生物安全实验室等级
参照美国国立卫生研究所、美国疾病控制中心的标准，我国生物安全实验室根据所处理的微生物及其毒素的危害程度分为四个等级，分别对应Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级生物安全标准。
屏障主要为实验室气流控制及灭菌设施。
根据中华人民共和国国家环境保护标准HJ 610-2016，环境影响评价技术导则地下水环境（Technical guidelines for environmental impact assessment-groundwater environment)(发布稿），根据附录A，地下水环境影响评价行业分类表，天津云检医学检验中心应该属于第163项，专业实验室，根据生物实验室安全等级，不属于P3、P4生物安全实验室，及转基因实验室，因此环评类别采用报告表的方式（约需1个月），属于地下水环境影响评价项目类别Ⅳ类。根据4 总则 4.1一般性原则，Ⅳ类建设项目不开展地下水环境影响评价。
通过了解，天津目前的程序是需拿到设置医疗许可，然后环评，再开始动工装修。
实验室生物安全等级分类 新型冠状病毒感染的肺炎疫情牵动着全球关注，至今已感染超过1700万人，世界多个国家和地区正在合力战“疫”。国内疫情虽趋于平稳，人民的生活也逐渐恢复正常，但北京疫情出现反弹，确诊例数不断增加；此外，今年非洲的“埃博拉病毒”疫情复燃后于6月底才宣告结束；巴西发现了“新型寨卡病毒”；我国也发现了“新型猪流感病毒（G4）”；7月初新加坡因“登革病毒”引起的登革热才刚开始流行。“病毒”这个名词一次又次绷紧了人们的心弦。 随着各地新建符合安全级别的PCR实验室与核酸检测技术的普及，加之各地检验医学队进京驰援，北京大规模的核酸筛查拉开帷幕，截至7月3日，北京市具备核酸检测能力的机构已达到175所。新冠病毒的核酸检测工作也从应急转为常态化，给全国临床实验室带来了新的挑战，加强生物安全实验室的建设迫在眉睫！ 为了能更全面的理解新型冠状病毒等病原微生物的相对危险性，本文带您进一步了解实验室生物安全防护水平等级与基本知识。 病原微生物等级分类对比 世界卫生组织（WHO）一直非常重视生物实验室安全问题，早在1983年就发布《实验室生物安全手册》（当前版为2004年修订的第三版），对各个国家作为参考和指南，有助于各国制订并建立微生物学操作规范，确保微生物资源的安全，进而确保其可用于临床、研究和流行病学等各项工作。 我国也于2004年颁布了国家标准《实验室生物安全通用要求》（GB 19489）（新修订于2008）和《病原微生物实验室生物安全管理条例》（新修订于2018年）。此外，为了维护国家安全，防范和应对生物威胁，保障人民生命健康，促进生物技术健康发展，保护生物资源和生态环境，促进社会和谐发展，推动构建人类命运共同体，我国今年已将生物安全纳入国家安全体系，《中华人民共和国生物安全法（草案）》也已通过二审，有望今年年底出台。 WHO根据感染性微生物的相对危害程度制订了危险度等级，分为四级，危险度四级最危险；我国根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为四类，一类最危险。 值得注意的是，虽然目前我国的病原微生物分类标准和WHO等国际标准有所出入，但内容对应是基本一致的。此外，即将出台的《中华人民共和国生物安全法（草案）》已通过二审，并修正了此分类，修正后的分类与WHO国际标准基本统一。在该草案的“二次审议稿”提到了“根据病原微生物的传染性、感染后对人和动物的个体或者群体的危害程度,将病原微生物分为一类、二类、三类、四类。三类、四类病原微生物统称为高致病性病原微生物。” 引发本次全球疫情的新冠病毒暂时按照病原微生物危害程度分类中第二类病原微生物进行管理，属于生物安全三级的高致病性微生物。此外。我国新发现的新型猪流感病毒（H1N1-G4）、巴西新发现的新型寨卡病毒、与正在新加坡流行的登革病毒都属于第三类病原微生物（生物安全二级）；今年在非洲刚果流行的埃博拉则属于第一类病原微生物（生物安全四级）。 生物安全防护水平与实验室 根据在封闭的实验室环境中所操作的生物因子的危害程度和隔离危险的病原体所需采取的一套生物安全防护措施，生物安全防护水平（biosafety level，BSL）分为BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4共四个生物安全等级，生物实验室按照生物安全水平分为P1（Protection level 1）、P2、P3和P4四个等级。实验室等级越高，其研究的病原微生物危害程度也是逐级递增，意
检验科微生物实验室生物安全事件应急预案 This manuscript was revised by JIEK MA on December 15th, 2012.
