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罗氏(Roche)公司Tunel试剂盒操作说明书一、原理：TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。
其原理是荧光素（fluorescein）标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下，可以连接到凋亡细胞中断裂DNA的3’-OH末端，并与连接辣根过氧化酶（HRP，horse-radish peroxidase）的荧光素抗体特异性结合，后者又与HRP底物二氨基联苯胺（DAB）反应产生很强的颜色反应（呈深棕色），特异准确地定位正在凋亡的细胞，因而在光学显微镜下即可观察凋亡细胞；由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA断裂，因而没有3‘-OH形成，很少能够被染色。
本试剂盒适用于组织样本（石蜡包埋、冰冻和超薄切片）和细胞样本（细胞涂片）在单细胞水平上的凋亡原位检测。
还可应用于抗肿瘤药的药效评价，以及通过双色法确定细胞死亡类型和分化阶段。
二、器材与试剂器材：光学显微镜及其成像系统、小型染色缸、湿盒（塑料饭盒与纱布）、塑料盖玻片或封口膜、吸管、各种规格的加样器及枪头等；试剂：试剂盒含TdT 10×、荧光素标记的dUTP 1×、标记荧光素抗体的HR P；自备试剂：PBS、双蒸水、二甲苯、梯度乙醇（100、95、90、80、70%）、DAB工作液（临用前配制，5 μl 20×DAB+1μL 30%H2O2+94 μl PBS）、Proteinase K工作液（10-20 μg/ml in 10 mM Tris/HCl，pH 7.4-8）或细胞通透液（0.1% Triton X-100 in 0.1% sodium citrate，临用前配制）、苏木素或甲基绿、DNase 1（3000 U/ml– 3 U/ml in 50 mM Tris-HCl，pH 7. 5，10 mM MgCl2，1 mg/ml BSA）等。
罗氏(Roche)公司Tunel试剂盒操作说明书(In situ cell death detection kit-POD法)一、原理：TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。
其原理是荧光素（fluorescein）标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下，可以连接到凋亡细胞中断裂DNA的3’-OH末端，并与连接辣根过氧化酶（HRP，horse-radish peroxidase）的荧光素抗体特异性结合，后者又与HRP底物二氨基联苯胺（DAB）反应产生很强的颜色反应（呈深棕色），特异准确地定位正在凋亡的细胞，因而在光学显微镜下即可观察凋亡细胞；由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA断裂，因而没有3‘-OH形成，很少能够被染色。
本试剂盒适用于组织样本（石蜡包埋、冰冻和超薄切片）和细胞样本（细胞涂片）在单细胞水平上的凋亡原位检测。
还可应用于抗肿瘤药的药效评价，以及通过双色法确定细胞死亡类型和分化阶段。
二、器材与试剂器材：光学显微镜及其成像系统、小型染色缸、湿盒（塑料饭盒与纱布）、塑料盖玻片或封口膜、吸管、各种规格的加样器及枪头等；试剂：试剂盒含：1号（蓝盖）Enzyme Solution 酶溶液：TdT 10×、2号（紫盖）Label Solution标记液：荧光素标记的dUTP 1×、3号（棕瓶）Converter-POD:标记荧光素抗体的HRP；自备试剂：PBS、双蒸水、二甲苯、梯度乙醇（100、95、90、80、70%）、DAB工作液（临用前配制，5 μl 20×DAB+1μL 30%H2O2+94 μl PBS）、Proteinase K工作液（10-20 μg/ml in 10 mM Tris/HCl，pH 7.4-8）或细胞通透液（0.1% Triton X-100 溶于0.1% 柠檬酸钠，临用前配制）、苏木素或甲基绿、DNase 1（3000 U/ml–3 U/ml in 50 mM Tris-HCl，pH 7.5，10 mM MgCl2，1 mg/ml BSA）等。
Sonoclot凝血及血小板功能分析仪的原理及应用Sonoclot凝血及血小板功能分析仪是一种广泛应用于临床医学领域的仪器，主要用于评估患者的凝血功能和血小板功能。
它通过测量形成血凝块的时间和强度，以及血小板在凝血过程中的聚集状态，为医生提供了重要的诊断和治疗依据。
本文将介绍Sonoclot凝血及血小板功能分析仪的工作原理，并探讨其在临床应用中的意义。
Sonoclot凝血及血小板功能分析仪采用了声纳技术（Sonoclot技术），其原理基于血液在凝血过程中的变化。
当血液开始凝固时，凝血酶会激活凝血级联反应，引发纤维蛋白原转变为纤维蛋白，形成一个稳定的血凝块。
