张村矿机电管理
技术资料汇编二00七年九月一日
目录
1、机电运输设备安装、验收制度
2、机电运输设备技术资料、档案管理制度
2.1 矿井机电运输系统日常运行与维护管理
2.2 矿井机电运输系统检验、检测（定期/强制）管理2.3 矿井机电运输系统计划检修管理
2.4 矿井机电运输系统设备安装调试与验收管理
2.5 矿井机电运输系统设备管理《实施细则》
2.6 矿井机电运输系统备品配件计划管理
2.7 《质量标准化》管理
2.8 职工岗位技能培训管理
2.9 矿井机电运输系统技术革新与科技进步管理
2.10 《岗位责任制》汇编
2.11 《操作规程》汇编
2.12 《安全生产责任制》汇编
2.13 矿井机电运输系统事故分析、责任追究与预测预防
2.14 矿井机电运输系统重大事故预案及其起动程序
3、主要机电设备管理制度
3.1 矿井主要通风机安全运行管理制度
3.2 矿井主排水系统安全运行管理制度
3.3 矿井压风系统安全运行管理制度
3.4 副井斜巷人车及矿车串车提升安全运行管理制度
3.5 主井高强胶带运输机安全运行管理制度
3.6 矿井地面变电站及架空输配电线路安全运行管理制度3.7 矿井井下高低压供电系统安全运行管理制度
3.8 矿井采掘工程供电系统安全运行管理制度
3.9 小绞车安装、运行管理制度
3.10刮板运输机安装，运行管理制度
3.11 普通胶带运输机运行管理制度
3.12局部通风机安装、运行管理制度
3.13学习制度
4、健全规章制度
4.1 岗位责任制
4.2 操作规程
4.3 交接班制度
4.4 安全活动制度
4.5 事故分析追查制度
4.6 要害场所管理制度
4.7 机电干部（包括技术人员）上岗查岗制度
4.8 电气管理制度
4.9 电气试验制度
4.10 停送电制度
4.11 电缆管理制度
4.12 小型电器管理制度
4.13 设备管理制度
4.14 设备运行维修保养制度
4.15 设备定期检修制度
4.16 设备包机制度
4.17 防爆设备入井验收制度
4.18 油脂管理制度
4.19 配件管理制度
4.20 轨道运输管理制度
4.21 小绞车管理制度
4.22 乘人管理制度
4.23 机电设备设计安装管理制度
4.24 图纸资料档案管理制度
5、健全技术资料
5.1 大型固定设备（主变压器、主通风机、主提升机、主压风机、主排水泵、锅炉、大型带式输送机、2米及以上绞车）
5.1.1 设备使用说明书
5.1.2 调试安装验收单
5.1.3 试验记录
5.1.4 设备历次事故记录
5.1.5 设备历次性能测试和关键部件探伤记录，分析报告处理及改进意见
5.1.6 设备大修及技术改造记录
5.1.7 设备履历簿和技术特征卡片
5.1.8 安装图册和配件图册
5.2主要图纸
5.2.1矿井主提升系统图
5.2.2通风系统图
5.2.3压风系统图
5.2.4排水系统图
5.2.5供热系统图
5.2.6供水系统图
5.2.7通讯系统图
5.2.8矿井地面供电系统图
5.2.9井上下供电系统图
5.2.10地面广场电缆、管线敷设布置图
5.2.11矿井轨道运输系统图
5.2.12矿井皮带机运输系统图
5.3技术测定
5.3.1主提升机每年测定50%，每两年测定一遍
5.3.2主排水泵试验测定每年一次
5.3.3压风机试验测定每年一次
5.3.4主扇风机试验测定每5年一次
5.3.5锅炉检验严格按锅炉监察规程进行
5.3.6主要设备的关键部件必须按规定周期和内容进行探伤
5.4周期性试验和测试记录
5.4.1斜井人车防防试验
5.4.2反风试验
5.4.3水泵联合试验
5.4.4电机车制动距离试验
5.4.5斜井提升连接装置拉力试验
5.4.6井上下各种电气试验、校验、测试
5.4.7井下杂散电流测试
5.4.8斜井及采区上下山主提升钢丝绳的检验
2.1 矿井机电运输系统日常运行与维护管理
一、运行中的机电运输设备每日要有2～3h的集中检查维修时间。日常维护与检查的内容有：
1、机电运输设备的运行是否正常，有无卡，磨，偏等不正常现象，硫化头是否平直良好。
2.、设备各零部件是否齐全，螺栓是否紧固，可靠。
3、电机，滚筒，CST，联轴器的温度是否正常，有无异响。
4、液压系统是否有泄漏现象，油位是否正常，必须定期注油润滑，维护人员对照润滑图表按时定量用合格的润滑油剂向各润滑点加油。
5、输送带张紧装置是否处于完好状态。
6、机电运输设备的工作状态是否正常，转动是否灵活。
7、检查，试验各项安全保护装置。
8、检查有关电气设备（包括电缆等）是否完好。
9、认真填写日检记录。
二、维护人员要坚守岗位，始终要对维护的机电设备运行特点做到心中有数。
三、班中做到四勤：勤听、勤看、勤摸、勤查。
勤听：听设备运转声音是否正常。
勤看：看各种仪表指示是否正常。
勤摸：摸各轴承和电机温升是否正常。
勤查：查设备的运行状况。
2.2～2.3 运输系统设备管理与检修规定
1、为保障矿井机电设备性能可靠稳定、运行安全经济，对矿井机电设备实行定期检查检修制度。
2、机电设备使用单位应结合实际情况制定出设备定期检查检修项目、流程及要点。对于大型固定设备及其重点部位均须建立定期检修档案，专人管理。
3、设备的大、中、小修周期，根据出厂说明以及设备运行状况决定，不得随意延长检修周期。
4、设备检修必须有详细的检修记录，对重要的技术参数必须校核准确，设备检修后必须有专业技术人员验收签字，并作试运转。
5、设备检查分班检、日检、周（旬）检及月检，各类检查必须详细、全面，不得遗漏。
6、重要设备的保护系统必须严格按照《煤矿安全规程》规定进行检查试验，并做好记录。
7、井下电气设备严格按防爆性能要求进行检查维护，杜绝失爆。下附检修规定：
运输设备检修管理规定
煤矿生产中，机电运输设备的维修、保养是保证设备安全运行与生产连续性的重要手段与基础措施，为进一步加强机电设备计划性、
周期性保养、维护，落实检修周期、时间、内容，确保检修质量，保障机电设备的安全、经济、运行，特制定本规定。
一、运输设备的管理规定
1、机电运输设备检修要坚持状态检修与计划性周期检修相结合，并要以计划性周期检修为主，状态检修为铺。矿属各单位必须按运输设备规定的检修项目，强制性开展计划检修工作，不得漏检和空检；
2、各队主要行政负责人是本单位机电运输的主要管理责任者，负责落实检修工作及保证检修质量。
3、每天（8：00-12：00）为日常检修时间，每月的月底为月检修时间，安排检修时间不低于8小时，每年上半年、下半年，各安排一次停产检修；
4、8小时以上（含8小时）的检修项目，必须编制正式的检修措施并贯彻到每个施工人员；
5、各队要配备足够力量的检修人员，设立检修班，并保证每班有人巡视，在主斜井强力皮带停机检修时，自行组织对普通皮带及刮板输送机进行维护保养；
6、各队要对本单位所使用的皮带运输设备及配件，建立台帐，对自己所使用的设备做到心中有数；
7、各单位要制订包机制度，包机到人，责任到人；
8、矿要制订运输设备检修奖罚制度，设备事故率，影响生产要与工资挂钩，充分调动职工的积极性；
9、各单位要有详细的日常检修记录，每月的材料消耗清单；
10、每月要根据检修材料，备件计划给经营部门，保证正常维修需要；
11、因检修不到位造成的设备和部件损坏要追究责任人和单位的责任，并根据损坏程度对单位和责任人进行罚款。
12．非检修时间，发生的电器、机械事故所影响的时间，由调度室统一纪录，并给于单位300元/小时的罚款。
13．正在使用的皮带、刮板输送机等运输设备，原则上；谁使用、谁管理、谁维护。使用单位要保证台台完好，各种保护齐全完整、灵敏可靠。安检科、机电科定期检查，如发现存在严重问题，给于责任单位500元罚款。
14．各单位需使用皮带、刮板输送机等设备时，需向机电科出具工程设备使用设计或说明，机电科确认后，经有关领导同意审批，方可开具运输设备领用出库单，使用单位持单到仓库领取。
15．使用单位领取的运输设备，入井前需对设备进行检验、试运转，无问题后方可入井。
