各种属细菌药敏试验解释标准
1.1 常见非苛养菌和苛养菌的药敏试验解释标准
因判定折点每年更新一次，常见非苛养菌（肠杆菌科、铜绿假单胞菌、不动菌属、洋葱伯克霍尔德菌、嗜麦芽窄食单胞菌、其他革兰阴性杆菌、葡萄球菌属和肠球菌属）和常见苛养菌（肺炎链球菌和其他链球菌、流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌）的药敏试验解释标准参照CLSI M100的每年更新版文件。
1.2 不常见苛养菌和不常见非苛养菌的药敏试验解释标准
1.2.1 乏养球菌属和颗粒链球菌属
乏养球菌属和颗粒链球菌属属于苛养菌，是感染性心内膜炎的重要致病菌。首选检测药物为青霉素、头孢噻肟或头孢曲松和万古霉素。来自呼吸道或伤口的分离株不必进行药敏试验，来自无菌部位如血液、深部组织、植入的假体装置，特别是免疫缺陷患者，应进行药敏试验。药敏试验解释标准见表1。
表1 乏养球菌属和颗粒链球菌属的药敏试验解释标准
1.2.2 其他革兰阳性球菌（气球菌属、孪生球菌属、乳球菌属和微球菌属）
气球菌属首选检测药物为青霉素、头孢曲松和万古霉素；孪生球菌属首选检测药物为青霉素、头孢噻肟或头孢曲松、万古霉素；乳球菌属首选检测药物为青霉素或氨苄西林、头孢曲松、万古霉素、克林霉素和红霉素，格氏乳球菌对克林霉素天然耐药。
微球菌属首选检测抗菌药物为青霉素和万古霉素。微球菌属常为污染菌，多次血培养阳性或植入假体装置分离的菌株可进行药敏试验。这些菌属药敏试验解释标准见表2。
表2 气球菌属、孪生球菌属、乳球菌属和微球菌属的药敏试验解释标准
1.2.3 对糖肽类药物天然耐药的革兰阳性菌（无色藻菌属、明串珠菌属、片球菌属、猪红斑丹毒丝菌和乳杆菌属）
无色藻菌属、明串珠菌属和片球菌属
无色藻菌属、片球菌属和明串珠菌属为苛养菌，对万古霉素天然耐药。首选检测抗菌药物为青霉素或氨苄西林。分离自无菌部位如血培养、深部组织的菌株，尤其是免疫缺陷患者无菌部位分离的菌株可进行药敏试验。药敏结果解释标准见表3。
猪红斑丹毒丝菌
猪红斑丹毒丝菌为苛养菌，对万古霉素和氨基糖苷类天然耐药。首选检测抗菌药物为青霉素或氨苄西林。猪红斑丹毒丝菌不必进行药敏试验；但因其引起的心内膜炎的暴发性特质和对常用于革兰阳性菌经验治疗的万古霉素天然耐药，应立即进行药敏试验。对青霉素过敏患者，需检测红霉素和克林霉素的敏感性。药敏试验解释标准详见表4。
乳杆菌属
乳杆菌属通常属于苛养菌。首选检测抗菌药物为青霉素或氨苄西林。干酪乳杆菌、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、唾液乳杆菌、阴道乳杆菌和玉米乳杆菌对万古霉素天然耐药；而嗜酸乳杆菌、卷曲乳杆菌、加氏乳杆菌、惰性乳杆菌、詹氏乳杆菌、约氏乳杆菌和乳酸乳杆菌对万古霉素敏感。美罗培南的MIC值一般比亚胺培南MIC值高2～
3个稀释度。分离自无菌部位如血培养、深部组织等的菌株，尤其是免疫缺陷患者无菌部位分离的菌株可进行药敏试验。药敏试验解释标准详见表4。
表3 对糖肽类药物天然耐药的革兰阳性菌的药敏试验解释标准
1.2.4 棒杆菌属（包括白喉棒状杆菌）、棒状杆菌属（包括隐秘杆菌属、节杆菌属、短杆菌属、纤维单胞菌属、纤维微菌属、皮杆菌属、利夫森菌属、微杆菌属、厄氏菌属、不包括黏滑罗氏菌在内的罗氏菌属、Trueperella和Turicella）和黏滑罗氏菌
棒杆菌属和棒状杆菌属（包括黏滑罗氏菌）通常为苛养菌。棒杆菌属和棒状杆菌属（不包括黏滑罗氏菌）首选检测抗菌药物为青霉素、万古霉素、庆大霉素和红霉素。黏滑罗氏菌首选检测抗菌药物为青霉素和万古霉素。棒状杆菌通常为污染菌。分离自无菌部位如深部组织、脑脊液、血培养（多瓶培养阳性）的菌株，尤其是有植入假体装置、免疫缺陷患者无菌部位分离的菌株可进行药敏试验。药敏试验解释标准详见表4。
表4 棒杆菌属和棒状杆菌属的药敏试验解释标准
1.2.5 需氧芽孢杆菌属（不包括炭疽芽孢杆菌）
需氧芽孢杆菌属（不包括炭疽芽孢杆菌）属于非苛养菌。首选检测抗菌药物为万古霉素、氟喹诺酮类和克林霉素。需氧芽孢杆菌属通常为污染菌。蜡样芽胞杆菌和苏云金芽孢杆菌产广谱β-内酰胺酶，通常对青霉素类和头孢菌素类耐药。需氧芽孢杆菌属通常对万古霉素、大环内酯类、氨基糖苷类和喹诺酮类药物敏感。分离自无菌部位如深部组织、脑脊液、血培养（多瓶培养阳性）的菌株，尤其是有植入假体装置、免疫缺陷或静脉吸毒史患者无菌部位分离的菌株可进行药敏试验。药敏试验解释标准详见表5。
表5 需氧芽孢杆菌属（不包括炭疽芽孢杆菌）的药敏试验解释标准
1.2.6 产单核细胞李斯特菌
产单核细胞李斯特菌通常属于苛养菌，对头孢菌素类天然耐药，首选检测抗菌药物为青霉素或氨苄西林、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑。因产单核细胞李斯特菌通常对氨苄西林或青霉素
敏感，不必进行敏感性检测。单核细胞李斯特菌进行药敏试验仅限于治疗失败或者对青霉素过敏的患者。药敏试验解释标准详见表6。
表6 产单核细胞李斯特菌的药敏试验解释标准
1.2.7 卡他莫拉菌
卡他莫拉菌属于非苛养菌。大部分菌株因产β-内酰胺酶对不耐酶的青霉素（如青霉素、氨苄西林和阿莫西林）表现为耐药；对大环内酯类耐药很少见。首选检测抗菌药物为阿莫西林-克拉维酸、头孢呋辛和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑。流行病学调查或重症感染患者分离的菌株应进行药敏试验，药敏试验解释标准详见表7。
表7 卡他莫拉菌的药敏试验解释标准
1.2.8 苛氧的革兰阴性杆菌（HACEK细菌群和巴斯德菌属）
HACEK细菌群包括凝聚杆菌属、心杆菌属、啮蚀艾肯菌和金杆菌属。HACEK群属于极度苛养菌，首选检测抗菌药物为青霉素、氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻肟或头孢曲松、亚胺培南、环丙沙星或左氧氟沙星和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑。分离自无菌部位如血培养、深部组织等的菌株，尤其是有植入假体装置、免疫缺陷或对青霉素过敏的患者无菌部位分离的菌株可进行药敏试验。分离自咬伤部位的艾肯菌属对阿莫西林-克拉维酸高度敏感，不必进行药敏试验。药敏试验解释标准详见表8。
巴斯德菌属常属于苛养菌，通常对苯唑西林、头孢氨苄和克林霉素耐药，而对氨苄西林、阿莫西林和青霉素的MIC值很少超过0.5 mg/L。首选检测抗菌药物为青霉素类、阿莫西林/克拉维酸、头孢曲松、氟喹诺酮类、大环内酯类、四环素和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑。药敏试验解释标准详见表8。