Sonoclot仪器通过测量血凝块形成的弹性来评估凝血功能。
具体来说，仪器会将血液样本放置在一个含有铝离子的杯子中，并在样本中引入钙离子激活凝血级联反应。
同时，仪器还会通过探头向样本中传递声纳波，以测量血凝块的变形。
Sonoclot凝血及血小板功能分析仪还可以评估血小板功能。
在凝血过程中，血小板在血管受损处聚集形成血小板血栓，从而帮助止血。
Sonoclot仪器可以通过测量血小板在凝血过程中的聚集状态来评估血小板功能。
在仪器中的探头会向样本中传递声纳波，同时感测血小板聚集所产生的声纳信号。
Sonoclot凝血及血小板功能分析仪在临床应用中具有广泛的意义。
首先，它可以帮助医生评估患者的凝血功能，以便及时采取措施进行干预。
例如，在手术前检测患者的凝血功能，可以预测手术过程中可能发生的出血风险，从而采取相应的处理措施。
其次，Sonoclot仪器可以用于监测患者接受抗凝治疗过程中的凝血功能。
抗凝治疗常用于心血管疾病、血栓疾病等病症的治疗，但过量使用会导致出血风险，而不足则可能引起血栓形成。
Sonoclot仪器可以帮助医生确保患者在接受抗凝治疗时保持适当的凝血状态。
此外，Sonoclot仪器在评估血小板功能方面也具有重要意义。
血小板功能异常可能会导致出血或血栓形成等病理现象，因此准确评估血小板功能对于诊断和治疗这些疾病都至关重要。
未成年人血浆PT、INR、APTT、FIB参考区间的初步建立迟林，李爽，尚欣荣，刘向祎(首都医科大学附属北京同仁医院检验科，北京100730)摘要：目的建立适用于SYSMEX CS5100全自动血凝分析仪及Siemens公司凝血酶原时间(PT)、国际标准化比值(NR)、活化部分凝血酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)试剂的未成年人参考区间.方法收集2018年4月至2018年9月就诊于同仁医院眼科未成年患者2218例，成年患者460例，使用SYSMEX CS-5100全自动血凝分析仪及Siemens公司的相关凝血试剂进行检测，初步建立本实验室未成年人参考区间.结果未成年人群不同性别组间凝血4项检测结果差异无统计学意义(P>0.75).PT7INR在未成年人群各组间差异无统计学意义，参考区间为PT10.91〜13.37s,INR0.90〜1.13；APTT(FSL)在婴儿期、幼儿期及学龄前期及学龄期四组间检测结果差异无统计学意义(P>0.75),即12岁以下未成年人参考区间为24.30〜40.48s,青春期参考区间为22.40〜36.74s;FI B参考区间婴儿组1.72〜3.42g/L,幼儿组1.21〜3.43g/L,其他年龄组间检测结果差异无统计学意义(P>0.05),即3岁以上未成年人1.35〜3.54g/L.结论初步建立本实验室凝血酶原时间(PT)、国际标准化比值(NR)、活化部分凝血酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)的未成年人参考区间，为临床提供可靠诊疗依据.关键词：凝血酶原时间；国际标准化比值；活化部分凝血酶时间；纤维蛋白原；参考区间；未成年人；不确定度中图分类号：R446.1文献标识码:AThe Preliminary Establishment of Plasma PT,INR,APTT,andFIB Reference Values for Minor PopulationCHI Lin,LI Shuang,SHANG Xinrong,LIU Xiangyi(Department of Clinical Laboratory,Beijing Tongren Hospital Affiliated to Capital Medical University,Beijng100730,China)Abstract：Objective To establish a reference range for Sysmex cs-5100automatic blood coagulation analyzer,including prothrombin time(PT),international normalized ratio(INR),activated partial thromboplastin time(APTT)and fibrinogen(FIB)reagents of Siemens company.M ethods2218cases ofjuvenile patients and460cases of adult patientsin Tongren Hospitalfrom April,2018to September,2018were co l ected and detected by Sysmex cs-5100automatic blood coagulation analyzer and relevantcoagulationreagentsofSiemenscompany,andthereferenceintervalofminorpopulationinour