第一章蛋白质化学
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1．何谓蛋白质的等电点？其大小和什么有关系？
2．经氨基酸分析测知1mg某蛋白中含有45ug的亮氨酸（MW131．2），23.2ug的酪氨酸(MW204.2)，问该蛋白质的最低分子量是多少？
3．一四肽与FDNB反应后，用6mol/L盐酸水解得DNP－V al．及三种其他氨基酸。当这种四肽用胰蛋白酶水解，可得到两个二肽，其中一个肽可发生坂口反应，另一个肽用LiBH4还原后再进行水解，水解液中发现有氨基乙醇和一种与茚三酮反应生成棕褐色产物的氨基酸，试问在原来的四肽中可能存在哪几种氨基酸，它们的排列顺序如何？
4．一大肠杆菌细胞中含10个蛋白质分子，每个蛋白质分子的平均分子量为40 000，假定所有的分子都处于a螺旋构象。计算其所含的多肽链长度？
5．某蛋白质分子中有一40个氨基酸残基组成的肽段，折叠形成了由2条肽段组成的反平行?折叠结构，并含有一?转角结构，后者由4个氨基酸残基组成。问此结构花式的长度约是多少？
6．某一蛋白样品在聚丙烯酸胺凝胶电泳（PAGE）上呈现一条分离带，用十二烷基硫酸钠(SDS)和硫基乙醇处理后再进行SDS－PAGE电泳时得到等浓度的两条分离带，问该蛋白质样品是否纯？
7．“一Gly－Pro－Lys－Gly－Pro－Pro－Gly－Ala－Ser－Gly－Lys－Asn一”是新合成的胶原蛋白多肽链的一部分结构，问：
1）哪个脯氨酸残基可被羟化为4一羟基脯氨酸？
2）哪个脯氨酸残基可被羟化为3一羟基脯氨酸？
3）哪个赖氨酸残基可被羟化？
4）哪个氨基酸残基可与糖残基连接？
8．一五肽用胰蛋白酶水解得到两个肽段和一个游离的氨基酸，其中一个肽段在280nm有吸收，且Panly反应、坂口反应都呈阳性；另一肽段用汉化氰处理释放出一个可与茚三酮反应产生棕褐色产物的氨基酸，此肽的氨基酸排列顺序如何？
9．研究发现，多聚一L－Lys在pH7.0呈随机螺旋结构，但在pH10为a螺旋构象，为什么？预测多聚一L－Glu在什么pH条件下为随机螺旋，在什么pH下为a螺旋构象？为什么？
10．Tropomyosin是由两条a螺旋肽链相互缠绕构成的超螺旋结构。其分子量为70 000，假设氨基酸残基的平均分子量为110，问其分子的长度是多少？
11．某肽经CNBr水解得到三个肽段，这三个肽的结构分别是：Asn－Trp－Gly-Met，Gly-Ala －Leu，Ala－Arg－Tyr－Asn－Met；用胰凝乳蛋白酶水解此肽也得到三个肽段，其中一个为四肽，用6mol/L盐酸水解此四肽只得到（Asp）2和Met三个氨基酸，问此肽的氨基酸排列顺序如何？
12．列举蛋白质主链构象的单元及它们的主要结构特征。
13．试比较蛋白质的变性作用与沉淀作用。
14．将一小肽（pI=8.5）和Asp溶于pH7．0的缓冲液中，通过阴离子交换树脂柱后，再进行分子排阻层析，那么Asp和小肽哪一个先从凝胶柱上被洗脱下来，为什么？
15．从理论和应用上说明有机溶剂、盐类、SDS、有机酸等对蛋白质的影响。
16．血红蛋白和肌红蛋白都具有氧合功能，但它们的氧合曲线不同，为什么？
17．为什么无水肼可用于鉴定C-端氨基酸？
18．Anfinsen用核糖核酸酶进行的变性一复性实验，在蛋白质结构方面得出的重要结论是什么？
19．蛋白质分离纯化技术中哪些与它的等电点有关？试述这些技术分离提纯蛋白质的原理。20．根据下列资料推出某肽的氨基酸排列顺序。
1）完全酸水解得到Phe、Pro、Glu、（Lys）2、Met和NH3
2）用FDNB试剂处理得到DNP－Phe
3）用澳化氰水解此肽得到一个以高丝氨酸内酯结尾的二肽和一个四肽
4）用胰蛋白酶水解可产生两个三肽
5）用羧肽酶A或羧肽酶B处理都不能得到阳性结果
21．高致病的厌氧细菌与气性坏疽（gas gangrene）病有关。它使动物组织的结构破坏。因该菌体内有胶原酶（collagenase），它可催化一X—Gly-Pro—Y一（X、Y是任一氨基酸）结构中一X一Gly之间的肽键断裂，问该酶使动物组织结构破坏的机理是什么？为什么它对细菌自身没有破坏作用？
22．一血红蛋白的电泳迁移率异常，用胰蛋白酶水解结合指纹图谱分析发现它的β链N-端的胰蛋白酶肽段只有6个氨基酸组成，而正常血红蛋白β链N-端的胰蛋白酶肽段为V al-His-Leu-Thr-Asp-Glu-Glu-Lys，问：
1）导致上述结果的原因是什么？
2）请比较HbA、HbS及这个异常血红蛋白在pH8．0条件下电泳时的电泳迁移率。
23．细菌视紫红质（Bacteriorhodopsin）是嗜盐细菌盐生盐杆菌紫色质膜的惟一蛋白质组分，所以称为细菌视紫红质。因为它含有视黄醛辅基（retinal，故是紫色的），犹如动物的视紫红质。细菌视紫红质的分于量为26 000，X一射线分析揭示出其分子中由7个平行排列的a 螺旋肽段，且每一螺旋肽段都横跨细胞膜（膜厚度为4．5 nrn，即该蛋白横穿质膜7次之多，每一跨膜片段为一a螺旋）。其功能是作为光驱动的跨膜泵（质子泵），为细胞提供能量。
1）计算每一螺旋肽段要完全横跨细胞膜最少要有多少个氨基酸残基组成此段螺旋？
2）估计此蛋白的跨膜螺旋部分占全部分子的百分数。
24．某五肽完全水解后得到等摩尔的丙、半胱、赖、苯丙和丝氨酸。用PITC分析得到PTH －Ser；用胰蛋白酶水解得到一个N一端为CySH的三肽和一个N一端为丝的二肽；靡蛋白酶水解上述三肽生成丙和另一个二肽，该五肽的结构如何？
26．原肌球蛋白（tropomyosin）的分子量为93 000，而血红蛋白的分子量为65 000，为什么原肌球蛋白的沉降系数比血红蛋白的小？
27 ．
1）为制备柠檬酸合成酶（CS），将牛心组织匀浆后，为什么先经差速离心法分离出线粒体后再进行下一步的纯化？
2）将线粒体裂解，向裂解液中加人硫酸胺到一定的浓度，然后离心保留上清液；向上清液中再加人硫酸胺粉末至所需要的浓度，离心，倒掉上清保留沉淀，这些操作的目的是什么？3）接着，将盐析所得到的柠檬酸合成酶粗制品对pH7．2的缓冲液透析，为什么不用水？透析的目的是什么？4）将上述处理所获得的CS粗制品进行分子排阻层析，在280nm下检测是否有蛋白被洗出；实验者保留第一个洗脱峰进行下一步的纯化，为什么？
5）实验者将经分子筛层析所得到的CS样品又选用阳离子交换剂进行分离，上样平衡后，改用高pH的缓冲液洗脱，为什么？
28．许多蛋白质富含二硫键，它们的抗张强度，黏性，硬度等都与它们的二硫键含量有关。
1）蛋白质的抗张强度、硬度等性质与二硫键含量之间关系的分子基础是什么？
2）多数球蛋日被加热到650C即变性丧失活性，但富含二硫键的蛋白质如牛胰腺蛋白酶抑制剂（BPTI）需在高温下长时间加热才变性。该抑制剂含58个氨基酸、一条肽链、有三对二硫键。热变性的BPTI在冷却的条件下可以恢复其活性，为什么？
29．何谓疏水的相互作用？为什么说非极性溶剂、去污剂可使蛋白质变性？
30．为什么二磷酸甘油酸（BPG）可降低血红蛋白与氧的亲和力？
31．将含有Asp（pI＝2．98）、Gly（pI＝5．97）、Thr（pI＝6．53）、Leu（pI＝5．98）、Lys （pI＝9．74）的pH为3．0的柠檬酸缓冲液，加到预先用同样缓冲液平衡过的阳离子交换树脂柱上，随后用该缓冲液洗脱此柱，问这五种氨基酸将按何种顺序被洗脱？
32．从下列资料推出一肽的氨基酸排列顺序。
l）含有Phe，Pro，Glu，（Lys）2；
2）Edman试剂处理生成PTH－Glu
3）用胰蛋白酶、羧肽酶A和B处理都不能得到任何较小的肽和氨基酸
33．多聚L－Leu肽段在二氧杂环己烷（dioxane）存在时可形成a螺旋结构，但多聚L－Ile 不能，为什么？
34．一次突变，某蛋白质分子内的一个丙氨酸转变为缬氨酸导致该蛋白质生物活性的丢失；然而在另一次突变时，由于一个异亮氨酸转变为甘氨酸而使该蛋白质的活性恢复了，请分析可能的原因是什么？
35．甘氨酸是蛋白质进化中高度保守的氨基酸残基吗？为什么？
36．在pH7．0时蛋白质分子中能与精氨酸侧链形成氢键或静电的相互吸引的侧链基团是哪些？
37．多数蛋白质分子中蛋氨酸和色氨酸的含量较低，而亮氨酸和丝氨酸等的含量较高；有趣的是：蛋氨酸和色氨酸都只有一个密码子与之对应，而亮和丝等有多个密码子。请分析：一个氨基酸密码子的数目与它在蛋白质中出现的频率之间的关系及这种关系的生物学意义是什么？
38．从蛋白质的一级结构可预测它的高级结构。下面是一段肽链的氨基酸排列顺序：“L－A －H－T－Y－G－P－F－Z（Q）－A－A－M－C－K－W－E－A－Z（Q）－P－D－G－M －E－C－A－F－H－R”，问：
1）你认为此段肽链的何处会出现在β转角结构？
2）何处可形成链内（intra－）二硫键？
3）假定上述顺序是一个大的球蛋白分子中的一部分结构，指出D、I、T、A、Z（Q）、K 氨基酸残基可能在蛋白质分子的表面还是内部？
39．以丙氨酸为例说明为什么等电状态的氨基酸应以两性离子而不是中性分子的形式存在？
40．从下列资料推出一个肽的氨基酸排列顺序：
l）用6mol/L盐酸完全水解此肽结合氨基酸，分析可知，此肽含有甘、亮、苯丙和酪四种氨基酸，且甘：亮：苯丙：酪＝2：1：1：1
2）用2，4一二硝基氟苯（FDNP）试剂处理此肽得到了DNP一酪氨酸，无自由的酪氨酸产生。
3）用胃蛋白酶水解此肽得到两个肽段，一个二肽含苯丙氨酸和亮氨酸，一个三肽含酪氨酸及2个甘氨酸。
1．蛋白质是两性电解质，既可与酸，又可与碱相互作用。溶液中蛋白质的带电情况，与它所处环境的pH值有关。调节溶液的pH值，可以使一个蛋白质带正电或带负电或不带电；在某一pH时，蛋白质分子中所带的正电荷数目与负电荷数相等，即静电荷为零，在电场中不移动，此时溶液的p H值即为该种蛋白质的等电点。
蛋白质的等电点主要取决于该蛋白质的氨基酸组成。含碱性氨基酸多的蛋白质其等电点要比含酸性氨基酸多的蛋白质的等电点高（大）；此外，蛋白质的解离情况与所处环境
的pH值、离子强度、离子的种类等有关．所以蛋白质的等电点不是一个精确的固定值，与测定时所用的缓冲液的性质、pH、离子强度等有关。
2．根据亮氨酸含量计算的最低分子量为：
1X10－3g / 45X10－6g ＝最低分子量 / 131.2
最低分子量=2915.6
根据色氨酸含量计算的最低分子量为：
1X10－3g / 23.2X10－6g ＝最低分子量 / 204.2
最低分子量=8 801．7
根据氨基酸残基计算最低分子量的原理，一般是假定在一个蛋白质分子中只有一个该氨基酸残基存在。
亮和色的摩尔数比率是：
(45/131.2) / (23.2/204.2) = 0.343 / 0.114 = 3
因此，该蛋白质的最小分子量应是每分子中含有3个亮氨酸残基，l个色氨酸残基时的分子量。即：2 915．6 X 3=8 746.8或 8 801．7 X1
3．Val－Arg－Gln（或Asn）－Gly
。是一个特殊的还原剂，能使孩酸直接还原为醇而不经醛中间物。
LiBH
4
4. (40000 / 110) X0.15nmX10＝546nm
5．构成?折叠结构的氨基酸残基数为36个，每条应有18个氨基酸残基。在?折叠结构中每两个相邻的氨基酸残基的轴心距为 0．35nrn，故 18 X 0．35nm等于 6．3nm（至少为6．3nm）。
6．该蛋白质样品是均一的。PAGE电泳法的分辨率很高，在这种电泳中只得到一条分离带，说明纯度很好。在SDS--PAGE电泳中得到等浓度的两条分离带，证实该蛋白含有两个亚基，而不含有杂质。
7.
