分子生物学重点汇总
分子生物学重点汇总
Central dogma（中心法则）：遗传信息从DNA向RNA再向蛋白质传递的规律。
Genome（基因组）：是指来自一个生物体的一整套遗传信息，也就是一个细胞或病毒所携带的全部遗传信息或整套基因。
transcriptome（转录组）：一个细胞、组织或有机体在特定条件下的一组完整基因。
proteome （蛋白质组）：在大规模水平上研究蛋白质特征，获得蛋白质水平上的关于疾病的发生、细胞代谢等过程的整体而全面的认识。Metabolome（代谢组）：对生物体内所有代谢物进行定量分析并寻找代谢物与生病理变化的相关关系的研究方法。
Gene（基因）：是位于染色体上的遗传基本单位，负载特定遗传信息的DNA片段，可以编码单个具有生物功能的产物，包括RNA和多肽链。Epigenetics（表观遗传学现象）：DNA结构上完全相同的基因，由于处于不同染色体状态下具有不同的表达方式，进而表现出不同的表型。
Cistron（顺反子）：即结构基因，编码一个多肽的遗传单位。
Muton（突变子）：顺反子中有若干个突变单位，最小的突变单位被称为突变子。
recon（交换子）：意同突变子。
Z DNA(Z型DNA)：DNA的一种二级结构，由两条核苷酸链反相平行左手螺旋形成。
Denaturation（变性）：生物大分子的天然构象遭到破坏导致其生物活性丧失的现象
Renaturation（复性）：在一定的条件下，变性的生物大分子恢复成具有生物活性的天然构象的现象。
negative superhelix（负超螺旋）：双链DNA在空间以双螺旋链旋转方向相反的方向形成的扭曲。
C value paradox （Ｃ值矛盾）：生物体的大Ｃ值与小ｃ值不相等且相差非常大。
overlapping gene（重叠基因）：不同的基因公用一段相同的ＤＮＡ序列。
repetitive gene（重复基因）：染色体上存在的多数拷贝基因。
interrupted gene（断裂基因）：真核生物的结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌，去除非编码区再连接后，可翻译出连续氨基酸组成的完整蛋白质。这些基因称为断裂基因。
splitting gene（间隔基因）：意思与断裂基因相同。
Intron（内含子）：真核生物中隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列。
Exon（外显子）：真核生物中在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列。
jumping gene（跳跃基因）：可从一个染色体位点转移到另一位点的分散重复序列，也就是能发生转座的DNA。
Transposon（转座子）：与跳跃基因意思相同。
Transcription（转录）：转录是生物体以DNA为模板合成RNA的过程
sense strand（有意链）：基因的双链结构中，用来转录的链叫反义链，不用来转录的叫有意链
coding strand（编码链）：双链DNA中，不能进行转录的那一条DNA链，该链的核苷酸序列与转录生成的RNA的序列一致（在RNA中是以U取代了DNA中的T），又称有义链（sense strand）。
antisense strand（反义链）：基因的DNA双链中，转录时作为mRNA合成模板的那条单链叫做模板链或反义链（template or antisense strand）。Promoter（启动子）：是RNA聚合酶结合的、在转录起始点上游的DNA序列。如不受阻遏，RNA聚合酶与之结合后即可启动转录。
-35 sequence (-35区)：细菌基因起始位点上游35bp处的保守序列，在RNA聚合酶起始识别中起作用。
Terminator（终止子）转录结束后所代表的DNA 序列，能够引起RNA 聚合酶终止转录。
transcriptional unit（转录单位）：RNA的合成是由RNA聚合酶（RNA polymerase)催化的。当RNA聚合酶结合到基因起始处时，即为启动子（promoter)的特殊序列上时，转录开始进行。
RNA polymerase（RNA聚合酶）：以一条DNA链或RNA为模板催化由核苷-5ˊ-三磷酸合成RNA的酶。
S.D. Sequence（S.D序列）：mRNA中用于结合原核生物核糖体的序列。（真核生物是kozak序列）
hnRNA(heterogenuous nuclear RNA)（核内不均一RNA）：在真核细胞核内可以分离到一类含量很高，分子量很大但不稳定的RNA，称为核内不均一RNA
Enhancer（增强子）：是能够结合特异基因调节蛋白，促进临近或远处特定基因表达的DNA序列。增强子距转录起始点的距离变化很大，但总是作用于最近的启动子。
Silencer（沉默子）：真核顺式作用元件中的负性调节元件，当其结合特异蛋白因子时，对转录起阻遏作用。
Insulater（绝缘子）：真核生物基因组的调控元件之一，亦为一种边界元件。
Rho-independent terminator（不依赖于p因子的终止子）：DNA上能够引起大肠杆菌聚合酶在没有p因子的情况下终止转录的序列。
Rho-dependent terminator（依赖于p因子的终止子）：
Zinc finger（锌指）：一种常出现在DNA结合蛋白质中的一种结构基元。是由一个含有大约30个氨基酸残基的环和一个与环上的4个Cys或2个Cys 和2个His配位的Zn2＋构成，形成的结构象个手指状。
lucine zipper（亮氨酸拉链）：出现在DNA结合蛋白质和其它蛋白质中的一种结构基元（motif）。当来自同一个或不同多肽链的两个两性的α-螺旋的疏水面（常常含有亮氨酸残基）相互作用形成一个圈对圈的二聚体结构时就形成了亮氨酸拉链。
RNA processing; （RNA加工）将一个RNA原初转录产物转换成成熟RNA分子的反应过程。加工包括从原初转录产物中删除一些核苷酸，添加一些基因没有编码的核苷酸，和对某些碱基进行共价修饰。
RNA splicing；（RNA剪接）从DNA模板链转录出的最初转录产物中除去内含子，并将外显子连接起来形成一个连续的RNA分子的过程。spliceosome;（剪接体）由大的蛋白质-RNA复合体催化内含子从mRNA前体中除去的反应的整体。
cis-splicing;（顺式剪接）RNA剪接发生在同一条RNA分子上。
trans-splicing（反式剪接）RNA旳剪接发生在两条不同来源的前体RNA底物，在剪接体中完成（在成熟的RNA引导序列中拼接成一外来的小外显子，发生在两条前体RNA间的选择性剪接）
constitutive splicing;（组成型剪接）从5’向3‘端对内含子进行逐一的剪接称为组成型剪接。
alternative splicing（选择性剪接）对内含子以及外显子进行选择性的剪接。
RNA editing（RNA编辑）将该基因与其转录物比较，发现转录物在移码突变附近有4个额外的尿苷酸，这4个尿甘酸是在转录中或转录后由酶催化加进去的，并将这改变RNA编码序列的加工方式称为RNA编辑。
Translation：翻译，蛋白质生物合成，是生物细胞以mRNA为模板，按照mRNA分子中核苷酸的排列顺序所组成的密码信息合成蛋白质的过程。Messenger RNA：mRNA用作蛋白质合成模板的RNA（负载同一氨基酸，但是别不同密码子的tＲＮＡ）
GGC(general genetic codon)：广义密码，密码子中第二位核苷酸决定氨基酸性质的特点。也叫密码中的密码（codon in codon）
Paracodon（副密码子）：
I soacceptingtRNA：同工受体tRNA:能解读同工密码子的不同tRNA。
AARS：氨酰tRNA合成酶:催化特定的氨基酸准确负载于与其对应的tRNA上的专化性酶类。
cis action element（顺式作用元件）:在转录起始点上游参与转录调控的DNA序列，由启动子、增强子和沉默子构成。
trans action factor（反式作用因子）:能特异识别并结合顺势作用元件，激活另一基因转录的真核转录调节蛋白。
operon;(操纵子）:转录是不连续进行的。每一转录区段可视为一个转录单位，称为操纵子。操纵子包括若干个结构基因及其上游的调控序列。
RBS (Ribosome binding site)（核糖体识别结合位点）:
inducer;（诱导物）：通过与调控蛋白结合激活基因转录的小分子。
regulon;（调节子）:在操纵子调控中，有时一个调控基因可调控多个操纵子的表达，将受控于同一个调节蛋白的多个操纵子，称为调节子。
intein 蛋白内含子又称为内蛋白子（intein）：蛋白质有自剪接现象，蛋白质自剪接是前体蛋白中间的某些区域被切除，剩余部分以肽键重新连接起来，这样便产生了1个蛋白质分子。以肽键连接起来形成有功能的成熟蛋白部分称为蛋白质外显子，被切除的部分称为蛋白质内含子。
Estein 蛋白外显子又称为外蛋白子（estein）：蛋白质有自剪接现象，蛋白质自剪接是前体蛋白中间的某些区域被切除，剩余部分以肽键重新连接起来，这样便产生了1个蛋白质分子。以肽键连接起来形成有功能的成熟蛋白部分称为蛋白质外显子，被切除的部分称为蛋白质内含子。
简答题：
１、何谓断裂基因( split gene)?何谓重叠基因( overlapping gene)?它们在生物进化与适应上有何意义?