laboratory was then initia l y established Results There wasnosignificantdifferenceincoagulation test results among different gender groups of minors(P>0.05).The reference interval of PT was10.91—13.37seconds,and that of INR was0.90-1.13.There was no significant difference in the results of APTT (FSL)amonginfancy,infancy,preschoolandschoolagegroups(P>005)Thereferenceinterval ofchildrenunder12yearsoldwas2430-4048seconds,thatofpubertywas2240-364seconds．FIB referencerangewas102—342g/Lintheinfantgroupand121—343secondsinthechildrengroup．Therewasnosignificantdifferenceamongotheragegroups(P>005),whichwas135—354g/lfor minorsover3yearsold Concluson Thereferenceintervalsofprothrombintime(PT),international normalizedratio(INR),activatedpartialthromboplastintime(APTT)andfibrinogen(FIB)inour laboratoryarepreliminarilyestablishedtoprovideareliablebasisforclinicaldiagnosisandtreatment．Key words:PT；INR；APTT；FIB；Reference values；Minor uncertaintyDOI：10.11748/bjmy.isn.l006—1703.2021.02.007收稿日期：2020-09-25；修回日期：2020-11-25基金项目：北京市卫生系统高层次卫生技术人才（编号=2015-3-104.）通讯作者：刘向祎.血液凝固是由一系列凝血因子参与的复杂酶促反应和分子聚合过程，分为三个阶段和两个途径. 凝血酶原时间（PT ）、国际标准化比值（INR ）、活化部分凝血活酶时间（APTT ）、纤维蛋白原含量（FIB ）,是反映内、外源凝血及共同凝血途径的主要 筛选试验，也是临床上常用的术前检查项目.同一检测项目由于检测方法不同，各试剂生产商提供的 试剂成分不同，使得这些项目的参考区间在临床使用上不通用.另外，儿童时期的凝血系统是不成熟 的、不断发育的，与成人凝血功能有差异，因此针对不同生理阶段、不同检测方法、不同试剂应建立不同 参考区.本研究通过回顾性分析2 218例未成年人 血浆PT 、INR 、APTT 、FIB 水平，初步建立适用于本 实验室的未成年人参考区间,以便于临床诊疗,防止误诊[1-2].2 未成年人群PT 、INR 、APTT 、FIB 检测结果未成年人 PT 、INR 、APTT 、FIB 检测结果与成 年对照组间差异有统计学意义（P <0.01）；按照儿科 学年龄分组合并后，各组间数据比较显示，PT 、INR 在未成年人群各组间差异无统计学意义（P >0.05）； APTT 在婴儿组、幼儿组、学龄前组及学龄组4组间材料和方法1 研究对象1.1 未成年人组 收集2018年4月至2018年 9月就诊于同仁医院眼科未成年患者2 218例，经过儿科会诊排除炎症感染、肝肾疾病、心血管疾病、血液系统疾病、传染病、恶性肿瘤及遗传病家族史，近 期无服药史，女性非月经期.其中男1116例，女1102例.根据儿科学年龄分组⑷，分为婴儿组（0〜1岁，246例，男125例，女121例）、幼儿组（1〜3岁， 474例，男225例，女249例）、学龄前组（3〜6岁，619例，男中302例，女317例）、学龄组（7〜12岁， 423例，男233例，女190例）、青春期组（13〜18岁, 456例，男231例，女225例）.1.2成人对照组同期就诊于同仁医院眼科成人460例（19〜60岁，男237例，女223例），经内科会诊，纳入与排除标准与未成年组相同.进入此研究所有受检者均知情同意.2 方法2.1 标本采集所有患者采集空腹静脉血1.8mL 置于109mmol/L 枸椽酸钠真空抗凝采血管内，血液与抗凝剂的比例为1：9,混匀.1 500 g 离心15min,分离乏血小板血浆，4h 内完成检测⑶.2.2 检测方法 使用Sysmex CS-5100全自动血凝仪进行检测,配套试剂由德国西门子公司提供. PT 检测试剂为Thromborel S, APTT 检测试剂为 Date Actin FSL Act.ivet.ecl Reagent, FIB 检测试剂为 Thrombin 。
