]发现墨旱莲乙酸乙酯部位可能通过抑制了ＡＫＴ/ｍＴＯＲ通路激活从而抑制３Ｔ３－Ｌ１前体脂肪细胞和ｈＭＳＣ衍生的脂肪细胞的分化ꎬ并能显著降低高脂血症金黄地鼠体内血清甘油三酯㊁总胆固醇和低密度脂蛋白等指标ꎬ抑制成脂过程的转录因子和蛋白在附睾脂肪组织中的表达ꎮ高血脂也是诱发动脉粥样硬化和冠心病的重要原因ꎬ墨旱莲正丁醇提取物连续给药六周后可显著降低小鼠血清中总胆固醇和甘油三酯水平ꎬ并改善动脉粥样硬化和冠心病症状[１６]ꎮ１.３㊀抗肿瘤作用㊀Ｙａｄａｖ等[１７]研究了墨旱莲乙醇提取物对７种不同癌细胞株ＭＤＡ－ＭＢ－２３１(乳腺)㊁ＨｅＬａ(宫颈)㊁ＳＫ－ＯＶ－３(卵巢)㊁ＳＷ６２０(结肠)㊁ＤＵ１４５(前列腺)㊁Ａ５４９(肺)和ＰＡＮＣ－１(胰腺)的抑制作用ꎬ发现其通过破坏线粒体膜电位和ＤＮＡ的方式能够对菌株的生长产生抑制作用ꎬ且对乳腺癌细胞株生长和迁移的抑制最为明显ꎬ并通过体外及体内安全性评价实验证明墨旱莲乙醇提取物无明显的毒性作用ꎮ已有研究表明ꎬ从墨旱莲中分离得到的a－三联噻吩甲醇可以通过调节ＮＡＤＰＨ氧化酶产生活性氧来诱导人子宫内膜癌细胞(Ｈｅｃ１Ａ和Ｉｓｈｉｋａｗａ)的凋亡(ＩＣ５０值分别为０.３８μｍｏｌ Ｌ－１和０.３５μｍｏｌ Ｌ－１)ꎬ可能为子宫内膜癌的药物研发提供依据[１８]ꎮ研究发现ꎬ蟛蜞菊内酯对前列腺㊁乳腺等肿瘤细胞[１９－２０]具有一定的抑制生长和诱导凋亡的作用ꎮ１.４㊀抗炎与镇痛作用㊀墨旱莲叶甲醇提取物对卡拉胶和蛋清所致的大鼠足肿胀均有明显的抗炎作用ꎬ且呈剂量依赖性ꎬ其抗炎活性与吲哚美辛(１０ｍｇ ｋｇ－１)和赛庚啶(８ｍｇ ｋｇ－１)相当[２１]ꎮ墨旱莲甲醇提取物还能够降低哮喘小鼠支气管及肺部中的炎症细胞因子浓度[２２]ꎮ从墨旱莲中分离得到的刺囊酸可通过ＮＦ－kＢ信号通路来抑制脂多糖诱导的小鼠ＲＡＷ２６４.７细胞炎症因子的表达[２３]ꎻ蟛蜞菊内酯可通过抑制ＮＦ－kＢ信号通路的关键激酶ＩＫＫ来抑制脂多糖诱导的ｃａｓｐａｓｅ－１１的表达[２４]ꎮ１.５㊀抗氧化作用㊀林朝鹏等[２５]发现墨旱莲黄酮类提取物可增强血清中ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ的活性ꎬ降低血清中ＭＤＡ含量ꎬ发挥抗氧化作用ꎮＳｉｎｇｈ等[２６]发现甲醇提取物与其他溶剂提取物相比ꎬ含有较高的多酚和黄酮类成分ꎬ在ＤＰＰＨ㊁ＡＢＴＳ㊁ＳＯＤ㊁Ｃａｔａｌａｓｅ㊁ＧＳＴ等活性实验中发挥了最强的抗氧化活性ꎮＵｎｎｉｋｒｉｓｈｎａｎ等[２７]的实验结果与上类似ꎮ１.６㊀抑菌作用㊀Ｒａｕｔ等[２８]采用抑菌圈法和最小抑菌浓度法测试表明ꎬ墨旱莲甲醇提取物在最低浓度１２.５ｍｇ ｍＬ－１时即可对大肠杆菌和玫瑰微球菌产生抑制作用ꎬ强于其石油醚提取物ꎻ也有研究认为其石油醚提取物对多种真菌的抑制作用最佳[２９]ꎮ实验表明ꎬ在ｐＨ５.５~９.０条件下ꎬ墨旱莲总皂苷可通过破坏细菌细胞膜的方式达到对枯草芽孢杆菌和铜绿假单胞菌生长的抑制作用[３０]ꎮＧｕｒｒａｐｕ等[３１]发现墨旱莲叶中含有的生物碱对大肠杆菌㊁铜绿假单胞菌㊁鲍氏志贺菌㊁金黄色葡萄球菌和粪链球菌等５种菌株均有抑制作用ꎬ且呈浓度依赖性ꎬ但最高浓度５００μｇ ｍＬ－１时的抑菌能力仍不及环丙沙星ꎮ１.７㊀其他活性㊀据文献报道ꎬ墨旱莲在抗骨质疏松[３２]㊁调节免疫[３３]㊁抗糖尿病[３４]㊁驱蚊[３５]㊁止血[３６]㊁抗蛇毒[３７]等方面同样具有一定的治疗效果ꎮ此外ꎬ蟛蜞菊内酯可通过调节ＮＦ－κＢ通路显著抑制ＬＰＳ介导的人肾小球系膜细胞异常增殖炎症反应ꎬ治疗肾损伤[３８]ꎮ墨旱莲石油醚提取物还能够显著的改善毛囊环境[３９]ꎬ促进毛发生长ꎬ治疗效果优于２％的米诺地尔[４０]ꎮ２㊀体内代谢Ｌｉ等[４１]通过ＵＨＰＬＣ/Ｑ－Ｏｒｂｉｔｒａｐ－ＭＳ技术分析了大鼠口服墨旱莲乙醇提取物(１ｇ ｋｇ－１)后入血成分ꎬ鉴别得２４种原型成分和２００种代谢产物ꎬ均以黄酮类化合物为主ꎬ代谢途径包括氧化㊁氢化㊁甲基化㊁葡萄糖醛酸化和磺化等ꎬ其中以葡萄糖醛酸化等Ⅱ相代谢途径为主ꎮ文献报道ꎬ墨旱莲提取物给药后血浆中的黄酮类化合物大部分以结合物形式存在ꎬ因此采用了酶解法处理大鼠血浆ꎬ基于液相分析方法检测木犀草素㊁野黄芩素㊁芹菜素和香叶木素的游离和结合总浓度ꎬ血药浓度－时间曲线呈双峰或多峰现象[４２]ꎮＣｈｅｒｕｖｕ等[４３]测定了墨旱莲三氯甲烷提取物灌胃给药后大鼠血浆木犀草素㊁蟛蜞菊内酯和芹菜素的药动学行为ꎬ大鼠血浆采用液液萃取进行前处理ꎬ结果表明上述成分在体内１ｈ左右出现血药峰浓度ꎬ半衰期为５ｈ左右ꎬ且血药浓度－时间曲线存在双峰现象ꎬ与Ｃｈｅｎ等[４４]的报道类似ꎬ这表明芹菜素和蟛蜞菊内酯等在体内可能存在肝－肠循环现象ꎮＣｈｅｎ等[４５]发现大鼠在口服５.００ｍｇ ｋｇ－１蟛蜞菊内酯代谢情况与上述报道类似ꎬ并通过体外肝微粒体孵育实验验证了其在体内代谢的规律ꎮ３㊀质量控制«中国药典»２０２０年版[２]主要通过观察性状和薄层色谱法(ＴＬＣ)以及测定水分㊁灰分㊁酸不溶性灰分来对墨旱莲进行鉴别和检查ꎬ而含量测定方面仅以对蟛蜞菊内酯进行高效液相分析方法(ＨＰＬＣ)为标准ꎬ但是墨旱莲化学成分及药理作用复杂多样ꎬ仅对蟛蜞菊内酯这一种化学成分进行含量测定并不能够完全评价其质量的优劣ꎮ近年来关于墨旱莲的质量控制方法从传统的显微㊁薄层以及ＨＰＬＣ逐渐发展到液相色谱－质谱联用(ＨＰＬＣ－ＭＳ)和毛细管电色谱法(ＣＥＣ)等ꎬ为墨旱莲所含成分分析提供了各种科学数据ꎮ３.１㊀ＴＬＣ㊀ＴＬＣ主要用于墨旱莲药材及其制剂的定性鉴别以及对旱莲苷Ａ㊁α－醛基三聚噻吩㊁蟛蜞菊内酯等指标性成分的含量测定ꎬ增强了墨旱莲质量控制方法的灵活性和可执行性ꎮＴＬＣ在墨旱莲质量控制中的应用见表１ꎮ表１㊀ＴＬＣ在墨旱莲质量控制中的应用样品对照品固定相展开剂显色条件９０％甲醇提取物α－醛基三联噻吩硅胶Ｇ环己烷－三氯甲烷－乙酸乙酯(８ʒ２ʒ１)ＵＶ３６６ｎｍ乙醚提取物[４７]槲皮素硅胶Ｇ甲苯－醋酸乙酯－甲酸(５ʒ４ʒ０.５)１％三氯化铝乙醇溶液ꎬＵＶ３６５ｎｍ乙酸乙酯提取物[４８]墨旱莲对照药材硅胶Ｇ正己烷－乙酸乙酯(９ʒ１)ＵＶ３６５ｎｍ甲醇提取物[４９]蟛蜞菊内酯硅胶６０Ｆ－２５４甲苯ʒ乙酸乙酯(９ʒ１)ＵＶ３６６ｎｍ水提取物[５０]蟛蜞菊内酯硅胶６０Ｆ－２５４甲苯ʒ乙酸乙酯ʒ丙酮ʒ甲酸(６ʒ２ʒ１ʒ１)ＵＶ３５１ｎｍ３.２㊀ＨＰＬＣ㊀ＨＰＬＣ是墨旱莲多指标性成分同时测定的常用方法ꎮ从表２可以看出ꎬＨＰＬＣ主要对墨旱莲中的香豆素类(蟛蜞菊内酯㊁去甲蟛蜞菊内酯)㊁三萜皂苷类(旱莲苷Ⅰ㊁旱莲苷Ⅶ)㊁黄酮类(木犀草素㊁芹菜素)㊁噻吩类(α－三联噻吩甲醛㊁α－三联噻吩甲醇)等化合物进行检测ꎮ发现不同产地㊁批次的墨旱莲中化学成分含量差异较大ꎬ如:蟛蜞菊内酯的含量范围为０.０１７０％~０.０１９０％ꎬ旱莲苷Ｉ为０.０１４０％~０.０１６０％ꎬ旱莲苷ＶＩＩ为０.００４３％~０.００５９％ꎬ木犀草素为０.０１７０％~０.０４８０％ꎬα－三联噻吩甲醛为０.０１２５％~０.１８４５％ꎬα－三联噻吩甲醇为０.００６３％~０.０７７７％ꎮ此外ꎬ吴红霞等[６４]通过高效液相色谱法建立了墨旱莲药材的指纹图谱ꎬ并对来自不同产地的墨旱莲进行质量分析ꎬ发现此方法可应用于墨旱莲的质量控制当中ꎮ表２㊀ＨＰＬＣ在墨旱莲质量控制中的应用检测对象检测化合物色谱柱流动相检测波长颗粒[５２]原儿茶酸㊁原儿茶醛１８(４.６ｍｍˑ１５０ｍｍꎬ５μｍ)甲醇－０.１％磷酸水溶液ＵＶꎬ２８０ｎｍ药材[５３]木犀草素ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｎａＣ１８柱(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)乙腈－０.１％磷酸水溶液ＤＡＤꎬ３４８ｎｍ墨旱莲配方颗粒[５４]绿原酸㊁咖啡酸ＡｇｉｌｅｎｔＺｏｒｂａｘＥｃｌｉｐｓｅＸＤＢ－Ｃ１８柱(４.６ｍｍˑ１５０ｍｍꎬ５μｍ)甲醇－０.１％磷酸水溶液ＤＡＤꎬ３２７ｎｍ药材[５５]α－三联噻吩甲醛㊁α－三联噻吩甲醇ＡｇｉｌｅｎｔＺｏｒｂａｘＳＢ－Ｃ１８柱(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)乙腈－０.５％甲酸水溶液ＶＷＤꎬ３９５ｎｍ药材[５６]木犀草素㊁芹菜素Ｎｕｃｌｅｏｄｕｒ１００－５Ｃ１８柱(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)甲醇－０.２％磷酸水溶液ＵＶꎬ３５０ｎｍ药材正丁醇提取部位[５７]墨旱莲皂甙Ａ㊁齐墩果酸㊁芹菜素㊁木犀草素㊁α－三联噻吩㊁(丁烯－３－炔－卜基)２ꎬ２－二联噻吩㊁蟛蜞菊内酯㊁去甲基蟛蜞菊内酯ＩｎｅｒｔｓｉｌＯＤＳ－２柱(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)乙腈:０.５％乙酸水溶液－甲醇:０.４％的磷酸水溶液ＳＰＤ－１０Ａｖｐꎬ２１０ｎｍ药材[５８]木犀草素ＳｙｍｍｅｔｒｙＯＤＳＣ１８柱(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)甲醇－０.２％磷酸水溶液ＰＤＡꎬ３５０ｎｍ药材[５９]木犀草素㊁芹菜素Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋＣＬＣ－ＯＤＳ柱(６ｍｍˑ１５０ｍｍꎬ５μｍ)乙腈－２％的醋酸水溶液ＳＰＤ－１０Ａｖｐꎬ３４０ｎｍ药材[６０]旱莲苷Ｃꎬ旱莲苷ＩＶꎬ旱莲苷Ａꎬ刺囊酸－２８－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖苷ＷａｔｅｒｓＡＣＱＵＩＴＹＵＰＬＣＢＥＨＣ１８柱(２.１ｍｍˑ１５０ｍｍꎬ１.７μｍ)乙腈－水溶液ＰＤＡꎬ２１０ｎｍ药材[６１]木犀草素㊁芹菜素ＡｃｑｕｉｔｙＢＥＨＣ１８柱(２.１ｍｍˑ５０ｍｍꎬ１.７μｍ)乙腈－１％乙酸水溶液ＰＤＡꎬ３４０ｎｍ药材[６２]异槲皮苷㊁木犀草苷㊁异去甲蟛蜞菊内酯㊁异绿原酸Ａ㊁异绿原酸Ｃ㊁木犀草素㊁蟛蜞菊内酯㊁芹菜素ＷａｔｅｒｓＡｃｑｕｉｔｙＵＰＬＣＢＥＨＣ１８柱(２.１ｍｍˑ１００ｍｍꎬ１.７μｍ)乙腈－０.１％甲酸水溶液ＤＡＤꎬ３５０ｎｍ测器ꎻＰＤＡ－光电二极管阵列检测器３.３㊀ＨＰＬＣ－ＭＳ㊀Ｈａｎ等[６５]通过ＨＰＬＣ－ＭＳ/ＭＳ建立了同时测定墨旱莲中９种化合物的方法ꎬ所检测化合物包括木犀草苷㊁旱莲苷Ｃ㊁木犀草素㊁旱莲苷ＩＶ㊁芹菜素㊁旱莲苷Ａ㊁刺囊酸２８－Ｏ－β－Ｄ－吡喃葡萄糖苷㊁刺囊酸㊁３－氧代－１６α－羟基齐墩果烷－１２－烯－２８－酸ꎻ并通过测定１３个产地的墨旱莲对该方法进行验证ꎬ证实该方法可应用于墨旱莲的质量控制ꎮ夏爱军等[６６]通过ＵＨＰＬＣ－Ｑ－ＴＯＦ/ＭＳ方法对对不同产地旱莲草药材中的５个指标性成分同时进行含量测定的方法ꎬ发现芹菜素㊁十六烷酸㊁木樨草素㊁蟛蜞菊内酯㊁木樨草苷在不同产地墨旱莲的测定结果存在着较大差异ꎮ３.