中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品中微生物学检验通则
1 主肠内容与适用范围
本标准规定了食品中微生物学检验的取样、检验和结果报告的一般要求。
本标准适用于出口食品中微生物学检验一般规则。
2 取样
2.1一般要求
2.1.1取样必须遵循无菌操作程序，防止一切可能的外来污染。每取完一份样品，应更换新的取样用具或将用过的取样用具迅速消毒后，再取另一份样品，以免交叉污染。
2.1.2从取样至开始检验的全过程中，应采取必要的措施防止食品中固有微生物的数量和生长能力发生变化。
2.1.3确定检验批，应注意产品的均质性和来源。如厂产r包括若干不同的质量档次或来源，应将质量档次或来源相同的那些产品划分在一起，组成若干分批，然!I由这些分批按分层随机取样法取样。
2.1.4取样必须是随机取样，可利用随机取样表见〔附录A(补充件)〕或其他适当方法进行。
2.2取样数量
2.2.1 出口贸易合同对食品取样数量有明确规定的，按合同规定取样;出口贸易合同没有规定具体取样数量的，可参照同一产品的品质检验取样数量取样，或按单位包装件数N的、IWN值取样。无论采取何种方法取样，每批货物的取样数量不得少于5件。
2.2.2对于需要检验沙门氏菌的食品，取样数量应适当增加，最低不少于8件。
2.2.3如出口贸易合同规定在一批货物的若干个子样中，任何一个子样均不得发现致病菌或含菌量不得超过某一限量，而检验方法又有足够的灵敏度时，可将各子样合并为一个样品进行检验，并根据并样后的检验结果判定整批产品合格与否。
2.2.4实验室检验样品一般为25g，如合同有特殊规定，按合同规定办理。
2.3 取样方法
2.3.1直接食用的小包装食品;尽可能取原包装，直到检验前不要开封，以防污染。
2.3.2统装或大容器包装的液体食品
2.3.2.1取样前摇动或用灭菌棒搅拌液体，尽量使其达到均质。
2.3-2.2取样时应先将取样用具浸人液体内略加漂洗，然后再取所需量的样品。装入灭菌盛样容器的量，不应超过其容量的四分之三，以便于检验前将样品摇匀
2.3-2.3取完样品后，应用消毒的温度计播入液体内测量食品的温度，并作记录。尽可能不用水银温度计测量，以防温度计破碎后水银污染食品。
2.3-2.4如为非冷藏易腐食品，应迅速将所取样品冷却至。-40Co
2.3.3统装或大容器包装的固体和半固体食品
2.3.3.1侮份样品应用灭菌取样器由几个不同部位采取，一起放入一个灭菌容器内。
2.3
3.2 注意不要使样品过度潮湿，以防食品中固有的细菌增殖。
2.3.4 统装或大容器包装的冷冻食品
2.3.4.1对大块冷冻食品，应从几个不同部位用灭菌工具取样，使之有充分的代表性。
2.3-4.2在将样品送达实验室前，要始终保持样品处于冷冻状态。样品一旦融化，不可使其再冻，保持
冷却即可。
2.3.5生产过程中的取样
2.3.5.1划分检验批次，应注意同批产品质量的均一性。
2.3.5.2如用固定在贮液桶或流水作业线上的取样笼头取样时，应事先将笼头消毒。
2.15.3 当用自动取样器取不需要冷却的粉状或固定食品时，必须履行相应的管理办法，保证产品的
代表性不被人为地破坏。
2.4 样品的标记
2.4.1所有盛样容器必须有和样品一致的标记。在标记上应记明产品标志与号码和样品顺序号以及其
他需要说明的情况。标记应牢固具‘防水性，字迹不会被擦掉或脱色。
2.4.2 当样品需要托运或由非专职取样人员运送时，必须封识样品容器。
2.5取样报告
当取样结束后.应由取样人写出完整的取样报告。取样报告应包括以下内容:
a. 产品名称;
b.加工者和买卖双方名称:
c.发货地点和到达地点;
d. 发货日期和到达日期;
e. 发运工具;
f.每批货物的标志和号码;
g.每批货物所包含的产品数量、大小和单位;
h 取样目的;
1. 取样方法:
S. 样品的大小和数量;
k.取样时产品的温度;
1. 取样时的气象状况;
m.取样日期、地点和时间;
n.检验样品的实验室名称和地址;
0.要求检验的项目;
P. 取样人签名。
2.6 样品的保存和运送
2.6.1 取样结束后应尽快将样品送往实验室检验。如不能及时运送，冷冻样品应存放在一15℃以下冰箱或冷藏库内;冷却和易腐食品存放在。-4℃冰箱或冷却库内;其他食品可放在常温冷暗处。
2.6.2运送冷冻和易腐食品应在包装容器内加适量的冷却剂或冷冻剂。保证途中样品不升温或不融化。必要时可于途中补加冷却剂或冷冻剂。
2.6.3如不能由专人携带送样时.也可托运。托运前必须将样品包装好，应能防破损，防冻结或防易腐和冷冻样品升温或融化。在包装上应注明“防碎”、“易腐”、“冷藏”等字样。
2.6.4作好样品运送记录，写明运送条件、日期、到达地点及其他需要说明的情况，
3 样品的验收、存放和检验样品的制备
3.1样品的验收和存放
3.1.1 当样品送达实验室后，应立即对照取样报告单核查样品。核查内容包括:
a. 样品件数;
b.包装是否完整;
c. 样品容器上的标记是否清晰可认;
d.测量样品温度并核对是否和取样时的食品温度一致;
e. 干燥样品有无受潮和细菌增殖征象;
f.冷冻样品是否融化;
g.易腐样品有无腐败征象。
3.1.2 记录样品核查结果并由核查人签字。
3.1.3 样品如不能及时检验，应及时存放在妥善的地方。
a. 冷冻样品应放入一15℃以下的冰箱内;
b. 易腐和冷却样品应放入。-4℃冰箱内;
c 干燥食品可放在常温冷暗处。
3.1.4 待检样品存放时间一般不应超过36ho
3.2 检验样品的制备
3.2.1样品的全部制备过程均应遵循无菌操作程序。
3.2.2检验冷冻样品前应先使其融化。可在。^-4"C融化，时间不超过18h，也可在温度不超过45℃的环境中融化，时间不超过15mine
3-2.3 检验液体或半固体样品前应先将其充分摇匀如容器已装满，可迅速翻转容器25次;如未装满，可于7s 内以30cm的幅度摇动25次。从混样到取样检验相隔时间不应超过3min,
3.2-4 检验千燥样品前应先用灭菌勺或刮板将样品搅拌均匀。
3.2.5开启样品容器前，先将容器表面擦干净，然后用70%乙醇消毒开启部位及其周围。
3.2.6非粘性液体样品(粘度不大于牛乳)，可直接用吸管吸取一定量，加于适量的稀释液或培养基内。吸管插人样品内的深度不应超过2.5cm，也不得将吸有样品的吸管浸入稀释液或培养基内
3.2.了粘性液体样品可用灭菌容器称取一定量，然后加入适量的稀释液或培养基。
3.2.8 固体和半固体祥品可用灭菌的均质杯称取一定量，再加适量的稀释液或培养基进行均质。从样品的均质到稀释和接种，相隔时间不应超过15min,
4 检验
4.1 凡出口食品的微生物学检验。必须按出口食品微生物学检验方法标准执行
