专题3 植物组织培养技术
课题2 月季花的组织培养
备课时间：主备人：武爱玲课型：新授课
上课时间：审核：生物组班级：
一、学习目的
1、说明植物组织培养的基本原理；
2、学习并进行植物组织培养的基本技术，
3、理解细胞分化的概念及离体植物细胞的脱分化和再分化。
二、重点和难点
1.教学重点：植物组织培养过程中使用的无菌技术
2.教学难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术
第一课时问题生成课
一、创设情景，导入课题。(2ˊ)
二、自主学习
★基础知识：
1．被子植物的花粉发育
被子植物花粉的发育要经历、和等阶段。花粉是由花粉母细胞经过而形成的，因此花粉是。
2．产生花粉植物的两种途径
通过花药培养产生花粉植株的两种途径：
思考：（1）花药培养产生花粉植株的两种途径的差别主要取决于什么？
（2）什么是体细胞胚？
（3）单倍体性细胞产生的花粉胚，也可发育成为单倍体植株，这和植物的体细胞克隆有区别吗？
3．影响花药培养的因素
诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低，受多种因素影响，其中与
是主要的影响因素；也是提高诱导成功率的重要因素；另外亲本植株的生长条件、以及等对诱导成功率都有一定影响。
思考：（1）为什么选择合适的花粉发育期是诱导花药培养成功率的重要因素？
（2）为什么花药的培养要选择完全未开放的花蕾？
4．实验操作
（1）材料的选取
选择花药时，一般要通过来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。确定花粉发育时期的方法有和。
（2）材料的消毒
材料消毒过程中用的0.1%的氯化汞溶液,实验完毕应如何处理?
（3）接种和培养
剥离花药时，应注意哪些问题？花药培养过程中应注意哪些问题？
【疑难点拨】
1．为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？
花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。
2．植物组织培养技术与花药培养技术有何区别？
相同之处：培养基的配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同。
不同之处：花药培养的选材非常重要，需事先摸索时期适宜的花蕾；花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基；花北培养对培养基配方的要求更为严格。这些都使花药的培养难度加大。
三、评价预习，各组学科长评价，老师评价。
四、共性问题，除上述问题还有什么生成问题。
第二课时问题解决课
花药中的花粉花药中的花粉
丛芽
丛芽
移栽脱分化
脱分化
态度决定成败！
一、引入课题后，呈现自主学习中的问题，及生成的问题。（生成问题板书））
二、小组合作，讨论探究
由学科长组织成员逐个讨论问题，教师巡视并指导讨论。展示交流，多元互动。
1.落实各组展讲任务、并展讲。
2.将展讲过程存在的问题进行多元互动。
三、合作指导、规范评价
四、总结归纳，意义提升。
五、课堂作业: 课后讨论题
六．课后作业：高考调研基础巩固
第三课时课后拓展训练
【高考调研】能力提升
教与学反思
态度决定成败！
《植物组织培养》实验教案 目录 实验一培养基母液及其它药品的制备（3学时） (2) 实验二MS培养基的制备及高压灭菌（3学时） (3) 实验三外植体的灭菌与接种（3学时） (4) 实验四植物愈伤组织诱导培养（2学时） (5) 实验五芽的诱导培养技术（3学时） (6) 实验六根的诱导培养技术 (7)
实验一培养基母液及其它药品的制备（3学时） 一、目的要求 1、通过MS培养基母液的配制，掌握配制培养基母液的基本技能； 2、掌握培养基各种母液的保存方法。 二、仪器与用具 1、仪器：各类天平、磁力搅拌器、冰箱； 2、用具：烧杯、容量瓶、量筒、试剂瓶、标签、玻璃棒、药匙、称量纸、记号笔； 3、试剂：95%酒精，0.5-1mol/LNaOH，0.5-1mol/LHCl，配制MS培养基所需的各种无机物、有机物，蒸馏水。 三、方法步骤 （一）母液的配制 母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍。 优点：（1）保证各物质成分的准确性； （2）便于配制时快速移取； （3）便于低温保藏。 注意配制时，两种成分分别溶解在少量蒸馏水中，其中EDTA盐较难完全溶解，可适
当加热。混合时，先取一种置容量瓶（烧杯）中，然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡，至产生深黄色溶液，最后定容，保存在棕色试剂瓶中。 4、MS有机物母液（100X） 5、生长调节剂 单独配制，浓度为0.1～2 mg/ml。 配制培养基母液时注意事项： ①一些离子易发生沉淀，可先少量水溶解，再按配方顺序依次混合； ②配制母液时用蒸馏水或重蒸馏水； ③药品应用化学纯或分析纯； ④溶解生长素时，可用少量0．5 –1mol/L的NaOH 或95%酒精溶解，溶解分裂素类用0．5 –1mol/L的HCl加热溶解。如再加蒸馏水，易产生白色沉淀，此时可加入热水。（二）母液的保存 1、装瓶：将配制好的母液分别装入试剂瓶中，贴好标签，注明各培养基母液的名称、浓缩倍数、日期。（注意将易分解、氧化者，放入棕色瓶中） 2、贮藏：4℃冰箱。 四、作业 1、写出实验报告。 2、配制培养基母液时应注意哪些事项？ 实验二MS培养基的制备及高压灭菌（3学时） 一、目的要求 掌握MS诱导培养基的配制方法及高压灭菌操作规程。 二、实验原理 植物组织经过脱分化作用，形成愈伤组织，经过再分化作用，愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。早在1957年Skoog即发现培养基中植物激素的类型和它们的比例，对再分化过程起着重要作用。 三、仪器与用具
