关于微生物的一些基本知识 1、微生物的分类 1.1 从微生物形态与结构 真核细胞型微生物细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体；胞质内有完整的细胞器（如内质网、核糖体及线粒体等）。真菌属于此类型微生物。 原核细胞型微生物细胞核分化程度低，仅有原始核质，没有核膜与核仁；细胞器不很完善。这类微生物种类众多，有细菌、螺旋体、支原体、立克次体、衣原体和放线菌。 非细胞型微生物没有典型的细胞结构，亦无产生能量的酶系统，只能在活细胞内生长 繁殖。病毒属于此类型微生物。 1.2 从对氧的需求 好氧微生物：亦称需氧菌、需氧微生物。在有氧环境中生长繁殖，氧化有机物或无机 物的产能代谢过程，以分子氧为最终电子受体，进行有氧呼吸。 厌氧微生物：厌氧性细菌anaerobic bacteria 指在无氧条件下生活的细菌。为好氧性细菌的对应词。其中，在氧存在下不能生长的细菌，特称为专性厌氧菌，如梭菌、甲烷菌、 硫酸盐还原菌以及大部分光合细菌。 兼性厌氧细菌：无论有氧状态还是无氧状态都能生长发育的细菌。 1.3 微生物获得碳源与能量的方式 根据微生物对碳源和能源的需求不同，可将微生物分为下列四个营养类型： (1) 光能自养型微生物：以CO2作为惟一或主要碳源，以无机物（如硫化氢、硫代硫 酸钠等无机硫化物）作为供氢体，还原CO2合成细胞物质，并利用光能进行生长。它们都含有叶绿素等光合色素，因此能将光能转化为化学能。藻类、蓝细菌和某些光合细菌（红 硫细菌、绿硫细菌）都属于光能自养微生物。 (2)化能自养型微生物：以CO2或碳酸盐作为惟一或主要碳源，以氢气、硫化氢、二价铁离子或亚硝酸盐等有机物作为电子供体，还原CO2或碳酸盐合成细胞物质，并利用无机物氧化所产生的化学能作为能源。这类微生物包括氢细菌、硫细菌、铁细菌和硝化细菌等。 (3)光能异养型微生物：不能以CO2作为惟一或主要碳源，需要以有机物作为供氢体，具有光合色素，以光作为能源。在生长时，光能异养型微生物常需要外源的生长因子。红 螺菌属、红假单胞菌属和红螺微菌属的一些细菌就属于光能异养型微生物。 (4)化能异养型微生物：以有机化合物作为碳源，并利用有机物质氧化产生的化学能作 为能源，对于这类微生物而言，有机物既是碳源又是能源。 2、微生物的繁殖
一、名词解释： 1.温和噬菌体(temperate phage)：噬菌体基因与宿主染色体整合，不产生子代噬菌体，但噬 菌体DNA能随细菌DNA复制，并随细菌的分裂而传代。 2.溶原性：温和噬菌体这种产生成熟噬菌体颗粒（前噬菌体偶尔可自发地或在某些理化和生 物因素的诱导下脱离宿主菌基因组而进入溶菌周期，产生成熟噬菌体，导致细菌 裂解）和溶解宿主菌的潜在能力，称为溶原性。 3.溶原性细菌：带有前噬菌体基因组的细菌称为溶原性细菌。 4.荚膜：荚膜是一些细菌在其细胞表面分泌的一种黏性物质，把细胞壁完全包围封住，这层 黏性物质就叫荚膜。 5.菌胶团：有些细菌由于其遗传特性决定，细菌之间按一定的排列方式互相黏集在一起，被 一个公共荚膜包围形成一定形状的细菌集团，叫做菌胶团。 6. 芽孢:某些细菌遇到不良环境时，在其细胞内形成一个内生孢子叫芽孢。 7.酶的活性中心：是指酶的活性部位，是酶蛋白分子直接参与和底物结合，并与酶的催化 作用直接有关的部位。 8.生长因子：是一类调节微生物正常生长代谢所必需，但不能用简单的碳、氮源自行合成的 有机物。 9.培养基：根据各种微生物对营养的需要（如水，碳源，能源，氮源，无机盐及生长因子等）， 按一定的比例配制而成的，用以培养微生物的基质，称为培养基。