4.2在检验中和食品及其稀释液、试剂、培养基接触的一切器皿必须经过有效的灭菌。所有检验操作，必须严格遵循无菌操作程序。
4.3制备试剂和培养基所用的水，应为无离子水或用玻璃器皿蒸馏的蒸馏水。水的质量应符合以下规格:
a.单一金属含量在。.05mg八000mL以下;
b.总金属含量不高于1.0mg/1000mL;
c. pH值在5.5至5.7之间;
d.残留氯含量不高于。.1mg/1000mL
4.4 实验室所用仪器、设备的性能，应定期检查和校正。
4.5新购的试剂和脱水合成培养基，在使用前应用已知菌进行试验，证明无毒、被检菌能正常在其中生长，方可使用。
4.6 每次检验都应用已知阳性菌和阴性菌作对照。
4.了检验结束后，所有带菌的培养基、试剂、稀释液和器皿必须尽快灭菌和洗刷。清洗过的器皿，不应残留洗涤剂痕迹。
5检验记录和结果的报告
5.1经检验的每份样品都应有完整的检验记录。记录的内容应包括:
a.样品名称;
b.样品来源(货主和产地);
c. 样品编号;
d.收样和开始检验日期;
e.检验项目和生长及各项反应情况;
f 评语和判定;
B-检验结束日期;
h，检验者和复核人签字。
5.2检验结束后，应尽快根据实际检验结果填写检验结果报告单，经有关负责人审核签字后，及时发证。
（国际贸易）中华人民共和国进出口商品检验法实施 条例
中华人民共和国国务院令 第447号 《中华人民共和国进出口商品检验法实施条例》已经2005年8月10日国务院第101次常务会议通过，现予公布，自2005年12月1日起施行。 总理温家宝 二○○五年八月三十壹日 中华人民共和国进出口商品检验法实施条例 第壹章总则 第壹条根据《中华人民共和国进出口商品检验法》（以下简称商检法）的规定，制定本条例。 第二条中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局（以下简称国家质检总局）主管全国进出口商品检验工作。 国家质检总局设于省、自治区、直辖市以及进出口商品的口岸、集散地的出入境检验检疫局及其分支机构（以下简称出入境检验检疫机构），管理所负责地区的进出口商品检验工作。
第三条国家质检总局应当依照商检法第四条规定，制定、调整必须实施检验的进出口商品目录（以下简称目录）且公布实施。 目录应当至少于实施之日30日前公布；于紧急情况下，应当不迟于实施之日公布。 国家质检总局制定、调整目录时，应当征求国务院对外贸易主管部门、海关总署等有关方面的意见。 第四条出入境检验检疫机构对列入目录的进出口商品以及法律、行政法规规定须经出入境检验检疫机构检验的其他进出口商品实施检验（以下称法定检验）。出入境检验检疫机构对法定检验以外的进出口商品，根据国家规定实施抽查检验。 第五条进出口药品的质量检验、计量器具的量值检定、锅炉压力容器的安全监督检验、船舶（包括海上平台、主要船用设备及材料）和集装箱的规范检验、飞机（包括飞机发动机、机载设备）的适航检验以及核承压设备的安全检验等项目，由有关法律、行政法规规定的机构实施检验。 第六条进出境的样品、礼品、暂准进出境的货物以及其他非贸易性物品，免予检验。可是，法律、行政法规另有规定的除外。
商品检验 1、商品检验也称货物检验，是指商品检验机构对商品的品种、数量（重量）、包装、安全 性能、卫生指标、残损情况、货物装运技术条件等进行检验和鉴定，从而确定货物的品质、数量（重量）和包装等是否与合同条款相一致，是否符合交易国家有关法律和法规的规定。 2、商品检验往往由有资格、权威、独立的第三者（专业检验机构）负责。一般要出具检验 证书，作为交接货物、支付货款和索赔理赔依据。 3、商品检验的内容： a)品质检验：主要是对货物的外观、化学成分、物理性能等进行检验。 b)数量和重（质）量检验：按合同规定的计量单位和计量方法对商品的数量和重（质） 量进行检验。 c)包装检验：指对包装的牢固度、完整性进行检验。 d)卫生检验：指对肉类罐头、奶制品、禽蛋及蛋制品、水果等货物进行检验。 e)残损鉴定：指对受损货物的残损部分予以鉴定，分析致残原因及其对商品使用价值 的影响，估计损失程度，出具证明等。 4、买方的检验权------交付、收到与接受： a)接受：买方认为卖方交付的货物符合合同要求，因而接收货物的过程。 b)收到不等于接受。收到货物后买方有权对货物进行检验，以决定是否接受。 c)买方接受后不能拒绝。 d)买方的部分接受视同整体接受。 5、检验的时间和地点 买卖合同中检验时间与地点的规定主要有以下几种： 第三种检验方式兼顾了买卖双方的利益，是我国进出口业务中最常用的一种。 6、检验的标准 对于商品进行残损检验时，以合同的有关条款、发票、装箱单、重量单、提单或运单、
保险单、外轮理货报告或船务记录等有效单证作为检验标准。 7、检验的方法 检验方法是包括对进出口商品的质量、数量、包装等进行检验的做法，包括抽样的数量及方法。实践中，检验的方法主要有：感官检验、化学检验、物理检验、微生物检验等。 （为避免不必要的争议，最好在签定合同时订明所用的具体检验方法。） 8、商检证书： 品质检验证书 重量/数量检验证书 包装检验证书 兽医检验证书 卫生检验证书 产地检验证书 价值检验证书 残损检验证书 消毒检验证书 温度检验证书 熏蒸证书 船舱检验证书 商检证书是证明卖方所交货物与合同相符的依据，是海关通关验放货物的有效证件。 9、进出口商品检验的一般程序 报验→抽样→检验→签证或发行 进口商品应最迟不少于1/3的对外索赔期的时间内填写报验单，同时提交合同、发票、货运单据等相关资料。
食品安全国家标准 食品微生物学检验产气荚膜梭菌检验 1范围 本标准规定了食品中产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens）的检验方法。 本标准适用于食品中产气荚膜梭菌的检验。 2设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： a）恒温培养箱：36℃±1℃； b）冰箱：2℃～5℃； c）恒温水浴箱：50℃±1℃，46℃±0.5℃； d）天平：感量0.1g； e）均质器； f）显微镜：10×～100×； g）无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头； h）无菌试管：18mm×180mm； i）无菌培养皿：直径90mm； j）pH计或pH比色管或精密pH试纸； k）厌氧培养装置。 3培养基和试剂 3.1胰胨-亚硫酸盐-环丝氨酸（TSC）琼脂：见附录A中A.1。 3.2液体硫乙醇酸盐培养基（FTG）：见附录A中A.2。 3.3缓冲动力-硝酸盐培养基：见附录A中A.3。 3.4乳糖-明胶培养基：见附录A中A.4。 3.5含铁牛乳培养基：见附录A中A.5。 3.60.1%蛋白胨水：见附录A中A.6。 3.7革兰氏染色液：见附录A中A.7。 3.8硝酸盐还原试剂：见附录A中A.8。 3.9缓冲甘油-氯化钠溶液：见附录A中A.9。 4检验程序