2019-2020学年高中生物第一章无茵操作技术实践第二节植物 组织培养技术教案苏教版选修1 1．简述植物组织培养的原理和过程。(重难点) 2．了解MS基本培养基贮备液的配制方法。(重点) 3．举例说出使用的激素及其对脱分化、再分化的作用。(难点) 1．植物组织培养 (1)概念：在无菌和人工控制的条件下，诱导离体的植物器官、组织等在适宜的培养条件下发育成完整植株的技术。 (2)原理：植物细胞的全能性，是指植物体的每个体细胞都携带来自受精卵的完整基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。 2．植物组织培养的过程 (1)脱分化：由已经分化的植物细胞或组织产生愈伤组织的过程。 (2)再分化：在一定条件下继续培养脱分化的愈伤组织可以重新诱导根、芽等器官的分化。 [合作探讨] 探讨1：同一株植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因组成一定相同吗？ 提示：不一定相同，如取的是花粉，是通过减数分裂形成的，获得的愈伤组织染色体数是体细胞的一半，所以与体细胞形成的愈伤组织基因组成不同。 探讨2：同微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？ 提示：微生物培养基以有机营养为主。而MS培养基则需提供大量无机营养，主要包括
植物生长必需的大量元素和微量元素两大类。 探讨3：马铃薯长期种植，产量会降低而且易感染病毒，要想提高马铃薯的产量，应该怎样培育无病毒的马铃薯？ 提示：长期进行无性繁殖的植物，只有根尖和茎尖中几乎无病毒，因此可利用马铃薯的茎尖或根尖进行植物组织培养获得无病毒的马铃薯植株。 [思维升华] 1．植物组织培养的过程 离体的植物组织、器官或细胞(外植体)――→脱分化愈伤组织――→再分化 根、芽或胚状体―→新个体。 (1)愈伤组织与根尖分生组织的异同： (1)使用顺序的比较 (2)使用比例的比较
植物组织培养技术论文—月季组织培养技术 系别：生命科学学院 专业：生物技术及应用 姓名：曹胜华 学号：200930771015
[摘要]月季为蔷薇科蔷薇属木本植物, 其花姿优美，花型丰富，花色齐备, 树型易修剪，栽培难度小;其花型大，美丽，幽雅，高贵。月季通常采用扦插、嫁接和压条繁殖，但是一些名贵品种扦插不易生根，主要靠芽接繁殖，而芽接速度慢，因而造成优良品种的月季苗供不应求。 [关键词] 月季组培 随着生物技术的迅猛发展，植物组织培养和细胞培养等现代生物技术得到普遍重视和应用，为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径，在月季的改良上显示了很大的应用潜力。以月季为试材进行组培试验,综述了月季组织培养、快繁的研究技术及进展，并对月季组培的最优条件进行了总结。本研究探索出的月季组培快速繁殖技术，在试管苗单芽诱导丛生苗、利用代用品培养降低组培成本、试管苗管外扦插生根、试管苗微型化长途运输等方面，较前人有所改进。 一.月季组织培养的研究进展 月季是世界栽培种类较多的多年生木本花卉之一。别名长春花、月月红、斗雪红、瘦客等，蔷薇科蔷薇属植物，其花姿优美，花型丰富，花色齐备, 树型易修剪，栽培难度小。其花型大，美丽，幽雅，高贵。在鲜花应用中，月季花的地位和比重与日俱增,是世界上著名的四大切花之一[1]。月季的花色可编制成完美的连续色谱。月季是重要的花卉，世界的销售额多年来稳居各类花)卉的第一或第二。月季的一大优点是分布极广，适应性良好，栽培容易。月季是四季常青花卉，花期长，花色多，芳香馥郁，由于其特殊的情感内涵和商品价值[2]，被广泛应用于园林、庭院装饰，并可制成月季盆景，作切花、花篮、花束等。此外，月季花可提取香料，根、叶、花均可人药，具有活血消肿、消炎解毒等功效。当前，月季育种是花卉育种中最活跃的领域之一。月季通常采用扦插、嫁接和压条繁殖，但是一些名贵品种扦插不易生根，主要靠芽接繁殖，而芽接速度慢，因而造成优良品种的月季苗供不应求[3]。随着生物技术的迅猛发展，植物组织培养和细胞培养等现代生物技术得到普遍重视和应用，为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径，在月季的改良上显示了很大的应用潜力。同时，月季组培和遗传转化系统的建立也是体细胞克隆变异育种和基因工程育种的重要前期工作[4]。 月季原产我国，早在汉代就有历史记载。2 0 0年前，月季植入西方和各国的蔷薇结缘，繁育出成千上万新月季品种，现代月季( 分为茶香月季 HT、聚花月季 F、壮花月季 Gr|、攀缘月季 CI、微型月季 Mi n、以及中国月季 Ch等 9大系。 ) 也随之推广到除热带和寒带外的世界各地。目前世界各地广为栽培的月季，是以中国月季为主要亲本，经以长期杂交育种而选育成功的。月季在观赏植物中的地位是很高的，全世界各国人民都普遍喜爱月季，月季的销售额多年来稳居各类花木的前茅。月季的用途很广( 如用藤本月季布置长廊、拱门；树状月季装饰主干道等)。 国外月季花卉工厂化育苗开展较早，在某些国家和地区已成为获得巨额外汇的支柱产业。我们国家的组织培养技术与国外相比差距不大，但是产业化起步较晚。在加快科学技术转化为生产力的今天，植物组培技术广泛应用于月季花卉的繁殖育种．必将取得巨大的经济效益、社会效益和生态效益。月季生长繁殖速度较慢，应用组织培养技术可大大缩短它的增殖周期，快速繁殖优良品种。在短期内繁殖出数以万计的苗木，这些苗木的遗传特性和表型特性与母株完全相同，完全保持了母株的优良特性。月季花组