４㊀其他方法㊀刘海兴等[６７]通过ＣＥＣ测得旱莲莲中总黄酮的平均含量最高为０.５４４ｍｇ ｋｇ－１ꎮＰｕｋｕｍｐｕａｎｇ等[６８]通过ＵＶ对墨旱莲不同提取物的总酚含量进行测定ꎬ测得正丁醇部位的总酚含量为(９０.２８８ʃ０.２４０)ｍｇ ｋｇ－１ꎮ综上分析可见ꎬ每种检测方法均有其优势与不足ꎬ如薄层色谱法凭借其操作简便㊁成本低廉㊁方法成熟㊁检测效率高等优势ꎬ至今仍为«中国药典»对墨旱莲鉴别的主要方法ꎬ但是由于其在结果的重复性㊁试剂毒性以及对生物高分子分离效果差㊁准确度低等不足ꎬ还需要不断的改进和完善ꎻ由于中药质量控制的指标成分需满足药材特有㊁临床效应明确㊁可定性㊁定量等条件ꎬ而２０１０年版«中国药典»[６９]首次通过ＨＰＬＣ对墨旱莲指标性成分蟛蜞菊内酯进行含量测定ꎬ弥补了先前药典仅通过显微㊁薄层等方法对墨旱莲进行真伪鉴别而无法进行含量测定的不足ꎬ成为墨旱莲质量控制和评价的重要手段ꎮ但是目前«中国药典»仅以蟛蜞菊内酯为检测指标进行高效液相色谱的含量测定ꎬ检测指标单一ꎬ而前期研究报道中通过ＨＰＬＣ法对墨旱莲中α－三联噻吩甲醛㊁木犀草素㊁芹菜素等多种活性成分为指标对墨旱莲进行质量控制为«中国药典»的更新和完善提供了借鉴ꎬ相信未来多指标成分测定将成为墨旱莲质量控制的必要内容ꎮ４　结语与展望墨旱莲药食同源ꎬ在临床应用及养生保健上具有一定的地位ꎮ目前对于墨旱莲的研究主要是在化学成分提取分离的基础上ꎬ开展提取物及单体的药理活性考察ꎬ以及少数化合物的体内代谢和药材的质量控制方法等ꎮ但是对于墨旱莲药效物质与其传统功效的关联性仍需进一步明确ꎬ未来需加强对其特征性成分如噻吩类㊁旱莲苷类㊁黄酮类等成分的功效和代谢特征进行全面㊁综合的分析ꎬ明确其成分与功效的关联性ꎬ建立更为科学的质量控制体系ꎬ才能为墨旱莲的药用价值及临床应用提供了更有力的科学依据ꎮ参考文献:[１]㊀程敏ꎬ胡正海.墨旱莲的生物学和化学成分研究进展[Ｊ].中草药ꎬ２０１０ꎬ４１(１２):２１１６－２１１８.[２]国家药典委员会.中华人民共和国药典２０２０年版(一部)[Ｓ].北京:中国医药科技出版ꎬ２０２０:３９１.[３]ＷＡＮＧＭꎬＦＲＡＮＺＧ.ＴｈｅｒｏｌｅｏｆｔｈｅＥｕｒｏｐｅａｎＰｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ(ＰｈＥｕｒ)ｉｎＱｕａｌｉｔｙＣｏｎｔｒｏｌｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＨｅｒｂａｌＭｅｄｉｃｉｎｅｉｎＥｕｒｏｐｅａｎＭｅｍｂｅｒＳｔａｔｅｓ[Ｊ].ＷＪＴＣＭꎬ２０１５ꎬ１(１):５－１５. [４]国家卫生计生委公布１０１种药食同源品种征求意见[Ｊ].山东中医杂志ꎬ２０１５ꎬ３４(１):７６.[５]ＸＩＯＮＧＨＰꎬＸＩＦＭꎬＣＨＥＮＷＳꎬｅｔａｌ.ＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａ[Ｊ].ＣｈｅｍＮａｔＣｏｍｐｏｕｎｄꎬ２０２１ꎬ５７(１):１－３. [６]ＹＵＳＪꎬＹＵＪＨꎬＨＥＦꎬｅｔａｌ.ＮｅｗａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｔｈｉｏｐｈｅｎｅｓｆｒｏｍＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａ[Ｊ].Ｆｉｔｏｔｅｒａｐｉａꎬ２０２０(１４２):１０４４７１.[７]徐汝明ꎬ邓克敏ꎬ陆阳.中药墨旱莲扶正固本和保肝作用的研究[Ｊ].上海交通大学学报(医学版)ꎬ２００９ꎬ２９(１０):１２００－１２０４. [８]ＳＡＸＥＮＡＡＫꎬＳＩＮＧＨＢꎬＡＮＡＮＤＫＫ.ＨｅｐａｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆＥｃｌｉｐｔａａｌｂａｏｎｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｅｖｅｌｓｉｎｒａｔｓ[Ｊ].ＪＥｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌꎬ１９９３ꎬ４０(３):１５５－１６１.[９]ＬＵＯＱꎬＤＩＮＧＪꎬＺＨＵＬꎬｅｔａｌ.ＨｅｐａｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅＥｆｆｅｃｔｏｆＷｅｄｅｌｏ￣ｌａｃｔｏｎｅａｇａｉｎｓｔＣｏｎｃａｎａｖａｌｉｎＡ－ＩｎｄｕｃｅｄＬｉｖｅｒＩｎｊｕｒｙｉｎＭｉｃｅ[Ｊ].ＡｍＪＣｈｉｎＭｅｄꎬ２０１８ꎬ４６(４):８１９－８３３.[１０]ＨＥＬＭＹＡＳꎬＳＨＥＲＩＦＮＭꎬＧＨＡＮＥＭＨＺꎬｅｔａｌ.Ｔａｒｇｅｔｅｄｍｅｔａｂｏ￣ｌｏｍｉｃｓｒｅｖｅａｌｓｔｈｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｉｍｐａｃｔｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａｏｎｄｉｅｔ－ｉｎｄｕｃｅｄｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌｉｃｆａｔｔｙｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｉｎｒａｔｓ[Ｊ].ＪＡｐｐｌｉｅｄＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅꎬ２０１９ꎬ９(Ｓ１):７７－９０.[１１]ＰＯＲＲＡＳＤꎬＮＩＳＴＡＬＥꎬＭＡＲＴÍＮＥＺ－ＦＬÓＲＥＺＳꎬｅｔａｌ.Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｏｆｑｕｅｒｃｅｔｉｎｏｎｈｉｇｈ－ｆａｔｄｉｅｔ－ｉｎｄｕｃｅｄｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌｉｃｆａｔｔｙｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｉｎｍｉｃｅｉｓｍｅｄｉａｔｅｄｂｙｍｏｄｕｌａｔｉｎｇｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｍｉｃｒｏｂｉｏｔａｉｍｂａｌａｎｃｅａｎｄｒｅｌａｔｅｄｇｕｔ－ｌｉｖｅｒａｘｉｓａｃｔｉｖａｔｉｏｎ[Ｊ].ＦｒｅｅＲａｄｉｃａｌＢｉｏＭｅｄꎬ２０１７(１０２):１８８－２０２.[１２]ＺＨＡＯＹꎬＰＥＮＧＬꎬＹＡＮＧＬꎬｅｔａｌ.ＷｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅＲｅｇｕｌａｔｅｓＬｉｐｉｄＭｅｔａｂｏｌｉｓｍａｎｄＩｍｐｒｏｖｅｓＨｅｐａｔｉｃＳｔｅａｔｏｓｉｓＰａｒｔｌｙｂｙＡＭＰＫＡｃｔｉ￣ｖａｔｉｏｎａｎｄＵｐ－ＲｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＰＰＡＲα/ＬＰＬａｎｄＬＤＬＲ[Ｊ].ＰＬｏＳＯｎｅꎬ２０１５ꎬ１０(７):ｅ１３２７２０.[１３]ＭＡＮＶＡＲＤꎬＭＩＳＨＲＡＭꎬＫＵＭＡＲＳꎬｅｔａｌ.Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｅｖａｌ￣ｕａｔｉｏｎｏｆａｎｔｉＨｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｓｆｒｏｍＥｃｌｉｐｔａａｌｂａ[Ｊ].ＪＥｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌꎬ２０１２ꎬ１４４(３):５４５－５５４.[１４]ＣＨＵＮＧＩꎬＲＡＨＵＭＡＮＡＡꎬＭＡＲＩＭＵＴＨＵＳꎬｅｔａｌ.ＡｎＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＣｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙａｎｄＣａｓｐａｓｅ－ＭｅｄｉａｔｅｄＡｐｏｐｔｏｔｉｃＥｆｆｅｃｔｏｆＧｒｅｅｎＳｙｎ￣ｔｈｅｓｉｚｅｄＺｉｎｃＯｘｉｄｅＮａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓＵｓｉｎｇＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａｏｎＨｕｍａｎＬｉｖｅｒＣａｒｃｉｎｏｍａＣｅｌｌｓ[Ｊ].Ｎａｎｏｍａｔｅｒｉａｌｓ(ＢａｓｅｌꎬＳｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ)ꎬ２０１５ꎬ５(３):１３１７－１３３０.[１５]ＧＵＰＴＡＡꎬＫＵＭＡＲＡꎬＫＵＭＡＲＤꎬｅｔａｌ.ＥｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅｆｒａｃｔｉｏｎｏｆＥｃｌｉｐｔａａｌｂａ:ａｐｏｔｅｎｔｉａｌｐｈｙｔｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｔａｒｇｅｔｉｎｇａｄｉｐｏｃｙｔｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ[Ｊ].ＢｉｏｍｅｄＰｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒꎬ２０１７(９６):５７２－５８３. [１６]ＫＩＭＤꎬＬＥＥＳꎬＣＨＯＩＪꎬｅｔａｌ.ＴｈｅｂｕｔａｎｏｌｆｒａｃｔｉｏｎｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓ￣ｔｒａｔａ(Ｌｉｎｎ)ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙｒｅｄｕｃｅｓｓｅｒｕｍｌｉｐｉｄｌｅｖｅｌｓａｎｄｉｍｐｒｏｖｅｓａｎ￣ｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｉｎＣＤｒａｔｓ[Ｊ].ＮｕｔｒＲｅｓꎬ２００８ꎬ２８(８):５５０－５５４.[１７]ＹＡＤＡＶＮＫꎬＡＲＹＡＲＫꎬＤＥＶＫꎬｅｔａｌ.