检验科微生物实验室生物安全事件应急预案为了有效的预防微生物实验室生物污染，有效应对实验室突发污染事件，保证实验结果的科学准确，保障实验工作人员的健康、生命财产安全，防止实验室污染对周围环境造成严重污染，加强检验工作的质量控制和实验室的管理，根据《中华人民共和国传染病防治法》、《突发公共卫生事件应急条例》和《实验室生物安全通用要求》等相关法律法规的规定，特制定本预案，确保一旦发生实验室污染事件及安全事故时，能及时、规范、科学、迅速有效地控制。 一、适用范围 本预案适用于微生物实验室发生的、与实验室安全相关的、危害科室工作人员健康以及社会公众健康和社会稳定的所有事件。主要包括：1．病原微生物的实验室污染事件； 2．工作人员受到实验室内有毒病原微生物的感染或侵害； 3．病原微生物被泄漏出实验室事件。 4．由于停电、火灾等不可预测因素所引起的实验室其他污染事件。 当出现以上适用范围中的任意情况，启动本预案。 二、应急管理小组 有微生物实验室生物安全事件应急管理小组，科主任任组长，制定实验室生物安全防护指导方针，规划对实验室的硬件建设、组织实施科学管理。在实验室生物安全事件发生时，决策指挥，调动人员，全面部署。发生突发事件后应急处理小组全体成员，应立即按实验室污染突发事件处理
的技术规范，采取有效措施控制事件、调查原因，减少人员伤亡和财产损失。 三、预防措施 1．加强实验室标准化建设，对实验室设备的配置、个人防护和实验室安全行为应按《实验室生物安全通用要求》做出明确规定。 2．建立实验室病原微生物专库，对于传染病病原样本建立严格的监督管理制度。 3．增强安全意识，合理完善实验室生物安全的各项规章制度。把生物安全管理责任和措施落到实处，消除安全隐患。实验室工作人员应自觉遵守实验室生物安全管理规定，严格按照操作规程和技术规范开展研究工作。 4．提高警惕，加强安全保卫，防止不法之徒盗窃病原微生物和有毒有害化学试剂，用于对人群进行生物化学恐怖攻击，对公众健康产生严重损害，影响社会稳定。 5．建立有效的预警机制，为各种病原微生物和有毒有害化学试剂建立档案和使用纪录，填写准确。每次使用后及时登记，发现遗失或被盗，立即报告。 6．建立实验室工作人员健康档案，定期体检。发现与实验室生物安全有关的人员感染或伤害应立即报告。 7．定期开展自查，及时发现安全隐患，发出预警通报。 四、应急控制措施
实验室生物安全级别——生物安全一级 生物安全一级(BSL-1) BSL—1适合于非常熟悉的病源，该病源不会经常引发健康成人疾病，对实验人员和环境潜在危险小。实验室没有必要和建筑物中的一般行走区分开。一般按照标准的微生物操作，在开放的实验台面上开展工作。不要求、一般也不使用特殊的遏制设备和设施。实验人员在实验程序方面受过特殊训练，由受过微生物学或相关科学一般训练的科学工作者监督实验。 以下标准及特殊操作、安全设备及设施和BSL—1病源有关： 一、标准微生物操作： 1、在进行有关培养物及样品实验时，未经实验室主任同意，限制或禁止进入实验室。 2、进行活体处理后，实验人员要洗手；离开实验室前脱手套。 3、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。不允许在工作区存放食物和日常生活用品。在实验室中，戴隐型眼镜的人，也需戴口罩或面罩。食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。 4、不能用嘴移液，只能用机械装置移液。 5、制定锐器安全使用规范。 6、所有的操作过程应尽量细心，避免产生溅出和气溶胶。 7、至少一天一次、活体溅出时，都应进行台面消毒。 8、所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前，均应使用可行的消毒方法进行消毒，如高压灭菌。转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出实验室，其包装应符合有关地方、州、联邦法规。 9、当存在传染源时，应在实验室入口处贴生物危险标志，并显示以下信息：实验中的病源名称、研究者姓名及电话号码。 10、实施控制昆虫和龋齿动物的程序(参见附录G)(另发) 二、特殊操作：无 三、安全设备(第一道屏障) 1、和BSL-1相关的病源，其操作一般不需要生物安全柜之类的特殊遏制装置或设备。 2、建议穿实验服、大褂、制服，避免污染和衣服上的尘土。 3、若手上皮肤有伤或出皮疹，应戴手套。 4、操作过程中，估计会出现微生物或危险物溅出时，应戴保护眼具。
实验室的结构和设施、安全操作规程、安全设备能够确保工作人员在处理含有致病微生物及其毒素时，不受实验对象侵染，周围环境不受污染。 P1实验室 P是英语protect 保护的缩写。实验室具备跟一般微生物学实验室相同等级的设备。 1.若在此级实验室内同时进行非基因重组的实验时，需明确划分实验区域，小心进行操作。 2.进行实验时，宜关闭实验室的门窗。 3.每日实验结束时需灭菌实验台，如实验中发生污染，需立即加以灭菌。 4.实验所产生之所有生物材料废弃物，需尽快灭菌后再依院方「感染性废弃物管理」相关办 5.法丢弃。被污染的器具需先经灭菌后，再清洗使用或丢弃。 6.不得用口做吸量操作。
7.实验室内禁止饮食，吸烟及保存食物。 8.操作重组体之后，或离开实验室之前要洗手。 9.在所有操作中，应尽量避免产生气雾。 10.要从实验室搬离被污染物品时，必需将其放入坚固且不漏的容器，在实验室内密封后才可运出。 11.防除实验室的非实验用生物，如昆虫及鼠类等。 12.若有其他方法可用，应避免使用针头。 13.实验用衣物的使用，需遵从计画主持人的指示。 14.需遵守计划主持人所订之其他事项。 p2实验室 1.符合BSL-2实验室建设要求。
