土壤有效磷的测定 ppt课件

实验四 土壤中速效磷的测定一、实验目的及测定方法了解土壤中速效磷的供应状况，对于施肥有着直接的指导意义。

土壤中速效磷的测定方法很多，由于提取剂的不同所得结果也不一样。

一般情况下，石灰性土壤和中性土壤采用碳酸氢钠提取，酸性土壤采用酸性氟化铵提取。

二、实验原理中性、石灰性土壤中的速效磷，多以磷酸一钙和磷酸二钙状态存在，用0.5M 碳酸氢钠液可将其提取到溶液中，然后将待测液用钼锑抗混合显色剂在常温下进行还原使黄色的锑磷钼杂多酸还原成为磷钼兰进行比色。

三、实验仪器往返震荡机、分光光度计、具塞三角瓶、容量瓶、吸管、洗瓶。

四、实验步骤1.称取通过18目筛孔的风干土5.00克（精确到0.01克）于250ml 具塞三角瓶中，加100ml 0.5M NaHCO 3液，再加一角匙无磷活性炭，塞紧瓶塞，在25℃下振荡30分钟，取出用干燥漏斗和无磷滤纸过滤于100ml 的三角瓶中。

2.吸取滤液10ml 于50ml 量瓶中，加硫酸钼锑抗混合显色剂5ml ，利用其中多余的硫酸来中和碳酸氢钠，充分摇匀，排除二氧化碳后蒸馏水定容到刻度，再充分摇匀。

3.在室温高于15℃的条件下放置30分钟，用722型分光光度计（在波长660nm 的光）进行比色，测定光密度值。

比色时同时做空白测定。

以空白溶液的光密度为0，读出测定液的光密度为0.061，在标准曲线上查出显色液的磷浓度（mgkg -1）。

4.磷酸标准曲线的绘制：吸取含磷（P ）5mgkg -1的标准溶液0、1、2、3、4、5ml,分别加入50ml 容量瓶中，加0.5 M NaHCO 3液10ml,加水至约30ml,再加入钼锑抗显色剂5ml ，摇匀,定容到50ml ，即得0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mgkg -1磷标准系列溶液，用分光光度计进行比色，读取吸收值，在方格坐标纸上以吸收值为横坐标，磷mgkg -1数为纵坐标,绘制成标准曲线。

得到线性回归方程0081.01934.1ˆ+=x y， ∴显色液的磷浓度=1.1934*0.061+0.0081=0.0808974（mgkg -1）五、结果计算土壤中速效磷（mg/kg ）分取倍数比色液*5100*)/(kg mg ==5*5100*0.0808974 =8.08974（mg/kg ） [分取倍数=5] 吸光值（x ） 0 0.075 0.155 0.245 0.321 0.420 含磷浓度（y ） 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5。

土壤有效磷的测定土壤有效磷的测定是合理施用磷肥的依据之一。

浸提剂的选择主要根据各种土壤性质而定。

在目前使用较广的几种浸提剂中，一般认为以0.03摩尔/升NH4F—0.025摩尔/升HCL浸提剂比较适合于风化程度较高的酸性土壤；石灰性土壤通常用0.5摩尔/升NaHCO3(pH值为8.5)浸提比较满意；对于中性和酸性水稻土NH4F—HCL法和NaHCO3法都有应用。

土壤有效磷含量只是一个相对的指标，同一土壤用不同方法测得的有效磷量可以相差很多，即使用同一浸提剂，由于浸提条件如土液比、温度、时间、振荡方法在相同条件下测得的结果才有相互比较的意义。

也不能根据结果直接来计算施肥量。

因此，在报告有效磷结果时必须同时说明所用的测定方法。

1．0.5摩尔/升NaHCO3浸提—钼锑抗比色法：（1）方法要点：石灰性土壤中的磷主要以磷酸钙的形态存在，中性土壤中则磷酸钙盐、磷酸铝盐磷酸铁盐都占有一定的比例。