产气荚膜梭菌检验程序见图1。 图1产气荚膜梭菌检验程序 5 操作步骤5.1样品制备 5.1.1 样品采集后应尽快检验，若不能及时检验，可在2℃～5℃保存；如8h 内不能进行检验，应以 无菌操作称取25g （mL ）样品加入等量缓冲甘油-氯化钠溶液（液体样品应加双料），并尽快至于-60℃低温冰箱中冷冻保存或加干冰保存。5.1.2 以无菌操作称取25g （mL ）样品放入含有225mL 0.1%蛋白胨水（如为5.1.1中冷冻保存样品， 室温解冻后，加入200mL 0.1%蛋白胨水）的均质袋中，在拍击式均质器上连续均质1min ～2min ；或置于盛有225mL0.1%蛋白胨水的均质杯中，8000r/min ～10000r/min 均质1min ～2min ，作为1:10稀释液。5.1.3 以上述1:10稀释液按1mL 加0.1%蛋白胨水9mL 制备10-2～10-6 的系列稀释液。
一、进出口商品检验制度 根据《中华人民共和国进出口商品检验法》的规定，对于列入《进出口商品检验种类表》和其他法律、行政法规规定须经商检机构检验的进出口商品，必须依法实施检验。我国进出口商品检验工作的主管机关是国商品检验局，各省、自治区、直辖市商检局及其分支机构负责管理该地区的进出口商品检验工作。国家商检部门根据《商检法》和对外贸易发展的需要，制定、调整、公布《种类表》。 (一)适用范围 目前，列入《种类表》的进出口商品共18类，涉及海关税则税号200余个。凡是列入《种类表》的进出口商品，在办理进出口通关手续前，必须向商检机构申请商品检验。对暂时进出口货物、非销售用的展览品、陈列品、保税仓库货物、来料加工装配进出口货物、进出口样品和礼品、免税品、免税外汇商品以及其他非贸易性物品，除另有规定外，免予法定商品检验。 (二)有关手续及通关要求 列入《种类表》的进口商品，收货人必须向卸货口岸或者到达地的商检机构办理登记，海关凭商检机构在报关单上加盖的“已接受登记”印章验放。进口商品办理登记后，收货人必须在合同约定的或商检机构规定的检验地点、时间内，持有关单证向商检机构报验。 列入《种类表》的出口商品，发货人应当在商检机构规定的期限内持合同等必要单证，向商检机构报验，海关凭商检机构签发的检验证书、放行单或者在报关单上加盖的印章放行。 实施进出口商检的商品，若属国家规定应实施其他管制的，如许可管理、动植检，食检的，进出口货物通关时，还应办理相关的进出境手续。 二、动植物检疫制度 为了防止动植物传染病、寄生虫病和植物危险性病、虫、杂草以及其他有害生物的传入、传出，保护我国农、林、牧、渔业生产和人体健康，维护我国的对外贸易信誉，《中华人民共和国进出境动植物检疫法》规定，对进出境动植物及其产品实施强制性检疫。国家在各口岸设立动植物检疫机构，行使进出境动植物检疫的行政管理权。 (一)适用范围
什么是食品微生物检验 吴崇食质12级1班学号：20122629 微生物是个体难以用肉眼观察的一切微小生物之统称。微生物包括细菌、病毒、真菌、和少数藻类等。（但有些微生物是肉眼可以看见的，像属于真菌的蘑菇、灵芝等。）病毒是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的“非细胞生物”，但是它的生存必须依赖于活细胞。根据存在的不同环境分为空间微生物、海洋微生物等，按照细胞机构分类分为原核微生物和真核微生物。 微生物对人类最重要的影响之一是导致传染病的流行。在人类疾病中有50%是由病毒引起。微生物导致人类疾病的历史，也就是人类与之不断斗争的历史。在疾病的预防和治疗方面，人类取得了长足的进展，但是新现和再现的微生物感染还是不断发生，像大量的病毒性疾病一直缺乏有效的治疗药物。一些疾病的致病机制并不清楚。大量的广谱抗生素的滥用造成了强大的选择压力，使许多菌株发生变异，导致耐药性的产生，人类健康受到新的威胁。一些分节段的病毒之间可以通过重组或重配发生变异，最典型的例子就是流行性感冒病毒。每次流感大流行流感病毒都与前次导致感染的株型发生了变异，这种快速的变异给疫苗的设计和治疗造成了很大的障碍。而耐药性结核杆菌的出现使原本已近控制住的结核感染又在世界范围内猖獗起来。 微生物千姿百态，有些是腐败性的，即引起食品气味和组织结构发生不良变化。当然有些微生物是有益的，它们可用来生产如奶酪，面包，泡菜，啤酒和葡萄酒。微生物非常小，必须通过显微镜放大约1000 倍才能看到。比如中等大小的细菌，1000个叠加在一起只有句号那么大。想像一下一滴牛奶，每毫升腐败的牛奶中约有5千万个细菌，或者讲每夸脱牛奶中细菌总数约为50亿。也就是一滴牛奶中可能含有50 亿个细菌。 微生物能够致病，能够造成食品、布匹、皮革等发霉腐烂，但微生物也有有益的一面。最早是弗莱明从青霉菌抑制其它细菌的生长中发现了青霉素，这对医药界来讲是一个划时代的发现。后来大量的抗生素从放线菌等的代谢产物中筛选出来。抗生素的使用在第二次世界大战中挽救了无数人的生命。一些微生物被广
进出口商品检验 在国际贸易中，进出口商品检验是必不可少的和十分必要的。 １９８９年２月２１日，第七届全国人大常委会第六次会议通过了我国第一部有关进出口商品检验的法律－－《中华人民共和国进出口商品检验法》。并于当年８月１日起实施。 现在，全国商检机构有近二万名技术人员和专家，其中大多数受过高等教育，在从事专业检验和科研工作方面有丰富的实践经验。商检机构配备有精密的检验仪器设备，能胜任食品、土畜产品、化工产品、五金矿产、轻工、纺织、机械、电器、仪器仪表等商品检验和化学分析、物理实验和微生物检验。 目前，中国商检机构与世界上二百多家商品检验机构建立了广泛的业务与合作关系，在国际检验领域中的声誉越来越高。 商品检验知识 包装检验是根据外贸合同、标准和其他有关规定，对进出口商品的外包装和内包装以及包装标志进行检验。 包装检验首先核对外包装上的商品包装标志（标记、号码等）是否与进出口贸易合同相符。对进口商品主要检验外包装是否完好无损，包装材料、包装方式和衬垫物等是否符合合同规定要求。对外包装破损的商品，要另外进行验残，查明货损责任方以及货损程度。对发生残损的商品要检查其是否由于包装不良所引起。对出口商品的包装检验，除包装材料和包装方法必须符合外贸合同、标准规定外，还应检验商品内外包装是否牢固、完整、干燥、清洁，是否适于长途运输和保护商品质量、数量的习惯要求。 商检机构对进出口商品的包装检验，一般抽样或在当场检验，或进行衡器计重的同时结合进行。 品质检验亦称质量检验。