2.实验室门口带锁并可自动关闭。实验室的门应有可视窗。 3.有足够的存储空间摆放物品以方便使用。在实验室工作区域处还有供长期使用的存储空间。 4.在实验室的工作区域处应有存放个人衣物的条件。 5.在实验室所有的建筑内配备高压蒸汽灭菌器，并按期检查和验证，以保证符合要求。 6.在实验室内配备生物安全柜。 7.设洗眼设施，必要时应有应急喷淋装置。 8.考虑机械通风，如使用窗户自然通风，有防虫纱窗。 9.有可靠的电力供应和应急照明。必要时，重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应设用电源。 10.实验室出口有在黑暗是可明确辨认的标识。
七、病原微生物实验室生物安全管理（共15分） 1、一、二级实验室备案证明☆ （1）法律依据：《病原微生物实验室生物安全管理条例》第二十五条。 （2）检查内容：查一、二级病原微生物实验室是否向设区的市级卫生计生行政部门备案。 （3）检查方法：查备案材料或资格证书。 （4）结果评价：此项不合格则该项目整体不得分。 （5）监督关键点：①一、二级实验室的备案与实际情况是否相符；②有无存在未备案的一、二级实验室。 *2、三级、四级实验室开展高致病性病原微生物实验活动资格证书（重点项☆，或合理缺项） （1）法律依据：《病原微生物实验室生物安全管理条例》第二十条、第二十一条。 （2）检查内容：查三级、四级实验室是否经国家认可并取得从事高致病性病原微生物实验活动资格证书。 （3）检查方法：查备案材料或资格证书。 （4）结果评价：此项不合格则该项目整体不得分。 （5）监督关键点：三、四级实验室是否存在未取得资格证书从事高致病性病原微生物实验活动。 3、实验室建立生物安全委员会，建立健全实验室生物安全管理体系和感染应急预案（1分） （1）法律依据：《病原微生物实验室生物安全管理条例》第三十一条、第三十二条、第四十条，《实验室生物安全通用要求（GB19489-2008）》7.1。 （2）检查内容：实验室生物安全委员会的建立文件，成员应体现其组织及学科的专业范围，具体职责包括①制定生物安全规章制度、操作规程和标准操作程序等；②建立实验活动风险评估的工作制度和程序，组织开展风险评估工作； ③负责本单位生物安全的日常监督、检查；④对本单位实验室开展的第一、第二类病原微生物的实验活动进行审查。 实验室生物安全管理体系：生物安全管理手册、程序文件、作业指导书和记录。 感染应急预案：结合本单位实际制定。从事高致病性病原微生物相关实验活动的实验室制定的预案应向所在地省级卫生计生行政部门备案。 （3）检查方法：查阅生物安全管理体系、预案等文件。
一级生物安全实验室验收标准 一、单位基本信息 1、单位名称：法人：电话： 2、实验室名称：负责人：电话：EMAIL： 3、实验室生物安全负责人：电话：EMAIL： 4、实验室性质： 5、实验活动涉及的微生物种类：种，属级病原微生物； 6、实验室生物安全防护申请验收级别：级 二、一级生物实验室安全防护内容 1、生物安全手册 从实验室立项、建设、使用维护的全过程生物安全防护综合措施均要纳入生物安全手册。（含实验活动危险度评估报告） 2、一级防护屏障 A安全设备：超静工作台、排风装臵、离心机要有安全密封的专用离心杯等。 B个人防护：防护服、口罩、手套、消毒剂等防护用品。 3、二级防护屏障 ⒈在出口处设洗手池；⒉门口处要有挂衣处，个人便装与实验室内工作服要分开；⒊墙壁、开花板、地面要平整、易清洁、不渗水、耐化学品、消毒剂腐蚀，地面防滑、不铺地毯；⒋台面要防水、耐腐蚀、耐热；⒌厨柜和实验台应牢固、两者之间要有一定距离便于清洁； ⒍有专门放微生物废弃物容器；⒎有开启的窗户应设纱窗；⒏有保证
工作照明的电力、避免强光、反射光；⒐有适当的消毒设施。 4、安全操作规程 ⒈禁止非工作人员进入；⒉接触微生物后、脱手套后、离开实验室前要洗手；⒊禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆、存放食品等非工作用具；⒋禁止口吸滴定管；⒌按尖锐器安全操作规范尽可能少的使用尖锐器；⒍按安全操作规程、尽可能降低病原微生物的溅出和气溶胶的产生；⒎每天至少消毒一次台面，活性物溅出要随时消毒；⒏培养物、废弃物在运出实验室前必须进行高压锅灭活，并放专用密闭容器中，由2人以上专运；⒐防虫、防鼠措施。 5、管理制度 A实验室布臵和准入：⒈实验室主工作区要合理设臵清洁区、半污染区、污染区；⒉非实验人员不得进入，外来实验者、进修、学习人员要经负责人批准；⒊禁止在主工作区饮食及其他非业务活动。 B实验室工作人员资格和培训：⒈固定的工作人员具备正规院校医学或生物学教育经历，具有医师或技师等专业技术资格，⒉经过生物安全技术专业培训，考核合格方可工作。 C工作人员健康管理：⒈上岗前应被告知有潜在危险，并接受安全教育、自愿从事实验室工作；⒉建立健康档案、接受可能接触微生物免疫、并有记录。 D实验室各项制度、规定、操作规程 （A）实验室涉及病原微生物实验活动的危害评估报告制度 （B）实验室人员准入制度 （C）实验室人员生物安全培训制度
微生物实验室生物安全操作规程 tiger 一、目的 制订本规则，保证实验室工作人员的健康安全、实验设备安全卫生以及防止对外界环境造成污染。 二、适用范围 适用于微生物实验室人员人身安全、卫生健康安全管理及设备安全。 三、职责 实验室工作人员必需严格遵守安全操作规程。 四、安全操作规程： 1.员工安全操作规程 1.1 实验室入口处须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的程序。 1.2 禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入，做好卫生防护，并在有关人员陪同下方可进入，同时注意做好环境维护及保密工作。 1.3 进行感染性实验时，禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人同意后方可进入。免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员必须经实验室负责人同意方可在实验室工作。 1.4 接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手。 1.5 禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。 