答：断裂基因是指真核生物的结构基因，它由外显子和内含子组成。重叠基因指的是两个或两个以上的基因共用一段DNA序列。断裂基因有利于变异和进化。（虽然单个碱基的改变有时可引起氨基酸的变更而造成蛋白质的变化，但是很难产生重大变化形成新的蛋白质，单个碱基突变发生在密码子第三位往往是沉默的大大降低了突变效应，而在断裂基因中如果发生在内含子与外显子的结合部位，那么就会发生剪接方式的改变结果是蛋白质结构发生大幅度的变化，从而加速进化）。重叠基因是原核生物进化的经济原则，用较小的C值可编码更多的基因信息。
２、什么是顺反子?用“互补”和“等位基因”说明“基因”这个概念。
答：等位基因是指同一基因的不同状态通常位于不同的同源染色体上。顺反子是基因表达的单位即转录单位，在原核生物中一般由多个翻译成蛋白质的片段组成，而真核生物中则不然，仅含有一个翻译单位的转录单位称为一个顺反子。顺反子可以通过互补分析得以鉴定。
３、你如何证明 Ty元件在转座时经历了一个RNA中间体?
答：构建一个含内含子与δ元件的人工 Ty 元件。采用诱导型 GAL 启动子合成大量的 Ty 元件的mRNA，从而使这一元件整合到基因组新位点的转座频率增加。检测新插入的 Ty 元件。若具有δ元件但缺少内含子，则通过 RNA 的中间体。（该知识点在课本85页，老教材）
４、IS元件整合到靶位点时会发生什么?
答：由于在转座子插入之前已产生一个交错切口，而且这一交错切口在转座子插入后被填补，因此导致靶位点序列重复。
答：IS元件整合到靶位点时，转座酶对受体靶位点序列和供体转座子的末端反向重复序列进行特定长度的交错切割。共同的机制使转座子和靶序列的切口末端发生交叉共价连接，形成单链移复合体，DNA聚合酶利用连接缺口的3‘—OH末端和模板链填补缺口，完成转座子及正向重复序列复制，而后发生供体转座子的复制型转座或非复制型转座。
５、比较基因组的大小和基因组复杂性的不同：
—个基因组有两个序列，一个是 A，另—个是 B，各2000bP长。其中—个是由400bp的序列重复5次而成，另一个则由50bp的序列重复40次而成，问：
(1)这个基因组的大小怎样?
(2)这个基因组的复杂性如何?
答：基因组的大小是指在基因组中DNA 的总量。复杂性是指基因组中所有单一序列的总长度。
（1）基因组的大小是4000 bp（2）基因组的复杂性是450 bp
６、请描述 C值矛盾，并举一个例说明。
答：C值是一种生物的单倍体基因组ＤＮＡ的总量，由于真核生物细胞基因中含有大量的重复序列，从而造成物种的Ｃ值和它的进化复杂性之间无严格的对应关系。例如：１、并非越高等的生物，遗传复杂性越高，人和两栖类的Ｃ值非常接近。２、变现复杂度没有明显变化的物种之间，它们的Ｃ值却存在很大的变化，两栖类中最小的基因组小于１０的９次方Ｍｂｐ而最大的可达１０的１１次方Ｍｂｐ。
７、跳跃复制的结果是什么?
答：产生串联的 DNA 序列。
8、为什么基因组 DNA在用限制性内切核酸酶消化时，哺乳类的卫星 DNA会产生特异的带?
答：在密度梯度离心中，每个DNA片段都最终会停留在它的密度与浮力相等的地方。每一DNA片段都有特定的由它的序列所决定的密度。所形成的主要DNA带较宽表明存在密度有细微差别的不同的序列。如果同一序列大量存在时，它就形成了自己的带。
９、列举一个已知的 DNA序列编码一种以上蛋白质的三种方法。
给定的一段DNA序列可以以下述方式编码两种或两种以上的蛋白质： (1)可读框中在核糖体结合位点之后含有多重起始位点； (2)以一两个碱基的移码方式出现重叠的可读框；(3)不同的剪接方式，例如，选择不同的外显子组合成不同的mRNA。
１０、论述DNA为什么适合作为遗传物质
是遗传物质的原因是它具有双螺旋结构，使得他能够稳定的存在。第二是碱基的排练顺序的多样性。
１１、设计实验克隆大肠杆菌的复制子。
答：利用相同的限制性内切酶分别酶解Ｅ．ｃｏｌｉＤＮＡ和具有抗生素抗性基因（如Ａｍｐｒ）的质粒ＤＮＡ，选择最小的DNA片段与质粒DNA连接后，转化缺乏Amp r基因的受体菌（Amp s），接种于含有氨苄青霉素的培养基中，选择能正常生长的菌落，即可克隆到E.coli复制起点的DNA片段。（第九十七页有详细讲解，老教材）
12、解释在DNA复制过程中，后随链是怎样合成的。
答：DNA 聚合酶只能朝 5'-3'方向合成 DNA，后随链不能像前导链一样一直进行合成。后随链是以大量独立片段（冈崎片段）合成的，每个片段都以5'3'方向
这些片段最后由连接酶连接在一起。每个片段独立引发、聚合、连接。
13、研究表明小麦成熟胚，未成熟幼胚，幼嫩花序，叶片细胞中端粒DNA的长度分别为30 kb，80kb, 45kb, 23kb。请讨论这一研究结果的分子生物学机理。
随着细胞老化，细胞的分裂次数也随之增加，而随着细胞分裂次数的增加，细胞DNA分子的端粒DNA也会随之减小，所以就端粒DNA而言，越幼嫩的组织他的分子量越大。（见于课本116页，老教材）
14、试证明一个基因中只有一条 DNA链作为模扳被转录。
答：若基因两条链均被转录，而RNA聚合酶只能以5’→3’方向合成，所以两条DNA链会以相反方向转录。两信使携带着彼此互补的反向核苷酸序列，编码不同的多肽。虽然某些DNA顺序能被双方向转录，但这不是常见现象。最早的明确证据是通过研究噬菌体SP8感染枯草杆菌得到的。 SP8
的DNA很特别：一条链(重链)富含嘌呤，另一链(轻链)则富含嘧啶。若把双链DNA温和加热，两条链分离(即DNA变性)，可用密度梯度离心分离两条链。 1963年，Julius Marmur和Paul Doty用SP8感染枯草杆菌细胞后提取RNA，发现它只能与噬菌体DNA的“重”链杂交(即互补配对形成DNA-RNA 杂合分子)。而不会与轻链杂交。显而易见，信使只可以与一条DNA链(重链)互补，因而DNA双链中只有一条链作为转录的模板(图A7.8)。 Marmur 和Doty很幸运地选用SP8做实验，因为它的全部基因都是同一条DNA链中转录而来。而另一些噬菌体，包括T4和λ噬菌体，部分基因由一条链转录而其他基因则由另一条链转录；因此若用这些噬菌体而不是SP8做实验，则不能成功地说明问题。（答案自己根据所给的资料总结，）
１５、某一质粒载体具有Tetr和 Kanr的表型，在 Kanr抗性基因内有一Bgl Ⅰ的切点。现用Bgl Ⅰ切割该载体进行基因克隆，问：(1)转化后涂皿时应加什么样的抗生素?(2)培养后长出的菌落具有什么样的抗性基因型?(3)如何利用抗变化筛选到含有插人片段的重组体?
答：(1)Te t（四环素）·；(2)TetrKans和TetrKanr；(3)重新接种在含Tet、Kan和只加Tet的平板上，选择只在Tet平板上生长的菌落，即为所需的重组体。
１６、概括典型原核生物启动子的结构和功能，并解释什么是保守序列。
答：原核生物启动子包括-10区和-35区，由核心启动子和上游控制元件组成，-35区为RNA聚合酶的结合位点，控制转录起始和转录效率，-10区为RNA紧密结合的结合位点，选择正确的起始位点，保证精确起始。保守序列即指DNA分子中的或则蛋白质中的氨基酸片段，他们在进化过程中基本保持变。
１７、简述原核生物RNA聚合酶全酶的组成以及各个亚基的功能
答：原核生物RNA聚合酶全酶是由两个α亚基和一个β亚基、一个β’亚基、一个σ亚基组成的。α亚基是全酶的组建因子，可促进DNA两条链的解旋和结合；β亚基是聚合NTP，合成RNA链的主要亚基，保证RNA链的延伸；β’亚基是促使RNA聚合酶与非模板链结合；σ亚基：促使RNA聚合酶与模板链上游转录因子结合，识别启动子，特别是启动子上的R位点。
１８、阐述原核生物的转录终止。
(1)转录终止的两种主要的机制是什么?
答：依赖于ｐ因子的的终止和不依赖于ｐ因子的终止。
(2)为什么在细菌转录终止中很少涉及到Pho因子?
答：细菌的转录与翻译不存在时间与空间的间隔，是同步进行的。
(3)怎样能阻止转录的终止?
答：提供抗终止蛋白。
１９、原核生物与真核生物的mRNA的各有什么特点?