表8 苛氧的革兰阴性杆菌（HACEK群细菌和巴斯德菌属）的药敏试验解
释标准
1.2.9 气单胞菌属（豚鼠其单胞菌复合体、嗜水气单胞菌复合体和维氏气单胞菌复合体）和弧菌属（包括霍乱弧菌）
气单胞菌属属于非苛养菌，均对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸和头孢唑啉耐药。气单胞菌属首选检测药物为第三代、四代头孢菌素、氟喹诺酮类和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑。气单胞菌属在采用β-内酰胺类抗菌药物治疗时可产生多种诱导性的β-内酰胺酶。携带该类酶的菌株可对超广谱头孢菌素产生耐药。
弧菌属属于嗜盐菌，嗜盐弧菌属常对磺胺类、青霉素类、头孢噻吩和头孢呋辛耐药。霍乱弧菌首选检测药物包括氨苄西林、阿奇霉素、氯霉素、磺胺类、四环素或多西环素和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑。其他弧菌属首选检测抗菌药物包括头孢噻肟、头孢他啶、氟喹诺酮类和四环素或多西环素。
气单胞菌属和弧菌属的药敏试验常限于肠道外分离的菌株。药敏试验解释标准详见表9。
表9 气单胞菌属和弧菌属的药敏试验解释标准
1.2.10 空肠弯曲菌/大肠弯曲菌和幽门螺杆菌
空肠弯曲菌/大肠弯曲菌属于苛养菌，首选检测药物为克林霉素、红霉素和四环素。流行病学筛查或针对经久不愈或严重感染患者体内分离的菌株可进行药敏试验。
幽门螺杆菌属于苛养菌。治疗失败的幽门螺杆菌引起的感染可进行培养和药敏试验。常规检测和报告药物为克拉霉素，不推荐检测甲硝唑的体外敏感性。
空肠弯曲菌/大肠弯曲菌和幽门螺杆菌的药敏试验解释标准详见表10。
表10 空肠弯曲菌/大肠弯曲菌的药敏试验解释标准
1.3 潜在生物恐怖病原菌：炭疽芽孢杆菌、鼠疫耶尔森菌、鼻疽伯克霍尔德菌、类鼻疽伯克霍尔德菌、土拉弗朗西斯菌和布鲁菌属
当鉴定的细菌很有可能是炭疽芽孢杆菌、鼠疫耶尔森菌、鼻疽伯克霍尔德菌、类鼻疽伯克霍尔德菌、土拉弗朗西斯菌和布鲁菌属时，应及时通知感染控制部门。确认这些菌株可能需要做专门的特殊试验，应送至BSL-2级以上且具有法律授权的实验室进行检测，对于极易产生气溶胶的操作应在BSL-3水平实验室进行。潜在生物恐怖病原菌首选抗菌药物、药敏试验的解释标准见表11。
表11 潜在生物恐怖病原菌的药敏试验解释标准
1.4 诺卡菌属和其他需氧放线菌（诺卡菌属、马红球菌及其他红球菌属细菌、戈登菌属、Tsukamurella spp.和链霉菌属）
诺卡菌属和其他需氧放线菌属于专性需氧菌，繁殖速度缓慢（马红球菌生长较快）。首选检测药物阿米卡星、阿莫西林/克拉维酸、头孢曲松、环丙沙星、克拉霉素、亚胺培南、利奈唑胺、米诺环素、莫西沙星、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑和妥布霉素。万古霉素和利福平是治疗马红球菌感染的重要药物，因此马红球菌首选检测药物除此之外应增加万古霉素和利福平。二线抗菌药物为头孢吡肟、头孢噻肟和多西环素。诺卡菌属的药敏试验解释标准见表12。其他需氧放线菌如马红球菌、马杜拉放线菌属、戈登菌属仅报告MIC值，尚无判断折点。
表12 诺卡菌属的药敏试验解释标准
细菌分离培养方法及操作步骤无菌取血液或脏器、淋巴结划线接种于鲜血琼脂平板或血清琼脂平面培养基、普通肉汤培养基,37℃恒温培养24 h,观察其生长特性。目前细菌分离培养的常用方法有平板划线分离法、加热分离法与实验动物分离法。 平板划线接种法 这就是目前临床上最常用的分离接种方法。它可以从被检病料中通过划线可使细菌分离、分散生长而形成单个菌落(有利于从含有多种细菌的标本中分离出目的菌),以便挑选可疑菌落作纯培养加以鉴定。具体操作: 1、右手持接种环,在酒精灯上火焰灭菌; 图1 病料采集图2 接种环灭菌 2、待接种环冷却后,挑取被检料少许,左手持琼脂平板,以食指为
支点,用拇指与无名指将平皿揭开一空隙。大约20℃时,迅速地将接种环轻轻地涂布在培养基的边缘。 3、在涂布处来回移动作曲线形划线接种。(注意:划线时,以腕力使接种环在琼脂平板表面划动,尽量不要划破培养基,划的线条要密,但不能重复旧线,以免培养物形成菌 苔。) 图3 平板划线接种法 4、划线完毕,合上平皿盖,将琼脂平板倒置,放入37℃温箱内培养
18－24小时。 注意:分离培养用的平板培养基应表面干燥,可于临用前置37℃孵育箱内30分钟,这样表面即干燥有利于分离培养,又使培养基预温,对培养某些较娇弱的细菌有利。 细菌药敏试验方法操作步骤药敏试验就是抗菌药使用以前必不可少的一个基本环节,一个正确的药敏结果能够科学的指导养殖户用药,减少抗菌素使用的盲目性,从而减少养殖户损失。在临床实际生产中具备重要意义。 1、在“超净台”中,用经(酒精灯)火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物,以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式; 用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌,以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后,找到第二点划线至平皿的1/2,依次划线,直至细菌均匀密布于平皿。 图4 接种环划线
病原学 细 菌 各 论 总 结 衛卋琦 2014.04.01
第六章球菌 葡萄球菌属 链球菌属 球菌肺炎球菌脑膜炎奈瑟菌 奈瑟球菌属 淋病奈瑟菌 链球菌 生物学性状形态染色G+ 培养特性营养要求高、不分解菊糖、不被胆汁溶解 分类 1、按溶血现象：甲型溶血性链球菌α（多为条件致病 菌）、乙型溶血链球菌β（致病力强）、丙型链球菌（一 般不致病）； 2、按抗原结构：A∽V 20种，对人致病90%属A群； 3、按需氧量：需氧性、兼性厌氧性和厌氧性对人致病主 要为前两者； 抗原构造 抵抗力 不强 60℃ 30min可以杀死，对一般消毒剂敏感 乙型溶血性链球菌对青霉素、红霉素、磺胺类药敏感 致病性致病物质 1、致热外毒素； 2、链球菌溶血素：1、链球菌溶血素O（SLO）可引起心 肌损伤，能加重心肌炎的病变；2、链球菌溶血素S（SLS）对白细胞、血小板和多种组织细胞有破坏作用； 3、M蛋白； 4、透明质酸酶； 5、链激酶使血块溶解或阻止血浆凝固，利于细菌扩 散；重组链激酶已用于心肌梗死； 6、链道酶使脓液稀薄，利于细菌扩散；用于脓胸、输 卵管炎等疾患，解除组织粘连； 所致疾病1、化脓性感染 2、猩红热 3、风湿热和急性肾小球炎