ＡｌｃｏｈｏｌｉｃＥｘｔｒａｃｔｏｆＥｃｌｉｐｔａａｌｂａＳｈｏｗｓＩｎＶｉｔｒｏＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｎｄＡｎｔｉｃａｎｃｅｒＡｃｔｉｖｉｔｙｗｉｔｈｏｕｔＥｘｈｉｂｉｔｉｎｇＴｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌＥｆｆｅｃｔｓ[Ｊ].ＯｘｉｄＭｅｄＣｅｌｌＬｏｎｇｅｖꎬ２０１７(２０１７):９０９４６４１.[１８]ＬＥＥＪꎬＡＨＮＪꎬＣＨＯＹꎬｅｔａｌ.α－ＴｅｒｔｈｉｅｎｙｌｍｅｔｈａｎｏｌꎬｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａꎬｉｎｄｕｃｅｓａｐｏｐｔｏｓｉｓｂｙｇｅｎｅｒａｔｉｎｇｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓｖｉａＮＡＤＰＨｏｘｉｄａｓｅｉｎｈｕｍａｎｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＪＥｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌꎬ２０１５(１６９):４２６－４３４.[１９]ＳＡＲＶＥＳＷＡＲＡＮＳꎬＧＡＵＴＡＭＳＣꎬＧＨＯＳＨＪ.Ｗｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅꎬａｍｅｄｉｃｉｎａｌｐｌａｎｔ－ｄｅｒｉｖｅｄｃｏｕｍｅｓｔａｎꎬｉｎｄｕｃｅｓｃａｓｐａｓｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｐｒｏｓｔａｔｅｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓｖｉａｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＰＫＣｅｐｓｉｌｏｎｗｉｔｈｏｕｔｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇＡｋｔ[Ｊ].ＩｎｔＪＯｎｃｏｌꎬ２０１２ꎬ４１(６):２１９１－２１９９. [２０]ＮＥＨＹＢＯＶＡＴꎬＳＭＡＲＤＡＪꎬＤＡＮＩＥＬＬꎬｅｔａｌ.Ｗｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅｉｎｄｕｃｅｓｇｒｏｗｔｈｏｆｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓｂｙｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎｏｆｅｓｔｒｏｇｅｎｒｅ￣ｃｅｐｔｏｒｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ[Ｊ].ＪＳｔｅｒｏｉｄＢｉｏｃｈｅｍＭｏｌＢｉｏｌꎬ２０１５(１５２):７６－８３.[２１]ＡＲＵＮＡＣＨＡＬＡＭＧꎬＳＵＢＲＡＭＡＮＩＡＮＮꎬＰＡＺＨＡＮＩＧＰꎬｅｔａｌ.Ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｍｅｔｈａｎｏｌｉｃｅｘｔｒａｃｔｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａＬ.(Ａｓｔｅａｒａｃｅａｅ)[Ｊ].ＡｆｒｉｃａｎＪＰｈａｒｍａｃｙＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙꎬ２００９ꎬ３(３):９７－１００.[２２]ＤＥＦＲＥＩＴＡＳＭＯＲＥＬＬＪꎬＤＥＡＺＥＶＥＤＯＢＣꎬＣＡＲＭＯＮａＦꎬｅｔａｌ.ＡｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅｄｍｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａ(Ｌ.)Ｌ.(Ａｓ￣ｔｅｒａｃｅａｅ)ｒｅｄｕｃｅｓｂｒｏｎｃｈｉａｌｈｙｐｅｒｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓａｎｄｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＴｈ２ｃｙｔｏｋｉｎｅｓｉｎａｍｕｒｉｎｅｍｏｄｅｌｏｆａｓｔｈｍａ[Ｊ].ＪＥｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌꎬ２０１７(１９８):２２６－２３４.[２３]ＲＹＵＳꎬＳＨＩＮＪＳꎬＪＵＮＧＪＹꎬｅｔａｌ.ＥｃｈｉｎｏｃｙｓｔｉｃａｃｉｄｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ－ｉｎｄｕｃｅｄｉＮＯＳꎬＴＮＦ－ａｌｐｈａꎬａｎｄＩＬ－６ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｖｉａＮＦ－ｋａｐｐａＢｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎｉｎＲＡＷ２６４.７ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ[Ｊ].ＰｌａｎｔａＭｅｄꎬ２０１３ꎬ７９(１２):１０３１－１０３７. [２４]ＫＯＢＯＲＩＭꎬＹＡＮＧＺꎬＧＯＮＧＤꎬｅｔａｌ.ＷｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓＬＰＳ－ｉｎｄｕｃｅｄｃａｓｐａｓｅ－１１ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｂｙｄｉｒｅｃｔｌｙｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｔｈｅＩＫＫｃｏｍｐｌｅｘ[Ｊ].ＣｅｌｌＤｅａｔｈＤｉｆｆｅｒꎬ２００４ꎬ１１(１):１２３－１３０.[２５]林朝朋ꎬ芮汉明ꎬ许晓春.墨旱莲黄酮类提取物抗自由基作用及体内抗氧化功能的研究[Ｊ].军事医学科学院院刊ꎬ２００５ꎬ２９(４):３４４－３４５.[２６]ＳＩＮＧＨＬꎬＡＮＴＩＬＲꎬＫＵＭＡＲＤꎬｅｔａｌ.ＰｈｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎａｌｙｓｉｓａｎｄＩｎ－ｖｉｔｒｏａｓｓａｙｓｆｏｒａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｎｄａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＢｈｒｉｎｇｒａｊｈｅｒｂＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａ(Ｌ.)[Ｊ].ＪＰｈａｒｍＰｈｙｔｏｃｈｅｍꎬ２０１９ꎬ８(３):４５２７－４５３３.[２７]ＵＮＮＩＫＲＩＳＨＮＡＮＫＰꎬＦＡＴＨＩＭＡＡꎬＨＡＳＨＩＭＫＭꎬｅｔａｌ.Ａｎｔｉｏｘｉ￣ｄａｎｔＳｔｕｄｉｅｓａｎｄＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＷｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅｉｎＥｃｌｉｐｔａａｌｂａ[Ｊ].ＪＰｌａｎｔＳｃｉꎬ２００７ꎬ２(４):４５９－４６４.[２８]ＲＡＵＴＳꎬＲＡＵＴＳꎬＧＨＡＤＡＩＡ.Ｐｈｙｔｏｃｅｕｔｉｃａｌｅｖａｌｕａｔｉｏｎａｎｄａｎｔｉ￣ｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆＥｃｌｉｐｔａａｌｂａａｎｄＴｙｌｏｐｈｏｒａｉｎｄｉｃａ[Ｊ].ＩｎｔＪＭｉｃｒｏｂｉｏｌＲｅｓꎬ２０１２ꎬ４(５):２２７－２３０.[２９]ＮＡＧＡＢＨＵＳＨＡＮꎬＲＡＶＥＥＳＨＡＫＡꎬＳＨＲＩＳＨＡＤＬ.Ａｎｔｉｄｅｒｍａｔｏ￣ｐｈｙｔｉｃａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａＬ.ａｇａｉｎｓｔｈｕｍａｎｉｎｆｅｃｔｉｖｅＴｒｉｃｈｏ￣ｐｈｙｔｏｎａｎｄＭｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍｓｐｐ[Ｊ].ＩｎｔＪＣｈｅｍＡＮａｌｙｔＳｃｉꎬ２０１３ꎬ４(２):１３６－１３８.[３０]ＲＡＹＡꎬＢＨＡＲＡＬＩＰꎬＫＯＮＷＡＲＢＫ.ＭｏｄｅｏｆＡｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌＡｃｔｉｖｉｔｙｏｆＥｃｌａｌｂａｓａｐｏｎｉｎＩｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＥｃｌｉｐｔａａｌｂａ[Ｊ].ＡｐｐｌＢｉｏ￣ｃｈｅｍＢｉｏｔｅｃｈꎬ２０１３ꎬ１７１(８):２００３－２０１９.[３１]ＧＵＲＲＡＰＵＳꎬＭＡＭＩＤＡＬＡＥ.ＩｎｖｉｔｒｏＡｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌＡｃｔｉｖｉｔｙｏｆＡｌ￣ｋａｌｏｉｄｓＩｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＬｅａｖｅｓｏｆＥｃｌｉｐｔａａｌｂａＡｇａｉｎｓｔＨｕｍａｎＰａｔｈｏ￣ｇｅｎｉｃＢａｃｔｅｒｉａ[Ｊ].ＰｈａｒｍａｃｏｇｎｏｓｙＪꎬ２０１７ꎬ９(４):５７３－５７７. [３２]ＤＥＮＧＹＴꎬＫＡＮＧＷＢꎬＺＨＡＯＪＮꎬｅｔａｌ.ＯｓｔｅｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅＥｆｆｅｃｔｏｆＥｃｈｉｎｏｃｙｓｔｉｃＡｃｉｄꎬａＴｒｉｔｅｒｐｏｎｅＣｏｍｐｏｎｅｎｔｆｒｏｍＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａꎬｉｎＯｖａｒｉｅｃｔｏｍｙ－ＩｎｄｕｃｅｄＯｓｔｅｏｐｏｒｏｔｉｃＲａｔｓ[Ｊ].ＰＬｏＳＯｎｅꎬ２０１５ꎬ１０(８):ｅ１３６５７２.[３３]ＣＨＲＩＳＴＹＢＡＰＩＴＡＤꎬＤＩＶＹＡＧＮＡＮＥＳＷＡＲＩＭꎬＭＩＣＨＡＥＬＲＤ.ＯｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆＥｃｌｉｐｔａａｌｂａｌｅａｆａｑｕｅｏｕｓｅｘｔｒａｃｔｅｎｈａｎｃｅｓｔｈｅｎｏｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｍｍｕｎｅｒｅｓｐｏｎｓｅｓａｎｄｄｉｓｅａｓｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆＯｒｅｏ￣ｃｈｒｏｍｉｓｍｏｓｓａｍｂｉｃｕｓ[Ｊ].ＦｉｓｈＳｈｅｌｌｆｉｓｈＩｍｍｕｎꎬ２００７ꎬ２３(４):８４０－８５２.[３４]ＫＵＭＡＲＤꎬＧＡＯＮＫＡＲＲＨꎬＧＨＯＳＨＲꎬｅｔａｌ.Ｂｉｏ－ａｓｓａｙｇｕｉｄｅｄｉ￣ｓｏｌａｔｉｏｎｏｆａｌｐｈａ－ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｆｒｏｍＥｃｌｉｐｔａａｌｂａ.[Ｊ].ＮａｔＰｒｏｄＣｏｍｍｕｎꎬ２０１２ꎬ７(８):９８９－９９０.[３５]ＤＡＳＳＫꎬＭＡＲＩＡＰＰＡＮＰ.ＬａｒｖｉｃｉｄａｌＡｃｔｉｖｉｔｙｏｆＣｏｌｏｃａｓｉａｅｓｃｕｌｅｎｔａꎬＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａａｎｄＷｒｉｇｈｔｉａｔｉｎｃｔｏｒｉａＬｅａｆＥｘｔｒａｃｔＡｇａｉｎｓｔＣｕｌｅｘｑｕｉｎｑｕｅｆａｓｃｉａｔｕｓ[Ｊ].ＰｒｏｃｅｅｄＮａｔＡｃａｄＳｃｉＩｎｄｉａꎬ２０１６ꎬ８６(１):１３９－１４３.[３６]庄晓燕ꎬ杨菁ꎬ李华侃ꎬ等.热盛胃出血小鼠模型的制作及墨旱莲对其止血作用机制的研究[Ｊ].数理医药学杂志ꎬ２０１０ꎬ２３(１):３５－３７.[３７]ＤＩＯＧＯＬＣꎬＦＥＲＮＡＮＤＥＳＲＳꎬＭＡＲＣＵＳＳＩＳꎬｅｔａｌ.ＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＳｎａｋｅＶｅｎｏｍｓａｎｄＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅｓＡ２ｂｙＥｘｔｒａｃｔｓｆｒｏｍＮａｔｉｖｅａｎｄＧｅｎｅｔｉｃａｌｌｙＭｏｄｉｆｉｅｄＥｃｌｉｐｔａａｌｂａ:ＩｓｏｌａｔｉｏｎｏｆＡｃｔｉｖｅＣｏｕｍｅｓｔａｎｓ[Ｊ].ＢａｓｉｃＣｌｉｎＰｈａｒｍａｃｏｌꎬ２００９ꎬ１０４(４):２９３－２９９.[３８]ＳＨＥＮＰꎬＹＡＮＧＸꎬＪＩＡＮＧＪꎬｅｔａｌ.ＷｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅｆｒｏｍＥｃｌｉｐｔａａｌｂａｉｎｈｉｂｉｔｓｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ－ｅｎｈａｎｃｅｄｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｒｅｎａｌｍｅｓａｎｇｉａｌｃｅｌｌｓｖｉａＮＦ－κＢｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ[Ｊ].ＡｍＪＴｒａｎｓｌＲｅｓꎬ２０１７ꎬ９(５):２１３２.[３９]ＢＥＧＵＭＳꎬＬＥＥＭＲꎬＧＵＬＪꎬｅｔａｌ.ＥｘｏｇｅｎｏｕｓｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎｗｉｔｈＥｃｌｉｐｔａａｌｂａｐｒｏｍｏｔｅｓｈａｉｒｍａｔｒｉｘｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｅｓＴＧＦ－ｂｅｔａ１ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｎｕｄｅｍｉｃｅ[Ｊ].ＩｎｔＪＭｏｌＭｅｄꎬ２０１５ꎬ３５(２):４９６－５０２.[４０]ＲＯＹＲＫꎬＴＨＡＫＵＲＭꎬＤＩＸＩＴＶＫ.ＨａｉｒｇｒｏｗｔｈｐｒｏｍｏｔｉｎｇａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＥｃｌｉｐｔａａｌｂａｉｎｍａｌｅａｌｂｉｎｏｒａｔｓ[Ｊ].ＡｒｃｈＤｅｒｍａｔｏｌＲｅｓꎬ２００８ꎬ３００(７):３５７－３６４.[４１]ＬＩＭꎬＳＩＤꎬＦＵＺꎬｅｔａｌ.Ｅｎｈａｎｃｅｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｉｎｖｉｖｏｍｅ￣ｔａｂｏｌｉｔｅｓｏｆＥｃｌｉｐｔａｅＨｅｒｂａｉｎｒａｔｐｌａｓｍａｂｙｉｎｔｅｇｒａｔｉｎｇｕｎｔａｒｇｅｔｅｄｄａｔａ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔＭＳ２ａｎｄｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅｍｕｌｔｉｐｌｅｒｅａｃｔｉｏｎｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ－ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ－ｅｎｈａｎｃｅｄｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｓｃａｎ[Ｊ].ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＢꎬ２０１９(１１０９):９９－１１０.[４２]邓斌ꎬ韦炳华ꎬ黄盛超ꎬ等.ＨＰＬＣ法同时测定大鼠口服墨旱莲提取物后血浆中四种黄酮类化合物[Ｊ].中药材ꎬ２０１４ꎬ３７(９):１６３６－１６４０.[４３]ＣＨＥＲＵＶＵＨＳꎬＹＡＤＡＶＮＫꎬＶＡＬＩＣＨＥＲＬＡＧＲꎬｅｔａｌ.ＬＣ－ＭＳ/ＭＳｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｌｕｔｅｏｌｉｎꎬｗｅｄｅｌｏ￣ｌａｃｔｏｎｅａｎｄａｐｉｇｅｎｉｎｉｎｍｉｃｅｐｌａｓｍａｕｓｉｎｇｈａｎｓｅｎｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙｐａｒａｍ￣ｅｔｅｒｓｆｏｒｌｉｑｕｉｄ－ｌｉｑｕｉｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ:ＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｔｏｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆＥｃｌｉｐｔａａｌｂａｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍｆｒａｃｔｉｏｎ[Ｊ].ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＢꎬ２０１８(１０８１/１０８２):７６－８６.[４４]ＣＨＥＮＴꎬＬＩＬＰꎬＬＵＸＹꎬｅｔａｌ.ＡｂｓｏｒｐｔｉｏｎａｎｄｅｘｃｒｅｔｉｏｎｏｆｌｕｔｅｏｌｉｎａｎｄａｐｉｇｅｎｉｎｉｎｒａｔｓａｆｔｅｒｏｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆＣｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍｍｏｒｉｆｏｌｉｕｍｅｘｔｒａｃｔ[Ｊ].ＪＡｇｒｉｃＦｏｏｄＣｈｅｍꎬ２００７ꎬ５５(２):２７３－２７７. [４５]ＣＨＥＮＱꎬＷＵＸꎬＧＡＯＸꎬｅｔａｌ.ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄＶａｌｉｄａｔｉｏｎｏｆａｎＵｌｔｒａ－ＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＬｉｑｕｉｄＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙＭｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅＤｅｔｅｒｍｉ￣ｎａｔｉｏｎｏｆＷｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅｉｎＲａｔＰｌａｓｍａａｎｄｉｔｓＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎａＰｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃＳｔｕｄｙ[Ｊ].Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓꎬ２０１９ꎬ２４(４):７６２.[４６]张朝凤ꎬ孙志华ꎬ张勉ꎬ等.墨旱莲的质量标准研究:２０１０全国知名中医院院长暨道家文化与中医药养生论坛论文集[Ｃ].２０１０:４４－４７.[４７]黄诺嘉ꎬ肖树雄.墨旱莲与其混淆品元宝草的鉴别[Ｊ].中药材ꎬ１９９７(９):４５６－４５７.[４８]李铮ꎬ傅欣彤ꎬ张小茜.养血安神丸质量标准研究[Ｊ].中国中医药信息杂志ꎬ２００９ꎬ１６(７):４８－４９.(下转第６８３页)ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ:ｃｏｒｅ－ｓｈｅｌｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅｓｗｉｔｈｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓｆｏｒｅｎｈａｎｃｅｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｔｙ[Ｊ].ＳｃｉＲｅｐꎬ２０２１ꎬ１１(１):１－１８.[５８]ＫＡＮＧＫꎬＫＩＭＹꎬＪＥＯＮＨꎬｅｔａｌ.Ｔｈｒｅｅ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｂｉｏｐｒｉｎｔｉｎｇｏｆｈｅｐａｔｉｃｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｗｉｔｈｄｉｒｅｃｔｌｙｃｏｎｖｅｒｔｅｄｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ－ｌｉｋｅｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＴｉｓｓｕｅＥｎｇｉＰａｒｔＡꎬ２０１８ꎬ２４(７/８):５７６－５８３.