0.5摩尔/升NaHCO3可以抑制Ca2+的活性，使某些活性较大的磷权钙盐中的磷被浸提出来；同时，也可使活性较强的磷酸铁、磷酸铝起水解作用而浸出。

浸出液中的磷用钼锑抗比色法测定。

（2）主要仪器：往复振荡机，分光光度计。

（3）试剂：A．0.5摩尔/升NaHCO3(pH值为8.5)浸提剂。

42.0克NaHCO3（三级）溶于约800毫升水中，稀释至约990毫升，用4摩尔/升NaOH溶液调节pH值至8.5（用pH计测定），最后稀释到1升，置于塑料瓶中，此溶液随配随用，不宜久存。

B．无磷活性炭。

将活性炭粉先用1:1HCL浸泡过夜，然后在平板漏斗上抽气过滤，用水洗到无Cl-为止。

再用0.5摩尔/升NaHCO3溶液浸泡过夜，在平板漏斗上抽气过滤，用水洗尽NaHCO3，最后检查到无磷为止，烘干备用。

其余试剂同全磷分析中酸溶—钼锑抗比色法。

（4）操作步骤：称取通过1毫米筛孔的风干土壤样品5.00克；置于250毫升三角瓶中，加入一小匙无磷活性炭粉和0.5摩尔/升NaHCO3浸提剂100毫升，在20~25。

1土壤全磷的测定(硫酸一高氯酸消煮法)方法原理在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物与高沸点的硫酸和强氧化剂高氯酸作用，使之完全分解，全部转化为正磷酸盐而进入溶液，然后用钼锑抗比色法测定。

操作步骤1.在分析天平上准确称取通过100目筛(孔径为0.25mm)的土壤样品1g(精确到0.0001)置于50ml三角瓶中，以少量水湿润，并加入浓H2SO48ml，摇动后(最好放置过夜)再加入70—72%的高氯酸(HClO4)10滴摇匀。

2.于瓶口上放一小漏斗，置于电炉上加热消煮至瓶内溶液开始转白后，继续消煮20分钟，全部消煮时间约为45—60分钟。

3.将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml容量瓶中，冲冼时用水应少量多次。

轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，用水定容，用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100ml三角瓶中。

同时做空白试验。

4.吸取滤液2—10ml于50ml容量瓶中，用水稀释至30ml，加二硝基酚指示剂2滴，用稀氢氧化钠(NaOH)溶液和稀硫酸(H2SO4)溶液调节pH至溶液刚呈微黄色。

5.加入钼锑抗显色剂5ml，摇匀，用水定容至刻度。

6.在室温高于15℃的条件下放置30分钟后，在分光光度计上以700nm的波长比色，以空白试验溶液为参比液调零点，读取吸收值，在工作曲线上查出显色液的P—mg/L数。

7.工作曲线的绘制。

分别吸取5mg/L标准溶液0，1，2，3，4，5，6ml于50ml 容量瓶中，加水稀释至约30ml，加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容。

即得0，,,,,,,mg/LP标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值。

在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标，Pmg/L数为横坐标，绘制成工作曲线。

结果计算全P %=显色液mg/L×显色液体积×分取倍数／(W×106)×100式中：显色液Pmg/L—从工作曲线上查得的Pmg/L；显色液体积—本操作中为50ml；分取倍数—消煮溶液定容体积/吸取消煮溶液体积；106—将ug换算成gW—土样重(g)。

土壤速效磷测定—碳酸氢钠浸提钼锑抗比色法【原理】石灰性土壤和中性土壤中的速效磷，多以磷酸一钙和磷酸二钙的状态存在，可用0.5M碳酸氢钠提取到溶液中；酸性土壤中的活性磷多以磷酸铁和磷酸铝状态存在，0.5M 碳酸氢钠也可以提取磷酸铁和磷酸铝表面的磷。

