一、实验目的
白酒中甲醇来自酿酒原辅料(薯干、马铃薯、水果、糠麸等)中的果胶，在蒸煮过程中果胶中的半乳糖醛酸甲酯分子中的甲氧基分解成甲醇。
1、掌握白酒中甲醇测定的基本方法。
2、熟悉白酒中甲醇的卫生限量标准。
3、进一步认识白酒中甲醇的危害。
4、加强实验基本技能的训练,提高标准曲线的制备水平
二、原理
酒中甲醇在磷酸溶液中被高锰酸钾氧化成甲醛，过量的高锰酸钾及在反应中产生的二氧化锰用硫酸草酸溶液除去,甲醛与品红亚硫酸作用生成蓝紫色醌型色素，与标准系列比较定量。
1．氧化5ＣＨ3OH+2KＭnO４+4Ｈ３PＯ4=5HＣHＯ+２ＫHPＯ４+2ＭnHPO４＋８H２0
2.去除有色物质
5Ｈ2C２O4+2KＭnＯ４+３H2SO4=２MnSO4+Ｋ2SO4+10CO２↑+ 8Ｈ2Ｏ
H２C2O4+MnO２+Ｈ2SＯ4=MnSＯ4+2CO2↑+ 2H2Ｏ
3.显色反应
品红与亚硫酸形成非醌型无色化合物，甲醛与品红-亚硫酸作用生成蓝紫色醌型色素。
三、试剂
配制。1.高锰酸钾－磷酸溶液称取3ｇ高锰酸钾，加入１5m1 85％磷酸溶液及70ｍｌ水的混合液中，待高锰酸钾溶解后用水定容至1０0ml。贮于棕色瓶中备用。
2. 草酸－硫酸溶液称取５g无水草酸（H2C２Ｏ4）或7g含2个结晶水的草酸(H2C2O2?２H２O），溶于1：1冷硫酸中,并用1：1冷硫酸定容至１00ml。混匀后,贮于棕色瓶中备用。
3.品红-亚硫酸溶液称取0．lg研细的碱性品红，分次加水（80℃)共６0ml，边加水边研磨使其溶解,待其充分溶解后滤于100ml容量瓶中,
冷却后加１0ｍl(10％）亚硫酸钠溶液,lｍl盐酸,再加水至刻度，充分混匀,放置过夜。如溶液有颜色，可加少量活性炭搅拌后过滤，贮于棕色
瓶中，置暗处保存。溶液呈红色时应弃去重新
4.甲醇标准溶液准确称取1．0０0g甲醇（相当于1.2７ｍl)置于预先
装有少量蒸馏水的1０0ml容量瓶中，加水稀释至刻度,混匀。此溶液每
毫升相当于１0ｍg甲醇,置低温保存。
5.甲醇标淮应用液吸取10.0ml甲醇标准溶液置于100ml容量瓶中，加
水稀释至刻度，混匀。此溶液每毫升相当于1ｍｇ甲醇。
６.无甲醇无甲醛的乙醇制备取30０mｌ无水乙醇,加高锰酸钾少许,振摇后放置24小时，蒸馏，最初和最后的1/１0蒸馏液弃去,收集中间的
蒸馏部分即可。
7. １0%亚硫酸钠溶液
四、仪器
分光光度计
五、操作方法
甲醇标准曲线制备与样品测定
管号（２5ml比色管） 0 1 ２ 3 4 5 样11 样12
甲醇标准液ml?0．0 0.２ 0.４0．6 0.8 1.０- - ５6度酒样mｌ0．6
0．6
56度无甲醇乙醇ml 0.６ 0.6 0．6 0.6 0．6 0．6 - - 去离子水ｍl ４.４ 4.2 4．0 3.8 3.6 ３.4 4.4 4.4
高锰酸钾磷酸ml 2 2 2 2 2 2 2 2
混匀静置1０min
草酸硫酸溶液ml 2 2 2 2 2 ２ 2 2
混匀静置使褪色冷却
品红亚硫酸溶液 5 ５ 5 5 ５ 5
5 5
混匀在２０至30摄氏度静置３0min
以０管为调零点,于５90nm波长处测吸光度
七、计算
１、绘制标准曲线，计算回归方程,计算? 样品管中甲醇的含量（m ｇ)?2、计算样品中甲醇的含量(ｇ/100ml ） X ＝
*100*1000
m
v 式中：X ——样品中甲醇的含量，g ／1000ｍl
Ｍ——测定样品中所含甲醇相当于标准的毫克数，mg V ——样品取样体积，ml
八、评价 卫生限量标准
自己查阅文献,要求依据最近的标准来作出评价
九、注意事项
1. 亚硫酸－品红溶液呈红色时应重新配制，新配制的亚硫酸品红溶液放冰箱中２４-48小时后再用为好。
2. 白酒中其他醛类以及经高锰酸钾氧化后由醇类变成的醛类(如乙醛、丙醛等）,与品红-亚硫酸作用也显色,但在一定浓度的硫酸酸性溶液中,除甲醛可形成经久不褪的紫色外，其他醛类则历时不久即行消退或不显色,故无干扰。因此操作中时间条件必须严格控制。
3.酒样和标准溶液中的乙醇浓度对比色有一定的影响，故样品与标准管中乙醇合量要大致相等