生物学仪器分析及实验技术-显微
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实验三电子显微镜技术的演示背景知识:普通光学显微镜通过提高和改善透镜的性能,使放大率达到1000~1500倍左右,但一直未超过2000倍。
这是由于普通光学显微镜的放大能力受光的波长的限制。
为了从更高的层次上研究物质的结构,必须另辟蹊径,创造出功能更强的显微镜。
20世纪20年代法国科学家德布罗意发现电子流也具有波动性,其波长与能量有确定关系,能量越大波长越短,比如电子学1000伏特的电场加速后其波长是0.388埃,用10万伏电场加速后波长只有0.0387埃,于是科学家们就想到是否可以用电子束来代替光波,这是电子显微镜即将诞生的一个先兆。
用电子束来制造显微镜,关键是找到能使电子束聚焦的透镜,光学透镜是无法会聚电子束的。
1926年,德国科学家蒲许提出了关于电子在磁场中运动的理论。
他指出:“具有轴对称性的磁场对电子束来说起着透镜的作用。
”这样,蒲许就从理论上解决了电子显微镜的透镜问题,因为电子束来说,磁场显示出透镜的作用,所以称为“磁透镜”。
1931年,德国柏林工科大学的Knoll和Ruska制作成功第一台电子显微镜──它是一台经过改进的阴极射线示波器,成功地得到了铜网的放大像──第一次由电子束形成的图像,加速电压为7万,最初放大率仅为17倍。
尽管分辨率还不如光学显微镜高,但它却证实了使用电子束和电子透镜可形成与光学像相同的电子像。
经过不断地改进,1933年Ruska和Bodo Von Borries又制成了第二台两级短焦距的电子显微镜,获得了金属箔和纤维的放大1万倍的电子图像。
虽然放大率得到提高,但分辨率当时还刚刚达到光学显微镜的水平。
1937年应西门子公司的邀请,Ruska建立了超显微镜学实验室。
1939年西门子公司制造出分辨本领达到30埃的世界上最早的实用电子显微镜,并投入批量生产。
随后,透射电镜的商业产品由美国无线电公司于1941年开始制作生产。
电子显微镜的出现使人类的洞察能力提高了好几百倍,不仅看到了病毒,而且看见了一些大分子,即使经过特殊制备的某些类型材料样品里的原子,也能够被看到。
细胞生物学实验教案实验一:特殊显微镜的使用及显微摄影术一、实验目的:1、掌握暗视野显微镜、相差显微镜的原理、构造及其使用方法。
2、掌握显微摄影装置及其操作技术,独立完成显微摄影全过程。
二、实验原理:暗视野显微镜应用丁达尔现象,装配暗示场聚光器,是入射光从聚光器斜向照明被检样品。
暗视野显微镜利用样品的散射光和放射光进行观察,只能观察物体的存在与运动而不能辨清其细微结构。
暗视场照明是照明光线仅照亮被检样品而不能进入物镜,使视场背景暗黑,样品明亮的照明方法。
相差显微镜利用被检物体的光程之差进行镜检,通过衍射和干涉现象,将肉眼看不到的相差,变为明暗的振幅差而能看到。
相差显微镜应用于生物学的主要价值,在于对透明的活体进行直接观察,无需采用是细胞致死的固定和染色的方法。
0lympus BH系列的BHS和BHT型显微镜有摄影装置,通过摄影装置,拍摄显微视场中被检样品。
三、实验仪器与试剂1、材料:洋葱鳞茎、人口腔细胞;2、器材:暗视场显微镜、相差显微镜、Olympus显微镜、活体生物样品、擦镜纸、消毒牙签、镊子、滴管、纱布、吸水纸、载玻片、盖玻片3、试剂:生理盐水(0.9%)、2%碘液、香柏油、二甲苯。