1）和2）脯氨酸羟化酶不能使游离的脯氨酸进行羟基化。在胶原分子中，甘氨酸氨基端的脯氨酸可被羟化为个羟基脯氨酸，甘羧基端的脯氨酸可被羟化为3一羟基脯氨酸。
3）在甘氨酸氨基端的赖氨酸（3位的赖）可被羟基化为羟赖氨酸，在甘氨酸羧基端的赖氨酸（11位的赖）可被羟基化为3一羟赖氨酸。
4）3一羟赖氨酸可连接糖残基。
8．Tyr－Arg－Lys－Met－Gln（Asn）
9．在pH7．0时赖氨酸侧链上的ε氨基带正电荷，它们之间的静电排斥作用阻止了a螺旋的形成。在pH10时，由于接近赖氨酸的等电点，侧链是非质子化的状态，允许a螺旋的形成。对多聚一L－Glu来说，在 pH7．0时，由于侧链羧基都带负电荷，它们之间的静电排斥，将干扰a螺旋的形成，应呈随机螺旋状态，在接近谷氨酸侧链的pK值为4．25～4．0时，因谷氨酸的侧链羟基是非质子化的，应呈螺旋构象。
10．由于是两条链构成的超螺旋结构，每条链的分子量为 35 000。而氨基酸残基的平均分子量为 110，故每条肽链应含有 318个氨基酸残基（35 000／110），318 X 0．15um，等于47．7nrn长。
11．根据条件1，该肽的可能顺序为：
Ala－Arg－Tyr－Asn－Met－Asn－Trp－Gly－Met－Gly－Ala－Leu；
由于胰凝乳蛋白酶专一性水解芳香组氨基酸的核基所形成的肽键，所得到的三个肽段的可能结构为：
Ala－Arg－Tyr Asn－Met－Asn－Trp Gly－Met－Gly－Ala－Leu
由于在酸水解时，色氨酸易被破坏，Asn Asp，推知其中的一个肽段为：
Asn－Met－Asn－Trp
综上所述，某肽的氨基酸顺序为：
Ala－Arg－Tyr－Asn－Met－Asn－Trp－Gly－Met－Gly－Ala－Leu
12．
1 ) a螺旋（a－helix）结构，其结构特征为：
（1）从外观看，a螺旋结构是一个类似棒状的结构。紧密卷曲的多肽链构成了棒的中心部分，侧链R伸出到螺旋排布的外面。完成一个螺旋需3．6个氨基酸残基。螺旋每上升一圈相当于向上平移0．54nm，即螺旋的螺距为0．54nm。相邻两个氨基酸残基之间的轴心距为 0．15nm。
（2）a螺旋结构的稳定主要靠链内的氢键。氢键形成于第一个氨基酸的羟基与线性顺序中第五个氨基酸的氨基之间。氢键环内包含13个原子，因此称这种螺旋为3．6（13）螺旋。
表示。
（3）大多数蛋白质中存在的a螺旋均为右手螺旋。 a螺旋的国际表示法，以n
s
n指每个螺旋中所包含的氨基酸残基数；s指氢键环内共价键所连接的原子数。
2）β折叠结构（β－Pleated sheet）的结构特征
β折叠结构又称为β折叠片层结构，β结构等。β折叠结构的形成一般需要两条或两条以上的肽段共同参与，即两条或多条几乎完全伸展的多肽链侧向聚集在一起，相邻肽链主链上的氨基和羰基之间形成有规则的氢键，维持这种片层结构的稳定。这样的多肽链构象就是β折叠结构。β折叠结构的特点是：
（1）在这种结构中，所有的肽键都参与了链间氢键的形成，氢键与肽链的长轴近于垂直。
（2）在β折叠中，多肽主链是比较伸展的，取锯齿状折叠构象；相邻的两个氨基酸之间的轴心距为 0．35nm。侧链 R交替地分布在片层平面的上方和下方，以避免相邻侧链R之间的空间障碍。
（3）β折叠结构有平行和反平行两种。在反平行的β折叠结构中，相邻肽链的走向相反，但氢键近于平行。在平行的β折叠结构中，相邻肽链的走向相同，氢键不平行。3）β转角结构，其结构特征是：
也称为β弯曲，β回折，发夹结构，U型转折等。蛋白质分子的多肽链在形成空间构象时，经常会出现180o的回折（转折），回折处的结构就称为β转角结构。一般有四个连续的氨基酸组成。在构成该种结构的四个氨基酸残基中，第一个氨基酸的验基和第四个氨基酸的氨基之间形成氢键。甘氨酸和脯氨酸易出现在这种结构中；在某些蛋白质，如嗜热菌蛋白酶中有三个连续的氨基酸形成的β转角结构。氢键形成于第一个氨基酸磷基氧和第三个氨基酸亚氨基的氢之间。
13．
l）蛋白质的变性作用：蛋白质因受某些物理的或化学的因素的影响，分子的空间构象破坏，从而导致其理化性质，生物学活性改变的现象称为蛋白质的变性作用。强酸，强碱，剧烈搅拌，重金属盐类，有机溶剂，脉，肌类，超声波等都可使蛋白质变性。
2）蛋白质的沉淀作用：由于水化层和双电层的存在，蛋白质溶液是一种稳定的胶体溶液。如果向蛋白质溶液中加入某种电解质，以破坏其颗粒表面的双电层或调节溶液的pH，使其达到等电点，蛋白质颗粒因失去电荷变得不稳定而将沉淀析出。这种由于受到某些因素的影响，蛋白质从溶液中析出的作用称为蛋白质的沉淀作用。
如重金属盐类、有机溶剂、生物碱试剂等都可使蛋白质发生沉淀，且不能用透析等方法除去沉淀剂而使蛋白质重新溶解于原来的溶剂中，这种沉淀作用称为不可逆的沉淀作
用。如果向蛋白质溶液中加入大量的盐类，如硫酸铰，蛋白质的溶解度逐渐下降，以致从溶液中沉淀出来，若用透析等方法除去使蛋白质沉淀的因素后，可使蛋白质恢复原来的溶解状态。此种沉淀作用称为可逆的沉淀作用。
沉淀的蛋白质不一定变性失活，但变性后的蛋白质一般失去活性。
14．小肽。
15．在有机酸如TCA、磺基水杨酸等存在下，绝大多数蛋白质带正电荷；可与酸根负离子形成不溶性复合物而沉淀析出，在临床上，预分析血液中的游离氨基酸的量，向血液中加入 TCA，使蛋白质沉淀，离心取上清液即可用于氨基酸的分析。
有机溶剂如丙酮、乙醇等，可使蛋白质沉淀。因有机溶剂使蛋白质脱水，介电常数降低。应用：制备有活性的酶或蛋白质性质的激素等常用丙酮将材料制成于粉以便于保存；用乙醇抽提制备某些醇溶性蛋白。
SDS：十二烷基硫酸钠，是一种阴离子去污剂，表面带大量的负电荷。可与蛋白质的疏水性基团结合使蛋白质变性。蛋白质分子愈大，结合的SDS量愈多；负电性愈大。因而在电场中的迁移速度不同。SDS－PAGE电泳法测定蛋白质的分子量即根据此原理。在核酸制备中用SDS破坏膜结构，除蛋白、核酸酶等。
盐类：在低盐溶液中，大多数蛋白质的溶解度增加；在高盐溶液中，由于蛋白质分子表面的电荷被中和，破坏了双电层，蛋白质将沉淀析出。不同蛋白质氨基酸组成不同，在不同盐浓度的溶液中溶解行为不同，可用盐析法沉淀蛋白质。
重金属盐类：在碱性条件下，蛋白质带负电，可与重金属离子如汞离子，铅离子结合，形成不溶性的重金属蛋白盐沉淀。因此，长期从事重金属作业的人，应吃高蛋白食物，以防止重金属离子被机体吸收。临床上，常用醋酸铅或硫酸铜沉淀体液中的蛋白质，以分析体液中的氨基酸或其他小分子化合物。
生物碱是植物组织中具有显著生理作用的一类含氮的碱性物质。能够沉淀生物碱的试剂称为生物碱试剂。如单宁酸、苦味酸、三氯乙酸等都能沉淀生物碱，故称它们为生物碱试剂。在酸性条件下，蛋白质带正电荷，可与生物碱试剂，如三氯乙酸的酸根离子结合成为溶解度较小的盐类而沉淀。
“柿石症”的产生就是由于空腹吃了大量的柿子，柿子中含有单宁酸，使肠胃中的蛋白质凝固变性而成为不能被消化的“柿石”。
16.·血红蛋白有两条a链和两条β链组成。血红蛋白的a链和β链与肌红蛋白的构象十分相似，尤其是β链。它们所含的氨基酸种类、数目、氨基酸的排列顺序都有较大的差异，但它们的三级结构十分相似。使它们都具有基本的氧合功能。但血红蛋白是一个四聚体，它的分子结构要比肌红蛋白复杂得多；因此除了运输氧以外，还有肌红蛋白所没有的功能。如运输质子和二氧化碳。
血红蛋白的氧合曲线为S形，而肌红蛋白的氧合曲线为双曲线，S形曲线说明血红蛋白与氧的结合具有协同性。
脱氧血红蛋白分子中，它的四条多肽链的C端都参与了盐桥的形成。由于多个盐桥的存在，使它处于受约束的强制状态。当一个氧分子冲破了某种阻力和血红蛋白的一个亚基结合后，这些盐桥被打断，使得亚基的构象发生改变，从而引起邻近亚基的构象也发生改变，这种构象的变化就更易于和氧的结合；并继续影响第三个、第四个亚基与氧的结合，故表现出S型的氧合曲线。
17．在无水肼存在下，除C端氨基酸外，其他氨基酸均转变为氨基酸酸肼的衍生物，加入苯甲醛，后者又转变为二苯基衍生物，不溶于水。经离心分离，C一端氨基酸在水相，向水相中加入2，4一二硝基氟苯与其反应，可得到相应的2，4一二硝基苯氨基酸，经色谱分析可鉴定之。
18．蛋白质的一级结构决定其高级结构。核糖核酸酶，一条肽链经不规则折叠而形成一个近似于球形的分子。构象的稳定除了氢键等非共价键外，还有4个二硫键。C．Anfinsen 发现，在8mol脲素和少量流基乙醇存在下，酶分子中的二硫键全部还原，酶的三维结构破坏，活性丧失。当用透析方法慢慢除去变性剂和疏基乙醇后，发现酶的大部分活性恢复；因为二硫键重新形成。这说明完全伸展的多肽链能自动折叠成其活性形式；若将还原后的核糖核酸酶在8mol脲素中重新氧化，产物只有1％的活性，因为硫氨基没有正确的配对。变性核糖核酸酶的8个硫氢基相互配对形成二硫键的几率是随机的
（1/7X1/5X1/3=1／105种可能的配对方式，但只有一种是正确的），实验发现，复性过程中 RNase接与天然RNase相同的连接方式形成二硫键，这是由于蛋白质的高级结构，包括二硫键的形成都是由一级结构决定的。
以上实验说明，蛋白质的变性是可逆的，变性蛋白在一定的条件下之所以能自动折叠成天然的构象，是由于形成复杂的三维结构所需要的全部信息都包含在它的氨基酸排列顺序上，蛋白质分子多肽链的氨基酸排列顺序包含了自动形成正确的空间构象所需要的全部信息，即一级结构决定其高级结构。由于蛋白质特定的高级结构的形成，出现了它特有的生物活性。
19．
1）等电点沉淀法，蛋白质是两性化合物，在等电点时其溶解度最小。不同蛋白质氨基酸组成不同，等电点不同，调节蛋白质混合溶液的pH值，可使他们分次沉淀出。
2）离子交换纤维素层析，常用的纤维素衍生物有CM一纤维素（分子中带有羧甲基基团，一C00H）和DEAE－纤维素（阴离子交换剂，带有二乙氨基乙基基团）。
一0一CH
2
蛋白质与离子交换纤维素的结合能力取决于彼此间相反电荷基团的静电吸引，在某一pH 条件下，不同蛋白质氨基酸组成不同，pI不同，所带的静电荷性质、数量不同，与离子交换纤维素的吸附能力不同。通过改变洗脱液的pH和离子强度，可把不同的蛋白质依次洗脱下来。
3）电泳法（聚丙烯酞胺凝胶电泳、等电聚焦）。
20．Phe-Met-Lys-Gln-Lys-Pro。
21．因细菌含有胶原酶，该酶专一性水解动物的结缔组织，因结缔组织中的主要蛋白质是胶原蛋白，其一级结构中存在一X－Gly－Pro－Y一顺序，允许细菌入侵宿主细胞，而细菌本身无胶原蛋白。
22．
1）赖氨酸或精氨酸取代了正常血红蛋白β链的第六位谷氨酸。导致用胰蛋白酶水解时产生了只有6个氨基酸组成的肽段。
2）在pH8．0时，血红蛋白都带负电荷，应向正极移动。由于异常血红蛋白分子中的第六位变成了一个碱性氨基酸（HbA第六位是 Glu，HbS第六位是 Val）；因此，在 pH8时，HbA所带的净电荷数最多，HbS次之，异常Hb所带的净电荷数最少，向正极移动的速度为：
异常血红蛋白 < HbS < HbA
23．
1）在a螺旋结构中，每一个氨基酸残基的高度为0.15nrn，所以
4．5／0．15=30个 AA
2）30（因每一螺旋要跨膜至少应含30个氨基酸残基）X 7=210个AA, 从其分子量知共含 26 000／110=236个 AA残基，所以 210／236=89（％）。
24．Ser一Lys一Cys一Phe一Ala
26．因原肌球蛋白为棒状结构，血红蛋白为球状，后者在超速离心场中所受到的摩擦阻力小。
27．
1）柠檬酸合成酶主要存在于线粒体，差速离心法可使线粒体与其他细胞器相互分离。
2）第一次加硫酸铵后离心要上清液，是为了除去杂蛋白；向上清液中再加入硫酸铵，离心要沉淀，因CS在沉淀部分。