免疫性感染后可获一定免疫力（主要为抗M蛋白抗体）。因其型别多，各型之间无交叉免疫作用，故常发生反复感染 微生物学检查1、直接镜检 2、分离培养与鉴定 3、抗链球菌溶血素O抗体实验 4、 分子生物学法 防治原则 积极治疗，减少传染源。对急性咽峡炎和扁桃体炎患者应早期、彻底治疗，防止风湿病和急性肾小球炎等疾病发生。对A群链球菌感染 者首选青霉素G。 传播途 径 飞沫 肺炎链球菌 生物学性状形态染色G+ 无鞭毛和芽胞有荚膜（人工培养无） 培养特性兼性厌氧性，营养要求高。可分解菊糖，能被胆汁溶解。分类90个血清型 1-3致病力强 抗原构造 与分型 荚膜多糖抗原 C物质 抵抗力 弱 56℃ 20min可杀死。有荚膜抗干燥。对一般消毒剂、 青霉素、红霉素、林可霉素等敏感。 致病性 致病物质荚膜，有抗吞噬作用。 所致疾病大叶型肺炎 免疫性病后有牢固的型特异性免疫 微生物 学检查 1、直接涂片染色镜检 2、分离培养与鉴定 3、动物实验 防治原 则 用荚膜多糖疫苗预防接种、治疗主要采用大剂量青霉素或林可霉素。 奈瑟菌属 项目脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌 生物学性1、形态与染色：呈肾形或豆1、形态与染色：G-双球菌，与脑
一、纸片扩散法 该法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加，抗菌药物的浓度呈对数减少，从而在纸片的周围形成浓度梯度。同时，纸片周围抑菌浓度范围内的菌株不能生长，二抑菌范围外的菌株则可以生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈，不同的抑菌药物的抑菌圈直径因受药物在琼脂中扩散速度的影响而可能不同，抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度，并与该药物对测试菌的MIC呈负相关。 二、稀释法 稀释法药敏试验可用于定量测试抗菌药物对某一细菌的体外活性，分为琼脂稀释法和肉汤稀释法。实验时，抗菌药物的浓度通常经过倍比（lg2）稀释，能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度成为最小抑菌浓度（MIC），一个特定抗菌药物的测试浓度范围应该包含能够检测细菌的解释性折点（敏感、中介和耐药）的浓度，同时也应该包含质控参考菌株的MIC. 2.1 琼脂稀释法首先制备含抗菌药物的琼脂稀释平板。再接种待测菌株，然后是结果判读。 2.2 肉汤稀释法 三、抗生素浓度梯度法 四、自动化仪器法 一、实验材料 普通营养琼脂培养基：可去生化试剂店购买，做不同细菌的药敏试验可选择不同的培养基，如做大肠杆菌的药敏试验可选择普通营养琼脂或麦糠凯培养基。做沙门氏菌可选择血清培养基。 药敏试纸：购买或自制（详见实验准备）
细菌：待做药敏试验的细菌 仪器：接种环、酒精灯、打孔器、牛津杯、移液器、滴头 二、实验准备 2.1 药敏片的准备：购买或自制 2.1.1 制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。经15磅15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。 2.1.2 抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。 2.2 药液的制备（用于商品药的试验）：按商品药的使用治疗量的比例配制药液；如商品药百病消按其说明量治疗量0.01%饮水，可按这个比例配制药液，可取10毫克加入10毫升的水中混匀。此稀释液即为用于做药敏试验的药液。 三、实验操作方法 3.1 药敏片法 3.1.1 在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。（另：可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。要求涂布均匀致密） 3.1.2 将镊子于酒精灯火焰灭菌后略停，取药敏片贴到平皿培养基表面。为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻按几下药敏片。为了使能准确的观察结果，要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基上；一般可在平皿中央贴一片，外周可等距离贴若干片（外周一般可贴七片），每种药敏片的名称要记住。 3.1.3 将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后，观察效果。 3.2 牛津杯法 3.2.1 在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二点划线至平皿的1/2，
2012年细菌耐药检测情况总结分析我院抗菌药物使用情况 根据卫生部《抗菌药物临床应用指导原则》和2009年第38号文件“卫生部办公厅关于抗菌药物临床应用管理有关问题的通知”的相关规定，为进一步加强我院临床微生物监测与细菌耐药工作，建立、完善抗菌药物临床应用与细菌耐药预警机制。为此，检验科对今后我院临床抗菌药物的选用提出如下参考意见： 1、根据相关规定要求： （1）对主要目标细菌耐药率超过30%的抗菌药物，应及时将预警信息通报本机构医务人员。 （2）对主要目标细菌耐药率超过40%的抗菌药物，应慎重经验用药。（3）对主要目标细菌耐药率超过50%的抗菌药物，应参照药敏试验结果选用。 （4）对主要目标细菌耐药率超过75%的抗菌药物，应暂停该类抗菌药物的临床应用，根据追踪细菌耐药监测结果，再决定是否恢复其临床应用。 2、根据2012年细菌耐药性监测结果显示，全年细菌检出数80株，其中占细菌检出率前五位的细菌分别依次为大肠埃希菌（28.7%）、肺炎克雷伯菌（17.5%）、铜绿假单胞菌（15%）、阴沟肠杆菌（8.75%）和金黄色葡萄球菌（5%），该5种检出菌的检出率为74.95%，基本可以反应出我院常见致病菌的情况，总数以革兰氏阴性菌为主。该5种细菌也是我们主要监测的目标细菌。