月季组织培养技术研究 摘要：以MS为基本培养基，附加不同浓度的细胞分裂素（6-BA）和生长素(NAA)， 以及用不同外植体部位筛选出最适合月季腋芽萌发的培养基和最佳外植体部位。 实验结果表明：诱导侧芽萌发以MS+6-BA2.0mg/L培养基效果最好，外植体部位 以中部枝条发芽率最佳,为80%。 关键词：月季；组织培养；快速繁殖 Abstract: Use MS as basic medium ,with different concentration of cytokinin and auxin,a nd use different part of the stem as explant for tissue culture to select the suitable medium and best explants site for the induction of Rosa chinensis. The results showed that MS +6B A2.0mg / L is the suitable medium for bud germination, and the middle part of the stem ist he best explant. Keywords: Rosa chinensis, tissue culture, rapid propagation 月季（Rosa chinensis）是蔷薇科落叶或半长绿灌木，其花色艳丽、香味浓郁，是世界栽培种类较多的多年生木本花卉之一。由于其分布极广、适应性良好、栽培容易等优点，加之月季四季常青、花期长、花色多等特点，使得在园林和路带绿化以及庭院居室的盆栽美化和切花等方面都得到广泛的应用。月季在观赏植物中具有很高的地位。月季花型大、美丽、幽雅、高贵，深爱各国人民喜爱，月季的销售额多年来稳居各类花木的前茅。被誉为“花中皇后”之美称，深受人们喜爱。 月季通常采用扦插和嫁接繁殖，一些名贵品种扦插不易生根，主要是靠芽接繁殖[1]。而芽接速度慢，因而造成优良品种苗木供不应求。应用组织培养技术可以大大缩短其增殖周期，达到快速繁殖优良品种的目的。近年来随着生物技术的不断发展与更新，用植物组织培养的方法快速繁殖各种花木技术得到了普遍重视和广泛应用，关于月季的离体培养、根诱导及移栽问题，以有了不少报道[1、2、8、9、10]。由于受基因影响，不同品种之间的组织培养特性表现出一定的差异[2]。因此讨论不同品种组培快繁的培养条件，特别是培养基中适宜的不同激素配比仍具有重要价值，另外选择适合接种的外植体不同部位也会影响其发芽率。本实验以月月红月季品种为材料进行了侧芽的诱导和筛选出适合月季组织培养最佳外植体部位的组织培养特性研究，试图找出适合月季品种的组培快繁的最佳激素配比的培养基和最适合培养的外植体部位。 1 材料与方法
月季的植物组织培养综述 摘要： 随着生物技术的迅猛发展，植物组织培养和细胞培养等现代生物技术得到普遍重视和应用，为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径，在月季的改良上显示了很大的应用潜力。以月季为试材进行组培试验,综述了月季组织培养、快繁的研究技术及进展，并对月季组培的最优条件进行了总结。本研究探索出的月季组培快速繁殖技术，在试管苗单芽诱导丛生苗、利用代用品培养降低组培成本、试管苗管外扦插生根、试管苗微型化长途运输等方面，较前人有所改进。 月季为蔷薇科蔷薇属木本植物, 其花姿优美，花型丰富，花色齐备, 树型易修剪，栽培难度小;其花型大，美丽，幽雅，高贵。月季通常采用扦插、嫁接和压条繁殖，但是一些名贵品种扦插不易生根，主要靠芽接繁殖，而芽接速度慢，因而造成优良品种的月季苗供不应求。前言： 为了进行月季组织培养实验，我们查阅了相关文献，从多个方面了解影响月季组织培养的因素，如外植体的取材部位、时间、大小、消毒、接种方式、不同阶段激素的配比、培养基成分、培养条件等，以期在实验中调控月季组培的环境，确保实验顺利进行。同时探究由愈伤组织诱导出芽及生根所需的最佳浓度配比。并在月季组织培养过程中，掌握外植体消毒方面要注意的事项，整个培养过程中培养条件的选取与控制，同时探究由愈伤组织诱导出芽及生根所需的最佳浓度配比。并在月季组织培养过程中，掌握外植体消毒方面要注意的事项，整个培养过程中培养条件的选取与控制，实验过程中出现的现象的观察记录以及分析，在这个过程中不断加强理论与实践的联系，深化对理论知识的理解。察记录以及分析，在这个过程中不断加强理论与实践的联系，深化对理论知识的理解。 关键词：月季、MS培养基、激素等。 综述： 培养基 基本培养基 众多培养基中以MS 培养基的效果为最好，广泛用于月季的离体快速繁殖中。对MS 培养基的成分及物理性能进行合理的选择会提高月季组织培养的成功率。 诱导培养基以MS为基本培养基，附加适量的细胞分裂素 6 一苄氨基嘌呤( 6 - BA) 和生长素萘乙 D 6 7 B 0 2) 酸 ( NAA) 。 激素 不同激素对诱导愈伤组织的影响诱导培养基以ＭＳ为基本培养基，附加适量的细胞分裂素和生长素。生长素增加至0.1mg/L时，细胞分裂素浓度的高与低已对增殖系数不产生明显影响。最适的侧芽诱导培养基为MS+细胞分裂素0.5-3.0mg/L和生长素0.01-1.00mg/L，且培养基中添加蔗糖有增加丛生芽数量的作用。 不同生长素种类和浓度对月季生根和移栽成活率的影响。用NAA 诱导生根和提高移栽成活率效果最好，浓度为100ppm 为宜，现在IAA 诱导生根和高移栽成活率效果并不理想，其浓度只能在1mg/L 以下,超过时对生根的促进作用已不显著,反而大幅度降低移栽成活率。NAA 和IBA对月季的诱导生根都有较好的效果,在1/2MS培养基附加NAA或IBA0.1-1.5mg/kg均可诱导不定根的产生,生根63.3%-93.3%。 糖浓度的影响 不同类型的月季，其组培需求的碳源和糖浓度有所不同。月季组培最常用的碳源是蔗糖，在丰花月季的组织培养中，初代培养的蔗糖含量为5%，继代培养的蔗糖含量为3%时培养效果
植物组织培养教学设计集团标准化工作小组 #Q8QGGQT-GX8G08Q8-GNQGJ8-MHHGN#
课题1 菊花的组织培养 ★课题目标 （一）知识与技能 1、熟悉植物组织培养的基本过程 2、理解细胞分化的概念及离体植物细胞的脱分化和再分化 3、通过联系农业生产实际，培养学生活学活用，理论联系实际的能力[来源:学|科|网] （二）过程与方法 归纳MS培养基的配制方法，并设计表格比较微生物培养基与MS培养基的配方的异同。 （三）情感、态度与价值观 通过阅读植物组织培养技术的发展史，课下查阅植物组织培养技术在生产实践中应用的资料，关注学生科学态度的教育，拓展学生视野，感受科学技术在生产实践中的重要价值。 ★课题重点 植物组织培养过程中使用的无菌技术 ★课题难点 植物组织培养过程中使用的无菌技术 ★教学方法
