大蒜根尖染色体观察实验报告
高熹168615140001
实验目的：
1、了解利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。
2、掌握大蒜根尖制片的方法。
3、通过对玻片的观察，统计染色体数目。
4、对比不同的大蒜根尖染色体数目，理解二倍体和四倍体的区别。
实验背景：
在自然条件下，机械损伤，射线辐射，温度骤变，及其它一些化学因素刺激，都可以使植物材料的染色体加倍，形成多倍体种群。近几十年来，随着人们对多倍体诱导机制研究的深入，由人工模拟自然条件来诱导多倍体植物获得了长足进展，形成了不少由价值的人工多倍体种群。
实验原理：
用秋水仙素溶液处理植物的种子或幼苗，是常用的人工诱导多倍体的有效方法。秋水仙素是从百合科秋水仙属的一个种，秋水仙的种子及器官中提取出来的一种生物碱，其分子式为C22H25NO6，秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合，从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成，但是姐妹染色单体照常想成，只是没有被拉向两级，于是染色体数目加倍。当药剂的作用消除后，由于多倍体细胞继续分裂，便得到多倍体组织，以后则产生新的多倍体植株。
实验器材：
刀片，镊子，双目显微镜，载玻片，盖玻片，烧杯，滤纸。
实验材料：
经秋水仙素处理过的大蒜根。（秋水仙素溶液配制取秋水仙素1g（先用少量95%乙醇助溶），溶于250～500ml蒸馏水中，配成浓度为0.2～0.4%的溶液，冰箱中保存。将大蒜架在盛水的烧杯中进行水培。待根尖长到1cm时，将大蒜盛在0.4%秋水仙素溶液的瓶盖或小烧杯上，避光处理24小时，然后再水培24小时加倍后根尖很肥大。）
实验试剂：
1mol/L的HCl溶液，改良苯酚品红溶液。
实验步骤：
1、取2-4根大蒜根放入烧杯中，加入1mol/L的HCl浸没，60℃水域水解5min。
2、弃掉HCl，自来水冲洗大蒜根三次，冲洗干净表面的HCl。
3、在载玻片上切下2-3mm的根尖，用纸吸去多余的水分，在载玻片上用刀片切
碎根尖，滴加1滴改良苯酚品红溶液，染色15min。
4、压片。镜检比较四倍体与二倍体细胞。
实验结果：
遗传学实验小论文 题目：染发剂对大蒜根尖产生微核的浓度研究班级：10生本班 学号：2010061107 姓名：郑兴艳 指导老师：高坚强 日期：2012-10-20
染发剂对大蒜根尖产生微核的浓度研究 摘要： 大蒜根尖细胞微核技术是一种以染色体损伤及纺锤丝毒性等为测试终点的植物体细胞检测方法,因具有材料方便,培养简单、技术容易掌握、准确、快速、有明显剂量-效应等优点。测定大蒜根尖细胞中出现的微核率,以此分析染发剂的诱变性,从而判断其对遗传物质是否有毒性效应。我们用不同浓度的染发剂处理大蒜根尖细胞，统计微核千分率（微核细胞率）。对统计结果进行单因素分析得：染发剂对大蒜染色体是有显著影响的。 关键词：染发剂;大蒜根尖;微核; 正文: 微核是真核细胞中的一种异常结构，是由落后染色体形成的核形小块，游离于主核外，大小是主核的1/3以下[1]，它的折光率及细胞化学反应性质与主核一样，也具有合成DNA的能力[2]，已经证实，微核率的大小是和用药剂量或辐射累积效应呈正相关，所以微核测可用于化学物质的遗传毒性研究[3]。 随着人们生活水平的不断提高，美发护发已普遍为广大公众所接受，目前作为美发的主要产品之一的染发剂使用相当普及，使用范围几乎包括男女老少，主要以青年以上各年龄段为消费主体。为了了解其潜在的危害性并评价其安全性，我们按1999年卫生部卫生法制与监督司制定的《化妆品卫生规范》的要求进行[4]。选用了市场上常见的染发剂，以大蒜为材料，探索染发剂对大蒜根尖细胞微核的诱变效应。 微核的形成机理 据陈宝伟的研究分析[8]，微核的形成主要有三种方式：一是化学毒性物质导致，包括染色体断裂剂和非整倍体剂。前者可诱发染色体发生断裂的遗传毒性物质，后者可以使染色体和纺锤体联结发生障碍或纺锤体功能受损；二是核体出芽，即间期的细胞核向外形成瘤状突起，形成芽体最后脱离主核形成微核；三是放射线导致，放射线可以引起DNA损伤，产生错误修复的双链断裂，导致微核出现。 材料与方法
根尖的结构和功能 应小中 一、根尖的结构和功能 植物根尖纵切面 的显微结构图。 根尖结构细胞结构特点主要作用根冠细胞壁薄，排列疏松保护作用 分生区（生长点）细胞排列紧密，细胞壁薄，细胞质浓，没 有液泡，细胞具分裂能力，细胞呈小正 方体。 分生作用，补充根冠细 胞和伸长区细胞 伸长区停止分裂，体积增大变长，能较快生长， 细胞近似小正方形。使根伸长，伸象土壤深处。 根毛区（成熟区）细胞停止分裂生长至成熟，分化为各种组 织，有许多根毛根尖吸水的主要部位，具吸收、输导作用。 注意：1、根的长度能够不断地增加，就是因为分生区的细胞能够分裂和伸长区细胞能够伸长的缘故。 2、根尖吸水的主要部位在根毛区 例1、小丽想要移栽月季花，她应该怎样做（） A、小心地连根拔起后移栽 B、小心地连根拔起后，将根洗净后移栽 C、小心连根带土的挖起后移栽，尽量不损伤根系 D、以上方法均可以 解析：农业生产中，移植作物幼苗时要带土移植，这样使得根尖损伤比较少，使植物在适应新环境前可从被夹带的土壤中获取水分和营养物质，成活率高。故答案为（C）二、植物细胞吸水和失水的条件：一般情况下，当植物根毛细胞的细胞液中营养物质的质量分数高于土壤溶液的质量分数，细胞吸水；反之，当植物根毛细胞的细胞液中营养物质的质量分数低于土壤溶液的质量分数，细胞失水。