3）透析是为了除去硫酸铵，为获得天然构象的CS，用pH7．2的缓冲液透析而不能用水。
4）在分离的样品中，CS分子量最大，故首先被洗出；大多数蛋白质含有色和酪氨酸，在280um下有吸收，故常用此波长检测。
5）说明CS带正电荷，改用高pH缓冲液洗脱，使CS所带电荷的性质改变，易于从阳离子交换柱上被洗脱下来。
28．
1）因为二硫键是共价键，这使许多蛋白质结构稳定的基础。因为二硫键使蛋白质多肽链之间形成共价交联，增加了蛋白质的抗张强度、硬度等。如谷蛋白是一种富含二硫键的蛋白质，小麦面团的黏性、弹性即是由于二硫键的存在。乌龟外壳坚硬，是由于它的a
角蛋白中大量二硫键的存在。
2）二硫键可防止蛋白质多肽链在不利条件下转变为完全伸展的状态。故在适宜的条件下构象可恢复。
29．是由于疏水基团为避开水相而相互靠近。蛋白质分子中有许多疏水的氨基酸，蛋白质的多肽链在盘绕折叠形成特定的构象时，这些疏水侧链相互靠近趋向于分子内部以减少其与水的界面，这是蛋白质空间构象形成的驱动力之一，称为疏水力或称为疏水的相互作用。
1959年，Kauzmann从热力学的角度对疏水的相互作用进行了分析研究后指出，非极性化合物从水中转移到有机溶剂中时，伴随着熵的增加。设想两个疏水基团原来和水接触，经过变化，两个疏水基团相互接触，除了它们自身的吸引力外，还有将它周围一部分排列整齐的水分子排入自由的水中，使水分子的混乱度增加；由于熵是体系混乱度的衡量，体系越混乱，其熵越大。因此两个疏水基团的相互吸引将伴随着熵的增大。反过来说，由于熵增是自发过程，是一个使体系能量趋于极小即能量上有利的过程，所以疏水的相互作用是熵所驱动的。非极性溶剂、去污剂等可破坏疏水的相互作用，因此是蛋白质变性剂。
30．研究发现，当BPG不存在时，血红蛋白与氧的亲和力强；BPG与血红蛋白结合后可极大地降低血红蛋白对氧的亲和力，降低的程度依赖于 BPG／Hb的比值。BPG存在于人的红细胞中，与血红蛋白的摩尔分数相同，是红细胞内糖在无氧或暂时缺氧情况下分解代谢的特殊产物。如高原缺氧，心肺功能不全或贫血时，均可使2，3一二磷酸甘油酸产生增加。血红蛋白和BPG结合后，氧合曲线向右移，因此，BPG的存在使血红蛋白结合氧的能力降低，即释放氧的量增加，以满足组织的需要。但BPG只影响脱氧血红蛋白与氧的结合能力，不会影响氧合血红蛋白与氧的亲和力。
从血红蛋白的构象看，它的4个亚基相互靠近，分子的中央有1个孔穴。X射线结构分析证实了BPG是结合在这个孔穴内。在生理pH条件下，BPG带有负电荷，可与附近两条β链上带正电荷的残基如His2，Lys82和His143形成盐键。加之原来的8个盐键，使血红蛋白处于稳定的不易和氧结合的状态。在氧合血红蛋白中，由于分子中的盐键被打断，血红蛋白的四级结构发生了相当大的变化，两条β链的H螺旋相互靠近，使分子中央的
基之间的距离变大，不能与BPG
孔穴变小而不能容纳BPG分子；同时两条β链末端NH
2
形成盐键，大大降低了对BPG的亲和力。
31．洗脱顺序为：Asp，Gly，Thr，Leu，Lys
32．Glu－Phe－Lys－Pro－Lys
33．因异亮氨酸的β碳原子上有一甲基，干扰了a螺旋结构的形成。在亮氨酸分子中，甲基位于γ碳原子上，远离主链，不会干扰a螺旋结构的形成。
34．第一次突变时丙氨酸转变成了缬氨酸，因后者的侧链较大，使蛋白质的构象改变；另
一次突变后由于异亮氨酸转变为甘氨酸，甘氨酸的侧链较小（和丙氨酸相似），补偿了第一次突变造成的影响。
35．甘氨酸是20种氨基酸中侧链最小的一个氨基酸。正因为如此，它的存在使多肽链能形成紧密的盘绕折叠（to make tight turns）或相互靠近。
36．有谷氨酸和天门冬氨酸的末端羧基（COO－）能与精氨酸的胍基形成静电吸引；精氨酸
的胍基还可作为氢键的供体，与谷氨酸胺、天门冬酰胺、丝氨酸、苏氨酸以及主链的羧基形成氢键。
37．一般来说，蛋白质分子中常出现的氨基酸，如亮氨酸、丝氨酸等，有较多的密码子；而不常出现的氨基酸的密码子的数目相对较少。如色氨酸、蛋氨酸。这种关系对保持遗传的稳定性具有重要的生物学意义。使DNA由于碱基组成的改变或由于一个碱基的突变所造成的密码子改变的几率降到最小。
38．
1）β转角结构很可能出现在7位和19位，即脯氨酸残基处。
2）13位和24位的半肽氨酸之间可能形成二硫键。
3）极性、带电荷的氨基酸如 AsP，Gln，Lys一般在分子的表面，而非极性的氨基酸如Ala，Ile可能在分子内部。苏氨酸尽管有极性，但亲水性指数（hydropathy index）接
近零，故它可能在分子表面或分子内。
39．因为氨基酸的等电pH值大于a一羧基的pK值，而小于a一氨基的pK值。因此这两个基团都是带电的。
40．此肽是亮氨酸脑啡肽，其氨基酸顺序为：Tyr－Gly－Gly－Phe－Leu。由条件2知，此肽的N端为酪氨酸，由条件3知，第3位后的氨基酸应为苯丙氨酸。（胃蛋白酶专一性水解带芳香环的氨基酸的氨基参与形成的肽键）
第二章核苷酸和核酸
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1．watson－Crick碱基配对中，膘吟环上还有哪些位置可以形成额外的氢键？
3．请写出双链DNA（5'）A TGCCCGTA TGCA TTC（3'）的互补链顺序。
4．以克为单位计算出从地球延伸到月亮（～320 000km）这么长的双链DNA的质量。已知双螺旋DNA每1000个核苷酸对重IX10-18g，每个碱基对长0．34nm（一个有趣的例子是
人体一共含DNA 0.5g）。
5．假定连续5个多腺苷酸序列（polyA）可使DNA产生20°的弯曲。如果两个脱氧腺苷酸串列（dA）5的中心碱基对分别相距（a）10个碱基对，（b）15个碱基对，计算这两种情况下DNA的净弯曲。假定DNA双螺旋是10个碱基对一个螺旋。
6．具有回文结构的单链RNA或DNA可形成发卡结构。这两个发卡结构中的双螺旋部分有何不同？
7．在许多真核生物细胞中有一些高度专一的系统用于修复DNA中的G—T错配。这种错配是由G≡C对变成的，这种专一的G—T错配修复系统对于细胞内一般的修复系统是一种补充，你能说出为什么细胞需要一个专门的修复系统以修复G—T错配的原因吗？
8．解释为什么双链DNA变性时紫外光吸收增加（增色效应）？
9．有两个分离自未知细菌的DNA样品，它们各含32％和17％的腺嘌呤碱基。你估计这两种细菌DNA各自所含的腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和胞嘧啶的比例是多少？如果这两种细菌中的一种是来自温泉，哪一种菌应该是温泉菌，为什么？
11．画出下列核酸成分的结构及它们在水中的溶解度顺序（从最易溶到最难溶）：脱氧核糖、鸟嘌呤、磷酸。请说明这些成分的溶解度如何与双链DNA的三维结构相协调。
12．外切核酸酶是能够从多核苷酸的一端逐个地切断磷酸二酯键产生单核苷酸的酶。用蛇毒磷酸二酯酶部分降解（5'）GCGCCAUUGC（3'OH产生的产物是什么？
13．当环境不再有利于活细胞代谢时，细菌形成内生孢子。例如土壤细菌枯草杆菌，当一种或多种营养素缺乏时，它们开始孢子化过程，终产物是一种小的代谢休眠状态的结构，这种孢子能不定期地存活下来，没有可检出的代谢活动。孢子在整个休眠期间（可以逾越1000年）有防止积累潜在的致死突变的机制。枯草杆菌孢子有着比生长细胞强得多的对热、紫外射线、氧化剂这些引起突变的因子的抵抗能力。
A）防止DNA损伤的一个因素是孢子大大减少了水的含量，这种因素能减少哪些类型的突变？为什么？
B）内生孢子有一类被称作小酸溶性蛋白（SASPS）的蛋白，它们能结合于DNA防止环丁烷类二聚物的形成。什么因子造成DNA环丁烷嘧啶二聚物的形成？为什么细菌孢子要有防止它们形成的机制？
14．大肠杆菌噬菌体T2 DNA的分子量为120 X 106，它的头部长约210nm，假定每核苷酸对的分子量为650，计算T2DNA的长度及它的长度和头部长度的比。
15．噬菌体M13 DNA它的碱基组成是A，22％；T，36％；G，21％；C，20％，这个碱基组成说明M13 DNA具有什么特点？
16．已知最简单的细菌——生殖道支原体的全部基因组是一个含有580 070碱基对的环形DNA分子。计算这个DNA分子的分子量和它在松弛状态时的周长。这种支原体染色体的Lk。是多少？如果它的ζ＝一0．06它的Lk是多少？
17．从大鼠肝脏分离得到的一个酶有192氨基酸残基，并且已知它是由一个1440bP的基因编码的。解释这个酶的氨基酸残基数与其基因的核苷酸对之间的关系。
18．一个共价闭合环形DNA分子，当它处于松弛状态，它的Lk＝500，这个DNA分子大概有多少个碱基对？出现下列情况，这个DNA分子的连系数将发生什么变化？1）与一种蛋白复合物结合形成一个核小体；2）DNA的一条链被切断；3）补加A TP和DNA旋转酶（DNA gyrase）；4）双螺旋DNA被热变性。
19．噬菌体λ感染大肠杆菌细胞的一种方式是把它的DNA整合（integration）进人细菌染色体。这个重组过程的成功和大肠杆菌染色体DNA的拓扑学具有相关性。当大肠杆菌染色体DNA超螺旋密度大于一0．045时，整合的可能性小于20％；当ζ值小于一0．06时，这种可能性大于70％。分离自一大肠杆菌培养物的一段DNA长13 800bp，其Lk为1222，计算这段DNA的ζ值，估计噬菌体λ感染这个培养物的可能性。
20．解释为什么负超螺旋的B型DNA可以有利于Z－DNA的形成。
21．从细胞中获得染色质用能降解DNA的内切酶作轻微处理后，并除去所有的蛋白质，把所得的DNA样品用于琼脂糖凝胶电泳分析，电泳结果表明，DNA形成较宽的有规律的梯状区带，各带的分子量是200bP，400bP，600bP，800bP??。这个凝胶电泳结果说明什么问题？为什么DNA区带不敏锐？
22．酵母人工染色体（Y AC）被用于在酵母细胞中克隆大的DNA片断。三种什么样的DNA 顺序可以保证Y AC在酵母细胞内的复制和繁殖？
23．何谓分子杂交？核酸杂交技术的分子基础是什么？
24．某A TP样品在260nm测的吸收值为1，由表中查知其摩尔消光系数（ε）为15．4X103，求此样品中A TP的含量？设比色杯的厚度为Icm。
25．一双链DNA的一条链中的［A］=0．3，［G］=0．24，问：
1）该条链中的［T］和［C］是多少？
2）该条链的互补链中，［T］、［C］、［A］和［G］应是多少？
26．举例说明能使核酸的化学结构发生改变的物质及其作用机理？
27．DNA对紫外光的吸收是由分子内的什么基因造成的？变性核酸和天然核酸的紫外吸收有什么区别？
28．核酸有几类？它们在细胞中的分布、功能如何？
29．什么是回文顺序和镜像重复结构？二者结构上的特征是什么？
30．tRNA在二级结构上有什么特征？
31．什么是DNA的熔解温度（Tm）？含60％（G—C）对的DNA与含40％（G—C）对的DNA的熔解温度有什么区别？
33．简述化学法和双脱氧末端终止法进行DNA序列测定的原理和基本操作方法。
34．写出下列DNA序列互补链的顺序，标出两条链的3'端，找出其中的回文结构部分，指出对称点。“一GA TCGAA TTCA TGCC—”
35．请举出两种区分DNA和RNA的方法。
36．用二苯胺法测定DNA，必须用同源的DNA作为标准样品吗？为什么？
37．为什么说碱基堆积作用是一种重要的稳定核酸三维结构的力？
38．20世纪中叶，科学家如何证明DNA是细胞中携带遗传信息的主要物质？
39．与B型DNA比较，Z型DNA结构的特征是什么？
40．为什么DNA含有胸腺嘧啶而不含尿嘧啶？