3、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌在我院临床感染细菌检出率中最高，分别为28.7%与17.5%。两种细菌都属于肠杆菌科，临床分离菌株易产生超广谱β- 内酰胺（ESBLs）。产生ESBLs的克雷伯菌属和大肠埃希菌分离株，临床上可能对青霉素类、头孢菌素类或氨曲南治疗无效。我院分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对青霉素类、头孢菌素类的耐药性都很高，而对于加有β- 内酰胺抑制剂（舒巴坦、他唑巴坦）的复方制剂基本都敏感。大肠埃希菌对青霉素类和一、二代头孢菌素耐药率为60%，对三、四代头孢的耐药率为30%以上，对头孢西丁的耐药率为10%左右；肺炎克雷伯菌对青霉素类、头孢菌素类的耐药率在28%左右。因此，临床主要考虑该细菌引起的呼吸道感染、泌尿系统感染等情况时，选择青霉素类和头孢菌素类抗菌药物应慎重，尽可能参照药敏试验结果。 4、2012年全年检出的铜绿假单胞菌占到细菌总检出率的15%，对青霉素和一、二代头孢类普遍耐药，其中对三代耐药50%以上，但对头孢他啶100%敏感，对哌拉西林的敏感率为92%，对哌拉西林/他唑巴坦100%敏感，在临床用药中可以选择。对氨基糖苷类、喹诺酮类含β- 内酰胺抑制剂的复方制剂耐药率也都达到30%以上，部分达到50%。铜绿假单胞菌对碳青霉烯类的耐药率均在10%以下。 5、2012年检出的阴沟杆菌占到总检出率的8.75%，对一、二代头孢和头孢西丁基本耐药，对三代头孢35%左右耐药，对四代头孢27%左右耐药。 6、2012年全年金黄色葡萄球菌检查率为5%，检出率虽不高，但对药
肺泡灌洗液细菌培养及药敏结果分析 发表时间：2018-02-02T15:22:23.477Z 来源：《临床医学教育》2017年12月作者：邹单东韦柳华程红革[导读] 下呼吸道感染是临床较为常见的感染，病原菌种类多、耐药性强。 广西医科大学第四附属医院广西柳州545005 [摘要] 目的：了解肺泡灌洗液中细菌种类及耐药情况，为临床合理用药提供依据。方法：美国Microscan Autoscan-4微生物分析仪对细菌作鉴定及药敏试验。结果：灌洗液细菌培养阳性率56.2%；195例细菌中革兰阴性菌占90.8%，革兰阳性菌占9.2%；主要细菌依次是铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌。主要革兰阴性菌对亚胺培南耐药率为0～15.1%，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰 胺酶 (ESBLs)阳性率为62.5%、64.1%，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率为60.0%，细菌多药耐药现象严重。结论：不同细菌对抗菌药物的耐药性不同，灌洗液细菌培养及药敏试验可为临床合理用药提供依据。 [关键词] 肺泡灌洗液；细菌分布；耐药性 [Abstract] Objection: in order to understand the type of bacteria and susceptibility test results in irrigating solution, and provide an according to rational use of drug for clinical.Methods: the instrument of identification and susceptibility test is Microscan Autoscan-4, USA.Result: the positive rate of irrigating solution is 56.2%; the Gram-negative bacteria has 90.8% in these 195 bacterias, and Gram-positive bacteria has 9.2%; the main type of these bacteria are Pseudomonas aeruginosa, Pneumonia crayresearch bacteria and baumanii . the tate of the bacterias, which resist to imipenem, is 0~15.1% in these Gram-negative bacterias; the rate of Pneumonia crayresearch bacteria and baumanii, which product ESBLs, is 62.5%、64.1%,respectively; and the rate of MRSA is 60.0%. and the phenomenon of multidrug resistant is Very serious.Conclusion: the drug resistance of bacteria is differrent, the bacterial culture and susceptibility test results of irrigating solution can provide basis of rational drug use for clinical. [Key words] irrigating solution; Bacteria distribution; drug resistanc 下呼吸道感染是临床较为常见的感染，病原菌种类多、耐药性强。目前病原诊断普遍采用痰培养，但因其易污染，痰液质量难以保障，临床价值有限。肺泡灌洗液与痰液相比，对下呼吸道感染诊断具有更高特异性和敏感性，同时细菌药敏结果对临床抗感染治疗更具价值【l】。因此，我们对2010年从肺泡灌洗液中分离到的195例细菌的药敏结果进行回顾性分析，以期为临床抗感染治疗提供依据，现将结果报道如下。 1 材料和方法 1.1 标本来源 251例灌洗液为2010年我院住院患者予以纤支镜支气管肺泡灌洗治疗后采集所得。同一患者多次分离到的细菌不重复计入。 1.2 细菌鉴定和药敏试验采用Microscan Autoscan-4微生物分析仪对细菌作鉴定和药敏试验。药敏试验判断标准、结果解释、MRSA、ESBLs检测参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准【2】。定期用标准菌株做药敏质量控制。 1.3 数据处理数据均由WHONET 5.4软件分析处理所得。 2 结果 2.1 细菌分布 251例灌洗液细菌培养阳性率为56.2%(141/251)。共分离细菌195例，革兰阴性菌占90.8%，革兰阳性菌占9.2%，细菌构成比见表1。 2.2药敏结果大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs株为10例、25例，阳性率为62.5%、64.1%，MRSA 6例，检出率为60.0%。主要细菌对抗菌药物的耐药率，见表2。