例2、实验观察：植物细胞的吸水和失水 在两个大小相似的萝卜中各挖一个大小相等的洞，向甲、乙萝卜的洞中分别注入等量的清水和浓盐水，各用一个装有玻璃管的橡皮塞塞住洞口， 记下玻璃管内液面的高度（如图）。放置一段时间，分析 会出现的变化： ⑴甲玻璃管内液面高度将（），乙玻璃管内液面高度 将（） A、上升 B、下降 C、不变 ⑵用手捏萝卜的感觉甲＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿， 乙＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 ⑶通过该实验，你能得出什么结论？＿＿＿＿＿＿＿＿ （4）请设计一个实验，粗略地测定萝卜细胞的细胞液浓度。 解析：通过该实验可以得到植物细胞可以吸水，也可以失水， 而植物细胞吸水或失水，主要取决于细胞周围水溶液的浓度和细胞液的浓度的大小：当周围水溶液的浓度小于细胞液的浓度时，细胞就吸水；当周围水溶液的浓度大于细胞液的浓度时，细胞就失水。故甲中的液面高度将下降（B），而乙中的液面将上升(A)。(当萝卜不失水时，比较硬，失水后就比较软。 对于第（4）小题，可以这样设计：配制不同浓度的盐水，装置如上图所示（准备多个并标号），然后将不同浓度的盐水依次注入到标不同号码的萝卜上洞内，然后观察玻璃管内液面变化，变化不大者为该溶液的浓度，即约为萝卜细胞细胞质的浓度，原因为细胞周围水溶液的浓度和细胞液的浓度相等，所以萝卜细胞既不吸水也不失水。
[课程]种植观察记录表 植物培植观察记录表 观察人:_______ 日期蒜苗成长记录 4月9日找4个健康的大蒜头,剥掉外面的松皮,均匀地摆放在一个小盆里;加清水漫过大蒜根部;放在向阳的窗台上，每天换水。 4月10日没有动静 4月11日没有动静 4月12日蒜头顶端有鹅黄色的小芽出现 4月13日一个小蒜苗开始有动静，露出一点儿头，用尺子量一下，一共3毫米。 4月14日其它3个蒜苗也开始有动静了，量一下，分别是2毫米、4毫米、5毫 米、6毫米。 4月15日 1号:最高5毫米;2号:最高7毫米; 3号:最高10毫米;4号:最高8毫米 4月16日 1号:最高2厘米;2号:最高3厘米; 3号:最高5厘米;4号:最高4厘米 4月17日 1号:最高3厘米;2号:最高4厘米; 3号:最高9厘米;4号:最高5厘米 4月18日 1号:最高6厘米;2号:最高8厘米; 3号:最高12厘米;4号:最高10厘米 植物培植观察记录表 观察人:_______ 日期成长记录
植物培植观察心得观察人:_______ 植物培植观察记录表观察人:_______ 日期成长记录 植物培植观察心得观察人:_______ 植物培植观察记录表观察人:_______ 日期成长记录 植物培植观察心得观察人:_______ 植物培植观察记录表观察人:_______ 日期成长记录 植物培植观察心得观察人:_______ 植物培植观察记录表观察人:_______ 日期成长记录 植物培植观察心得观察人:_______ 植物培植观察记录表观察人:_______
日期成长记录 植物培植观察心得观察人:_______ 植物培植观察记录表观察人:_______ 日期成长记录 植物培植观察心得观察人:_______ 植物培植观察记录表观察人:_______ 日期成长记录 植物培植观察心得观察人:_______ 植物培植观察记录表观察人:_______ 日期成长记录 植物培植观察心得观察人:_______
大蒜根尖微核试验 摘要 微核简称(MCN)，是真核生物细胞中的一种异常结构，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生。本实验我们用生活中和实验室里的多种诱变剂来处理大蒜根尖细胞，通过压片镜检来观察统计大蒜分生区细胞内微核的数目，检测不同诱变剂的诱变强度。 前言 微核简称(MCN)，是真核生物细胞中的一种异常结构，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生。在细胞间期微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外、大小应在主核1／3以下。微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样。一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的断片产生的，但有些实验也证明整条的染色体或多条染色体也能形成微核。这些断片或染色体在细胞分裂末期被两个子细胞核所排斥便形成了第三个核块。已经证实微核率的大小是和用药的剂量或辐射累积效应呈正相关，这一点和染色体畸变的情况一样。所以可用简易的间期微核计数来代替繁杂的中期畸变染色体计数。由于大量新的化合物的合成，原子能应用，各种各样工业废物的排出，使人们很需要有一套高度灵敏，技术简单的测试系统来监视环境的变化。只有真核的测试系统更能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害，在这方面，微核测试是一种比较理想的方法。且有研究显示以植物进行微核测试与以动物进行的一致率可达99%以上。目前微核测试已经广泛应用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、染色体遗传疾病及癌症前期诊断等各方面。 材料与方法 材料 1实验器具：显微镜、解剖针、盖玻片、载玻片、培养皿 2实验试剂：改良苯酚品红染液、浓盐酸、叠氮化钠、清水、2%迪彩防干枯洗发液、2%驱蚊剂、0.2%NaNO2、1%氧氟沙星 3实验材料：大蒜根尖 方法 1将大蒜浸水催根 将剥皮的大蒜放入培养皿中，倒入清水使大蒜根部没入水中，置于25℃下培养24小时，待初生根长出1-2cm左右，根毛发育良好，即可用来检测。 2处理 将培养皿中的清水倒出，将事先准备好的4种诱变剂及阴性（清水）、阳性（叠氮化钠）对照倒入培养皿中，注意标记准确，使各种诱变剂完全浸泡根尖。大蒜根尖处理24h后，将诱变剂及阴性、阳性对照换成清水后恢复培养24h。 3固定根尖细胞 将恢复后的大蒜从根尖顶端切下1cm长的幼根放入离心管中，以卡纳氏固定液进行固定2-24h后，保存于70%乙醇溶液中。 4压片 将离心管中的液体倒出，加入足够的浓盐酸解离3-5min，再用蒸馏水洗涤3次（每次1-2min）。从根尖处切下约0.5mm置于载玻片上，滴加苯酚品红染色15min后，盖上盖玻片，包两层滤纸，用镊子钝部按压至根尖散成云雾状。 5镜检