41．何谓DNA拓扑异构酶？DNA拓扑异构酶的类型及作用特征是什么？
42．何谓超螺旋DNA？
43．何谓修饰核苷？举两例说明常见的修饰核苷的种类。
44．什么是核酸的变性？变性核酸有哪些特征？
45．何谓DNA的复性？变性后的DNA都能复性吗？
1．A、G的N
7，N
3
3．其互补链为：（5'）GAATGCATACGGGCAT（3'）
4．因为每 1000个核苷酸对重 IX 10-18g，每个碱基对长 0．34nm，DNA的长度为：
320000km＝32X107m＝32X1016nm
32X1016nm／0．34nm＝94．12X1013kb
94．12X1013kbX10-18＝94．12X10-5（g）
5．
1）－dAA－10bp－dAA－，因 polyA弯曲方向相同，两个弯曲度之和为40°。
2）dAA一15bp－dAA一，因polyA弯曲方向相反，互相抵消，故为0°。
6．RNA中的螺旋为A型螺旋，DNA中的螺旋为B型螺旋。
7．真核细胞的DNA分子中，约5％的胞嘧啶是甲基化的，即为5一甲基胞嘧啶；后者可自发脱氨基形成T（胸腺嘧啶）导致G—T错配，这是真核细胞中最常见的错配对形式。因此细胞要有一个专门修复G—T错配的系统，以保证遗传信息的稳定性。
8．物质在溶剂化、取代反应、氢键断裂等变化时会改变对光的吸收。DNA变性时氢键被打断，并影响碱基堆积，因而造成对紫外光吸收的增加。
9．DNA1中，因含有32％的A，所以应含有32％的T；而G＝C＝（1一64％）／2＝18％；DNA2中，因含有17％的 A，所以应含有 17％的 T；而 G＝C＝（1一34％）／2＝33％；DNA1的G－C含量比DNA2的小，推知其Tm值小于DNA2，DNA2应是温泉菌。
11．结构未画出（省略）。三者的溶解性为：磷酸最大，脱氧核糖次之，鸟嘌呤最小。磷酸和核糖极性大，它们在双螺旋的外面相间通过磷酸二酯键连接成DNA主链。碱基是疏水性的，位于双螺旋的内部。
12．蛇毒磷酸二酯酶是一种核酸外切酶，可作用于DNA和RNA。从3'－OH端开始逐个切下 5'一核苷酸，每作用一次产生一个比原核酸链少一个核苷酸的DNA或 RNA片段。故产物有9个。
13．
1）大多数代谢反应需要水，其中也包括突变反应。若孢子中的含水量降低，则导致突变的酶的活性降低，使非酶促的脱嘌呤反应速度降低，因脱嘌呤反应是水解反应。
2）紫外光可导致环丁烷型嘧啶二聚物的形成。因枯草杆菌是一种土壤细菌，孢子可散落在土壤的表面或弥散在空气中。因此易长时间受到紫外线的照射。因此，细菌孢子要有防止环丁烷型嘧啶二聚物形成的机制。
14．120X106／650＝18．5 X 104bp 18．5X104bpXO．34nm＝6．3X104nm
6．3X104nm／210＝300 即 T2DNA的长度是头长的 300倍
15．因 [A]≠[T]，［G］≠［C］，MI3 DNA应该是单链 DNA分子。
16．
l）分子长度：580 070X0．34nm=197 223．8nm=197um
2）分子量：650／每对核苷酸X 580070＝3．77X108
3）Lk。一580 070／10．5＝55 245
4）ζ＝－0．06，说明该DNA6％被解旋
其 Lk为：55 245十［55 245 X（一0．06）］＝55 245—3315＝51 930
17．实际为该酶编码的核苷酸残基数为：192 X 3＝576nt，而基因实际长度为1440bp，这个事实表明，这个真核基因内含内含子顺序，前导顺序或信号顺序。它们在代谢过程中被剪除。
18．Lk＝500，这个DNA分子的碱基对总数为5250bp。
l）Lk值不变 2）Lk变成不定数
3）Lk减少 4）Lk不变
19．ζ＝（Lk－Lk。）／Lk
o Lk
o
＝13 800／10．5＝1314；
ζ＝（1222一1314）／1314＝一0．07，感染的可能性大于70％。
20．因为Z型DNA的Lk值为负值，负超螺旋处于解螺旋，螺旋不足状态；且负超螺旋DNA 是一种较高能量的分子状态，因此有利于Z－DNA的形成。
21．这个结果表明，染色质的结构单位DNA长约200bp。当用内切酶处理染色体时，切点在一定范围之内变化，故DNA电泳区带不敏锐。
22．着丝粒DNA、端粒DNA、复制原点（大肠杆菌细胞中 DNA复制的原点称为 ori C。真核细胞中DNA复制的原点称为自体复制子，缩写为ARS）。
23．将不同来源的DNA样品或DNA与RNA放在一起，热变性后使其缓慢地冷却，若这些异源的核酸分子之间在某些区段有相互补的顺序，在退火过程中会形成杂合的双链，这个过程称为分子杂交。杂交的双链螺旋分子称为杂交分子。杂交分子只有在种属比较近的物种之间才有可能形成。因为分类学上相近的生物，DNA分子往往具有某些相互补的碱基序列。
核酸杂交技术的分子基础是互补碱基的配对结合。不同来源的DNA或RNA，一起加热变性后再缓慢冷却，若这些异源DNA之间或RNA之间，或DNA和RNA之间有互补的核苷酸序列时，在退火过程中会形成杂交分子，即所谓的分子杂交。
24．A260nm＝ε XсX L，с＝A260nm/εX L=6．49X10-5（m）
25．根据碱基等比规律，［A］＋〔G〕=[T]+［C］
1）［T］＋[C]=1—0．3—0．24=0．46
2）T=0．3 C=0．24，A＋G=0．46
26．
1）脱氨基作用，核酸分子中有些碱基的环外氨基会发生自然的丢失（脱氨）。
2）脱氧核苷酸碱基和戊糖之间糖苷键的断裂。DNA在 pH 3的溶液中保温会使嘌呤全部丢失产生一种叫“无嘌呤酸”的衍生物。
3）紫外光可以诱导两个乙烯基团缩合成环丁烷，类似的反应也可以发生在核酸的两个相邻的嘧啶（尤其是胸腺嘧啶残基）之间，从而形成嘧啶二聚物。
4）工业生产产生的活性化学物对环境的污染也可能导致 DNA的损伤，如（1）脱氨试剂，特别是亚硝酸或者是能被代谢成亚硝酸和亚硝酸盐的化学合物；（2）所有烷基化剂（如二甲基硫酸酯，能甲基化鸟嘌呤残基产生O6一甲基鸟嘌呤，使它不能和胞嘧啶配对）。
27．嘌呤碱和嘧啶碱、变性核酸的紫外吸收值比天然核酸的大，因增色效应。
28．核酸有两种：核糖核酸和脱氧核糖核酸。核糖核酸主要存在于细胞质中，但细胞核中也有，如小核RNA、核不均一性RNA。细胞质中的RNA主要有核糖体RNA，信息RNA（mRNAs）和转移RNA（tRNA）三种。核糖体RNA（rRNAs）是核糖体的结构成分。核糖体由大、小两个亚基组成，每个亚基都含有一个相对分子量较大的rRNA和许多不同的蛋白质分子。真核生物和原核生物的核糖体，其rRNA分子数和分子量也不同。信息RNA是携带一个或几个基因信息到核糖体的核酸，它们指导蛋白质的合成。转移RNA是把mRNA中的信息准确地翻译成蛋白质中氨基酸顺序的适配器（adapter）分子。除了这些主要类型的RNA外，还有许多专门功能的RNA，如线粒体RNA、叶绿体RNA和病毒RNA等。
脱氧核糖核酸，主要存在于细胞核，但细胞质中也有，如线粒体DNA、叶绿体 DNA等，此外还有质粒DNA和一些病毒DNA等。DNA的功能是储存遗传信息。
29．所谓回文顺序，就像一个单词，一个词组或一个句子，它们从正方向阅读和反方向阅读，其含义都一样。例如：ROTATOR和NURSESRUN。这个名词被用于描述碱基顺序颠倒重复，因而具有二倍对称的DNA段落。DNA分子上的回文结构就是反向重复顺序；这样的顺序具有链内互补的碱基顺序，故在单链DNA或RNA中能形成发卡结构；在双链DNA内能形成十字架结构。如果颠倒重复存在于同一条链，则这种顺序叫做镜像重复，镜像重复在同一条链内不具有链内互补顺序，因此不能形成发卡结构和十字架结构。
30．这是由tRNA的特征性二级结构决定的，其结构特征如下。
1）由一条核糖核苷酸链组成，由于多核苷酸链的自身回折，使链内可配对的碱基之间通过氢键形成碱基对，构成了分子内的螺旋区；而不配对的碱基形成环状突起，这些环状突起
好像是三叶草的三片小叶，而与环状突起相连的双螺旋区构成了三叶草的叶柄，故称tRNA 的二级结构为三叶草型结构。
2）根据tRNA分子结构中各部分的功能及碱基组成的特征，tRNA的三叶草结构可分为几个主要的部分（结构区）。
（1）3'端有 CCA顺序，在所有的 tRNA分子中，3'端均为 CCA。在蛋白质生物合成中，tRNA充当搬运工，每种特定的tRNA所搬运的氨基酸就挂在 3'羟基上。故称3'端为氨基酸臂。
（2）TΨC环，该环内含有 TΨC（54～56位氨基酸）顺序而得名。T为胸腺嘧啶核糖核苷酸，Ψ为假尿嘧啶核苷酸，该环与核糖体的结合有关。
（3）反密码臂（anticodon arm），因含反密码子而得名。密码与反密码之间有互补配对的关系。密码子存在于mRNA分子上，在mRNA链上，每三个相邻的核苷酸为一种氨基酸编码，代表了一种氨基酸。这三个相邻的核苷酸被称为一个密码子，简称密码。如丙氨酸的密码是GCC，搬运丙氨酸的tRNA分子中的反密码臂中，含有IGC顺序，被称为反密码子。
（4）二氢尿嘧啶臂（DHU臂），因该环中含有两个DHU而得名。该环也与核糖体的结合有关。
（5）额外臂（extra arm），它处于 TΨC臂和反密码子臂之间，在不同的 tRNA分子中，该臂所含的核苷酸数目不同，这可以作为 tRNA分类的指标。
31．DNA的变性发生在狭窄温度区间，DNA的变性伴随着紫外吸收的增加。当紫外吸收增加值达总增加值一半时的温度称为该DNA的熔解温度。含较高（G—C）百分含量的DNA，其Tm 值也高。
33．这两种DNA序列分析的基本原理是把DNA变成在不同碱基的核苷酸处打断的四套末端标记的DNA片断。每套DNA片断打断的位置位于一种特异碱基。例如：一个具有pAATCGACT
的 DNA顺序，如果一个反应能使 DNA在 C处打断就会产生 PAATC和pAATCGAC两个片断。一个能使 DNA在 G处打断的反应仅产生一个 PAATCG片断。因此，当相应于 4个不同碱基产生的四套 DNA片断并排进行电泳分离时，它们产生一个可以直接读出DNA顺序的梯状区带。双脱氧末端终止法（Sanger法）应用得更广泛，因为技术上比较简单。这种方法是用酶法合成与被分析链互补的DNA链。
35．
1）根据颜色反应，RNA与地衣酚试剂反应产生亮绿色，DNA无此反应
2）RNA可被 RNaseA水解，DNA不能被该酶水解
36．不，该法根据脱氧核糖的存在。
37．嘌呤和嘧啶具有疏水性，在细胞所具有的中性pH，它们比较难溶于水。在两个碱基如金属圆币一样上下平行堆积时，碱基之间产生疏水堆积作用。这是两个碱基之间互相作用的
两种重要方式之一。这种堆积作用综合了范德华（van der Waals）引力和偶极作用两种作用力。这种堆积降低了碱基和水的接触，是一种重要的稳定核酸三维结构的力。
38．1944年，Oswald T．Avery等人发现，从有毒肺炎双球菌菌株抽提的 DNA能使无毒性的同类菌株转化成有毒茵株。于是Avery和他的同事得出结论：抽提自有毒菌株的DNA带有使无毒菌株转化成有毒菌株的可遗传信息。他们还发现，把 DNA样品用蛋白酶处理不破坏DNA的转化活性，但是使用脱氧核糖核酸酶处理（破坏DNA的酶， DNase）则可使 DNA失去这种活性。
1952年由 Alfred D．Hershey和 Meatha Chase所作的实验独立地提供了 DNA携带遗传信息的第二个证据。他们用放射性同位素32P标记噬菌体 DNA的磷酸基因；用32S标记噬菌体蛋白质衣壳的含硫氨基酸（注意DNA不含硫元素，而噬菌体蛋白不含磷）分别感染未标记的细菌悬浮物。然后，感染了噬菌体的细菌细胞置切碎器（Blender）中搅拌，以使病毒衣壳离开细菌，并用离心法使空病毒衣壳与细胞分离。发现感染了32P标记噬菌体的细胞含32P，表明病毒 DNA已进入细胞而病毒蛋白质外壳不含放射性。用同样方法处理感染了用35S 标记的病毒的细胞发现不含放射性，但病毒衣壳含35S 。感染的病毒能复制子代，说明使病毒复制的遗传信息是由DNA导入的，即是病毒颗粒中的含磷DNA，而不是含硫的病毒蛋白质外壳进入细胞，因此是DNA提供了遗传信息完成了病毒的复制。