四、实验步骤与方法(一)口腔上皮细胞的制备及染色1、把载玻片和盖玻片擦拭干净;2、用滴管在载玻片的中央滴一滴生理盐水;3、用消毒牙签在自己漱净的口腔内壁轻轻地刮几下;4、把牙签上的碎屑放在生理盐水中轻涮几下;5、盖上盖玻片;6、在盖玻片的一侧滴一滴稀碘液;7、用吸水纸吸引,使染液浸润标本的全部。
(二)洋葱鳞茎内表皮装片制作1、把载玻片和盖玻片擦拭干净;2、用滴管在载玻片的中央滴一滴蒸馏水;3、用镊子撕取洋葱鳞茎内表皮置于蒸馏水中;4、盖上盖玻片;5、在盖玻片的一侧滴一滴稀碘液;6、用吸水纸吸引,使染液浸润标本的全部。
(三)分别用暗视场显微镜和相差显微镜观察(四)显微摄影的使用将装片置于显微摄影镜下,选一清晰的视野进行拍摄并打印出来。
高中生物实验仪器使用技巧
高中生物实验需要用到各种实验器材和仪器,正确使用和操作
这些仪器不仅可以提高实验效果,也是保证人身安全的前提。
以下
是高中生物实验仪器使用技巧:
1. 显微镜使用技巧:在使用显微镜前,需要先将物镜转至最低位。
在将物镜放入载玻片上的标本前,先以10倍或20倍的眼镜观
察标本的情况,调节焦距直到清晰为止。
在观察过程中,需要注意
保持镜片干燥和不碰触载玻片或标本。
2. 恒温恒湿箱使用技巧:在使用恒温恒湿箱进行实验时,需要
先根据实验需要调节好箱内的温度和湿度。
将样品放入恒温恒湿箱
内前,需要将样品放入样品架或样品皿中,以免直接接触恒温恒湿
箱的内壁。
在关门后,需要时常检查水箱的水位和水质。
3. 热水浴使用技巧:在使用热水浴时,需要先加入适量的水并
加热至所需温度后再放入试管或其他。
在使用试管夹或者平板夹时,需要注意试管或的稳固,避免翻倒。
加热后的试管或表面温度高,
避免用手直接触碰。
4. 称量仪器使用技巧:在使用天平或其他称量仪器时,需要先
校准仪器。
校准后,需要将称量物品放入稳定的稳定器上,以保证
称量准确。
在称量时需要避免手部或触碰,使用称量勾或其他工具
进行称量。
5. 分离仪器使用技巧:在使用离心机、层析仪或其他分离仪器时,需要先根据样品性质和实验需要调节好仪器的参数,如转速、
离心管位置等。
在使用离心机时,需要确保离心管的盖子关闭紧密,同时离心机的转速不要过高。
以上是高中生物实验仪器使用技巧的简要说明,希望对有需要
的同学们有所帮助。
显微分析实验总结1. 引言显微分析是一种通过使用显微镜和相关的技术手段,对物质样品进行观察和分析的方法。
它广泛应用于材料科学领域,特别是在材料分析、结构表征、纯度检测等方面。
本文将对显微分析实验进行总结,包括实验目的、实验步骤、实验结果及分析等内容。
2. 实验目的本实验的主要目的是通过显微镜观察和分析不同材料样品的显微结构,掌握显微分析的基本原理和方法。
3. 实验步骤3.1 样品制备首先,需要准备不同材料的样品,并进行适当的处理。
样品制备的方法根据不同材料的性质而定,可以包括切割、抛光、腐蚀等步骤,以获得适合观察的样品。
3.2 显微观察将准备好的样品放置在显微镜台上,调整显微镜的焦距和镜头放大倍数,以便获得清晰的显微结构图像。
在观察过程中,需要注意调整照明光源的亮度和方向,以提高观察效果。
3.3 图像记录使用相机或手机等设备,记录经过显微镜观察得到的图像。
确保图像清晰且能够准确反映样品的显微结构。