启发式教学 ★教学工具 多媒体课件 ★教学过程 （一）引入新课 上节课我们探讨学习了如何从土壤中分离出尿素分解菌和纤维素分解微生物及其计数方法。这节课我们来学习研究植物的组织培养技术。 （二）进行新课 1．基础知识 知识回顾：联系“植物细胞工程”，回答下列问题： 1．1具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的能力，即每个生物细胞都具有全能性。但在生物体的生长发育过程中并不表现出来，这是因为在特定的时间和空间条件下，通过基因的选择性表达，构成不同组织和器官。 1．2植物组织培养技术的应用有：实现优良品种的快速繁殖；培育脱毒作物；制作人工种子；培育作物新品种以及细胞产物的工厂化生产等。 活动1：阅读“植物组织培养的基本过程”，讨论并完成以下问题： 1．3细胞分化：个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。 〖思考1〗细胞分化是一种持久性的变化，它有什么生理意义
月季植物组织培养实验报告 姓名：张恒玉 （天津师范大学10生乙10517085） 摘要：月季（Floribunda roses）为蔷薇科蔷薇属木本植物,其花姿优美，花 型丰富，花色齐备, 树型易修剪，栽培难度小;其花型大，美丽，幽雅，高贵。在鲜花应用中，月季花的地位和比重与日俱增,是世界上著名的四大切花之一。植物组织培养主要以绿色植物细胞或组织块为研究主要对象，把植物体上的生活器官、组织块活细胞从整体上离体下来进行人工培养。以细胞全能性为理论基础对最适月季培养的培养基、激素、培养基质进行筛选，使离体组织经过脱分化和再分化而发育成新的植物个体。为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径，在月季的改良上显示了很大的应用潜力。 关键词：月季组织培养 Rose Plant Tissue Culture Lab Report Name: ZhangHengyu （Tianjin Normal University college of Life Science, Biological Sciences 300387） Abstract:Rose (Floribunda roses) for the woody Rosaceae Rosa, the beautiful flower position, abundant flowers, colors available, easy to trim the tree, planting small difficulty; its flowers large, beautiful, elegant, noble. Applications in the flowers, the status and the proportion rose growing is the world's leading one of the four cut flowers. Plant Tissue Culture main object of the green plant cells or tissue blocks for research, Of life on the plant organ, tissue block living cells isolated from the whole down the artificial culture, Cell totipotency theory based on the optimum rose culture medium, hormones, culture media filter, Isolated tissue and develop into new individual plants after dedifferentiation and redifferentiation. breeding of new varieties offer a new way, in the rose show a significant improvement potential applications. Keywords: Rose tissue culture 1 月季介绍
专题3植物的组织培养技术 课题3.2月季的花药培养 一、【课题目标】 （一）知识与技能 1、识记被子植物花粉发育的过程 2、通过学习花药培养的基本技术，培养设计试验、动手操作、分析解释实验现象的能力 （二）过程与方法 1、列表比较花药培养与组织培养 2、选择适宜的培养材料和培养基 （三）情感、态度与价值观 1、培养动手实践、勇于探索的科学探究素质 2、通过讨论花药离体培养技术在生产实践中的应用，帮助学生确立理论联系实际的观点 二、【课题重点】 选取适宜的培养材料和培养基 三、【课题难点】 选取适宜的培养材料和培养基 四、【教学方法】 启发式教学 五、【教学工具】 多媒体课件 六、【教学过程】 （一）引入新课 利用植物的茎可以经过组织培养得到新植株，但这种方法同时也存在着一定的缺陷，繁殖出来的新植株往往无法获得一些新的性状。本节我们将学习花药离体培养技术，这是一种信的育种技术。 （二）进行新课 1. 基础知识 活动2 :阅读“被子植物的花粉发育”，回答下列问题： 1. ______________________________ 被子植物的花粉是在_____________ 中由经过分裂形成的。 2. 结合教材内容填下列示意图： 〖思考2〗由此可见，被子植物的花粉的发育要经历四分体时期，单核期和双核期等阶 段。 〖思考3〗在正常情况下，一个小孢子母细胞可以产生_4_个精子；在一枚花药中可以产生