16．所有入井的皮带、刮板输送机及配件，必须经机电科签发入井证，方可入井。
17．回收升井的皮带机、刮板输送机，使用单位要确保小件不丢失，设备无损坏。设备升井后，由设备管理员现场检验，合格后记录入账并开具收条，并由设备保管员指定位置，由使用单位摆放整齐，如发现有丢失、损坏等现象，由使用单位按原价2倍赔偿。
强力皮带的管理规定
一．管理规定（违反下列规定给于责任人100元罚款）
1．矿机电队应成立独立的皮带班，并配备足够的维修人员由专职干部管理；
2．机电队皮带班实行区域化管理，管理范围包括：地面生产系统、井下主要运输系统的强力皮带、普通皮带、给煤机，普通皮带
溜子与强力皮带搭接点处的附件设施等，并包括其范围内的管
线、电缆的吊挂及文明卫生；
1.强力皮带按矿井大型固定设备管理，各种制度、记录齐全完整。
2.强力皮带设立专职巡回检查人员，每圆班全部检查一次；
3.每圆班要慢速验带一次，发现问题及时处理，皮带接头严禁出现
鼓泡、碎边、老化现象；
4.强力皮带接头每2周全部检查测量一次，测量的数据要与上一次
数据比较，有无变化；
5.专人检查强力皮带电气系统的各种保护并认真填写记录；
6.严禁使用强力皮带或其它皮带、溜子运送物料；
7.强力皮带的各项保护要每班试验，保证其灵活可靠；
8.强力皮带检修时，要制定相应的安全措施。
9.强力皮带检修时，应停电并挂牌加闭锁。
10.强力皮带托棍严禁出现不转的情况，整部皮带机缺托棍，坏托棍
数量不超过3%，并设置专人检查更换托棍；
11.溜子、普通皮带与强力皮带搭接处下方5米以内必须在下皮带加
装清煤器，搭接处巷道上方10米，下方20米处文明卫生，归溜子、普通皮带使用单位打扫清理；
12.溜子、普通皮带与强力皮带搭接处必须有不低于2米的挡煤板，
溜子落煤应落到皮带中心，溜子头不得压挡煤板；
13.溜子与皮带搭接转载点要有喷雾、洒水装置，暴露的皮带滚筒要
加防护栏；
14.严禁杂物及大块矸石（200）上皮带。
15．各工作面与斜井大皮带搭接的交接点，由机电队统一制作，清煤器、挡煤板并由机电队统一安装，要保证使用效果良好；二．巡检内容
（1）机头部分：
○1逆止器运转、润滑是否正常，有无异常震动及响声；○2CST系统各部管路有无渗油泄露，各过滤阀、件定期更换清理；○3操作台的各项显示数值是否正常；○4电机、CST系统运转是否正常，有无异常振动、声音，各对轮间隙是否正常；○5CST的油位是否合适，油质是否清洁；○6各滚筒瓦座润滑是否否正常，有无异常温升，胶皮有无掉缺、破损；○7机头各部螺栓是否牢固、可靠；○8各机头架有无开焊变形；○9检查各种保护是否完好。
（2）机身部分：
○1各部机架有无开焊变形，连接螺栓是否松动、缺失；○2各处防跑偏托棍是否齐全、完好，防跑偏开关是否动作可靠；○3机身沿停开关是否完好、可靠；○4托棍运转是否灵活可靠，有无卡阻现象；发现有托
棍不转或卡阻不灵活的马上更换；○5观察机身皮带有无跑偏磨机架现象，发现此现象立刻调整；○6各处挡煤板是否齐全、完整，挡煤板皮子如破损马上更换；○7皮带机身给料点各部件是否齐全完整，挡煤板、清煤器是否齐全、完整，皮带缓冲装置是否齐全、工作是否可靠；○8机身各处信号装置是否完好。
3、机尾部分
○1机尾给料点各部件是否齐全完整，挡煤板有无漏煤现象；○2防跑偏立棍工作是否正常；○3皮带张紧力是否合适；○4皮带张紧滚筒及变坡滚筒是否缺油，运转是否正常，胶层有无掉缺、损伤现象，皮带有无磨机尾架；○5皮带张紧跑车，有无开焊变形等异常，底轮是否转动灵活；○6防跑装置是否安全检查可靠；○7机尾二道清煤器皮子磨损是否严重。
三．文明卫生
（1）机头、机尾的文明卫生要班班打扫，并进行交接班，接班人员发现卫生差时，可要求交班人员打扫，直到打扫干净，方可接班；如对方不听可上报有关领导，进行罚款处理。
（2）机头打扫的内容：
○1溜煤筒清理干净，无积煤；○2机头架、机尾架无浮煤，地板无积煤、无积水；○3机头设备、电机、CST无浮煤、渗油部位擦干净；○5保证机头机尾架托棍不粘煤泥；○6保持机头信号房内的卫生，做到室内干净、整洁，物品摆放整齐无浮灰；○7保证机头沙箱填满、灭火器摆放整齐，消防设备齐全
（3）主井斜巷内水沟畅通，无积水、无积煤、无淤泥杂物；
（4）机尾处打扫内容：
○1机尾处无杂物、无积煤、水沟保持畅通；○2机尾托棍无粘煤泥、机尾架、皮带张紧跑车无浮煤；○3张紧跑车轨道清理干净、无积煤、跑车运行自如；○4变坡滚筒及滚筒架周边清理干净，不能被浮煤埋住。四．其他设备的检修内容
1．刮板输送机：
○1各转动部分是否有异常声响、剧烈振动或发热等现象；
○2减速箱、液力偶合器、液压缸是否有漏损；
○3减速箱、盲轴、链轮、挡煤板、分链器和刮板螺栓是否松动；
○4刮板、连接环、链条是否损坏；
○5刮板、链条松紧度是否合适、有无跳牙现象；
○6溜槽有无掉销和错口现象；
○7机头、机尾架有无变形；
○8各部螺栓紧固有无松动。
2、破碎机：
○1手把、按钮、信号闭锁是否完好；
○2保证各部润滑、开关电缆是否有漏电现象；
○3各部螺丝是否紧固、前后挡帘是否固定完好；
○4旋转滚筒、刀齿是否齐全、完整、牢固；
○5传动装置、三角皮带、护罩是否完好。
3、圆振筛：
○1电机、减速机、对轮及连接装置是否完好；
○2各信号装置、按钮是否完好；
○3电机、减速机、传动部位、各轴承温度、声音、润滑是否正常、各部位螺丝是否紧固；
○4溜矸筒、溜煤筒是否完好，磨损是否超限；
○5蓖子有无开焊、变形，有无异物卡住。
2.5 运输设备的管理规定
1、机电运输设备检修要坚持状态检修与计划性周期检修相结合，并要以计划性周期检修为主，状态检修为铺。矿属各单位必须按运输设备规定的检修项目，强制性开展计划检修工作，不得漏检和空检；
2、各队主要行政负责人是本单位机电运输的主要管理责任者，负责落实检修工作及保证检修质量。
3、每天（8：00-12：00）为日常检修时间，每月的月底为月检修时间，安排检修时间不低于8小时，每年上半年、下半年，各安排一次停产检修；
4、8小时以上（含8小时）的检修项目，必须编制正式的检修措施并贯彻到每个施工人员；
5、各队要配备足够力量的检修人员，设立检修班，并保证每班
有人巡视，在主井大皮带、停机检修，自行组织对小皮带及刮板输送机进行维护保养；
6、各队要对本单位所使用的运输设备配件，建立台帐，对自己所使用的设备做到心中有数；
7、各工作面与斜井大皮带搭接的交爆点，由机电队统一制作，清煤、挡煤板并由机电队统一安装，并保证使用效果良好；
8、各单位要制订包机制度，包机到人，责任到人；
9、矿要制订运输设备检修奖罚制度，设备事故率，影响生产要与工资挂钩，充分调动职工的积极性；
10、各单位要有详细的日常检修记录，每月的材料消耗清单；
11、每月要根据检修材料，备件计划给经营部门，保证正常维修需要；
12、因检修不到位造成的设备和部件损坏要追究责任人和单位的责任，并根据损坏程度对单位和责任人进行罚款。
13．正在使用的皮带、刮板输送机等运输设备，原则上；谁使用、谁管理、谁维护。使用单位要保证台台完好，各种保护齐全完整、灵敏可靠。安检科、机电科定期检查，如发现严重问题，给于责任单位500元罚款。
二、强力皮带的检修管理规定
1、检修规定：
○1大皮带设立专职巡回检查人员，每圆班检查一次；
○2每圆班要慢速验带一次，发现问题及时处理，皮带接头严禁出现鼓
泡、碎边、老化现象；
○3皮带接头每2周全部检查测量一次，测量的数据要与上一次数据比较，有无变化；
○4专人检查电气系统保护并认真填写记录；
○5严禁使用高强皮带或其它皮带溜子；
○6强力皮带的各项保护要每班试验，保证其灵活可靠；
2、巡回检查：
（1）机头部分：
○1逆止器运转、润滑是否正常，有无异常震动及响声；○2CST系统各部管路有无渗油泄露，各过滤阀、件定期更换清理；○3操作台的各项显示数值是否正常；○4电机、CST系统运转是否正常，有无异常振动、声音，各对间隙是否正常；○5CST的油位是否合适，油质是否清洁；○6各滚筒瓦座润滑是否否正常，有无异常温升，胶皮有无掉缺、破损；○7机头各部螺栓是否牢固、可靠；○8各机头架有无烧焊变形；○9检查各种保护是否完好。