1.6 尽量以移液器吸取液体，禁止口吸。 1.7 实验过程中，严格按有关操作规程操作，降低溅出和气溶胶的产生。 1.8 每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。 1.9 工作人员应接受必要的免疫接种和检测(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。每年要接受一次最新的培训。人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案。 1.10禁止将无关动物带入实验室。 2.无菌室安全操作规程 2.1无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面一次(拖布专用)，紫外线照射消毒30min以上，超净工作台台面每次实验前要用75％酒精擦洗。然后紫外线消毒30min。操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。 2.2无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。 2.3无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，75％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液，等等。 2.4无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。 2.5需要带入无菌室使用的器械、平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。 2.6工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75% 乙醇等消毒剂再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。 2.7无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟，并且同时打开超净台进
生物安全实验室的分级、分类和技术指标SICOLAB 生物安全实验室的分级 一、生物安全实验室可由防护区和辅助工作区组成。 二、根据实验室所处理对象的生物危害程度和采取的防护措施，生物安全实验室分为四级。微生物生物安全实验室可采用BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示相应级别的实验室；动物生物安全实验室可采用ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示相应级别的实验室。生物安全实验室应按下图进行分级。 生物安全实验室的分级 生物安全实验室的分类 一、生物安全实验室根据所操作致病性生物因子的传播途径可分为a类和b 类。a类指操作非经空气传播生物因子的实验室；b类指操作经空气传播生物因子的实验室。b1类生物安全实验室指可有效利用安全隔离装置进行操作的实验室；b2类生物安全实验室指不能有效利用安全隔离装置进行操作的实验室。
二、四级生物安全实验室根据使用生物安全柜的类型和穿着防护服的不同，可分为生物安全柜型和正压服型两类，并可符合下图的规定。 四级生物安全实验室分类 生物安全实验室的技术指标： 一、二级生物安全实验室宜实施一级屏障和二级屏障，三级、四级生物安全实验室应实施一级屏障和二级屏障。 二、生物安全主实验室二级屏障的主要技术指标应符合表图一的规定。 三、三级和四级生物安全实验室其他房间的主要技术指标应符合表图二的规定。 四、当房间处于值班运行时，在各房间压差保持不变的前提下，值班换气次数可低于本规范表图一和图二中规定的数值。 五、对有特殊要求的生物安全实验室，空气洁净度级别可高于本规范表图一和图二的规定，换气次数也应随之提高。 如下： 图一.生物安全主试验室二级屏障的主要技术指标
本工程选址于某市现代农业园区地块内。该园区近靠高速公路，基础设施完善，通信系统完备，离居民区较远且环境优美。根据使用要求，本地块内将建设BSL-3级生物安全实验室，拟进行高致病性病毒微生物的检测以及未知毒性的原微生物实验，如禽流感、口蹄疫、炭疽、结核病、狂犬病等。根据有关统计资料表明，BSL-3级生物安全实验室事故感染率的30%是由气溶胶扩散引起的，因气溶胶的易生性，易散性，而且不易被人察觉，因此在BSL-3级生物安全实验室内必须采取严格的隔离预防措施。SICOLAB其中在二级防护中，建筑隔离和空调系统设计是建设BSL-3级生物安全实验室的关键。因此，设计中遇到的问题和难点集中体现在规划设计，特别是BSL-3级生物安全实验室（注:根据《生物安全实验室建筑技术规范》（GB50346-2004）规定按实验室所处理对象的生物危害程度和采取的防护措施，要求从低到高分为四级。BSL-3为三级生物安全实验室，ABSL-3为三级动物生物安全实验室）设计上。 BSL-3级生物安全实验室座落于其中独立建造的实验楼中。地上2层，地下1层。建筑层高4.2m，实验室面积802m2;上部为设备管道层，下层为污水处理。 1、实验室总平面布置原则SICOLAB 从事高危险生物实验的人员，特别是BSL-3级生物安全实验室工作人员每天都有可能接触到试验中产生的危害，即所谓的气溶胶aerosol，就是悬浮于介质中的粒径一般为0.001μm￣100μm的固态、液态微小粒子形成的相对稳定的分散体系。它主要通过呼吸道传播，具有最大的危险性。实验工作人员承受着生存和死亡的心理和生理上的压力。因此，在建筑规划设计中采用了低层分散式的建筑布置形式和园林式的环境设计理念，以营造出一种由里至外的内部空间环境与外部空间环境的交流，也就是通过透空连廊、透光幕墙、降低层数、拉开建筑间距等手段，将园林绿化、阳光等直接送到实验工作人员面前。以求得到封闭集中的布置形式无法给予的大自然的气息。 1.1总平面区域划分 ①办公区动物疫情测报中心; ②缓冲区由30m宽的隔离区严格分开的办公区和实验区; ③实验区动物解剖室，ABSL-2级实验室，ABSL-3级实验室，BSL-3级实验室，固废冷藏，动物饲养房。 1.2出入口布置 图中a为办公人员出入口—动物疫情测报中心及办公用房;b为送检样品入口（兼污物出口）—疫区样品（含车辆和人员）经入口处消毒装置消毒后，进入实验区（兼污物出口）;c为后勤出入口（与办公入口共用）—物资和疫苗等清洁物品进入。 2、BSL-3级生物安全实验室设计 2.1 BSL-3级生物安全实验室技术流程
