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挂面中丙二醛含量测定方法的研究

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（ ６ ； ｎ＝ ） 直接反 应 法平均 回收 率 分 别 为 ７ ．８ 、９ ６ ％ 、０ ９ ％ ， Ｓ 为 １７６３ ， ９ ７ ％ ７ ．０ ８ ．７ Ｒ Ｄ ．７ ％ 最低 检 测 限为 ３ ．８ ９０ ｇｋ （ ２ １１ ， ／ ｇ Ｋ＝ ．７ ） 重复性 试验 Ｒ Ｄ为 １７ ％（ ６ 。试验 结果表 明 Ｔ Ａ Ｍ 更适 于挂 面 中丙二 醛含 量 的测 Ｓ ．５ ｎ＝ ） ＣＥ
然后将溶液在常温下用磁力搅拌器搅拌2h3000rmin离心20min上清液用中速滤纸过滤取滤过液于50旋转蒸发浓缩用去离子水定容至50ml1322riba值的测定取15ml的浓缩液于具塞试管中加入15ml质量分数为08的1ba05ml一定浓度的sds和15ml一定ph的醋酸缓冲液混匀加塞在80下水浴30min取出冷却lomin加入4ml一定比例混合的正丁醇和吡啶混合物剧烈摇晃离心取上层有机液体用可见光分光光度计于530nm处测定吸光度并通过标准曲线计算相应iba值
和原味葵 花 子 中丙 二 醛 含 量 ， 是 索 氏抽 提 法 进 行 但 样 品预处 理 所 需 时 间 较 长 ， 测定 时加 热 有 助 于油 脂
蛤变 的主要 原 因是 挂 面 中 含 有 大约 ２ 的脂 类 ％ 物质 ， 些脂 类物质 在光 、 、 这 热 氧气 的作用 下分解 生 成甘油 和游 离脂 肪 酸 。挂 面 中 的脂 肪 酸 主要 为 不
饱 和脂肪 酸 ， 饱 和 脂 肪 酸 又 进 一 步 被 氧 化 产 生 氢 不
氧化使结果偏高。三氯乙酸抽提法和直接反应法现 在多用于腊 肉制 品和油料 作物 中丙 二醛含 量 的检 测 卜博 ， 于 挂 面 中丙 二 醛 含 量 的 测 定 还 未 见 报 Ｊ用
导。
本试 验 主要研 究 了三氯 乙酸抽 提法 （Ｃ Ｅ 和 Ｔ Ａ Ｍ） 直 接反应 法 （ Ｒ 用于测 定挂 面 中丙二 醛 含量 。 由 Ｄ Ｍ）
２１ ０ ２年 ３月
中国粮油学报
Ｊ ｕ ｎ ｌｏ ｅ Ｃ ｉｅｅ Ｃ ｒａｓａ ｄ Ｏ ｌ Ａｓｏ ｉｔ ｎ ｏ ｒ ａ ｆｔ ｈｎ ｓ ｅｅｌ ｎ ｉ ｓ ｃａｉ ｈ ｓ ｏ
Ｖｏ ． ７， ． １２ Ｎｏ ３
Ｍａ． ｒ２０１ ２
第 ２ 第 ３期 ７卷
挂 面 中丙 二 醛含 量 测 定 方 法 的研 究
（ Ｒ 测 定挂 面 中丙二醛含 量 的试验 条件 ， 比较 了两种 方法 的加 标 回收率 、 密度 、 测 限和重 复性 。结果 Ｄ Ｍ） 并 精 检
显示 ，Ｃ Ｅ 的较 佳试验 条件 为三 氯 乙酸质 量分数 １％ 、 液 比 １１ 、 拌 时 间 ２ｈ Ｄ Ｍ 的较佳 试验 条 件 为 ＴＡ Ｍ ０ 料 ： 搅 ２ ；Ｒ 醋酸缓 冲液 ｐ ． 、Ｄ Ｈ２ ５ Ｓ Ｓ质量 分数 ４ 、 丁 醇 和吡 啶 的 混 合 溶剂 溶 剂 比 ６１ ％ 正 ：。向样 品 中分 别 添加 １ 、０ ３ ０ ２ 、０
挂 面在 我 国有 着 两 千 多 年 的历 史 ， 受群 众 喜 深