（2）机身部分：
○1各部分架有无开焊变形，连接螺栓是否松动、缺失；○2各处防偏托棍是否齐全、完好，防跑偏开关是否动作可靠；○3机身停开关是否完好、可靠；○4托棍已平是否灵活可靠，有无卡阻现象；发现有托棍不转或长期不灵活的马上更换；○5观察机身皮带有无跑偏磨机架现象，发现此现象立刻调整；○6各处挡煤带是否齐全、完整，挡煤带皮子和皮损马上更换；○7皮带机身经点，各部件是否齐全完整：挡煤板、清
煤器是否齐全、完整，皮带缓冲装置是否齐全、工作是否可靠；○8机身各处信号装置是否完好。
3、机尾部分
○1机尾给料点各部件是否齐全完整，挡煤板有无漏煤现象；○2防偏立棍工作是否正常；○3皮带张紧力是否合适；○4皮带张紧滚筒及变坡滚筒是否缺油，运转是否正常，胶尾有无掉缺、损伤现象，皮带有无磨机尾架；○5皮带张紧跑车，有无开焊变形等异常，底轮是否转动灵活；○6防跑装置是否安全检查可靠；○7机尾二道清煤器皮子磨损是否严重。
3、文明卫生
（1）机头、机尾的文明卫生要班班打扫，并进行交接班，接班人员发现卫生差时，可要求交班人员打扫，直到打扫干净，不可接班；如对方不听可上报有关领导，进行罚款处理。
（2）机头打扫的内容：
○1溜柱筒清理干净，无积煤；○2机头架、机尾架无浮煤，地板无积煤、无积水；○3机头设备、电机、CST无浮煤、油部位擦干净；○5保证机头机尾架托棍不粘煤泥；○6保持机头信号内的卫生，做到室内干净、整洁，物品摆放整齐无浮灰；○7保证机头沙箱、填满、灭火器摆放整齐，消防设备齐全
（3）主井斜巷内水沟畅通，无积肥水、无焊、无淤泥杂物；
（4）机尾处打扫内容：
○1机尾处无杂物、无积煤、水沟保持畅通；○2机尾托棍无粘煤泥、机
尾架、皮带张紧跑车无浮煤；○3张紧跑车轨道清理干净、无积煤、跑车运行自如；○4滚筒及滚筒架周边清理干净，不能齐及浮煤
三、其它运输设备规定：
1、强力皮带托棍严禁出现不转的情况，整部皮带机缺托棍，坏托棍数量不超过9%，并设备专人检查更换托棍；
2、溜子皮带搭接处下方5米以内必须在下皮带加装舒清焊器，搭按对巷道上方10米，下方20米处文明卫生，归溜子使用单位；
3、溜子与皮带搭接处必须有不低于2米的挡焊板，溜子落焊应落到皮带中心，溜子头不得压挡焊板；
4、溜子与皮带搭接转载点要有喷雾、洒水装置，暴露的皮带滚筒要加防护栏；
5、严禁杂物及大块矸石（200）上皮带。
二、检修标准
检修后的设备要符合《煤矿机电设备检修标准》及《煤矿机电设备完好标准》的要求。
三、检修内容
1、普通皮带输送机日常检查与维护内容：
○1输送带的运行是否正常，有无卡、磨、偏等不正常现象，接头是否平直良好；
○2上、下托棍是否齐全，转动是否灵活可靠；
○3输送机各零部件是否齐全，螺栓是否紧固可靠；
○4减速器、联轴器、电动机及滚筒的温度是否正常，有无异响；
○5减速器和液力偶合器是否有泄漏现象，油位是否正常；
○6输送带张紧装置是否处于完好状态；
○7各部位清扫装置是否处于完好状态；
○8检查、试验各项安全保护装置；
○9检查电器设备（包括电缆等）是否完好；
○10保证各旋转倍位的润滑；
○11认真填写检修记录。
2、强力皮带输送机：
○1以上输送机的各项内容（机头、机身、机尾）
○2逆止器运转、润滑是否否正常，有无异常震动及响声；
○3CST系统各部管路有无渗油、泄露、各过滤阀、件定期清理更换；○4CST系统的各项显示数值是否在正常范围；
○5皮带接头处不得鼓泡、碎边、老化现象；
○6机尾张紧车是否掉道，车轮有无损坏，轨道、轨枕、有无变形、错位；
○7机头、机架、机尾各种保护要检查、试验是否完好；
○8有关电器设备、通讯线路是否完好畅通；
○9高强皮带按矿井大型固定设备管理，执行领导干部上岗检查制度，各种纪录齐全完整；
○10高强皮带的托棍有专人修理更换；
○11专人检查电气系统保护，并认真填写记录；
○12凡与高强皮带搭接的溜子机头，皮带机头必须设可靠的沿停开关和
A册施工技术资料汇总及竣工图 A—0 A册目录 A—1工程概况 A—2单位工程竣工核验有关资料 A—2.1施工单位工程质量竣工报告（合格证明书）A—2.2勘察单位工程质量检查报告（合格证明书）A—2.3设计单位工程质量检查报告（合格证明书）A—2.4监理单位工程质量评估报告（合格证明书）A—2.5监理单位工程质量评估报告（详细报告） A—2.6建设工程竣工验质量检和功能试验纪录表 A—2.7建设工程竣工验收报告 A—2.8建设工程竣工验收备案表 A—3基础分部工程核验有关资料 A—3.1分项、分部工程质量验收证明书（基础分部工程）A—3.2基础分部工程质量监理评估报告 A—4主体分部工程核验有关资料 A—4.1分项、分部工程质量验收证明书（主体分部工程）A—4.2主体分部工程质量监理评估报告 A—5结构吊装、桩基分项工程核验有关资料 A—5.1分项、分部工程质量验收证明书（结构吊装工程）A—5.2结构吊装工程质量监理评估报告 A—5.3分项、分部工程质量验收证明书（桩基分项工程）
A—5.4桩基分项工程质量监理评估报告 A—5.5桩基分项工程竣工图 A—6 建筑工程开工、竣工通知 A—7工程地质勘察报告 A—8图纸会审纪录 A—8.1施工图设计文件审查合格证明书 A—8.2图纸会审纪录 A—9技术核定单及设计修改变更通知书 A—9.1技术核定单 A—9.2设计修改变更通知书 A—10建（构）筑物测量放线及复核 A—10.1工程测量定位放线纪录 A—10.2建（构）筑物工程测量复核表 A—11建（构）筑物变形测量资料 A—11.1建（构）筑物沉降观测记录 A—11.2建（构）筑物沉降量分布曲线示意图，压力与沉降发展曲线图A—11.3垂直测量成果表 A—12地基验槽纪录 A—13 隐蔽工程验收纪录 A—13.0隐蔽工程验收纪录汇总表 A—13.1基坑挖土隐蔽工程验收纪录 A—13.2砂垫层隐蔽工程验收纪录
膜片钳技术原理 可兴奋膜的电学模型 细胞膜由脂类双分子层和和蛋白质构成。脂质层的电导很低，由于双分子层的结构特点，形成了细胞的膜电容，通道蛋白的开闭状况主要决定了膜电导的数值。在细胞膜的电学模型中，膜电容和膜电导构成了一个并联回路。在细胞膜的电兴奋过程中，脂质层膜电容的反应是被动的，其电流电压曲线是线性的；而由通道蛋白介导的膜电导构成了膜反应的主动成分，它的电流电压关系是非线性的。 当改变跨膜电位时，膜电容和膜电导分别引发被动和主动电流：Im=Ii＋CdV/dt，其中Im是流过膜的总电流，Ii是通道电流，CdV/dt是由膜电容介导的电容电流。为了考察通道电流就必须消除电容电流的影响，此时可以令dV/dt＝0，即将膜电位钳制在一固定数值，使其不随时间变化，这就是电压钳技术的实质所在。 电压钳技术 离子通道的近代观念源于Hodgkin、Huxley、Katz等人在20世纪30—50年代的开创性研究。在1902年，Bernstein创造性地将Nernst的理论应用到生物膜上，提出了“膜学说”。他认为在静息状态下，细胞膜只对钾离子具有通透性；而当细胞兴奋的瞬间，膜的破裂使其丧失了选择通透性，所有的离子都可以自由通过。Cole等人在1939年进行的高频交变电流测量实验表明，当动作电位被触发时，虽然细胞的膜电导大为增加，但膜电容却只略有下降，这个事实表明膜学说所宣称的膜破裂的观点是不可靠的。1949年Cole在玻璃微电极技术的基础上发明了电压钳位（voltage clamp technique）技术，基本原理如下： 电压钳技术的核心在于将膜电位固定在指令电压的水平，这样才能研究在给定膜电位下膜电流随时间的变化关系。在上图中，膜电位Vm由高输入阻抗的电压跟随器所测量。钳制放大器在比较了膜电位和指令电位E之后，通过电阻Ra将电流注入膜内以控制膜电位。