详解生物安全实验室等级与规范 根据实验室操作的生物因子的危害等级不同，实验室需要不同的防护水平。实验室不同水平的设施、安全设备以及实验操作技术和管理措施构成了生物实验室的各级生物安全水平。生物安全实验室分为4个等级：一级生物安全实验室(BSL-1)、二级生物安全实验室|(BSL-2)、三级生物安全实验室(BSL-3)和四级生物安全实验室(BSL-4),俗称分别为：P1、P2、P3和P4实验室(P是“物理防护”的英文physical protectio n" 的首字母)。一级生物安全实验室防护水 平最低，四级生物安全实验室防护水平最高。 一、一级生物安全实验室 生物安全防护水平为一级的实验室适用于操作在通常情况下不会引起人类或者 动物疾病的微生物。一级生物安全实验室的操作、安全设备和实验设施的设计和建设仅适用于进行基础的教学和研究，处理危害等级1的微生物。BSL-1是生物安全防护的基本水平，依靠标准的微生物操作来保证安全，缺少特殊的一级防护屏障或二级 防护屏障。一般来说，一级生物安全实验室仅能从事没有感染性的操作，不能满足食品微生物检测实验室的工作需要。 一级生物安全实验室需满足如下设施和设备的要求：实验室的门应有可视窗并 可锁闭，门锁及门的开启方向应不妨碍室内人员逃生。应设洗手池，宜设置在靠近实验室的出口处：实验室门口处应设存衣或挂衣装置，可将个人服装与实验室工作服分开放置。实验室的墙、天花板和地面应易清洁、不渗水、耐化学品和消毒灭菌剂的 腐蚀。地面应平整、防滑，不应铺设地毯。实验室台柜和座椅等应稳固，边角应圆滑。实验室台柜等和其摆放应便于清洁，实验台面应防水、耐腐蚀、耐热和坚固。实
兽医微生物实验室的生物安全分类（2005年版）凡涉及微生物及其提取物或基因工程产物操作的实验室，根据对病原微生物不同种类的生物安全要求。实验室的设计、设施也有所不同。目前国际公认的微生物实验室分为生物安全（biosafety level，BSL）1至4级。其中BSL-1最低，BSL-4最高。BSL-1~4俗称P1~4。 BSL-1实验室可从事已知不会对健康成人造成危害、但对实验室工作人员和环境可能有微弱危害的、有明确特征的微生物实验工作。实验室与建筑物中的一般通道不隔开，一般在试验台上操作，不要求使用或经常使用专用封闭设备。 BSL-2实验室与BSL-1相似，适用于那些对人及环境有中度可能危害的微生物实验工作。其不同点在于：工作人员要经过操作病原因子的专门培训，并由能够胜任的专业人员进行指导和管理；工作时限制外人进入实验室；某些产生传染性气溶胶或溅出物的工作要在生物安全柜或其他封闭设备内进行；对污染的锐器采取高度防护措施。凡从事微生物基因的操作，均需在BSL-2实验室进行。 BSL-3实验室供处理危险病原体使用，适用于可以通过吸入途径引起严重的或致死性疾病病原体的实验工作，例如从事高致病性禽流感、口蹄疫和艾滋病研究或检测的实验室BSL-3实验室的实验人员在处理病原体方面要经专门培训，并由有关专家进行监督管理。传染性材料的所有操作均要在生物安全柜或其他物理防护设施内进行，工作人员要穿适宜的防护服。BSL-3实验室要经过专业的设计和建造。 BSL-4实验室有造成气溶胶感染和危及生命的病原微生物，如埃波拉病毒、尼帕病毒等研究的实验室，必须达到BSL-4的安全水平。BSL-4实验室对防止微生物扩散到环境中有特殊的工程和设计要求。每一名实验室工作人员在处理病原微生物方面均要有特殊和全面的培训；要具有法定资格的科学家监督管理。实验室主任要严格控制进入实验室的人员。实验室均应是毒力的建筑物或是建筑物内的隔离区。要实施特殊的实验室安全工作细则。 在此种实验室的工作区内，所有的工作都要限制在II级生物安全柜或者是安全柜与一套由生命维持系统工期的正压个人工作服联合使用。
高级别生物安全实验室体系建设规划（2016-2025年） 国家发改委、科技部 高级别生物安全实验室是指生物安全防护级别为三级和四级的生物安全实验室。为进一步提高我国高级别生物安全实验室体系的建设水平，增强生物安全科技自主创新能力，根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《国务院关于加强传染病防治人员安全防护的意见》有关要求制定本规划。 一、体系建设的必要性和重要性 高级别生物安全实验室是国家生物安全体系的基础支撑平台，是人口健康与动物卫生领域开展科研、生产和服务的重要保障条件。2004年《国家高级别生物安全实验室建设规划》发布以来，我国已经形成了高级别生物安全实验室体系的基本框架，一批生物安全三级实验室（以下简称“三级实验室”）投入运行，建成了若干生物安全四级实验室（以下简称“四级实验室”），为我国的烈性与重大传染病防控、生物防范和产业发展做出了重要贡献。随着国际生物安全形势日趋复杂多变，我国战略性新兴产业蓬勃发展，实验室需求日益增加，原有的建设布局和管理能力已经不能完全适应新形势的需要。在整体布局方面，用于科研的实验室相对较多，产业和特殊领域的实验室数量不足，区域布局不均衡；在组织协调方面，全国性协调管理和资源共享机制有待完善，统筹管理、快速反应和临机决策能力亟需加强；在经费投入方面，缺乏长期稳定的建设、运行维护投入，不利于实验室体系的可持续发展。因此要充分把握新形势下经济社会发展的新要求，加快建设合理布局、功能完善、统筹管理、高效运行的国家高级别生物安全实验室网络体系。 二、指导思想和原则 （一）指导思想 贯彻落实总体国家安全观，面向医药人口健康、动物卫生、检验检疫、生态环境安全四大领域，针对微生物菌种保藏、科学研究、产业转化三大主体功能，围绕烈性、突发、外来、
