乌司他丁对脂多糖致小鼠急性肺损伤的保护作用以及与诱导型一氧化氮合酶和c-Jun 表达的关系

乌司他丁对重症中暑小鼠急性肺损伤的保护作用周耿标;徐秋林;刘亚楠;王郑莲;郭晓华;苏磊【摘要】目的：探讨乌司他丁（ulinastatin, UTI）对重症中暑小鼠急性肺损伤的保护作用。

方法 SPF级雄性C57/BL6小鼠60只，随机分为6组（n=10）：正常组、重症中暑模型组、造模前给药组、造模前生理盐水组、造模后给药组及造模后生理盐水组。

正常组小鼠置于（22±1）℃的环境中，其余各组小鼠置于加温舱（温度37℃、湿度60%）持续加温，两给药组分别于造模前、后10 min腹腔注射UTI 5×104 U/kg，而两生理盐水组则腹腔注射等量的生理盐水，加热期间前1.5 h每隔30 min用水银温度计人工测定肛温（Tc）1次，之后每隔15 min测1次肛温，待Tc达42.7℃（以此作为重症中暑开始的标志）后撤离高温舱，转移至常温中复温6 h。

观察各组肺组织病理学变化，检测各组支气管肺泡灌洗液（Bronchial Alveolar Lavage Fluid, BALF）中蛋白含量、肺湿/干比（W/D）、肺含水量、肺血管通透性（伊文思蓝含量）。

结果与正常组相比，重症中暑模型组及造模前、后生理盐水组肺部损伤严重，病理形态学改变明显，肺W/D比值、肺含水量、BALF中蛋白含量及肺血管通透性均显著增加（P<0.05），且组间无显著性差异（P>0.05）；而造模后给药组与重症中暑模型组及造模前、后生理盐水组相比，其肺部病理变化明显改善，肺W/D值、肺含水量、BALF中蛋白含量及肺血管通透性显著降低，但高于正常对照组（均P<0.05），而造模前给药组小鼠Tc≥42.7℃的时间较其它热打击组明显延长，但上述肺损伤指标却未见明显改善。

结论乌司他丁对重症中暑所致肺水肿与炎性渗出具有抑制作用，能有效对抗重症中暑所致的急性肺损伤，发挥保护作用。

%Objective To investigate the protective effect of ulinastatin (UTI) against acute lung injury induced by heatstroke in mice. Methods Sixty C57/BL6 mice were randomly dividedinto 6 groups, with 10 mice in each: control group, heatstroke group, UTI pretreatment group, saline pretreatment group, UTI post-treatment group, saline post-treatment group. The control mice were housed at a controlled room temperature of (22 ± 1) ℃, and the other groups were placed inside a temperature and humidity controlled chamber pre-set at 37℃and 60%. The two UTI groups were intraperitoneally injected with UTI at 5×104 U/kg 10 min before or after heat stress, and the two saline groups were given then equal amounts of saline in the same manner. The core body temperature of mice was monitored by a mercury thermometer every 30 min in the first 1.5 h during heating. The core temperature was measured, then every 15 min until it reached 42.7℃, which was taken as the onset of heatstroke. The animals were allowed to recover passively at ambient temperature for 6 h. The lung histopathological changes, protein concentration in BALF, lung wet/dry weight ratios, lung water content, and pulmonary microvascular permeability were assayed after 6 h of recovery at 37 ℃. Results Compared with the control group, the heatstroke model group and two saline groups displayed more severe lung damage and pathological morphology changes, and the lung wet/dry weight ratio, protein concentration in BALF, lung water content and pulmonary microvascular permeability were also significantly increased. These effects were significantly alleviated in UTI treated group. Pretreat ment with UTI significantly prolonged the time to Tc≥42.7 ℃ but had no effect on lung injury induced by heatstroke. Conclusion UTI can reduce the pulmonaryedema and inflammatory exudation in acute lung injury caused by heatstroke.【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2015(000)009【总页数】6页(P1277-1282)【关键词】重症中暑;乌司他丁;急性肺损伤;支气管肺泡灌洗;伊文氏蓝;肺湿干比【作者】周耿标;徐秋林;刘亚楠;王郑莲;郭晓华;苏磊【作者单位】广州中医药大学，广东广州 510405;广州军区广州总医院重症医学科，广东广州 510010;广州军区广州总医院重症医学科，广东广州 510010;广州军区广州总医院重症医学科，广东广州 510010;南方医科大学病理生理学教研室//广东省医学休克微循环重点实验室，广东广州 510515;广州军区广州总医院重症医学科，广东广州 510010【正文语种】中文中暑是一种严重威胁人民群众生命的热相关疾病，尽管当前中暑的救治措施已经取得很大进展，其死亡率仍在10%～15%。