钳制放大器的输出：Vo=A（E－Vm），因为这个输出由电阻Ra和膜所分压，所以输出电流：I=（Vo－Vm）/Ra。由这两个关系可推出：Vm=EA/(1+A)-RaI/（1+A）。因此若钳制放大器的增益A极大，膜电位Vm和指令电位E之间的差别就可以忽略，即实现了电压钳制。 Hodgkin、Huxley和Katz应用电压钳技术研究枪乌贼巨轴突，结合同位素示踪和胞内灌流等技术发现：动作电位的初期，细胞膜主要对钠离子的通透性发生改变，胞外的钠离子迅速内流，并产生所谓的“超射”现象（overshoot）；随后对钠的通透性的急剧减少并且对钾离子的通透性增加。兴奋期的膜电位存在“超射”现象也是膜学说所不能解释的。 根据这些实验，Hodgkin、Huxley和Katz在其1949—1952年的一系列论文中提出了“离子学说”或“钠学说”。认为当膜的去极化超过一个临界值时，就会触发动作电位的产生。在此期间，钠电导迅速上升，钠离子大量内流，使得膜电位接近钠的平衡电位；随后钠电导迅速失活，钾电导逐渐增加，引起膜电位的复极化。 Hodgkin和Huxley通过对电压钳位实验数据的分析，给出了所谓的Hodgkin—Huxley方程。他们将膜电位钳制在不同的水平，观察钾电导或钠电导随时间的变化，然后用一个常微分方程去逼近所得到的实验曲线，而这些微分方程中的参数则假定跟离子通道上的“粒子”相关。根据H—H方程，能够推导出动作电位的阈值、形状、幅度等性质。并且在去除电压钳制的条件下，可以得到一个以电压和时间为变量的偏微分方程，由它可以给出和真实状况相符合的神经冲动的传导。 膜噪声和噪声分析 Katz等人在1970年代初期研究了蛙神经肌肉接头处肌纤维膜电位的波动。他们根据对这种膜电位“噪声”的分析，提出了量子释放的概念，认为神经递质是以囊泡的形式从突触前膜释放到突触间隙中。并且Katz等人借助这种新的“噪声分析”方法（fluctuation analysis），能从突触后膜电位的“噪声”中推测出单位事件的幅度和时程。Anderson、Stevens、Colquhoun和Sigworth等人进一步发展了“噪声分析”。 “噪声分析”的实质在于二项分布期望和方差之间的关系。假定通道只有开和关两个状态，并且各个通道的开关是独立的。若N是通道的总数，p是通道的开放概率，i是单通道电流，I是膜电流的期望值。则有：I=Npi，var(I)=Np(1-p)i2,即：var(I)=iI-I2/N。用var(I)对I作图，这显然是一个开口朝下的抛物线。微分这个二次方程得到曲线的斜率：dvar(I)/dI=i-2I/N,当I=0时的斜率就是单通道电流，根据钳制电位和反转电位之间的差就可以算出单通道电导；在抛物线的顶点即当：dvar(I)/dI=0时，I=Ni/2，由此可算出
离子通道研究技术的最新进展———全自动膜片钳技术 曹小于1 郑婉云2 鲁燕滨3 黄 超1 (1.达科为生物技术有限公司 深圳 518054) (2.厦门大学生命科学学院分子细胞神经科学实验室 厦门 361005) (3.南京善康医药科技发展公司 南京 210013) 摘 要 全自动膜片钳技术是离子通道检测技术的最新进展,它具有直接性、高信息量及高精确性的特点。近来在多个方面作出新的突破,如高的实验通量表现,较高的自动化程度、良好的封接质量、微量加样等。目前,该技术在以离子通道为靶标的药物研发,药物毒理测试以及虚拟药筛等方面有广阔的应用前景。本文对全自动膜片钳仪器的原理和技术细节作全面介绍。 关键词 全自动膜片钳 高通量药筛 hERG检测 虚拟筛选 引言 细胞是通过细胞膜与外界隔离的,在细胞膜上有很多种离子通道,细胞通过这些通道与外界进行离子交换。离子通道在许多细胞活动中都起关键作用,它是生物电活动的基础,在细胞内和细胞间信号传递中起着重要作用。随着基因组测序工作的完成,更多的离子通道基因被鉴定出来,离子通道基因约占1.5%,至少有400个基因编码离子通道。相应的由于离子通道功能改变所引起的中枢及外周疾病也越来越受到重视。以离子通道作为靶标的药物现占总靶标的5%,而潜在的离子通道靶标药物将占总靶标的25%,因此开发离子通道为靶标的药物将具有广阔的市场前景。已知与离子通道有关的疾病主要有:癫痫(ep ilep sy)、心律失常(Cardiac ar2 rhyth m ia)、糖尿病(diabetes)、高血压(hyperten2 si on)、舞蹈症(Huntingt on’s disease)、帕金森症(Par2 kins on’s disease)……。 离子通道的实验研究最初主要来源于生理学实验。1949～1952年,Hodgkin等发展的“电压钳技术”为离子通透性的研究提供技术条件。60年代中期,一些特异性通道抑制剂的发现为离子通道的研究提供有力武器。1976年Neher和Sak mann发展的膜片钳技术直接记录离子单通道电流,为从分子水平上研究离子通道提供直接手段。80年代中期,生化技术的进步,分子生物学以及基因重组技术的发展,使人们能够分离纯化许多不同的通道蛋白,直接研究离子通道的结构与功能关系(见表1)。 表1 传统膜片钳技术主要优缺点总结 优 点缺 点 A高信息量:能改变细胞膜电位,单细胞记录A需要受过良好训练的电生理学专家 B高灵敏性:能记录到pA级电流变化和单通道B通量很低,一天的实验数据量不超过10 开关状态C劳动力投入密集,试验操作过程复杂 C灵活性好:可以控制改变细胞膜内外的溶液成分D不适合药物粗筛/二次筛选 D应用范围广:可以分析检测所有的离子通道类型E技术自动化非常困难,且不能进行平行检测E相对于荧光标记和放射性标记等手段具有更高权 威性和精确性〔1〕 1 多款全自动膜片钳系统分析 1.1 技术实现原理 Nani on公司的PatchL iner NPCκ216,Molecular Devices公司的I on works HT和PatchXp ress7000A 全部采用的是平板微阵列技术。其技术特点如下:在平板电极上打磨或者使用金属离子轰击成孔,每孔都是大小均一的直径约1～2μm的小孔,每个小孔下面有电极连接到放大器,可对实验过程中的电流变化进行记录。将细胞悬浮液加载到平板玻璃孔上,通过调节压力和吸力,一个细胞便可以自动定位在小孔上(相当于微管电极的尖端),自动进行封接,自动判断封接并进一步施加负压破膜以进行全细胞模式实验〔4,5〕。
膜片钳的发展和应用 1．背景 细胞是生物的基本组成单元，细胞外围有一层薄膜，彼此分离又互相联系，细胞间与细胞内的通信、信号传递依靠其膜上的离子通道来进行，离子和离子通道是细胞兴奋性的基础，亦是产生生物电的基础。生物电信号通常是用电学或电子学的方法进行测量。早期多采用双电极电压钳技术作胞内记录，近年来逐渐被膜片钳所取代，这项技术为从细胞和分子水平了解生物膜离子单通道“开启”和“关闭”的门控动力学及各种不同离子通道的通透性和选择性等膜信息提供了最直接的手段。 膜片钳记录(patch clamp recording)是利用玻璃微电极吸引封接面积仅为几个um2的细胞膜片，在10-12A水平，记录单个或几个通道的离子电流，已达到当今电子测量的极限。此技术广泛用于细胞膜离子通道电流的测量和细胞分泌、药理学、病理生理学、神经科学、脑科学、植物细胞的生殖生理等领域的研究。从而点燃了细胞和分子水平的生理学研究的生命之火，并取得了丰硕的成果。 2．膜片钳技术简介 2.1 基本原理和记录方法 电压钳(V oltage-clamp)是由英国学者Huxley和Katz最先应用的[1]。其实质是通过负反馈微电流放大器在兴奋性细胞膜上外加电流，保持细胞跨膜电位不变，并迅速控制其数值，以观察在不同膜电位条件下膜电流的情况。膜电流的改变反映了膜电阻和膜电容的变化，因此电压钳可用来研究整个细胞膜或一大块细胞膜上所有离子通道的活动，但该技术由于在细胞内插人两根电扳，对细胞损伤很大，在小细胞中难以实现，又因细胞形态复杂，很难保持细胞膜各处生物特性的一致，而逐渐被膜片钳所取代。 