生物安全级别标准 生物安全级别标准 (1) 概述： (2) 生物安全一级(BSL-1) (2) 一、标准微生物操作： (2) 二、特殊操作：无 (3) 三、安全设备(第一道屏障) (3) 四、实验室设施(第二道屏障) (3) 生物安全二级(BSL—2) (3) 一、标准微生物操作： (4) 二、特殊操作： (4) 三、安全设备(第一道屏障) (5) 四、实验室设施(第二道屏障) (6) 生物安全三级(BSL—3) (6) 一、标准微生物操作 (7) 二、特殊操作 (7) 三、安全设备(第一道屏障) (9) 四、实验室设施(第二道屏障) (9) 生物安全四级(BSL—4) (9) (一)生物安全柜实验室(见附1) (9) (二)、防护服实验室 (11) 传染病的隔离 (13) 三级生物安全柜 (13) 二级生物安全柜 (13) 生物危害等级 (13) 危害等级Ⅰ（低个体危害，低群体危害） (13) 危害等级Ⅱ（中等个体危害，有限群体危害） (14) 危害等级Ⅲ( 高个体危害，低群体危害) (14) 危害等级Ⅳ（高个体危害，高群体危害） (14) 附图：RhP多功能水质改良菌安全等级资料 (14)
概述： 生物安全的定义为生物性的传染媒介通过直接感染或间接破坏环境而导致对人类、动物或者植物的真实或者潜在的危险。“实验室生物安全（biosafety laboratory）”一词用来描述那些用以防止发生病原体或毒素无意中暴露及意外释放的防护原则、技术以及实践。 本标准概括了传染性微生物和实验动物工作中的四个生物安全级别所包括的主要要素。根据给个人、环境、社会提供的保护情况，确定级别。 生物安全一级(BSL-1) 进行试验研究用的物质都是已知的所有特性都已清楚并且已证明不会导致疾病的多种微生物物质。研究通过日常的程序在公开的实验台面上进行。不需要有特殊需求的安全保护措施。操作人员只需经过基本的实验室实验程序培训并且通常由科研人员指导，在这样的环境下并不需要生物安全柜的存在。 代表病原体：麻疹病毒、腮腺炎病毒。 BSL—1适合于非常熟悉的病源，该病源不会经常引发健康成人疾病，对实验人员和环境潜在危险小。实验室没有必要和建筑物中的一般行走区分开。一般按照标准的微生物操作，在开放的实验台面上开展工作。不要求、一般也不使用特殊的遏制设备和设施。实验人员在实验程序方面受过特殊训练，由受过微生物学或相关科学一般训练的科学工作者监督实验。 以下标准及特殊操作、安全设备及设施和BSL—1病源有关： 一、标准微生物操作： 1、在进行有关培养物及样品实验时，未经实验室主任同意，限制或禁止进入实验室。 2、进行活体处理后，实验人员要洗手；离开实验室前脱手套。 3、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。不允许在工作区存放食物和日常生活用品。在实验室中，戴隐型眼镜的人，也需戴口罩或面罩。食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。 4、不能用嘴移液，只能用机械装置移液。 5、制定锐器安全使用规范。 6、所有的操作过程应尽量细心，避免产生溅出和气溶胶。 7、至少一天一次、活体溅出时，都应进行台面消毒。 8、所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前，均应使用可行的消毒方法进行消毒，如高压灭菌。转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出实验室，其包装应符合有关地方、州、联邦法规。
病原微生物实验室生物安全培训试题 科室______ 姓名______ 分数______ 1.气溶胶是指悬浮于气体介质中粒径一般为（）的固态或液态微小粒子形成的相对稳定的分散体系。分散 相含有生物因子的气溶胶。?? 1. A.??μm 2. B.??μm 3. C.??μm 4. D.??μm 2.?? 去除生物污染不一定杀灭微生物。所以操作中需要：（）。?? 1. A.??安全柜内操作 2. B.??向室外排放的空气要用高效空气颗粒 (high-efficiency particulate air, HEPA滤器过滤, 3. C.??排出的废水和废物要进行高压灭菌, 对传出的仪器和样本容器表面进行消毒。 4. D.??以上都是 3.?? 下列不属于实验室一级防护屏障的是（）。?? 1. A.??生物安全柜 2. B.??防护服 3. C.??口罩 4. D.??缓冲间 4.《病原微生物实验室生物安全管理条例》中华人民共和国国务院令第424号于2004年11月5日国务 院第69次常务会议通过（）公布，自公布之日起施行。?? 1. A.??2004"年"12"月"1"日" 2. B.??2004"年"11"月"12"日" 3. C.??2005"年"1"月"1"日" 4. D.??2005"年"6"月"1"日" 5.生物实验室中产生微生物气溶胶的操作有（）。?? 1. A.??接种环操作：培养和划线培养、在培养介质中“冷却”接种环、灼烧接种环等 2. B.??吸管操作：混合微生物悬液、混合微生物悬液、吸管操作液体溢出在固体表面等 3. C.??针头和注射器操作：排除注射器中空气、从塞子里拔出针头、接种动物、针头从注射器脱落 等 4. D.??其他操作：离心、搅拌、混合、灌注和倒入液体、打开培养容器、感染性材料溢出、在真空 中冻干和过滤、接种鸡胚和培养物收取等 5. E.??以上都是 6.省、自治区、直辖市人民政府卫生主管部门和兽医主管部门负责（）级实验室的备案。?? 1. A.??一 2. B.??二 3. C.??三 4. D.??一和二 7.生物安全实验室所在单位的上级主管部门设立的生物安全专家委员会职责有（）。?? 1. A.??对涉及感染因子、动物使用、重组DNA以及基因修饰物质等研究方案进行审查和分析危害程 度评估； 2. B.??负责对下属单位生物安全的日常监督、检查；