爱。据不完全统计 ， 我国挂面企业有 ４ ０ — ０ ０ ５ ０家 ０ ０ （ 不包括作 坊式 的小 企业 ） 年产 值 ｌＯ亿 元人 民 ， ｌ 币¨ ， 面行 业 整 体 上 发 展 形 势 较 好 ， ２ ０ 挂 在 ０８年 销
于丙二醛的不稳定性 ， 本研究 以 Ｔ Ａ值变化趋势 的 Ｂ 稳 定性作 为 选 取 较 优 试 验 条 件 的指 标 ， 三氯 乙酸 以 浓度、 料液比、 搅拌 时间为单 因素研究 Ｔ Ａ Ｍ 的试 ＣＥ 验条件 ； 以醋酸缓冲液 ｐ Ｓ Ｓ Ｈ、Ｄ 浓度 、 正丁醇和吡啶 的混合溶液溶剂比为单因素研究 Ｄ Ｍ 的试验条件。 Ｒ 在 较佳试 验 条件 下 比较 二种 方 法 的检 测 限 、 密 度 、 精 重 复性 和加 标 回收 率 ， 确 定 一种 较 适 于测 定 挂 面 拟
过 氧化 物 ， 过氧 化物 很 不稳 定 ， 氢 继续 分 解 成具 有 臭
味和异味的小分子醛类 、 酮类和酸类化合物， 从而导 致挂面蛤变 Ｊ不仅使挂面的营养价值和感官品质 ， 下降 ， 还会产生致癌物质丙二醛＿ 。 自 Ｋ ｈ 和 ８ Ｊ 从 ｏｎ
Ｌｖｒ ｄｅ发 现 动 物 组 织 能 够 与 硫 代 巴 比 妥 酸 ｉ ｓ ｇ ｅｅ （ Ｂ 反 应 生 成 粉 红 色 物 质 后 ， 反 应 广 泛 用 于 脂 Ｔ Ａ） 此 肪 氧化 酸败程 度 的测 定 。其 反 应 原理 是 脂 肪 氧化 产 物 １ 子 丙 二 醛 （ Ａ） ２分 子 Ｔ Ａ 反 应 生 成 分 ＭＤ 与 Ｂ
ｇｍ ／ Ｌ３个浓度 水 平 的 丙 二 醛 标 准 物 （ Ｅ Ｔ Ｐ）时 ， 氯 乙酸 抽 提 法 平 均 回 收 率 分 别 为 ８ ． １ 、 ３ ３ ％ 、 三 ２ ６ ％ ８． ３
８ ．５ ， ２ １ ％ 变异 系数 （ Ｓ 为 １０ ６０ ， 低检 测 限为 １ ． ０ ｇ ｋ （ ＝ ． ３ ， 复 性 试验 Ｒ Ｄ为 １ ２ ％ Ｒ Ｄ） ． １ ％ 最 ２ ５ ／ ｇ Ｋ ２ １ ） 重 Ｓ ．５
售 额增长 ２ ％ 的基 础 上 ，０ ９年上 半 年 产 量持 续 增 ７ ２０ 长 了 ８７ ％ ， 售 额 增 长 ９ ８ ％ ［ ， 很 多 生 产 上 ．６ 销 ．３ ２ 但 Ｊ 的技术 问题 仍 然 未 得 到 解 决 ， 常 见 的是 夏 天 挂 面 最
容 易蛤变 。
二醛含量的试验方法不 同， 目前常用 的有索 氏抽提 法 ］三氯 乙酸 抽 提 法 一 ”、 和 直 接 反 应 法 ］ ¨ 。周 拥军等 、 赵华锋¨ 刮曾应用索 氏抽提法测定栝楼籽
定。
关键 词
挂 面 丙二 醛
三氯 乙类号 ：Ｓ １． Ｔ ２３２
文献 标识码 ： Ａ
文章 编 号 ：０ ３— １４ ２ １ ）３— ｌ５— ７ １０ ０７ （０２ ０ ０ ｌ ０ ＭＤ Ａ—Ｔ Ａ 红 色 复 合 物 ¨ Ｂ 。针 对 不 同原 料 测 定 丙
高 俊 陈季 旺 周 琦 曹九超 崔 城 李庆龙 陈克 明
（ 武汉 工业学 院 武 汉 ， ４０ ２ ） ３０ ３ ４３０ ） １２０ （ 明面业 股份有 限公 司 南 县 克 ，
摘
要 丙二 醛含量 是评价 挂 面酸败 的重要 指 标之 一 ， 究 了三 氯 乙酸抽 提 法 （ Ｃ Ｅ 和 直接 反 应 法 研 Ｔ Ａ Ｍ）