膜片钳技术(patch-clamp)是在电压钳基础上发展起来一种新技术，与电压钳的主要区别有二：一是钳制膜电位的方法不同；二是电位固定的细胞膜面积不同，即所研究的离子通道数目不同。与电压钳一样，膜片钳也是利用负反馈电子线路，将微电板尖端所吸附的一个至几个平方微米的细胞膜电位固定在一定水平，观察流过通道的离子电流。其实现膜电位固定的关键是在玻璃微电极尖端边缘与细胞膜之间形成高阻封接，使电极尖开口处与相接的细胞膜小区域(膜片)形成无论是从机械上还是电学上都极为紧密地封接，从而可反映细胞上单一(或多数)离子通道的分子活动[2]。1976年，德国科学家Neher和Sakmann首先用此技术对蛙胸皮肌细胞膜上的己酰胆碱受体通道进行了研究，记录出了量值在皮安级(10-12 A)的微弱电流[3,4]。1981年，经Hamill等[5]后人的进一步完善，其电流测量灵敏度已达1pA，时间和空间分辨率达10 us和1 um。 随着膜片钳技术的出现，目前有几种不同的记录方式： (1)细胞吸附式(cell-attached patch)将两次拉制后，经热抛光的微管电极置于清洁的细胞膜表面, 形成高阻封接，在细胞膜表面隔离出一小片膜，即通过微管电极对膜片进行电压钳制，从而测量膜电流。 (2)内面向外模式(inside-out patch)高阻封接形成后，将微管电极轻轻提起，使其与细胞分离，电极端形成密封小泡，在空气中短暂暴露几秒钟后，小泡破裂再回到溶液中，使小泡的外半部分破裂即得。
膜片钳使用规则 一、工作原理： 1.膜片钳是一种可以直接观察单一的离子通道蛋白质分子对相应离子通透难易程度等特性的一种实验技术。其基本原理是用一个尖端光洁，直径约为0.5~3um 的玻璃微电极同神经或肌细胞的膜接触而不刺入，然后在微电极另一端开口处施加适当的负压，将与电极尖端接触的那一小片膜轻度吸入电极尖端的纤细开口，这样在这一小片膜周边与微电极开口处的玻璃边沿之间，会形成紧密的封接，其电阻可达数个或数十个千兆欧，这实际上把吸附在微电极尖端开口处的那一片膜同其余部分的膜在化学上完全隔离出来，由微电极记录到的电流变化只同该膜片中通道分子的功能状态有关。如果在这一小片膜中只包含了一个或少数几个通道蛋白分子，那么通过微电极测量出的电流，就是某种带电离子经由开放的单一通道蛋白质分子进行跨膜移动的结果。 二、操作步骤： 1.打开总电源。 2.依次打开电脑、显微镜、监视器、微操、放大器。 3.打开PULSE软件，在E盘建立自己的文件夹。 4.灌注玻璃电极并排空气体。 5.装上玻璃电极，浸入液面并调至视野范围。 6.点击set-up，将增益调为0.5，点Auto，记录电极电阻。
7.封接细胞，若上G，提起或吸破细胞。 8.依次点击on-cell，whole-cell补偿。 9.选定In-out或whole-cell模式进行实验。 10.用毕请关闭仪器，并切断总电源。 三、注意事项： 1.每天做实验前请用清水拖地，以防尘埃、静电伤害机器。 2.拉制仪使用前需预热15-30min。 3.银丝电极及地线发白时，请先用砂纸轻微打磨，再浸入新鲜的次 氯酸钠溶液镀氯化银，如果银丝电极30min未变黑，则考虑更换 次氯酸钠。 4.先开放大器，后开软件；先关软件，后关放大器。 5.非必须用到汞灯时请不要打开汞灯电源，打开后至少需1个小时 才可关闭。 6.在放大器打开时绝对不能用手、金属物品或其它导电的物品接触 电极丝（包括地线），在取放细胞片时请关闭放大器。 7.向玻璃微电极灌注内液时切勿灌太多（1cm左右为适），以防液 体进入银丝底部增加噪声。 8.安装玻璃微电极时，电极应与银丝平行，防止刮蹭银丝电极。 9.玻璃微电极需先用甲醇浸泡，再用酒精灯微烧两端，使其平滑。 10.换液时应时刻观察浴槽，防止液面过低或液体溢出污染镜头，最 适液面为微高于出液口。
膜片钳记录和分析技术 2010-12-15 16:41 来源：美国分子仪器点击次数：2186 关键词：膜片钳细胞信号 分享到： ?收藏夹 ?腾讯微博 ?新浪微博 ?开心网 细胞是动物和人体的基本组成单元，细胞与细胞内的通信,是依靠其膜上的离子通道进行的，离子和离子通道是细胞兴奋的基础，亦即产生生物电信号的基础，生物电信号通常用电学或电子学方法进行测量。由此形成了一门细胞学科-电生理学（electrophysiology），即是用电生理的方法来记录和分析细胞产生电的大小和规律的科学。 早期的研究多使用双电极电压钳技术作细胞内电活动的记录。现代膜片钳技术是在电压钳技术的基础上发展起来的。 1976年德国马普生物物理研究所Neher和Sakmann创建了膜片钳技术（patch clamp recording technique）。这是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜单一的（或多个的离子通道分子活动的技术）。以后由于吉欧姆阻抗封接(gigaohm seal, 109W)方法的确立和几种方法的创建。这种技术点燃了细胞和分子水平的生理学研究的革命之火，它和基因克隆技术（gene cloning）并架齐驱，给生命科学研究带来了巨大的前进动力。 这一伟大的贡献，使Neher和Sakmann获得1991年度的诺贝尔生理学与医学奖。 一、膜片钳技术发展历史 1976年德国马普生物物理化学研究所Neher和Sakmann首次在青蛙肌细胞上用双电极钳制膜电位
的同时，记录到ACh激活的单通道离子电流，从而产生了膜片钳技术。 1980年Sigworth等在记录电极内施加5-50 cmH2O的负压吸引，得到10-100GW10-100G?的高阻封接（Giga-seal），大大降低了记录时的噪声实现了单根电极既钳制膜片电位又记录单通道电流的突破。 1981年Hamill和Neher等对该技术进行了改进，引进了膜片游离技术和全细胞记录技术，从而使该技术更趋完善，具有1pA的电流灵敏度、1μm的空间分辨率和10μs的时间分辨率。 1983年10月，《Single-Channel Recording》一书问世，奠定了膜片钳技术的里程碑。Sakmann 和Neher也因其杰出的工作和突出贡献，荣获1991年诺贝尔医学和生理学奖。 二、膜片钳技术原理 膜片钳技术是用玻璃微电极吸管把只含1-3个离子通道、面积为几个平方微米的细胞膜通过负压吸引封接起来（见下图），由于电极尖端与细胞膜的高阻封接，在电极尖端笼罩下的那片膜事实上与膜的其他部分从电学上隔离，因此，此片膜内开放所产生的电流流进玻璃吸管，用一个极为敏感的电流监视器（膜片钳放大器）测量此电流强度，就代表单一离子通道电流。 膜片钳技术的建立，对生物学科学特别是神经科学是一资有重大意义的变革。这是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜单一的（或多个的离子通道分子活动的技术。些技术的出现自然将细胞水平和分子水平的生理学研究联系在一起，同时又将神经科学的不同分野必然地融汇在一起，改变了既往各个分野互不联系、互不渗透，阻碍人们全面认识能力的弊端。
以色列技术创新成果资料汇编 新材料行业 特拉维夫大学 希伯来大学