3.4 数据分析对于观察到的显微结构图像,进行相应的数据分析。
可以使用图像处理软件对图像进行测量、分析,提取相关的参数和特征。
根据实验目的,进行必要的统计和比较分析。
4. 实验结果及分析根据上述实验步骤,我们成功观察和分析了不同材料样品的显微结构,并得到了一些有意义的数据和结论。
以金属材料为例,通过显微分析,我们观察到了金属晶体的晶界、晶粒大小和形貌等信息。
通过统计分析,我们还发现不同处理条件下,晶粒尺寸的变化规律。
这些结果对于进一步了解材料的微观结构和性质具有重要意义。
同时,我们还发现不同材料之间在显微结构上存在差异,这为进一步研究材料的性质和应用提供了重要参考。
5. 结论通过显微分析实验,我们成功观察和分析了不同材料样品的显微结构,并获得了一些有意义的实验结果和结论。
这些结果对于进一步研究材料的性质和应用具有重要意义。
通过本实验,我们还掌握了显微分析的基本原理和方法,并学会了使用显微镜和相关工具进行样品观察和数据分析。
细胞生物学实验指导实验一、显微镜的结构与使用方法一、实验目的1.认识显微镜的构造2.学会独立操作显微镜二、仪器和材料显微镜、擦镜纸、装片三、实验内容1.学生按编号把自己的显微镜取出,放在试验台上,在教师的指导下熟悉显微镜各部分的构造及用途,然后进行操作练习。
先用低倍镜进行对光联系,使视野明亮而均匀。
如果使用双筒目镜,还应学习目镜间距的调节。
在转换高倍物镜观察,此时应注意它的视野亮度与低倍物镜有无区别?并思考通过哪几种方法调节使得高倍物镜的视野达到要求的亮度。
2.取已制备好的装片进行观察:按低倍镜使用步骤和方法进行操作练习。
注意要使观察到的像向前移动时,玻片标本应向那个方向移动?欲使观察到的像向右移动时,拨片标本应向那个方向移动?3.观察制备好切片:细胞核、中心体、胞间连丝、有丝分裂、减数分裂、高尔基体等。
4.观察完毕后,按正规要求取下玻片,把显微镜收好。
四、作业绘制2-3中细胞结构实验二、Feulgen反应显示DNA(一)实验目的1.掌握临时制片法。
2.熟悉Feulgen反应的原理及操作步骤。
3.观察细胞中DNA的分布。
(二)实验原理Feulgen在1924年发明一种对DNA特异的组织化学染色反应,故称Feulgen反应。
DNA经酸(1mol/L HCl)水解后,DNA分子中的嘌呤和脱氧核糖连接的配糖键被打开,脱氧核糖的一端释放出醛基,并在原位与Schiff试剂反应形成特异性的紫红色产物。
该产物能特异地吸收峰值为550~570nm的光波。
并且在一定的浓度范围内,对550~570nm光波的吸收值与DNA 含量成正比关系,既符合化学计量学关系。
此法既可定位用于细胞或组织化学染色反应,观察DNA的分布,又可用显微分光光度计和图像分析仪对细胞或组织中DNA的含量进行定量分析。
紫红色的产生,是由于反应产物的分子内含有醌基,醌基是一个发色团,所以具有颜色。
对照组或采取不经盐酸处理,或预先用热三氯醋酸或DNA酶处理,抽提去细胞中的DNA而得到阴性反应。
扫描电子显微镜生物样品制备与观察细胞生物学实验报告实验目的:通过使用扫描电子显微镜(SEM),观察并比较不同生物样品的细胞结构和形态特征。
实验材料:-不同种类的生物样品(如植物叶片、昆虫翅膀、细菌培养物)-10%磷酸盐缓冲液(PBS)-2.5%葡萄糖溶液-电镜显微镜台-SEM样品支架-SEM扫描电镜实验步骤:1.收集各种生物样品,并用PBS润湿样品表面,以去除杂质。