（一）生物安全实验室一级（BSL-1）适用于具有以下特征的生物因子的操作：已知不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等，并且对实验室工作人员和环境的潜在危害性最小。 （二）进入BSL-1 实验室的工作人员要通过实验室操作程序的特殊培训，并由一位受过微生物学及相关科学一般培训的实验室工作人员监督管理。 （三）BSL-1 实验室标准微生物操作准则： 1. 实验正在进行或正在操作组织和标本时，实验室主任应限制人员进入实验室。 2. 操作潜在危险物和摘下手套后要洗手，离开实验室之前也要洗手。 3. 工作区内禁止吃东西、喝水、抽烟、操作隐形眼镜、使用化妆品及储存食物。在实验室戴隐形眼镜的人员应佩戴护目镜和防护面具。食物要储存在工作区外的专用柜子或冰箱里。 4. 严格禁止用嘴吸移液管，要使用机械吸液装置。 5.制定尖锐物品的安全操作规范。 6. 所有的实验操作步骤尽可能小心，减少气溶胶或飞溅物的形成。 7. 工作日结束后，应实行终末消毒处理。如有任何潜在危险物溅出时，工作台表面应立即净化消毒处理。 8. 所有培养基、保存物和其它系统管理的废弃物，在处理之前应使用经审定批准的净化方法（如：高压灭菌法）进行净化处理。 9.实验室应具备防止昆虫和啮齿类动物在实验室孳生的防护设备。 (四) BSL-1 实验室生物安全设备（一级屏障） 1.操作属于生物安全一级的生物因子一般不需要特殊防护装置和设备，如生物安全柜。 2.实验服、实验袍或实验制服，防止便服被污染或弄脏。 3. 如果手部皮肤破损或起疹时应戴上手套；要配备可替换的胶乳手套。 4.操作中遇到可能有微生物或其它有毒害物质飞溅出来时，应佩戴保护性眼罩。 （五）BSL-1 实验室设施（二级屏障） 1.BSL-1 实验室应该有控制进入的门。 2.每个实验室应配备一个洗手用的洗涤槽。 3.实验室的设计应使实验室易于清洁。实验室里不适合铺设地毯。 4.实验台面应是防水的，并且能够耐受中等程度的热、有机溶剂、酸碱及其它用于净化处理台面和设备的化学药品。 5.实验室器材设施应能支持预期的承重和使用需要。桌凳、柜子和设备之间的间距应便于清扫。 如果实验室有向外开放的窗户，窗户上应安装防蚊蝇的纱窗。
生物安全实验室等级 生物安全等级通常可安全进行相关研究工作的条件的整合，与不同工作中的生物安全要求相匹配。控制生物安全风险的根本措施，就是根据生物安全评估结果，为所要开展的工作设定相应的生物安全等级。各实验室的生物安全级别根据物理控制水平所对应的能够在内安全操作的微生物危险度等级(1级～4级)确定，国际上以BSL一1、BSL一2、BSL一3、BSL 一4。 1、BSL-1 代表病原体：麻疹病毒、腮腺炎病毒 简介：进行试验研究用的物质都是已知的所有特性都已清楚并且已证明不会导致疾病的多种微生物物质。研究通过日常的程序在公开的实验台面上进行。不需要有特殊需求的安全保护措施。操作人员只需经过基本的实验室实验程序培训并且通常由科研人员指导，在这样的环境下并不需要生物安全柜的存在。 2、BSL-2 代表病原体：流感病毒 简介：进行试验研究用的物质是一些已知的中等程度危险性的并且与人类某些常见疾病相关的物质。操作者必须经过相关研究的操作培训并且由专业科研人员指导。对于易于污染的物质或者可能产生污染的情况进行预先的处理准备。一些可能涉及或者产生有害生物物质的操作过程都应该在生物安全柜内进行，在这些条件下最好使用二级的生物安全柜。 3、BSL-3 代表病原体：炭疽芽孢杆菌、鼠疫杆菌、结核分枝杆菌、狂犬病毒 简介：进行试验研究的物质一般都是本土或者外来的有通过呼吸传染使人们致病或者有生命危险可能的物质。我们需要保护一切在周围环境中的操作者免于暴露于这些有潜在危险的物质中。通常使用二级或者三级的生物安全柜是必需的。 4、BSL-4 代表病原体：埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉沙病毒 简介：进行试验研究的物质是一些极高危险性并且可以致命的有毒物质，可以通过空气传播并且现今并没有有效的疫苗或者治疗方法来处理。操作者必须经过熟练的关于进行这种极高危险性物质研究的培训，并且应该很熟悉一些相关操作，保护设施，实验室设计等等方面对于这些极高危险性物质的预防。同时也必须由在此研究领域非常有经验的科研人员进行指导，严禁独自在4级实验室工作。对于实验室的进出应当严格的进行控制，实验室一定要单独的建造或者建造在一栋大楼中于其他任何地方都分离开的独立房间内，并且要求有详细的关于研究的操作手册进行参考。在这样的实验研究中三级的生物安全柜是必需的。
目前，生物等级5级病毒并不存在，只有1-4级，4级最危险。 生物安全等级一级（BSL-1）代表病原体：麻疹病毒、腮腺炎病毒 简介：进行试验研究用的物质都是已知的所有特性都已清楚并且已证明不会导致疾病的多种微生物物质。研究通过日常的程序在公开的实验台面上进行。不需要有特殊需求的安全保护措施。操作人员只需经过基本的实验室实验程序培训并且通常由科研人员指导，在这样的环境下并不需要生物安全柜的存在。 生物安全等级二级（BSL-2）代表病原体：流感病毒 简介：进行试验研究用的物质是一些已知的中等程度危险性的并且与人类某些常见疾病相关的物质。操作者必须经过相关研究的操作培训并且由专业科研人员指导。对于易于污染的物质或者可能产生污染的情况进行预先的处理准备。一些可能涉及或者产生有害生物物质的操作过程都应该在生物安全柜内进行，在这些条件下最好使用二级的生物安全柜。 生物安全等级三级（BSL-3）代表病原体：炭疽芽孢杆菌、鼠疫杆菌、结核分枝杆菌、狂犬病毒简介：进行试验研究的物质一般都是本土或者外来的有通过呼吸传染使人们致病或者有生命危险可能的物质。我们需要保护一切在周围环境中等操作者免于暴露于这些有潜在危险的物质中。通常使用二级或者三级的生物安全柜是必需的。 生物安全等级四级（BSL-4）代表病原体：埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉沙病毒简介：进行试验研究的物质是一些极高危险性并且可以致命的有毒物质，可以通过空气传播并且现今并没有有效的疫苗或者治疗方法来处理。操作者必须经过熟练的关于进行这种极高危险性物质研究的培训，并且应该很熟悉一些相关操作，保护设施，实验室设计等等方面对于这些极高危险性物质的预防。同时也必须由在此研究领域非常有经验的科研人员进行指导，严禁独自在4级实验室工作。对于实验室的进出应当严格的进行控制，实验室一定要单独的建造或者建造在一栋大楼中于其他任何地方都分离开的独立房间内，并且要求有详细的关于研究的操作手册进行参考。在这样的实验研究中三级的生物安全柜是必需的。