目录 一、特拉维夫大学 (1) 1.3-2015-907 | 抗污薄膜，抗污材料 (1) 2.11-2012-336 | 薄膜透明导电纳米线的显示面板 (2) 3.11-2007-122 | 钴钨磷无电沉积工艺和材料 (3) 4.11-2007-121 | 薄铜钼层为ULSI中应用化学沉积 (4) 5.3-2011-144 | 牙科应用多肽纳米结构抗菌复合树脂充填 (6) 6.11-2013-522 | 蓝宝石高温超导线材 (8) 7.3-2013-469 | 固体气体产生灭火系统高能有机化工原料 (9) 8.11-2012-333 | 从水母制成的生物塑料和水凝胶 (10) 9.2-2007-14 | 自组装肽水凝胶 (12) 10.6-2015-911 | 金属合金纳米泡沫作为在天然气合成油的甲烷干法重整的催化剂 (14) 11.3-2011-149 | 用肽纳米管加强环境传感器和生物传感器的耐久度、敏感度和选择度 (14) 12.11-2013-448 | 铋纳米线 (15) 13.3-2009-27 | “智能”肽纳米纺织品 (17) 14.3-2011-145 | 纳米增强粘合剂、塑料、油漆和涂料 (18) 15.3-2009-26 | 采用纳米压印光刻产品认证（NIL） (19) 16.3-2013-469 | 用于固态产气灭火系统的活性有机材料 (21) 17.3-2012-389 | 铼纳米结构和电沉积 (23) 18.6-2013-468 | 基于多孔硅的光学水中杂质探测 (25) 19.7-2013-442 | 微机电系统（MEMS）传感器和执行器 (27) 20.6-2012-372 | 用于石油挖掘的多孔介质表征 (29) 二、希伯来大学 (31) 1.8-2012-2708 | 将蜘蛛丝蛋白转化为纤维 (31) 2.6-2006-40 | 加强粘性的生物相容黏合剂 (31) 3.9-2010-2490 | 提高导电涂料和光电纳米涂料的生产效率 (32) 4.14-2008-2154 | 层级表面形态的纳米棒 (33) 5.16-2009-2287 | 纳米级鸟笼结构催化剂 (34) 6.9-2013-2904 | 可调节/可固定的混合纳米晶/纳米碳管印刷传感器 (35) 7.9-2013-2893 | 应用于3D印刷传导结构的油墨和加工过程 (36) 8.9-2012-2870 | 效率高，成本低的钙钛矿太阳能电池 (37) 9.9-2012-2868 | 使用弱性石墨金属硫化物复合材料于锂离子电池的制造过程 (38) 10.9-2006-1065 | 设计和制造光化学传感器的新型途径 (39) 11.15-2012-2780 | 通过分子层沉积形成自清洁光滑的表面 (39) 12.14-2013-2965 | 使用闪烁材料进行3D打印 (41) 13.15-2014-3073 | 新型海洋防污手段 (42) 14.9-2010-2423 | 接触型和遥感型新型聚合物凝胶 (43) 15.16-2006-103 | 纳米金的电气连接 (44) 16.6-2006-762 | 与活细胞通讯的电子装置（脑黄金） (44) 17.16-2011-2602 | 重掺半导体的纳米晶体量子点 (45) 18.9-2011-2588 | 融合自我组装材料进入微电子织造过程 (46) 19.9-2011-2608 | 纳米结构和纳米表面的新型掺杂方法 (47) 20.9-2008-2090 | 高敏感度的爆炸物传感器 (48)
膜片钳技术在药学研究中的应用 前言 德国物理学家Neher和Sakmann[1.2]建立的膜片钳技术（patch clamp technique）是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞上单一的（或多数的）离子通道活动的技术，已被广泛应用。作为先进的细胞电生理技术，它一直被奉为研究离子通道的“金标准”。应用膜片钳技术可以证实细胞膜上离子通道的存在，并能对其电生理特性、分子结构、药物作用机制等进行深入的研究。基因组学、蛋白质组学研究表明，以离子通道为靶标的药物研究在未来具有很大的发展空间。 关键词膜片钳技术；药学研究；应用 Abstract [ ]The patch-clamp technique , a dominant technique in cellular electrophysiology , is always being regarded as the gold standard for ion channel research.. Application of the patch-clamp technique can demonstrate the existences of ion channels and provide valuable information for ion channels, including their electrophysiological properties , molecular structures and the mechanism of drug action .Genomics and proteomics research has showed that the development of drugs for ion channel target would be very promising in future. Key words Patch-clamp technique ; Study on Medicinal chemistry ; Application 80年代初发展起来的膜片钳技术（patch clamp technique）为了解生物膜离子单通道的门控动力学特征及通透性、选择性膜信息提供了最直接的手段，该技术的兴起与应用，使人们不仅对生物体的电现象和其它生物现象有更进一步的了解，而且基因组学、蛋白质组学研究表明，以离子通道为靶标的药物研究在未来具有很大的发展空间。为了突破由于筛选技术所造成的对离子通道为靶标的药物开发的瓶颈，近年来，对膜片钳技术进行了改进以适合药物高通量筛选的要求，由此产生了一些技术。 一、膜片钳技术原理及特点
膜片钳技术原理与基本操作 1976 年Neher 和Sakmann 建立了膜片钳技术（Patch clamp technique），这是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜上单一的或多数的离子通道分子活动的技术。1981 年Hamill, Neher 等人又对膜片钳实验方法和电子线路进行了改进，形成了当今广泛应用的膜片钳实验技术。该技术可应用于许多细胞系的研究，也是目前唯一可记录一个蛋白分子电活动的方法，膜片钳技术和克隆技术并驾齐驱给生命科学研究带来了巨大的前进动力，这一伟大的贡献，使Neher 和Sakmann 获得1991 年诺贝尔医学与生理学奖。 一、膜片钳技术的基本原理 用一个尖端直径在1.5~3.0μm 的玻璃微电极接触细胞膜表面，通过负压吸引使电极尖端与细胞膜之间形成千兆欧姆以上的阻抗封接，此时电极尖端下的细胞膜小区域（膜片，patch）与其周围在电学上分隔，在此基础上固定（钳制，Clamp）电位，对此膜片上的离子通道的离子电流进行监测及记录。 基本的仪器设备有膜片钳放大器、计算机、倒置显微镜、示波器、双步电极拉制器、三轴液压显微操纵器、屏蔽防震实验台、恒温标本灌流槽、玻璃微电极研磨器。膜片钳放大器是离子单通道测定和全细胞记录的关键设备，具有高灵敏度、高增益、低噪音及高输入阻抗。膜片钳放大器是通过单根电极对细胞或膜片进行钳制的同时记录离子流经通道所产生的电流。膜片钳放大器的核心部分是以运算放大器和反馈电阻构成的电流-电压（I-V）转换器，运算放大器作为电压控制器自动控制，使钳制电位稳定在一定的水平上。 二、操作步骤 1.膜片钳微电极制作 (1) 玻璃毛细管的选择：有二种玻璃类型，一是软质的苏打玻璃，另一是硬质的硼硅酸盐玻璃。软质玻璃在拉制和抛光成弹头形尖端时锥度陡直，可降低电极的串联电阻，对膜片钳的全细胞记录模式很有利；硬质玻璃的噪声低，在单通道记录时多选用。玻璃毛细管的直径应符合电极支架的规格，一般外部直径在 1.1~1.2mm。内径1mm。 (2) 电极的拉制：分二步拉制。第一部是使玻璃管中间拉长成一窄细状，第二次拉制窄细部位断成二根，其尖端直径一般在1~5μm，充入电极内液后电极电阻在1~5MΩ为宜。调节第一步和第二步拉制时加热线圈的电流强度，即可得到所需要的电极尖端直径。电极必须保持干净，应现用现拉制。 (3) 涂硅酮树酯：记录单通道电流时，为了克服热噪声、封接阻抗噪声及电极浸入溶液产生的浮游电容性噪声，需要在电极尖颈部（距离微电极尖端50mm）的表面薄薄地涂一层硅酮树酯（sylgard），它具有疏水性、与玻璃交融密切、非导