⑴原核生物
①原核生物mRNA 的半衰期短。②许多原核生物mRNA以多顺反子形式存在③其5’端无帽子结构，3’端没有或只有较短的poly(A)。④原核细胞mRNA（包括病毒）有时可以编码几个多肽。⑤原核生物常以AUG（有时GUG，甚至UUG）作为起始密码子
⑵真核生物：
①其5’端存在帽子结构。②绝大多数真核生物mRNA具有poly(A)尾巴。
③其RNA最多只能编码一个多肽。④真核生物几乎永远以AUG为起始密码子。
２０、β-地中海贫血症患者不能合成β-球蛋白。将患者与正常人β-球蛋白基因的DNA序列进行比较分析发现，除第一个intron中有一个碱基发生了改变外，所有序列相同，但其mRNA分子比正常人多出约100多个核苷酸。根据这一结果，说明患者缺失β-球蛋白的原因。
答：在第一个内含子中3’端受点上游的PyPuPyPyＵＡＰｙ中的Ａ碱基发生突变，导致第一个内含子无法形成套索结构，无法被剪切。
２１、说明研究两个已知蛋白质间相互作用关系的酵母双杂交技术的分子生物学原理。
２２、举三例RNA的研究成就并说明其在推动分子生物学发展中的重要意义。
２３、说明constitutive splicing与alternative splicing, cis-splicing与trans-splicing之间在概念及机制上的区别。
自己总结，在课本的169页（老教材）
２４、简述前体mRNA经过剪接形成mRNA的过程。
答：真核细胞细胞核ｍＲＮＡ前体的剪接：利用套索结构的中间结构进行ＲＮＡ剪接，在剪接过程中，要先剪接成特殊的剪接体。
①在内含子的５’切断，通过５’、２’键将内含子５’Ｇ与分支点Ａ残基的２’连接成套索结构。②在内含子的３’端剪接位点，外显子１与外显子２连接，内含子以套索结构被释放。
在原核生物中：在转录出多顺反子ｍRNA前体后，需通过ＲＮａｓｅ三将核糖体蛋白与聚合酶亚基的ｍＲＮＡ切开，各自产生两个成熟的ＲＮＡ之后再各自进行翻译。（原核生物不需要掌握）
２５、哪三个序列对原核生物mRNA的精确转录是必不可少的?
答：-35序列（RNA 聚合酶识别位点），-10序列（RNA 聚合酶紧密结合位点）和终止子。
26、说明真核生物前体 RNA加工的类别及机理。
答：真核生物前体 RNA加工的类别包括5`-末端加帽、3`-末端加尾、剪接、修饰和编辑。
27、什么是可变剪接？它是怎样造成：
(1)在不同的组织中基因活性不同？(2)单个基因翻译产生两个不同的多肽？
答：可变剪接是剪接的一种形式，它能从一个mRNA前体剪接产生两个以上的成熟mRNA。（1）在不同的组织中产生的mRNA具有不同的起始序列，因为起始序列与翻译的起始有关，所以两个不同的mRNA分子以不同的效率被翻译，在不同的组织中表达的活性不同。（2）在这种情况下，一个基因编码序列内切除一些相关的序列，从而产生一个蛋白质不同的形式甚至是功能完全不同的两个蛋白质。（第二个可以从顺式剪接和反式剪接来回答）
28、什么是增强子?它们与其他调控序列有何不同?增强子具有哪些特点?
答：增强子是真核生物中定距离的正调控点，增强子的作用具有位置和方向的独立性，以成为“突环”的模式起作用，具有组织和细胞的特异性，其表达需要特异的蛋白因子的作用，作用方式与其他序列的不同之处在于①没有方向性，两个方向都能起作用②没有位置效应③具有组织和细胞类型的特异性④它与受调控的基因位于同一ＤＮＡ中但可位于任意一条链上
⑤通过两个以上的增强子和他们相应的转录因子的作用可影响聚合酶效应。
２９、在DNA分离过程中，酚通常与氯仿联合使用，即使不联合使用也要在苯酚抽提后用氯仿再抽提一次，为什么?
答：原因是酚和水有一定程度的互溶，所以单独使用酚抽提DNA，最终不能去除酚，残留的酚会使起切割和连接作用的限制性内切酶和连接酶变性。氯仿也是蛋白质性剂，它不与水互溶，但是能够与苯酚互溶，这样酚和氯仿连用，就可以带走残留的酚。
３０、比较真核生物与原核生物转录起始的第一步有什么个同。
答：原核生物中，具有特异识别能力的σ亚基识别转录起始点上游的启动子序列，这样可以使全酶与启动子序列结合力增加，形成闭合的二元起始复合物。关键的作用是RNA 聚合酶与DNA 的相互作用。真核生物中，当含TBP 的转录因子与DNA 相互作用时，其它转录因子也结合上来，形成起始复合体，这一复合物再与RNA 聚合酶结合，因此主要是RNA聚合酶与蛋白质之间的作用。
３１、一个基因如何产生两种不同类型的mRNA分子?
答：第一种是：一个原初产物含有一个以上的多聚腺苷化位点，能产生具有不同3’端的mRNA。
第二种是：如果一个原初转录产物含有几个外显子，发生不同的剪接（主要是选择型剪接），产生多种mRNA。
３２、什么是转录起始前复合体?
答：转录起始复合体包含与RNA 聚合酶相结合所必需的基本转录因子。
３３、列举前体mRNA剪接过程中发生的6种RNA-RNA相互作用?
答：U1-5′剪接位点、U2-分支位点、U4-46、U2-U6、U6-5′剪接位点、U5-外显子。（可以参考课本161-168页）不作为重点知识。
３４、为什么把同样的第一外显子(SL外显子)加在所有mRNA上对锥虫是有利的?
３５、如何确定在一个多内含子基因的剪接过程中，内含子被切除的顺序?
答：用一系列不同内含子和外显子的探针标记——Northern 印迹可以检测内含子去除的顺序。（说详细就是：将内含子确定出来后分别复制并分别用不同荧光标记）然后将他们与正在剪接的RNA（存在多种剪接状态）分子混合，是他们形成双链，观察荧光的种类，就可以确定哪些是先剪接下去的内含子哪些是后剪接下去的内含子。
３６、将带有启动子和终止子在内的玉米Adh完整基因导入E. coli细胞内没有得到表达，其主要原因是什么？
答：1、原核生物的启动子存在很大的区别，E. Coli中的转录酶无法识别玉米Adh基因的启动子，无法发动转录起始。（还可以从其它的方面作答）３７、包含的E.coli RNA聚合酶全酶识别的一个的E.coli启动子-10 框的非模板序列为5’-CATAGT-3’。
（a）在第一个位置发生的C→T突变是Up-mutation还是Down-mutation？为什么？
答：是Up-mutation 因为启动子的—10区是Pribnow盒，当其序列由C突变为T后，DNA稳定性变弱，更容易与聚合酶全酶紧密结合，增强转录效率。
（b）在最后位置发生的T→A突变，是Up-mutation还是Down-mutation？为什么？
答：是Down-mutation 因为当T突变为A后改变了碱基堆积状况，降低了RNA聚合酶与启动子的结合效率。（可参考课本124页，老教材）
３８、根据提供的（a）mouse total DNA ×mouse globin pr e-mRNA ，
（b）mouse total DNA ×mature mouse globin mRNA 杂交的电镜图像，说明你得到的信息。
答：①真核生物的ＤＮＡ存在内含子。
②ｍＲＮＡ是ｐｒｅ－ｍＲＮＡ剪切掉内含子后的产物。（仅作参考）
３９、(1)如何区分由启动子起始转录的RNA片段与5’端被加工过的RNA片段;
答：５’端加工后的ＲＮＡ分子，其５’端存在５’－５’磷酸二酯键，可以区分区分起始转录的ＲＮＡ，同时它的第一个碱基一定是甲基化的Ｇ，而起始转录的ＲＮＡ第一个碱基可能是Ａ而且一般都没有被甲基化修饰。
(2)证明多肽是从氨基端到羧基端方向合成的
４０、什么是摇摆假说?
答：1996年，Crick根据立体化学原理提出摆动学说，解释了反向密码子中某些稀有成分的配对，以及许多氨基酸有两个以上密码子的问题。假说中提出：在密码子与反密码子的配对中，前两对严格遵守碱基配对原则，第三对碱基有一定的自由度，可以“摆动”，因而使某些tRNA可以识别一个以上的密码子。一个tRNA究竟能识别多少个密码子是由反密码子的第一位碱基的性质决定的，反密码子的第一位A或C时只能识别1种密码子，为G或U时可以识别2种密码子，为I时可识别3种密码子。如果有几个密码子同时编辑一个氨基酸，凡是第一、二位碱基不同的密码子都对应于各自独立的tRNA。（可只答加粗部分）
４１、简述真核与原核细胞中翻译起始的主要区别。
答：原核生物的起始tRNA是fMet-tRNA，真核生物是Met-tRNA。原核生物中30S小亚基首先与mRNA模版相结合，再与fMet-tRNA结合，最后与50S 大亚基结合。而在真核生物中，40S小亚基首先与Met-tRNAMet相结合，再与模版mRNA结合，最后与60S大亚基结合生成80S.mRNA.Met-tRNAMet起始复合物。
（还可以加上：真核生物只能以AUG作为起始点，而原核生物还可以以GUG、UUG作为起始位点。原核生物的第一个tRNA先进入A位点，再进入P位点，而真核生物是直接进入P位点）
４２、起始tRNA具有哪两种与其他 tRNA不同的特性?
