酶工程期末复习材料
一.名词解释
1.绝对专一性：一种酶只能催化一种底物进行一种反应，这种高度专一性称为
绝对专一性。
2.相对专一性：一种酶能够催化一类结构相似的底物进行某种相同类型的反
应，这种专一性称为相对专一性。
3.酶的转换数：又称摩尔催化活性，是指每个酶分子每分钟催化底物转化的分
子数。
4.催化周期：是指酶进行一次催化所需的时间。
5.酶结合效率：又称酶的固定化率，是指酶与载体结合的百分率。
6.酶活力回收率：是指固定化酶的总活力与用于固定化酶的总酶活力的百分率
7.沉淀分离：通过改变某些条件或添加某种物质，使酶的溶解度降低，而从溶
液中沉淀析出，与其他溶质分离的技术过程。
8.盐溶：一般在低盐浓度下，蛋白质的溶解度随盐的浓度升高而增加，这种现
象称为盐溶
9.盐析：盐浓度升高到一定浓度后，蛋白质的溶解度又随盐浓度的升高而降低，
结果使蛋白质沉淀析出，这种现象称为盐析。
10.差速离心：是采用不同的离心速度和离心时间，使不同沉降速度的颗粒分批
分离的方法。
11.密度梯度离心：是样品在密度梯度介质中进行离心，使沉降系数比较接近的
物质得以分离的一种区带分离方法。
12.等密度梯度离心：当欲分离的不同密度范围处于离心介质的密度范围时，在
离心力的作用下，不同浮力密度的颗粒或向下沉降，或向上漂浮，只要时间足够，就可以一直移动到与它们各自的浮力密度恰好相等的位置，形成区带，这种方法称为等密度梯度离心。
13.离子交换层析：利用离子交换剂上的可解离基团对各种离子的亲和力不同而
达到分离目的的一种层析分离方法
14.凝胶层析：又称凝胶过滤，分子排阻层析，分子筛层析等，是指以各种多孔
凝胶为固定相，利用流动相中所含各种组分的相对分子质量不同达到物质分离的一种层析技术。
15.超临界萃取：又称超临界流体萃取，利用遇分离物质与杂质在超临界流体中
的溶解度不同而达到分离的一种萃取技术。
16.超临界流体：当温度和压力超过其超临界点时，两相变为一相，这种状态下
的流体称为超临界流体。
17.表面活性剂：是由极性基团和非极性基团组成两性分子，有阳离子，阴离子
和非离子型表面活性剂。
18.酶分子修饰：通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的催
化特性的技术过程称为酶分子修饰。
19.酶的固定化：采用各种方法，将酶固定在水不溶性的载体上，制备固定化酶
的过程称为酶的固定化。
20.固定化酶：固定在载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶称为固定
化酶。
21.Ks分段盐析：在一定的温度和pH条件下，通过改变离子强度是不同的酶或
蛋白质分离的方法
22.β分段盐析：在一定盐和离子强度的条件下，通过改变温度和pH，使不同
的酶和蛋白质分离的方法。
23.酶的非水相催化：酶在非水介质中的催化作用称为酶的非水相催化。
24.离子液：由有机阳离子与有机阴离子构成的室温条件下呈液态的低熔点盐
类，挥发性低，稳定性好。
25.微水介质体系：是由有机溶剂和微量水组成的反应体系，是在有机介质酶催
化中广泛应用的一种反应体系
26.正交束体系：胶束又称为正胶束或正胶团，是在大量水溶液中含有少量与水
不相容的有机溶剂，加入表面活性剂后形成水包油的微小液滴。
27.反胶束体系：又称反胶团，是指在大量与水不相混溶的有机溶剂中，含有少
量的水溶液。加入表面活性剂后形成油包水的微小液滴。
28.必需水：维持酶分子完整的空间构象所必需的最低水量称为必需水
29.最适水含量：在催化反应速度达到最大时的水含量称为最适水含量。
30.水活度：是指体系中水的逸度与纯水逸度之比。
31.酶分子的定向进化：是模拟自然进化过程，在体外进行酶基因的人工随机突