运用各种检验手段，包括感官检验、化学检验、仪器分析、物理测试、微生物学检验等，进出口商品的品质、规格、等级等进行检验，确定其是否符合外贸合同（包括成交样品）、标准等规定。 品质检验的范围很广，大体上包括外观质量检验与内在质量检验两个方面：外观质量检验主要是对商品的外形、结构、花样、色泽、气味、触感、疵点、表面加工质量、表面缺陷等的检验；内在质量检验一般指有效成分的种类含量、有害物质的限量、商品的化学成分、物理性能、机械性能、工艺质量、使用效果等的检验。同一种商品根据不同的外形、尺寸、大小、造型、式样、定量、密度、包装类型等而有各种不同的规格。 卫生检验主要是对进出口食品检验其是否符合人类食用卫生条件，以保障人民健康和维护国家信誉。根据《中华人民共和国食品卫生法（试行）》规定：“进口的食品、食品添加剂、食品容器、包装材料和食品用工具及设备，必须符合国家卫生标准和卫生管理办法的规定。进口上款所列产品，由国境食品卫生监督检验机构进行卫生监督检验。进口单位在申报检验时，应当提供输出国（地区）所使用的农药、添加剂、熏蒸剂等有关资料和检验报告。海关凭国家卫生监督检验机构的证书放行。”又规定：“出口食品由国家进出口商品检验部门进行卫生监督、检验。海关凭国家进出口商品检验部门的证书放行。” 安全性能检验是根据国家规定和外贸合同、标准以及进口国的法令要求，对进出口商品有关安全性能方面的项目进行的检验，如易燃、易爆、易触电、易受毒害、易受伤害等，以保证生产使用和生命财产的安全。目前，除进出口船舶及主要船用设备材料和锅炉及压力容器的安全监督检验，根据国家规定分别由船舶检验机构和劳动部门的锅炉、压力容器安全监察机构负责监督检查外，其他进出口商品涉及安全性能方面的项目，由商检机构根据
食品卫生微生物学检验 1 主题内容与适用范围 本标准规定了食品卫生微生物学检验总则。 本标准适用于样品的采样、送检、检验及报告。 2 引用标准 GB 4789.17 食品卫生微生物学检验肉与肉制品检验 GB 4789.18 食品卫生微生物学检验乳与乳制品检验 GB 4789.19 食品卫生微生物学检验蛋与蛋制品检验 GB 4789.20 食品卫生微生物学检验水产食品检验 GB 4789.21 食品卫生微生物学检验清凉饮料检验 GB 4789.22 食品卫生微生物学检验调味品检验 GB 4789.23 食品卫生微生物学检验冷食菜、豆制品检验 GB 4789.24 食品卫生微生物学检验糖果、糕点、果脯检验 GB 4789.25 食品卫生微生物学检验酒类检验 GB 4789.26 食品卫生微生物学检验罐头检验 GB 4789.27 食品卫生微生物学检验鲜乳中抗生素残留量检验 3 设备和材料 探子、铲子、匙、采样器、试管、广口瓶、剪子、开罐器等。 4 样品的采集 在食品检验中，所采集的样品必须有代表性。食品因其加工批号、原料情况(来源、种类、地区、季节等)、加工方法、运输、保藏条件、销售中的各个环节(例如有无防蝇、防污染、防蟑螂及防鼠等设备)及销售人员的责任心和卫生认识水平等无不影响着食品卫生质量，因此必须考虑周密。 4.1 样品种类 样品种类可分为大样、中样、小样三种。大样系指一整批，中样是从样品各部分取得的混合样品，小样系指做分析用，称为检样。检样一般以25g为准，中样以200g为准。 4.2 采样方法 4.2.1 采样必须在无菌操作下进行。 4.2.2 采样用具：如探子、铲子、匙、采样器、试管、广口瓶、剪子和开罐器等，必须是灭菌的。 4.2.3 根据样品种类如袋、瓶和罐装者，应取完整的未开封的。如果样品很大，则需用无菌采样器取样；样品是固体粉末，应边取边混合；样品是液体的，通过振摇即可混匀；检样是冷冻食品，应保持在冷冻状态(可放在冰内、冰箱的冰盒内或低温冰箱内保存)，非冷冻食品需保持在0～5℃中保存。 4.3 采样数量 根据不同种类，采样数量有所不同，见下表。 各种样品采样数量 （图略） 续表 （图略）
食品微生物学检验GB 4789 系列知识点汇总 GB 4789.1-2016 食品卫生学检验总则 一、2016版总则变更内容 1.删除了标准中的英文名称、起草单位变更为中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局。 2.删除了规范性引用文件。 3.修改了实验室基本要求： 微生物专业教育或培训经历（如生物学、植 物学、医学、食品科学与工程、食品质量与安全等与微 生物有关的相关专业），具备相应的资质（应有岗位上岗 证、生物安全上岗证和压力容器上岗证），能够理解并正 确实施检验。 ①人员修改为检验人员实验室生物安全操作和消毒知识（相关标准及培训， 如GB 19489-2008 实验室生物安全通用要求、消毒技术 规范（2002））。 品。 确保自身安全。
有颜色视觉障碍的人员不能从事涉及辨色的实验（即无颜 色视觉障碍）。 ②环境与设施--突出温度、湿度和洁净度。 生物危害程度应与实验室生物防护水平相适应: 灭的微生物，如天花病毒。 间传播如霍乱弧菌。 病原微生物分类 沙门氏菌、单增李斯特氏菌。 第四类：通常不会引起人或动物疾病的微生物。 BSL-1）：操作第四类病原微生物（属于正压，适用 ） 实验室生物安全级别BSL-2）：操作第三类病原微生物（属于负压，适用 II级生物安全 ） BSL-3）：操作第二类病原微生物
四级（BSL-4）：操作第一类病原微生物 消毒：是杀死微生物的物理或化学手段，但不一定杀死其中的孢子。 灭菌：是杀死和去除所有微生物及其中孢子的过程。 蒸法消毒） 消毒剂表面消毒 微生物实验 高压灭菌 干热灭菌（180℃1h或170℃2h） 培养基和试剂灭菌 过滤除菌 紫外线消毒法：紫外灯管放射一定波长，破坏细菌或病毒的DNA和RNA，使他们丧失生存能力和繁殖能力，从而达到灭菌目的。紫外线的特点是对芽孢和营养细胞都能起作用，但细菌芽孢和霉菌芽孢对其抵抗力大，且紫外线穿透力极低，所以只能用于表面灭菌，对固体物质灭菌不彻底。
实习一食品的微生物学检验 实验目的：了解食品微生物检验的过程，常用指标及检验结果评价。 实验内容： （一）细菌总数的测定 1 定义：细菌总数是指1g或lml食品，经过处理，在pH7．4～7．6的普通营养琼脂平板上,35～370C培养24土2小时生长出来的细菌菌落总数。 2.实验试剂（1）琼脂（2）生理盐水（3）蛋白陈（4）牛肉膏（5）氯化钠 3.实验仪器：1）采样瓶（2）平皿（3）吸管（4）试管（5）孵箱 4.操作方法 （1）样品的采集与处理： 在采样和样品处理时，必须严格遵守无菌原则，采样后尽快检验。样品在室温下放 置最好不超过2小时，否则应置于冰箱内，在冰箱放置最长也不要超过12小时。 A 肉与肉制品的采集及处理： （1）样品的采集 ①生肉与内脏：如系屠宰场的猪，可于开腔后立即用灭菌刀采取两腿内侧肌肉509 左右；如果是鲜肉和冻肉，可用灭菌刀采取腿肉或其它部位肌肉5吨左右；，如系脾、肾,可取其全部;如系肝脏，则取靠近肝门带有淋巴结部分。样品采后用无菌镊子夹入灭菌玻璃容器或塑料袋内立即送检，样品内不得放人任何防腐剂。 ②熟肉及灌肠类：一般可取有代表性样品30～50克，肥瘦共存的肉，宜取瘦的，肥瘦难分或量不多时，要随机取样，灌肠类横断采样3～5块，样品取后放入灭菌容器内立即送检。 （b）样品处理。 凡由大块样品中采取一部分，，一般均须在表面，以一烙板灭菌或沸水进行表面灭菌。再用灭菌剪子剪掉表面部分，在无菌条件下，取深层肌肉或内脏10g放人灭菌