答：（1）带有一个甲酰化的氨基酸（N-甲酰甲硫氨酸）。
（2）它是惟一一种同30S 核糖体亚基-mRNA复合物内的密码子（AUG）起反应的tRNA。
４３、氨基酸分子如何与正确的tRNA分子连接?
答：对于每一种氨基酸都有一种特殊的氨酰tRNA合成酶，这种酶可以识别自己的氨基酸和相应的空载tRNA。在 ATP 存在的情况下，它把氨基酸的羧基同tRNA 3′端的 CCA 连接起来。
４４、谈谈保证蛋白质翻译准确率的主要机制有哪些？
1，mRNA上的密码子与tRNA上的反密码子严格的碱基配对：保证了氨酰tRNA的正确参入。
2，氨酰tRNA合成酶的催化专一性：保证特定的氨基酸与其相应的tRNA正确结合形成氨酰tRNA。
４５、氨酰tRNA合成酶的功能是什么?
答：两个类型的10 种氨酰tRNA合成酶各自对应一种功能性氨酰tRNA。通过两步反应，特定的氨基酸先通过磷酸化与氨酰AMP 结合，然后与相关的tRNA 结合（磷酸二酯键的断裂），这一
反应的精确性是mRNA 遵循遗传密码进行翻译的基础。
选择题
1．双链DNA中的碱基对有：( ｃｄ)
(a) A-U (b) G-T (c) C-G (d) T-A (e) C-A
2．复制转座：( ａｃｄ)
(a)复制转座子，即在老位点上留有一个拷贝
(b)移动元件转到一个新的位点，在原位点上不留元件 (c)要求有转座酶(d)要求解离酶
(e)涉及保守的复制，在这个过程中转座子序列不发生改变
3．基因组是：( a )
(a)一个生物体内所有基因的分子总量
(b)一个二倍体细胞中的染色体数
(c)遗传单位
(d)生物体的—个特定细胞内所有基因的分子的总量
4.Ⅰ型内含子能利用多种形式的鸟嘌呤，如：( abcd )
(a)GMP (b)GDP (c)GTP (d) dGDP (e)ddGMP(2’，3’-双脱氧GMP)
5.Ⅰ型剪接需要( a b f )
(a)单价阳离子(b)二价阳离子(c)四价阳离子(d) UlsnRNP
(e)一个腺苷酸分支点(f)一个鸟膘呤核苷酸作为辅助因子
6.在Ⅰ型剪接的过程中，( a d e )
(a)游离的G被共价加到内含子的5’端
(b)GTP被水解(c)内含子形成套马索结构
(d)在第一步，G的结合位点被外来的 G占据，而在第二步时，被3’剪接位点的G所取代
(e)被切除的内含子继续发生反应，包括两个环化反应
7．σ因子的结合依靠( a )
(a)对启动子共有序列的长度和间隔的识别
(b)与核心酶的相互作用
(c)弥补启动子与共有序列部分偏差的反式作用因子的存在
(d)转录单位的长度
(e)翻译起始密码子的距离
8．σ因子专一性表现在：( b )
(a)σ因子修饰酶(SME)催化σ因子变构，使其成为可识别应激启动子的σ因子
(b)不同基因编码识别不同启动子的σ因子
(c)不同细菌产生可以互换的σ因子
(d)σ因子参与起始依靠特定的核心酶
(e)σ因子是一种非专一性蛋白，作为所有RNA聚合酶的辅助因子起作用
1．转座子主要由下列部分组成：(l)插入序列（2）倒转重复序列 (3)宿主基因。
2．分子遗传学认为，生物体的第I类遗传信息是指由DNA序列所提供的遗传信息。第II类遗传信息是指表观遗传学信息（在第一类遗传信息的基础上通过后成修饰指令第一类遗传信息是否表达或何时何地以何种方式表达。）
3．卫星DNA形成的理论主要有、、。
4．检测某DNA分子具有呼吸作用，这意味着，该DNA分子的序列具有富含Ａ－Ｔ特点.
1.在 DNA合成中负责复制和修复的酶是DNA聚合酶一。
5.合成前导链的RNA引物是RNA聚合酶催化的，合成后随链冈崎片段的RNA引物是引发酶催化的
6. 在 DNA复制过程中，连续合成的子链称前导链，另一条非连续合成的子链称为后随链。
7.DNA后随链合成的起始要一段短的引物，它是由引发酶以核糖核苷酸为底物合成的RNA片段。
8. 复制叉上DNA双螺旋的解旋作用由解旋酶催化的，它利用来源于ATP水解产生的能量沿 DNA链单向移动。在 DNA复制和修复过程中修补 DNA螺旋上缺口的酶称为DNA聚合酶一。
9. 在大肠杆菌中发现了3种 DNA聚合酶。聚合酶一。
10.真核生物中有5种DNA聚合酶。它们是(l)DNA聚合酶α(2)DNA聚合酶ε(3)DNA聚合酶β(4)DNA聚合酶γ(5)DNA聚合酶δ。
11．DNA聚合酶Ⅰ的Klenow大片段是用枯草杆菌蛋白酶切割(1)(2)的活性。
12.真核生物基因启动子包括起始子，GC岛、TATA Box，
I site，R site，TATAAT box。
13．原核生物的启动子包括有三个RNA聚合酶识别位点、转录起点和紧密结合位点以RNA的第一个Nt是G或A。
14．真核生物成熟mRNA的Cap结构特点是甲基化，加尾识别序列是富含A。
15. 写出两种合成后不被切割或拼接的RNA：真核生物中的5S rRNA和原核生物中的mRNA。
16.真核生物的mRNA加工过程中，5’端加上N-7-甲基鸟嘌呤，在3’端加上多聚腺嘌呤化尾，后者由p o1y(A)聚合酶催化。如果被转录基因是不连续的，那么，内含子一定要被切除，并通过剪接过程将外显子连接在一起。这个过程涉及许多RNA分子，如Ul和U2等，它们被统称为snRNA。它们分别与一组蛋白质结合形成snRNP，并进一步地组成40S或60S的结构,叫剪接体。
17.真核生物mRNA的加尾识别序列是AATAA、YGTGTGYY（Y为嘧啶）。
核基因组mRNA内含子剪接的Chambon rule是。snRNA的作用是。切除内含子不需能量，仅由内含子中的A发
生反应来完成。
18. Enhancer存在于非编码序列中，其调控机理是。
19. 氨酰tRNA合成酶(AARS)可使每个氨基酸和它相对应的tRNA分子相偶联形成一个氨酰tRNA分子。
20.核糖体包括两个tRNA分子的结合位点：肽酰tRNA结合区，即 P位点，紧密结合与多肽链延伸尾端连接的 tRNA分子，和氨酰tRNA结合区，即 A 位点，结合带有一个氨基酸的tRNA分子。
21．释放因子蛋白与核糖体上 A位点的终止密码结合，导致肽基转移酶水解连接新生多肽与tRNA分子的化学键。
22．任何mRNA序列能以三种可读框的形式被翻译，而且每一种都对应一种完全不同的多肽链。
23．在所有细胞中，都有一种特别的起始tRNA识别起始密码子 AUG，它携带一种特别的氨基酸，即甲硫氨酸，作为蛋白质合成的起始氨基酸。
24．核糖体沿着 mRNA前进，它需要另一个延伸因子EF-G ，这一步需要GTP 的水解。当核糖体遇到终止密码
( UAA 、UGA 、UAG )的时候，延长作用结束，核糖体和新合成的多肽被释放出来。翻译的最后一步被称为终止，并且需要—套释放因子。
25. tRNA的二级结构是三叶草结构，三级结构是倒“L”形结构。起始tRNA识别起始密码子 AUG，它携带一种特别的氨基酸，即甲硫氨酸，作为蛋白质合成的起始氨基酸。
26. 乳糖操纵子通过和两种方式调控，色氨酸合成酶操纵子通
过和两种方式调控。
1. 定义重组DNA 技术将不同的DNA 片段按照人们的设计定向连接起来，然后在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状。 2. 说出分子生物学的主要研究内容 1. DNA 重组技术 2. 基因表达研究调控 3. 生物大分子的结构功能研究 4. 基因组、功能基因 组与生物信息学研究 3. 简述DNA 的一、二、三级结构 一级： 4 种核苷酸的连接及排列顺序，表示了该DNA 分子的化学成分 二级： 2 条多核苷酸连反向平行盘绕所形成的双螺旋结构 三级：DNA 双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定的空间结构 4. 原核生物DNA 具有哪些不同于真核生物DNA 的特征？ ①DNA双螺旋是由2条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成，多核苷酸的方向由核苷酸间的磷酸二酯键的走向决定，一条是5---3，另一条是3---5②DNA双螺旋中脱氧核糖和磷酸 交替连接，排在外侧构成基本骨架，碱基排在内侧③两条链上的碱基通过氢键相结合，形成碱基对 5. DNA 双螺旋结构模型是由谁提出的？沃森和克里克 6. DNA 以何种方式进行复制，如何保证DNA 复制的准确性？ 线性DNA 的双链复制：将线性复制子转变为环状或者多聚分子，在DNA 末端形成发卡式结构，使分子没有游离末端，在某种蛋白质的介入下在真正的末端上启动复制。环状DNA 复制：B型、滚环型、D型 ①以亲代DNA 分子为模板进行半保留复制，复制时严格按照碱基配对原则 ②DNA聚合酶I非主要聚合酶，可确保DNA合成的准确性
③DNA修复系统：错配修复、切除修复、重组修复、DNA直接修复、SOS系统 7. 简述原核生物DNA复制特点 只有一个复制起点，复制起始点上可以连续开始新的DNA复制，变现为虽只有一个复制单元，但可以有多个复制叉 8. 真核生物DNA的复制在哪些水平上受到调控？ 细胞生活周期水平调控；染色体水平调控；复制子水平调控 9. 细胞通过哪几种修复系统对DNA损伤进行修复？ 错配修复，恢复错配；切除修复，切除突变的碱基和核苷酸片段；重组修复，复制后的修复；DNA直接修复，修复嘧啶二聚体；SOS系统，DNA的修复，导致变异 10?什么是转座子？分为哪些种类？ 是存在于染色体DNA上可自主复制和移动的基本单位。可分为插入序列和复合型转座子 11?什么是编码链？什么是模板链？ 与mRNA序列相同的那条DNA链称为编码链，另一条根据碱基互补配对原则指导mRNA 合成DNA链称为模板链 12. 简述RNA的种类及其生物学作用 mRNA :编码了一个或多个多肽链序列。 tRNA :把mRNA上的遗传信息变为多肽中的氨基酸信息。 rRNA :是核糖体中的主要成分。 hnRNA :由DNA 转录生成的原始转录产物。 snRNA :核小RNA，在前体mRNA 加工中，参与去除内含子。 snoRNA :核仁小RNA，主要参与rRNA及其它RNA的修饰、加工、成熟等过程。 scRNA :细胞质小RNA在蛋白质合成过程起作用。
