2013执业兽医资格考试微生物学革兰氏阴性需氧杆菌

• 该属的另二种成员，即绿脓杆菌和伪鼻 疽杆菌对动物也有一定的致病性，产生 的病变极似鼻疽，但较少见。
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一、形态特征
• 鼻疽杆菌为 细直或微弯、两端钝圆 的 G － 杆菌， 无芽胞、无鞭毛、无荚膜， 幼龄培养菌形态比 较整齐，老龄菌常表现多形。
碱性美兰染色时 ，
此菌尤其是老龄菌体，可 见有着色不均的浓淡相间 的串珠状颗粒 （β羟基丁
支气管败血波氏菌主要引起动物的疾病，在兽医 中比较重要； 百日咳波氏菌、副百日咳波氏菌主要对氏菌。
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一、形态特征
• 支气管败血波氏菌为G－细小球杆菌，具有
周身鞭毛能运动，无芽胞，表面有微荚膜
存在，单在或成双，很少成链。
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二、培养特性
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四、诊断
• 诊断本病可结合上述细菌的特点进行微 生物学诊断。
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菌落特性：
1) 在肝汤琼脂或胰蛋白胨琼脂上，培养4天后，呈细 小、柔软、湿润、圆形隆起、透明和闪光的露滴状 菌 落 ， 菌 落 大 小 不 等 ， 小 的 0.05~0.1mm ， 大 的 0.5~10.mm。
2) 在血琼脂平板上产生灰白色、隆起的细小圆形菌落， 无溶血性。 3) 本属细菌不能在麦康凯上生长。 4) 必须注意的是：布氏杆菌常易发生光滑型→粗糙型
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• 其中1、2、3三个种危害最大， 羊种 天然感
染羊、猪种天然干扰猪、牛种感染牛，但1、 2、3可相互感染，同时对人、马等动物都能 致病，人类对布氏杆菌的感染以羊种最多见， 且毒力最强，猪种次之，牛种最弱；人感染 后表现波浪热、高烧、疲劳等。 • 布氏杆菌病原体可通过胎盘、羊水、流产胎 儿、乳汁、阴道分泌物、精液等排出体外， 通过皮肤伤口、消化道、呼吸道、眼结膜、 交配等途径感染。 16
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三、致病性
• 本菌不产生外毒素，仅有内毒素（及其耐热）。
• 内毒素对健康动物毒性不强，但 注射 于已经感染鼻疽 杆菌的动物，可引起剧烈的病灶激发反应。
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四、微生物学诊断
• 对于鼻疽杆菌的诊断有： – 细菌学检查 – 血清学检查 – 变态反应检查法等
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1、细菌学检查：
主要是形态学观察、分离培养、生化鉴定、动 物试验等； 动物试验不仅能用于污染病料中鼻疽杆菌的分 离，而且可作为此菌鉴别的一个参考依据，能 用作本试验的动物有猫、雄性豚鼠、仓鼠等， 但以豚鼠多用。病料或肉汤培养物腹腔或皮下 接种雄性豚鼠，在接种后约4~5天可见豚鼠阴 囊红肿、睾丸肿胀，继而化脓破溃，一般在 2~3周左右死亡，此反应称为Straus反应。
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第三节 波氏菌属（Bordetella）
本菌属有3个正式种： 1. 支气管败血波氏菌（B. bronchiseptica） 2. 百日咳波氏菌（B. pertussis） 3. 副百日咳波氏菌（B. parapertussis） 另外还有一个不定位的“ 支气管败血样波氏菌 ” （B. bronchiseptica-like）——现定名为“禽波氏 菌”（B. avium）。
酸盐）， 或两端浓染 ， 此特点有一定的诊断价值。