2.将样品放置在SEM样品支架上,用细菌镊子小心地将样品固定在支架上。
3.将SEM样品支架放入SEM扫描电镜中,并调节扫描电镜的参数,如电子束的加速电压和信号放大倍数。
4.将SEM样品支架移动到扫描电镜中心位置,并确保样品表面与电子束的垂直距离适当。
5.打开电子束,在视野范围内找到有代表性的细胞区域,并通过调整焦距和扫描速度来获取清晰的图像。
6.在观察过程中,可以尝试不同的电子束参数,以获得最佳的样品成像效果。
7.观察并记录每个样品的细胞结构和形态特征,注意细胞的大小、形状和细胞器的位置等。
实验结果与讨论:通过SEM观察,我们可以清晰地看到植物叶片的气孔细胞和叶绿体的内部结构。
气孔细胞呈现出多边形的形状,并且表面布满微小的细管,这些细管是用于气体交换的通道。
叶绿体则呈现出椭圆形,并且具有叶绿素颗粒的特征,这些颗粒是光合作用中的关键结构。
昆虫翅膀的观察结果显示,翅膀表面有许多微小的鳞片组成,这些鳞片具有复杂的纹理和形状。
昆虫通过这些鳞片可以完成特定的功能,如飞行和保护。
SEM的使用使我们能够更加详细地观察到翅膀表面的微观结构。
细菌样品的观察结果显示,细菌呈现出不规则形状的胞体,表面光滑且有不规则的突起。
通过SEM的高放大倍数,可以看到细菌细胞壁的纹理和孔隙结构,这些结构可能与细菌的生长和代谢有关。
通过SEM观察不同生物样品的细胞结构和形态特征,可以增进我们对细胞生物学的理解。
SEM的高分辨率能力使我们能够观察到细胞的微观结构,从而对细胞的功能和相互作用有更深入的认识。
《生物技术仪器分析》课程教学大纲课程名称:生物技术仪器分析课程类别:专业课课程学时:总学时 36学分:2适用专业:生物工程、生物技术先修课程:分析化学、生物化学、微生物学、化工原理适用专业:生物工程、生物技术(学分:2 学时:36)一、课程的性质和任务课程性质:《生物技术仪器分析》以介绍现代仪器分析的基本理论及其对物质进行分析测定的基本原理、基本方法、基本技巧为主要内容,是一门实践性强,理论和实践相结合的课程,是生命科学领域生物技术和生物工程专业的专业基础课。
本课程是一门实验技术性较强的课程,起到基础课程与专业课程的桥梁作用。
教学目标:通过本课程学习,要求学生了解现代仪器分析的基本理论及其对物质进行分析测定的基本原理、基本方法和基本技巧, 掌握各种现代仪器分析方法在生命科学领域各相关专业的实际应用, 掌握基本的实验操作技术,为进一步从分子水平上认识和解决生命科学的相关问题奠定较好的分析基础知识。
教学要求:《生物技术仪器分析》是一门实践性、技术性很强的综合性课程,各部分内容包括相关的基础理论、仪器依据的基本原理、仪器的基本构造、定性定量分析方法、简单的分析影响因素和使用注意事项等。
要求学生初步具有根据分析的目的,结合学到的各种仪器分析方法的特点、应用范围,选择适宜的分析方法的能力。
在教学过程中要注重培养学生发现问题、分析问题和解决问题的能力以及科学思维方式的训练。
二、教学内容和要求(含每章教学目的、基本教学内容和教学要求):三、课程的重点和难点本课程涉及面广,理论性很强,但同时又是一门实践性很强的应用技术。
教学中必须重视基础理论和应用两部分,要紧密联系实际让学生从原理上学懂弄通,有些内容要放在实验室中,结合仪器讲授,并配合尽量多的演示技巧和实验进行学习。