乌司他丁对百草枯诱导大鼠急性肺损伤保护作用的实验研
究的开题报告
一、研究背景和意义
百草枯是目前全球广泛使用的除草剂，但长期接触和误食会导致急性肺损伤，并可能导致死亡。

乌司他丁是一种止咳药和解热药，已经被证明对多种炎症和粘液分泌
具有抑制作用。

本研究旨在探讨乌司他丁是否能够对百草枯诱导的急性肺损伤进行保
护作用，并探究其作用机制，为百草枯急性毒性的防治提供有力的科学依据。

二、研究内容和方法
1. 实验对象及组分
本研究使用Wistar大鼠作为实验对象，分为四组：正常对照组，百草枯诱导组，乌司他丁治疗组和百草枯+乌司他丁治疗组。

2.模型建立
百草枯诱导组和百草枯+乌司他丁治疗组用胃管灌胃给予百草枯（100mg/kg），每日一次，持续三天。

乌司他丁治疗组和百草枯+乌司他丁治疗组用乌司他丁
（50mg/kg），每日一次，持续三天。

正常对照组不进行任何处理。

3.指标检测
检测每组实验动物的体重，肺功能指标，肺组织病理学变化，并测定肺部炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的表达水平。

三、预期结果
乌司他丁能够减轻百草枯诱导大鼠肺损伤，并通过减少肺功能参数和肺炎症因子表达来发挥保护作用。

同时，乌司他丁还可能通过抑制白细胞介素、炎症细胞及其介
质等组分的产生，发挥其抗炎作用。

四、结论
本研究的预期结果将进一步阐明乌司他丁对百草枯诱导大鼠急性肺损伤的保护作用，为百草枯急性毒性的防治提供有力的科学依据。

乌司他丁对内毒素性急性肺损伤大鼠的保护作用及机制的实验研究研究背景和目的急性肺损伤(Acute lung injury, ALI)是指机体遭受心源性以外的各种肺内外因素(严重感染、创伤、休克、酸中毒及有害气体吸入等)打击后,出现弥漫性肺泡-毛细血管膜损伤所导致肺水肿和微肺不张等病理特征的临床综合征。

ALI的临床表现为进行性呼吸窘迫和顽固性低氧血症,晚期常并发急性呼吸窘迫综合征(Acute respiratory distress syndrome, ARDS)及多脏器功能障碍综合征(Multiple organ dysfunction syndrome, MODS),发病急,病情凶险,死亡率高居不下,是现代危重医学中的难题。

ALI的发病机理错综复杂,迄今尚未完全阐明。

目前人们普遍认为ALI是全身炎症反应综合征(Systemic inflammatory response syndrom, SIRS)在肺部的表现,其本质是一种肺内过度性、失控性炎性反应。

而ALI与一般炎症的区别在于它在某些环节上存在抗炎性反应和炎性反应的失衡,损伤与抗损伤的平衡机制遭到破坏,细胞因子在此过程中起到至关重要的作用。

因此,细胞因子网络的平衡及其上游的调控研究,成为All发病机制的研究重点,对于揭示ALI的发生发展以及以此为靶因素的治疗措施的研究具有重要意义。

细胞因子按其在炎性反应中的不同作用可分为促炎性细胞因子和抗炎性细胞因子。

促炎性细胞因子中肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor, TNF)-α是释放最早、最重要的内源性介质,在炎症过程中具有启动和触发作用。