39．最明显的区别在于它是左手螺旋的。每个螺旋有12个碱基对，每个碱基对上升0．37nm，DNA的主链取 Z字形。有一些核苷酸顺序较易于形成 Z型结构。主要的例子是嘌呤和嘧啶碱基取相间排列的顺序，特别是C，G相间或5一甲基胞嘧啶与鸟嘌呤相间的顺序。和B型DNA相比较，Z型DNA显得又细又长。
40．胞嘧啶的脱氨产物尿嘧啶很容易被作为DNA的外来物而被DNA修复系统除去。如果DNA 本来就含有尿嘧啶，则由胞嘧啶脱氨产生的尿嘧啶的识别就会很困难，因为保留下来的尿嘧啶就会在复制期间与腺嘌呤配对导致DNA顺序的永久性改变。胞嘧啶的脱氨作用会逐渐地导致G三C碱基对的减少和A＝T配对的增加，经过千万年以后，胞嘧啶的脱氨作用会排除G 三C碱基对及含有它的遗传密码。在DNA中含有胸腺嘧啶可能是进化过程中的关键转变点，它使得遗传信息的长期储存成为可能。
41．能够增加或减少DNA超螺旋程度的酶称为DNA拓扑异构酶。它们的作用是催化DNA拓扑连系数的改变。DNA拓扑异构酶可以分成两大类：一次作用改变一个拓扑连系数的酶称为I 型DNA拓扑异构酶；一次作用改变（增加或碱少）两个拓扑连系数的酶称为II型DNA拓扑异构酶。I型DNA拓扑异构酶作用的方式是临时性地切开双链DNA中的一条链，使切口的一端围绕未切割链旋转一圈，并重新连接切口。因此，这类DNA拓扑酶每次作用改变DNA分子的拓扑连系数为l。II型DNA拓扑异构酶同时切开 DNA的两条，因此，一次作用改变 DNA 分子的拓扑连系数为 2。
在大肠杆菌细胞中起码有四种不同的拓扑异构酶（I一IV）。I型 DNA拓扑异构酶（拓扑异构酶I和III）能使DNA连系数增加而松弛负超螺旋DNA。一种细菌II型DNA拓扑酶，即 DNA拓扑酶 II或称 DNA旋转酶（gyrase），能把负超螺旋导入 DNA（减少Lk）。它使用ATP作为能源。
第一章蛋白质化学（17学时） 【目的要求】 ⒈ 掌握蛋白质的概念和化学组成；蛋白质的基本结构单位——氨基酸的分类及结构；蛋白质各级分子结构的内容和特点。 2．熟悉氨基酸、蛋白质的理化性质及分离鉴定方法。 3．了解蛋白质的分子结构与功能的关系及蛋白质一级结构的测定。 【教学内容】 第一节蛋白质通论 一、蛋白质是生命的物质基础 二、蛋白质的分类：形状；功能；组成；溶解度 三、蛋白质的元素组成 第二节蛋白质的基本结构单位——氨基酸 一、氨基酸的基本结构特征 二、氨基酸的分类及结构 三、蛋白质中不常见的氨基酸 四、非蛋白质氨基酸 五、氨基酸的理化性质 1．一般物理学性质 2．氨基酸的化学性质：酸碱性质，等电点 六、氨基酸的化学反应 1．茚三酮反应 2．亚硝酸反应 3． 2．4—二硝基氟苯反应（FDNB） 4．甲醛反应 5．二甲基氨基萘磺酰氯反应（DNS-Cl） 6．与酰化剂的反应 7．α-羧基的成酯反应 8．侧链基团参加的反应 七、氨基酸的分离和分析鉴定 1．蛋白质的水解 2．氨基酸的分离鉴定：离子交换柱层析，纸层析，薄层层析 第三节蛋白质的结构 一、蛋白质的一级结构 1．肽键和肽链 2．二硫键 3．蛋白质的一级结构测定 ——片段重叠法 二、蛋白质的二级结构 1．酰胺平面和蛋白质的构 象：肽平面，双面角，构象，构 型 2．维持蛋白质构象的作用 力：氢键，离子键，范德华力， 疏水作用，配位键，二硫键 3．蛋白质二级结构的主要 类型：α-螺旋，β-折叠，β-拐 角，无规卷曲 三、蛋白质的超二级结构和结 构域 1．超二级结构 2．结构域 四、纤维状蛋白质结构 1．角蛋白：α-角蛋白，β- 角蛋白 2．胶原蛋白 五、蛋白质的三级结构三级 结构的特点：（1）（2）（3）（4） 六、蛋白质的四级结构四级 结构的特征：（1）（2）（3）（4） （5） 第四节蛋白质的结构与功能 一、蛋白质一级结构与空间结 构的关系 二、一级结构与功能的关系 1．一级结构的微小差别可 导致生理功能的重大不同（镰刀 型细胞贫血症） 2．同功能蛋白质中氨基酸 顺序的种属差异与生物进化 三、蛋白质的空间结构与功能 1．蛋白质的变性与复性 2．胰岛素的结构与功能 3．血红蛋白与肌红蛋白的 结构与功能 4．免役球蛋白的结构与功 能 第五节蛋白质的理化性质 一、蛋白质的胶体性质 二、蛋白质的两性性质和等电 点 三、蛋白质的沉淀作用 1．可逆沉淀作用：盐析与 盐溶 2．不可逆沉淀作用 四、蛋白质的紫外吸收性质 五、蛋白质的沉降作用 第六节蛋白质的分离纯化与鉴 定 一、蛋白质分离纯化的基本原 则 二、细胞粉碎及蛋白质的抽提 三、蛋白质分离纯化的主要方 法 1．离子交换柱层析法 2．凝胶过滤法（分子筛） 3．亲和层析法 4．疏水层析法 5．蛋白质沉淀法：等电点 沉淀，盐析法，有机溶剂沉淀法 四、蛋白质分子量的测定 1．凝胶过滤 2． SDS-PAGE 五、蛋白质的纯度鉴定 1．电泳 2．等电聚焦：纯度，等电 点 六、蛋白质含量测定 1．紫外吸收法 2．染料结合法（Bradford） [返回索引]第二章核苷酸与核 酸（13学时） 【目的要求】 1. 掌握核酸的化学组成; DNA 的分子结构及生物学意义; RNA 的种类及结构。 2. 熟悉核酸的理化性质; 核
(单选题) 1: 体内氨的主要去路是 A: 生成非必需氨基酸 B: 合成尿素 C: 参与合成核苷酸 D: 生成谷氨酰胺 正确答案: (单选题) 2: 酶原无活性是因为： A: 酶蛋白肽链合成不完全 B: 活性中心未形成或未暴露 C: 酶原是无活性蛋白质 D: 缺乏辅酶或辅基的作用 正确答案: (单选题) 3: 合成1分子尿素可以从体内清除几分子CO2？ A: 1分子 B: 2分子 C: 3分子 D: 4分子 正确答案: (单选题) 4: 嘌呤核苷酸从头合成时，首先合成的是下列哪种核苷酸？ A: AMP B: GMP C: IMP D: ATP 正确答案: (单选题) 5: 下列关于乙酰辅酶A进入胞质的转运，哪种叙述是正确的？ A: 由柠檬酸-丙酮酸穿梭系统转运。 B: 由柠檬酸-苹果酸穿梭系统转运。 C: 由肉碱酰基转移酶系统转运。 D: 由磷酸甘油穿梭系统转运。 正确答案: (单选题) 6: 在酵解途径中，下列哪种酶催化可逆反应？ A: 磷酸果糖激酶 B: 已糖激酶 C: 丙酮酸激酶 D: 烯醇化酶 正确答案: (单选题) 7: 含2n个碳原子的饱和脂酸经β-氧化分解，可生成的FADH2数是A: 2n个 B: n个 C: n+1个 D: n-1个 正确答案: (单选题) 8: NADPH主要来源于哪条途径？ A: 糖酵解 B: 乙醛酸循环 C: 柠檬酸循环 D: 磷酸已糖支路 正确答案: (单选题) 9: 核酸的基本组成单位是 A: 戊糖和碱基 B: 戊糖和磷酸 C: 核苷酸
正确答案: (单选题) 10: 下列哪种与能量有关的反应不是在线粒体中进行？ A: 柠檬酸循环 B: 脂肪酸氧化 C: 氧化磷酸化 D: 糖酵解 正确答案: (单选题) 11: 第二信使分子IP3的功能是： A: 打开肌浆网膜Ca2+ 通道 B: 激活质膜Ca2+—ATPase C: 打开质膜Ca2+ 通道 D: 激活肌浆网膜Ca2+—ATPase 正确答案: (单选题) 12: 异三聚体G蛋白的α-亚基具有哪种酶的活性? A: ATPase B: GTPase C: CTPase D: UTPase 正确答案: (单选题) 13: 细胞间信息物质不包括 A: 生长因子 B: 肾上腺素 C: N-脂酰鞘氨醇 D: 一氧化氮 正确答案: (单选题) 14: 辅酶与辅基的主要区别是 A: 与酶蛋白结合的牢固程度不同 B: 化学本质不同 C: 分子大小不同 D: 催化功能不同 正确答案: (单选题) 15: 米氏常数Km可以用来度量： A: 酶和底物亲和力大小 B: 酶促反应速度大小 C: 酶被底物饱和程度 D: 酶的稳定性 正确答案: (单选题) 16: 下列哪一项符合诱导契合学说？ A: 酶与底物的关系有如锁和钥的关系 B: 在底物的诱导下，酶的构象可发生一定改变，才能与底物进行反应C: 底物的结构朝着适应酶活性中心方面改变 D: 底物与酶的变构部位结合后，改变酶的构象，使之与底物相适应正确答案: (单选题) 17: 下列哪一物质的甲基不是来自S-腺苷甲硫氨酸？ A: 卵磷脂 B: 肾上腺素 C: 胸苷酸 D: 肌酸磷酸 正确答案: (单选题) 18: 下列哪种酶是尿素合成途径中的关键酶？ A: 氨甲酰磷酸合成酶I B: 鸟氨酸转氨甲酰酶
（生物科技行业）南开大学微生物专业历年生物化学 试题
南开大学壹九九九年研究生入学考试生物化学试题 1．举例说明垂体激素和其它内分泌腺的关系如何？（10分） 2．试述K m的意义及常用的求K m的方法。（10分） 3．B族维生素缺乏将影响哪些代谢？为什么？（10分） 4．脂肪酸β-氧化的产物及其代谢的命运如何？用代谢途径表示其中的俩条代谢去路。（20 5．某同学在用醋酸纤维膜电泳法分离血清蛋白质时没有得到预期的分离效果，请帮助他分析原因。（10分） 6．何谓联合脱氨基作用？用结构式表示出联合脱氨基作用的主要方式。（10分） 7．为什么说电泳法，离子交换纤维素层析，分子排阻层析可用于分离蛋白质？（10分）8．DNA体外重组的理论基础及主要的方法步骤是什么？（10分） 9．试比较核糖核酸和脱氧核糖核酸的生物合成。（10分） 南开大学2000年研究生入学考试生物化学试题 壹．壹双链DNA分子的壹条链中的[A]＝0．3，[G]＝0．24，问 1．该条链中[T]和[C]是多少？ 2．该条链的互补链中，[T]，[C]，[A]和[G]应是多少？（10分） 二．按下表要求比较饱和脂肪酸的从头合成和脂肪酸的β-氧化作用：（10分）
三．请举俩例说明反馈作用及其生物学意义。（10分） 四．壹线性双链DNA分子中的胞嘧啶由于脱氨基而转变为尿嘧啶，问进行壹次半保留复制后所产生的子代DNA分子中该部位的核苷酸对应是什么？俩次复制后呢？（10分）五．根据下列资料推出某肽的氨基酸排列顺序：（10分） 1．完全酸水解得到Phe，Pro，Glu，（Lys）2，Met，NH3 2．用FDNB试剂处理得到DNP—Phe 3．用溴化氰水解此肽得到壹个以高丝氨酸内酯结尾的四肽和壹个二肽 4．用胰蛋白酶水解可产生俩个三肽 5．用羧肽酶A或羧肽酶B处理都不能得到阳性结果。 六．DNA重组技术中使用的工具酶有哪些？详述它们的作用特征。（10分） 七．用反应式表示出生命活动所需的能量是如何产生的？（10分） 八．用代谢途径表示出甘油在肝脏中可能的代谢去路。（15分） 九．下表数据是在没有抑制剂存在或有2mM的抑制剂存在时测得的反应速度随底物浓度变化的情况：