蒜生长的观察记录 令狐文艳 西安市莲湖区龙首村小学六年级3班王子欣 2011年11月17日 今天妈妈在菜市场买了一塑料袋大蒜。我想：这么多，反正好长时间才能吃完，为什么不拿一瓣大蒜去做发芽实验呢？于是，我拿了挑了一瓣大小中等、健康的大蒜，放在平地碗中，杯子里适当加了一些清水，放在餐厅的桌子上，开始观察。 2011年11月18日 下午放学后，回家的第一件事就是观察：大蒜有没有什么变化？只是发现泡大蒜的清水变得浑浊了，有点泛黄泛黄的，还有些刺鼻的大蒜味。 清水变浑浊这个问题我觉得很奇怪，便上网查资料，资料上讲：清水之所以那么浑浊，是因为大蒜在清水里泡了一整天，清水把大蒜的味道和颜色吸收了，大蒜的外皮和底部有些物质溶进水中，所以清水才会那么浑浊不清。并且不需要换新水，这种浑浊的水的营养价值很高，这样的话，蒜苗才能更快的成长。 大蒜在水中贪婪地吸收着水分，像一个花苞一样，总觉得比原来胖了一些。 2011年11月20日
早晨起来，路过餐厅时，眼前的景象不禁令我大吃一惊：大蒜终于发芽了。我盼星星盼月亮终于盼到了这一天！小芽从大蒜的尖上冒出来，一两个绿中透黄。 但是，我发大蒜下没有长根！一般的植物都是先长根后发芽，而大蒜为什么这么“另类”呢？原来，大蒜芽很长的时候，根还是很短，这时的营养靠块茎自身胚芽供给。 啊！大蒜多么“与众不同”，神奇啊！ 2011年11月22日 不经意之间发现小蒜苗长得真快呀！呀！眨眼工夫，就窜了那么高，用尺子量了一下最高的4厘米，蒜苗尖微微泛着黄色，这时突然发现，大蒜下冒出了根！大蒜根为弦线状须根，黄白色、无根毛，根长0.5-1厘米不等，这些根就像柔滑的丝带，装饰着成长的蒜苗显得大蒜可爱又生动。 我很奇怪，为什么大蒜生长得这么快？原来，大蒜每年6月收获，在炎热的夏季进行休眠，到了潮湿而温暖的气候，就会从休眠中醒来,发芽生长，开始新一轮的生长周期。这是蒜在适应环境过程中形成的生长习性。 2011年11月26日 一早起床，我看见大蒜最长的有14厘米了，而且有一两个蒜苗长出了两三个叶子了。 我摸了蒜瓣发现它空了，觉得很奇怪。就去问妈妈，妈妈说：“它们的营养都被长出来的芽吸收了。”我觉得真神奇。2011年11月30日
大蒜根尖染色体实验报告 一、 实验目的与实验要求 1、掌握洋葱培养的方法，掌握利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。 2、掌握洋葱根尖制片的方法，复习染色、压片的基本操作。 3、通过对于有丝分裂相的观察，统计洋葱染色体数目，加深对于细胞有丝分裂过程的理解。 4、对比进行多倍体诱导前后的洋葱根尖，理解四倍体与二倍体的区别，认识微核和植物细胞分裂期的各形态特征。 5、体验开放式实验教学，培养生物实验意识，提高学习的主动性、获取实验知识的能力和撰写实验报告水平。 二、 实验方案 1、实验仪器 显微镜、载玻片、盖玻片、试管、烧杯、小塑料管、滤纸、刀片、解剖针、滤纸等 2、实验药品 新鲜、健康的洋葱鳞茎一个；0.02%秋水仙素、1mol/L HCl、醋酸洋红染液、卡诺氏固定液，碱性品红、乙酸，乙醇等。 3、实验原理 (1 洋葱的根尖 洋葱根尖的整体结构如右图，其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象，其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。 (2 多倍体的诱导
多倍体的诱导使用秋水仙素，秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合，从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成，但是姐妹染色单体照常想成，只是没有被拉向两级，于是染色体数目加倍。 各步骤的作用：固定液可以迅速杀死细胞，保持细胞形态在有丝分裂相。解离可以破坏细胞的胞间层（果胶），使细胞之间的联系变松散，有利于压片和染色。漂洗可以洗去过量的盐酸，防止解离过度 破坏细胞结构或影响染色效果（盐酸是酸性，而醋酸洋红是碱性染料）。 (3 有丝分裂 完整的有丝分裂相包括G1期（合成前期）、S 期（合成期）、G2期（合成后期）和M 期（分裂期），其中G1期、S 期和G2期合称间期，细胞完成DNA 的复制以及有丝分裂的准备，而M 期又可以分为前期、中期、后期和末期，为了形态观察的方便，本实验采用后一种分法。如表一。 表一植物有丝分裂各时期特点 4、实验步骤 (1 将大蒜剥皮后放进垫了滤纸的培养基中，加入清水，放进25℃恒温