10.选择培养基：根据某微生物的特殊营养要求，或对各种化学物质敏感程度的差异而设计、 配制的培养基，称为选择培养基。 11.鉴别培养基：几种细菌由于对培养基中某一成分的分解能力不同，其菌落通过指示剂显 示出不同的颜色而被区分开，这种起鉴别和区分不同细菌作用的培养基， 叫鉴别培养基。 12.发酵：是指在无外在电子受体时，底物脱氢后所产生的还原力[H]不经呼吸链传递而直接 交给某一内源性中间产物接受，以实现底物水平磷酸化产能的一类生物氧 化反应。 13.好氧呼吸：是有外在最终电子受体（O2）存在时，对底物（能源）的氧化过程。 14.无氧呼吸*：无氧呼吸又称厌氧呼吸，是一类电子传递体系末端的受氢体为外源无机氧化 物的生物氧化。 15.土壤自净：土壤对施入一定负荷的有机物或有机污染物具有吸附和生物降解的能力，通 过各种物理、化学过程自动分解污染物使土壤恢复到原有水平的净化过程， 称土壤净化。 16.水体自净：天然水体受到污染后，在没有人为的干预条件下，借助水体自身的能力使之 得到净化，这种现象成为水体自净，其中包括生物学和生物化学的作用。17：水体富营养化（环化有） 18.硝化作用：氨基酸脱下的氨，在有氧的条件下，经亚硝酸细菌和硝酸细菌的作用转化为 硝酸的过程。
环境微生物学知识点 教材：环境工程微生物周凤霞白京生主编化学工业出版社 单元知识一绪论 1.环境问题与可持续发展 概念现状 2.微生物作用 微生物概念微生物作用（有益、有害） 3.微生物特点 个体小繁殖快种类多结构简单易变异 单元知识二环境微生物主要类群 1.原核微生物 ①细菌（形态结构及作用 ②放线菌（形态菌落培养污泥丝状膨胀的类型） ③蓝细菌（特征作用水华、赤潮类别） 2.真核微生物 ①酵母菌（类型结构特征应用 ②霉菌（类型结构特征应用特种污水处理优势 ③真核微型藻类（分类作用水华、赤潮类别） 3.原生动物 ①鞭毛虫（形状特征指示性作用） ②肉足虫（形状特征分类指示性作用） ③纤毛虫（形状特征分类 ④包囊（形成原因过程指示性作用） 4.微型后生动物 ①轮虫（形状特征分类指示性作用） ②线虫（形状特征分类指示性作用） ③水蚤（形状特征分类指示性作用） 5.病毒 ①病毒特征 ②病毒结构 ③繁殖（5 ④溶原性 单元知识三微生物原理 1.微生物营养 ①营养要素（5大要素 ②营养类型（4个） ③培养基（原则分类作用生化营养保证） 2.生长曲线（曲线多周期过程及对比分析 3.环境因素影响（温度ph 4.微生物代谢（酶 5.遗传变异（遗传变异污泥驯化） 单元知识四微生物生态
1.微生物环境分布（土壤大气水体） 2.微生物间关系（共生互生寄生拮抗 3.微生物与物质循环（C N P 循环污水处理中应用）单元知识五微生物的环境污染 1.水体富营养化（水华赤潮） 2.产生毒素 单元知识六微生物在水污染治理中的作用 1.污水生物处理分类（好氧厌氧兼氧） 2.活性污泥法（微生物组成净化机理培养驯化） 3.生物膜法（微生物组成净化机理培养驯化）
微生物的概念及其在生物分类中的地位 录入时间:2011-4-15 11:11:57 来源：中国食品商务网 1.1 微生物的概念 微生物（Microorganism, microbe）一词并非生物分类学上的专门名词，而是指大量的、极其多样的、不借助显微镜看不见的微小生物类群的总称。因此，微生物通常包括病毒、细菌、真菌、原生动物和某些藻类，它们的大小和特征见表1-1。 表1-1.微生物形态、大小和细胞类型 微生物大小近似值细胞特征 病毒0.01～0.25μm非细胞的 细菌0.1～10μm原核生物 真菌2μm～1m 真核生物 原生动物2～1000μm真核生物 藻类1μm～几米真核生物 但是有些例外。如许多真菌子实体、蘑菇等常肉眼可见；相同的，某些藻类能生长几米长。一般来说，微生物可以认为是相当简单的生物，大多数的细菌、原生动物、某些藻类和真菌是单细胞的微生物，即使为多细胞的微生物，也没有许多的细胞类型。病毒甚至没有细胞，只有蛋白质外壳包围着的遗传物质，且不能独立生活。 1.2 微生物在生物分类中的地位 在生物发展的历史上，曾把所有的生物分为动物界和植物界两大类。而
微生物，不仅形体微小、结构简单，而且它们中间有些类型像动物，有些类型像植物，还有些类型既有动物的某些特征，又具有植物的某些特征，因而归于动物或植物都不合适。于是，1866年海克尔（Haeckel）提出区别动物界与植物界的第三界——原生生物界。它包括藻类、原生动物、真菌和细菌。