[５９]ＷＡＮＧＪＺꎬＸＩＯＮＧＮＹꎬＺＨＡＯＬＺꎬｅｔａｌ.Ｒｅｖｉｅｗｆａｎｔａｓｔｉｃｍｅｄｉｃａｌｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｏｆ３Ｄ－ｐｒｉｎｔｉｎｇｉｎｌｉｖｅｒｓｕｒｇｅｒｉｅｓꎬｌｉｖｅｒｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎꎬｌｉｖｅｒｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎａｎｄｄｒｕｇｈｅｐａｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｔｅｓｔｉｎｇ:ａｒｅｖｉｅｗ[Ｊ].ＩｎｔＪＳｕｒｇꎬ２０１８(５６):１－６.[６０]ＦＡＵＬＫＮＥＲ－ＪＯＮＥＳＡꎬＦＹＦＥＣꎬＣＯＲＮＥＬＩＳＳＥＮＤＪꎬｅｔａｌ.Ｂｉｏ￣ｐｒｉｎｔｉｎｇｏｆｈｕｍａｎｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓａｎｄｔｈｅｉｒｄｉｒｅｃｔｅｄｄｉｆｆｅｒｅｎ￣ｔｉａｔｉｏｎｉｎｔｏｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ－ｌｉｋｅｃｅｌｌｓｆｏｒｔｈｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｏｆｍｉｎｉ－ｌｉｖｅｒｓｉｎ３Ｄ[Ｊ].Ｂｉｏｆａｂｒｉｃａｔｉｏｎꎬ２０１５ꎬ７(４):０４４１０２.[６１]ＮＧＵＹＥＮＤＧꎬＦＵＮＫＪꎬＲＯＢＢＩＮＳＪＢꎬｅｔａｌ.Ｂｉｏｐｒｉｎｔｅｄ３ＤＰｒｉｍａｒｙＬｉｖｅｒＴｉｓｓｕｅｓＡｌｌｏｗＡｓｓｅｓｓｍｅｎｔｏｆＯｒｇａｎ－ＬｅｖｅｌＲｅｓｐｏｎｓｅｔｏＣｌｉｎｉｃａｌＤｒｕｇＩｎｄｕｃｅｄＴｏｘｉｃｉｔｙＩｎＶｉｔｒｏ[Ｊ].ＰＬｏＳＯｎｅꎬ２０１６ꎬ１１(７):ｅ０１５８６７４.[６２]ＭＡＺＺＯＣＣＨＩＡꎬＤＥＶＡＲＡＳＥＴＴＹＭꎬＨＵＮＴＷＯＲＫＲꎬｅｔａｌ.Ｏｐｔｉ￣ｍｉｚａｔｉｏｎｏｆｃｏｌｌａｇｅｎｔｙｐｅＩ－ｈｙａｌｕｒｏｎａｎｈｙｂｒｉｄｂｉｏｉｎｋｆｏｒ３Ｄｂｉｏ￣ｐｒｉｎｔｅｄｌｉｖｅｒｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｓ[Ｊ].Ｂｉｏｆａｂｒｉｃａｔｉｏｎꎬ２０１８ꎬ１１(１):０１５００３.[６３]ＭＡＳＳＡＳꎬＳＡＫＲＭＡꎬＳＥＯＪꎬｅｔａｌ.Ｂｉｏｐｒｉｎｔｅｄ３Ｄｖａｓｃｕｌａｒｉｚｅｄｔｉｓ￣ｓｕｅｍｏｄｅｌｆｏｒｄｒｕｇｔｏｘｉｃｉｔｙａｎａｌｙｓｉｓ[Ｊ].Ｂｉｏｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓꎬ２０１７ꎬ１１(４):０４４１０９.[６４]ＬＥＥＫꎬＬＥＥＪꎬＬＥＥＳ.３Ｄｌｉｖｅｒｍｏｄｅｌｓｏｎａｍｉｃｒｏｐｌａｔｆｏｒｍ:ｗｅｌｌ－ｄｅｆｉｎｅｄｃｕｌｔｕｒｅꎬｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇｏｆｌｉｖｅｒｔｉｓｓｕｅａｎｄｌｉｖｅｒ－ｏｎ－ａ－ｃｈｉｐ[Ｊ].ＬａｂＣｈｉｐꎬ２０１５ꎬ１５(１９):３８２２－３８３７.[６５]ＤＥＮＧＪꎬＺＨＡＮＧＸꎬＣＨＥＮＺꎬｅｔａｌ.Ａｃｅｌｌｌｉｎｅｓｄｅｒｉｖｅｄｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｌｉｖｅｒｍｏｄｅｌｆｏｒｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｆｈｅｐａｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｉｎｄｕｃｅｄｂｙｄｒｕｇ－ｄｒｕｇｉｎ￣ｔｅｒａｃｔｉｏｎ[Ｊ].Ｂｉｏｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓꎬ２０１９ꎬ１３(２):０２４１０１.[６６]ＫＡＬＣＨＭＡＮＪꎬＦＵＪＩＯＫＡＳꎬＣＨＵＮＧＳꎬｅｔａｌ.Ａｔｈｒｅｅ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｔｕｍｏｒｃｅｌｌｍｉｇｒａｔｉｏｎａｓｓａｙｔｏｓｃｒｅｅｎｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆａｎｔｉ－ｍｉｇｒａｔｏｒｙｄｒｕｇｓａｎｄｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌｆｌｏｗ[Ｊ].ＭｉｃｒｏｆｌｕｉｄＮａｎｏｆｌｕｉｄｉｃｓꎬ２０１３ꎬ１４(６):９６９－９８１.[６７]ＢＨＩＳＥＮＳꎬＭＡＮＯＨＡＲＡＮＶꎬＭＡＳＳＡＳꎬｅｔａｌ.Ａｌｉｖｅｒ－ｏｎ－ａ－ｃｈｉｐｐｌａｔｆｏｒｍｗｉｔｈｂｉｏｐｒｉｎｔｅｄｈｅｐａｔｉｃｓｐｈｅｒｏｉｄｓ[Ｊ].Ｂｉｏｆａｂｒｉｃａｔｉｏｎꎬ２０１６ꎬ８(１):０１４１０１－０１４１０１.[６８]ＭＥＮＯＮＮＶꎬＬＩＭＳＢꎬＬＩＭＣＴ.Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓｆｏｒｐｅｒｓｏｎａｌｉｚｅｄｄｒｕｇｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｃａｎｃｅｒ[Ｊ].ＣｕｒｒＯｐｉｎＰｈａｒｍａｃｏｌꎬ２０１９(４８):１５５－１６１.(上接第６７７页)[４９]ＳＡＶＩＴＡＫꎬＰＲＡＫＡＳＨＣＨＡＮＤＲＡＫ.ＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆＥｘｔｒａｃｔｉｏｎＣｏｎｄｉｔｉｏｎｓａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆａＳｅｎｓｉｔｉｖｅＨＰＴＬＣＭｅｔｈｏｄｆｏｒＥｓ￣ｔｉｍａｔｉｏｎｏｆＷｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｅｘｔｒａｃｔｓｏｆＥｃｌｉｐｔａａｌｂａ[Ｊ].ＩｎｔＪＰｈａｒｍＳｃｉＤｒｕｇＲｅｓꎬ２０１１ꎬ３(１):５６－６１.[５０]ＷＡＮＩＮＳꎬＤＥＳＨＭＵＫＨＴＡꎬＰＡＴＩＬＶＲ.ＡｒａｐｉｄｄｅｎｓｉｔｏｍｅｔｒｉｃｍｅｔｈｏｄｆｏｒｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｗｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅｉｎｈｅｒｂａｌｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓｕｓｉｎｇＨＰＴＬＣ[Ｊ].ＪＣｈｅｍＭｅｔｒｏｌꎬ２０１０ꎬ４(１):２８－３３.[５１]夏天一ꎬ张凤ꎬ韩强ꎬ等.ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ法同时测定墨旱莲中蟛蜞菊内酯㊁旱莲苷Ｉ和旱莲苷ＶＩＩ的含量[Ｊ].沈阳药科大学学报ꎬ２０１７ꎬ３４(１):５７－６１.[５２]周燕园ꎬ吴怀恩ꎬ梁臣艳ꎬ等.ＨＰＬＣ测定墨旱莲配方颗粒中的原儿茶酸和原儿茶醛[Ｊ].华西药学杂志ꎬ２０１３ꎬ２８(５):５１４－５１６.[５３]陈腾飞ꎬ萧伟ꎬ尚强ꎬ等.ＨＰＬＣ法测定不同产地墨旱莲药材中木犀草素含量[Ｊ].南京中医药大学学报ꎬ２０１１ꎬ２７(２):１５８－１６０.[５４]周燕园.ＨＰＬＣ法测定墨旱莲配方颗粒中绿原酸和咖啡酸[Ｊ].中成药ꎬ２０１２ꎬ３４(２):３７４－３７７.[５５]韩强ꎬ习峰敏ꎬ张凤ꎬ等.ＨＰＬＣ法测定墨旱莲中两个噻吩类化合物的含量[Ｊ].沈阳药科大学学报ꎬ２０１５ꎬ３２(４):２８５－２８８. [５６]邓斌ꎬ韦炳华ꎬ黄盛超ꎬ等.ＨＰＬＣ法同时测定旱莲草中木犀草素和芹菜素的含量[Ｊ].中国药房ꎬ２０１４ꎬ２５(３９):３６８５－３６８７. [５７]孔燕凌.ＨＰＬＣ同时测定墨旱莲正丁醇有效部位含量分析[Ｊ].实验与检验医学ꎬ２０１７ꎬ３５(４):４７５－４７８.[５８]房信胜ꎬ王建华ꎬ蕾魏ꎬ等.不同提取条件下墨旱莲的ＨＰＬＣ－ＰＡＤ图谱分析[Ｊ].天然产物研究与开发ꎬ２０１０ꎬ２２(Ｂ０８):５５－５９.[５９]杨海英ꎬ王雪梅ꎬ杜刚ꎬ等.高效液相色谱法测定旱莲草中木犀草素和芹菜素的含量[Ｊ].时珍国医国药ꎬ２００８ꎬ１９(１２):２９９４－２９９５.[６０]赵晶ꎬ夏明辉ꎬ李莉ꎬ等.ＵＰＬＣ－ＰＤＡ测定不同产地墨旱莲中的４种皂苷[Ｊ].中国实验方剂学杂志ꎬ２０１６ꎬ２２(３):６３－６６. [６１]杨海英ꎬ曾程ꎬ杜刚.ＵＰＬＣ法测定旱莲草中木犀草素和芹菜素的含量[Ｊ].中药材ꎬ２０１０ꎬ３３(８):１２７５－１２７６.[６２]侯雪峰ꎬ孙帅ꎬ汪刚ꎬ等.ＵＰＬＣ同时测定墨旱莲药材中８种成分的含量[Ｊ].中国中药杂志ꎬ２０１６ꎬ４１(２１):３９８２－３９８７. [６３]ＰＡＴＩＬＡＡꎬＳＡＣＨＩＮＢＳꎬＳＨＩＮＤＥＤＢꎬｅｔａｌ.ＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆｓａｍｐｌｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｖａｒｉａｂｌｅｓｆｏｒｗｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅｆｒｏｍＥｃｌｉｐｔａａｌｂａｕ￣ｓｉｎｇＢｏｘ－ＢｅｈｎｋｅｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｄｅｓｉｇｎｆｏｌｌｏｗｅｄｂｙＨＰＬＣｉｄｅｎｔｉｆｉ￣ｃａｔｉｏｎ[Ｊ].ＡｎｎａｌｅｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｑｕｅｓＦｒａｎçａｉｓｅｓꎬ２０１３ꎬ７１(４):２４９－２５９.[６４]吴红霞ꎬ高晓霞ꎬ赵云丽ꎬ等.墨旱莲药材的高效液相指纹图谱及聚类分析[Ｊ].沈阳药科大学学报ꎬ２００６ꎬ２３(２):９７－１００. 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旱莲草的药用价值与功效1、功能主治滋补肝肾,乌须固齿,凉血止血,治肝肾不足,眩晕耳鸣,视物昏花,腰膝酸软。