分子生物学与基因工程复习重点 第一讲绪论 1、分子生物学与基因工程的含义 从狭义上讲，分子生物学主要是研究生物体主要遗传物质-基因或DNA的结构及其复制、转录、表达和调节控制等过程的科学。 基因工程是一项将生物的某个基因通过载体运送到另一种生物的活体细胞中，并使之无性繁殖和行使正常功能，从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术。 2、分子生物学与基因工程的发展简史，特别是里程碑事件，要求掌握其必要的理由 上个世纪50年代，Watson和Crick提出了的DNA双螺旋模型； 60年代，法国科学家Jacob和Monod提出了的乳糖操纵子模型； 70年代，Berg首先发现了DNA连接酶，并构建了世界上第一个重组DNA分子； 80年代，Mullis发明了聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）技术； 90年代，开展了“人类基因组计划”和模式生物的基因组测序，分子生物学进入“基因组时代”； 目前，分子生物学进入了“后基因组时代”或“蛋白质组时代”。 3、分子生物学与基因工程的专业地位与作用：从专业基础课角度阐述对专业课程的支 撑作用 第二讲核酸概述 1、核酸的化学组成（图画说明） 2、核酸的种类与特点：DNA和RNA的区别 （1）DNA含的糖分子是脱氧核糖，RNA含的是核糖； （2）DNA含有的碱基是腺嘌呤（A）、胞嘧啶（C）、鸟嘌呤（G）和胸腺嘧啶（T），RNA含有的碱基前3个与DNA完全相同，只有最后一个胸腺嘧啶被尿嘧啶（U）所代替； （3）DNA通常是双链，而RNA主要为单链；
（4）DNA的分子链一般较长，而RNA分子链较短。 3、DNA作为遗传物质的直接和间接证据； 间接： （1）一种生物不同组织的细胞，不论年龄大小，功能如何，它的DNA含量是恒定的，而生殖细胞精子的DNA含量则刚好是体细胞的一半。多倍体生物细胞的DNA含量是按其染色体倍数性的增加而递增的，但细胞核里的蛋白质并没有相似的分布规律。 （2）DNA在代谢上较稳定。 （3）DNA是所有生物的染色体所共有的，而某些生物的染色体上则没有蛋白质。（4）DNA通常只存在于细胞核染色体上，但某些能自体复制的细胞器，如线粒体、叶绿体有其自己的DNA。 （5）在各类生物中能引起DNA结构改变的化学物质都可引起基因突变。 直接：肺炎链球菌试验、噬菌体侵染实验 4、DNA的变性与复性：两者的含义与特点及应用 变性：它是指当双螺旋DNA加热至生理温度以上（接近100oC）时，它就失去生理活性。这时DNA双股链间的氢键断裂，最后双股链完全分开并成为无规则线团的过程。简而言之，就是DNA从双链变成单链的过程。增色效应：它是指在DNA的变性过程中，它在260 nm的吸收值先是缓慢上升，到达某一温度后即骤然上升的效应。 复性：它是指热变性的DNA如缓慢冷却，已分开的互补链又可能重新缔合成双螺旋的过程。复性的速度与DNA的浓度有关，因为两互补序列间的配对决定于它们碰撞频率。DNA复性的应用-分子杂交：由DNA复性研究发展成的一种实验技术是分子杂交技术。杂交可发生在DNA和DNA或DNA与RNA间。 5、Tm的含义与影响因素 Tm的含义：是指吸收值增加的中点。 影响因素： 1）DNA序列中G + C的含量或比例含量越高，Tm值也越大（决定性因素）；2）溶液的离子强度 3）核酸分子的长度有关：核酸分子越长，Tm值越大
分子生物学复习提纲 一．名词解释 （1）Ori ：原核生物基因质粒的复制起始位点，是四个高度保守的19bp组成的正向重复序列，只有ori能被宿主细胞复制蛋白质识别的质粒才能在该种细胞中复制。 ARS：自主复制序列，是真核生物DNA复制的起点，包括数个复制起始必须的保守区。不同的ARS序列的共同特征是一个被称为A区的11bp的保守序列。（2）Promoter：启动子，与基因表达启动有关的顺式作用元件，是结构基因的重要成分，它是位于转录起始位点5’端上游区大约100~200bp以内的具有独立功能的DNA序列，能活化RNA 聚合酶，使之与模板ＤＮＡ准确地相结合并具有转录起始的特异性。 （3）r-independent termination不依赖r因子的终止，指在不依赖r因子的终止反应中，没有任何其他因子的参与，核心酶也能在某些位点终止转录。（强终止子） （4）SD sequence：ＳＤ序列（核糖体小亚基识别位点），存在于原核生物起始密码ＡＵＧ上游７～１２个核苷酸处的一种４～７个核苷酸的保守片段，它与１６ＳｒＲＮＡ３’端反向互补，所以可以将mRNA的AUG起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。 Kozak sequence：存在于真核生物mRNA的一段序列，核糖体能够识别mRNA 上的这段序列，并把它作为翻译起始位点。 （5）Operator：操纵基因，与一个或者一组结构基因相邻近，并且能够与一些特异的阻遏蛋白相互作用，从而控制邻近的结构基因表达的基因。 Operon：操纵子，是指原核生物中由一个或多个相关基因以及转录翻译调控元件组成的基因表达单元。包括操纵基因、结构基因、启动基因。 （6）Enhancer：增强子，能强化转录起始的序列的为增强子或强化子Silencer：沉默子，可降低基因启动子转录活性的一段DNA顺式元件。与增强子作用相反。 （7）cis-acting element ：顺式作用元件，存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列，包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件，本身不编码任何蛋白质，仅仅提供一个作用位点，与反式作用因子相互作用参与基因表达调控。 trans-acting factor：反式作用因子，是指直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。具有三个功能结构域，即DNA结合域、转录结合域、结合其他结合蛋白的结构域。 （8）Open reading frame (ORF)：开放式阅读框架，是指一组连续的含有三联密码子的能够被翻译成为多肽链的DNA序列。它由起始密码子开始，到终止密码子结束。 （9）Gene：基因，产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。（能转录且具有生物学功能的DNA/RNA的序列。）
分子生物学试题及答案
分子生物学试题及答案一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。
除了5’ 3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（ IF-2 ）和（IF-3 ）。4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。 5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（ DNA重组技术）三部分。 7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（ hnRNA在转变为mRNA 的过程中经过剪接，）、
生物化学与分子生物学重点(1) https://www.doczj.com/doc/f18988331.html, 2006-11-13 23:44:37 来源：绿色生命网 第一章绪论 一、生物化学的的概念： 生物化学（biochemistry)是利用化学的原理与方法去探讨生命的一门科学，它是介于化学、生物学及物理学之间的一门边缘学科。 二、生物化学的发展： 1．叙述生物化学阶段：是生物化学发展的萌芽阶段，其主要的工作是分析和研究生物体的组成成分以及生物体的分泌物和排泄物。 2．动态生物化学阶段：是生物化学蓬勃发展的时期。就在这一时期，人们基本上弄清了生物体内各种主要化学物质的代谢途径。 3．分子生物学阶段：这一阶段的主要研究工作就是探讨各种生物大分子的结构与其功能之间的关系。 三、生物化学研究的主要方面： 1．生物体的物质组成：高等生物体主要由蛋白质、核酸、糖类、脂类以及水、无机盐等组成，此外还含有一些低分子物质。 2．物质代谢：物质代谢的基本过程主要包括三大步骤：消化、吸收→中间代谢→排泄。其中，中间代谢过程是在细胞内进行的，最为复杂的化学变化过程，它包括合成代谢，分解代谢，物质互变，代谢调控，能量代谢几方面的内容。 3．细胞信号转导：细胞内存在多条信号转导途径，而这些途径之间通过一定的方式方式相互交织在一起，从而构成了非常复杂的信号转导网络，调控细胞的代谢、生理活动及生长分化。 4．生物分子的结构与功能：通过对生物大分子结构的理解，揭示结构与功能之间的关系。 5．遗传与繁殖：对生物体遗传与繁殖的分子机制的研究，也是现代生物化学与分子生物学研究的
一个重要内容。 第二章蛋白质的结构与功能 一、氨基酸： 1．结构特点：氨基酸(amino acid)是蛋白质分子的基本组成单位。构成天然蛋白质分子的氨基酸约有20种，除脯氨酸为α-亚氨基酸、甘氨酸不含手性碳原子外，其余氨基酸均为L-α-氨基酸。 2．分类：根据氨基酸的R基团的极性大小可将氨基酸分为四类：① 非极性中性氨基酸(8种)； ② 极性中性氨基酸(7种)；③ 酸性氨基酸(Glu和Asp)；④ 碱性氨基酸(Lys、Arg和His)。 二、肽键与肽链： 肽键(peptide bond)是指由一分子氨基酸的α-羧基与另一分子氨基酸的α-氨基经脱水而形成的共价键(-CO-NH-)。氨基酸分子在参与形成肽键之后，由于脱水而结构不完整，称为氨基酸残基。每条多肽链都有两端：即自由氨基端(N端)与自由羧基端(C端)，肽链的方向是N端→C端。 三、肽键平面(肽单位)： 肽键具有部分双键的性质，不能自由旋转；组成肽键的四个原子及其相邻的两个α碳原子处在同一个平面上，为刚性平面结构，称为肽键平面。 四、蛋白质的分子结构： 蛋白质的分子结构可人为分为一级、二级、三级和四级结构等层次。一级结构为线状结构，二、三、四级结构为空间结构。 1．一级结构：指多肽链中氨基酸的排列顺序，其维系键是肽键。蛋白质的一级结构决定其空间结构。 2．二级结构：指多肽链主链骨架盘绕折叠而形成的构象，借氢键维系。主要有以下几种类型： ⑴α-螺旋：其结构特征为：①主链骨架围绕中心轴盘绕形成右手螺旋；②螺旋每上升一圈是3.6个氨基酸残基，螺距为0.54nm；③ 相邻螺旋圈之间形成许多氢键；④ 侧链基团位于螺旋的外侧。 影响α-螺旋形成的因素主要是：① 存在侧链基团较大的氨基酸残基；② 连续存在带相同电荷的氨基酸残基；③ 存在脯氨酸残基。 ⑵β-折叠：其结构特征为：① 若干条肽链或肽段平行或反平行排列成片；② 所有肽键的C=O和