很多个花粉。 1思考4〗营养细胞在花粉萌发过程中的作用是什么？控制花粉的萌发并提供营养。 活动3:阅读“产生花粉植株的两条途径”，讨论并回答下列问题: 1产生花粉植株（即单倍体植株）的两种途径：一是花粉通过胚状体阶段发育为植株，二是通过 愈伤组织阶段发育为植株。这两种途径的区别主要取决于培养基中—的种类及其浓度的配 比。 3 ?胚状体的结构及其发育过程与种子相似，所以把胚状体到从芽的过程称为分化，而把从愈伤组 织到从芽的过程称为再分化。 活动4 :阅读“影响花药培养的因素”，回答下列问题： 1影响花粉植株的主要因素：材料的选择和培养基的组成等。 2. 材料的选择： ①从花药来看，应当选择（初花期、盛花期、晚花期）的花药； ②从花粉来看，应当选择（四分体期、单核期、双核期、萌发期）的花粉; ③从花蕾来看，应当选择（完全未开放、略微开放、完全盛开）的花蕾。 〖思考5〗除此之外，你认为影响花粉诱导成功率的因素还有哪些？ 植物的种类、亲本生长条件、材料的低温处理、接种密度、培养基组成、培养的环境条件等。 〖思考6〗为什么不选择使用单核期之前或之后的花粉？ 单核期之前，花药质地幼嫩，容易破碎；单核期之后，花瓣开始松动，消毒困难。 〖思考7〗花瓣松动会给材料消毒带来困难的原因是外界环境中的微生物容易侵入到花药中。 2 .实验设计 活动5:阅读“材料的选择”，回答下列问题： 1. 选择花药时一般通过镜检确定花粉发育时期，此时需要对花粉细胞核进行染色，最常用的染色 剂是醋酸洋红溶液和焙花青-铬钒溶液，它们分别可以将细胞核染成红色和蓝黑色。 2. 在使用焙花青-铬钒溶液时，需要首先将花药用卡诺氏固定液处理20min。该试剂的配制方法 是将无水酒精和冰醋酸按体积比为3 :1的比例混合均匀。 活动6:阅读“材料的消毒”，填写下列流程图: 〖思考8〗月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较，二者有何不同？在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗。 活动7:阅读“接种和培养”，回答下列问题： 1. 剥取花药：消毒后的花蕾，要在无菌条件下除去花萼、花瓣。 〖思考9〗剥取花药时，一是注意不要损伤花药，原因是容易从受伤部位产生愈伤组织；二是要彻底除去花丝，原因是花丝不利于愈伤组织或胚状体的形成。 2. 接种花药：剥取的花药要立刻接种到培养基上。每个培养瓶接种7?10个花药。 3. 培养：花药培养利用的培养基是MS 培养基，pH为5.8 ，温度为25 C,幼苗形成之前（需
课题1 菊花的组织培养 ★课题目标 （一）知识与技能 1、熟悉植物组织培养的基本过程 2、理解细胞分化的概念及离体植物细胞的脱分化和再分化 3、通过联系农业生产实际，培养学生活学活用，理论联系实际的能力[来源:学|科|网] （二）过程与方法 归纳MS培养基的配制方法，并设计表格比较微生物培养基与MS培养基的配方的异同。 （三）情感、态度与价值观 通过阅读植物组织培养技术的发展史，课下查阅植物组织培养技术在生产实践中应用的资料，关注学生科学态度的教育，拓展学生视野，感受科学技术在生产实践中的重要价值。★课题重点 植物组织培养过程中使用的无菌技术 ★课题难点 植物组织培养过程中使用的无菌技术 ★教学方法 启发式教学 ★教学工具 多媒体课件 ★教学过程 （一）引入新课 上节课我们探讨学习了如何从土壤中分离出尿素分解菌和纤维素分解微生物及其计数方法。这节课我们来学习研究植物的组织培养技术。
（二）进行新课 1．基础知识 知识回顾：联系“植物细胞工程”，回答下列问题： 1．1具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的能力，即每个生物细胞都具有全能性。但在生物体的生长发育过程中并不表现出来，这是因为在特定的时间和空间条件下，通过基因的选择性表达，构成不同组织和器官。 1．2植物组织培养技术的应用有：实现优良品种的快速繁殖；培育脱毒作物；制作人工种子；培育作物新品种以及细胞产物的工厂化生产等。 活动1：阅读“植物组织培养的基本过程”，讨论并完成以下问题： 1．3细胞分化：个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。 〖思考1〗细胞分化是一种持久性的变化，它有什么生理意义？ 使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向专门化，有利于提高各种生理功能的效率。 1．4愈伤组织是通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。 〖思考2〗填表比较根尖分生组织和愈伤组织的异同： 1．5植物组织培养的过程可简单表示为： 活动2：阅读“影响植物组织培养的条件”，讨论并完成以下问题： 1．6材料：植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。菊花组织培养一般选择未开化植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。 组织类型 细胞来源 细胞形态 细胞结构 细胞排列 细胞去向 根尖 分生组织 受精卵 正方形 无液泡 紧密 分化成多种 细胞组织 愈伤组织 高度分化细胞 无定形 高度液泡化 疏松 再分化成新个体 相同点 都通过有丝分裂进行细胞增殖 （脱分化） 离体细胞、组织、器官 （又叫外植体） （再分化） 愈伤 组织 （生长） 胚状体 丛芽等 新个体
一、选题依据 1、论文题目及研究领域 （1）论文题目：月季茎段组织培养技术研究 （2）研究领域：组织培养在月季繁殖上的应用 2、论文研究的理论意义和应用价值 月季在我国应用非常广泛，因此繁殖方法也非常多，但是常规繁殖技术很难对其品种进行更新。虽然自l875年人工杂交技术产生后，经过长期的杂交和选择，获得了许多理想品种，但月季育种目前存在着以下几个问题：（1)传统杂交方法具有局限性。表现在基因资源有限，染色体数目及倍性差异使远缘杂交难以成功；生长一致性、开花同时性等多基因控制性状难以改良等。此外月季作为多年生灌木，育种所需时间较长。（2）只注重对外观性状的改良，而忽视了对内在性状的改良。在过去的育种史中，育种家们只注意芽形、花形、花径、瓣数和茎长等外观性状的改良，并且选择的标准也趋于一致，造成资源流失，而内在性状，如生活力、瓶插寿命以及对病虫害的抵抗能力等未得到相应的提高。（3)遗传背景相对狭窄。据统计蔷薇属的100多个物种中只有8个种对现代月季做出过突出贡献，因此这种近亲杂交现象严重影响月季的生活力[1]。 