药敏试验： 用药敏实验进行药物敏感度的测定，以便准确有效的利用药物进行治疗。目前，临床微生物实验室进行药敏试验的方法主要有纸片扩散法，稀释法（包括琼脂和肉汤稀释法），抗生素浓度梯度法（E-test 法），和自动化仪器等。 简介： 体外抗菌药物敏感性试验简称药敏试验（AST），是指在体外测定药物抑菌或杀菌能力的试验。 根据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)近期推荐的标准，对非苛氧菌（肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、和其他非肠科杆菌、葡萄球菌属细菌、肠球菌属细菌）和苛氧菌（嗜血杆菌属细菌、淋病奈瑟菌、肺炎链球菌和其他链球菌）选择常规药敏试验的首选药物（A 组抗生素）或临床使用的主要抗生素（B组抗生素）进行药敏试验。 抗菌药对细菌性传染病的控制起到了非常重要的作用，但由于养殖过程中不科学的、盲目的滥用抗菌药，很多致病性细菌产生了耐药性，使得抗菌药对细菌性疾病的控制效果越来越差，不但造成药物浪费，而且还延误病情，给养殖户造成了很大的经济损失。 随着新型致病菌的不断出现，抗菌药的防治效果越来越差。并且各种致病菌对不同的抗菌药物的敏感性不同，同一细菌的不同菌株对不同抗菌药物的敏感性也有差异。长期以来，各种致病菌耐药性的产生使各种常用抗菌药物往往失去药效，以及不能很好的掌握药物对细菌的敏感度，所以一个正确的结果，可供临床医师选用抗菌药物的参
考，并提高疗效。农业部动物检疫所青岛易邦生物工程有限公司动物疫病诊疗中心总结出几套适合基层进行药敏试验的操作方法，现简单介绍如下。 实验步骤： 实验材料 普通营养琼脂培养基：可去生化试剂店购买，做不同细菌的药敏试验可选择不同的培养基，如做大肠杆菌的药敏试验可选择普通营养琼脂或麦糠凯培养基。做沙门氏菌可选择血清培养基。 药敏试纸：购买或自制（详见实验准备） 细菌：待做药敏试验的细菌 仪器：接种环、酒精灯、打孔器、牛津杯、移液器、滴头 实验准备 2.1 药敏片的准备：购买或自制 2.1.1 制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。经15磅15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。 2.1.2 抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。
特殊细菌药敏试验的规范化操作 一、目前我国细菌药敏试验现状 20年以来，我国在卫生部和各地临床检验中心和检验学会的共同努力下引进CLSI药敏系列标准，使全国微生物实验室能在同一标准下进行质量控制活动。当前，微生物实验室对常见临床分离细菌的药物敏感试验的水平已有了显著的提高，但对特殊细菌的药敏试验的各个环节的规范操作还不能得到普及，对目前还无折点的细菌能否做药敏试验，以及如何判断细菌的药物敏感和耐药，仍然概念模糊，有待进一步规范和普及。 目前常见错误做法： （一）铜绿假单孢菌的药敏判断标准用于其他非发酵细菌；嗜血杆菌的标准用于卡他莫拉菌等的错误做法时有发生。 （二）借用同属细菌敏感标准 （三）借用同类抗生素的敏感标准 二、各菌属的药物敏感性报告及试验方法的CLSI药敏标准 （一）“嗜麦芽”菌属药敏报告标准 1.CLSI对“嗜麦芽”纸片药敏判断标准 药物名称纸片含量ug/片耐药 R 中介I 敏感S 米诺环素30 ≤1415-18 ≥19 左氧氟沙星 5 ≤1314-16 ≥17 复方新诺明 1.25/23.75 ≤1011-15 ≥16 2.CLSI对“嗜麦芽”稀释法判断标准 药物名称S I R 替卡西林/棒酸≤16/232/2-64/2 128/2 头孢他定≤816 ≥32 米诺环素≤48 ≥16 左氟沙星 2 4 ≥8 复方新诺明≤2/38- 4/76 氯霉素≤816 ≥32（二）无折点细菌的药物敏感试验报告 1. 其他药物的敏感性报告: CLSI推荐的药物可以报告MIC值和敏感度（S、I、R），临床需要的其他药物的药敏试验报告可以直接报告MIC值但不报告S、I、R。 2. 不要用认为相近细菌的折点代替报告S、I、R，这会误导医生用药。
细菌分离培养方法及操作步骤 无菌取血液或脏器、淋巴结划线接种于鲜血琼脂平板或血清琼脂平面培养基、普通肉汤培养基，37℃恒温培养24 h，观察其生长特性。目前细菌分离培养的常用方法有平板划线分离法、加热分离法和实验动物分离法。 平板划线接种法 这是目前临床上最常用的分离接种方法。它可以从被检病料中通过划线可使细菌分离、分散生长而形成单个菌落（有利于从含有多种细菌的标本中分离出目的菌），以便挑选可疑菌落作纯培养加以鉴定。具体操作： 1、右手持接种环，在酒精灯上火焰灭菌； 图1 病料采集图2 接种环灭菌 2、待接种环冷却后，挑取被检料少许，左手持琼脂平板，以食指为支点，用拇指和无名指将平皿揭开一空隙。大约20℃时，迅速地将接种环轻轻地涂布在培养基的边缘。
3、在涂布处来回移动作曲线形划线接种。（注意：划线时，以腕力使接种环在琼脂平板表面划动，尽量不要划破培养基，划的线条要密，但不能重复旧线，以免培养物形成菌苔。） 图3 平板划线接种法 4、划线完毕，合上平皿盖，将琼脂平板倒置，放入37℃温箱内培养18－24小时。 注意：分离培养用的平板培养基应表面干燥，可于临用前置37℃孵育箱内30分钟，这样表面即干燥有利于分离培养，又使培养基预温，对培养某些较娇弱的细菌有利。
细菌药敏试验方法操作步骤 药敏试验是抗菌药使用以前必不可少的一个基本环节，一个正确的药敏结果能够科学的指导养殖户用药，减少抗菌素使用的盲目性，从而减少养殖户损失。在临床实际生产中具备重要意义。 1、在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。 图4 接种环划线 2、以无菌操作将灭菌的不锈钢小管（外径为4毫米、孔径与孔距均为3毫米，管的两端要光滑，也可用玻璃管、瓷管），放置在培养基上打孔，将孔中的培养基用针头挑出，并以火焰封底，使培养基能充分的与平皿融合（以防药液渗漏，影响结果）。