变，建立突变基因文库，在人工控制条件的特殊环境下，定向选择得到具有优良催化特性的酶的突变体的技术过程。
32.易错PCR：是从酶的单一基因出发，在改变反应条件的情况下进行聚合酶链
反应，是扩增得到的基因出现碱基配对错误，从而引起基因突变的技术过程。
33.DNA重排技术：又称DNA改组技术，是从正突变基因文库中分离得到的同源
DNA，用酶切割成随机片段，经过不加引物的多次PCR循环，使DNA的碱基序列重新排布而引起基因突变的过程。
34.基因家族重排：又称基因家族改组技术，是从基因家族的若干同源基因出发，
用酶切割成随机片段，经过不加引物的多次PCR循环，使DNA的碱基序列发生重新排布而引起基因突变的技术流程。
35.盒式诱变：是一种定点突变技术，将靶基因的一段DNA删掉，并用人工化学
合成所具有的突变核苷酸的双链寡核苷酸片段取代。
36.酶反应器：用于酶进行催化反应的容器及其附属设备称为酶反应器。
二.简答题
1.影响酶催化作用的因素
①底物浓度的影响—附P6图1-2；②酶浓度的影响--附P6图1-3；③温度的影响--附P6图1-4；④pH的影响--附P7图1-5；⑤抑制剂的影响—附P8竞争性/非竞争性/反竞争性抑制剂的定义；⑥激活剂的影响—氯离子是α-淀粉酶的激活剂，钴离子和镁离子是葡萄糖异构酶的激活剂
2.固定化酶活力测定
①振荡测定法——称取一定质量的固定化酶，放进一定形状一定大小的容器中，加入一定量的底物溶液，在特定的条件下，一边振荡或搅拌，一边进行催化反应。经过一定时间取出一定量反应液进行酶活力测定
②酶柱测定法——将一定量的固定化酶装进具有恒温装置的反应中，在适宜的条件下让底物溶液以一定的流速经过酶柱，收集反应液，测定底物的消耗量或产物的生成量
③连续测定法——利用连续分光光度计对固定化酶反应液进行连续测定。
④固定化酶的比活力测定；⑤酶结合效率与酶活力回收率的测定；⑥相对酶活力的测定
3.酶的生物合成的阻遏与诱导作用(P33-P35)
4.酶生物合成的模式
①同步合成型--属于该合成型的酶，其生物合成伴随着细胞的生长而开始，在细胞进入旺盛生长期时，酶大量合成，当细胞生长进入平衡期后，酶的合成随着停止，生长偶联型。
②延续合成型--属于该合成型的酶，其生物合成可以受诱导物的诱导，在细胞生长达到平衡期以后，仍然可以延续合成，说明这些酶所对应的mRNA相当稳定，在平衡期后相当长的一段时间内，仍然可以通过翻译而合成所对应的酶。
③中期合成型--酶的生物合成收到产物的反阻遏作用或分解代谢物阻遏作用，而酶所对应的mRNA稳定性较差。
④滞后合成型--属于该合成型的酶，要在细胞生长进入平衡期以后才开始合成，该类酶所对应的mRNA稳定性很好，可以在细胞生长进入平衡期后相当长一段时间内，继续进行酶的生物合成，非生长偶联型。
5.微生物产酶发酵工艺条件的控制
①培养基的选择和控制，生产中碳源、氮源对微生物酶生产的诱导或抑制作用是最重要的考虑因素；培养基中碳源与氮源的比例是随生产的酶类、生产菌株的性质和培养阶段的不同而改变的；培养基中无机盐、生长因子和产酶促进剂也是要考虑和控制的。②温度控制，酶生产的培养温度随菌种而不同；有的为了利于菌体生长和酶的合成，也有进行变温生产的。③酶生产的合适pH通常和酶反应的最适pH接近；当然也有例外，pH也可能影响微生物分泌的酶系。④溶解氧的调节控制。
6.溶解氧的调节控制
①调节通气量—增大通气量可以提高溶氧速率，减少通气量使溶氧速率降低。
②调节氧的分压—提高氧的分压可以增加氧的溶解度，从而提高溶氧速率。
③调节气液接触时间—气液两相的接触时间延长，可以使氧气更多的时间溶解在培养基中。
④调节气液接触面积—增加气液两相的接触面积有利于提高氧气溶解到培养液中的溶解速率。
⑤改变培养液的性质—培养液的性质对溶氧速率有明显的影响。
7.试述酶发酵动力学的主要内容（材料的试题精选2的简答题）