90年代发展起来的以组织培养为基础的转基因技术无疑为月季育种提供了一条新途径。这种方法不但使品种在外源基因所控制的性状上发生改变，其性状保持相对稳定，还可利用来自其他生物类型的基因，创造更优良的品种。目前，月季的组织培养已有了较深入的研究，基因的分离、克隆以及载体构建等技术在重要的农作物及模式植物上已积累了较多的经验，皆可应用于月季的基因工程育种中[2]。运用这项技术不断培育出新品种以满足人们对月季求新求异的需求。 3、目前研究的概况和发展趋势 月季传统的栽培方法是用嫁接和扦插法进行繁殖，但繁殖速度较慢。自20世纪60年代组培技术在生产中应用以来，许多研究者在月季的组培方面做了大量的研究工作，在月季组培苗的利用方面也取得了很大的进展，对加速新品种的推广和运用起到了积极作用。我国的研究者从20世纪80年代以后便开始进行切花月季组培种苗的生产，在组培的各大领域取得了很好的成绩。 目前，植物组织培养已经向基因的分离、克隆以及载体构建方向发展。在当前再生体系不够完善仍然是制约月季转基因的主要因素，直接再生不定芽途径虽然再生高，需时短，适应范围广，但转化困难；胚性愈伤组织或次级体细胞胚易于转化，但体细胞胚再生体系的建立相对困难，需要在诱导出初级体细胞胚后经过长时间的继代和选择，目前具备该再生体系的品种还非常有限。植株再生是进行遗传转化的必要前提，只有具备了成熟的再生体系才能有效的进行基因转化。现在组织培养技术在很大程度上仍是已经验为基础的，广泛开展月季组培的研究仍是解决问题的最佳途径，在我国尤其如此。随着经验的累积，月季再生体系将不断完善，为转基因提供前提条件。此外，人们对环保的日益重视，对新奇花朵的需求日益增加，以组织培养为基础的技术必将在月季育种中发挥重要作用[3]。 二、论文研究的内容
月季的植物组织培养开题报告 一、实验目的意义 通过月季的植物组织培养实验，对植物组织培养技术进行初步了解，认识植物组织培养的重要性和发展潜能，并了解月季的特征及生长习性，锻炼自己独立做实验、独立思考的能力。 二、实验材料和方法 1.实验材料：月季（取材自天津师范大学主校区明理楼旁边） 2.实验步骤 ①称取6.5g～12g琼脂，先用蒸馏水置1000ml搪瓷杯浸泡2小时后充分洗去杂质。弃去浸 液用无离子水再洗1～2次，并加入500ml无离子水在电炉上溶化。边搅拌边溶化，直至完全溶化备用。 ②另取蔗糖30g于上述溶液中搅拌完全溶解备用。 ③另按MS培养基用量量取无机大量微量元素及有机成分的母液于一烧杯中，并完全倒入 ②液中搅拌溶解混匀备用。 ④按目的要求用取样器加入各种激素并搅拌混匀，加稀碱或稀释酸调pH值应比目的要求 的pH值稍高0.1～0.2。定溶1000ml。 ⑤趁热大于60℃分装于培养瓶中，应边搅拌边分装液体，根据要求的量分装。一般液体的 厚度掌握在1cm左右为宜。分装时不得将液体粘落至瓶口上。 ⑥将培养瓶封口塞棉塞、包牛皮纸系线绳。 ⑦另取Ф5cm的滤纸若干，置Ф9cm的培养皿中并用牛皮纸包好准备灭菌。 ⑧另取无离子水若干不得超过瓶内总体积的70%，加棉塞包牛皮纸，灭菌制备无菌水。另 取清毒瓶包好备用。 ⑵灭菌 ①检查有无漏电漏水现象，加无离子水的3升，将要灭菌的物品平稳地放置高压锅套桶 内。 ②盖上锅盖水平拧好螺栓，打开放气阀，接通电源加热，待放气阀处水汽充分溢出时盖 上放气阀，待压力升至0.05Mpa时打开放气阀放气至压力回到零位时盖上放气阀升压。 ③待压力达0.12～0.15Mpa时，开始计时，使调压器自220V回调170～180V左右维持 30分钟断电。 ④待压力回降至零位时，打开锅盖错开一缝隙使热蒸汽迅速溢出烘干包纸和瓶塞。 ⑤趁热取出被灭菌之物，将培养瓶置平稳处使培养瓶中的培养基凝固。23小时后查有无 细菌，48小时后查有无霉菌，如有杂菌应及时处理，无杂菌备用。 ⑶接种 ①取材：将采集的月季茎段冲洗干净，分装到烧杯中，放入超净工作台；先用70%酒精浸 没并轻摇15s进行欲消毒；倒出酒精，加入0.1%二氯化汞浸没；倒净二氯化汞。用无菌水冲洗3次，将废液倒弃备用。 ②解下培养瓶上包头纸的线绳，并将培养瓶整齐地排列在接种台的左侧，然后用70%的酒 精棉球从内向外擦接种台面。 ③在酒精灯下用用镊子在消毒瓶内取出材料置于培养皿内的无菌滤纸上吸干水分，右手持 镊子左手拿灭过菌的解剖刀迅速地将茎段切成剪成每段2～3cm至少有1个侧芽，用镊子将外植体迅速地在酒精上接入培养瓶内。 ④在酒精灯火焰上转动瓶口和棉塞进行灼热灭菌，迅速塞好棉塞、包好包头纸，系好线绳，
课题2月季的花药培养 教材内容解读 要点1植物的花药培养的育种意义 育种工作者采用花药培养的方法，使花粉粒发育为单倍体植株，再经过人工诱导使染色体数目加倍，重新恢复到正常植株的染色体数目。这样的植株不仅能够正常生殖，而且每对染色体上的成对的基因都是纯合的，自交产生的后代不会产生性状分离。单倍体育种不仅缩短了育种周期，也为新品种的培育开辟了新途径。 要点2被子植物的花粉发育 （1）被子植物的雄蕊通常包含花丝、花药两部分。花药为囊状结构，内部含有许多花粉。花粉是由花粉母细胞经过减数分裂而形成的。 （2）被子植物花粉的发育要经历四分体时期、单核期和双核期等阶段。 ①在四分体时期，4个单倍体细胞连在一起。 ②进入单核期时，四分体的4个单倍体细胞彼此分离，形成4个具有单细胞核的花粉粒。这时的细胞含浓厚的原生质，核位于细胞的中央（单核居中期）。随着细胞不断长大，细胞核由中央移向细胞一侧（单核靠边期）。 ③进入双核期时，靠近细胞一侧的细胞核，分裂成1个生殖细胞核和1个花粉管细胞核，进而形成两个细胞，一个是营养细胞，一个是生殖细胞。生殖细胞将再分裂一次，形成两个精子。 要点3产生花粉植株的两种途径 通过花药培养产生花粉植株（即单倍体植株）一般有两种途径： 一种是花粉通过胚状体阶段分化发育成为植株；另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，将其诱导再分化成植株。 这两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。 要点4影响花药培养的因素 （1）不同植物的诱导成功率很不相同。 （2）就同一植物来说，亲本植株的生理状况对诱导成功率也有直接影响。 （3）花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素。 花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。