选择题 1．证明DNA 是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2 噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是（C ）。 A．从被感染的生物体内重新分离得到DNA 作为疾病的致病剂 B．DNA 突变导致毒性丧失 C．生物体吸收的外源DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能 D．DNA 是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子 E．真核心生物、原核生物、病毒的DNA 能相互混合并彼此替代 2.1953 年Watson 和Crick 提出（A ）。 A．多核苷酸DNA 链通过氢键连接成一个双螺旋 B．DNA 的复制是半保留的，常常形成亲本-子代双螺旋杂合链 C．三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D．遗传物质通常是DNA 而非RNA E．分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变 3．DNA 双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键，并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA 的解链温度的正确描述？（C,D ） A．哺乳动物DNA 约为45℃，因此发烧时体温高于42℃是十分危险的 B．依赖于A-T 含量，因为A-T 含量越高则双链分开所需要的能量越少 C．是双链DNA 中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值 D．可通过碱基在260nm 的特征吸收峰的改变来确定 E．就是单链发生断裂（磷酸二酯键断裂）时的温度 4．Watson和Crick提出的经典DNA双螺旋结构属于(B) A．A型B．B型C．Z型 5．多种密码子编码一个氨基酸的现象，称为密码子的(B) A．连续性B．简并性C．通用性D．摆动性 6．真核基因经常被断开（B,D,E ）。 A．反映了真核生物的mRNA 是多顺反子 B．因为编码序列外显子被非编码序列内含子所分隔 C．因为真核生物的DNA 为线性而且被分开在各个染色体上，所以同一个基因的不同部分可能分布于不同的染色体上 D. 表明初始转录产物必须被加工后才可被翻译 E．表明真核基因可能有多种表达产物，因为它有可能在mRNA 加工的过程中采用不同的外显子重组方式 7．选出下列所有正确的叙述。（A,C ） A．外显子以相同顺序存在于基因组和cDNA 中 B．内含子经常可以被翻译 C．人体内所有的细胞具有相同的一套基因 D．人体内所有的细胞表达相同的一套基因 E．人体内所有的细胞以相同的方式剪接每个基因的mRNA 8．下列哪些基因以典型的串联形式存在于真核生物 基因组？（B,C ） A．珠蛋白基因B．组蛋白基因 C．rRNA 基因D．肌动蛋白基因 9．细胞器基因组（ A ）。
一. 名词解释 1. C值及C值反常反应：所谓C值，通常是指一种生物单倍体基因组DNA的总量。真核细胞基因的最大特点是它含有大量的重复序列，而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开，这就是C值反常现象。 2. 半保留复制：DNA生物合成时，母链DNA解开分为两股单链，各自为模板按碱基互补规律，合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA，一股从亲本完全接受过来，另一股则完全从新合成。两个子细胞的DNA碱基序列一致。 3 半不连续复制：前导链连续复制而随从链不连续复制，就是复制的半不连续性。 4 引发体：复制的起始含有解螺旋酶.DNA C蛋白.引物酶和DNA复制起始区域的复合结构称为引发体。 5. DNA损伤：在复制过程中发生的DNA突变体称为DNA损伤。 6 转座子：是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。 7. 中心法则：通过DNA的复制把遗传信息由亲代传递给子代，遗传信息由DNA传递到RNA，最后翻译成特异的蛋白质.RNA还以逆转录的方式将遗传信息体传递给DNA分子。这种遗传信息的流向称为中心法则。 8 编码链：双链DNA中，不能进行转录的那一条DNA链，该链的核苷酸序列与转录生成的RNA的序列一致，又称意义链。 9. 转录因子：能直接或间接辨认和结合转录上游区段DNA的蛋白质，称反式作用因子。在反式作用因子中，直接或间接结合DNA聚合酶的，则称为转录因子。 10 RNA编辑：是某些RNA，特别是mRNA前体的一种加工方式，如插入，删除或取代一些核苷酸残基，导致DNA所编码的遗传信息发生改变，因为经过编辑mRNA序列发生了不同于模板DNA的变化。 11 cDNA：互补DNA，是以mRNA为模板，按碱基互补规律，合成与mRNA互补的DNA 单链。 12 RNA选择性剪接：是指不同的剪切方式从一个mRNA前体产生不同的mRNA剪接异构体的过程。 13 GU-AG法则：多数细胞核mRNA前体中内含子的5’边界序列为GU，3’边界，序列为AG。因此，GU表示供体先借点的5’端，AG代表接纳体衔接点3’端序列。习惯上，这种保守序列模式称为GU-AG法则。 14. 顺反子：遗传学上将编码一个多肽链的遗传单位，称为顺反子。真核mRNA只编码一种蛋白质，为单顺反子。 15. 翻译：以mRNA为模板，氨酰-tRNA为原料直接供体，在多种蛋白质因子和酶的参与下，在核糖体上将mRNA分子上的核苷酸顺序表达为有特定氨基酸顺序的蛋白质的过程。 16. 摆动假说：Crick为解释反密码子中某些稀有成分的配对以及许多氨基酸有2个以上的密码子的问题而提出的假说。 17. 氨酰-tRNA合成酶：是一类催化氨基酸和tRNA相结合的特异性酶。 18. SD序列：早在1974年，Shine就发现，几种细菌小亚基rRNA3’末端顺序为：5’—ACCUCCUA—3’，它可以和mRNA中离AUG顺序5’侧约9-13个碱基处有一段富含嘌呤碱基AGGA或GAGG互补，后来称此区域为SD。 19. 多核糖体：mRNA同时与若干个核糖体结合形成的念珠转结构，称为多核糖体。 20 核定位序列：蛋白质中的一种常见的结构域，通常为一短的氨基酸序列，它能与核载体相互作用，将蛋白质运进细胞核内。 21. 基因打靶：是指通过DNA定点同源重组，改变基因组中的某一特定基因，从而在生物活体内研究此基因的功能。
分子生物学试题及答案 一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。 3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36 个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。 9．弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。10．魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸（ppGpp）和鸟苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11．上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10 区的TATA、-35 区的TGACA 及增强子，弱化子等。 12．DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13．SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。 14．单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15．考斯质粒：是经过人工构建的一种外源D NA载体，保留噬菌体两端的COS区，与质粒连接构成。16．蓝-白斑筛选：含LacZ基因（编码β半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal（5- 溴-4-氯-3- 吲哚-β-D- 半乳糖苷）产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后，LacZ 基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛 选重组细菌。称之为蓝- 白斑筛选。 17．顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。 18．Klenow 酶：DNA聚合酶I 大片段，只是从DNA聚合酶I 全酶中去除了5' → 3'外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用 多聚dC 和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1．DNA 的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2．RNA 酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1 ）、（IF-2 ）和（IF-3 ）。 4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（DNA重组技术）三部分。7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（T2 噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接，）、 （mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA′3 末端多了一个多聚腺苷酸（polyA）尾巴）。9．蛋白质多亚基形式的优点是（亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法）、（可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响）、（活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭）。 10．蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11．半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP 的启动子S2 进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于