随着科学的发展，新技术和研究方法的应用，尤其是电子显微镜和超显微结构研究技术的应用，发现了生物的细胞核有两种类型，一种是没有真正的核结构，称为原核，其细胞不具核膜，只有一团裸露的核物质；另一种是由核膜、核仁及染色体组成的真正的核结构称为真核。动物界、植物界及原生生物界中的大部分藻类、原生动物和真菌是真核生物，而细菌、蓝细菌则是原核生物。真核生物和原核生物不仅细胞核的结构不同，而且其性状也有差别，真核生物和原核生物性状的比较内容将在第二章详细介绍。 根据核结构的不同，1969年魏塔科（Whittaker）提出五界系统，即动物界、植物界、原生生物界、真菌界和原核生物界。五界系统的生物都有细胞结构。病毒作为一界被提出的较晚，主要原因是①病毒和类病毒是生物还是非生物，是原始类型还是次生类型是长期争论未决的问题；②病毒不是用双命法，分类不用阶元系统。但经过长期研究发现，病毒和细胞型生物是有共同特性：①遗传物质是DNA（部分病毒是RNA）；②使用共同的遗传密码。在此基础上，我国学者于1979年提出将无细胞结构病毒立为病毒界，从而建立了六界系统。 细胞型生物 动物界（Animalia） 植物界（Plantae）
微生物的培养和应用 【学习目标】 1、掌握培养基的分类、组成、功能及配制。 2、掌握无菌技术的内容和无菌操作技术。 3、研究培养基对微生物的选择作用 4、掌握分离、纯化特定微生物的研究思路和方法，掌握从土壤中分理处能够分解尿素的细菌并进行技术的操作过程。 【要点梳理】 要点一、微生物的实验室培养 1、培养基： （1）培养基的配制原则 ①目的要明确（根据微生物的种类、培养目的等）。如培养基可由简单的无机物组成，生产用培养则可加入化学成分不明确的天然物质，而分类鉴定培养基必须加入已知化学成分的物质。 ②营养要协调。注意各种营养物质的浓度和比例。 ③pH要适宜。各种微生物适宜生长的pH范围不同。如细菌、放线菌和真菌生长的最适pH分别为：6.5～7.5、 7.5～8.5和5.0～6.0。 （2）培养基的种类和用途 （3）选择培养基和鉴别培养基应用实例
（4）培养基中的营养要素 要点诠释： ①微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常用的氮源是铵盐、硝酸盐。 ②对异养微生物来说。含C、H、O、N的化合物既是碳源．又是氮源。 ③有些培养基不需要添加生长因子，生物自己能合成；而绝大多数微生物培养需要加入生长因子，原因是它们缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限。 2、无菌技术 （1）无菌技术的概念 在微生物培养中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，其主要技术是无菌操作。无菌技术是指通过一定物理、化学的手段，防止实验室培养物被外来微生物污染，保持微生物的纯培养的技术，其中包括在微生物的分离、转接、保存等过程中防止其他微生物污染的手段。无菌技术主要围绕如何避免杂菌污染展开的，主要包括以下几方面： ①对实验操作的空间，操作者的手和衣着，进行清洁和消毒。 ②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近或接种箱内进行。 ④应避免已经灭菌处理的材料用具与周围其他物品相接触。 （2）灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。方法见下表： 注意：灭菌所依据的原理基本上都是使菌体内的蛋白质和核酸发生变性，从而达到杀菌的效果。 （3）消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。 ①煮沸消毒法：在100℃煮沸5 min～6 min可以杀死微生物细胞和一部分芽孢。 ②巴氏消毒法：在70℃～75℃煮30 min或在80℃煮15 min。可以杀死牛奶中的微生物，并且使牛奶的营
微生物学实验复习 3、培养基得配置原则： (1)目得要明确(根据微生物得种类、培养目得等)，如培养基可由简单得无机物组成，生产用培养基内可加入化学成 分不明确得天然物质，而分类、鉴定用培养基内必须加入已知化学成分得物质。 (2)营养要协调：注意各种营养物质得浓度与比例。 (3)pH要适宜：各种微生物适宜生长得pH范围不同，如细菌、放线菌与真菌得最适pH分别 为：6、5～7、5、7、5～8、5与5、0～6、0。