待测液中的磷酸与钼锑抗混合显色剂作用，在一定酸度和三价锑离子的存在下，磷酸和钼酸铵形成黄色锑磷钼混合杂多酸，其组成比为磷（P）∶锑（Sb）∶钼（Mo）=1∶2∶12。

锑磷钼混合杂多酸在常温下，易为抗坏血酸还原为磷钼蓝，使的显色速度加快。

（测定磷的范围0.06～0.44mg/L）。

【试剂】①0.5mol〃L-1NaHCO3溶液：准确称取42g NaHCO3溶于800ml水中，冷却后以0.5mol〃L-1 NaOH溶液调节pH＝8.5，定容至1L；② 3.25mol〃L-1 H2SO4钼锑贮存液：蒸馏水400ml于1000ml烧杯，缓缓加入208.3ml浓硫酸，搅拌，冷却；另外称取钼酸铵20g，在50℃水浴中溶解，然后冷却；硫酸溶液缓缓加入到钼酸铵溶液中，不断搅拌，再加100ml 0.5％的酒石酸锑钾溶液，冷却定容，避光保存；③钼锑抗混合显色剂：于100ml钼锑贮存液中，加入1.5g左旋抗坏血酸，摇匀，避光，现配现用；④P标准溶液配制：45℃烘干4－8h的分析纯磷酸二氢钾0.2197g，定容至1000ml，摇匀，此时P浓度为50 mg/L；准确吸取10ml，定容到100ml，为5 mg/L磷标准液（不宜长时间保存）；⑤0.5mol〃L-1 NaOH溶液：20g NaOH定容到1000ml。

【步骤】1. 土壤浸提准确称取2.50g样品于150ml三角瓶中→加50ml 0.5M碳酸氢钠→封口，震荡30min(25℃恒温水浴震荡)→后过滤到三角瓶中2. 磷含量测定10ml滤液于50ml容量瓶（含量过高时吸取5ml或更少，用0.5M碳酸氢钠补足到10ml）→缓慢沿瓶壁加入5ml混合显色剂，充分摇匀后排除二氧化碳气体，定容，摇匀→30min后在660nm波长下比色（该颜色可以稳定24h）→测得吸光值后根据标准曲线计算速效磷含量。

土壤有效磷的测定国家标准《土壤质量土壤有效磷的测定电感耦合等离子体原子发射光谱（ICP-AES）法》（征求意见稿）编制说明一、目的意义土壤有效磷是土壤是否缺磷的标志，是评价土壤肥力的重要指标之一。

土壤中有效磷的测定方法很多，通常的方法及现行的国家标准122997，行业标准NY/T 1121.7是按土壤的酸、碱性用不同的浸提剂提取后，用钼锑抗比色法测定。

此方法原理，需配制的试剂多，且操作过程中钼锑抗显色剂的加入量要较准确，特别是钼酸铵量的多少对显色的深浅和稳定性有大的影响。

标准液待测液的比色酸度要基本一致。

不同温度、不同酸度下吸光值有很大差别，故显色的酸度、温度要控制好，控制不当甚至有蓝色沉淀产生导致实验失败等现象。

电感耦合等离子体原子发射光谱仪，作为新一代的先进分析仪器，用等离子体（ICP）作为离子源，通过检测器检测产生的离子。

与传统无机分析技术相比，提供了较低的检出限和宽的动态性线范围，精密度高、速度快、模式灵活多样等特点。

对于土壤中的有效磷只需将样品浸提液上机即可。

避免了复杂的显色、比色及人为条件控制过程带来的不稳定因素。

“土壤质量土壤有效磷的测定—电感耦合等离子体原子发射光谱（ICP-AES）法”将是对相关标准的一个补充和完善，提供了更完善、科学、快捷的方法。

为土壤有效磷的测定及快速评价土壤是否缺磷有着十分重要的意义。

二、任务来源2011 年12 月30 日国家标准化管理委员会下发了《关于下达2011 年第三批国家标准制修订计划的通知》（国标委综合[2011] 82 号），其中《土壤质量土壤中有效磷的测定电感耦合等离子体原子发射光谱(ICP-AES)法》获得批准成为2011年第三批国家标准制订计划项目，计划编号20111829-T-326，主管部门为农业部，技术归口单位为全国土壤质量标准化技术委员会，由中国热带农业科学院分析测试中心承担起草工作。