培训教材 实验室生物安全相关法律法规和标准 沅江市疾控中心吟 二零一一年三月十八日
病原微生物实验室生物安全 相关法律法规和标准 实验室生物安全防护的发展 二十世纪五十年代，美国在开展生物武器、化学武器的实验室研究中，为了防止生物因子(病原微生物)和化学毒剂泄漏逃逸到实验室外环境，研制了一系列的防护装备和设备，如高效粒子空气过滤器、生物安全柜等；建设了BSL－3实验室和BSL－4实验室等。 实验室生物安全防护的发展 实验室生物安全法律法规和标准的发展 实验室获得性感染的调查 美国实验室生物安全专家Sulkin and Pike调查了5000多个实验室，发现： ——累计实验室相关感染3921例； ——病原微生物实验室获得性感染的病原微生物有： 肝炎、布氏菌病、肺结核、野兔热(土拉弗氏菌)、斑疹伤寒、 委瑞拉马脑炎(Venzuelan Equine Encephalitis) 实验室获得性感染原因 在3921例实验室感染中，对导致感染的原因分析发现： ——低于20%的实验室获得性感染与已知的事故有关； ——80％与实验室工作人员暴露与感染性气溶胶有关。 ——80% 是不明原因的感染。 ——20% 感染的原因是明确的。 其中80% 是由工作人员操作失误引起的；20% 是由设备故障引起的。 实验室获得性感染原因 在3921例实验室感染中，对导致感染的原因分析发现： 导致感染最多的4种实验室事故 ——溢出和泼洒； ——针头和注射器； ——锐器、碎玻璃； ——动物或动物体外寄生虫的咬伤或抓伤。 案例一 ——新加坡实验室人员感染SARS(2003年) 案例二 ——国实验室人员感染SARS(2004年) 早在1979年，美国实验室生物安全专家Pike在他的一篇评论中指出： ——"生物安全知识、防护技术和设备对防止大多数实验室感染的发生是非常有用的"。 病原微生物危害和生物安全定义 为了避免微生物和医学实验室中有害或有潜在危害的生物因子对人、环境和社会造成的危害或潜在危害，而采取的防护措施（硬件）和管理措施（软件），达到对人、环境和社会的安全防护目的。 什么是实验室生物安全？
一、一级生物安全注意事项 1.在实验期间实验室门保持关闭状态。 2.按照操作规程使气溶胶的产生降到最小。 3.在一级生物安全区域内不许吸烟、进食、喝饮料及贮存食物。 4.穿实验服。 5.不许用嘴吸吸液管，应使用机械的吸液设备。 6.避免使用皮下注射针。 7.完成实验操作离开实验室前要洗手。 8.定期消毒工作台面，有液体飞溅应立即消毒。 9.生物废弃物丢弃前需消毒。其它污染的原料在清洗、再利用或丢弃前也需 消毒。 10.污染物封口、耐用的、防漏的容器袋包裹，高压消毒后送到指定销毁点。 11.控制昆虫和啮齿动物的出没。 12.保持工作区清洁。 二、清除污染 建议使用次氯酸盐和高级别的消毒剂来清除污染。一般情况可使用新鲜配制的含有效氯1 g/L 的次氯酸盐溶液，处理溢出的血液时，有效氯浓度应达到5 g/L。 (一)血液溢出物 1.穿戴手套、实验服和口罩， 2.用纸巾覆盖溢出物，向纸巾上倒有效氯含量5000mg/L含氯消毒剂，直到全部 浸透且不能流出。并维持适当的接触时间约30分钟。 3.用镊子夹取纸巾丢入医疗垃圾袋中。 4.用有效氯含量1000mg/L含氯消毒剂喷雾溢出区域并空气干燥15分钟。 5.15分钟接触反应后，用清水冲洗，用纸巾擦净这一区域。 6.将纸巾、手套丢入丢入医疗垃圾袋中。 7.用皂液和消毒洗手液洗手。 8.就此事件和处理过程做一个记录，报告给主管部门。 (二)皮肤感染 用抗菌皂液和温水冲洗感染部位15分钟。
(三)眼、面部飞溅 用冲眼器冲洗冲洗感染部位15分钟。 (四)医疗锐器伤或粘膜受血液或体液沾染 1.用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤，用生理盐水冲洗粘膜。 2.如有伤口，应当在伤口稍上方轻轻挤压，从伤口近心处向远心方向挤压，尽 可能挤出损伤处的血液。禁止在伤口的局部，以免损伤局部组织。再用肥皂液和流动水进行冲洗5分钟，还应注意是哪个病人污染的，如果不知是哪一个病人，也应留意刺伤自已的针头。然后，填写《医疗锐器伤登记表》，报有关部门，做好登记，定期监测。 3.受伤部位的伤口冲洗后，应当用消毒液，如：75%酒精或者0.5%碘伏进行消 毒，并包扎伤口；被暴露的粘膜，应当反复用生理盐水冲洗干净。 4.如遇被乙肝病人或艾滋病病人用过的针头刺伤，除了上述处理方法外，还要 立即注射免疫球蛋白，同时注射相应的疫苗，如乙肝疫苗等。同时还要在当时，三个月及六个月时抽血化验有没有相应的表面抗原，然后，报有关部门，做好登记，定期监测。 (五)检验冰箱冰柜离心机消毒 1.冰箱、冰柜的消毒 1)冰柜、冰箱的冷藏冷冻室的消毒用75%的酒精。 2)冰箱、冰柜的门把宜每日清洁，用75%的酒精浸湿毛巾擦拭，然后用干布擦拭水 分。 3)冰柜、冰箱的冷藏冷冻室最好每月清洁一次，清洁前取出全部物品，用75%的酒 精浸湿毛巾擦拭，然后用干布擦拭水分。作好记录。 2.离心机的消毒 1)离心机表面的消毒每天一次，按仪器表面消毒操作程序进行。 2)离心机内部的消毒宜每周一次，打开离心机盖，用75%酒精浸湿的毛巾擦拭离心 机内壁，转动机杆、转盘。 3)取出离心机离心筒用75%酒精醮湿棉签擦拭，当发生意外时，如试管离心 破裂时，要立即取出机筒，将玻璃碎片放入锐器盒，将污染的机筒放入容器中用5000mg/l的84消毒液浸泡60分钟，水洗、清洁、干燥后方可使用。 4)作好记录。