实验（4）观察根毛根尖的结构 (2009-05-05 22:58:22) 转载▼ 标签： 生物实验 生物课堂 生物教育 公益活动 实验四：观察根毛根尖的结构 从根的尖端向上长约3 cm左右的部分，形态学上称之为根尖。根尖包括根冠、分生区（生长点）、伸长区和根毛区（成熟区）。各区的细胞和组织各有其特点和功能。本实验的目的在于为教师提供根毛与根尖结构的简易观察方法和应注意的问题，以及教学方面的一些建议。 一、实验准备 (一）材料: 小麦，玉米，豆类等的种子萌发后产生了幼根的材料。 材料的培养： 取测定过种子萌发率的上述种子，放置在垫有潮湿滤纸（卫生纸、纱布亦可）的培养皿中，继续培养。为使幼根上长出发达的根毛，宜将培养皿放在一个大的玻璃缸内，缸底加水（注意水切勿漫过培养皿）并加盖，用以保持小环境的湿润，为根毛的生长创造有利条件。一般开始萌发的种子，在25℃左右的温度下，经过3～4 d即可长出3 cm以上的幼根，并且幼根上长有发达的根毛。 （二）用品: 放大镜，显微镜，载玻片，盖玻片，镊子，盛有清水的滴瓶，碘液，棉花，滤纸（或纱布）。 二、方法步骤 根尖外形的观察 取小麦（或其他种子）的幼根，放置在载玻片上，用放大镜观察它的外形和分区。根的尖端略为透明的部分是根冠，呈帽状。由于与土壤接触，根冠细胞经常遭到破坏，所以根冠外层细胞黏液化，很润滑，这有利于根尖在土壤中生长。分生区的大部分被根冠所包被，其上部与伸长区相接，在外观上与伸长区无明显的界限。根尖的最上部是根毛区。在放大镜下可以清楚地看到，根毛是根毛区表皮细胞向外侧生长的突起，上部根毛逐渐伸长以及根毛区根毛密布的情况。在根毛区和分生区之间的一小段是伸长区。由于伸长区细胞在外形上无明显的形态特征，所以只能待制片后在显微镜下观察它们的形态结构。以上观察的内容，也可以让学生将根尖放在载玻片上，不加盖片，在低倍的显微镜下进行观察，其效果更好。尤其是根毛区的表皮细胞产生的根毛和根毛逐渐伸长的情况，都清晰可见。根尖结构的观察
4月1日星期二天气晴 水培大蒜 今天，老师给我们布置了一篇观察日记——水培大蒜。 晚饭过后，我找到了一个白盘子，我想，让大蒜生活在洁白的环境里。 我在水中泡下了二十四个小蒜瓣，每个小蒜瓣还用自己身上的衣服紧紧地裹住周围蒜瓣的身体，像亲密的兄弟姐妹一样不肯分开。每个小蒜瓣的颜色都是白里带点儿粉，上面还披着一层粉紫色的蒜皮，看上去十分可爱。 我看着大蒜，心里想：大蒜啊！我盼你快点长大吧！大蒜有的长的比较扁，有的长的比较园；闻起来酸酸的，有一股刺鼻的味道。大蒜很像一个个活泼、可爱的孩子。
4月3日星期五天气晴 大蒜发芽了 一早起床，我又去看大蒜，发现已经有很多的蒜瓣发芽了，露出了它嫩绿色的、尖尖的小芽，我兴奋地跳了起来，我的大蒜终于发芽了。 大蒜长胖了许多，它的身体已经快把身上的衣服——蒜皮都给撑破了。它的底部还长出了好多白白的小胡须，这胡须是帮助它们吸收水分，快快长高、长大的法宝。我往盘子里又添上些水，我对大蒜说：“快点儿多喝点儿水，这样你们就能长得又高又壮了！” 吃完晚饭之后，我觉得蒜味又重了。蒜瓣开始微微变大并且蒜苗又有点绿了，是不是水太多了呢？我这样想，于是我减了一点 水。
4月5日星期日天气雨 蒜芽长高了 早晨，我来到大蒜身旁，陡然发现蒜芽竟然长高了。 它一下子长高了好多，已接近八厘米了，它长得细细的、直直的，我把它端到窗台上晒太阳，那些长出来的小芽芽翠绿翠绿的，真好看。有的像刚出土的笋芽，好奇地张望着这个很陌生的世界；有的像田野里复苏返青的麦苗，正在努力向上。 这青翠的小苗随风摇摆，好像在对其他还没有发芽的姐妹们说：“快点儿睡醒吧，快点儿来和我们一起看看这外面的世界！”我又给大蒜换了些水，我对它说：“快点长，长大了我就奖励你。” 这两天大蒜喝水可真多呀，我每天都要给它们加水……
植物染色体结构变异的诱导及鉴定 10农生一班第一组卢** 摘要用物理因素（X射线，γ射线和快中子等）和化学药剂等处理植物材料，染色体的断裂频率会大大增加。在染色体移向两极时无着丝粒染色体由于没有着色粒而不受纺锤丝的牵引而随机地停留在细胞的各个部位，称为染色体断片。细胞分裂末期或二分体时期或四分体时期，染色体断片形成核状的结构，称为微核或拟核。 关键词物理因素、化学因素、染色体、微核 引言本文利用植物根尖作为材料，用不同的诱导剂经行处理，利用细胞生物学方法观察其微、核率来表示动植物受遗传损伤程度的一种方法.微核的形成是细胞受诱变剂作用后的一种遗传学终点。此实验可以应用于寻找最佳诱变剂,和环境敏感型植物,最终用来指导实际生活中的环保工作,其中包括预测实际环境可能引起污染的因素,进行环境监测的科学方法,可用于环境监测的敏感型植物.从而让科学研究真正服务于人类事业. 1材料及方法 1.1验材料及器具 1.1.1验材料洋葱和大蒜根尖 1.1.2验器具恒温培养箱、显微镜、计数器、镊子、载玻片、盖玻片、烧杯、白瓷盘、紫外灯(长为365nm 10W) 、吸水纸 1.1.3验试剂 CuSO4浓度(0、0.1、0.2、0.5、1.0、5.0和10.0 mg/L) ；实验室常用XX 牌子的洗手液，分别稀释25，50，75，100，200倍，并用稀盐酸调节酸碱度，使pH为7-8；卡诺固定液(95%酒精:冰醋酸3:l), 70%乙醇, 1mol/LHCl, 95%酒精和浓盐酸,卡宝品红染色液 1.2 步骤 1.2.1发根： 选取大小均匀，无病害的大蒜鳞茎，洋葱鳞茎，置于铺好含充分的纱布的培养皿中，并将培养皿放进25℃的恒温箱中2~3d。在此过程中要不断加水，保证植物生根所需水分。在根长至2cm时，即根细胞分裂高峰期取出。 1.2.2诱变处理 重金属处理：取出若干个处理组大蒜，每组至少需要15个植株,分别用硫酸铜溶液浓度(0、0.1、0.2、0.5、1.0、5.0和10.0 mg/L)，每个浓度梯度下分别处理其根尖24小时。诱变处理后，用清水冲洗根表面的溶液，用蒸馏水继续培养24h。 紫外线处理：取出6个处理组大蒜，洋葱，每组至少需要15个植株，在细胞分裂高峰期，用10 W紫外灯距离分别，26cm照射，分别照射0min,20 min,25 min,30 min,35 min。并在照射后的3d分别取根尖制片观察微核数，处理时的水温，气温均为24。C，空气相对湿度80%.