白细胞介素(Interleukin, IL)-10则被认为是体内最重要的抗炎性细胞因子,可作用于炎症级联反应的多个环节,在全身性炎性反应过程中起保护作用。

丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-aetivated protein kinase, MAPK)是真核细胞内的一类丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶,通过磷酸化其他细胞蛋白,从胞浆移位至细胞核而调节转录因子的活性,启动相关细胞因子和炎性介质的基因表达。

乌司他丁对急性肺损伤保护作用的实验研究的开题报告
题目：乌司他丁对急性肺损伤保护作用的实验研究
研究背景和意义：急性肺损伤是一种常见的临床疾病，通常是由于感染、炎症、创伤
和其他因素引起的。

该病具有高发病率和死亡率，导致生命质量下降和经济负担增加。

因此，探索有效的治疗方案对急性肺损伤的发生和发展具有重要意义。

乌司他丁是一种钙离子拮抗剂，已广泛用于治疗心血管疾病。

一些研究表明，乌司他
丁可能具有对急性肺损伤的保护作用，但其具体机制尚不清楚。

因此，本研究旨在探
究乌司他丁对急性肺损伤的保护作用及其可能的机制。

研究内容和方法：本研究将采用小鼠模型和细胞模型，探究乌司他丁对急性肺损伤的
保护作用及其机制。

具体方法包括以下几个方面：
1. 建立小鼠急性肺损伤模型，分为对照组、模型组和乌司他丁处理组。

观察小鼠的生
存率、肺组织病理学变化、炎性反应等指标，探究乌司他丁对急性肺损伤的保护作用。

2. 进行细胞实验，利用乌司他丁处理肺泡上皮细胞（A549细胞）模型，模拟急性肺损伤的炎症反应，观察乌司他丁对细胞的保护作用和相关的细胞信号途径的变化。

3. 通过实验数据统计和分析，探讨乌司他丁对急性肺损伤的保护机制，以及其对炎性
反应和细胞凋亡等生物学过程的影响。

预期结果和意义：本研究预计可以探索乌司他丁对急性肺损伤的保护作用及其可能的
机制，为临床治疗急性肺损伤提供新的策略。

同时，本研究的结果也可能为乌司他丁
在其他相关疾病的治疗中提供新的线索和发展方向。

乌司他丁对急性肺损伤保护作用的研究发表时间：2018-08-08T13:17:28.193Z 来源：《心理医生》2018年7月20期作者：王娟娟郑霞[导读] 乌司他丁是广谱的蛋白酶抑制剂，可以抑制多种蛋白酶的活性，如胰蛋白酶、α-糜蛋白酶王娟娟郑霞（泰安市妇幼保健院山东泰安 271000）【摘要】乌司他丁是广谱的蛋白酶抑制剂，可以抑制多种蛋白酶的活性，如胰蛋白酶、α-糜蛋白酶、纤溶酶等，可抑制炎症介质释放、稳定溶酶体膜和清除氧自由基。

近年来的研究证实，乌司他丁可以通过抑制炎症细胞的聚集、减少炎症因子的释放、调节机体氧化/抗氧化平衡以及减轻肺部水肿等途径起到肺部保护作用。

【关键词】乌司他丁；急性肺损伤；脂多糖【中图分类号】R563.8 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2018）20-0193-03急性肺损伤（ALI）[1]是指心源性以外的肺内、外致病因素导致的急性、进行性、缺氧性呼吸衰竭。