全草入药,能凉血、止血、消肿、强壮之功效。

2、用于什么病症治肝肾不足,眩晕耳鸣,视物昏花,腰膝酸软。

3、用法用量旱莲草60——90g。

捣烂,加盐少许,冲开水去渣服。

服后吐出涎沫。

《岭南草药志》。

1、出自:《本草纲目》。

【别名】:乌田草、墨旱莲、旱莲草、墨水草、乌心草。

【药材来源】:全草入药。

【生境分布】:全国广布种。

常见于田梗,沟溪边湿地。

全草药用,能收敛、止血、补肝肾之功效。

外用治疗跖疣。

【性味归经】:草味甘酸,性凉,入肝肾二经,无毒。

【化学成分】:叶含蟛蜞菊内酯Wedelolac-tone、去甲基蟛蜞菊内酯。

去甲基蟛蜞菊内酯-7-葡萄糖甙。

含菸碱nicotine约 0.08%,另含三噻嗯甲醇α-terthienylmethanol、三噻嗯甲醛α-formyl-α-terthienel;此外,尚含皂甙约1.3%,鞣质、苦味质及异黄酮甙类。

【功能主治】:滋补肝肾、凉血止血,可治各种吐血,鼻出血,咳血,肠出血,尿血,痔疮出血,血崩等症。

捣汁涂眉发,能促进毛发生长,内服有乌发、黑发功效。

【用法用量】:旱莲草60——90g。

捣烂,加盐少许,冲开水去渣服。

服后吐出涎沫。

《岭南草药志》。

2、《唐本草》说,墨旱莲“主血痢,针灸疮发,洪血不可止者敬之”。

3、《日华子本草》中也说,墨旱莲可以“排脓,止血,通小肠,敷一切疮并蚕瘑”。

4、《滇南本草》载,墨旱莲“固齿,乌发,洗九种痔疮”。

5、《本草纲目》指出,墨旱莲“乌须发,益肾阴”。

《本草述》认为,墨旱莲“疗溺血及肾虚变为劳淋”。

菊科，一年生草本植物。

直立，具匍匐茎;叶对生，披针形;头状花序，腋生或顶生，花白色;瘦果黑色。

全国广布种。

常见于田梗，沟溪边湿地。

全草药用，能收敛、止血、补肝肾之功效。

即莲子草也，旧不载所出州郡，但云生下湿地，今处处有之，南方尤多。

此有二种：一种叶似柳而光泽，茎似马齿苋，高一、二尺许，花细而白，其实若小莲房。

薄层色谱用于草药分析对现状的批评性回顾及对专著改进的建议Eike Reich1*，Anne Blatter1，Beat Meier21CAMAG应用实验室，Sonnenmattstrasse 11，4132 Muttenz，瑞士2瑞士植物化学出口委员会主席，Zeller AG，Seeblickstrasse 4，8590 Romanshorn，瑞士*通讯作者3摘要薄层色谱（TLC）是一个非常适合药用植物分析的方法。

有许多参数能够改变色谱结果，使得薄层色谱拥有无以伦比的灵活性，这是其固有的优势。

另一方面，如果对这些参数缺乏标准化及精确定义，薄层色谱的结果很难重现。

就像在目前的欧洲药典（Ph. Eur.）中，现代薄层色谱的技术被严重忽视。

本文试图提出对通用方法描述及独立专著改进的可能，着重于对实验细节的优化与标准化，将有助于提高方法的重现性。

本文以理论讨论及实际应用为基础，阐明了高效薄层色谱（HPTLC）的优势，并对薄层色谱方法在药典专著中标准化的必要性进行了阐述。

关键词衍生化，成像，高效薄层色谱（HPTLC），方法学，展开，点样，标准化，薄层色谱（TLC）。

1．介绍传统薄层色谱（TLC）广泛应用于药用植物的分析，全世界大多数药典的草药专著中都有薄层色谱鉴别方法。

薄层色谱通用方法描述通常没有具体规定，使实验人员有较大随意性。

因此采用这些方法得到的结果往往变化很大，可能很难进行判断。

由于影响薄层色谱结果的许多参数被忽视，薄层色谱分析的重现性往往很难令人满意。

另外，对薄层色谱方法学的现代化还存在有明显的阻力。

随之而来有种趋势，许多人将薄层色谱视为过时和落后的技术，希望采用“更可靠”的高效液相色谱（HPLC）或其它色谱技术来代替。

然而，不能低估，薄层色谱也有许多优势。

不仅仅是草药鉴别，还有提取物和成品的稳定性测试，以及生产过程中的中控，薄层色谱提供的图像化的色谱结果还不能被替代[1]。

每个样品分析速度快、费用低也是其优点。

xxxxxxxxxxxx有限公司成品质量标准及检验操作规程1 品名：1.1 中文名：墨旱莲1.2 汉语拼音：Mohanlian2 代码：3 取样文件编号：4 检验方法文件编号：5 依据：《中国药典》（2020年版一部）。

6 质量标准：7 检验操作规程：7.1 试药与试剂：70%甲醇、墨旱莲对照药材、稀盐酸、甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、水、0.5%醋酸溶液、蟛蜞菊内酯对照品、70%乙醇、盐酸、氢氧化钠滴定液、甲基红乙醇溶液指示剂。

7.2 仪器与用具：电子天平、烘箱、显微镜、马弗炉、硅胶G板、超声波清洗器、高效液相色谱仪、二氧化硫测定仪。

7.3 性状：取本品适量，自然光下目测色泽，嗅闻气味。

7.4 鉴别：7.4.1 取本品制片置10×10显微镜下做显微观察。

7.4.2 取本品，浸水后，搓其茎叶，显墨绿色。

7.4.3 取本品粉末2g，加70%甲醇20ml，超声处理45分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。