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丙二醛的测定

丙二醛的测定

丙二醛含量的测定（李合生p260）一、实验原理植物器官衰老时，或在逆境环境下，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛是其产物之一，通常利用它作为脂质过氧化指标，表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件反应的强弱。

丙二醛在高温、酸性条件下与硫代巴比妥酸反应，形成在532nm波长处有最大光吸收的有色三甲基复合物，该复合物的吸光系数为150{mmol/（L.cm）}，并且在600nm 波长处有最小光吸收。

二、材料、仪器设备及试剂1、5%的三氯乙酸（TCA）,称取0.5g三氯乙酸，加蒸馏水稀释定容至10ml容量瓶中。

2、0.67%硫代巴比妥酸(TBA). 称取0.067g硫代巴比妥酸‘放入沸水中溶解，在定容至10ml容量瓶中。

新鲜的子叶或茎段、研钵2个、冰浴槽两个、研锤2个、1ml注射器2个、石英砂1瓶、药勺1把、吸水纸若干、试剂瓶1个、移液枪若干把、风光光度计一台、蒸馏水两瓶、干燥的试管若干个、试管架、离心机一台、离心管若36个、记号笔1个、标签纸若干、水笔1个。

三、试验方法与步骤1、丙二醛的提取准备工作：离心管36个，分别标号1~18和1Y~18Y（标有Y的装子叶研磨液,带0的表示实验组），拿出的研钵2个（带研锤），取1个棕色试剂瓶向里面放入TCA适量。

再拿出准备好的2个1ml注射器备用，取出石英砂和药勺（去石英砂用，用最小的那个）。

正式工作：从每个要测实验组中称取约0.2g的鲜重样品（从各个重复中抽取等个数的鲜样，切去根，再把茎和子叶分开，各部分混合均匀后，随即称取0.2g），放入研钵中，加少许石英砂，再加0.2~0.4mlTCA后研磨，研磨至糊状后用刚才用过的那个注射器中的剩余磷酸缓冲液冲洗研锤和研钵，倒入对应编号的离心管中，再用刚才用过的注射器再取1ml 磷酸缓冲液冲洗研钵，把冲洗液倒入离心管中，盖上盖摇匀，待全部都研磨完毕后放入离心机种离心（4℃、1200r/min、30min）。

离心好后放在室温下备用。

丙二醛含量测定

丙二醛含量测定

实验六、植物组织丙二醛含量测定植物叶片在衰老过程中发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等。

这些指标在一定程度上反映衰老过程的变化。

近来大量研究表明，植物在逆境胁迫或衰老过程中，细胞内活性氧代谢的平衡被破坏而有利于活性氧的积累。

活性氧积累的危害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。

活性氧包括含氧自由基。

自由基是具有未配对价电子的原子或原子团。

生物体内产生的活性氧主要有超氧自由基(O-2)、羟自由基(OH·)、过氧自由基(ROO·)、烷氧自由基(RO·)、过氧化氢（H2O2）、单线态氧（O21）等。

植物对活性氧产生有酶促和非酶促两类防御系统，超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶POD和抗坏血酸过氧化物酶(ASA—POD)等是酶促防御系统的重要保护酶，抗坏血酸(ASA)和还原型谷胱甘肽(GSH)等是非酶促防御系统中的重要抗氧化剂。

丙二醛(MDA)是细胞膜脂过氧化作用的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。

因此，丙二醛产生数量的多少能够代表膜脂过氧化的程度，也可间接反映植物组织的抗氧化能力的强弱。

所以在植物衰老生理和抗性生理研究中，丙二醛含量是一个常用指标。

[原理]植物组织中的丙二醛(MDA) 在酸性条件下加热可与硫代巴比妥酸(TBA) 产生显色反应，反应产物为粉红色的3，5，5一三甲基恶唑2，4一二酮(Trimet—nine)。