容器内，用灭菌剪子剪碎，加入灭菌河沙和灭菌生理盐水100ml研磨混匀制成1：10混悬液。熟肉及灌肠也可不用表面灭菌处理，而直接用无菌操作称取10g 放入灭菌容器内研磨或剪碎，再按上法制成1:10混悬液。 b．乳与乳制品（鲜乳、炼乳、奶粉、酸奶等）。 (a)样品的采集 1.鲜乳：如在畜牧场直接取样，先将牛乳头用酒精棉球表面擦拭消毒，弃去开始挤下的头两把奶，然后再用灭菌容器接取，同一头牛应在各乳头上各取一部分。如在奶站或销售点，可用灭菌采样器采取不同部位有代表性的样品，采后不加防腐剂，立即送检。若为同一批瓶装奶则随机取2～5瓶送检。 2.乳制品。最好采取原装样品，如无原装者，要用灭菌容器取不同部位有代表性的样品送检。 （b）样品处理： 1. 鲜乳：以无菌操作，直接用吸管取10ml加入90ml生理盐水作成1： 10稀释液（需用原液者例外）。 2. 奶粉：无菌称取10g样品，放入预温至450C的生理盐水90m1，溶后混匀制成1： 10稀释液。 3. 炼乳、酸乳：将瓶口或铁筒的表面用点燃的酒精棉球消毒，然后用石炭酸纱布盖好，再用灭菌开罐器开封，无菌称取10g样品放入灭菌容器内，加灭菌生理盐水90ml振摇均匀，制成1:10稀释液。 4. 奶油；将块状样品用灭菌刀取10g，加90ml生理盐水，放入450C 水浴中熔化，摇匀制成1:10稀释液。 C．蛋品: （a）样品采集： 鲜蛋：取完整的鲜蛋放入无菌袋内送检。 干全蛋，于蛋黄和干蛋白:将包装箱开口处用75％酒精棉球消毒后打开,用无菌采样器斜角插入箱底，使样品填满采样器，抽出采样器，用灭菌匙分上、。中、下各取 50g装人250ml广口瓶，混匀，送检。
外贸业务基础理论试卷（B 卷） 第1页 （共12页） 总分复查人 2011年全国外贸业务员考试 外贸业务基础理论试卷（B 卷） （考试时间：2011年5月15日 上午9:00—11:00） 题 号 一 二 三 四 五 总 分 阅卷组长 得 分 一、单项选择题（请将答案填涂在答题卡上， 答在试卷上无效。每小题1分，共40分） 1．与“整箱/整箱”货物交接方式对应的英文缩写是（ ）。 A ．FCL/FCL B ．FCL/LCL C ．LCL/LCL D ．LCL/FCL 2．组织境外旅游是属于（ ）。 A ．知识产权贸易 B ．服务贸易 C ．货物贸易 D ．技术贸易 3．以下支付方式对出口商的风险而言从小到大的排列顺序是（ ）。 A ．D/A ＜30%装运前T/T+70%L/C at sight ＜D/P at sight ＜装运前T/T B ．D/A ＜D/P at sight ＜30%装运前T/T+70%L/ C at sight ＜装运前T/T C ．装运前T/T ＜D/P at sight ＜30%装运前T/T+70%L/C at sight ＜D/A D ．装运前T/T ＜30%装运前T/T+70%L/C at sight ＜D/P at sight ＜D/A 4．根据《联合国国际货物销售合同公约》的规定，发盘内容可以不包括（ ）。 A ．品名 B ．数量 C ．检验 D ．单价 5．美国保险商实验室标准检验标志的英文缩写是（ ）。 A ．CCC B ．UL C ．ISO D ．GS 6．我国海关对高校以特定减免税进口的教学科研设备的监管年限为（ ）年。 A ．4 B ．5 C ．6 D ．7 得 分 评卷人 复查人 座位号
微生物取样方法、微生物检测标准 举例一： 一、空气采样及检验方法 1培养基：普通营养琼脂平板，按GB4789.28中3.7条配制 2采样（空气沉降法） 2.1布点：面积小于30平方米的车间，设一对角线，在线上取3点，即中心一点，两端在距墙1米处各取一点；面积大于30平方米的车间，设东、西、南、北、中5个点，其中东、西、南、北点均距墙1米。 2.2采样高度：与地面垂直高度80-150厘米。 2.3采样方法；用直径为9厘米的普通营养琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培养。 3培养：于37℃培养24小时。 4检测频率：每周 空气质量标准： 生车间、熟车间、成品车间：低于100个 半成品库、成品库：低于10个 二、设备的采样与检验方法 根据生产过程所要求的重点卫生部位，实验室对其进行涂抹采样，进行细菌总数检验。 1采样方法 1.1涂抹法（适用于表面平坦的设备和工器具产品接触面） 取经过灭菌的铝片框（框内面积为50平方厘米）放在需检查的部位上，用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分，擦完后立即将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。 1.2贴纸法（适用于表面不平坦的设备和工器具接处面） 将无菌规格纸（5×5厘米，纸质要薄而软）用无菌生理盐水泡湿后，于需测部分分别贴上两张，两张纸面积共50平方厘米，然后取下放入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。 2检验方法 2.1细菌总数的检验 将上述样液充分振摇，根据卫生情况，相应地做10倍递增稀释，选择其中2-3个合适的稀释度作平皿倾注培养，培养基用普通营养琼脂，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入1毫升样液，于37℃培养24小时后计菌落数。 结果计算 表面细菌总数（cfu/cm2）=平皿上菌落的平均数×样液稀释倍数/30×2 2.2致病菌的检验 沙门氏菌，参照GB4789.4进行 金黄色葡球菌，参照GB7918.5进行 4.检验合格标准：细菌总数10－100个∕cm2， 5.关键点：细菌总数≤10个∕cm2 一般区域：细菌总数≤100个∕cm2 三、人员手表面细菌污染情况的检验