另取墨旱莲对照药材2g，同法制成对照药材溶液。

再取旱莲苷A对照品适量，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法（附录7）试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各10µ1、对照品溶液5µ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（30 ：40 ：15 ：3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸试液，在105°C 加热至斑点显色清晰。

供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

7.5 检查：7.5.1 水分不得过13.0%(附录15 第二法)。

7.5.2 总灰分不得过14. 0%(附录17)。

7.5.3 酸不溶性灰分不得过3.0%(附录17)。

7.5.4 二氧化硫残留量照二氧化硫残留量测定法（附录58）测定，不得过150mg/kg。

7.6 含量测定：照高效液相色谱法（附录8）测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以0.5%醋酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为351nm。

薄层层析法分析旱莲草的凝血活性成分过七根;徐常龙;董雯;张炳火【摘要】旱莲草是一种具有多种生理活性的中草药,含有多种凝血物质.利用制备型薄层层析的方法,分别对旱莲草的乙醇和乙酸乙酯提取物的凝血活性成分进行了分析,发现旱莲草至少含有6个凝血活性组分,其中3个组分凝血活性较强.%Eclipta alba,a kind of herbal medicine with many physiological activities,has various procoagulant components.In this study,the procoagulant components of E.alba were extracted by using ethanol and ethyl acetate respectively,and analyzed by suing preparative thin layer chromatography(TLC).There were at least six procoagulant components in metabolites of E.alba,and three of them showed strong procoagulant activity.【期刊名称】《江西师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2017(041)001【总页数】4页(P89-92)【关键词】旱莲草;凝血活性;薄层层析【作者】过七根;徐常龙;董雯;张炳火【作者单位】九江学院药学与生命科学学院,江西九江 332000;九江学院药学与生命科学学院,江西九江 332000;九江学院药学与生命科学学院,江西九江 332000;九江学院药学与生命科学学院,江西九江 332000【正文语种】中文【中图分类】R286旱莲草是一种重要的药用植物[1-2]，最早用于止血[3]，常用来治疗阴虚血热、吐血、血衄、尿血、血痢、崩漏下血以及外伤出血等出血性病症，其止血功能在临床中药复方制剂方面已得到了一些应用，它是宁环片、功血宁冲剂和明目止血片等临床常用止血中药制剂的主要成分之一[4].但是，迄今为止，旱莲草凝血或止血活性的研究基本集中在水、乙醇和甲醇等溶剂浸泡的粗提物上[3，5-7]，虽然从旱莲草中分离到了包括香豆草醚类、三萜皂苷类、甾体类、噻吩类和黄酮类等各种化合物[8-16]，但其中只有蟛蜞菊内酯、去甲蟛蜞菊内酯和异去甲蟛蜞菊内酯等极少数化合物[17-18]被证实具有凝血活性，因此旱莲草有多少种凝血活性成分依然是未知数.本文利用薄层层析(thin layer chromatography，TLC)方法，对旱莲草全草的乙醇提取物和乙酸乙酯提取物的凝血活性成分进行了初步分析，发现旱莲草至少含有6个以上的凝血活性成分，其中3个组分凝血活性较强.1.1 材料供试旱莲草：从江西省九江市鄱阳湖边采集旱莲草全草，用自来水洗干净，去除枯枝，50 ℃烘箱中干燥后切成0.5 cm左右，再用粉碎机进行粉碎备用.供试血液：采用真空采血器采集人血(血型为A型，加入抗凝剂)，并用0.9%的生理盐水(含抗凝剂肝素钠)稀释20倍备用.制备型薄层层析(TLC)硅胶板，自制.硅胶GF254每3 g加质量分数为0.6%的羧甲基纤维素钠溶液10 mL，充分碾磨后铺在洁净的玻片上，晾干，再置于65 ℃烘箱中活化24 h备用.1.2 方法1.2.1 旱莲草的粗提物制备在室温(25 ℃左右)条件下，将旱莲草干粉末分别用乙酸乙酯和乙醇浸泡24 h后过滤，滤液经减压蒸馏，得到乙酸乙酯和乙醇浸泡的粗提物.1.2.2 利用制备型薄层层析硅胶板初步分离各取乙酸乙酯和乙醇粗提物100 mg，分别用乙酸乙酯和丙酮溶解，在制备型薄层层析硅胶板上进行划线点样，乙酸乙酯粗提物用溶剂系统v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)=4∶1展层，乙醇粗提物用溶剂系统v(丙酮)∶v(石油醚)=4∶1展层.展层结束后分别在可见光、紫外线254 nm和365 nm下观察，拍照，并将各吸收条带仔细刮下，如果两相邻条带相隔距离较远，则将两相邻条带之间的部分作为单独的一个样品.乙醇粗提物所得的各样品用1 mL 丙酮浸泡，而乙酸乙酯粗提物所刮下的条带分为2份，1份用0.5 mL乙酸乙酯浸泡，另1份用0.5 mL丙酮浸泡，浸泡液用于凝血活性检测.1.2.3 样品及组分的凝血活性检测取60 μL血样于载波片上，再加20 μL样品和血样混匀，肉眼或显微镜下观察血细胞是否出现凝聚成团的现象.以丙酮、乙酸乙酯和蒸馏水为对照组.2.1 利用制备型薄层层析方法所得到的化合物组分经TLC展层后刮板，乙酸乙酯粗提物得到了18个组分，乙醇粗提物得到了8个组分(见图1).2.2 凝血活性检测2.2.1 对照溶剂的凝血活性试验结果显示，乙酸乙酯和无菌蒸馏水滴到血液稀释液中，血细胞未出现凝聚成团的现象(见图2(A)和图2(B))，这说明乙酸乙酯和无菌蒸馏水在试验条件下没有凝血活性；在v(血样)∶v(丙酮)=3∶1的剂量下，血细胞也无凝聚成团的现象，但在v(血样)∶v(丙酮)≤1∶1的剂量下，血细胞出现明显凝聚成团的现象(见图2(C)和图2(D))，这说明在本试验条件下，低剂量丙酮没有凝聚血细胞的作用，但高剂量丙酮具有明显凝聚血细胞的活性.2.2.2 粗提物的凝血活性试验结果显示，乙醇粗提液具有较弱的凝血活性，乙酸乙酯粗提液未检测出凝血活性，但如果乙酸乙酯完全挥发后，再用丙酮溶解，样品的丙酮溶液则具有较强的凝血活性.这可能是因为乙酸乙酯和血液不能互溶，其溶解的活性成分不能充分接触血液各成分，因此难以发挥凝血活性；而丙酮和血液能够互溶，导致其溶解的活性成分能够和血液充分接触而发挥凝血活性.2.2.3 薄层层析制备的各组分的凝血活性利用乙醇粗提物得到的8个组分中，只有组分3具有较弱的凝血活性，其余7个组分均未检测到凝血活性.利用乙酸乙酯粗提物得到的18个组分，如果用乙酸乙酯作为溶剂，则均未检测到凝血活性，但是如果用丙酮作为溶剂，则检测到6个组分具有凝血活性(见表1)，其中3个组分活性较强，血液一接触样品溶液，立即引起凝聚现象，显微镜下可见大量红细胞凝聚成较大的团块，并且出现网状结构(见图3).注：++表示具有较强的凝血活性；+表示有微弱的凝血活性；-表示无凝血活性. 旱莲草的水、乙醇和甲醇粗提物均有一定的止血和促凝血功能[3，5-9]，本研究发现，旱莲草的乙酸乙酯提取物中含有多种凝血活性成分，这说明旱莲草中凝血活性成分种类丰富，值得深入系统研究.王建等[3]认为，旱莲草水煎剂的凝血功能是通过缩短凝血酶原时间和部分凝血活酶时间，升高血小板数量和纤维蛋白原含量而实现的.陈锐等[17]研究发现，在体外，蟛蜞菊内酯和异去甲蟛蜞菊内酯既可直接导致红细胞凝聚成团，也能先导致纤维蛋白原转变为纤维蛋白，再由纤维蛋白絮凝红细胞，从而发挥双重凝血作用.本研究发现，旱莲草的乙醇和乙酸乙酯提取物均能导致红细胞凝聚成团，并出现网状结构，这说明这些提取物中的凝血活性成分的凝血机理至少包括2种：(i)直接凝聚红细胞导致凝血；(ii)先将纤维蛋白原转变为纤维蛋白，再由纤维蛋白凝聚红细胞.【相关文献】[1]Dhaka N，Kothari S L.Micropropagation of Eclipta alba(L.)hassk：An important medicinal plant [J].In Vitro Cell Dev Biol：Plant，2005，41(5)：658-661.[2] Singh S K，Manoj K，Rai M K，et al.An improved and efficient micropropagation of Eclipta alba through transverse thin cell layer culture and assessment of clonal fidelity using RAPD analysis [J].Ind Crop Prod，2012，37(1)：328-333.[3] 王建，白秀珍，杨学东.墨旱莲对热盛胃出血止血作用的研究 [J].数理医药学杂志，2005，18(4)：375-376.[4] 何希瑞，樊鹏程，李茂星，等.常用止血中药及其止血机制研究进展 [J].中国实验方剂学杂志，2010，16(15)：217-221.[5] Pithayanukul P，Laovachirasuwan S，Bavovada R，et al.Anti-venom potential of butanolic extract of Eclipta prostrate against Malayan pit viper venom [J].J Ethnopharmacol，2004，90(2/3)：347-352.[6] 陈建济，施东捷，李克华，等.墨旱莲对4种蝮蛇毒引起的炎症和出血的影响 [J].蛇志，2005，17(2)：65-68.[7] 刘世旺，徐艳霞，徐霞玲，等.墨旱莲叶水提取物止血活性初探 [J].安徽农业科学，2008，36(31)：13673-13674.[8] 张金生，郭倩明.旱莲草化学成分的研究 [J].药学学报，2001，36(1)：34-37.[9] 赵越平，汤海峰，蒋永培，等.墨旱莲化学成分的研究 [J].中国中药杂志，2002，37(1)：17-19.[10] 吴疆，侯文彬，张铁军，等.墨旱莲的化学成分研究 [J].中草药，2008，39(16)：814-816.[11] 余建清，于怀东，邹国林.墨旱莲挥发油化学成分的研究 [J].中国药学杂志，2005，40(12)：895-896.[12] Liu Yanqiu，Zhan Libin，Liu Tiegang，et al.Inhibitory effect of Ecliptae herba extract and its component wedelolactone on pre-ostoclastic proliferation and differentiation [J].Ethnopharmacol，2014，157(1)：206-211.[13] Xi Fengmin，Li Chuntong，Han Jun，et al.Thiophenes，polyacetylenes and terpenes from the aerial parts of Eclipta prostrata [J].Bioorgan Med Chem，2014，22(22)：6515-6522.[14] Han Lifeng，Zhao Jing，Zhang Yi，et al.Chemical constituents from dried aerial parts of Eclipta prostrata [J].Chin Herb Med，2013，5(4)：313-316.[15] Xi Fengmin，Li Chuntong，Mi Junling，et al.Three new olean-type triterpenoid saponins from aerial parts of Eclipta prostrata(L.) [J].Nat Prod Res，2014，28(1)：35-40. [16] Tabata A，Taniguchi M，Shibano M.Ecliptamines A-D，four new guanidine alhaloids from Eclipta prostrata L. [J].Phytochem Lett，2015，11：224-228.[17] 陈锐，许群，陈昱，等.旱莲草凝血和溶血活性成分的研究 [J].天然产物研究与开发，2014，26(18)：1161-1164.[18] Kosuge T，Ishida H，Satoh T.Studies on antihemorrhagic substances in herbsclassified as hemostatics in Chinese medicine.Ⅳ.On antihemorrhagic principles in Hypericum erectum Thunb [J].Chem Pharm Bull，1985，33(1)：202-205.。