ALI有着从轻到重的连续过程，重度ALI即为急性呼吸窘迫综合征，ALI是ARDS的早期阶段。

急性肺损伤的病理改变是广泛严重的肺泡损害和间质性肺水肿，其中上皮细胞及内皮细胞对保持肺泡毛细血管屏障的完整性发挥关键作用。

乌司他丁（UTI）又称是尿胰蛋白酶抑制剂，是一种广谱的蛋白酶抑制剂，可以抑制多种蛋白酶的活性，如胰蛋白酶、α-糜蛋白酶、纤溶酶等，可以抑制炎症介质释放、稳定溶酶体膜和清除氧自由基[2]。

广泛应用于急性胰腺炎、休克、体外循环、急性肺损伤以及全身炎症反应综合征、多器官功能障碍综合征等急性疾病。

现将乌司他丁治疗急性肺损伤（ALI）/急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的研究进展综述如下。

1.抑制炎症细胞的聚集急性肺损伤时肺脏组织出现大量炎性细胞浸润，其中多形核白细胞（PMN）是肺内炎症反应的重要的效应细胞。

PMN的聚集是ALI 常见的病理学改变。

中性粒细胞可以分泌多种蛋白酶，以髓过氧化物酶（MPO）为其所特有，MPO的活性与PMN的浸润程度成正比关系，因此MPO被认为是PMN浸润的可靠指标，肺组织MPO活性可反映PMN扣押与聚集程度[3]。

乌司他丁对内毒素肺损伤大鼠的保护作用林雪松;向军;蔡亚娜;汪乐【摘要】目的：探讨乌司他丁对急性内毒素性肺损伤保护作用的机制。

方法取SD 大鼠20只，大鼠腹腔注射脂多糖（ LPS）5 mg·kg-1·d-1，按随机数字表法将大鼠分配进入乌司他丁组和对照组各10只。

乌司他丁组静脉给予乌司他丁50 kU·kg-1，对照组给予等量0.9％氯化钠溶液，观察大鼠水通道蛋白-1（AQP-1），AQP-5的表达变化及肺泡壁厚度变化以及肺水肿的程度。

结果对照组大鼠体内注射LPS后，AQP-1及AQP-5的表达持续性降低，乌司他丁组AQP-1及AQP-5降低不明显；对照组肺组织湿/干质量比值明显增高，乌司他丁组无明显变化。

对照组24，48，72 h的肺泡壁厚度（3.84±0.68），（6.32±1.08），（11.03±2.47）μm，乌司他丁组分别为（2.31±0.44），（3.76±0.82），（2.94±0.67）μm，无明显变化。

结论 AQP-1及AQP-5通过调节细胞通透性而导致肺水肿，乌司他丁通过减缓上述过程从而减轻内毒素性肺损伤的程度。

%Objective To investigate the protection mechanism of ulinastatin on bacterial endotoxin-induced acute lung injury. Methods Acute lung injury was induced by Escherichia colilipo-polysacch aride(LPS)5 mg·kg-1·d-1,intratracheally. Twenty SD rats were randomly divided into controlgroup(n=10)and ulinastatin group(n=10). Ulinastatid group received ulinastatin 50 kU·kg-1 ,the control groups received the same amount of 0. 9% sodium chloride solution. Then the expression changes of rat AQP-1 and AQP-5,alveolar wall thickness change and the degree of pulmonary edema were detected. Results After the injection of LPS into the rat,the expression of AQP-1 and AQP-5 in control group were continuouslydecreased,but those in ulinastatin group decreased were not obvious. The lung wet/dry weight ratio in the control group increased significantly,the not obvious changes in the ulinastain group. The thickness of the alveolar in 24,48,72 h of the control group w ere(3. 84±0. 68),(6. 32±1. 08),(11. 03±2.47)μm, respectively,and those in the ulinastian groups were(2. 31±0. 44)(,3. 76±0. 82)(,2. 94±0. 67)μm,respectively. Conclusion The AQP-1 and AQP-5 induced the occurrence of pulmonary edema by changing the cell permeability. Ulinastatin can slow down the process so as to reduce the degree of endotoxin-induced lung injury.【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2014(000)006【总页数】4页(P718-721)【关键词】乌司他丁;损伤,肺,急性;内毒素;水通道蛋白【作者】林雪松;向军;蔡亚娜;汪乐【作者单位】浙江省台州市中心医院烧伤科，台州 318000;上海交通大学附属瑞金医院烧伤科，上海 200025;浙江省台州市中心医院烧伤科，台州 318000;浙江省台州市中心医院烧伤科，台州 318000【正文语种】中文【中图分类】R965机体严重创伤及感染后常伴有急性肺损伤,可进一步发展为急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)。