一、判断题：(请用“√”或“×”表示，共15分) 1、百日咳毒素可使Giα的精氨酸ADP__核糖基化。 ( 2、磷酸肌醇系统是不经过腺昔酸环化酶的另一第二信使系统。 ( 3、人体可以合成各种类型的饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸。 ( 4、氨是有毒物质，在体内主要是以谷氨酰胺的形式进行转运的。 ( 5、当二分子甘油异生为一分子葡萄糖时需要消耗二个高能磷酸键。 ( 6、肾上腺皮质激素和肾上腺髓质激素都是首先通过与其膜受体结合而产生生日 效应的。 ( 7、据推测细胞内的DNA主要以B型结构存在。 ( 8、生物体内核酸的碱基配对方式都是watson-Crick配对。 ( 9、导致RNA化学性质更活泼的关键是RNA中的核糖含有2'-OH。( 10、碱基的内酰胺和内酰亚胺的同份异构互变是造成生物天然突变的主要原[ 之一。 ( ) 11、内切核酸酶是指能切断磷酸二酯键的核酸酶。 ( 12、DNA样品的溶解温度是指DNA变性一半时的温度。 ( 13、“基因组”是某物种所有基因的组合。 ( 14、凡有抑制剂存在，都会降低酶与底物的亲和力。 ( 15、球蛋白的三维折叠均采取亲水侧基在外，疏水侧基藏于分子内部的结构 式。 ( ) 二、选择题：(共10分) 1、磷酸化酶激酶中的( )是钙调素，因而可被Ca2+激活。 a)α-亚基； b)β-亚基； c)Y-亚基； d)δ-亚基 2、霍乱毒素可以使Gs蛋白失去( )。 a) GTP-GDP交换能力； b)GTPase的活性； c)与受体的结合能力； d)激活腺昔酸环化酶的能力 3、阿司匹林具有解热止痛的作用，这主要是由于它抑制了( )。 a)肾上腺素的合成； b)甲状腺素的合成； c)前列腺素的合成； d)肾上腺皮质激素的合成 4、蛋白激酶C是Ca2+和( )依赖性激酶。 a)PE b)PC； c)PS； d)Pi 5、糜蛋白酶的亲和标记物为( a)TLCK； b)TPCK c)DFP； d)Pitc 6、Arg的pk1'＝2．17 pk2'＝9．04 pk3'＝12．48 其p’等于( )。 a) 5．613 b) 7．332 C) 7．903 d) 10．76 7、在细胞的DNA中( a)用一个碱基对替换一个碱基对的突变称为点突变； b)插入一个碱基对的突变称为点突变； c)一个遗传位点上的突变称为点突变： d)改变一个基因的突变称点突变 8、大肠杆菌RNA聚合酶中的Sigma因子( ) a)是识别转录终止点的亚基； b)是识别转录起始点的亚基； c)是不可替换的亚基； d)是不可解离的亚基 9、真核生物mRNA poly(A)尾巴的加接信号() a)在转录终止之后； b)在转录终止点之前；
南开99生物化学 一、判断题：(请用"√"或"×"表示，共15分) 1、百日咳毒素可使Giα的精氨酸ADP__核糖基化。 ( 2、磷酸肌醇系统是不经过腺昔酸环化酶的另一第二信使系统。 ( 3、人体可以合成各种类型的饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸。 ( 4、氨是有毒物质，在体内主要是以谷氨酰胺的形式进行转运的。 ( 5、当二分子甘油异生为一分子葡萄糖时需要消耗二个高能磷酸键。 ( 6、肾上腺皮质激素和肾上腺髓质激素都是首先通过与其膜受体结合而产生生日效应的。 ( 7、据推测细胞内的DNA主要以B型结构存在。 ( 8、生物体内核酸的碱基配对方式都是watson-Crick配对。 ( 9、导致RNA化学性质更活泼的关键是RNA中的核糖含有2'-OH。( 10、碱基的内酰胺和内酰亚胺的同份异构互变是造成生物天然突变的主要原[ 之一。 ( ) 11、内切核酸酶是指能切断磷酸二酯键的核酸酶。 ( 12、DNA样品的溶解温度是指DNA变性一半时的温度。 ( 13、"基因组"是某物种所有基因的组合。 ( 14、凡有抑制剂存在，都会降低酶与底物的亲和力。 ( 15、球蛋白的三维折叠均采取亲水侧基在外，疏水侧基藏于分子内部的结构式。 ( ) 二、选择题：(共10分) 1、磷酸化酶激酶中的( )是钙调素，因而可被Ca2+激活。 a)α-亚基； b)β-亚基； c)Y-亚基； d)δ-亚基 2、霍乱毒素可以使Gs蛋白失去( )。
a) GTP-GDP交换能力； b)GTPase的活性； c)与受体的结合能力； d)激活腺昔酸环化酶的能力 3、阿司匹林具有解热止痛的作用，这主要是由于它抑制了( )。 a)肾上腺素的合成； b)甲状腺素的合成； c)前列腺素的合成； d)肾上腺皮质激素的合成 4、蛋白激酶C是Ca2+和( )依赖性激酶。 a)PE b)PC； c)PS； d)Pi 5、糜蛋白酶的亲和标记物为( a)TLCK； b)TPCK c)DFP； d)Pitc 6、Arg的pk1'＝2．17 pk2'＝9．04 pk3'＝12．48 其p'等于( )。 a) 5．613 b) 7．332 C) 7．903 d) 10．76 7、在细胞的DNA中( a)用一个碱基对替换一个碱基对的突变称为点突变； b)插入一个碱基对的突变称为点突变； c)一个遗传位点上的突变称为点突变： d)改变一个基因的突变称点突变 8、大肠杆菌RNA聚合酶中的Sigma因子( ) a)是识别转录终止点的亚基； b)是识别转录起始点的亚基； c)是不可替换的亚基； d)是不可解离的亚基 9、真核生物mRNA poly(A)尾巴的加接信号() a)在转录终止之后； b)在转录终止点之前； b)在转录终止点上； d)在mRNA的5'末端 10、在大肠杆菌核糖体中( a)大核糖体亚基负责肽键的合成； b)S12蛋白负责肽键的合成；
南开大学生物化学考研大纲及复习经验 南开大学生物化学考研复习都是有依据可循的,考研学子关注事项流程为：考研报录比-大纲-参考书-资料-真题-复习经验-辅导-复试-导师，缺一不可。 作为被南开大学生物化学与分子生物学专业录取的考研党中的一员，为了纪念一下本人顺利斩杀南开大学生物化学科目这一拦路虎，特意写下这篇文章来谈谈自己关于南开大学生物化学科目的考研复习经验，另附上南开大学生物化学科目的考研大纲一篇。 就我自身而言，我的生物化学本科成绩实在一般，因而在考研的准备过程中，我对这一科目的重视程度也是十分之高的。单单是教材，我就认认真真地过了两面，当然也包括教材上的课后习题。吃透教材之后，等到大纲出来，我就开始看上届学长推荐给我的专业课复习资料了。我自己用完之后觉得这套资料的内容还不错，而且相较于市场上的其他专业课复习资料而言，其内容的确是很符合南开大学生物化学科目的历年出题思路和考察内容。所以，我把我当时攻克下南开大学生物化学科目所使用的参考书目列表如下： 《现代生物化学》，黄熙泰、于自然、李翠凤主编化学工业出版社2005年第二版《生物化学》，王镜岩朱圣庚徐长法高等教育出版社第3版 《南开大学生物化学考研红宝书》，由天津考研网主编。 最后，我将南开大学生物化学科目的考试大纲附在下面，同学们可以看看南开大学这一科目的考察内容，有重点的展开复习工作： 《生物化学（生科院）》考试大纲 一、考试目的 本考试是生命科学学院全日制科学学位硕士研究生的入学资格考试。 二、考试的性质与范围 本考试是测试考生生物化学基础知识、基本技术和相关研究进展的掌握程度，以及对上述内容理解和综合运用能力的参照性水平考试。考试范围包括本大纲规定的生物化学基础知识和基本技术，及实时的相关研究进展。 三、考试基本要求 1.具备生物化学研究领域相关的化学、生物学等方面的背景知识。 2.全面掌握生物化学基础知识和基本技术，了解相关研究进展。
南开大学2008年研究生入学生物化学考试试题 一、选择题 1、凝血酶原中特有的氨基酸为 A 5-羟赖氨酸 B 6-N-甲基赖氨酸 C γ-羧基谷氨酸 D 磷酸丝氨酸 2、一氨基酸溶于水后，溶液pH为5，则该氨基酸的pI为 A 大于5 B 小于5 C 等于5 D 等于7 3、维生素D3 原是指 A 胆固醇 B 7-脱氢胆固醇 C 25-（OH）维生素D3 D 1，25-（OH）2 维生素D3 4、与酰基转移相关的维生素是 A 尼克酸 B 比多素 C 生物素 D 遍多算 5、竞争性抑制剂的抑制程度与下列那种因素无关 A 作用时间 B 酶与抑制剂亲和力的大小 C 抑制剂浓度 D 酶与底物亲和力的大小 6、谷胱甘肽还原酶的辅酶是 A NADPH B NADH C FMNH2 D FADH2 7、当Km 值等于0、25【S】时，反应速度为最大速度的 A 70% B 75% C 80% D 90% 8、从组织提取液中沉淀蛋白质而又不使之变性的方法是加入 A 硫酸铵 B 三氯醋酸 C 氯化汞 D 5mol/L 盐酸 9、下列那一电子传递体是非蛋白组分 A Cyt.a B CoQ C Cyt.b D Cyt.c 10、下列那种酶是胆固醇合成途径的限速酶 A HMGCoA 合酶 B HMGCoA 还原酶 C HMGCoA 裂解酶 D 磷酸二酯酶 11、NO 是通过激活下列那种酶来调节相关生理功能的 A 腺苷酸环化酶 B 膜结合型鸟甘酸环化酶 C 可溶型鸟甘酸环化酶 D 磷酸二酯酶 12、下列哪种情况为负同促效应 A Asp 激活ATCase B ATP 抑制磷酸果糖激酶 C ATP 抑制柠檬酸合酶 D F-1，6-2P 激活丙酮酸激酶 13、PKC可被下列那种物质激活 A cAMP B IP3 C DAG D cGMP 14、下列哪种物质是糖异生的前体 A 乙酰辅酶A B 丙酮 C 谷氨酸 D β-羟丁酸 15、在肝细胞中，酵解生成还原辅酶NADH 是通过下列哪种方式进入线粒体的 A 葡萄糖-丙氨酸循环 B 苹果酸-天冬氨酸循环 C 3-磷酸甘油-磷酸二羟丙酮循环 D 柠檬酸-丙酮酸循环 16、作为RNA合成模板的DNA 链也称为 A 正链 B 有意义链 C 负链 D 编码链 17、在记录DNA序列时，转录起始点左边的序列称为 A 上游 B 下游 C 远端 D 近端 18、真核生物内含子的剪接机制可分为 A 、两类B、四类C、三类D、五类 19、HIV 病毒携带的逆转录酶具有 A、蛋白酶活性 B 、3’-5’外切酶活性C、脱氢酶活性D、RNase H 活性 20、蛋白质生物合成起始核糖体附着在mRNA的 A、P 位 B、ρ（rho）依赖位点 C、SD 顺序 D、A 位 二、判断题（50分） 1、阳离子交换树脂分离Asp 和Lys,pH7、0 缓冲体系中，Lys 先被洗脱下来。
南开大学一九九九年研究生入学考试生物化学试题 1．举例说明垂体激素与其它内分泌腺的关系如何？（10分） 2．试述K m的意义及常用的求K m的方法。（10分） 3．B族维生素缺乏将影响哪些代谢？为什么？（10分） 4．脂肪酸β- 氧化的产物及其代谢的命运如何？用代谢途径表示其中的两条代谢去路。（20 5．某同学在用醋酸纤维膜电泳法分离血清蛋白质时没有得到预期的分离效果，请帮助他分析原因。（10分） 6．何谓联合脱氨基作用？用结构式表示出联合脱氨基作用的主要方式。（10分） 7．为什么说电泳法，离子交换纤维素层析，分子排阻层析可用于分离蛋白质？（10分）8．DNA体外重组的理论基础及主要的方法步骤是什么？（10分） 9．试比较核糖核酸与脱氧核糖核酸的生物合成。（10分） 南开大学2000年研究生入学考试生物化学试题 一．一双链DNA分子的一条链中的[A]＝0．3，[G] ＝0．24，问 1．该条链中[T]和[C]是多少？ 2．该条链的互补链中，[T]，[C]，[A] 和[G]应是多少？（10分） 四．一线性双链DNA分子中的胞嘧啶由于脱氨基而转变为尿嘧啶，问进行一次半保留复制后所产生的子代DNA分子中该部位的核苷酸对应是什么？两次复制后呢？（10分）五．根据下列资料推出某肽的氨基酸排列顺序：（10分） 1．完全酸水解得到Phe，Pro，Glu，（Lys）2，Met，NH3 2．用FDNB试剂处理得到DNP—Phe 3．用溴化氰水解此肽得到一个以高丝氨酸内酯结尾的四肽和一个二肽 4．用胰蛋白酶水解可产生两个三肽 5．用羧肽酶A或羧肽酶B处理都不能得到阳性结果。 六．DNA重组技术中使用的工具酶有哪些？详述它们的作用特征。（10分） 七．用反应式表示出生命活动所需的能量是如何产生的？（10分）