习题库 项目一食品中的微生物及其检验 一、名词解释 1、微生物： 2、食品微生物检验： 3、食品变质： 4、腐败： 5、酸败： 6、菌落总数： 7、大肠菌群： 8、MPN： 二、填空题 1、食品中的微生物的主要来源是、和。 2、引起食品腐败变质的原因主要有、、和 等方面，其中，最普遍、最主要的因素是。 3、分解蛋白质的微生物以为主，其次是和。 4、分解糖类的微生物以为主，其次是和。 5、分解脂肪的微生物以为主，其次是和。 6、国家食品卫生标准一般包括三个方面的内容：、 和。 7、微生物指标一般分为、和三项。
8、食品微生物检验包括和两个方面。 三、选择题 1、下列描述的微生物特征中，不是所有微生物共同特征的是（） A.个体微小 B.分布广泛 C.种类繁多 D.可无致病性 E.只能在活细胞内生长繁殖 2、土壤中，数量和种类最多的微生物是（） A、细菌 B、霉菌 C、酵母菌 D、放线菌 3、我国城市饮用水卫生标准规定（） A、每1000ml水中大肠杆菌＜3个 B、每1000ml水中大肠杆菌＜30个 C、每100ml水中大肠杆菌＜3个 D、每100ml水中大肠杆菌＜30个 E、每500ml水中大肠杆菌＜3个 4、我国城市饮用水卫生标准规定（E ） A、每ml水中细菌总数＜1000个 B、每ml水中细菌总数＜10个 C、每100ml水中细菌总数＜10个 D、每500ml水中细菌总数＜10个 E、每ml水中细菌总数＜100个 四、判断题 1、菌落计数以菌落形成单位（CFU）表示。（）
2、MPN是指可能产气的数量。（） 3、食品中病原微生物的检验，可以检验出少量的病原微生物（） 五、问答题 1、食品微生物检验的特点有哪些？ 2、食品微生物检验的任务是什么？ 3、食品微生物检验的内容主要包括哪些方面？每一个方面的检验项目是什么？ 4、食品质量的评价指标有哪些？并具体解释之。 5、食品微生物检验的意义是什么？ 6、食品中细菌总数检验的意义是什么？ 7、食品中大肠菌群检验的意义是什么？ 项目二食品微生物检验的基本条件与设备 一、名词解释 1、分辨力： 2、相位： 3、振幅： 二、填空题 1、无菌室通常包括和两部分，这两部分的比例一般为 ，高度一般m左右。 2、对无菌室进行熏蒸消毒时，通常采用的方法是和。 3、在采用氧化熏蒸法对无菌室进行消毒时，使用的高锰酸钾和甲醛的比例为 。
2013年全国外贸业务员考试 外贸业务基础理论试卷（A卷） （考试时间：2013年5月19日上午9:00—11:00） 一、单项选择题（请将答案填涂在答题卡上， 答在试卷上无效。每小题1分，共40分） 1．根据《INCOTERMS 2000》的规定，就买方承担的货物风险而言，（）。 A．C组和D组术语最小，F组其次，E组最大 B．E组术语最小，F组和C组其次，D组最大 C．F组和C组术语最大，E组其次，D组最小 D．D组术语最小，F组和C组其次，E组最大 2．我国一般原产地证书的官方发证机构是（）。 A．贸促会B．出入境检验检疫局 C．制造商D．出口商 3．自2009年1月1日起，我国一般纳税人在进口设备作为固定资产时所发生的（），可从销项税额中抵扣。 A．进口关税B．进口环节增值税 C．进口环节消费税D．进口环节增值税和进口环节消费税 4．在我国进出口贸易中，若按FAS术语成交，下面说法错误的是（）。 A．卖方要在约定时间内将合同规定货物交到指定装运港买方所指派船只的船边 B．若买方所派船只不能靠岸，卖方要负责用驳船把货物运至船边，仍在船边交货 C．装船的责任和费用由买方承担 D．在船上完成交货义务 5．山东邹可进出口有限公司出口一批大蒜到日本，该批货物于2009年4月7日装运，要求船公司以2009年4月6日作为提单日期签发提单，则该提单称为（）。 A．顺签提单B．倒签提单 C．过期提单D．预借提单 6．根据我国《票据法》规定，当汇票大小写金额不一致时，（）。 A．以大写金额为准B．以小写金额为准 C．票据无效D．由付款行决定 7．我国加工贸易合同审批的主管部门是（）。 A．国务院B．国家发改委 C．海关D．商务厅（委） 8．我国出口商品检验时，对产地和报关地相一致的出境货物，经检验检疫合格的，出入境检验检疫局出具（）。 A．《出境货物通关单》B．《出境货物换证凭单》 C．《出境货物换证凭条》D．《出境货物不合格通知单》 9．经中华人民共和国国务院批准，我国于2009年4月1日已将纺织品、服装出口退税率提高到（）。 A．14% B．15% C．16% D．17% 10．我国的进口许可证最多只能延期（）次，延期最长不超过（）个月。 A．1、2 B．1、3
食品微生物检验的内容及检测技术 食品安全检验过程的主要内容 食品微生物的检验。食物在生产过程中以及放置过程中会受到环境中微生物的损坏或影响，在部分研究中，将食品中细菌数量对食品的损坏程度作为食品安全检测的首 要内容。在食品微生物的检验过程中，我们主要对人体有害微生物进行检验，其中在食品安全检验过程中，因为食品中有多种微生物共存现象，所以在检验前，微生物检验员要把不同的菌体进行分离，这样才能更加清楚的了解各种微生物的数量及菌体的分布情况，包括生产型食品微生物，如醋酸杆菌，酵母菌等和使食物变质的微生物，如霉菌、细菌等和食源性病原微生物如溶血性大肠杆菌，肉毒杆菌等。对食品原辅料微生物的控制和产成品微生物的检验是保证食品安 全的重要途径。 针对食品致病菌的相关检验。不同的致病菌会对人们的身体健康有不同程度的危害，像我们在生活中经常吃到的大米，有些不法商家将发霉的大米加工后再次放入市场进行二次销售，虽然经加工后，在外表上和普通大米没啥两样，但这种大米中含有黄曲霉这一致病菌，据可靠信息表明，黄曲霉的危害性十分巨大，如果人们长时间吃这样的大米，出
现癌症的风险要比常人高出很多倍，由此可见，食品中致病菌的检验是保证我们能吃到放心食品十分关键的微生物检 测技术，所以我们在致病菌的检验上对不同种类的致病菌进行定量严格检验。如乳制品和肉制品的致病菌主要是黄曲霉菌和大肠杆菌，而蛋制品中则容易出现染沙门菌、大肠菌群、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，罐头食品容易出现肉毒梭菌、产气荚膜梭菌、蜡样芽胞杆菌。 食品微生物检验中的主要特点 对食品检测要求相对较高。在食品微生物的一系列检验中，由于食品中涉及的微生物种类较多，因此加大了食品微生物检验的难度。国家标准或行业标准对不同食品中微生物的含量特别是致病菌的含量有明确的要求。在食品的运输过程中，食品致病菌以及其他微生物对相应的食品有一定的污染，随着微生物种类的增多，检测人员需要对食品受致病菌影响的程度、食品保质期以及其他相关的标准进行测量，难度会随着微生物种类的增多而复杂。所以在微生物检验上我们对每一阶段的食品安全检测都要重视，在各个微生物的测量上，相关的检测技术要求就有所提高。 食品微生物检验效率。随着食品市场的商品流通提高，人们对食品需求不断增加，而食品安全问题却在日益严重，为了保障人们在能够及时满足食品种类和数量要求的同时，进一步促进食品安全的保障措施落实，必须加强食品安