5、细菌培养基得配制过程？ 答：配制培养液→调节PH →分装→包扎→灭菌→搁置斜面（搁置斜面得长度不超过试管总长得1/2） 【问题与探究】 （1）培养基灭菌后，为什么需要冷却到50 ℃左右时，才能用来搁置斜面或倒平板？您用什么办法来估计培养基得温度？ 【提示】 琼脂得凝固点为40 ℃，温度太高易使培养皿破裂，低于40 ℃，培养基已凝固，倒不出，所以培养基灭菌后，需冷却到50 ℃左右时才能用来倒平板，可以用手触摸盛有培养基得试管，感觉试管得温度下降到刚刚不烫手时就可以进行倒平板了。 （2）为什么需要使试管口通过火焰？ 【提示】 通过灼烧灭菌，防止试管口得微生物污染培养基。 （3）为了能彻底灭菌，在操作过程中应注意哪些事项？ 【提示】 使用高压蒸汽灭菌锅时，加压之前一定要把原先得空气排尽，注意恒温灭菌，同时要注意高压蒸汽灭菌锅得压力(100 kPa)、温度(121 ℃)与灭菌时间(20 min)。 6、无菌操作与接种技术 (1)接种 概念：在_无 菌 条件下将微生物接入 培养基____得操作过程。 工具：玻璃刮铲、接种针与接种环。 方法：穿刺接种、斜面划线接种与平板划线接种、涂抹平板等。 （2）无菌操作 ——微生物接种技术得关键 ①培养微生物用得试管、培养皿与微生物培养基等，在接种之前都需要 灭菌_。 ②通常接种操作要在____酒精灯火焰__得附近进行。 【想一想】 在微生物得培养过程中为什么要进行无菌操作？
微生物培菌工知识试卷A 一、选择题（150×0.5/） 1、为在光学显微镜能够看到细菌的荚膜，通常使用下列哪种染色剂进行染色。(D) A 孔雀绿 B 结晶紫 C 硝酸银 D 碳素墨水 2、发现第一个有实用价值抗生素的微生物学家是(C) A Elhrich B Domagk C Fleming D Wakmsan 3、脂多糖中的类脂A是G阴性细菌细胞壁组成成分，但它是下列哪种毒素的毒性中心？(C) A 类毒素B外毒素C内毒素D抗毒素 4、下面哪类细菌形成的菌落，往往外形很不透明或有“干燥”之感，并且表面一般有粗糙和皱褶感。(A) A 产芽孢 B 产荚膜C具鞭毛D具伴孢晶体 5、衣原体与病毒的共同特性是(B) A具核糖体，能合成蛋白质B依赖宿住获得A TP C对抗生素不敏感D二分裂方式繁殖 6、测量细菌个体大小最常用的方法是下面的哪一种？(A) A采用显微镜测微尺B通过摄影法 C 通过照相制成图片，再按放大倍数测算D测定分子量大小 7、细菌细胞膜是一个重要的代谢中心，因此细菌细胞(A) A 可以没有细胞壁绝不能没有细胞膜B既不能无壁也不能无膜 C可以无膜但不能无壁D以上答案都不对 8、若在光学显微镜下观察细菌的细致形态和主要构造时，是否需要进行染色。(B) A一般不需要B一般都需要C没有必要 D 不一定 9、在发明哪种技术以前，人们是无法了解某种微生物对人类或自然界的具体作用的。(C) A显微镜技术B染色技术C纯种分离技术D消毒灭菌技术 10、根据下列哪项指标可将微生物分为原核微生物、真核微生物和非细胞微生物3大类群。(C) A不同进化水平B性状上的明显差异 C不同进化水平和性状的显著差异D个体形态和结构 11、能产生大量分枝和气生菌丝的放线菌菌落，与培养基的结合，往往具有如下特征。(D) A较松、极易挑取B较松，易挑取C较紧、容易挑取 D 较紧、不易挑取 12、微生物通常是指个体小于以下一数字的微小生物。(B) A 1mm B 0.1mm C 0.01mm D 0.001mm 13、立克次氏体与病毒的共同特点是。(B) A 以二均分裂方式繁殖B专性细胞内寄生C对抗生素不敏感D能通过细菌滤器 14、细菌芽孢具有极强的抗逆性，因此，能否灭某些有代表性细菌的某种细胞结构是衡量各种消毒灭菌措施是否有效的主要指标，这种结构是。(B) A 营养细胞B芽孢C芽孢囊 D 伴孢晶体 15、链霉菌菌落表面的典型特征是。(D) A粘稠B奶油状C膏状D颗粒、粉质或绒状 16、引起流行性斑疹伤寒的主要病原体是。(A) A衣原体B立克次氏体C支原体 D 螺旋体 17、至今人类已知的微生物种数达。(A) A 10万种B15万种 C 20万种D 30万种 18、实验室中常选用下面哪种菌为材料来研究细胞膜的化学组成和有关性质。(A) A 革兰氏阳性菌 B 革兰氏阴性菌 C 球状体 D 伤寒杆菌 19、引起沙眼的主要病原体是。(A)