掌握仪器分析的基本概念,基本理论与分析方法。
掌握常用分析仪器的结构原理、使用方法和应用技术。
四、参考性教学时间安排五、实践(实验)教学环节(含实验项目、实践内容)实验室相关仪器现场演示及讲解。
初中生物实验室仪器设备大全实验室仪器设备是进行生物实验和研究的基本工具,它们能够帮助科研人员进行数据采集、实验操作、样品处理等工作。
下面将介绍一些常见的初中生物实验室仪器设备,以及它们的功能和用途。
1.显微镜显微镜是生物实验室中最常见的仪器之一,用于观察和研究微小的生物结构和细胞组织。
根据放大倍数和使用方式的不同,可以分为光学显微镜和电子显微镜两种。
光学显微镜适合用于观察活的细胞和组织,而电子显微镜则可以观察更小的结构和更细微的细胞器。
2.分光光度计分光光度计是一种用于测量溶液中物质浓度和光学性质的仪器。
它可以通过测量光的吸收、透射或散射来分析溶液中的化学物质的浓度和成分,常用于酶活性测定、DNA/RNA浓度检测等实验中。
3.电泳仪电泳仪是一种用电场作用下移动带电粒子(如DNA、RNA、蛋白质等)的仪器,通过电泳技术可以进行DNA分离、酶切、PCR产物分析等实验。
初中生物实验中常用的电泳仪有水平电泳仪和垂直电泳仪,其尺寸和电场强度可根据实验需求进行选择。
4.离心机离心机是用于分离液体混合物中不同密度的成分的仪器。
在生物实验中,离心机常被用来沉淀细胞、细胞器、蛋白质等,常见的离心机有台式离心机和高速离心机,可根据需要选择不同的转速和转子。
5.恒温培养箱恒温培养箱是一种用于控制生物实验条件的仪器,可以提供恒定的温度和湿度环境,常用于培养微生物、细胞培养和PCR反应等实验。
恒温培养箱通常有单层、双层或多层结构,可根据实验需求进行选择。
6. pH计pH计是用于测量溶液酸碱度的仪器,可以精确测量溶液的pH值,并用于调节实验溶液的酸碱平衡。
在细胞培养、酶反应、蛋白质纯化等实验中,pH计是必不可少的实验工具。
7.培养箱培养箱是用于培养微生物和细胞的常见仪器,可以提供恒定的温度和湿度环境,保持培养物的生长环境。
培养箱包括普通培养箱、CO2培养箱和恒温振荡培养箱等不同类型,可根据实验需要选择。
8.吸光度计吸光度计是用于测量溶液对光的吸收情况的仪器,通常用于测定DNA/RNA、蛋白质、酶活性等生物分子的浓度和纯度。
1、通过对原核和真核各种形态细胞的光学显微镜观察,了解细胞的形态及其显微构造;2、学习显微测量的方法,对细胞的大小有向来观认识。
小白鼠肝细胞切片;鸡血红细胞;蚕豆叶片横切片;普通光学显微镜;目镜测微尺;镜台测微尺;载玻片;盖玻片。
(一)细胞形态观察l、动物细胞的观察〔1〕人肝细胞切片:在显微镜下子细观察肝细胞的形态构造。
〔2〕鸡血细胞涂片的观察:观察血细胞的组成;红细胞、白细胞、血小板的形态特点。
2、植物细胞的观察〔1〕取蚕豆叶片横切片的观察:注意表皮细胞和叶肉细胞的根本构造。
〔二〕细胞的大小和测量1、卸下目镜的上透镜,将目镜测微尺刻度向下装在目镜的焦平面上,再旋上目镜的上透镜。
2、将镜台测微尺刻度向上放在镜台上夹好,使测微尺分度位于视野中央。
调焦至能看清镜台测微尺的分度。
3、小心挪移镜台测微尺和转动目镜测微尺(如目镜测微尺分度含糊,可转动目镜上透镜发展调焦),使两尺左边的向来线重合,然后由左向右找出两尺另一次重合的直线。