8.细胞破碎方法及其原理（P85表格4-1）
9.简述SDS-PAGE操作步骤，分离效果，适用研究范围，加入SDS的作用
操作步骤：①制备凝胶—样品胶，浓缩胶，分离胶；②选择电极缓冲溶液—根据欲分离组分而定。一般蛋白质和核酸的分离选择阴离子电泳系统；碱性蛋白质选择阳离子电泳系统。③进行电泳，电泳结束后，将凝胶从玻璃板上取出，进行染色，脱色处理后进行分离检测
分离效果：该电泳方法广泛应用于各种蛋白质相对分子质量的测定，误差不超过±10%
适用研究范围：主要用于酶分子质量的测定，酶蛋白和酶RNA的顺序测定以及酶的分离检测。
加SDS的作用：SDS本身带负电荷，与蛋白质形成复合物，掩盖蛋白质本身电荷
的影响。
10.萃取剂的超临界流体具备的条件
①具有良好的化学稳定性，对设备没有腐蚀性；②临界温度不能太高或太低，最好在室温附近或操作温度附近；③操作温度应低于被萃取溶质的分解温度或变质温度；④临界压力不能太高，可节约压缩动力费；⑤选择性要好，容易制得高纯度的制品；⑥溶解度要高，可以减少溶剂的循环量；⑦萃取剂要容易获得，价格便宜。
11.酶分子修饰的方法
①金属离子置换修饰--只适用于那些在分子结构中本来含有金属离子的酶。用于金属离子置换修饰的金属离子，一般都是二价金属离子。
②大分子结合修饰--使用一些能与酶非共价地相互作用而又能有效地保护酶的一些添加物，如聚乙二醇；既能通过氢键固定在酶分子表面，也能通过氢键有效地与外部水相连，从而保护酶的活力。
③侧链基团修饰—氨基修饰，羧基修饰，巯基修饰
④肽链有限水解修饰—通常使用某些专一性较高的蛋白酶或肽酶作为修饰剂
⑤核苷酸链剪切修饰—主要是对核酸类酶进行修饰。
⑥氨基酸置换修饰—酶蛋白基本有氨基酸组成，将肽链的某一个氨基酸置换成另一个氨基酸，从而改变酶的特性。
⑦核苷酸置换修饰—针对核酸类酶的结构上核苷酸进行置换。
⑧物理修饰—通过物理方法使酶分子的空间构象发生某些改变，从而改变酶的催化特性。
12.酶固定化方法
①吸附法—常用的固体吸附剂有活性炭，硅藻土，硅胶
②包埋法—是将酶包埋在各种多孔载体中，常用的多孔载体有琼脂，海藻酸钠
③结合法—选择适宜的载体，使之通过共价键或离子键与酶结合在一起的固定化方法。
④交联法—借助双功能试剂使酶分子之间发生交联作用，制成网状结构的固定化酶
13.固定化酶的表征手段及其应用
表征手段：①扫描电镜法；②红外光谱法；③圆二色谱法；④NMR核磁共振；⑤AFM原子力显微镜
应用：①在工业生产中的应用—氨基酰化酶世界上第一种工业化生产的固定化酶，用于连续生产L-氨基酸；②在酶传感器方面的应用—固定化酶与能量转换器结合而成的传感装置，广泛用于临床诊断，工业发酵过程控制和环境监测等领域。
14.高通量筛选技术（P217表8-2）
15.酶反应器的类型—要知道各种反应器的缩写，适用的酶，以及简图P225-P229表9-1）
三.综合分析题
1.酶活力测定的基本步骤（举一个酶为例）--材料试题精选1的简答题第2题
2.以一种酶为例，说明如何提高酶产量—材料试题精选2的综合分析题第1题
3.酶生物合成的阻遏与诱导机制—材料试题精选2的综合分析题第2题
4.酶反应器的设计--材料试题精选9的综合分析题
第一章 1.酶工程：是生物工程的重要组成部分，是随着酶学研究迅速发展，特别是酶的推广应用，使酶学和工程学相互渗透、结合、发展而成的一门新的技术科学，是酶学、微生物学的基本原理与化学工程有机结合而产生的边缘科学技术。 2.化学酶工程：指自然酶、化学修饰酶、固定化酶及化学人工酶的研究和应用 3.生物酶工程：是酶学和以基因重组技术为主的现代分子生物学技术结合的产物，亦称高级酶工程。 4.酶工程的组成部分？ 答：酶工程主要指自然酶和工程酶（经化学修饰、基因工程、蛋白质工程改造的酶）在国民经济各个领域中的应用。