微生物知识点整理 第一章绪论 1、微生物的特点： A. 形体微小，结构简单 B. 种类繁多，分布广泛 C. 代类型多，代能力强 D. 生长繁殖快，培养容易 E. 容易发生变异，适应能力强 2微生物根据进化水平和细胞结构的不同，分为：原核微生物和真核微生物 具有核膜包被的真正细胞核、能进行有丝分裂、细胞质中有线粒体的微小生物，称为真核微生物。 原核微生物：细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体、衣 原体和螺旋体。 真核微生物：真菌、单细胞藻类、原生动物 第二章原核微生物 1、细菌的基本形态:球状、杆状和螺旋状 2、细菌的一般结构和特殊结构 一般结构：细胞壁、细胞膜、细胞质及含物、核区和质粒 特殊结构：糖被、鞭毛、菌毛、性毛、芽孢及其他休眠组织、菌鞘、附器 3、革兰氏染色
步骤：A初染：结晶紫B媒染：碘液C脱色：乙醇D复染：番红 原理：革兰氏阳性菌细胞壁厚，肽聚糖含量高，交联度大，网孔小，乙醇脱色时肽聚糖网孔会因脱水而明显收缩，且不含类脂，故不会因为乙醇处理而出现孔壁，结果结晶紫与碘的复合物仍存留在细胞壁，使之呈现紫色；革兰氏阴性菌壁薄，肽聚糖含量低，交联度小，网孔大，乙醇脱色时肽聚糖收缩不明显，且类脂含量高，被乙醇溶解使壁出现较大的孔隙，结晶紫和碘的复合物被洗去，复染时染上番红的红色 4、细菌的繁殖方式：裂殖 5、菌落：单个细菌细胞或一小堆同种细胞迅速生长繁殖形成肉眼可见的、有一定形态的子细胞群 6、放线菌：以孢子进行繁殖，分为基菌丝、气生菌丝和孢子丝为什么属于原核生物？ ①放线菌的菌丝体为单细胞，菌丝直径比真菌细，与细菌接近；②无核膜、核仁和线粒体等，核糖体为70S，属原核生物； ③细胞壁含胞壁酸，二氨基庚二酸，不含几丁质，纤维素，革兰氏染色阳性； ④对环境pH值的要近中性或微偏碱，这与细菌相近而不同于真菌 (一般偏酸性)；⑤凡能抑制细菌的抗生素也能
微生物学实验复习 3、培养基的配置原则： (1)目的要明确(根据微生物的种类、培养目的等)，如培养基可由简单的无机物组成，生产用培养基内可加入化学成 分不明确的天然物质，而分类、鉴定用培养基内必须加入已知化学成分的物质。 (2)营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。
(3)pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同，如细菌、放线菌和真菌的最适pH分别 为：～、～和～。 5、细菌培养基的配制过程 答：配制培养液→调节PH→分装→包扎→灭菌→搁置斜面（搁置斜面的长度不超过试管总长的1/2）【问题与探究】 （1）培养基灭菌后，为什么需要冷却到50 ℃左右时，才能用来搁置斜面或倒平板你用什么办法来估计培养基的温度 【提示】琼脂的凝固点为40 ℃，温度太高易使培养皿破裂，低于40 ℃，培养基已凝固，倒不出，所以培养基灭菌后，需冷却到50 ℃左右时才能用来倒平板，可以用手触摸盛有培养基的试管，感觉试管的温度下降到刚刚不烫手时就可以进行倒平板了。 （2）为什么需要使试管口通过火焰 【提示】通过灼烧灭菌，防止试管口的微生物污染培养基。
（3）为了能彻底灭菌，在操作过程中应注意哪些事项 【提示】 使用高压蒸汽灭菌锅时，加压之前一定要把原先的空气排尽，注意恒温灭菌，同时要注意高压蒸汽灭菌锅的压力(100 kPa)、温度(121 ℃)和灭菌时间(20 min)。 6、无菌操作和接种技术 (1)接种 概念：在_无 菌 条件下将微生物接入 培养基____的操作过程。 工具：玻璃刮铲、接种针和接种环。 方法：穿刺接种、斜面划线接种和平板划线接种、涂抹平板等。 （2）无菌操作——微生物接种技术的关键 ①培养微生物用的试管、培养皿和微生物培养基等，在接种之前都需要 灭菌_。 ②通常接种操作要在____酒精灯火焰__的附近进行。 