4、记录两条重合线间目镜测微尺和镜台测微尺的格数。
按下式计算目镜测微尺每格等于多少μm:1、目镜校正: 40倍显微镜目镜测微尺每格的微米数2、细胞大小的测量:1、血细胞按含量上下,主要含有:红细胞,白细胞,血小板。
白细胞最大,红细胞次之,血小板最小。
红细胞:主要的功能是运送氧。
白细胞:主要扮演了免疫的角色, 当病菌侵入人体时, 白细胞能穿过毛细血管壁, 集中到病菌入侵部位,将病菌包围,吞噬。
血小板:止血过程中起着重要作用。
细胞形态见以下图。
2、植物细胞普通比动物细胞大一些。
形态图见下。
3、在不同放大倍数下,测定的细胞大小根本一致,但有一些偏差。
放大倍数越大,在视野中同等实际距离下的两点视野距离更大,而更容易测量准确。
1、熟悉PAS 法原理及操作步骤;2、观察PAS 反响的染色结果,并观察多糖在组织细胞中的分布。
多糖是由多个单糖份子缩合脱水而生成的化合物。
一些不溶性的多糖构成植物和动物的 骨架, 如植物的纤维素和动物的甲壳素, 普通称为构造多糖。
生命科学实验室应用的仪器分析技术研究生命科学的研究需要用到现代仪器,而仪器分析技术在这一领域中具有至关重要的作用。
它不仅可以对生物样品进行快速有效的分析,还能为科研者提供更准确可靠的结果。
本文将探讨生命科学实验室应用的仪器分析技术,并介绍一些重要的仪器和技术。
1. 光谱学光谱学是一种监测和识别化学物质的方法,其原理是测量物质与电磁辐射(如光)相互作用的性质。
生命科学中,光谱学广泛应用于生物分子的分析,如DNA、蛋白质和酶等。
现在,光谱学已成为许多生命科学领域必不可少的技术,如药物发现、毒理学研究以及生物传感器的开发。
其中,UV-Vis吸收光谱和荧光光谱是最常用的技术。
UV-Vis吸收光谱可以用于测量化合物的浓度,而荧光光谱可以用于测量化合物在不同条件下的性质。
此外,红外光谱(IR)和拉曼光谱(Raman)也常用于分析生物分子。
2. 质谱学质谱学是一种分析化学方法,可以用来确定化合物的质量、结构和化学性质。
它适用于几乎所有的生物分子,如蛋白质、核酸和代谢产物。
在生命科学中,质谱学已成为探索生命过程的突破点。
目前,常用的质谱技术包括:质谱联用技术(LC-MS和GC-MS)、时间飞行质谱(TOF-MS)、离子阱质谱(IT-MS)和四极杆质谱(Q-MS)等。
通过这些技术,可以检测生物体内的化合物、鉴定未知物质和探究代谢通路。
3. 原子力显微镜原子力显微镜(AFM)是一种高分辨率成像技术,可以在原子级别上测量样品表面的几何形状、电学性质、表面力和化学反应。
在生命科学中,AFM广泛应用于研究生物分子的形态、结构和相互作用等方面。
AFM有多种模式,如接触型AFM(CAFM)、非接触型AFM(NC-AFM)和原子力显微光谱学(AFM-IR),每种模式都有其优点和限制。
通过这些技术,可以更好地理解生物分子之间的相互作用,从而提高药物的设计和开发。
4. 显微成像技术显微成像技术是生命科学中最重要的技术之一,它可以提供捕捉并记录生物体结构和组织的图像和视频。
八年级生物显微镜知识点
随着生物学研究的深入,显微镜的重要性也越来越显著。
在生物实验室中,显微镜是必不可少的工具。
那么,本文将为大家介绍八年级生物显微镜知识点。
让我们一起来了解一下吧。
I. 显微镜的种类