inr检测原理和意义
INR（International Normalized Ratio）是一种常用的凝血功能检测指标，用于评估患者的凝血状态。
它主要应用于监测和调整口服抗凝治疗（如华法林）的剂量。
INR检测原理：
INR检测是通过比较患者的凝血时间与正常人群的凝血时间来确定的。
具体步骤如下：
1. 首先，将患者的血液与一种含有活化的凝血因子的试剂混合。
2. 然后，记录血液凝固的时间，即凝血时间。
3. 接下来，将患者的凝血时间与正常人群的平均凝血时间进行比较。
4. 最后，根据公式计算INR值：INR = （患者凝血时间/正常凝血时间）^ ISI （国际标准化指数）。
INR检测意义：
INR的主要意义在于判断患者的凝血功能状态，并且对抗凝治疗进行监测和调整。
以下是INR检测的一些具体意义：
1. 口服抗凝治疗监测：INR是调整口服抗凝药物（如华法林）剂量的重要指标。
通过监测INR值，可以评估患者的凝血状态是否达到治疗目标，并调整药物剂量以维持合适的抗凝效果。
2. 血栓风险评估：INR还可以用于评估患者的血栓形成风险。
较高的INR值可能表示患者存在出血风险，而较低的INR值则可能增加血栓形成的风险。
3. 手术前后管理：在某些手术中，需要调整患者的凝血功能以减少出血风险。
INR检测可以帮助医生评估患者的凝血状态，并制定相应的治疗方案。
总之，INR检测的原理和意义是通过比较患者的凝血时间与正常人群的凝血时间来评估患者的凝血功能状态，为口服抗凝治疗的监测和调整提供了重要的指导依据。
临床INR值含义、计算、临床意义、监测及监测频率INR 是临床上常用的凝血功能检测指标之一，是国际标准化比值（international normalized ratio）的缩写。
我们检验人对INR 肯定不陌生，但是对于INR 的具体含义、为什么要计算INR、如何计算的、INR 有何临床价值等问题不是十分清楚。
这篇文章带大家详细了解一下INR 的来龙去脉。
INR的含义INR 是标准化的凝血酶原时间（PT），通过校正凝血活酶试剂差异对凝血酶原时间测值的影响，采用标准化报告的方式使不同实验室和不同试剂测定的PT 具有可比性，便于统一用药标准。
计算INR临床上检测PT 以了解受检者外源性凝血系统的功能，PT 检测试剂主要是凝血活酶，凝血活酶主要来源于人或动物组织中的提取物，其对抗凝疗法所致的凝血因子降低具有较好的敏感性，而以人脑提取物制成的PT 凝血活酶试剂最为敏感。
在实际检测过程中，同一份标本在不同的实验室，以秒为单位的PT 测定会因为使用的凝血活酶试剂不同、试剂批号和仪器的不同而有各异的参考范围，使得不同仪器和不同试剂测定的PT 不具有可比性。
为减小误差，同时使PT 结果得到统一，最初Poller 等人通过建立曼彻斯特比较试剂作为参考试剂，而各地实验室则通过采用各自凝血活酶试剂测出PT 结果再与参考试剂进行矫正，从而使结果得到统一，减少误差。
直到1977 年，世界卫生组织（WHO）提供了第一批人脑凝血活酶作为国际参考试剂，此试剂的产生为世界各地PT 试验提供了统一的标准。
除此之外，不同地区，PT 试验的测定方法及报告方式亦有所不同。
为了使PT 的报告方式等得到统一及标准化，WHO 于1985 年提出了PT 的标准化的报告方式，将其命名为国际标准化比率（INR），并明文规定，在PT 测定时必须报INR 值。
计算 INR？INR 是患者凝血酶原时间与正常对照凝血酶原时间之比的ISI 次方，用公式表示为：由公式可以看出，INR 主要由PT 比值和ISI 决定。
现场即时监测INR的中国专家共识罗氏家用凝血检测仪(POCT)Author: Prof.xu主要内容现场即时监测INR的中国专家共识家用凝血检测仪(POCT)的应用血凝仪用于抗凝治疗及患者自我管理的有效性、便捷性康固全凝血检测仪CoaguChek XS PT/INR方便性：•手掌式仪器，小巧轻便、简单易用•机外加样（顶/侧）•采用一滴毛细血管全血和静脉全血检测，让患者免受静脉穿刺之苦•一分钟出结果，即可掌控华法林疗效•省去患者奔波于家庭-医院的舟车劳顿康固全凝血检测仪CoaguChek XS PT/INR经济性：•仪器：＞10000，对于多数中国家庭，略显偏高。
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•文章作者：安贞医院心内科李红等康固全凝血检测仪CoaguChek XS PT/INR准确性国内数据3北京解放军总医院：•与大型仪器Stago比对：康固全方便快捷，对患者损伤小，能够提供可靠数据。
•文章作者：解放军总医院南楼心血管科申雪琴张丽康固全凝血检测仪CoaguChek XS PT/INR准确性国内数据4上海中山医院：•与大型仪器Sysmex CA6000比对，结果表明：检验结果具有相当良好的一致性，康固全能够安全有效地应用于房颤患者长期抗凝治疗的自我监测。