三、编制过程标准编制工作主要分三个阶段：第一阶段：前期预研长期以来大批量的土壤样品中有效磷的检测任务，一直采用目前现行的国标方法（比色法），操作过程繁琐冗长，费时费力，批量检测较为困难。

土壤中有效磷的测定-NY/T 1121.7-2014A碳酸氢钠提取一一铝锑抗比色法适用于石灰性、中性土壤PHN6.5方法提要由于浸提液（0.5MNaHC03）提高了CO32-离子的活性，使其与Ca2+形成CaCO3沉淀，从而降低了Ca2+的活性，使一定量活性较大的Ca-P被浸出，同时也可使比较活性的Fe—P和AI-P通过水解作用而浸出（由于碳酸盐的碱溶液，也降低了铝和铁离子的活性，有利于磷酸铝和磷酸铁的提取。

此外，NaHC03碱溶液中存在着0H-、HC03-、C032-等阴离子均能置换吸附态的磷酸盐H2P04-。

），从而增加了碳酸氢钠提取中性和石灰性土壤速效磷的能力。

由于浸出液中Ca、Fe、Al浓度较低，不会产生磷的再沉淀；浸出液中的磷可用铝锑抗比色法定量测定。

主要仪器设备1千分之一电子天平；2恒温水浴振荡器；3150ml塑料瓶和50ml塑料小烧杯；4锥形瓶（或比色管）：50mL或25mL比色管；5紫外分光光度计；试剂1氢氧化钠：10%（m/V）溶液；（调节浸提剂pH至8.5）2 碳酸氢钠浸提剂［c（NaHC03）=0.50mol ・LT,pH=8.5］称取 42.0gNaHC03 溶于950mL 水中，用10%氢氧化钠溶液调节pH至8.5（用酸度计测定），用水稀释至1L。

贮存于塑料瓶中备用。

如贮存期超过20d,使用时须重新校正pH。

3酒石酸锑钾［K（SbO）C4H4O6・1/2H2O］：0.30%（m/V）溶液；（提供三价锑离子，作用是生成的三元杂多酸比磷铝酸铵具有更强的吸光作用；同时,加快抗坏血酸的还原反应.）4抗坏血酸（C6H8O6左旋，比旋光度+21-22°,分析纯）（还原剂，抗坏血酸主要优点是生成的颜色稳定，干扰离子的影响较小，适用范围较广，但显色慢，需要加温。

如果溶液中有一定的三价锑存在时，则大大加快了抗坏血酸的还原反应，在室温下也能显色。

5铝锑贮备液：称取10.0g铝酸铵［（NH4）6Mo7O24-4H2O］溶于300mL约60℃水中，冷却。

第五章土壤和植物中磷的测定主要包括：第一节土壤全磷的测定一、概述土壤全磷（P）量是指土壤中各种形态磷素的总和。

我国土壤全磷的含量（以P，g·kg-1表示）从第二次国各地土壤普查资料来看，大致在0.44～0.85 g·kg-1范围内,最高可达1.8 g·kg-1, 低的只有0.17 g·kg-1。