实训细菌的药物敏感性试验 教学目标 使学生掌握细菌药物敏感性试验的操作方法，能够利用本试验方法选择敏感药物治疗兽医临床常见的细菌性传染病。 材料准备 1．器材：温箱、天平、打孔机、滤纸、无菌试管及吸管、镊子、接种环、酒精灯等。 2．试剂：蒸馏水。 3．培养基：普通琼脂平板。 4．菌种：金黄色葡萄球菌及大肠杆菌的固体培养物。 5．药品：链霉素、金霉素、新霉素、红霉素等抗菌药物。 6．硫酸钡标准管：取1%~1.5%氯化钡0.5ml加1%硫酸溶液99.5ml，充分混匀即成，用前充分振荡。 方法步骤 将抗菌药物置于接种待检菌的固体培养基上，抗菌药物通过向培养基内的扩散，抑制敏感细菌的生长，从而出现抑菌环。由于药物扩散的距离越远，达到该距离的药物浓度越低，由此可根据抑菌环的大小，判定细菌对药物的敏感度。 （一）含药纸片的制备 1．滤纸片最好选用新华1号定性滤纸，用打孔机打成直径6mm的滤纸片，放在小瓶中或平皿中，在121.3℃灭菌15min，再置100℃干燥箱内烘干备用。 2．药液的配制用无菌蒸馏水将各药稀释成以下浓度：磺胺100mg/ml、青霉素100IU/ml、链霉素、金霉素、新霉素、红霉素、多粘菌素1000μg/ml。 3．含药纸片的制备将灭菌的滤纸片用无菌的镊子摊布于灭菌平皿中，按每张滤纸片饱和吸水量为0.01ml计算，50张滤纸片加入药液0.5ml。要不时翻动，使纸片充分吸收药液，浸泡1~2h后于37℃温箱中烘干备用。对青霉素、金霉素纸片的干燥宜采用低温真空干燥法，干燥后立即放入瓶中加塞，放干燥器内或置-20℃冰箱中保存。纸片的有效期一般为4~6个月。 （二）测验方法 1．钩取金黄色葡萄球菌和大肠杆菌菌落各4~5个，分别接种于肉汤培养基中，37℃培养4~6h。 2．用灭菌生理盐水稀释培养菌液，使其浊度相当于硫酸钡标准管。装有以上两种成分的试管须相同，硫酸钡应用前需充分振动。 3．用无菌棉拭子蘸取上述肉汤培养液，在试管壁上挤压除去多余的液体，在琼脂培养基表面均匀涂抹。每种细菌分别接种1~2个琼脂平板。
细菌药物敏感试验实验报告 药物敏感性试验的基本原则 1药敏试验检测获得性耐药，不必测试天然耐药： 天然耐药是细菌菌种固有的特征，耐药基因一般位于染色体，可以长期稳定遗传，表现为对某类或某种药物的天然耐药。天然耐药信息一般由基础医学和临床文献提供。部分天然耐药，体外试验条件下可能无法检测出来，因而导致假敏感，如果报告将成为极重要错误，严重误导临床。常见菌种对各类药物的天然耐药见文献。实验室全体人员应熟知这些信息，可将其发给临床学习和参考。 2药敏试验测试的前提条件： 实验室应具备相应检测的人员能力、客观条件、结果解释依据。标本处理、菌株分离鉴定、药敏试验操作等环节规范、标准、结果可信；具备对结果的解释能力，能够提供临床会诊服务。临床常规工作，分离株(可能)有临床意义而非定植或污染时，才可进行药敏试验。 错误示例：来自痰标本的溶血葡萄球菌，未作标本质量评估和半定量培养，进行药敏试验；来自粪便标本肠球菌属进行药敏试验等。 3测试结果应准确： 实验室应遵照CLSI文件或相关规范建立本医院药敏试验的质量管理
体系。质控菌株、频率、质控范围符合相关要求；定期参加实验室室间比对项目。建议保留菌株，以便复核。 具体的专业要求 1标本类型 临床微生物学的一大特点是标本种类繁多，而不同药物在这些部位的分布不同。标本的规范采集、质量保证、立即运送和有效保藏有赖于临床、实验室以及相关各方的密切合作。在规范临床送检的前提下，实验室进行药敏试验和报告药敏结果时，应首先考虑标本的特殊性。实际工作中需重点考虑的标本如下。 1．脑脊髓液： 正常和疾病状态不能穿透血脑屏障的药物，常规不应报告。报告审核时，对于分离自脑脊髓液的菌，下列药物不能报告：仅有口服剂型的抗菌药物、一、二代头孢菌素(除外静脉用头孢呋辛)、头霉素类、克林霉素、大环内酯类、四环素类和喹诺酮类。
检验科细菌室实习小结 1、检验科细菌室实习小结 细菌是的工作中，无菌操作很重要，不管是在细菌接种、鉴定还是药敏的时候，必须严格进行规范操作，否则将导致交叉污染，同时无菌操作也能更好的保护好自己。 在实习和工作中一定要将理论联系实际，要善于思考，在观察菌落形态和细菌镜下形态时更应仔细认真，临床微生物的工作是一个经验积累的过程，要想成为一名优秀的检验医师，今后在微生物方面的学习中还得加倍努力。 在细菌室实习生活结束之际，我要特别感谢细菌室的每一位老师，感谢他们耐心、和蔼的教导，是他们严谨、一丝不苟的科学态度教育了我，是他们团结协作、融洽的工作气氛感染了我。他们循循善诱给我讲解，他们耐心规范了我的操作，他们给予我很大的信任与鼓励，放手让我操作。而我能做的是在今后的学习和工作中带着一颗感恩的心认真负责地工作，培养高尚的职业道德、严肃的科学态度和一丝不苟的工作作风，使自己成为一名合格的检验专业的的优秀人员。 祝福细菌室每一位老师工作顺利、阖家幸福。 2、检验科细菌室实习小结 还记得，实习第一天的时候，老师就说，在细菌室，这短短的两个月时间是远远不够的。确实啊，我的细菌室实习是暂时告一段落了，但在微生物的学习之路还是很长的。现在我们所学到的仅仅只是入门啊！ 在实习和工作中一定要将理论联系实际，要善于思考，要严谨对待，临床微生物的工作即是一个不断积累经验的过程也是一个要随时更新知识的过程。要想成为一名合格的检验医师，今后在微生物方面的学习中还得加倍努力。 在细菌室实习生活结束之际，我要特别感谢细菌室的每一位老师，感谢他们耐心、和蔼而又严厉的教导，是他们严谨、一丝不苟的科学态度教育了我，是他们团结协作、融洽的工作气氛感染了我。他们循循善诱给我讲解，他们耐心规范了我的操作，他们给予我
临床细菌培养结果与药敏试验敏感性和耐药分析 发表时间：2016-07-09T12:43:14.773Z 来源：《医师在线》2016年5月第9期作者：夏芳 [导读] 通过对药材水分、灰分及浸出物的考察，制定了土五加的检查成分，有效地控制药材质量，从源头进行监控，保证药材的来源。夏芳 河南省南阳油田总医院河南南阳 473132 摘要：目的了解我院临床所送标本分离菌株的特征及耐药情况，为临床提供“经验”用药的依据。方法收集2015年1月—2015年10月我院临床各科送检的1782份标本所分离出的病原菌鉴定结果与药敏实验作分析。结果 1782份标本由21个科室所送标本组成，共检出阳性标本555例，检出率为31.1%。革兰氏阴性菌439株，占分离菌的79.1%；革兰氏阳性菌检出116株，占分离菌的20%。革兰氏阴性杆菌中以大肠埃希菌分离率最高，为25.4%，依次为铜绿假单胞菌11.5 % ，阴沟杆菌9.1% 肺炎克雷伯菌8.6% ，鲍曼不动杆菌5.2%； 革兰式阳性球菌以表皮葡萄菌为主，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌阳性率为23.8%，耐甲氧西林凝固酶阴性球菌为44.1%，大肠埃希菌产ESBLS为66%，肺炎克雷伯菌产ESBLS为39.6%，奇异变形杆菌产ESBLS为50%，革兰氏阴性菌耐药相当严重，大部分耐药在50%以上。