观察根尖的结构 2 根尖的结构 教师:穆晓军 一、教学目标: 1、知识目标:识别植物根尖的基本结构及相关特 2、能力目标:培养学生自学能力，实验操作、观察能力 3、情感目标:培养学生实事求是的科学态度 二、教学重点: 识别植物根系的基本结构，说出各部分的主要功能。 三、教学难点:描述根尖各部分的细胞结构特点。 四、课前准备 1、学生准备 (1)预习本课，观察教科书中的插图。 (2)课前培养:利用培养皿培养小麦(大麦)种子，使其长出树条幼根。上课前一天，将幼根朝上放置，盖上培养皿盖(培养皿内保持较适宜温度)，使根毛大量长出。 2、教师准备 (1)根据教科书，准备观察“根尖的结构”的材料用具。不同之处:一是准备小麦(大麦)种子萌发后的根尖，以备用肉眼或者放大镜观察。二是用压片法制作临时装片(用紫药水染色可观察到根尖各部分细胞的特点)。 五、教学过程 (一)导入新课教师出示资料:
人曾对一年生苹果树苗的根系做过细致的观察，发现其分支总数达50000条之多，而树干分支不过10条，也就是说根的分支能力是地上部分的数千倍。引导学生通过阅读资料，产生疑问并自己提出问题，根的生长速度为什么这么快,根的结构是怎样的,为什么根毛这么多,等等。以此引发学生产生丰富的联想，提出问题，并作出最贴近问题答案的假设，训练学生掌握正确科学探究的方法，促使学生产生探究的兴趣。 (二)探究过程: 1、观察“根尖模式图”，掌握根尖的基本结构。 2、实验方案 (1)用肉眼、放大镜观察根尖，直观感受根尖各部分的外观形态。 用显微镜观察根尖的临时装片，再观察根尖的永久装片，再对比“根尖模式图”，总结根尖的基本结构。用显微镜观察根尖的结构时，要求学生从尖端向上依次观察，教师巡回指导，指出观察的方法和观察的角度等。组织学生讨论，通过问题讨论，总结出根尖的结构，随观察的次序提出问题:根冠、分生区、伸长区和成熟区的细胞的体积大小，排列和形态是怎样的,你还观察到哪些结构,
微核试验 一、研究的目的与意义： 1：知道微核产生的原理。 2：学会识别微核以及计算微核率。 3：学用微核试验来评价药物、放射线、有毒物质等对人体细胞或体外培养细胞遗传学损伤。 4：了解不同化学试剂对细胞各个分裂期的影响。 由于大量新的化合物的合成，原子能应用，各种各样工业废物的排出，使人们很需要有一套高度灵敏，技术简单的测试系统来监视环境的变化。真核测试系统能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害。利用微核实验这种遗传毒性试验方法可以检测检测染色体或者有丝分裂器损伤，计数细胞的微核率。检测已存在或潜在的危害。 二、研究内容与技术路线 2.1 研究内容： 通过观察不同浓度的1,2,4-三氯苯和铬以及它们的交互作用对大蒜根尖细胞微核率以及不同分裂期细胞的比例的影响，来判断其遗传毒性。 2.2 技术路线：冷冻保存 24h 孚尔根染液配制 三、实验方法 3.1实验材料
大蒜、甲醇、冰乙酸、碱性品红、偏重亚硫酸钠、比重 1.18 的浓盐酸、蒸馏水、酒精、重铬酸钾、氯苯、丙酮、显微镜、载玻片、盖玻片、定性滤纸、烧杯、100毫升容量瓶、200 毫升容量瓶、镊子、刀片、纱布、青霉素小瓶、移液管、试管 3.2试剂准备： 1、1mol/LHCl ：用10mL 移液管量取8.69mL 浓盐酸加入100mL 容量瓶，用在蒸馏水定容至100mL 。 2、50mg/L、100mg/L、：称取170mg重铬酸钾，加水溶解，在200mL容量瓶中定容，配制300mg/L的Gr 6+母液，然后稀释到50mg/L、100mg/L。 3、卡诺式固定液：将甲醇：冰乙酸按3:1 比例混合配制 5、Schiff 氏试剂：称取0.5g 碱性品红加入到100mL 煮沸的蒸馏水中，时时振荡，继续煮5min，使碱性品红充分溶解。冷却致50C，用滤纸过滤，滤液中加入 10ml1mol/LHCI，冷却致25C，加入1.5g偏重亚硫酸钠，充分振荡，塞紧瓶塞，在室温暗处静置至少24h ，用粗滤纸过滤于棕色瓶中，封瓶塞，外包黑纸。贮存于冷暗处（4C冰箱中）备用。 3.3实验过程： 3.3.1、材料准备： 将大蒜剥皮后放进垫了滤纸的培养基中，加入清水，放进25°C恒温培养箱中 2~3天，催化大蒜生根。 选择根长0.5~1cm 且不定根生长情况差不多的大蒜分为10 组 3.3.2、Schiff 氏试剂检验：
微核试验 摘要：利用大蒜根尖细胞微核染色与计数技术测定不同浓度6价铬和1.2,4-三氯苯以及它们的不同浓度混合液对大蒜根尖分生区细胞微核率和细胞分裂各期的影响。以蒸馏水为对照组，设置的实验组为3组不同浓度的6价铬和三氯苯以及它们的混合液。用孚尔根染液法对不同试剂及各浓度的处理的根尖进行染色。在显微镜下观察各试剂各浓度处理下的微核率以及不同分裂期细胞的比例。 关键字：孚尔根染色法、微核、微核率、分裂期细胞 Abstract:Use of garlic root tip cell micronucleus dyeing and counting technology . Different concentrations of chromium 6 and 1,2, 4 - t hree hlorobenzene as well as their different concentration mixture to garlic root tip meristematic cells in the areas of micronucleus rate and the influence of each stage of cell division.With distilled water as control group, the group set up for the three groups of different concentrations of chromium 6 and 3 chlorobenzene and