南方酸性土壤全磷含量一般低于0.56g·kg-1；北方石灰性土壤全磷含量则较高。

土壤全磷含量的高低，受土壤母质、成土作用和耕作施肥的影响很大。

一般而言，基性火成岩的风化母质含磷多于酸性火成岩的风化母质。

我国黄土母质全磷含量比较高，一般在0.57g·kg-1～0.70g·kg-1之间。

另外土壤中磷的含量与土壤质地和有机质含量也有关系。

粘土含磷多于砂性土，有机质丰富的土壤含磷亦较多。

磷在土壤剖面中的分布，耕作层含磷量一般高于底土层。

大量资料的统计结果表明，我国不同地带的气候区的土壤其速效磷含量与全磷含量呈正相关的趋势。

在全磷含量很低的情况下，土壤中有效磷的供应也常感不足，但是全磷含量较高的土壤，却不一定说明它已有足够的有效磷供应当季作物生长的需要，因为土壤中磷大部分成难溶性化合物存在。

例如我国大面积发育于黄土性母质的石灰性土壤，全磷含量均在0.57～0.79g·kg-1之间，高的在0.87g·kg-1以上。

但由于土壤中大量游离碳酸钙的存在，大部分磷成为难溶性的磷酸钙盐，能被作物吸收利用的有并效磷含量很低，施用磷肥有明显的增产效果。

因此，从作物营养和施肥的角度看，除全磷分析外，特别要测定土壤中有效磷含量，这样才能比较全面地说明土壤磷素肥力的供应状况。

分类土壤中磷可以分为有机磷和无机磷两大类。

矿质土壤以无机磷为主，有机磷约占全磷的20%～50%。

土壤有机磷是一个很复杂的问题，许多组成和结构还不清楚，大部分有机磷，以高分子形态存在，有效性不高，这一直是土壤学中一个重要的研究课题。

土壤速效磷的测定(0.5M碳酸氢钠法)（一）方法原理：用PH8.5的0.5M碳酸氢钠溶液，于温度25℃左右提取分离土壤速效磷。

取一定量的提取液,控制显色中的硫酸的浓度为0.4N，钼酸铵的浓度为0.1%，以氯化亚锡为还原剂，使形成“磷钼兰”溶液。

用比色计测定其兰色强度，然后于标准曲线上查找其相应的浓度，从而计算土壤中的速效磷的含量。

（二）试剂配制：（1）0.5MNaHCO3：称取化学纯NaHCO3 420.0克放入血清瓶中。

加8000ml水溶解后，定容10000ml，摇匀，一般情况下，这样配制的溶液可得PH8.5。

应用酚酞指示剂检查：取溶解后的溶液2ml于试管中，加入1滴酚酞应为微红色，否则用0.5N NaOH逐滴加入，边加边摇动血清瓶。

调节至PH8.5，在定容10000ml，摇匀。

（2）硫酸—钼酸铵试剂：a.贮存液：称化学纯钼酸铵50.0克于800ml水中，微热溶解。

另取化学纯浓硫酸（比重1.84）903ml，分次徐徐加入盛有2000ml水的3000ml三角瓶，并不断用玻棒搅拌，冷却后备用。

将钼酸铵溶液徐徐加入硫酸溶液中，并不断搅拌，稀至5000ml（用容量瓶稀释多次定容），摇匀，此溶液贮于紧塞的细口瓶中，放在暗处保存，其钼酸铵浓度为1%，硫酸浓度为6.5N。

b.使用液：使用时视其用量，将贮存液准确稀释5倍（即1份体积贮存液加4份体积水），摇匀，即可使用。

（3）10%HCL溶液：取分析纯浓盐酸（比重1.19）239ml，加入500ml水中，以水稀释定容至1000ml，摇勺。

（4）氯化亚锡溶液：称取1.00克氯化亚锡（二级）溶于40ml10%HCL中。

此试剂每天新鲜配制。

（5）标准磷溶液：准确称取经45℃烘干6小时分析纯KH2PO4 4.3936克于小烧杯中，用少量水溶解后，将溶液毫无损失地溶解洗入1000ml量瓶中，加入2ml 浓硫酸，稀释至刻度，摇匀，即为1000PPm/ml标准磷溶液。

再准确吸取此液25.00ml于500ml量瓶中，用0.5M NaHCO3稀释至刻度，摇匀，即为50PPm磷的标准溶液。