1.3 植物组织培养技术教案（苏教版选修1） ●课标要求 1．结合植物组织培养的过程理解植物组织培养的含义、原理。 2．结合天竺葵的组织培养掌握植物组织培养的操作过程。 ●课标解读 1．掌握培养基的配制。 2．掌握植物组织培养过程中各项技能。 3．掌握合理利用激素诱导愈伤组织脱分化、再分化。 ●教学地位 本节涉及到植物组织培养的概念、原理、过程、培养基的配制、组织培养的操作技术等内容，是该章的核心内容之一，是高考中常考的内容。 ●教法指导 1．植物组织培养的过程可用多媒体课件展示。 2．天竺葵的组织培养可直接进入实验室进行实际实验操作。 ●新课导入建议 利用课件向学生展示花卉生产过程，感知组织培养给人们带来的便利。 ●教学流程设计 学生课前预习：阅读教材P25－32，填写【课前自主导学】，完成“思考交流”。?步骤1：情景导课：以【新课导入建议】引出本节课题。?步骤2：根据创设的情景，引出基因工程的概念，并通过【课堂互动探究】探究1分析、理解植物组织培养的过程。通过例1巩固、提高。?步骤3：结合植物组织培养的条件和实际操作过渡至MS培养基的配制和实验操作中的注意事项的教学。? 步骤7：通过【当堂双基达标】进行当堂检测验收。?步骤6：引导学生通过合作，整理本节重点、难点内容，利用【本课知识小结】进行总结，建立知识网络。理解并记忆【结论语句】。?步骤5：回扣基础知识，将检查、批阅【课前自主导学】时学生出错较多的部分进行强化，重点对【正误判断】部分进行辨析。?步骤4：通过【课堂互动探究】探究2帮助学生认识MS培养基配制和组织培养的实验操作。利用例2验收、巩固。
1.含义指在无菌和人工控制条件下，诱导离体的植物器官、组织等在适宜的培养条件下发育成完整植株的技术。 2．原理 植物细胞的全能性，是指植物体的每个体细胞都携带着一套来自受精卵的完整基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。 3．植物茎尖组织培养的主要过程 优良母株――→分离接种 诱导形成愈伤组织―→诱导芽的分化 ―→ 试管
3.2 月季的花药培养教学设计 广东省云浮市新兴县惠能中学杨永亮 一、教材分析 课题背景介绍了花药培养的历史以及花药培养在育种工作上的意义，使学生了解植物组织培养技术在生产中的应用，熟悉花药培养的过程。由于本课题难度比较大，对硬件要求比较高，教师可根据学校具体实际选取某种植物的花药培养。 二、教学目标 1．知识与技能 a、说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径。 b、说出影响花药培养的因素。 c、掌握花药培养的过程。 2．过程与方法 a、学会花药离体培养的技术。 b、尝试用其他植物花药离体培养。 3．情感、态度与价值观 领悟花药培养的科学探究方法和历程，建立理论与实践相结合的观念。 三、教学重点 选取适宜的培养材料和培养基。 四、教学难点 花药培养的原理及操作过程。 五、教学过程
本节我们将学习花药离体培养技术。 基础知识 1、被子植 物的花粉 发育 1、教师讲解凡是种子有果皮包被，胚珠有子房壁包被 着的植物，叫做被子植物。被子植物的雄蕊包括花丝 与花药。花粉是小孢子母细胞减数分裂形成，单倍体 的生殖细胞。花粉的发育要经历：四分体时期、单核 期、双核期。 2、教师让学生阅读课本P37图3-6，并讨论。 学生阅读课本，获取信息: 一个成熟的花粉粒为雄配 子体，在成熟前，生殖细胞 进行一次有丝分裂，形成两 个精子，这样的花粉在成熟 时，含有一个营养核和两个 精子。两个精子和一个营养 核的基因型相同。 学生自主 学习，体 现以学生 为中心的 理念。 2、产生花 粉植株的 两种途径 1、教师引导学生阅读课本材料，并让学生说出产生花 粉植株的两种途径分别是什么。 学生阅读课本图3-7，获取 信息:产生花粉植株（即单 倍体植株）的两种途径的区 别主要取决于培养基中激 素的种类及其浓度的配比。 培养学生 归纳总结 能力。
植物组织培养 【教学目标】 1．知识目标： 举例说出植物细胞的全能性；简述植物的组织培养。 2．能力目标： 分析影响植物细胞再分化的因素，培养学生分析、应用信息的能力。 3．情感目标： 举例说出植物组织培养技术的应用，增强学生对科学、技术与社会之间关系的理解。【教学重难点】 分析影响植物细胞再分化的因素，培养学生分析、应用信息的能力。 【教学过程】 一、植物细胞的全能性 植物体的每一个活细胞都具有形成完整植物体的遗传潜能，植物细胞的这种特性就叫做全能性。 1．细胞为什么会具有全能性呢？ 生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 2．在生物体内，细胞为什么没表现出全能性，而是分化为不同的组织、器官呢？ 这是因为在特定的时间和空间条件下基因选择性表达的结果。在个体发育的不同时期，生物体不同部位的细胞表达的基因是不相同的，合成的蛋白质也不一样，从而形成了不同的组织和器官。 3．植物细胞什么条件下才能表现出全能性呢？ 当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时，在一定的营养物质、激素和其它外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。 二、植物组织培养技术 植物组织培养就是利用植物体的离体器官、组织或细胞，无菌条件下在含有营养物质的培养基上，给予适宜的光照、温度、湿度等环境条件进行人工培养，使其增殖、生长、发育而形成完整的植株。