特种设备安全技术资料汇编 特种设备安全生产目标管理责任书 关于明确特种设备安全管理机构及任命特种设备安全管理人员（专/兼职）的通知特种设备安全生产责任制度 特种设备维护、保养管理制度 特种设备文件和记录管理制度 特种设备应急措施及救援制度 特种设备定期自查及隐患整改制度 特种设备定期检验申报制度 特种设备作业人员安全教育、培训制度 特种设备安全生产会议制度 特种设备事故处理制度 特种设备安全会议记录 特种设备安全自行检查记录 特种设备作业人员培训记录 特种设备停用、报废（拆除）报告 特种设备定期检验申报单 特种设备延期检验申请表 特种设备台帐 锅炉安全运行记录
前言 为贯彻《特种设备安全监察条例》，针对使用单位存在特种设备安全管理规章制度和相关记录不完善的薄弱环节，提高特种设备使用单位安全管理水平，我们引用了特种设备安全管理先进单位的管理资料，组织有关人员编印了《特种设备安全管理规章制度及相关表卡汇编》，旨在帮助特种设备使用单位更好地履行主体责任，建立各项安全规章制度，完善有关特种设备使用过程表单和记录，健全特种设备安全技术档案。 本《汇编》有关内容，虽引用了特种设备安全管理先进单位的管理资料，但考虑到特种设备使用单位管理情况的复杂性，有些内容不一定适合使用单位，各单位在参照《汇编》有关内容时，应结合本单位实际，制定出适合的，可操作的各项安全管理规章制度及相关表卡。《汇编》仅供参考、借鉴，内容若有错误，以国家现行法规、规章、技术规范和有关规范文件为准。 编者 XXXX年X月
特种设备安全生产目标管理责任书 为了进一步加强本公司的安全生产工作，落实安全生产责任，有效的控制各类伤亡事故，依据《特种设备安全监察条例》、现向本公司有关部门、生产车间下达以下安全目标管理责任书： 一、安全生产控制指标. 年，各部门、生产车间不得发生伤亡人员事故。 二、安全生产管理目标. (一)公司成立安全生产工作领导小组，由担任组长，配备专职、兼职安全管理人员。 (二)对特种设备至少每月进行一次自行检查，并作出记录，对发现的问题及时采取措施整改。 (三)建立特种设备安全技术档案。新安装的特种设备必须办理使用登记手续。 (四)提前一个月向特种设备检验机构提交书面特种设备定期检验申请，不使用未经定期检验或者检验不合格的特种设备。 (五)建立健全特种设备生产使用管理的各项规章制度，并做好各项记录。 (六)制定特种设备事故应急措施和救援预案。 (七)加强特种设备的作业人员及相关管理人员的安全知识教育和培训，必须持质量技术监督局统一格式的特种作业人员证书，方可从事相应的作业或者管理工作。 (八)按照国家和自治区有关规定，及时、准确上报各类事故，不得延报、漏报、隐瞒不报。 三、各部门、生产车间必须认真按照责任书要求严格管理，保证特种设备安全运行。抓好安全生产工作。 责任部门（车间）：公司：（公章） 负责人：总经理： 年月日年月日
膜片钳技术SOP 关键词：膜片钳 目的： 研究膜片上几个甚至一个离子通道的电流，对单个离子通道在各种电位状态及每种电位状态下对产生电流的离子作出定性、定量的分析，来反映细胞膜上离子通道活动，为研究离子通道结构与功能关系提供关于生物电特性的新资料。基本原理： 膜片钳制技术（patch clamp technique)是对一块单独的细胞膜片（或整个细胞）的电位进行钳制的一项电生理技术。 通过对膜电位的钳制可以观察通过离子通道的电流，膜片钳放大器正是通过维持电压的恒定而测出这种电流。运用膜片钳技术记到的最小电流可达到pA级(10-12 A)。膜片钳的本质属于电压钳范畴，其基本工作原理是：采用经典的负反馈放大技术作电压固定，但改用细胞外微吸管作电极，将微电极管尖端与细胞膜表面接触，经负压抽吸，形成具极高阻抗的紧密封接，其电阻值高达10-100千欧（即GΩ=109Ω）。只有在这种封接存在时，通过膜电极引导记录的电流才是通过该膜的离子通道电流。 膜片钳技术原理示意图 Rs是膜片阻抗相串联的局部串联电阻（输入阻抗），Rseal是封接阻抗。Rs通常为1～5MΩ，如果Rseal高达10GΩ（1010Ω）以上时，IP/I=Rseal/(Rs+ Rseal)-1。此Ip可为在I－V转换器（点线）内的高阻抗负反馈电阻(Rf)的电压降而被检测出。
药品和试剂： 根据不同的实验设计选择不同的药品和试剂。 主要仪器设备与材料： ①屏蔽防震实验台(TMC 63-544) ②数字式超级恒渐浴槽（HSS-1 CHENDU INSTRUMENT China） ③微管电极拉制器（PP-83 NARISHIGE Japan） ④微管电极抛光仪（ME-83 NAEISHIFE Japan） ⑤电子刺激器（SEN-2030, NIHON KOHDEN, Japan） ⑥膜片钳放大器（AXOPATCH 200B Axon Instruments U.S.A） ⑦倒置相差显微镜（AXIOVERT 135 ZEISS Germany） ⑧计算机（PⅢ 800） ⑨A/D、D/A转换器（DIGIDATA-1200 Axon Instruments U.S.A） ⑩pClamp软件（10.0）Axon Instruments U.S.A ) 实验对象： 兔、大鼠、猪、和人的组织细胞（直径小于30μm的细胞），都可用于膜片钳实验。动物由泸州医学院（许可证号：SYXK（川）2008-063）提供；人体组织来源于临床手术丢弃物。本SOP以猪冠状动脉平滑肌细胞为例，选取体重约120～150 Kg的猪，雌雄不拘，猪心脏购自泸州市屠宰场。 实验环境： 常温（22o C）下进行, 湿度（70-80%） 操作步骤： 1.液体配制 主要根据研究通道的不同，所用细胞的不同，配制相应的液体，可参考相应的文献进行调整。包括：电极液；细胞外液等。基本原则是保持2个平衡，渗透压平衡和酸碱平衡。另外，所有液体在使用前必须过滤，以保持液体洁净。（详见细胞的分离与培养SOP：L Y-XJD-SYJS-014/015） 2.标本制备 膜片钳实验一般是在单个细胞上进行。实验用单细胞主要来自培养细胞或急性酶分离的细胞，也可来自脑片细胞中的原位细胞。常用的酶是胶原酶和蛋白酶，
网络基础知识及移动通信技术材料汇编 胥正川编印 上海 2009年1月18日
目录 https://www.doczj.com/doc/f33617016.html,munications of the ACM, Special Issue: Emerging technologies for homeland security, Vol. 47, Issue 3, 2004 Saydjari, O.S. Cyber defense: art to science, pp. 52 - 57 Bajcsy, R. etc, Cyber defense technology networking and evaluation, pp. 58 - 61 II.Choi, Y.B., etc (2006) ‘Corporate wireless LAN security: threats and an effective security assessment framework for wireless information assurance’, Int. J. Mobile Communications, Vol. 4, No. 3, pp.266–290. III.Kumar, S. (2004) ‘Mobile communications: global trends in the 21st century’, Int. J. Mobile Communication, Vol. 2, No. 