该物质在539nm波长下有吸收峰。

由于硫代巴比妥酸也可与其它物质反应，并在该波长处有吸收，为消除硫代巴比妥酸与其它物质反应的影响，在丙二醛含量测定时，同时测定600nm下的吸光度，利用539nm 与600nm下的吸光度的差值计算丙二醛的含量。

[材料、仪器、药品]1．材料：植物抗逆性鉴定实验中的四种菠菜样品，即绿色和黄色叶片的高温处理和室温对照。

丙二醛的测定实验报告

丙二醛的测定实验报告

丙二醛的测定实验报告丙二醛的测定实验报告引言：丙二醛（又称为丙醛，化学式为CH3CHO）是一种常见的有机溶剂和工业原料。

它具有刺激性气味和易燃性，因此在实验室中需要进行测定以确保安全性。

本实验旨在通过一种简单而准确的方法测定丙二醛的浓度。

实验方法：首先，我们准备了一系列丙二醛的标准溶液，浓度范围从0.1 mol/L到1.0mol/L。

然后，我们取一定体积的每个标准溶液，加入适量的试剂A和试剂B。

试剂A是一种与丙二醛反应生成有色产物的试剂，而试剂B则是一种催化剂，可以加速反应速率。

接下来，我们将混合溶液在恒定的温度下反应一段时间，然后用紫外可见光谱仪测量吸光度。

实验结果：根据测量得到的吸光度数据，我们绘制了吸光度与丙二醛浓度的标准曲线。

通过对标准曲线进行线性回归分析，我们得到了一个直线方程，可以用来计算未知丙二醛样品的浓度。

此外，我们还计算了标准曲线的相关系数，以评估拟合的好坏。

讨论：在本实验中，我们选择了试剂A和试剂B作为反应试剂，因为它们能够与丙二醛发生明显的化学反应。

试剂A与丙二醛反应生成的有色产物具有特征性的吸收峰，可以通过紫外可见光谱仪进行检测。

试剂B的加入可以加速反应速率，提高实验的效率。

通过测量吸光度并绘制标准曲线，我们可以通过测量未知样品的吸光度来确定其丙二醛浓度。

这种方法具有简单、快速和准确的特点。

然而，需要注意的是，标准曲线的制备和测量条件的控制对于结果的准确性至关重要。

此外，我们还计算了标准曲线的相关系数，以评估拟合的好坏。

相关系数越接近1，说明标准曲线与实际数据的拟合度越好。

如果相关系数较低，可能需要重新选择试剂或改变实验条件，以提高实验结果的准确性。

结论：通过本实验，我们成功地测定了丙二醛的浓度，并建立了一条可靠的标准曲线。

这种方法具有简单、快速和准确的特点，适用于实验室中对丙二醛浓度的测定。

然而，需要注意的是，标准曲线的制备和测量条件的控制对于结果的准确性至关重要。

在今后的实验中，我们可以进一步优化实验条件，提高测定的准确性和可靠性。

丙二醛含量测定

丙二醛含量测定

实验六、植物组织丙二醛含量测定植物叶片在衰老过程中发生一系列生理生化变化,如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等;这些指标在一定程度上反映衰老过程的变化;近来大量研究表明,植物在逆境胁迫或衰老过程中,细胞内活性氧代谢的平衡被破坏而有利于活性氧的积累;活性氧积累的危害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用,造成细胞膜系统的损伤,严重时会导致植物细胞死亡;活性氧包括含氧自由基;自由基是具有未配对价电子的原子或原子团;生物体内产生的活性氧主要有超氧自由基O-2、羟自由基OH·、过氧自由基ROO·、烷氧自由基RO·、过氧化氢H2O2、单线态氧O21等;植物对活性氧产生有酶促和非酶促两类防御系统,超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT、过氧化物酶POD和抗坏血酸过氧化物酶ASA—POD等是酶促防御系统的重要保护酶,抗坏血酸ASA和还原型谷胱甘肽GSH等是非酶促防御系统中的重要抗氧化剂;丙二醛MDA是细胞膜脂过氧化作用的产物之一,它的产生还能加剧膜的损伤;因此,丙二醛产生数量的多少能够代表膜脂过氧化的程度,也可间接反映植物组织的抗氧化能力的强弱;所以在植物衰老生理和抗性生理研究中,丙二醛含量是一个常用指标;原理植物组织中的丙二醛MDA 