核心：诱导离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织和诱导愈伤组织再分化。 （一）植物组织培养过程 1．植物细胞的脱分化：就是让已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。 2．植物细胞的再分化：愈伤组织继续培养可以重新分化形成根或芽等器官的过程。愈伤组织的再分化主要有两种方式，一种是不定芽方式，一种是胚状体方式。 3．愈伤组织：排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状的薄壁细胞。 （二）植物组织培养的条件： 含有全部营养成分的培养基、一定的温度湿度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。 思考： 为什么整个过程要求消毒、灭菌及无菌操作？ 植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。 注意： 当细胞分裂素与生长素共同使用时，能强烈促进愈伤组织的形成。当细胞分裂素与生长素浓度比高时，有利于芽的发生；浓度比低时，有利于根的发生。 三、植物组织培养的应用
植物组织培养教学设计公司内部编号：（GOOD-TMMT-MMUT-UUPTY-UUYY-DTTI-
课题1 菊花的组织培养 ★课题目标 （一）知识与技能 1、熟悉植物组织培养的基本过程 2、理解细胞分化的概念及离体植物细胞的脱分化和再分化 3、通过联系农业生产实际，培养学生活学活用，理论联系实际的能力[来源:学|科|网] （二）过程与方法 归纳MS培养基的配制方法，并设计表格比较微生物培养基与MS培养基的配方的异同。 （三）情感、态度与价值观 通过阅读植物组织培养技术的发展史，课下查阅植物组织培养技术在生产实践中应用的资料，关注学生科学态度的教育，拓展学生视野，感受科学技术在生产实践中的重要价值。 ★课题重点 植物组织培养过程中使用的无菌技术 ★课题难点 植物组织培养过程中使用的无菌技术 ★教学方法
启发式教学 ★教学工具 多媒体课件 ★教学过程 （一）引入新课 上节课我们探讨学习了如何从土壤中分离出尿素分解菌和纤维素分解微生物及其计数方法。这节课我们来学习研究植物的组织培养技术。 （二）进行新课 1．基础知识 知识回顾：联系“植物细胞工程”，回答下列问题： 1．1具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的能力，即每个生物细胞都具有全能性。但在生物体的生长发育过程中并不表现出来，这是因为在特定的时间和空间条件下，通过基因的选择性表达，构成不同组织和器官。 1．2植物组织培养技术的应用有：实现优良品种的快速繁殖；培育脱毒作物；制作人工种子；培育作物新品种以及细胞产物的工厂化生产等。 活动1：阅读“植物组织培养的基本过程”，讨论并完成以下问题： 1．3细胞分化：个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。
月季组织培养方案 1供试材料来源:本实验材料取自盆栽的丰花月季,剪取腋芽尚未萌发的枝条,去除茎段两端各2毫米，选芽以茎段中芽为最好。 2技术路线: 外植体选取——初代培养——增值培养——生根培养——训化 3方法步骤: （1）外植体的剪取和消毒程序的筛选: 取无菌苗叶片切成0.5cm×0.5cm的小块，叶柄，茎段切成小段。外植体很小时，有利于培养脱毒的植株(对月季的杉树坏疽环斑病毒可通过茎尖培养的方式达到脱毒的目的，如果单纯为了快速繁殖，可用大的茎尖或茎段进行离体培养，这时外植体的大小决定了茎尖的成活比例。一般说外植体愈大，成活率愈高，成苗时间愈短。外植体的大小同时影响外植体自身的发育和月季组培苗茎的增殖，外植体的长度在9.0-10.0mm，直径在3.0-3.5mm范围时(茎的增殖和发育是最好的）.消毒:接种材料为当年抽生侧芽饱满的幼嫩茎段，自来水冲洗10-20min;75%或70%乙醇表面消毒15s。用无菌水冲洗3次。2%NaClO灭菌5—10min。然后用无菌水冲洗3次。 （2）初代培养基的筛选:诱导培养基以MS为基本培养基，附加适量的细胞分裂素6一苄氨基嘌呤(6-BA)和生长素萘乙酸(NAA)。NAA增加至0.1mg,L时，6一BA浓度的高与低已对增殖系数不产生明显影响。最适的侧芽诱导培养基为MS + 6一B A 0.5,3.0 mg,L + NAA 0.0l,1(0mg,L，且培养基中添加蔗糖有增加丛生芽数量的作用。 （3）增殖培养基的筛选:诱导培养基上已经萌发的嫩芽转入附加6一BA、NAA等激素的MS培养基中，进行增殖继代。KT，IAA等激素作用效果较差，协同作用不明显。低浓度的6 一BA有利于不定芽的增殖，浓度过高则抑制不定芽增殖，适量NAA有利于芽和叶生长，但浓度过高诱导产生大量愈伤组织，不利于侧芽的直接分化和生长。在NAA浓度相同BA 浓度不同的培养基中，随BA浓度的升高，芽苗的增殖系数也相应提高。在BA浓度相同而NAA浓度不同的培养基中，随NAA浓度升高，小芽生长速度加快 (4).生根培养基的筛选:无菌芽苗在继代培养基中只诱导地上部分生长。待培养一段时间后，转入生根培养基中，诱导生根。采用1,4 MS培养基，不加生长素即可以促进生根。在无菌苗的生根诱导过程中，生长素的种类和浓度起决定性作用。分浓度NAA、IBA、IAA 对藤本月季进行生根培养，发现3种生长素的生根效果不同，且浓度的影响较大。发现低浓度的生长素有利于根的形成，适当浓度的IBA、NAA 对生根率有显著影响，浓度过高会抑制根的形成，NAA浓度为0.50mg,L时效果最佳。生根阶段加人活性炭(AC)后，有助于提高生根率和生根质量。 (5).试管苗移栽实验 小苗接到生根培养基上后，14d可见基部分化出根点，20d则长出许多白根。此时组培阶段结束，进入试管苗移栽成活阶段。所有试管苗移栽前都应先将生根苗移至室温进行移栽前的锻炼。锻炼时问与移栽成活率有关，练苗7d以上，成活率达到95,。影响移栽成活率的主要因素有3个:湿度、温度以及基质种类和带菌量。考虑到这3个因素，移栽时应保持90,以上湿度，18,25?的环境温度，基质用0.2 ,的高锰酸钾或其他灭菌剂进行消毒灭菌。而基质的选择上，以蛭石和珍珠岩的栽培效果较好。移栽成活后喷极稀的营养液，使小苗得到营养补充。l0,15d即长出新叶，且根系快速生长，可适时进行大田移栽。