南开大学2006年研究生入学考试生物化学试题 一．判断下列说法正确与否（对“√”，错者划“×”，每小题1分，共15分） 1．核苷酸的呋喃型核糖是六元环结构。 2．腺嘌呤的2位有一个取代氨基。 3．在RNA的生物合成过程中，GTP的α磷原子渗入RNA链中。 4．逆转录酶具有校对功能。 5．内含子的剪切反应都不需要ATP。 6．真核细胞DNA的高度重复顺序也称“卫星DNA”。 7．限制图和遗传图的制作方法是一样的。 8．色氨酸操纵子有负调节机制。 9．以质粒为载体的转基因过程称转导。 10．真核生物一个基因可产生多种蛋白质产物。 11．葡萄糖-6-磷酸进入酵解或磷酸戊糖途径主要取决于NADP+和NADPH的比值。12．发酵和酵解均不需氧参加，故统称为糖的无氧分解。 13．别构酶都是寡居酶。 14．甘油和乙酰CoA都是糖异生的前体。 15．类固醇激素也可通过质膜受体发挥效应。 二．填空题（每空1分，共23分） 1．一个3150bp共价闭合环形DNA分子，其超螺旋密度为-0.05，则其Lk，Tw和Wr值分别为（）、（）、（）。 2．真核mRNA通常其5’末端有（），3’末端有（），它们都是（）过程的产物。 3．蛋白质生物合成可以分裂为五个阶段，它们是（）、（）、（）、（）、（）。 4．维持蛋白质三级结构的次级键有（）、（）、（）、（）。 5．胶原蛋白多肽链中有很多序列是由（）重复而成的。 6．α-螺旋结构中的二面角φ为（）度，ψ为（）度。 7．维生素K的主要作用是（）。 8．蛋白质的泛素化作用最终导致蛋白质的（）。 9．Glu脱羧酶的辅酶为（），丙酮酸羧化酶的辅酶为（）。10．一氧化氮合酶催化（）生成NO。 三．名词解释（每小题2分，共16分） 1．顺反子 2．多聚核糖体 3．反激活子 4．转录单位 5．基因组学 6．酶的活力单位 7．SDS-PAGE 8．酪氨酸激酶受体 四．选择题（每小题一分，共11分） 1．框移突变（frame-shift mutation）可能是基因编码顺序：
南开大学 2006年攻读硕士研究生入学考试试题 一．判断下列说法正确与否（对“√”，错者划“×”，每小题1分，共15分） 1．核苷酸的呋喃型核糖是六元环结构。 2．腺嘌呤的2位有一个取代氨基。 3．在RNA的生物合成过程中，GTP的α磷原子渗入RNA链中。 4．逆转录酶具有校对功能。 5．内含子的剪切反应都不需要ATP。 6．真核细胞DNA的高度重复顺序也称“卫星DNA”。 7．限制图和遗传图的制作方法是一样的。 8．色氨酸操纵子有负调节机制。 9．以质粒为载体的转基因过程称转导。 10．真核生物一个基因可产生多种蛋白质产物。 11．葡萄糖-6-磷酸进入酵解或磷酸戊糖途径主要取决于NADP+和NADPH的比值。 12．发酵和酵解均不需氧参加，故统称为糖的无氧分解。 13．别构酶都是寡居酶。 14．甘油和乙酰CoA都是糖异生的前体。 15．类固醇激素也可通过质膜受体发挥效应。 二．填空题（每空1分，共23分） 1．一个3150bp共价闭合环形DNA分子，其超螺旋密度为-0.05，则其Lk，Tw和Wr值分别为 （）、（）、（）。 2．真核mRNA通常其5’末端有（），3’末端有（），它们都是（）过程的产物。 3．蛋白质生物合成可以分裂为五个阶段，它们是（）、（）、（）、（）、（）。 4．维持蛋白质三级结构的次级键有（）、（）、（）、（）。5．胶原蛋白多肽链中有很多序列是由（）重复而成的。 6．α-螺旋结构中的二面角φ为（）度，ψ为（）度。 7．维生素K的主要作用是（）。 8．蛋白质的泛素化作用最终导致蛋白质的（）。 9．Glu脱羧酶的辅酶为（），丙酮酸羧化酶的辅酶为（）。 10．一氧化氮合酶催化（）生成NO。 三．名词解释（每小题2分，共16分） 1．顺反子： 2．多聚核糖体： 3．反激活子：
南开大学2013年硕士研究生入学考试试题 一、选择题（每题1分，共33分） 1、下列哪种氨基酸为非蛋白质氨基酸（） A羟赖氨酸 B羟脯氨酸 C鸟氨酸 D精氨酸 2、下列哪种试剂不能用于蛋白质的N-末端分析（） A2,4-二硝基氟苯 B二异丙基磷酰氟 C苯异硫氰酸酯 D丹黄酰氯 3、下列哪种酶只存在于乙醛酸循环 A柠檬酸合酶 B苹果酸合酶 C苹果酸脱氢酶 D异柠檬酸脱氢酶 4、电子传递抑制剂抗霉素A的抑制位点是 A NAD-CoQ还原酶 B琥珀酸脱氢酶 C细胞色素bc1复合物 D细胞色素c-细胞色素（a+a3） 5、谷氨酰胺合成酶受下列哪种调节 A磷酸化/脱磷酸化 B乙酰化/脱乙酰化 C腺苷酰化/脱腺苷酰化 D甲基化/脱甲基化 6、下列哪种酶专一水解色氨酸羧基形成的肽键 A胰蛋白酶 B胰凝乳蛋白酶 C氨肽酶 D羧肽酶 7、下列哪种氨基酸可干扰α-螺旋的形成 A Lys B Glu C Gly D Ala 8、缬氨霉素是下列哪种离子的载体 A Ca2+ B Mg2+ C Na+ D K+ 9、下列哪种物质不能自由通过线粒体膜
A草酰乙酸 B丙酮酸 C苹果酸 D柠檬酸 10、下列哪种物质是蛋白激酶A（PKA）的底物 A去分支酶 B磷酸化酶b C磷酸化酶a D磷酸化酶b激酶 11、蛋白激酶C（PKC）的活性依赖于下列哪种磷脂 A PI B PC C PE D PS 12、酶高效催化的机制是 A改变化学反应的平衡点 B能催化热力学上不能进行的反应 C降低反应的活化能 D减少活化分子的数量 13、一对电子经过Q循环传递给细胞色素C，共有几个质子从线粒体基质内排至内膜外侧 A1个 B2个 C3个 D4个 14、下列哪种物质是嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸生物合成中的共同前体 A PRPP B Gly C Glu D Ser 15、核苷酸还原为脱氧核苷酸发生在哪级水平上 A核苷一磷酸 B核苷二磷酸 C核苷三磷酸 D核苷 16、氨甲蝶呤是下列哪种酶的竞争性抑制剂 A胸苷酸合成酶 B氨甲酰磷酸合成酶 C核苷酸还原酶 D二氢叶酸还原酶 17、糖原合成中的糖基供体是 A1-磷酸葡萄糖 B6-磷酸葡萄糖 C UDP-葡萄糖
南开大学生物化学与分子生物学考研暑期及全阶段复习建 议含资料推荐 南开大学生物化学与分子生物学考研暑期及全阶段复习建议含资料推荐，时光匆匆如白驹过隙，回想起考研的峥嵘岁月，心中还是感触颇深。当时有过对未来研究生生活的憧憬，也有过对当前复习生活的忧愁，但这些都已经过去了。我很庆幸这些日子带给我的成长，也感恩于辛勤付出过后带来的成功。 英语 在大三3月份开学开始学习英语，前期主要背英语词汇，白天当时用的是《恋恋有词》，晚上开始用《墨墨背单词》一晚上背个80个。然后每天做一篇阅读用的是《张剑黄皮书》这样维持了三个月。等到暑假我开始做英语一的真题阅读，因为的只有2010-2018年的，少的可怜，不忍心做，要留到后面。在做英语一阅读的时候我发现自己的短板就是翻译不通导致选不对。然后我就开始看《何凯文的长难句》以及视频。我暑假也在背单词用的是《新东方便携式词汇小本》，当遇到错的多的阅读时，我会看一下唐迟老师的真题讲解。这些任务基本上是9月中旬完成的。接着，我开始专攻我的英语二了，我买了《老蒋讲真题》，在本子上先做了6套题，不要写在书上因为还要做第二遍，剩下的三套题要留到最后十二月份做，自己在做真题出现的问题可以多看看蒋军虎老师的各个专项突破。将英语出现的不认识的词汇以及难理解的句子全部都记在本子上。十月份我又将英语的真题阅读，和之前一样只做阅读！十一月份我还是看词汇，不过这次看的是《何凯文1575》，词汇少但是高频，算是一次回顾还有蒋军虎的《老蒋十二式》。等到十一月中旬开始看写作部分买了《写作宝中宝》，背一些历年的作文真题。同时我也看蒋军虎的写作视频，积累些模板，。等到十二月再把的真题再做一次这次就是写在书上，同时剩下的三套题要自己规定时间进行模拟考试。 政治 政治从暑假开始复习，暑假期间先略微浏览了一遍肖秀荣的《命题人知识点精讲精练》上面的知识点儿，看了一下徐涛老师的强化视频。然后做了《1000题》，只做了上面的选择题。因为政治和时事密切相关，多关注一些政治老师的微博或者公众号，多收集信息。在10月下旬又做了一下徐涛的《优题库》。11月上旬开始看并且背诵《考点预测背诵版》《形势与政策及世界当代经济与政治》两本书。在11月底开始，主要的内容便是肖秀荣《8套卷》！！《4套卷》！！而肖秀荣老师每年会押中很多题目尤其是大题，考研时候也会有几道原题。我政治复习过程中并没有做真题，因为重现性很少，相反做预测卷比较多。我买了蒋中挺五套卷、石磊的四套卷，腿姐的预测卷等等。同时注意下：在8月下旬新大纲出
2005年天津南开大学生物化学考研真题 —.判断下列说法正确与否（对"V"，错者划×"，每小题1分，共35 分） 1.核酸的稀有碱基具有特殊的生物学活性。 2.tRNA 分子中的稀有碱基是转录后修饰的产物。 3.在稀盐溶液中 DNA 和 RNA 的双螺旋构象是一样的。 4.tRNA 曾经被称为"可溶性 RNA"是因为它具有更多的稀有碱基。 5.线粒体中的 RNA 是由核基因编码的。 6.脱氧核苷中脱氧核糖的 2位没有羟基。 7.若双螺旋 DNA分子的一条链的片断顺序为5'-GCAGTCCA-3'则另一条链为5-CGTCAGT- 3'。 8.病毒基因组的组成和其它生物一样都含有 DNA。 9.逆转录酶具有校对功能。 10.DNA损伤的光复活修复是由 DNA 聚合酶参与的。 11.真核基因都含有内含子。 12.端粒酶催化端粒 DNA 链合成的方向 5- 3'。 13.内含子的剪切反应有时需要ATP。 14.肽链的生物合成中核糖体从5'-3'方向沿着mRNA 移动。 15.细胞内的肽链合成是从C末端向 N末端进行的。 16．反密码子第一位是I的tRNA可以识别三个不同的密码子。 17.阿拉伯糖操纵子（ara）不受细胞内ATP水平的调节。 18.DNA连接酶催化 DNA连接反应需要能量因子。 19.PCR方法中的 DNA 合成不需要引物。 20.多核苷酸磷酸化酶合成多聚核糖核苷酸需要模板。 21．蛋白质分子中个别氨基酸的取代必然会导致生物活性的改变。 22.蛋白质在SDS-PAGE中和非变性电泳中的分离结果是相同的。 23.皮质激素可以转变为性激素。 24.ATP 是生物能量的储存方式。 25. 寡聚酶一般是指由多个相同亚基组成的酶分子。
02年生物化学本科考试： 1，血红蛋白和肌红蛋白的结构和功能有什么相同和不同之处，它们的氧合曲线相同吗？为什么？ 2，简述酶的高效机制原理。 3，DNA双螺旋结构有什么特征？可以用来解释哪些生命现象？ 4，举例说明维生素辅酶的机理。———————————————————————————— 期末考试内容： 名解解释：（共15分） 1，回文结构 2，超二级结构 3，尿素柠檬酸双循环 4，解偶联剂 5，连系数LK 简答题：（共50分） 1，乳糖操纵子正调节和负调节。 2，DNA复制的规律糖原合成与分解的协同调节。 3，蛋白测序（需要知道羧肽酶的限制应用，重叠法的各种酶的切点）推断出一段肽链氨基酸序列。 4，体内酮体积累。 5，酶活性调节类型。 03年： 第一次阶段考试： 1、蛋白质的一、二、三、四级结构分别是什么？分别靠什么作用力维持其结构？ 2、什么是蛋白质的变性？变性过程中伴随什么物理化学的变化？ 3、什么是酶的可逆抑制作用和不可逆抑制作用，前者包括哪三种？各自的特点？ 4、什么是维生素？包括哪两种？nad+递氢的作用机理是什么？—————————————————————————————— 第二次阶段检测： 大作业：为什么说TCA循环是所有循环代谢的中心环节？ （画出相关的循环途径图）——————————————————————————————