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二、培养特性
• 本菌为 需氧 菌，最适生长温度为 37℃ ，最适生 长pH6.4~6.8 ；在普通培养基上能生长，但生长 缓慢；在含有3~5%的 甘油 或 血液 、 血清 、 葡 萄糖的培养基中生长更好。
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（1）在甘油琼脂培养基上37℃24小时的菌落呈细小、光滑、 圆形、湿润、粘稠的灰白色渐至灰黄色菌落；
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六、微生物学诊断
• 检定程序如下：
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1. 用于本菌血清学检查的方法很多，通常有凝 集试验、补体结合试验、荧光抗体染色等。 例如：对于微生物诊断中分离的细菌可用已 知的诊断血清，通过凝集试验来检测；在临 床上可已知的诊断抗原通过凝集试验检测家 畜的血清中是否存在有布氏杆菌的抗体。 2. 临床上还可用变态反应协助诊断。
1、马尔他布氏杆菌(Br. melitensis)，也称为
羊种；
2、猪布氏杆菌(Br. suis)； 3、流产布氏杆菌( Br. abortus ) ，也称为牛
种；
4、沙林鼠布氏杆菌( Br. meotomae ) ； 5、绵羊布氏杆菌( Br. ovis ) ； 6、犬布氏杆菌( Br. canis ) 。
• 鼻疽假单胞菌简称鼻疽杆菌，现在称为鼻疽伯氏菌 （Burkholderia mallei），是假单胞菌属中最重要的动物 病原菌; • 主要侵害马属动物，引起急性（多见于骡、驴）或慢性 （多见于马）的鼻疽病，偶尔能感染人和一些肉食兽。 • 临床上呈现：鼻鼻疽、肺鼻疽和皮肤鼻疽三种表现型， 但共同的病变特征是侵袭部位（皮肤、鼻腔和气管黏膜、 肺、淋巴结及其他器官形成特征性的鼻疽结节、溃疡与 疤痕。 • 因此本菌主要存在于病马的结节、鼻液与溃疡分泌物中。 2
第八章 革兰氏阴性需氧杆菌
• 这一章节包括8个科和16个关系未定的 属，本章仅就兽医上有重要意义的几个 属的细菌作些简单介绍。
第一节 鼻疽假单胞菌 （Pseudomonas mallei） 第二节 布氏杆菌杆菌属（Brucella） 第三节 波氏菌属 （Bordetella）
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第一节 鼻疽假单胞菌 （Pseudomonas mallei）
（2）在血琼脂平板上不溶血；
（3）在马铃薯培养基上生长具有特征性：37℃48小时可长 成蜂蜜状粘稠的菌苔，颜色则由淡黄色→淡褐色→深 褐色；这对鉴定很有价值； （4）在甘油肉汤中培养呈轻度均匀混浊，并逐渐形成灰白 色粘稠沉淀；培养日久后（10~15天）可形成灰白色 菌膜；
（5）在孔雀绿酸性复红培养基上，形成淡绿色菌落； （6）本菌在麦康凯培养基上不能生长。
一、形态学特征
布氏杆菌常用的染色方法是柯兹罗夫斯基染色法 （即柯氏染色法）；本菌为球杆状或短杆状细小的G －菌，多单在，短链较少，无芽胞、无荚膜、无鞭毛。
通常，病料中或初次分离的细菌形态较小，但经过 继代培养后，猪种和牛种逐渐变为杆状，而羊种仍 呈球杆状。经柯氏染色后，本菌可染成红色，而其 他组织细胞与杂菌均呈绿色或兰色。
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Brucella abortus - Gram-negative, coccobacillus prokaryote; causes bovine spontaneous abortion due to its rapid growth in the presence of erythritol (produced in the plancenta). SEM x 18 29,650
• Brucella ovis in epididymis