在生物学实验中,常用的显微镜有光学显微镜、电子显微镜、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜等。
本文重点介绍光学显微镜。
II. 光学显微镜结构
1. 目镜:位于显微镜的上部,用于放大显微镜底物的像;
2. 物镜:位于显微镜的下部,通过对显微镜底物进行放大以形成像;
3. 样品台:用于放置样品;
4. 光源:通过样品台,照亮样品;
5. 对焦轮:用于调节物镜与样品之间的距离。
III. 光学显微镜使用
使用光学显微镜需要经过以下步骤:
1. 将样品放在样品台上;
2. 调节光源,照亮样品;
3. 选择合适倍数的物镜;
4. 使用对焦轮将物镜与样品之间的距离调整到合适位置;
5. 通过目镜观察样品。
IV. 光学显微镜的配件
在进行光学显微镜实验时,还需要一些配件,如目镜清洁杆、差分干涉仪、热像仪等。
V. 光学显微镜的应用
生物学研究中,光学显微镜的应用非常广泛,例如:
1. 观察细胞和细胞器的结构与形态;
2. 研究昆虫、植物和动物的组织构造;
3. 研究微生物的形态、数量和分布。
总结:
如上述所述,八年级生物显微镜知识点是非常重要的。
光学显微镜的应用性广泛,其结构也比较简单,使用也比较方便。
介绍完毕,希望本文能对大家有所帮助。
现代生物学仪器分析在生命科学研究中的应用生命科学的发展与生物学仪器分析技术的进步密切相关,比如X射线晶体衍射对DNA双螺旋结构的发现起着至关重要的作用,而DNA双螺旋结构的发现奠定了现代分子生物学的基石,使微观世界的大门为我们敞开,让我们得以一窥微观领域的奇妙景象。
一代测序技术的问世使人类得以提前完成人类基因组计划,第二代,第三代测序技术的出现,不仅大大降低了测序成本,还大幅提高了测序速度,并且保证了高准确性,为现代生物学的研究提供了强有力的帮助。
诞生于上个世纪八十年代的生物质谱技术,为功能基因组,蛋白质组的研究奠定了基础。
随着科学技术的发展,更精确,更快速,选择性更高,灵敏度更高的分析仪器以及新的技术和新的方法会不断的涌现出来,从而加速生命科学研究的不断发展。
现代生物学仪器分析中有“四大谱”和“三大法”。
生物分子的结构分析最有效的方法就是“四大谱”:紫外-可见光谱、红外光谱、核磁共振波谱和质谱。
而生物大分子结构测定的最重要和应用最广泛的“三大法”分为X射线晶体衍射分析、核磁共振波谱分析和冷冻电镜。
紫外可见吸收光谱是通过研究溶液中生物分子对紫外和可见光谱区辐射能的吸收情况对生物分子进行定性、定量和结构分析的方法。
通常我们所说的紫外光谱其波长范围主要是为200~800nm。
由于不同物质的分子其组成和结构不同,它们所具有的特征能级也不同,其能级差不同,而各物质只能吸收与它们分子内部能级差相当的光辐射,所以不同物质对不同波长光的吸收具有选择性。
紫外可见吸收光谱应用广泛,不仅可进行定量分析,还可利用吸收峰的特性进行定性分析和简单的结构分析。
近年来,随着生命科学领域的发展,紫外可见吸收光谱在生命科学领域应用的越来越广泛。
比如利用紫外-可见吸收光谱对生物样品的定性分析,鉴定生物样品的种类、纯度等;还可以利用紫外-可见吸收光谱测定生物样品的浓度(蛋白质,核酸等)红外—拉曼光谱在生命科学领域应用十分广泛,因为拉曼样品用量很少,不需要对生物样品进行固定、脱水、包埋、切片、染色、标记等繁琐的前处理程序,不仅操作简单,而且不会损伤样品从而能够获得样品最真实的信息。