10L发酵罐使用说明
1.准备
1.1关闭所有阀门,盖紧罐盖上各种盖帽,旋紧罐盖上压紧螺栓
1.2标定pH、DO电极,将电极插入罐体侧面的传感器并及时的锁紧螺母,确保安
装妥当
1.3关紧发酵罐底阀PO1,倒入培养基(如需加消泡剂在此时加入),调整pH值,
旋紧接种口
1.4关闭排气冷凝器进水WO3,提起过滤器(提起时,状态为S,即消毒;放下时,
状态为F,即发酵)
2.预热
2.1预先启动蒸汽发生器
2.2将控制器中温度设为手动,转速设为300转,控制为自动,并启动搅拌
2.3开排气阀VT1,开夹套冷凝水阀VO1排夹套水,打开1路蒸汽SO1,蒸汽在夹
套内对培养基进行预加热
3.实罐灭菌
3.1 当温度达到60℃,检查蒸汽是否到达罐底部,这时可将1路蒸汽减少,并将VO1减少至1/4-1/2开度
3.2当温度升到近98℃时,打开排冷凝水阀VO2,并打开蒸汽阀SO2,使蒸汽进罐体,调节冷凝水阀VO2以有少量蒸汽排出为宜
3.3 当罐温达到100℃时,标定溶氧零点,关搅拌,关闭排气阀VT1
3.4 当温度达到121℃或压力达到0.1时,略打开VT1至有少量蒸汽排出
4.保温阶段
4.1 保温阶段可灭阀腔,灭移种管线(灭阀腔:开SO3,PO2;灭移种管线:开SO3,PO3)
4.2 旋松接种口盖至有少量蒸汽冒出
4.3 保温过程中要始终保持温度(121℃)和罐压不变(0.1)
5.灭菌完成及降温
5.1 保温30min后,首先旋紧接种口盖,旋紧罐底阀PO1,再关紧取样器的蒸汽阀SO3
5.2 关小VO2后关紧SO2
5.3 当罐压接近0.05时关闭VO2,缓慢开空气管线AO1,AO2,空气进入发酵罐,当罐压稳定后将三通阀AO3放下,即发酵状态
5.4 当过滤器冷凝水阀VO2排尽冷凝水后就可以关闭
5.5 关夹套蒸汽阀SO1,冷凝水阀VO1,开夹套进水阀WO1,出水阀WO2
5.6 将温度设定为自动,并设定发酵温度;启动搅拌,设定搅拌为自动
注意:降温过程中,始终监视罐压,严禁罐压掉零;当温度达到工艺要求时,调节搅拌转速、空气流量、罐压,要标定溶氧电极的斜率及校正(不是标定)pH电极的零点
备注:溶氧电极的标定:电极在罐中预开启12小时,待稳定后方可进行标定:100度
时,零点;发酵温度时,斜率100%
pH电极的标定:两点标定法:先是6.86标定,后用4.0标定,稳定后即可
过滤器膜的维护:30%酒精浸泡
每次取样前和取样后均需要蒸汽灭菌