【想一想】 在微生物的培养过程中为什么要进行无菌操作 提示：无菌操作的目的是防止受到空气中的杂菌污染。 7、微生物的分离 （1）原理：根据微生物对_营养成分、氧气、pH 等要求的不同，通过只提供目的微生物生长的必需条件，或加入某些抑制剂使非目的微生物不能生长，从而达到 选择分离 微生物的目的。 (2)方法 ①据菌落形态特征初步分离 ②常用方法——平板分离法 分类?????_____________ 混合平板法 ______________ ：是常用的平板分离法，有扇形划线、 连续划线、交叉划线和方格划线等 目的：在培养基上得到目的微生物的 单个 菌落 【归纳】无菌技术的具体内容 (1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。 (2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 (3)实验操作应在酒精灯火焰附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。 (4)实验操作时应避免已灭菌处理的材料用具与周围物品接触。 （5）在微生物的实验室培养中，无菌技术的核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。 8、平板分离法 ①原理：大多数细菌、许多真菌和单细胞藻类能在固体培养基上形成孤立的菌落。平板分离法能将单个微生物分离和固定在固体培养基表面或里面，每个孤立的活微生物体经过生长、繁殖均可形成便于移植的菌落。 ②常用培养基：最常用的分离、培养微生物的固体培养基是琼脂固体培养基。 ③.方法：(1)涂抹平板法：分离材料进行10倍系列稀释，取一定稀释度样品倒入预先准备好的琼脂平板，用无菌玻璃刮铲将样品涂布均匀，细菌菌落常仅在平板表面生长。 (2)混合平板法：分离材料进行10倍系列稀释，取一定稀释度样品与溶化的琼脂混合，将 与样品混合的琼脂倒入无菌平皿，细菌菌落出现在平板表面及内部。 (3)平板划线法：有扇形划线、连续划线、方格划线等。 涂抹平板法 平板划线法
微生物基础知识 1、微生物概述 （1）定义：生物界中存在的一群形体微小的生物。它的大小通常以微米来表示。 （2）范围：细菌、霉菌、酵母菌、放线菌、支原体、病毒等。（3）特点： ①形体微小、结构简单、生长繁殖快、对物质有强烈的转化作用； ②种类繁多； ③易引起变异； ④数量大、分布广、环境适应性强； （4）与人类的生活密切相关。 2、微生物的分类 微生物可分为八大类： 真菌：蘑菇、霉菌、酵母菌、念珠菌 细菌：肺炎球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌 放线菌： 支原体：肺炎支原体 衣原体：沙眼 立克次体：斑疹伤寒 螺旋体：梅毒 病毒：甲、乙肝病毒，麻疹病毒，狂犬病毒，流感病毒。
（1）按其结构、化学组成可分为： ①原核类：仅有原始核质，无核仁和核膜，细胞器很不完善。如细菌、放线菌、支原体、立克次氏体； ②真核类：细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体，细胞器完整。如真菌（酵母菌和霉菌），原生动物，藻类： ③非细胞类：体积微小，能通过除尘过滤器。如病毒和朊病毒。（2）按其致病性可分为： ①病原性微生物：有致病性； ②非病原性微生物：无致病性； 3、微生物的五大共性 （1）体积小，面积大 （2）吸收多，转化快 （3）生长旺，繁殖快 （4）适应强，易变异 （5）分布广，种类多 4、影响微生物生长的因素 （1）温度：在各种影响微生物生长繁殖的因素中，温度起着最重要的作用，每种微生物都一个最适宜的生长温度，在这种温度下，增代时间最短。一般来讲，高温能杀死微生物，低温可抑制微生物生长；（2）PH值：酸碱环境对微生物的影响；