紫外分光光度法测定墨旱莲总皂苷的含量张榕文1，吴庆光2，张玲玲2，万玉华1，黄春静1( 1．霸王（广州）有限公司，广东广州510440；2．广州中医药大学，广东广州510006) 摘要：目的建立测定墨旱莲药材中总三萜皂1苷的含量的方法。

方法通过70%乙醇提取，乙醚和水饱和正丁醇萃取，得到墨旱莲中的总三萜皂苷，采用紫外分光光度法测定其含量，并分析方法的可行性。

结果以人参皂苷标准品作标准曲线，在24.12-192.96µg 范围内线性关系良好（r=0.9996）；加样回收率为99.6%。

测定四批墨旱莲干燥品中总三萜皂苷的含量分别为5.66、4.43、2.68、3.08 mg/g。

结论该测定方法简便、灵敏、准确，可用于墨旱莲总三萜皂苷的含量测定，为提高墨旱莲药材质量标准和开展墨旱莲药材中三萜皂苷的提取工艺研究提供参考。

关键词：墨旱莲；三萜皂苷；紫外分光光度法；含量测定Determination of triterpenoid saporins in herba ecliptae by UV spectrophotometryAbstract：Objective：To establish a method for determining the total triterpenoid saponin in Ecliptae Herba.Method：Dried and minced herb of Ecliptae Herba was extracted with 70% ethanol, purified by Ether and water-saturating n-butanol. The method of perchloric acid spectrophotometry was used to determine total triterpenoid saponins。

Results：Ginsenoside Re was taken as the standard to make the standard curve: Y=4.9968X+0.0028，r=0.9996, the linear range was 24.12—192.96µg. The average recovery rate was 99.6%. The contents of total triterpenoid saponins in four batch desiccative Ecliptae Herba were 5.66 mg/g,4.43 mg/g,2.68 mg/g and 3.08 mg/g. Conclusion：These methods are simple, accurate and suitable for determining the total triterpenoid saponin in Ecliptae Herba. Also it provide a reference to improve the quality standare of Ecliptae Herba.1基金项目：广州市白云区科技计划课题（2011-KZ-51）;广东省科技项目（2012A030100003）第一作者：张榕文（1979-）男，讲师，研究方向：主要中药学研究。

高效液相色谱法测定旱莲草中木犀草素和芹菜素的含量[ 09-09-03 09:52:00 ] 编辑：studa20作者：杨海英王雪梅杜刚王建平李光军高云涛【摘要】目的建立了同时测定旱莲草中木犀草素和芹菜素含量的高效液相色谱（HPLC）法。

方法采用Shim-pack CLC-ODS色谱柱（150 mm×6 mm，5μm），流动相为乙腈-2%的醋酸水溶液 (体积比为30∶70),流速1.0 ml·min-1,检测波长340 nm,柱温为40℃。

结果在上述条件下，木犀草素和芹菜素的质量浓度分别在0.003～0.24 mg·ml-1和0.002 5～0.20 mg·ml-1时与色谱峰面积之间的线性关系良好，两者的平均加标回收率分别为100.6%和102.5%。

结论该方法快速、简便、准确，可用于旱莲草中木犀草素和芹菜素的HPLC测定。

【关键词】旱莲草; 木犀草素; 芹菜素; 高效液相色谱法Abstract：ObjectiveTo establish an HPLC method for content determination of luteolin and apigenin in Herba Ecliptae. MethodsHPLC separation was carried out in a Shim-pack CLC-ODS columm (150 mm×6 mm，5μm) with acetonitrile -2% acetic acid (30∶70, v/v) as mobile phase at a flow rate of 1.0 ml·min-1. The detection wavelength was 340 nm and the column temperature was maintained at 40℃. ResultsThere were good linear relationships between the mass concentrations and the peak areas of luteolin and apigenin in the ranges of 0.003～0.24 mg·ml－1 and 0.0025～0.20 mg·ml－1, respectively. The recovery rates were 100.6% and 102.5%, respectively. ConclusionThis method is rapid, accurate and reproducible for determination of luteolin and apigenin in Herba Ecliptae.Key words：Herba Ecliptae; Luteolin; Apigenin; HPLC旱莲草 (Herba Ecliptae)别名墨旱莲、金陵草、莲子草、旱莲子，为菊科鳢肠属植物的全草, 主产于江苏、浙江、江西、湖北等地，资源丰富。

2007-10-27 16:16:002007-10-27 16:21:002007-10-27 16:26:002007-10-27 16:33:002007-10-27 16:36:002007-10-27 16:44:002007-10-27 16:53:002007-10-27 17:01:002007-10-27 17:05:00 10楼：RE:【分享】天然药物薄层色谱图集一天南星薄层层析样品制备：取本品粉末1g，以乙醇10 ml浸泡24小时，离心后吸取上清液，挥去乙醇，加0.5N盐酸水解，再加乙醚用力振摇，静置后取乙醚层，浓缩点样。

吸附剂：硅胶G(青岛海洋化工厂)，铺板后在120℃活化2小时。

展开剂：氯仿-甲醇-甲酸(9.2:0.6:0.2)，展距20 cm。

显色剂：2%间苯三酚乙醇液+浓硫酸(1:1)。

相关帖子：【分享】发现一个网站“中药质量控制论坛”有很多薄层的技术东西看啊2007-10-27 21:04:002007-10-27 21:14:002007-10-27 21:19:00 4楼：RE:【分享】天然药物薄层色谱图集二白药子薄层层析样品制备：取本品粉末4g，加0.1%硫酸80ml冷浸，放置过夜，滤过，将滤液倾入经予处理过的苯乙烯磺酸钠型树脂柱（1×22cm），调节适度的流速，样品液流完以后，将树脂倒出，用蒸馏水洗数次，滤去水分，置盘中干燥（使水分不超过60%），加入适量10%氨水碱化，静置20分钟，置沙氏提取器中加氯仿回流洗脱（至无生物碱反应），氯仿液用水洗至中性，加无水硫酸钠少量，滤过，滤液蒸干，加氯仿1ml溶解，此液代表脂溶性总生物碱，吸取0.6μl点样。

上述用氯仿回流过的2007-10-27 21:24:002007-10-27 21:32:002007-10-27 21:34:00 2007-10-27 21:40:002007-10-27 21:47:002007-10-27 21:51:00 10楼：RE:【分享】天然药物薄层色谱图集二红药子薄层层析样品制备：取生药粉末（40目）各0.2g，加甲醇5ml冷浸片刻，滤过，于水浴上将甲醇蒸干加水2ml，用5ml乙醚振摇，分取醚层，浓缩至少量，点样。

H PLC 法测定不同产地墨旱莲药材中木犀草素含量收稿日期:2010 07 08;修稿日期:2010 10 13基金项目:国家科技部"重大新药创制"专项项目(2009ZX09313 032)作者简介:陈腾飞(1986 ),男,河北邯郸人,南京中医药大学2008级硕士研究生。

*通信作者:w zh zh nj@陈腾飞1,萧伟2*,尚强2,秦建平2,王振中2(1.南京中医药大学药学院,江苏南京 210046;2.江苏康缘药业股份有限公司,江苏连云港 222001)摘要:目的 建立墨旱莲药材中木犀草素的高效液相(H PL C)含量测定方法。

方法 色谱柱:P henomenex Luna C 18柱(4.6mm 250mm,5 m),流动相:乙腈 0.1%磷酸(25 75),流速:1.0mL/min,检测波长:348nm,柱温:30 。

结果 木犀草素在57~1140ng(r =1.000)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率为96.64%,RSD 为1.87%。

结论 该方法简便、准确,可以作为墨旱莲中木犀草素含量测定的一种有效方法。

关键词:高效液相色谱法;墨旱莲;木犀草素;含量测定中图号:R284.1文献标志码:A文章编号:1000 5005(2011)02 0158 03HPLC Determination of Luteolin in Eclip ta p rostrata f rom Different Producing Area CHEN Teng f ei 1,X IAO Wei 2,SHANG Qiang 2,QIN Jian ping 2,WANG Zhen zhong 2(1.S chool of P har macy ,N anj ing Uni vers ity of Chinese M edicine,N anj ing ,210000,China ;2.J angs u K anion Phar ma ceutical CO.,L T D ,L iany ungang ,,222001,China)ABSTRAC T:OBJECTIV E T o est ablish an H PL C determination of L uteo lin in Eclip ta p r ostr ata L..METHODS Phe nomenex L una C 18column (4.6mm 250mm,5 m)w as used under the mo bile phase of acetonitr ile 0.1%pho sphor ic acid (25 75)at a flow r ate o f 1.0mL /min.T he detection wav e leng th w as 348nm and the column temper atur e w as main tained at 30 .RESULTS T here w as a go od linear r elationship at the r ang es of 57~1140ng fo r Luteo lin(r = 1.000).T he av erag e r eco very rate was 96.64%w ith r elative st andard deviation(RSD )of 1.87%.CONCLUSION T his method is accurate and reproducible for the determination of L ut eo lin in Eclip ta p r ostr ata L..KEY WORDS:H PL C;Eclip ta p r ostr ata L.;luteolin;content determ inat ion墨旱莲为菊科植物醴肠Eclip ta p r ostr ata L.的干燥地上部分,具有滋补肝肾,凉血止血的功效[1],收载于 中华人民共和国药典 一部,其质量标准控制水平相对偏低,其中主要成分黄酮类成分未能很好的控制。