结论定期对临床所选标本的细菌培养和药敏鉴定结果进行分析，有助于临床合理用药，减少耐药菌的发生，降低医疗费用和改善医患关系有重要意义。 关键词：细菌培养药敏试验 抗生素的合理使用已是人们关注的焦点，而合理使用抗生素的前提对于临床医生来说，基于两点出发：一是经验性用药；二是在细菌培养后，在药敏的指导下用药。而我们所说的“经验”性用药，是建立在细菌培养和药敏的回顾性总结的基础上而言的，所以检验科的微生物室应及时的总结临床所送标本分离菌构成特征及耐药情况，为临床提供“经验”用药的依据，为减少耐药菌的产生，降低医疗费用和改善医患关系有重要意义。基于这一目的，我们收集了2015年1月至2015年10月我院临床各科送检的1782份标本所分离出的病原菌鉴定结果及药敏试验结果，报告如下： 材料与方法 一、标本来源：住院与门诊共计21个科室，所送检的标本包括：血、尿、便、痰、分泌物、引流物、穿刺液、胸腹水等共计1782份。 二、材料与试剂：BACTEC9120全自动血培养仪、DL-96细菌鉴定系统、使用配套鉴定及药敏分析卡。 三、方法：各种标本以无菌方法接种于相应的培养基中，至于全自动培养箱孵育，如有细菌生长则进行鉴定和药敏试验，细菌的分离、鉴定严格按全国临床检验操作规程进行，药敏试验采用纸片法和MIC法。 四、统计学处理：用WHONET5.4统计软件进行处理和分析。 结果 一、1782份标本细菌的检出率 1782份标本由21个科室送检标本组成，共检出阳性标本555例，检出率为31.1%。临床各科送检标本数与检出率 本次分离出的555株细菌，革兰氏阴性菌439株，占分离菌的79.1%；革兰氏阳性菌116株，占分离菌的20.9%。
c l s i m s药敏试验解读 This manuscript was revise d on November 28, 2020
表1A. 美国临床微生物学实验室在非苛养菌常规试验和报告中应考虑的具有FDA 临床适应证的抗菌药物建议分组 总注释： A.对四环素敏感的菌株被认为对多西环素和米诺环素也敏感。然而，某些对四环素 中介或耐药的菌株可能对多西环素、米诺环素或二者敏感。 B.利福平不能单独用于抗菌治疗。 C.分离于泌尿道菌株不被常规报告。 D.头孢噻吩仅被用于预报口服药物结果，包括头孢氨苄、头孢泊肟、头孢氨苄和氯 碳头孢。以前关于头孢噻吩结果可预报其他头孢菌素敏感性建议仍然正确，但近年来还没有数据证实此建议。 E.当测试粪便中分离的沙门菌和志贺菌株时，只有氨苄西林、一种氟喹诺酮类和复 方新诺明可用于常规报告。另外，对肠道外感染沙门菌粉分离株，应测试并报告一种三代头孢菌素，假如需要，也可测试和报告氯霉素。分离于肠道内和肠道外伤寒样沙门菌（伤寒沙门菌和副伤寒沙门菌A-C）需进行药敏试验。分离于肠道内非伤寒样沙门菌不需进行常规药敏试验。 F.从CSF中分离菌株，试验和报告头孢噻肟和头孢曲松，以取代头孢唑林。 G.其他非肠杆菌科细菌包括假单胞菌和其他非苛养、非发酵葡萄球菌的革兰阴性杆 菌，但不包括铜绿假单胞菌、不动杆菌、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌，因为对这些菌种的建议试验和报告药物表格已分开。 鼻疽伯克霍尔德菌和假鼻疽伯克霍尔德菌试验和报告药物建议请参阅CLSIM45文件。 H.仅对金黄色葡萄球菌包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA） I.青霉素敏感的葡萄球菌对葡萄球菌感染具有临床疗效的其他β-内酰胺类药物也敏 感。青霉素耐药葡萄球菌对青霉素酶不稳定青霉素类耐药。除具有抗-MRSA活性新的头孢菌素外，苯唑西林耐药葡萄球菌对当前所有使用的β-内酰胺类药物均耐
常见细菌药物敏感性试验报告规范中国专家共识 微生物学检验为感染性疾病的诊断、治疗和控制提供了必不可少的证据。因此微生物学检验报告是临床和实验室等多方共同关注的焦点。国内临床微生物学检验发展较为薄弱，报告存在着种种不足。同时，临床与实验室的沟通存在一定不足，密切协作非常必要。基于实际存在的问题，为规范国内临床微生物学检验药物敏感性试验报告，加强临床与实验室合作，发挥检验医师作用，特制订本共识，以期指导相关报告的规范化，减少错误，增加专业信息，提高服务质量，为临床医学诊、治、控提供坚实的科学依据。本共识限于常见细菌的药物敏感性报告。 一、药物敏感性试验的意义和基本原则 (一)意义 药物敏感性试验可以检测细菌对于抗细菌药物的敏感性，为临床用药、新药研究、监测耐药变迁、发现耐药机制等提供客观证据[1]。对于经验治疗，依据一方面来自医生自身的经验，一方面是实验室长期不断提供的数据积累。临床需要考虑不同感染的病原谱和常见病原对不同药物的敏感性；对于靶向治疗，特定分离株的具体药敏试验结果可以用于判断经验治疗选药合理性、经验治疗效果分析、调整治疗选药依据等。 (二)基本原则 1．药敏试验检测获得性耐药，不必测试天然耐药： 天然耐药是细菌菌种固有的特征，耐药基因一般位于染色体，可以长期稳定遗传，表现为对某类或某种药物的天然耐药[2]。天然耐药信息一般由基础医学和临床文献提供。部分天然耐药，体外试验条件下可能无法检测出来，因而导致假敏感，如果报告将成为极重要错误，严重误导临床。常见菌种对各类药物的天然耐药见文献[3,4]。实验室全体人员应熟知这些信息，可将其发给临床学习和参考。 2．药敏试验测试的前提条件[5]： 实验室应具备相应检测的人员能力、客观条件、结果解释依据。标本处理、菌株分离鉴定、药敏试验操作等环节规范、标准、结果可信；具备对结果的解释能力，能够提供临床会诊服务。临床常规工作，分离株(可能)有临床意义而非定植或污染时，才可进行药敏试验。错误示例：来自痰标本的溶血葡萄球菌，未作标本质量评估和半定量培养，进行药敏试验；来自粪便标本肠球菌属进行药敏试验等。 3．测试结果应准确： 实验室应遵照C L S I文件或相关规范建立本医院药敏试验的质量管理体系。质控菌株、频率、质控范围符合相关要求；定期参加实验室室间比对项目。建议保留菌株，以便复核。 二、具体的专业要求 (一)标本类型 临床微生物学的一大特点是标本种类繁多，而不同药物在这些部位的分布不同。标本的规范采集、质量保证、立即运送和有效保藏有赖于临床、实验室以及相关各方的密切合作。