分子生物学复习资料 （第一版） 一名词解释 1 Southern blot / Northern blot—DNA斑迹法 / RNA转移吸印技术。是为了检测待检基因或其表达产物的性质和数量（基因拷贝数）常用的核酸分子杂交技术。二者均属于印迹转移杂交术，所不同的是前者用于检测DNA样品；后者用于检测RNA样品。 2 cis-acting element / trans-acting factor—顺式作用元件 / 反式作用因子。均为真核生物基因中的转录调控序列。顺式作用元件是与结构基因表达调控相关、能被基因调控蛋白特异性识别和结合的特定DNA序列，包括启动子和上游启动子元件、增强子、反应元件和poly （A）加尾信号。反式作用因子是能与顺式作用元件特异性结合、对基因表达的转录起始过程有调控作用的蛋白质因子，如RNA聚合酶、转录因子、转录激活因子、抑制因子。 3VNTR / STR—可变数目串联重复序列 / 短串联重复。均为非编码区的串联重复序列。 前者也叫高度可变的小卫星DNA，重复单位约9～24bp,重复次数变化大,变化高度多态性；后者也叫微卫星DNA，重复单位约2～6 bp，重复次数约10～60次，总长度通常小于150bp 。（参考第7题） 4 viral oncogene / cellular oncogene—病毒癌基因 / 细胞癌基因。病毒癌基因指存在于逆转录病毒中、体外能使细胞转化、体内能导致肿瘤发生的基因；细胞癌基因也叫原癌基因，指存在于细胞内，与病毒癌基因同源的基因序列。正常情况下不激活，与细胞增殖相关，是维持机体正常生命活动所必须的，在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强时，使细胞过度增殖，从而形成肿瘤。 5 ORF / UTR—开放阅读框 / 非翻译区。均指在mRNA中的核苷酸序列。前者是特定蛋白质多肽链的序列信息，从起始密码子开始到终止密码子结束，决定蛋白质分子的一级功能；后者是位于前者的5＇端上游和3＇端下游的、没有编码功能的序列，主要参与翻译起始调控，为前者的多肽链序列信息转变为多肽链所必需。 6 enhancer / silencer—增强子 / 沉默子。均为顺式作用元件。前者是一段含多个作用元件的短DNA序列，可特异性与转录因子结合，增强基因的转录活性，可以位于基因任何位置，通常在转录起始点上游-100到-300个碱基对处；后者是前者内含的负调控序列，结合特异蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。 7 micro-satellite / minisatellite—微卫星DNA / 小卫星DNA 。卫星DNA是出现在非编码区的串联重复序列，特点是有固定重复单位且重复单位首尾相连形成重复序列片段，串联重复单位长短不等，重复次数大小不一。微卫星DNA即STR；小卫星DNA分为高度可变的小卫星DNA（即VNTR）和端粒DNA。（参考第3题） 8 SNP / RFLP—单核苷酸多态性 / 限制性片段长度多态性。前者是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性，它是人类遗传变异中最常见的一种，占所
现代分子生物学考研复习资料整理 第一章绪论 分子生物学：是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构及其重要性、规律性和相互关系的科学 分子生物学的主要研究内容 1、DNA重组技术 2、基因表达调控研究 3、生物大分子的结构功能研究——结构分子生物学 4、基因组、功能基因组与生物信息学研究 5、DNA的复制转录和翻译 第二章染色体与DNA 半保留复制：DNA在复制过程中碱基间的氢键首先断裂，双螺旋解旋并被分开，每条链分别作为模板合成新链，产生互补的两条链。这样新形成的两个DNA分子与原来DNA分子的碱基顺序完全一样，因此，每个子代分子的一条链来自亲代DNA，另一条链则是新合成的，所以这种复制方式被称为DNA半保留复制 DNA半不连续复制：DNA双螺旋的两条链反向平行，复制时，前导链DNA的合成以5′-3′方向，随着亲本双链体的解开而连续进行复制；后随链在合成过程中，一段亲本DNA单链首先暴露出来，然后以与复制叉移动相反的方向、按照5′-3′方向合成一系列的冈崎片段，然后再把它们连接成完整的后随链，这种前导链的连续复制和后随链的不连续复制称为DNA 的半不连续复制 原核生物基因组结构特点：1、基因组很小，大多只有一条染色体2、结构简练3、存在转录单元，多顺反子4、有重叠基因 真核生物基因组的结构特点：1、真核基因组庞大，一般都远大于原核生物的基因组2、真核基因组存在大量的重复序列3、真核基因组的大部分为非编码序列，占整个基因组序列的90％以上，该特点是真核生物与细菌和病毒之间最主要区别4、真核基因组的转录产物为单顺反子5、真核基因是断裂基因，有内含子结构6、真核基因组存在大量的顺式作用元件，包括启动子、增强子，沉默子等7、真核基因组中存在大量的DNA多态性8、真核基因组具有端粒结构 DNA转座（移位）是由可移位因子介导的遗传物质重排现象 DNA转座的遗传学效应：1、转座引入插入突变2、转座产生新的基因3、转座产生的染色体畸变4、转座引起生物进化 转座子分为插入序列和复合型转座子两大类 环状DNA复制方式：θ型、滚环型和D-环型 第三章生物信息的传递（上）从DNA到RNA 转录：指拷贝出一条与DNA链序列完全相同的RNA单链的过程 启动子：是一段位于结构基因5′段上游区的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确地结合并具有转录起始的特异性 原核生物启动子结构：存在位于-10bp处的TATA区和-35bp处的TTGACA区，其是RNA聚合酶与启动子的结合位点，能与σ因子相互识别而具有很高的亲和力 终止子：是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列（促进转录终止的DNA序列） 终止子的类型：不依赖于ρ因子和依赖于ρ因子 增强子：能增强或促进转录起始的序列 增强子的特点：1、远距离效应2、无方向性3、顺式调节4、无物种和基因的特异性5、具
1.定义重组DNA技术 将不同的DNA片段按照人们的设计定向连接起来，然后在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状。 2.说出分子生物学的主要研究内容 1.DNA重组技术 2.基因表达研究调控 3.生物大分子的结构功能研究 4.基因组、功能基因组与生物信息学研究 3.简述DNA的一、二、三级结构 一级：4种核苷酸的连接及排列顺序，表示了该DNA分子的化学成分 二级：2条多核苷酸连反向平行盘绕所形成的双螺旋结构 三级：DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定的空间结构 4.原核生物DNA具有哪些不同于真核生物DNA的特征？ ①DNA双螺旋是由2条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成，多核苷酸的方向由核苷酸间的磷酸二酯键的走向决定，一条是5---3，另一条是3---5②DNA双螺旋中脱氧核糖和磷酸交替连接，排在外侧构成基本骨架，碱基排在内侧③两条链上的碱基通过氢键相结合，形成碱基对 5.DNA双螺旋结构模型是由谁提出的？沃森和克里克 6.DNA以何种方式进行复制，如何保证DNA复制的准确性？ 线性DNA的双链复制：将线性复制子转变为环状或者多聚分子，在DNA末端形成发卡式结构，使分子没有游离末端，在某种蛋白质的介入下在真正的末端上启动复制。环状DNA 复制：θ型、滚环型、D型 ①以亲代DNA分子为模板进行半保留复制，复制时严格按照碱基配对原则 ②DNA聚合酶I 非主要聚合酶，可确保DNA合成的准确性
③DNA修复系统：错配修复、切除修复、重组修复、DNA直接修复、SOS系统 7.简述原核生物DNA复制特点 只有一个复制起点，复制起始点上可以连续开始新的DNA复制，变现为虽只有一个复制单元，但可以有多个复制叉 8.真核生物DNA的复制在哪些水平上受到调控？ 细胞生活周期水平调控；染色体水平调控；复制子水平调控 9.细胞通过哪几种修复系统对DNA损伤进行修复？ 错配修复，恢复错配；切除修复，切除突变的碱基和核苷酸片段；重组修复，复制后的修复；DNA直接修复，修复嘧啶二聚体；SOS系统，DNA的修复，导致变异 10.什么是转座子？分为哪些种类？ 是存在于染色体DNA上可自主复制和移动的基本单位。可分为插入序列和复合型转座子11.什么是编码链？什么是模板链？ 与mRNA序列相同的那条DNA链称为编码链，另一条根据碱基互补配对原则指导mRNA 合成DNA链称为模板链 12.简述RNA的种类及其生物学作用 mRNA：编码了一个或多个多肽链序列。 tRNA：把mRNA上的遗传信息变为多肽中的氨基酸信息。 rRNA：是核糖体中的主要成分。 hnRNA：由DNA转录生成的原始转录产物。 snRNA：核小RNA，在前体mRNA加工中，参与去除内含子。 snoRNA：核仁小RNA，主要参与rRNA及其它RNA的修饰、加工、成熟等过程。scRNA：细胞质小RNA在蛋白质合成过程起作用。