（3）氧气：真空环境可抑制需氧菌的生长； （4）光线； （5）盐类； （6）水分活性。 5、常见污染药物制剂的微生物 （1）葡萄球菌：可引起局部感染 （2）大肠杆菌：胆道和尿道感染 （3）绿脓杆菌：化脓性感染、中耳炎、肺炎 （4）枯草杆菌：结膜炎 （5）酵母菌：使糖分解，药液产生有机酸 （6）霉菌：是制剂霉坏，酸败变质 6、洁净车间内微生物在哪里？ （1）空气 （2）水 （3）人员 （4）器具 灰尘-----“微生物的飞行器” 微生物不是凭空存在的，99%的微生物都附在颗粒上。控制空气中的微粒数，就是控制了微生物数量。 灰尘、微粒具有沉降和粘附的趋势，所以同一区域内，地面是微
一．绪论 1.微生物:肉眼难以看清、需要借助光学显微镜或电子显微镜才能观察到的一切微小生物的 总称。 分类：无细胞结构：病毒、亚病毒因子 有细胞结构：原核生物、真核生物 六界系统：占4界，病毒界、原核生物界、原生生物界、真菌界 三域学说：古菌域、细菌域、真核生物域 2.列文虎克：微生物学的开拓者、世界上第一个观察到微生物的人——1676 巴斯德：微生物学的奠基人、否定“自然发生”学、说证明微生物引起发酵、制备疫苗预防疾病、发明巴斯德消毒法 科赫：细菌学的奠基人、发明固体培养基、分离出病原菌、提出“科赫法则”、创立显微镜技术 布赫纳：用酵母菌无细胞压榨汁将葡萄糖进行酒精发酵取得成功，发现了微生物酶的重要作用、从此将微生物学推到了生化研究的阶段。 3.微生物的特点： （1）形态微小结构简单（2）代谢旺盛繁殖快速（3）适应性强容易变异 （4）种类繁多分布广泛（5）食谱广、易培养、起源早、休眠长 二．原核微生物 第一节：细菌 1.细菌的基本形态：杆状、球状、螺旋状 2.细菌的大小：度量细菌细胞大小常用的单位是微米um。1m=103mm=106um=109nm. 大肠杆菌可作为典型的细菌细胞大小的代表，平均长度约为2um，宽
0.5um。最小到最大：50nm~0.75mm，相差一万倍。 3.细胞壁的功能：（几乎所有细菌（除支原体外）都有细胞壁） （1）保护细菌免受机械性或其他外力的破坏。 （2）维持细胞特有的形状 （3）屏障保护功能 （4）提供细胞的生长、分裂和鞭毛的着生、运动所必需的结构 （5）赋予细胞特定的抗原性、致病性和对抗生素及噬菌体的敏感性。 4.革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁结构比较 5.细菌的革兰氏染色机制 阳性：肽聚糖的含量与交联程度都比较高，肽聚糖层多，所以细胞壁较厚，壁上的间隙较小， 媒染后形成的结晶紫—碘复合物就不易被洗脱出细胞壁，加上它本来就不含脂质，乙醇洗脱时细胞壁非但没有出现缝隙，反而使肽聚糖层的网孔因脱水而变得通透性更小，结果蓝紫色的结晶紫—碘复合物就留在细胞内而使细胞呈蓝紫色。
绪论 1.微生物的定义与特点;微生物的分类。 一、微生物的概念与特点 1.微生物（microorganism）是一群个体微小，结构简单，肉眼不能直接看见，必须借助于光学显微镜或电子显微镜放大数百倍至数万倍才能观察到的微小生物的总称。 2.微生物的特点 个体微小，结构简单 比表面积大，吸收多，转化快 繁殖快，代谢强 适应强，易变异 种类多，分布广 1.微生物类型 根据微生物大小、结构和组成不同分为三类型 2.病原微生物的定义病原微生物：是指能引起动物、植物或人类产生疾病的微生物。 3.医学微生物学的发展简史。 .微生物的发现与研究 （1）列文虎克发明显微镜，最早观察到微生物；微生物学研究的创始人：巴斯德、科赫、李斯特 第一章细菌的基本性状 第一节细菌的形态与结构 1.细菌细胞壁的结构和功能，肽聚糖结构及其化学组成；革兰阳性与革兰阴性细菌细胞壁的主要区别 （一）细胞壁 化学组成与结构，革兰染色共有组分：肽聚糖 特殊组分：G+ 菌、G-菌不同 革兰阳性菌细胞壁特殊组分：磷壁酸 革兰阴性菌细胞壁特殊组分：外膜