内容包括：酶的产生；酶的分离纯化；酶的改造；生物反应器。5.酶的结构特点？ 答：虽然少数有催化活性的RNA分子已经鉴定，但几乎所有的酶都是蛋白质，因而酶必然具有蛋白质四级结构形式。其中一级结构是指具有一定氨基酸顺序的多肽链的共价骨架；二级结构为在一级结构中相近的氨基酸残基间由氢键的相互作用而形成的带有螺旋、折叠、转角、卷曲等细微结构；三级结构系在二级结构基础上进一步进行分子盘区以形成包括主侧链的专一性三维排列；四级结构是指低聚蛋白中各折叠多肽链在空间的专一性三维排列。具有低聚蛋白结构的酶（寡聚酶）必须具有正确的四级结构才有活性。具有活性的酶都是球蛋白，即被广泛折叠、结构紧密的多肽链，其氨基酸亲水基团在外表，而疏水基团向内。 6.酶活性中心：是酶结合底物和将底物转化为产物的区域，通常是整个酶分子中相当小的一部分，它是由在线性多肽链中可能相隔很远的氨基酸残基形成的三维实体。 7.酶作用机制有哪几种学说？ 答：锁和钥匙模型、诱导契合模型 8.酶催化活力的影响因素？ 答：底物浓度、酶浓度、温度、pH等。 9.酶的分离纯化的初步分离纯化的步骤？ 答：（一）材料的选择和细胞抽提液的制备 1.材料的选择：目的蛋白含量要高，而且容易获得 2.细胞破碎方法及细胞抽提液的制备。为了确保可溶性细胞成分全部抽提出来，应当使用类似于生理条件下的缓冲液。动物组织和器官要尽可能除去结缔组织和脂肪、切碎后放人捣碎机中。完全破碎酵母和细菌细胞。 3.膜蛋白的释放:膜蛋白存在于细胞膜或有关细胞器的膜上。按其所在位置大体可分为外周 蛋白和固有蛋白两种类型 4.胞外酶的分离:胞外酶是在微生物发酵时分泌到发酵液中的。发酵后可通过离心或过滤将菌体从发酵液中分离弃去，所得发酵清液通常要适当浓缩，然后再作进一步纯化。目前常用的浓缩方法是超滤法。 （二）蛋白质的浓缩和脱盐 浓缩方法主要有：沉淀法、吸附法、干胶吸附法、渗透浓缩法、超滤浓缩法
共三套 《酶工程》试题一： 一、是非题（每题1分，共10分） 1、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。（） 2、酶的分类与命名的基础是酶的专一性。（） 3、酶活力是指在一定条件下酶所催化的反应速度，反应速度越大，意味着酶活力越高。（） 4、液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。（） 5、培养基中的碳源，其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。（） 6、膜分离过程中，膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过，而把大于其孔径的颗粒截留。（） 7、在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对，在酶的亲和层析分离中，可把分子对中的任何一方作为固定相。（） 8、角叉菜胶也是一种凝胶，在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。（） 9、α－淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化，但不称为糊精化酶。（） 10、酶法产生饴糖使用α－淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。（） 二、填空题（每空1分，共28分） 1、日本称为“酵素”的东西，中文称为__________,英文则为__________,是库尼（Kuhne）于1878年首先使用的。其实它存在于生物体的__________与__________。 2、1926年，萨姆纳（Sumner）首先制得__________酶结晶，并指出__________是蛋白质。他因这一杰出贡献，获1947年度诺贝尔化学奖。