乌司他丁治疗急性肺损伤的临床疗效研究摘要目的探讨乌司他丁治疗急性肺损伤的临床疗效。

方法80例急性肺损伤患者，随机分为对照组和实验组，各40例。

对照组患者采用常规治疗，实验组患者在对照组基础上联合乌司他丁治疗，观察比较两组患者治疗效果、呼吸频率（RR）、动脉血氧分压（PaO2）、动脉血二氧化碳分压（PaCO2）、氧合指数（PaO2/FiO2）、C反应蛋白（CRP）和乳酸水平差异。

结果实验组患者总有效率为90.00%，明显高于对照组的70.00%，差异有统计学意义（P＜0.05）。

实验组患者RR为（23.46±1.56）次/min，PaO2为（92.62±6.38）mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa），PaCO2为（33.99±4.95）mm Hg，PaO2/FiO2为（281.42±21.83）mm Hg，优于对照组的（27.86±1.74）次/min、（81.05±7.14）mm Hg、（38.85±5.29）mm Hg、（219.74±18.82）mm Hg，差异有统计学意义（P＜0.05）。

实验组患者CRP为（30.24±3.81）mg/L，乳酸为（1.01±0.15）mmol/L，低于对照组的（41.75±3.53）mg/L、（1.52±0.37）mmol/L，差异有统计学意义（P＜0.05）。

结论针对急性肺损伤患者应用乌司他丁治疗可明显提高治疗效果，改善血气指标和炎性指标，促进患者康复，值得推广应用。

关键词乌司他丁；急性肺损伤；疗效【Abstract】Objective To discuss the clinical efficacy of ulinastatin in the treatment of acute lung injury. Methods A total of 80 acute lung injury patients were randomly divided into control group and experimental group，with 40 cases in each group. The control group received conventional therapy，and the experimental group received ulinastatin on the basis of the conventional group. Observation and comparison were made on differences in treatment effect，respiratory rate （RR），partial pressure of oxygen （PaO2）partial pressure of carbon dioxide （PaCO2），oxygenation index （PaO2 /FiO2），C reactive protein （CRP）and lactic acid level between the two groups. Results The experimental group had obviously higher total effective rate as 90.00% than 70.00% in the control group，and the difference was statistically significant （P＜0.05）. The experimental group had RR as （23.46±1.56）times/min，PaO2 as （92.62±6.38）mm Hg （1mm Hg=0.133 kPa），PaCO2 as （33.99±4.95）mm Hg andPaO2 / FiO2 as （281.42±21.83）mm Hg，which were all better than （27.86±1.74）times/min，（81.05±7.14）mm Hg，（38.85±5.29）mm Hg and（219.74±18.82）mm Hg in the control group，and their difference was statistically significant （P＜0.05）. The experimental group had lower CRP as （30.24±3.81）mg/L，lactate as （1.01±0.15）mmol/Lthan （41.75±3.53）mg/L and （1.52±0.37）mmol/L in the control group，and their difference was statistically significant （P＜0.05）. Conclusion Application of ulinastatin in treating acute lung injury patients can obviously improve treatment effect，improve blood gas index and inflammatory index，and promote rehabilitation of patients. It is worthy of promotion and application.【Key words】Ulinastatin；Acute lung injury；Efficacy急性肺損伤为临床常见呼吸系统急症，若治疗不及时可引起急性呼吸窘迫综合征，影响患者生活质量。