出口商品检验检疫的一般程序 1．一般工作程序 （1）法定检验检疫的出境货物，在报关时必须提供出人境检验检疫机构签发的《出境货物通关单》，海关凭报关地出人境检验检疫机构出具的《出境货物通关单》验放； （2）出境货物的检验检疫工作程序是先检验检疫，后放行通关，即法定检验检疫的出境货物的发货人或其代理人向检验检疫机构报检，检验检疫机构受理报检和计收费； （3）转检验或检疫部门实施检验检疫； （4）对产地和报关地相一致的出境货物，经检验检疫合格的，出具《出境货物通关单》；对产地和报关地不一致的出境货物，出具《出境货物换证凭单》或《出境货物换证凭条》，由报关地检验检疫机构换发《出境货物通关单》；出境货物经检验检疫不合格的出具《出境货物不合格通知单》。 2.报检 商检机构在对每一批出口商品进行检验之前，都必须首先受理报检。报检和商检机构受理报检，是检验工作的起始程序。商检机构应当在规定的期限内检验完毕，并出具检验证单。 （1）报检条件 ①已经生产加工完毕并完成包装、刷啧、准备发运的整批出口货物； ②已经经过生产企业检验合格，并出具厂检合格单的出口货物； ③对于执行质量许可制度的出口货物，必须具有商检机构颁发的质量许可证或卫生注册登记证； ④必须备齐各种相互吻合的单证。 上述四个条件必须同时具备。 （2）报检范围 ①国家法律、行政法规规定必须由出人境检验检疫机构实施检验检疫的； ②对外贸易合同约定须凭检验检疫机构签发的证书进行结算的； ③有关国家条约规定必须经检验检疫的。 （3）报检时限和地点 ①出人商品最迟应在出口报关或装运前7天报检，对于个别检验检疫周期较长的货物，应留有相应的检验检疫时间。 ②需隔离检疫的出境动物在出境前60天预报，隔离前7天报检。 ③法定检验检疫货物，除活动物需由出境口岸检验检疫机构检验检疫外，原则上应坚持产地检验检疫。 （4）出境商品预报检 为了方便对外贸易，检验检疫机构对某些经常出口的非易腐烂变质、非易燃易爆的货物予以接受预先报检，这样既有利于检验检疫工作的开展，‘又有利于防止内地的不合格货物运抵口岸
建国以来，我国政府一直将进出口商品检验工作纳入政府工作范围，由进出口商品检验局以及后来合并成立的质量监督检验检疫局实施垄断性的官方检验。随着我国进出口贸易量的不断增长，受检验检疫机构自身行政资源所限，对进出口商品实施批批检验以确保进出口商品质量安全的工作方式越来越难以为继。入世以来，也是由于国家承诺，国内出现了一大批从事进出口商品检验鉴定的商业性机构，但是其发展极不平衡，不同机构在业务范围、检验人员能力、检测设备配置、内部管理水平、检验服务质量等都存在较大差异。如何借助与整合各种检验力量，服务好我国外经贸，确保进出口商品质量安全，成为监管部门急需考虑的问题。本课题从政府监管、信息不对称和市场监管等角度入手，分析了我国的进出口商品检验鉴定机构及其政府监管现状。同时，在剖析美国、日本、香港等国家和地区在进出口商品检验鉴定服务市场监管的成功经验，如健全的法律法规、分类管理、充分发挥行业协会参与监管的作用、信息公开和发挥社会舆论监督作用等等的基础上，通过文献研究、比较分析、应用数据等方法，针对我国的进出口商品检验鉴定服务监管体系存在的不合理、不科学的地方，提出强化契约精神，重建道德信用体系、充分发挥行业协会的作用、政企分开，创造公平竞争的市场环境、培养品牌检验鉴定服务商和加强检验鉴定机构的信息供给等一系列创新措施，以期构建一套科学的行之有效的进出口商品检验鉴定机构政府监管体系，为进一步做好进出口商品检验鉴定机构政府监管工作提供有益的帮助。 进出口商品检验制度是我国贸易管制制度的重要组成部分,它伴随外贸的出现而出现,我国现行的进出口商品检验制度于1989年《中华人民共和国进出口商品检验法》颁布后得以确立。中国加入世贸组织后,2002年4月28日九届全国人大常委会第二十七次会议通过《关于修改〈中华人民共和国进出口商品检验法〉的决定》,对不适合世贸规划的法律条款进行了相关修订。我国商品检验制度的建立,对我国改革开放30年来对外贸易的发展起到了举足轻重的作用。据国家统计局数据,近年来我国进出口额都在2万亿美元以上,2007年为21738亿美元,2008年达25616亿美元,2009年为22073亿美元,排名世界前列。由此可见,对外贸易在我国国民经济的发展中举足轻重。我国的进出口商品制度在发展过程中也应顺应社会经济的发展,相应作出一定的调整,但总的来说还是滞后于社会经济的发展。主要原因如下:一、进出口商品检验制度发展悠久,进出口商品检验主管机关受计划经济思想的影响还存在,由目前的制度可略见一斑;二、依据行政法原理,行政机关是依法成立的行使国家行政职权的行政组织,换言之,不属于国家行政管理方面的职能不应由行政机关承担。三、从依法行政的角度考虑,中国的进出口商品检验部门也需定位准确,重新以法律的角度与层面完善进出口商品检验制度。按照行政法理论,行政机关在法律授权下行使行政管理职能,依法行政和合理行政是行政法的最基本原则。针对目前进出口商品检验僵化的管理制度难以适应行政法基本原则的要求,建议应通过立法等渠道,完善现有的商检法规内容,使检验工作有法可依,并且重新定位进出口商品检验机关的职能,分离部分服务职能,建立新的进出口商品检验制度。本文以行政法的几大基本原则为依据,从商品检验制度基本理论研究入手,阐述我国进出口商品检验法律制度的历史沿革与现状,分析该制度存在的问题和与行政法基本原则的冲突和差距,并借鉴外国先进发达国家的商品检验制度进行研究,提出有关构想,以克服当前存在突出问题,进而完善我国商品检验法律制度。 检验检疫是国际贸易活动中一个重要环节,对我国商品进出口起着重要的把关、服务与促进作用,对国内进出口企业、国内消费者起着保护、服务、扶持功能。
空气、食品接触面微生物检验方法、检验标准 1、目的： 检测生产车间空气、操作人员手部、与食品有直接接触面的机械设备的微生物指标，生产区域环境当中病原微生物的监控，达到规定标准，以控制食品成品的质量。 2、参照标准： 中华人民共和国国家标准《一次性使用卫生用品卫生标准》GB15979－1995、《HACCP原理与实施》、中华人民共和国国家标准《公共场所空气微生物检验方法细菌总数测定》GB/T 18204.1－2000、中华人民共和国进出口商品检验行业标准SN 0169-92/SN 0172-92/ SN 0170-92、出入境检验检疫局二000四年《出入食品微生物检验培训教材》中《出入食品生产厂卫生细菌检验方法》、日本东京冷冻食品检验方法。 3、采样与检测方法： 3.1空气的采样与测试方法 3.1.1样品采集： (1)取样频率： a)车间转换不同卫生要求的产品时，在加工前进行采样，以便了解车间卫生清扫消毒情况。 b)全厂统一放长假后，车间生产前，进行采样。 c)产品检验结果超内控标准时，应及时对车间进行采样，如有检验不合格点，整改后再进行采样检验。 d)实验性新产品，按客户规定频率采样检验。 e)正常生产状态的采样，每周一次。 （2）采样方法 在动态下进行，室内面积不超过30 m2，在对角线上设里、中、外三点，里、外点位置距墙1 m；室内面积超过30 m2，设东、西、南、北、中五点，周围4点距墙1 m。采样时，将含平板计数琼脂培养基的平板(直