第三次，期末考试内容 填空题（10分） 1，蛋白质胶体具有（）层和（）层。 2，生物素构成羧化酶的辅酶，参与（）的固定反应。 3，磷酸吡哆醛是（）酶和（）酶的辅酶。 4，胆固醇合成的关键酶是（）。 5，DNA中的颠倒重复顺序称为（）顺序，侑形成（）结构，和（）结构的能力。在双链DNA中形成（）结构，在单链DNA和RNA中形成（）结构。 判断题（10分）涉及的知识点 什么是基因组 双链RNA中是以什么型存在的（A，B，Z） 氨是谷氨酰胺形式转运的。 竞争性抑制是否改变Vmax。 维生素B2是FMN的辅酶。 乙酰CoA可否进入糖异生的过程。 胰高血糖素和肾上腺激素可以使血糖浓度升高。 选择题（10分）涉及的知识点 什么是超二级结构。 哪种维生素影响钙离子的吸收。 嘌呤，嘧啶是以什么氨基酸为起始开始进行合成的。 霍乱毒素使哪种G蛋白锁定在活性状态。 IP3是什么膜Ca2+的通道。（区别质膜和肌浆膜） 什么是顺反子。 什么是交感顺序。 什么叫做沉默突变。 名词解释（12分） 1，别构调节 2，Krebs bicycle 循环 3，开放阅读框 4，溶解温度 简答题（58分） 1，蛋白质的变性和沉淀作用有什么区别？ 2，什么叫做酶原，酶原的生物学意义是什么？ 3，糖原的合成和分解是如何协和调控的？ 4，脂肪酸的分解和脂肪酸的合成可以同时进行吗？为什么？ 5，为什么遗传密码是“三联体”，遗传密码的重要特性是什么。 6，B-DNA序列中，有3150bp，超螺旋密度为-0.05，那它的Lk，Tw，Wr各是多少？ 7，I型DNA合成酶的三种酶活性，及它们的意义？
2017南开大学生物化学与分子生物学考研感悟 拿到录取通知书的那天，我的心才慢慢的放松下来，从准备考南开大学生物化学与分子生物学专业到初试、复试，一路走来，经历过无数的汗水和辛酸，有过迷茫有过犹豫，但最终还是坚持下来了，这薄薄的一张纸是对我过去一年付出的最好回报。写下这段经历既是对自己的肯定也是给学弟学妹们的些许经验。 开始复习首先要提到的就是专业课，因为专业课才是区分一个学校和另一学校最主要的标志。南开大学生物化学与分子生物学专业在研究生考试中不考数学，考两门专业课：709生物化学（生科院）；811细胞生物学或813分子生物学。在专业课的考试方面我选择了生物化学和细胞生物学两门。我用的考研参考书目有翟中和等编《细胞生物学》科学出版社2007年8月第三版；朱玉贤、李毅著《现代分子生物学》高等教育出版社，2002（第二版）；Benjamin Lewin，余龙等译《基因VIII》（中文版），科学出版社，2005 ；《Molecular Biology》Robert Weaver著，McGraw-Hill出版社，2005(第三版)；研途宝南开大学考研网《南开大学811细胞生物学考研复习精编》（含真题与答案）；《南开大学709生物化学考研复习精编》（含真题与答案）。第一轮复习时，复习的比较全面，先把课本复习了一遍，但是感觉自己抓不住重点，幸好这两本精编对重点内容都有总结。第二轮复习主要是抓重点，然后精做考研真题。最好是5年或是更多的真题，多多益善，因为很多考试题目就是前几年考过的真题，所以，在真题这方面一定要重视起来。 接下来是考研英语的复习，关于英语，因为本人的英语不是很好，所以在很早就报了一个考研英语辅导班，不奢望会取得多高的成绩，能过南开的考研复试分数线而且能让我的复习过程更有信心就可以了。关于英语的复习，可以从上面提到的时间表中看出，英语占了很大一部分，英语就是这样一个学科，如果你给它足够的时间，可能你的英语水平并没有明显的进步，比如每天做的阅读理解基本上都能保持在32分左右，但是如果有一段时间不练习，阅读就会立马降到26分左右。所以，英语的复习就是一个逆水行舟，不进则退的过程。而单词更是每天都必须要学习的，我的方法是朗读和背诵，个人觉得很有效果。 考研政治的复习，跟大多数人一样，直接买的考试大纲，加上任汝芬的序列一、二、三、四就足够了，不过，个人认为，二不够好，出题太多，而且只给答案没有解释，让人知其然不知其所以然。关于复习时间的问题，个人复习开始的时间较早，但是没有整块的时间用于政治的复习，都是一些零散的时间，比如做题做累了的时候，就完全可以拿出政治来放松一下，当然这种零星的复习法也只适用于中前期，到后期也需要识记和做题了，当时我还做过1500题，不过错的好多，很浪费时间，效果也不怎么好。个人感觉到最后的两个星期政治复习的高峰才刚刚到来，好多东西都是需要理解并记忆的，如果这个工作做得太早，到考试的时候可能已经忘得差不多了，如果太晚复习的话，自己可能会有很大的紧迫感，也不利于复习，所以个人认为，等20天20题出来之后，开始背是最佳的时间选择。 其实公共课的复习方法都差不多，但是不同的人也会有差别，要不然也不会最后成绩有那么大的差距，所以，个人建议，不能把别人的经验直接复制过来用到自己的身上，要在复习和总结他人经验的基础上形成自己的一套学习方法，自己的才是最好的。 个人的经验就这么多，其实很多事情都是说起来容易做起来难，寥寥数言根本无法概括出考研过程中的心路历程，其中的辛酸、快乐只有深入其中的人才能够体会，希望奋斗在考
二．填空题 1．按下表要求比较饱和脂肪酸的从头合成和脂肪酸的β- 氧化作用：（10分） 2．酶的种类很多，但辅助因子的种类并不多，因为。3．在尿素循环中，精氨酸水解产生尿素和鸟氨酸，故此循环也成为鸟氨酸循环。4．沉降系数用S表示，其单位是1×10-13 S 。 5．原核RNA聚合酶有αββ’ωδ5个亚基组成，其中αββ’ω称为核心酶。6．m2Gm的中文名称是。 7．与血钙水平的调节有关的激素是和。 8．原核生物中多肽链合成的第一个氨基酸是fMet ，它是由甲酰转移酶催化Met-tRNA fMet产生的。 9．与暗适应能力有关的维生素是。 10．代谢反应中甲基的供体是。 11．盐析作用指。12．DNA分子上的回文结构就是。13．糖异生的原料是三碳化合物丙酮酸、乳酸、甘油等，能转变为糖的氨基酸和柠檬酸循环的中间代谢物。 14．典型的呼吸链有两种，即，这是根据代谢物上脱下氢的不同而区分的。 15．II型限制性核酸内切酶所识别的核苷酸顺序通常具有，具有回文顺序的DNA在同一条链内有互补顺序，因而在单链DNA中可形成发卡结构，在双链DNA中可形成十字架结构。 16．下丘脑可分泌多种激素，其中与甲状腺激素的分泌有关的激素是。17．肽单位是一个刚性平面结构，这是由于。18．启动子。19．酶合成的诱导作用可用来解释，酶合成的阻遏作用可用来解释。 20．氨基酸与特定tRNA分子的结合是由氨酰tRNA合成酶催化的。
21．转录指。22．嘧啶核苷酸从头合成的第一个核苷酸是，嘧啶核苷酸从头合成的第一个核苷酸是。 23．联合脱氨指将转氨基作用与脱氨基作用偶联到一起的脱氨方式。 24．脂肪酸和胆固醇等从头合成所需的氢由提供。25．在操纵子体系中阻遏蛋白通过与结合，从而阻遏的转录。 26．呼吸链中的递氢体是，递电子体是。27．超二级结构指。28．cAMP是第二信使物质，它是由腺苷酸环化酶酶催化ATP产生的。 29．转录起始点右边的DNA顺序称为下游顺序，左边的顺序称为上游顺序。 30．磺胺类药物是叶酸合成酶酶的抑制剂，可干扰叶酸的合成。 31．回文结构用于描述。32．组蛋白是真核细胞染色体的结构蛋白的成分，含Arg、Lys 氨酸多。 33．既是转录产物又可参与翻译的生物分子是RNA 。 34．在蛋白质的生物合成中，每个氨基酸都是通过其氨酰-tRNA的反密码子与mRNA上的密码子之间的碱基配对来定义的。 35．DNA聚合酶以5’—3’方向合成与复制叉运动方向一致的链称为前导链。 36．蛋白质的二级结构不涉及侧链R 的构象，维系二级结构稳定的里主要是氢键。37．酶原指。38．在细胞内活化酰基的载体是CoA ，它的合成与维生素泛酸（VB C. 有关。 39．维持蛋白质三级结构稳定的力主要是非共价键，但在某些蛋白质中有二硫键。40．G蛋白就是，是存在于细胞膜上的一组蛋白。 41．糖异生作用指。42．转氨酶的辅酶是磷酸吡哆醛，其催化的反应平衡常数约为 1.0 。 43．合成一分子尿素可以从体内清除 2 分子氨和 1 分子CO2，需消耗4 个高能磷酸键。44．乳酸脱氢酶LDH1对NAD 亲和力高，LDH5对乳酸亲和力高。 45．双脱氧末端终止法测定DNA碱基顺序需要、、、等。 46．DNA回文顺序也称颠倒重复顺序，它具有二倍重复性质，它能在DNA分子内形成十字架结构，它的RNA转录物能形成发卡结构。 47．酮体合成的主要场所是，酮体合成的前体是，酮体合成途径中的限速酶是，在糖供应不足时，酮体可以作为的主要原料。 48．嘌呤环中的N1来自Asp ，N7来自Gly ，N9来自Gln 。 49．氨基蝶呤是叶酸的结构类似物，它可以有效地抑制二氢叶酸合成酶的活性，从而抑制了核酸的合成，所以常作为癌症的化疗药物。 50．葡萄糖彻底氧化成CO2和H2O需经历三个阶段，分别是， ，。 51．卵磷脂是由一分子甘油，2分子脂肪酸和1分子磷酰胆碱组成的。52．脂肪酸分解的限速酶是肉碱酰基转移酶I ，脂肪酸合成的限速酶是乙酰CoA羧化
南开大学2000年研究生入学考试生物化学试题 一．判断题（请用“+”和“-”分别代表对错）（15%） 1．百日咳毒素可使Giα的精氨酸ADP-核糖基化。 2．磷酸肌醇系统是不经过腺苷酸环化酶的另一第二信使系统。 3．人体可以合成各种类型的饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸。 4．氨是有毒物质，在体内主要是以谷氨酰胺的形式转运。 5．当二分子甘油异生为一分子葡萄糖时需要消耗二个高能磷酸键。 6．肾上腺皮质激素和肾上腺髓质激素都是首先通过与其膜受体结合而产生生理效应的。7．据推测细胞内的DNA主要以B型结构存在。 8．生物体内核算的碱基配对形式都是Watson-Click配对。 9．导致RNA化学性质更活泼的关键是RNA中的核糖含有2’-OH。 10．碱基的内酰胺和内酰亚胺的同分异构互变是造成生物天然突变的主要原因。11．内切核酸酶是指能切断磷酸二酯键的核酸酶。 12．DNA样品的熔解温度是指DNA变性一半时的温度。 13．“基因组”是某物中所有基因的组合。 14．凡有抑制剂存在，都会降低酶与底物的亲和力。 15．球蛋白的三维折叠均采取亲水侧基在外，疏水侧基藏于分子内部的结构模式。二．选择题（10%） 1．磷酸化酶激酶中的（）是钙调素，因而可被Ca2+激活。 A.α-亚基 B.β-亚基 C.γ-亚基 D.δ-亚基 2．霍乱毒素可以使Gs蛋白失去 A.GTP-GDP交换能力 B.GTPase的活性 C.与受体结合的能力 D.激活腺苷酸环化酶的能力 3．阿司匹林具有解热止痛的作用，这主要是由于它抑制了 A.肾上腺素的合成 B.甲状腺素的合成 C.前列腺素的合成 D.肾上腺皮质激素的合成 4．蛋白激酶C是Ca2+和（）依赖性激酶。 A.PE B.PC C.PS D.PI 5．胰蛋白酶的亲和标记物为： A.TLCK B.TPCK C.DFP D.PITC 6．Arg的pK1=2.17，pK2=9.04，pK3=12.48，其pI等于： A.5.61 B.7.33 C.7.90 D.10.76 7．在细胞的DNA中： A.用一个碱基对替换另一个碱基对的突变成为点突变 B.插入一个碱基对的突变称为点突变 C.一个基因位点上的突变称为点突变 D.改变一个基因的突变称为点突变 8．大肠杆菌RNA聚合酶的Sigma因子 A.是识别转录终止点的亚基 B.是识别转录起始点的亚基 C.是不可替换的亚基 D.是不可解离的亚基 9．真核生物mRNA poly(A)尾巴的加接信号 A.在转录终止之后 B.在转录终止点之前 C.在转录终止点上 D.在mRNA的5’末端 10．在大肠杆菌核糖体中