1, pp.67–86. IV.Varshney, U., Malloy, A., Ahluwalia, P. and Jain, R. (2004) ‘Wireless in the enterprise: requirements, sol utions and research directions’, Int. J. Mobile Communications, Vol. 2, No. 4, pp. 354–367. V.Lim, B. and Zheng, H. (2004) ‘A day in the life of Jini: a peek at service-oriented architecture for internet appliances’,Int. J. Mobile Communication, Vol. 2, No. 2, pp.199–216. VI.Pietro, R.D. and Mancini, L.V. (2003) Security and privacy issues of handheld and wearable wireless devices, Communications of the ACM, Vol 46, No. 9. VII.Wei, J., Liu, L.C. and Koong, K.S. (2006) ‘An onion ring
一.模管员作业规范 1.模治具开发申请 新开模具由业务开出联络书(提供样品),转交工程,再由工程申请开模,因生产需求,需增开模具由生技写出报告申请开模. 2. 订单作业,跟催 申请单经张总核准后.由模具申请单位联络供应商,提供样品,并从供应商处追回报价单,连同申请单一并交与采购,采购依报价单与供应商联络谈好价格后下订单.订单完成后,交一份订单与申请单位,由申请单位依订购单跟崔模具到位. 3模具的试模确认: 模具到位后,由生技课收取模具.并安排试模填写”模具验收单,”模具”NG”即着送还模具厂修理,’’OK’’则建立履历表,入档管制 二.模具验收作业程序规范. 1.生技课模具管理员将新开或维修后的模具从仓库领出,作初步目视检查以确定 是否有重点缺陷. 2.检查模具结构设计是否合理或符合我司特殊指定要求. 3.检查模具之线档.定位.定位梢,顶针,炮筒等部件是否符合成型作业要求. 4.检查泠冷却系统装置是否符合要求. 5.检查排气系统是否合理. 6.检查射料口开得是否合理.水口料头是否良好,上模是否带插头,合模是否紧密, 模具是否容易安装及拆卸. 7目视检查成型后产品是否有毛边.断胶.气泡,压伤线材及零件等外观不良现象. 8.对照图纸或客户原样.用游标卡尺检查各部分尺寸是否有公差范围内. 9.成型出来的产品与相配外壳组装是否良好.
10.用风磨笔将模具编号打在模板上并记录于<<模具管制一览表>>上. 11.模具验收OK后,及时将验收结果记录于<<模具验收履历表>>上. 三.模具外发/借管制规范. 1.外发/借原因明确:模治具外借时,模管员须写明外发/借原因,是为何而发/借出. 如:因托外加工等,否则不予以发/借出.若无写明原因而发/借出,则视模管员因为不按程序办理记警告以上处罚. 2.外发/借单据.各模治具外发/借时,必须具备相关单据.<<模治具外发/借管 表>><<模治具进出管制表>>.<<模治具(维修)外借管制表>>还有放行条,以上各单据模管员在填表写时必须按表单要求逐项填写准确.<<模治具外发/借管制表>>经本公司单位主管,仓库,工程确认签名,并呈经理或总经理签名后而予以放行,并要求厂商确认签收.模管员必须严格按照以上办理各单据,,缺一不可. 3.如期不回.模治具必须及时跟催回来,各发/借出模具.须按单据归还时间按时归 还,若未及时归还,须注明原因,若未按时跟催回来又未合理处理原因则视为模管员跟催不及时给予处罚. 4.认真确认:模具归还时,模管员须认真确认,若确认无误,则在相关单据上签名. 若确认有问题,须注明责任归属.,以待处理,若有问题而管理员没有查出,而造成损失由模管员负责承担责任. 四.模治具管理规范 1.保养入库.外发/借模治具经确认无误后须及时保养入库,并填写好<<模治具进 出管理表>>. 2.问题处理:对归还有问题之模治具.经明确责任归属后,及时按模治具维修管理 程序处理.
施工技术资料目录汇总 施工技术资料目录汇总作者：佚名时间：2008-3-4 浏览量：A 册施工技术资料汇总及竣工图A—0 A 册目录 A—1 工程概况 A—2 单位工程竣工核验有关资料 A—施工单位工程质量竣工报告（合格证明书） A—勘察单位工程质量检查报告（合格证明书） A—设计单位工程质量检查报告（合格证明书） A—监理单位工程质量评估报告（合格证明书） A—监理单位工程质量评估报告（详细报告） A—建设工程竣工验质量检和功能试验纪录表 A—建设工程竣工验收报告 A—建设工程竣工验收备案表 A—3 基础分部工程核验有关资料 A —分项、分部工程质量验收证明书（基础分部工程）A—基础分部工程质量监理评估报告 A—4 主体分部工程核验有关资料 A—分项、分部工程质量验收证明书（主体分部工程） A—主体分部工程质量监理评估报告 A—5 结构吊装、桩基分项工程核验有关资料
A —分项、分部工程质量验收证明书（结构吊装工程） A—结构吊装工程质量监理评估报告 A —分项、分部工程质量验收证明书（桩基分项工程） A—桩基分项工程质量监理评估报告 A—桩基分项工程竣工图 A—6 建筑工程开工、竣工通知 A—7 工程地质勘察报告 A—8 图纸会审纪录 A —施工图设计文件审查合格证明书 A—图纸会审纪录 A—9 技术核定单及设计修改变更通知书 A —技术核定单 A —设计修改变更通知书 A—10 建（构）筑物测量放线及复核 A —工程测量定位放线纪录 A—建（构）筑物工程测量复核表 A—11 建（构）筑物变形测量资料 A—建（构）筑物沉降观测记录 A—建（构）筑物沉降量分布曲线示意图，压力与沉降发展曲线图 A—垂直测量成果表
全自动膜片钳技术及其在药物筛选中的应用 来源：易生物浏览次数：513 网友评论0 条 全自动膜片钳技术及其在药物筛选中的应用一：全自动膜片钳技术介绍：膜片钳技术被称为研究离子通道的“金标准”。是研究离子通道的最重要的技术。目前膜片钳技术已从常规膜片钳技术（Conventional patch clamp technique）发展到全自动膜片钳技术（Automated patch... 关键词：应用药物全自动通道细胞研究 全自动膜片钳技术及其在药物筛选中的应用 一：全自动膜片钳技术介绍： 膜片钳技术被称为研究离子通道的“金标准”。是研究离子通道的最重要的技术。目前膜片钳技术已从常规膜片钳技术（Conventional pat ch clamp technique）发展到全自动膜片钳技术（Automated patch clamp technique）。 传统膜片钳技术每次只能记录一个细胞（或一对细胞），对实验人员来说是一项耗时耗力的工作，它不适合在药物开发初期和中期进行大量化合物的筛选，也不适合需要记录大量细胞的基础实验研究。全自动膜片钳技术的出现在很大程度上解决了这些问题，它不仅通量高，一次能记录几个甚至几十个细胞，而且从找细胞、形成封接、破膜等整个实验操作实现了自动化，免除了这些操作的复杂与困难。这两个优点使得膜片钳技术的工作效率大大提高了！签于全自动膜片钳技术的这些优点，目前已经广泛的用于药物筛选。 传统膜片钳技术主要优缺点总结 全自动膜片钳技术的发展，经历了下列三个发展阶段，在每个阶段，所采取的原理和技术有所不同： 1. Flip-Tip翻转技术： 将一定密度的细胞悬液灌注在玻璃电极中，下降到电极尖端的单个细胞通过在电极外施加负压可以与玻璃电极尖端形成稳定的高阻封接，自动判断封接形成是否良好并自动破膜形成全细胞模式。随后,药物化合物等可以被自动应用到管内进行全细胞模式实验。这种方式形成