径9 cm)置采样点(约桌面高度)，并避开空调、门窗等空气流通处，打开平皿盖，使平板在空气中暴露5 min。采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过6h，若样品保存于0～4℃条件时，送检时间不得超过24h。 3.1.2菌落培养： （1）在采样前将准备好的平板计数琼脂培养基平板置37℃±1℃培养24 h，取出检查有无污染，将污染培养基剔除。 （2）将已采集样品的培养基在6 h内送实验室，细菌总数于37℃±1℃培养48h观察结果，计数平板上细菌菌落数。 （3）菌落计算： a) 记录平均菌落数，用“个/皿”来报告结果。用肉眼直接计数，标记或 在菌落计数器上点计，然后用5～10倍放大镜检查，不可遗漏。 b) 若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2 个或2个 以上菌落计数。 3.2工作台（机械器具）表面与工人手表面采样与测试方法： 3.2.1样品采集： (1)取样频率： a)车间转换不同卫生要求的产品时，在加工前进行擦拭检验，以便了解车 间卫生清扫消毒情况。 b)全厂统一放长假后，车间生产前，进行全面擦拭检验。 c)产品检验结果超内控标准时，应及时对车间可疑处进行擦拭，如有检验 不合格点，整改后再进行擦拭检验。 d)实验新产品，按客户规定擦拭频率擦拭检验。 e)对工作表面消毒产生怀疑时，进行擦拭检验。 f)正常生产状态的擦拭，每周一次。 （2）采样方法： a) 工作台（机械器具）：用浸有灭菌生理盐水的棉签在被检物体表面（取 与食品直接接触或有一定影响的表面）取25cm2的面积，在其内涂抹10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的
菌落总数检查操作程序 1 实验前准备 1.1 稀释水、刻度吸管、平皿 稀释水：瓶装PH值7.0无菌生理盐水，塞上胶塞，按高压蒸气灭菌操作程序，121℃湿热灭菌30分钟。取0.2ml、1ml、5ml、10ml刻度吸管、平皿置于金属容器中，140℃干热灭菌2小时。 1.1.1 培养基准备： 平板计数琼脂培养基 以上实验所需干粉培养基均由中检所提供，分别按说明加适量水加热溶解后，塞上胶塞，湿热灭菌30分钟备用。 1.1.2 无菌衣 将无菌衣、头罩、口罩、乳胶手套叠好，置于无菌衣袋中，湿热灭菌30分钟。 1.2 无菌室及操作台的准备 用0.1%的新洁尔灭溶液或75%乙醇溶液将操作台，天花板，墙壁，地面擦洗一遍，同时将操作台用0.1%新洁尔灭溶液或75%乙醇溶液擦洗一遍。将实验所需物品通过传递窗移入无菌室，打开空气净化系统，打开紫外灯，杀菌0.5-1个小时。 2 实验操作 2.1 进入无菌室更衣间，用0.1%新洁尔灭溶液或75%乙醇溶液消毒手及腕部至少一分钟，戴上头罩、口罩，穿好无菌衣及无菌手套后，进入无菌室，开始实验操作。 菌落总数操作程序 选择2-3个适宜稀释度的样品匀液，各取1ml分别放入无菌皿内
2.2 供试液的稀释及操作 2.2. 1 固体：取供试品25g，加无菌生理盐水225ml，溶解混匀，作为1：10的供试液。 2.2.2 液体：取供试品25 ml，加无菌生理盐水225ml，溶解混匀，作为1：10的供试液。 2.2.3 用1ml无菌吸管或微量移液器吸取1：10样品匀液1 ml，沿管壁缓慢注于盛有9
ml稀释液的无菌试管中，振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1：100的样品匀液。 2.2.4 按以上操作程序，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1 ml 无菌吸管或吸头。 2.2.5 根据对样品污染状况的估计，选择2-3个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10倍递增稀释时，吸取1 ml样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。同时，分别吸取1 ml空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。 2.2.6 及时交15-20 ml冷却至46的平析计数琼脂培养基倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。 2.2.7 待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃±1℃培养48±2小时。如果样品中可能含有在琼脂培养表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂覆盖一薄层琼脂培养基，凝固后翻转平板培养。 2.3 菌落计数 2.3.1 做平板菌落计数时，可用肉眼观察。必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。 2.4 菌落计数的报告 2.4.1 平板菌落数的选择 选取菌落数在30-300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU 的平板记录具体菌落数，大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数；其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片 状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘2，代表一个平板菌落数。平板内出现菌落间无明显界线的链状生长时，则应将每条单链作为一个菌落计数。 2.4.2 菌落总数的计算方法 2.4.2.1 若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释度，作为每g(ml)样品中菌落总数结果。 2.4.2.2 若有两个连续稀释度的平均菌落数在适宜计数范围内时，按以下公式计算： ΣC N =