their https://www.doczj.com/doc/fb14698497.html,efu's root dye solution for different reagent and the concentration of the treatment of root tip for dyeing. Under the microscope to observe the reagent concentration under the treatment of micronucleus rate and different proportion of split phase cells Key Words：Fu's root staining method、micronucleus、Micronucleus rate、Split phase cells 一、研究的目的与意义： 1：知道微核产生的原理。 2：学会识别微核以及计算微核率。 3：学用微核试验来评价药物、放射线、有毒物质等对人体细胞或体外培养细胞遗传学损伤。 4：了解不同化学试剂对细胞各个分裂期的影响。 由于大量新的化合物的合成，原子能应用，各种各样工业废物的排出，使人们很需要有一套高度灵敏，技术简单的测试系统来监视环境的变化。真核测试系统能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害。利用微核实验这种遗传毒性试验方法可以检测检测染色体或者有丝分裂器损伤，计数细胞的微核率。检测已存在或潜在的危害。 二、研究进展 微核( micronucleus, 简称MCN) , 是真核生物细胞中的一种异常结构, 是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。一般认为, 微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体片断产生的。在细胞有丝分裂时, 受到有害理化因子的损伤, 染 色体发生断裂, 在下一次分裂后期, 丧失着丝粒的染色体片断行动滞后, 不能进
蒜生长的观察记录 2014年10月20日 今天妈妈在菜市场买了一塑料袋大蒜。我想：这么多，反正好长时间才能吃完，为什么不拿一瓣大蒜去做发芽实验呢？于是，我拿了挑了一瓣大小中等、健康的大蒜，放在平地碗中，杯子里适当加了一些清水，放在餐厅的桌子上，开始观察。 2014年10月26日 下午放学后，回家的第一件事就是观察：大蒜有没有什么变化？只是发现泡大蒜的清水变得浑浊了，有点泛黄泛黄的，还有些刺鼻的大蒜味。 清水变浑浊这个问题我觉得很奇怪，便上网查资料，资料上讲：清水之所以那么浑浊，是因为大蒜在清水里泡了一整天，清水把大蒜的味道和颜色吸收了，大蒜的外皮和底部有些物质溶进水中，所以清水才会那么浑浊不清。并且不需要换新水，这种浑浊的水的营养价值很高，这样的话，蒜苗才能更快的成长。 大蒜在水中贪婪地吸收着水分，像一个花苞一样，总觉得比原来胖了一些。 2014年11月1日
早晨起来，路过餐厅时，眼前的景象不禁令我大吃一惊：大蒜终于发芽了。我盼星星盼月亮终于盼到了这一天！小芽从大蒜的尖上冒出来，一两个绿中透黄。 但是，我发大蒜下没有长根！一般的植物都是先长根后发芽，而大蒜为什么这么“另类”呢？原来，大蒜芽很长的时候，根还是很短，这时的营养靠块茎自身胚芽供给。 啊！大蒜多么“与众不同”，神奇啊！ 2014年11月6日 不经意之间发现小蒜苗长得真快呀！呀！眨眼工夫，就窜了那么高，用尺子量了一下最高的4厘米，蒜苗尖微微泛着黄色，这时突然发现，大蒜下冒出了根！大蒜根为弦线状须根，黄白色、无根毛，根长0.5-1厘米不等，这些根就像柔滑的丝带，装饰着成长的蒜苗显得大蒜可爱又生动。 我很奇怪，为什么大蒜生长得这么快？原来，大蒜每年6月收获，在炎热的夏季进行休眠，到了潮湿而温暖的气候，就会从休眠中醒来,发芽生长，开始新一轮的生长周期。这是蒜在适应环境过程中形成的生长习性。 2014年11月11日 一早起床，我看见大蒜最长的有14厘米了，而且有一两个蒜苗长出了两三个叶子了。
根的结构和功能 教学目标 知识目标 1、能够表述根尖外形及根毛特点。 2、准确描述根尖各部分结构及其功能 , 明确相邻各部分之间的联系。 能力目标 通过组织学生用放大镜和显微镜观察根尖的结构 , 培养学生的观察能力并使学生使用放大镜和显微镜观察植物组织的动作技能达到熟练水平。 情感目标 通过学习根尖各部分结构的联系以及各部分与其功能相适应的特点 , 使学生接受辩证唯物主义观点与科学方法论的教育 , 体会到生物体是统一整体并处于发展变化之中。 教学建议 一、知识体系图解 二、教材分析 1、 " 根尖各部分结构和功能 " 是本节的重点知识。众所周知 , 植物体的根是由根尖发育而成的。根尖为什么能够发育成根 , 这与其结构紧密相关。而根尖的结构特点又决定了根尖的功能。根尖的功能又决定着整株植物的生与死。所以 , 只有把握了根尖的各部分结构和功能 , 才能更好地了解根和根的功能 , 为后续知识的把握打下良好的基础。