革兰阴性菌细胞壁肽聚糖:聚糖骨架、四肽侧链 2.细胞壁的功能： （1）维持细菌固有形态和抵抗低渗作用。（2）物质交换作用。（3）屏障作用。（4）免疫作用。（5）致病作用。（6）与细菌药物敏感性有关。 G+菌与G-菌细胞壁结构比较 ?细菌细胞膜的结构与真核细胞基本相同，由磷脂和多种蛋白质组成，但不含胆固醇。 ?细菌细胞膜可形成一种特有的结构，称中介体。 2.细菌荚膜、鞭毛和菌毛的功能。 荚膜： 功能： 有抗吞噬和抵抗杀菌物质的杀菌作用，增强细菌的侵袭力，构成细菌致病力的重要因素之一。②具有免疫原性。③鉴别细菌和血清学分型 鞭毛：功能：细菌的运动器官 菌毛 普通菌毛：具有黏附性，与细菌致病性有关。 性菌毛：与细菌的遗传变异相关 3.芽胞结构特点、意义、与消毒灭菌的关系；细菌L型的形态特征、检验要点。 芽胞：某些细菌（主要为革兰阳性杆菌）在一定条件下，细胞质浓缩脱水而形成一个折光性很强，具有多层膜状结构、通透性很低的圆形或卵圆形的小体。 L型细菌：细胞壁缺陷的细菌。 常发生在作用于细胞壁的抗菌药物治疗过程中。 根据细胞壁缺陷程度分： 原生质体（完全失去细胞壁，见于G+菌，仅在高渗环境中存活) 原生质球（细胞壁部分缺损，见于G-菌，在高渗或非高渗环境中均能存活） 4.G+菌和G-菌细胞壁结构的差异及其意义。 第二节细菌的生理 细菌的生长条件,生长周期及各期的特点;IMViC试验的组成及机制;细菌分解及合成代谢产物的种类及意义。 细菌的生长繁殖
1.什么是微生物？它包括哪些类群？ 定义:微生物是指所有形体微小,单细胞或个体结构较为简单的多细胞,甚至无细胞结构的低等生物的总称类群；微生物包括无细胞结构生物病毒,亚病毒等;细胞生物中包括原核生物中的古细菌,真细菌,放线菌,蓝细菌,枝原体等;包括真核生物中的酵母菌,霉菌,单细胞藻类,原生动物等 2.生物有哪五大共性？其中最基本的是哪一个？为什么？ 微生物五大共性分别是：1:体积小，面积大；2:吸收多，转化快；3:生长旺，繁殖快；4:适应强，易变异；5:分布广，种类多。其中最基本的特性是体积小，面积大。 微生物是一个突出的小体积大面积系统，从而赋予它们具有不同于一切大生物的五大共性，因为一个小体积大面积系统，必然有一个巨大的营养物质吸收面、代谢废物的排泄面和环境信息的交换面，故而产生了其余四个共性。巨大的营养物质吸收面和代谢废物的排泄面使微生物具有了吸收多，转化快，生长旺，繁殖快的特点 3.试述微生物学发展的几个主要时期，其主要标志及其主要人物 ? 初创期：列文虎克——微生物学的先驱 1、自制单式显微镜，观察到细菌等微生物的个体； 2、出于个人爱好对一些微生物进行形态描述。奠基期：法国巴斯德——微生物学的奠基人 1、否定了自然发生学说；2、发酵由微生物引起； 3、推动了免疫学的产生； 4、研究牛羊炭疽病、鸡霍乱、人类狂犬病； 5、发明巴氏消毒法； 6、制作狂犬疫苗、炭疽病疫苗。德国科赫——细菌学奠基人 1、建立了平板分离法、细菌染色、悬滴培养或显微摄影等技术；2、分离了炭疽芽孢杆菌、结核分枝杆菌和霍乱弧菌等重要病原菌；3、提出并证实病原菌必须遵循的科赫法则。发展期：E.Buchner——生物化学奠基人成熟期：J.Watson 和F.Crick——分子生物学奠基人 4.什么是无菌技术？常用的基本工具都有哪些？ 无菌技术是在医疗护理操作过程中，保持无菌物品、无菌区域不被污染、防止病原微生物侵入人体的一系列操作技术。无菌持物钳、无菌容器、无菌手套。 5.实验室用固体培养基获得微生物纯培养的方法有哪些？ 稀释倒平板特点：菌落分离较为均匀，进行微生物计数结果相对准确。但操作相对麻烦，热敏感菌有时易被烫死，而严格好氧菌也可能因被固定在培养基中生长受到影响。 2、涂布平板法特点：操作相对简单，是较常使用的常规方法。但有时会因涂布不均匀使某些部位的菌落不能分开，进行微生物计数时需对稀释和涂布过程的操作特别注意，否则不易得到准确的结果。 3、平板划线法特点：操作简单，多用于对已有纯培养的确认和再次分离。应用：这三种方法可用于所有能在固体培养基表面形成菌落的微生物的纯培养分离。并且，通过选用适当的选择平板及培养条件，可直接分离各种具有特定生理特征的微生物。和厌氧罐或厌氧手套箱技术结合，这3种方法也可用于获得各种厌氧菌的纯培养。 6.举例说明富集培养技术的过程 富集培养：一类使混合微生物群体中某特定微生物比例激增的培养方法。其一可用促进某特定微生物生长繁殖的选择性培养基或培养条件，其二可用抑制其他微生物生长繁殖的选择性培养基或培养条件。如用于增殖好氧性自生固氮菌的Ashby无氮培养基，增殖土壤真菌用的Martin培养基等。其三可用连续培养法，在一定稀释率下，使比生长速率小的细胞溢出培养器，而比生长速率大的细胞留在培养器中。