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二、培养特性
1. 本菌为需氧菌，最适生长温度为37℃，最适生长pH 是6.6~7.2； 2. 本菌对营养要求较高，在普通培养基上生长贫瘠， 通常用肝汤琼脂、马铃薯浸汁琼脂或胰蛋白胨琼脂， 或加上一些营养如马血清、血液、葡萄糖、甘油、 胰化酪蛋白大豆胨等，都可促进本菌生长。 3. 初次分离时，牛布氏杆菌必须在含有5~10%CO2 环 境中才能生长，但在人工培养基上移种几代后就不 需要CO2。
变异（即S－R变异），有时还会出现过度型（I型 22 菌落）。
三、抵抗力
本属菌在自然条件下的抵抗力较强，但 在阳光直射和干燥的条件下抵抗力较弱， 对湿热很敏感，100℃很快即被杀死， 对一些消毒剂也很敏感。
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四、抗原性
• 主要有属内抗原和属外抗原。
– 1、属内抗原：包括A、M、R等表面抗原。
• A抗原和M抗原是细胞壁表面的脂多糖蛋白复合物； • R抗原是细胞壁中的低蛋白含量的脂多糖复合物，为R型 菌的共同抗原决定簇，当光滑型菌株发生S－R变异后， 丧失A、M抗原，即可暴露R抗原。
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另外：伪鼻疽杆菌 和绿脓杆菌的一些特性 请看书自学。
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第二节 布氏杆菌杆菌属 （Brucella）
• 布氏杆菌能引起人畜共患的慢性传染病， 主要侵害生殖器官和关节，主要特征是： 生殖器官、胎膜以及多种器官组织发炎、 坏死和肉芽肿的形成，引起流产、不孕、 睾丸及关节炎症等症状。
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本属细菌主要分为6个生物种 20个生物型，6个种即：
1. 在狗中，本菌除引起幼犬的气管支气管炎外，常为 犬瘟热的继发病原菌； 2. 在猪中，既可引起1周龄乳猪原发性肺炎，又是猪传 染性萎缩性鼻炎的一种常见病原菌或继发菌； 3. 试验动物常用豚鼠，强毒株腹腔接种后1~2天内致死 豚鼠；剖检可见有腹腔小点状出血，肝、脾及较不 33 活动的胸段形成粘性半透明渗出物组成的假膜。
本菌为严格需氧菌，最适生长温度为37℃。
1. 2. 3. 4. 在普通琼脂培养基上生长良好，形成圆形、隆起、 光滑、闪光的细小菌落； 在血琼脂平板上出现β溶血； 在马铃薯培养基上生长较好，形成湿润、闪光、 牛奶咖啡样融合性菌苔，并使马铃薯变成棕黑色； 能在麦康凯上生长。
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三、致病性
本菌能引起多种动物（如：猪、犬、猫、家兔、 马、猴，甚至人）的慢性呼吸道病，并可相互 传染。
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2、血清学试验：目前主要是补体结合反 应，具有很高的特异性。
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3、变态反应：常用的方法有点眼反应、眼睑试 验、皮下试验、皮肤试验和喷雾试验，我国 的兽医规程主要采用点眼法。
– 点眼法操作简单，检出率高，该法是将鼻疽菌素 滴入待检马的一侧眼结膜囊内，约3~4滴，分别 于点眼后3、6、9、24小时观察；如眼结膜红肿 并排出脓性分泌物，即可判为阳性。
– 2、属外抗原：是指布氏杆菌能与巴氏杆菌、变形 杆菌、弗朗西斯菌、弧菌、弯曲杆菌、钩端螺旋体、 假单胞菌、沙门氏菌、耶尔森氏菌以及大肠杆菌等 24 菌属发生交叉凝集反应的抗原。
五、致病性
1. 本菌不产生外毒素，仅有内毒素，且毒性很强。内毒
素是细胞壁内的一种磷脂多糖。 2. 本属菌通常可被吞噬细胞吞噬成为细胞内寄生菌，可 在淋巴结中生长繁殖；由于赤藓醇可促进本菌的生长， 因此布氏杆菌对动物的睾丸组织有一定的嗜性。 3. 由布氏杆菌引起的疾病称为“布氏杆菌病”，母畜通 常表现为不孕、流产，公畜主要发生附睾炎。