2、 " 识别根尖各部分细胞结构特点及其相应的功能 " 是本节的难点知识。教材中的插图或挂图都是根的结构模式图 , 而显微镜下观察的根尖细胞结构 , 大多是不规则的 , 这就要求 教师在引导学生观察根尖细胞结构时 , 把书本知识与实践结合起来 , 认清显微镜下根尖各部分的结构特点。避免学生对细胞结构的熟悉趋于模式化。这样更有利于练习学生把握知识的灵活性。 3、在根尖的各部分结构的教学过程中 , 还要非凡注重一个问题 , 就是学生轻易把根尖的四个部分看成是界限分明的 , 而不是互相连续的。这就应该在最后研究根尖的发展变化的时候 , 指出根尖的四部分是互相连续的 , 各部分之间并没有明显的界限 , 各部分是依次向前发展变化的。最后 , 教师要让学生明白 , 根尖的四个组成部分是由分生区的细胞经过细胞分裂、细胞生长和细胞分化而形成的 , 使学生既复习了已经学过的知识 , 又形成了根尖是发展变化 的动态观点。 三、教法建议 本节课可以通过实验观察、分析 , 按照由整体到局部 , 由宏观到微观的顺序让学生了解根尖的结构及功能。 课前利用小麦或其他植物 , 使其萌发并长出数条幼根。在课上先指导学生用肉眼观察根尖 , 教师要指出从根的尖端到长有绒毛的一段根就是根尖 , 同时要求学生观察一下根尖以上的部位 , 弄清根尖在一条幼根上所占比例的大小。帮助学生从根尖的外形上区分各部分的形态、色泽等特点 , 如 :根尖尖端处稍带黄色的帽状结构是根冠 ; 根冠内部一团稍稍发暗的部位是分生区 ; 分生区以上白色、表面光滑的部位是伸长区 ; 伸长区以上长有根毛的部位是成熟区。在成熟区的上端 , 还可以看到已经枯萎的根毛。 用显微镜观察根尖结构时 , 教师要要求学生按照一定的顺序依次进行观察 , 并配合使用挂图或投影 , 帮助学生把握根尖各部分细胞的结构特点 , 同时引导学生
大蒜根尖染色体实验报告 一、实验目的与实验要求 1、掌握洋葱培养的方法，掌握利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。 2、掌握洋葱根尖制片的方法，复习染色、压片的基本操作。 3、通过对于有丝分裂相的观察，统计洋葱染色体数目，加深对于细胞有丝 分裂过程的理解。 4、对比进行多倍体诱导前后的洋葱根尖，理解四倍体与二倍体的区别，认 识微核和植物细胞分裂期的各形态特征。 5、体验开放式实验教学，培养生物实验意识，提高学习的主动性、获取实 验知识的能力和撰写实验报告水平。 二、实验方案 1、实验仪器 显微镜、载玻片、盖玻片、试管、烧杯、小塑料管、滤纸、刀片、解剖 针、滤纸等 2、实验药品 新鲜、健康的洋葱鳞茎一个；0.02%秋水仙素、1mol/L HCl、醋酸洋红染 液、卡诺氏固定液，碱性品红、乙酸，乙醇等。 3、实验原理 (1)洋葱的根尖 洋葱根尖的整体结构如右图，其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象， 其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。 (2)多倍体的诱导 多倍体的诱导使用秋水仙素，秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合，从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成，但是姐妹染色单体照常想 成，只是没有被拉向两级，于是染色体数目加倍。 各步骤的作用：固定液可以迅速杀死细胞，保持细胞形态在有丝分裂相。解离可以破坏细胞的胞间层（果胶），使细胞之间的联系变 松散，有利于压片和染色。漂洗可以洗去过量的盐酸，防止解离过度
破坏细胞结构或影响染色效果（盐酸是酸性，而醋酸洋红是碱性染料）。 (3)有丝分裂 完整的有丝分裂相包括G1期（合成前期）、S期（合成期）、G2期（合成后期）和M期（分裂期），其中G1期、S期和G2期合称间 期，细胞完成DNA的复制以及有丝分裂的准备，而M期又可以分为 前期、中期、后期和末期，为了形态观察的方便，本实验采用后一种 分法。如表一。 表一植物有丝分裂各时期特点 4、实验步骤 (1)将大蒜剥皮后放进垫了滤纸的培养基中，加入清水，放进25℃恒温 培养箱中2~3天，催化大蒜生根。 (2)选择根长0.5~1cm且不定根生长情况差不多的大蒜分为10组。 (3)在大蒜生根之后，先选取一些根尖放进卡诺式固定液中固定3个小时， 用Schiff氏试剂染色，镜检，观察染色体是否能染上色以及染色效果。 若染色效果不行，则重新配制Schiff氏试剂，直至染色效果良好，然 后将其贮存于4℃冰箱中准备使用。 (4)将分好组的大蒜分别用清水、50mg/L Gr6+、100mg/L Gr6+、150mg/L Gr6+、30 mg/L 1,2,4-三氯苯、40 mg/L 1,2,4-三氯苯、50 mg/L 1,2,4-三 氯苯、浓度分别为50mg/L Gr6+和30 mg/L 1,2,4-三氯苯的混合液、 100mg/L Gr6+和40 mg/L 1,2,4-三氯苯的混合液、150mg/L Gr6+和50 mg/L 1,2,4-三氯苯的混合液培养24小时。清水组为对照组。
洋葱根尖染色体观察
大蒜根尖多倍体诱导与染色体观察 实验目的： 1、了解利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。 2、掌握大蒜根尖制片的方法。 3、通过对玻片的观察，统计染色体数目。 4、对比不同的大蒜根尖染色体数目，理解二倍体和四倍体的区别。 实验原理： 1.有丝分裂 完整的有丝分裂相包括G1期（合成前期）、S期（合成期）、G2期（合成后期）和M期（分裂期），其中G1期、S期和G2期合称间期，细胞完成DNA 的复制以及有丝分裂的准备，而M期又可以分为前期、中期、后期和末期，为了形态观察的方便，本实验采用后一种分法。观察有丝分裂，重点在于观察染色体的形态。在细胞分裂前期，细胞核解体，染色质凝聚显现出染色体的形态；在前中期，染色体散乱地分布于细胞的中部；在中期，纺锤体形成，染色体受到微管的牵引，着丝粒成行排列于赤道板上；在后期，染色体受到动粒微管的牵引，向细胞两级运动；在末期，染色体重新解螺旋，细胞核重新形成。细胞染色体过程示意图见图1. 仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢2
图1：细胞有丝分裂过程示意图 2.大蒜的根尖 大蒜根尖的整体结构如图2，其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象，其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。 仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢3