检验科第一季度细菌药敏分析报告 2016年12月21日至2017年3月20日，我科共收集全院73例细菌培养与鉴定标本，共检出致病菌18例，其中排名前三的细菌分别是：第一，葡萄球菌6例；第二，链球菌5例；第三，肠杆菌、铜绿假单胞菌各2例。其余真菌、粘质沙雷菌、假单胞菌各一例。 首先，从以上的细菌普来看，葡萄球菌和链球菌感染为我院感染的主要病菌，与近2年的细菌耐药性来看，每种病菌的对抗生素浓度和种数的耐受程度和都有所增加，这意味着将来的细菌感染治疗工作会越发困难。从第一季度的感染情况来看，链球菌的感染机率大幅上升，其耐药程度比以往也有所增加。链球菌主要通过飞沫传染，应对病人和带菌者及时治疗，以减少传染源。空气、器械、敷料等注意消毒。对急性咽峡炎和扁桃体炎患者，尤其是儿童，须治疗彻底，防止超敏反应性疾病的发生。由于细菌族别不同，对抗生素的敏感相应也不同，所以临床用药最好以药敏实验为指导。 以上感染排列前三的细菌的详细耐药情况如下表： （6例葡萄球菌属耐药情况统计） 抗生素 名称 青霉素 红霉素 诺氟沙星 苯唑西林 左氧氟沙星 利福平 耐药例数 5 5 3 3 2 2 抗生素名称 青霉素 红霉素 万古霉素 克林霉素 阿莫西林 氯霉素 耐药例数 4 5 3 2 1 2
（5例链球菌属耐药情况统计） （2例肠杆菌属耐药情况统计） （2例铜绿假单胞菌属耐药情况统计） 从以上表格可以清楚看出，这些致病菌除了他们的天然耐药性以外，对多种抗生素均产生耐药机制，这使得临床医生的用药范围大大受收到限制，同时也对治疗效果及治愈率带形成严重的负面影响。由此看来，我院医务工作者在这方面将面临巨大的困难和挑战。 其次，真菌的感染是我院新增致病菌，以往感染率较高的肠杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌感染有所下降。这几种常见致病菌的感染逐渐减少，与医务人对这几类常见病菌认知程度的加深有很大的关系，这也是值得我们欣慰的一件事。 综上所述，我们应该清楚的认识到我院感染病菌的发展趋势，正确、勇敢的面对当前感染病例医治的困难，共同努力遏制细菌感染和耐药菌的增加趋势。 库车县第二人民医院检验科 2017年3月22日 抗生素名称 阿莫西林 头孢西丁 头孢噻吩 庆大霉素 替卡西林 头孢呋辛 耐药例数 2 2 1 1 1 1 抗生素名称 复方新诺明 庆大霉素 氨苄西林 头孢他啶 头孢呋辛 头孢西丁 头孢噻吩 耐药例数 2 2 2 1 1 1 1
如何解读药敏报告及选择抗菌药物？ 药敏试验报告对于临床有很多指导价值：帮助我们临床选择治疗的抗菌药物，鉴定细菌，能够有效的预防和控制各种感染。但临床医生对药敏报告却是一大堆抱怨，最大的抱怨是：报了一堆医院没有使用的药物，而医院使用的药在药敏试验中没有做？选择药敏报告敏感的药物，为什么临床治疗无效？ 要回答以上问题必须会解读药敏报告，并能正确选择抗菌药物。 首先必须了解以下概念： 1、药敏试验（AST）：体外测定药物抑菌或杀菌能力的试验，以便准确有效的利用药物进行治疗。 最低抑菌浓度（MIC）：最低抑菌浓度是测量抗菌药物的抗菌活性大小的一个指标，指在体外培养细菌18至24小时后能抑制培养基内病原菌生长的最低药物浓度。 最小杀菌浓度（MBC）：指杀死99.9%（降低级3个数量）的供试微生物所需的最低药物浓度。 2、NCCLS/CLSI：美国国家标准化委员会/美国临床实验室标准化协会。 3、多重耐药（MDRO）：是指有多重耐药性的病原菌。Multiresistance 可以翻译成多药耐药性、多重耐药性、其定义为一种微生物对三类（比如氨基糖苷类、红霉素、β－内酰胺类）或三类以上抗生素同时耐药，而不是同一类三种。
泛耐药（XDR）：广泛耐药细菌指细菌对常用抗菌药物几乎全部耐药，革兰氏阴性杆菌仅对黏菌素和替加环素敏感，革兰氏阳性球菌仅对糖肽类和利奈唑胺敏感。 全耐药（PDR）：泛耐药细菌指对所有分类的常用抗菌药物全部耐药，革兰氏阴性杆菌对包括黏菌素和替加环素在内的全部抗菌药物耐药，革兰氏阳性球菌对包括糖肽类和利奈唑胺在内的全部抗菌药物耐药。敏感S：用常规用量治疗有效，常规用药时到达的平均血药浓度超过细菌的MIC5倍以上。 耐药R：用常规用量治疗不能抑制细菌的生长。MIC高于药物在血、体液中可能到达的浓度。 中介 I：被检菌MIC接近血、体液中药物浓度，治疗效果不肯定。 剂量依耐性敏感SDD：依赖于患者所用剂量的菌株敏感性，患者应使用最大的允许剂量。（如更高剂量或更频繁给药）。 现在我们来回答医生提出的问题： 一、报了一堆医院没有使用的药物，而医院使用的药在药敏试验中没有做？ 1、药敏试验是参照美国NCCLS/ CLSI每年发布的标准执行，同时作为卫生部部颁标准执行。 2、细菌全自动分析仪的药敏组合是固定的。 3、提供药物种类的选择，某些细菌对某类抗生素天然耐药，则不需要做药敏试验。
医院细菌培养及药敏试验中常见问题 范文 Common problems in hospital bacterial culture and dru g sensitivity test 编订：JinTai College
医院细菌培养及药敏试验中常见问题范文 前言：毕业论文是普通中等专业学校、高等专科学校、本科院校、高等教育自学考试本科及研究生学历专业教育学业的最后一个环节，为对本专业学生集中进行科学研究训练而要求学生在毕业前总结性独立作业、撰写的论文。本文档根据毕业论文内容要求和特点展开说明，具有实践指导意义，便于学习和使用，本文下载后内容可随意调整修改及打印。 感染性疾病较常见，其中大多数为细菌感染和病毒感染，除病毒病原检测较困难未普及外，细菌培养及药敏试验是一项成熟普及的技术。详细内容请看下文毕业论文范文：医院细菌培养及药敏试验中常见问题。 按理所有感染性疾病均应根据培养及药敏结果选用抗生素，即细菌感染性疾病的病原学培养率应达到100%才是最理想的，由于有的病例需多次培养，故按培养次数占病例数百分比还应超过100%，只有这样，该试验指导临床的价值才能真正体现。 然而，由于许多原因，许多医院的感染性疾病的病原微生物标本送培养率都在50%以下，应当重复送检的标本更少，
同时，有限的送培标本还存在标本合格率低即采集时机、方法、采集途径、采集量的不科学问题，及时采集后的保护、送检时间、条件也有不当造成污染或病原体破坏而影响培养阳性率的情况，故在临床工作中正是由于感染性疾病病原送培率低、送培质量难保证，故造成了培养结果难以指导临床选药、经验性使用抗生素的现象极为普遍的情况，遇疗效不好则频繁更换，不仅疗效不佳，而且这又是产生和促进细菌耐药性增加的因素之一。 固定化、商品化的药敏试剂盒限制了抗生素药敏试验范围， 有时结果形同虚“试”。 微生物室把临床标本中的细菌培养出来后，做药敏试验 是购买商品化的药敏试验盒来进行的，而生产商家在药敏试剂板中只随机或意向性固定了近20中左右的抗生素，也就是说，药物敏感范围只能按药敏板中的抗生素种类做，不可能在本院使用时改变，如果这20种抗生素的种类均耐药，那么20种以外抗生素又哪些敏感呢?指导作用甚微，临床上又只得经验性 用药。 -------- Designed By JinTai College ---------