一，名词解释 1.（Northern blot）Northern印迹杂交。这是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。Northern 印迹杂交的RNA吸印与Southern印迹杂交的DNA吸印方法类似，RNA印迹技术正好与DNA相对应，故被称为Northern印迹杂交。 （Southern blot）Southern印迹杂交是一种常用的DNA定量的分子生物学方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量。 2.（cis-acting element）顺式作用元件。存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列，它们的作用是参与基因表达的调控，本身不编码任何蛋白质, 仅仅提供一个作用位点, 要与反式作用因子相互作用而起作用。 (trans-acting factor)反式作用因子。是指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。 3. (VNTR )可变数目串联重复多态性。可变数目串联重复序列是重复单位为9~24bp，重复次数变化大，呈高度多态性的DNA序列，又称小卫星DNA，拷贝数10~1000不等。 （STR）短串联重复序列。又称微卫星DNA，是一类简单的寡核苷酸串联重复序列，其重复单位为2~6bp，重复次数10~60次左右，其长度通常小于150bp，分布在所有染色体中。 4.（viral oncogene）病毒癌基因。病毒（大多是逆转录病毒）具有的一种可以使宿主细胞发生癌变的基因。源自细胞中的正常基因。 (cell-oncogene)细胞癌基因。存在于正常的细胞基因组中，与病毒癌基因有同源序列，具有促进正常细胞生长、增殖、分化和发育等生理功能。在正常细胞内未激活的细胞癌基因叫原癌基因，当其受到某些条件激活时，结构和表达发生异常，能使细胞发生恶性转化。 5. (ORF) 开放阅读框。在mRNA的核苷酸序列中，有一段序列是一个特定蛋白质多肽链的序列信息，这一段核苷酸序列从起始密码子开始，到终止密码子结束。 （UTR）非翻译区。是mRNA分子两端的非编码片段。 6.（enhancer）增强子。存在于基因组中的对基因表达有调控作用的DNA调控元件。位置不定，结合转录因子后，可增强基因表达。 （silencer）沉默子。可降低基因启动子转录活性的一段DNA顺式元件。与增强子作用相反。 7.（microsatellite DNA）微卫星DNA。是一类简单的寡核苷酸串联重复序列，其重复单位为2~6bp，重复次数10~60次左右，其长度通常小于150bp，分布在所有染色体中。 (Minisatellite DNA) 小卫星DNA。可变数目串联重复序列是重复单位为9~24bp，重复次数变化大，呈高度多态性的DNA序列，拷贝数10~1000不等。 8. （RFLP）限制性片段长度多态性。是指基因型之间限制性片段长度的差异，这种差异是由限制性酶切位点上碱基的插入、缺失、重排或点突变所引起的。用于分析相关基因多态性的技术。即用同一种限制性内切酶，完全酶切来源于同一物种不同个体的基因组DNA，从而获得长度各异的DNA片段(酶切谱)。 （SNP）单核苷酸多态性。不同物种、个体基因组DNA序列同一位置上的单个核苷酸存在差别的现象。有这种差别的基因座、DNA序列等可作为基因组作图的标志。人基因组上平均约每1000个核苷酸即可能出现1个单核苷酸多态性的变化，其中有些单核苷酸多态性可能与疾病有关，但可能大多数与疾病无关。单核苷酸多态性是研究人类家族和动植物品系遗传变异的重要依据。 9. (cloning vector)克隆载体。可携带插入的外源DNA片段并可转入受体细胞中大量扩增的DNA分子。该分子中含有能够在受体细胞中自主复制的序列和筛选标记，常用于外源基因的克隆，如噬菌体或质粒。 （expression vector）表达载体。能使插入基因进入宿主细胞表达的克隆载体，包括原核表达载体和真核表达载体，可以是质粒、噬菌体或病毒等。典型的表达载体带有能使基因表达的调控序列，并在适当位置有可插入外源基因的限制性内切酶位点。 10.（optional exon）外显子选择。是指在不同的剪接方式中，某一个外显子（或几个外显子）可以在成熟的mRNA中保留，也可以通过剪接过程被去掉。所以，至少有两种剪接方式，一是外显子全部保留，二是删除一个或几个外显子。 （optional intron）内含子选择。是指在不同的剪接方式中，内含子可以被完全去掉，也可以有一个内含子被保留在成熟的mRNA中。有两种剪接方式，一是内含子全部删除，二是保留某一个内含子。 11.（promoter）启动子。DNA分子上能与RNA聚合酶结合并形成转录起始复合体的区域。在许多情况下，还包括促进这一过程的调节蛋白的结合位点。 （terminator）终止子。转录过程中能够终止RNA聚合酶转录的DNA序列。使RNA合成终止。。①转录过程产生RNA 的一段可终止转录的茎-环结构序列；②位于模板基因下游该结构所对应的DNA序列。在大肠杆菌中有依赖于ρ或不依赖于ρ的两类终止子。 12.（leader sequence）前导序列。mRNA 5′端的核苷酸片段。位于翻译起始密码子AUG之前。在真核生物中前导序列通常是不翻译的；在原核生物中，前导序列含有的SD序列可与核糖体小亚基的16S rRNA相配对，置起始密码子于核糖体上适当位置，以启动翻译过程。 （SD sequence）SD序列。信使核糖核酸(mRNA)翻译起点上游与原核16S 核糖体RNA或真核18S rRNA 3′端富含嘧啶的7核苷酸序列互补的富含嘌呤的3～7个核苷酸序列(AGGAGG)，是核糖体小亚基与mRNA结合并形成正确的前起始复合体的一段序列。 13.（gene）基因。编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位，是染色体或基因组的一段DNA序列
现代分子生物学 复习提纲 第一章绪论 第一节分子生物学的基本含义及主要研究内容 1 分子生物学Molecular Biology的基本含义 ?广义的分子生物学：以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究 对象，从分子水平阐明生命现象和生物学规律。 ?狭义的分子生物学：偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调控 等过程，也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 1.1 分子生物学的三大原则 1) 构成生物大分子的单体是相同的 2) 生物遗传信息表达的中心法则相同 3) 生物大分子单体的排列（核苷酸、氨基酸）的不同 1.3 分子生物学的研究内容 ●DNA重组技术（基因工程） ●基因的表达调控 ●生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学） ●基因组、功能基因组与生物信息学研究 第二节分子生物学发展简史 1 准备和酝酿阶段 ?时间：19世纪后期到20世纪50年代初。 ?确定了生物遗传的物质基础是DNA。 DNA是遗传物质的证明实验一：肺炎双球菌转化实验 DNA是遗传物质的证明实验二：噬菌体感染大肠杆菌实验 RNA也是重要的遗传物质-----烟草花叶病毒的感染和繁殖过程 2 建立和发展阶段 ?1953年Watson和Crick的DNA双螺旋结构模型作为现代分子生物学诞生的里程碑。 ?主要进展包括： ?遗传信息传递中心法则的建立 3 发展阶段 ?基因工程技术作为新的里程碑，标志着人类深入认识生命本质并能动改造生命的新时期开始。 ? 第三节分子生物学与其他学科的关系 思考 ?证明DNA是遗传物质的实验有哪些？ ?分子生物学的主要研究内容。 ?列举5～10位获诺贝尔奖的科学家，简要说明其贡献。 第二章染色体与DNA
1）分子生物学 从分子水平上研究生命现象物质基础的学科。研究细胞成分的物理、化学的性质和变化以及这些性质和变化与生命现象的关系，如遗传信息的传递，基因的结构、复制、转录、翻译、表达调控和表达产物的生理功能，以及细胞信号的转导等。 2）移动基因： 又称转座子。由于它可以从染色体基因组上的一个位置转移到另一个位置，是指在不同染色体之间跃迁，因此也称跳跃基因。 3）假基因： 有些基因核苷酸序列与相应的正常功能基因基本相同，但却不能合成出功能蛋白质，这些失活的基因称为假基因。 4）重叠基因： 所谓重叠基因是指两个或两个以上的基因共有一段DNA序列，或是指一段DNA序列成为两个或两个以上基因的组成部分。 5）基因家族： 是真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因。 6）基因:能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列,是决定遗传性状的功能单位. 7）基因组:细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和. 8）端粒:以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒.该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体,仅在真核细胞染色体末端存在. 9）操纵子:是指数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区(包括启动子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA为多顺反子. 10）顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关,能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列.包括启动子,上游启动子元件,增强子,加尾信号和一些反应元件等. 11）反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节 基因转录活性的蛋白质因子. 12）启动子:是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列. 13）增强子:位于真核基因中远离转录起始点,能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列.它可位于被增强的转录基因的上游或下游,也可相距靶基因较远.