图2：大蒜根尖结构示意图 3.多倍体诱导 秋水仙素易溶于冷水、不易溶于热水、有毒、针状结晶或淡黄色粉末，是诱导多倍体的一种常用试剂，其是从百合科植物秋水仙的鳞茎和种子中提取出来的一种生物碱。它的作用机理是与微管蛋白单体结合，抑制微管的形成，进一步抑制纺锤体的形成，使染色单体分离受阻，形成同源多倍体。因此，秋水仙素作用于正在分裂的细胞，如生长点才能产生作用，诱导多倍体的形成。秋水仙素诱导多倍体在蔬菜和观赏植物的应用非常广泛，但是在大蒜方面的报道却很 少。 图3：秋水仙素的化学结构式 实验器材： 实验材料：经秋水仙素处理过的大蒜根。（秋水仙素溶液配制取秋水仙素1g （先用少量95%乙醇助溶），溶于250～500ml蒸馏水中，配成浓度为0.2～0.4%的溶液，冰箱中保存。将大蒜架在盛水的烧杯中进行水培。待根尖长到 1cm时，将大蒜盛在0.4%秋水仙素溶液的瓶盖或小烧杯上，避光处理24小时，然后再水培24小时加倍后根尖很肥大。） 实验试剂：1mol/L的HCl溶液，改良苯酚品红溶液。 实验器材：刀片，镊子，双目显微镜，载玻片，盖玻片，烧杯，滤纸。 实验步骤： 1、取材：取大蒜发根至0.5-1cm，然后转入盛有0.15%秋水仙素水溶 液的培养皿中继续培养24小时到30小时，待观察到根部有膨大时 取出固定。（一般植物细胞周期17-18小时） 2、固定：在卡诺固定液中固定24小时，移至70%乙醇中保存或者备 用。 仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢4
观察根毛和根尖的结构 班级姓名日期 一、追求要求 用放大镜观察根尖外形及根毛。用显微镜观察根尖纵切面，认识根尖各部分的结构特点及其功能。 二．材料用具： 三方法步骤 （一）、用肉眼和放大镜观察根毛及根尖外形 ．结合（图培养豆类根毛的装置），对着光线先用肉眼观察试管内种子的幼根，找到着生在幼根上的白色“绒毛”，这就是根毛。再用放大镜仔细观察根毛。 ．用肉眼和放大镜观察根尖外形 （二）、用显微镜观察根尖纵切面切片。 对照（图根尖纵切结构模式图），在低倍或高倍显微镜下，从根尖的最前端向上仔细辨认出根冠、分生区（生长点）、伸长区和成熟区（根毛区）四个部分。识别每一部分细胞结构有何特点。根尖由、、、四部分组成。 、根冠：位于(根尖\根毛)的顶端,细胞体积较(大\小),排列(不规则\规则).根冠具有（保护\支持)分生区的作用. 、分生区：大部分被(根尖\根冠)包围.细胞体积较(大\小),排列(紧密\疏松),具有很强的(分裂\分生)能力,能不断产生新细胞. 、伸长区：位于(分生区\根冠)上方.细胞能(迅速\缓慢)伸长，几小时能伸长为原来的倍以上，是根生长最（快、慢）的部分。根能不断向土壤深处生长，是与（伸长区、分生区）细胞迅速伸长分不开的。伸长区也能吸收少量水分和矿物质。 、成熟区：位于（伸长区\分生区）上方.细胞(停止\继续)伸长,细胞内有很(大\小)的液泡,液泡里充满(细胞液\细胞质).表皮细胞向外突起形成(根毛\表皮),表皮以内的细胞开始(分化\分裂)形成组织.例如,位于中心部分的某些细胞,细胞质和细胞核消失,上下相邻细胞的横壁也消失,形成了导管. 成熟区以上部位：根毛消失，根内形成导管、帅管。 五．[讨论]：.移栽幼苗,为什么带土移栽容易成活? 提示：幼苗的根系尚不发达,根尖比较柔弱,生有大量的根毛.根尖及根毛与土粒紧紧连在一起.移栽幼苗时若除去根部土壤,就会伤及根尖及根毛,因而会使幼苗根部吸收水分和矿物质的功能减弱,降低了移栽幼苗的成活率. .根的吸收功能主要在根尖的哪一部分? 提示：成熟区生有大量的根毛,使表皮细胞的吸收面积大大增加,是吸收水分和无机盐的主要部位. 六、绘图：在显微镜下，选取有代表性的根尖各部分细胞绘制细胞图（包括根冠、分生区、伸长区、成熟区细胞，在图的右侧标注根尖各部分名称。注意各部分细胞的大小及形状） 观察叶片结构 班级姓名日期 一、追求要求 、练习徒手切片 、认识叶片的结构 、画叶片的表皮细胞和保卫细胞图
观察根毛和根尖的结构实验教案 一、教学目标： 1、知识目标：识别植物根尖的基本结构及相关特点 2、能力目标：培养学生自学能力，实验操作、观察能力 3、情感目标：培养学生实事求是的科学态度 二、教学重点： 识别植物根系的基本结构，说出各部分的主要功能。 三、教学难点： 描述根尖各部分的细胞结构特点。 四、课前准备 1、学生准备 （1）预习本课，观察教科书中的插图。 （2）课前培养：利用培养皿培养小麦（大麦）种子，使其长出树条幼根。上课前一天，将幼根朝上放置，盖上培养皿盖（培养皿内保持较适宜温度），使根毛大量长出。 2、教师准备 （1）根据教科书，准备观察“根尖的结构”的材料用具。不同之处：一是准备小麦（大麦）种子萌发后的根尖，以备用肉眼或者放大镜观察。二是用压片法制作临时装片（用紫药水染色可观察到根尖各部分细胞的特点）。 五、教学过程 (一)导入新课 教师出示资料： 人曾对一年生苹果树苗的根系做过细致的观察，发现其分支总数达50000条之多，而树干分支不过10条，也就是说根的分支能力是地上部分的数千倍。 引导学生通过阅读资料，产生疑问并自己提出问题，根的生长速度为什么这么快？根的结构是怎样的？为什么根毛这么多？等等。以此引发学生产生丰富的联想，提出问题，并作出最贴近问题答案的假设，训练学生掌握正确科学探究的方法，促使学生产生探究的兴趣。 (二)探究过程 1、观察“根尖模式图”，掌握根尖的基本结构。 2、实验方案 （1）用肉眼、放大镜观察根尖，直观感受根尖各部分的外观形态。] （2）用显微镜观察根尖的临时装片，再观察根尖的永久装片，再对比“根尖模式图”，总结根尖的基本结构。 用显微镜观察根尖的结构时，要求学生从尖端向上依次观察，教师巡回指导，指出观察的方法和观察的角度等。组织学生讨论，通过问题讨论，总结出根尖的结