在酸性条件下加热可与硫代巴比妥酸TBA 产生显色反应,反应产物为粉红色的3,5,5一三甲基恶唑2,4一二酮Trimet—nine;该物质在539nm波长下有吸收峰;由于硫代巴比妥酸也可与其它物质反应,并在该波长处有吸收,为消除硫代巴比妥酸与其它物质反应的影响,在丙二醛含量测定时,同时测定600nm下的吸光度,利用539nm与600nm下的吸光度的差值计算丙二醛的含量;材料、仪器、药品1．材料：植物抗逆性鉴定实验中的四种菠菜样品,即绿色和黄色叶片的高温处理和室温对照;2．仪器：1 分光光度计；2 离心机；3水浴锅：4 天平；5 研钵；6 剪刀；7 5ml刻度离心管；9 刻度试管10ml；10 镊子；11 移液管5ml、2ml、1ml；12冰箱;3．药品：1 0.05mol/L pH7.8磷酸钠缓冲液；2 石英砂；3 5％三氯乙酸溶液：称取5g三氯乙酸,先用少量蒸馏水溶解,然后定容到100ml；4 0.5％硫代巴比妥酸溶液：称取0.5g硫代巴比妥酸,用5％三氯乙酸溶解,定容至100ml,即为0.5％硫代巴比妥酸的5％三氯乙酸溶液;方法1．丙二醛的提取：取0.5g样品,加入2ml预冷的0.05mol/L pH7.8的磷酸缓冲液,加入少量石英砂,在经过冰浴的研钵内研磨成匀浆,转移到5ml刻度离心试管,将研钵用缓冲液洗净,清洗也移入离心管中,最后用缓冲液定容至5ml;在4500转/min离心10min;上清液即为丙二醛提取液;2．丙二醛含量测定：吸取2 ml的提取液于刻度试管中,加入0.5％硫代巴比妥酸的5%三氯乙酸溶液3ml,于沸水浴上加热10min,迅速冷却;于4500转/min离心10min;取上清液于532、600nm波长下,以蒸馏水为空白调透光率100%,测定吸光度;3．结果计算：A532—A600 ×V1×V丙二醛含量nmol/g = 1.55×10-1×W×V2式中：A为吸光度；V1为反应液总量5m1；V为提取液总量5ml；V2为反应液中的提取液数量2ml；W为植物样品重量0.5g；1.55×10-1为丙二醛的微摩尔吸光系数在1升溶液中含有1µmol丙二醛时的吸光度;4．注意事项：1 0.1~0.5％的三氯乙酸对MDA—TBA反应较合适,若高于此浓度,其反应液的非专一性吸收偏高；2 MDA—TBA显色反应的加热时间,最好控制沸水浴10~15min之间;时间太短或太长均会引起532nm下的光吸收值下降；3 如用MDA作为植物衰老指标,首先应检验被测试材料提取液是否能与TBA反应形成532nm处的吸收峰;否则只测定532、600nm两处A值,计算结果与实际情况不符,测得的高A值是一个假象；4 在有糖类物质干扰条件下如深度衰老时,吸光度的增大,不再是由于脂质过氧化产物MDA含量的升高,而是水溶性碳水化合物的增加,由此改变了提取液成分,不能再用532nm、600nm两处A值计算MDA含量,可测定510、532、560nm处的A值,用A532一A510—A560/2的值来代表丙二醛与TBA反应液的吸光值;实验结果记录实验前思考题1通过丙二醛含量测定能够解决什么理论和实际问题2什么时候植物会发生严重的膜脂过氧化作用简述其过氧化作用过程;3说明膜脂过氧化作用的对植物的效应;4TBA为什么要溶解在三氯乙酸中5提取液与TBA的混合液为什么要加热为什么加热时间又不能过长6为什么要测定反应液在600nm下的吸光度7在计算公式中,为什么吸光系数的单位是微摩尔,而最后的含量单位却是毫微摩尔8写出实验时间按排和操作流程图;9写出抗逆性鉴定和丙二醛含量测定实验统一的时间按排和操作流程图;实验后思考题1如果可溶性糖含量影响丙二醛含量的测定,你有什么办法消除其影响2丙二醛反应液为什么加热时间过长会影响测定结果。