3、目前我国广泛使用的高产糖比酶优良菌株菌号为__________,高产液化酶优良菌株菌号为___________。在微生物分类上，前者属于__________菌，后者属于__________菌。 4、1960年，查柯柏（Jacob）和莫洛德（Monod）提出了操纵子学说，认为DNA分子中，与酶生物合成有关的基因有四种，即操纵基因、调节基因、__________基因和__________基因。 5、1961年，国际酶委会规定的酶活力单位为：在特定的条件下（25oC，PH及底物浓度为最适宜）__________,催化__________的底物转化为产物的__________为一个国际单位，即1IU。 6、酶分子修饰的主要目的是改进酶的性能，即提高酶的__________、减少__________，增加__________。 7、酶的生产方法有___________，___________和____________。 8、借助__________使__________发生交联作用，制成网状结构的固定化酶的方法称为交联法。 9、酶的分离纯化方法中，根据目的酶与杂质分子大小差别有__________法，__________法和__________法三种。 10、由于各种分子形成结晶条件的不同，也由于变性的蛋白质和酶不能形成结晶，因此酶结晶既是__________，也是__________。 三、名词术语的解释与区别（每组6分，共30分） 1、酶生物合成中的转录与翻译 2、诱导与阻遏 3、酶回收率与酶纯化比（纯度提高比） 4、酶的变性与酶的失活
酶工程期末复习 一、名词解释 1、酶工程：是酶的生产、改性与应用的技术过程。由酶学与化学工程技术、基因工程技术、微生物学技术相结合而产生的一门新的技术学科。 2、酶的化学修饰：通过化学基团的引入或除去，使蛋白质共价结构发生改变。 3、必需水：一般将维持酶分子完整空间构象所必需的最低水含量称为必需水。 4、抗体酶：具有催化活性的抗体，即抗体酶。 5、别构效应：调节物与酶分子的调节中心结合之后，引起酶分子构象发生变化，从而改变催化中心对底物的亲和力。这种影响被称为别构效应或变构效应。 6、别构酶：能发生别构效应的酶称为别构酶。 7、酶活力：又称酶活性，是指酶催化某一化学反应的能力。 8、比活力：也称为比活性，是指每毫克酶蛋白所具有的酶活力单位数，一般用IU/mg 蛋白质表示。 9、生物传感器：由生物识别单元和物理转换器相结合所构成的分析仪器。 10、蛋白质工程：是以创造性能更适用的蛋白质分子为目的，以结构生物学与生物信息学为基础，以基因重组技术为主要手段，对天然蛋白质分子的设计和改造。 11、酶反应器 12、固定化酶：固定在载体上并在一定空间范围内进行催化反应，可以反复、连续使用的酶。 13、水活度：是指在一定温度和压力下，反应体系中水的摩尔系数w χ与水活度系数w γ的乘积：w w w γχα=。 14、生物反应器：指有效利用生物反应机能的系统（场所）。 15、酶反应器：以酶或固定化酶作为催化剂进行酶促反应的装置称为酶反应器。 16、活化能：从初始反应物（初态）转化成活化状态（过渡态）所需的能量，称为活化能。 二、填空题 1、酶活力测定的方法有终止法和连续反应法。常用的方法有比色法、分光光度法、滴定法、量气法、同位素测定法、酶偶联分析。 2、酶固定化的方法有吸附法（物理吸附法、离子交换吸附法）、包埋法（网格包埋法、微囊型包埋法、脂质体包埋法）、共价结合（偶联）法、交联法。 3、酶活力是酶催化反应速率的指标，酶的比活力是酶制剂纯度的指标，酶的转换数是酶催化效率的指标。 4、细胞破碎的主要方法有机械法（珠磨法、高压匀浆法、超声波破碎法）、非机械法（物理法、化学法、酶法）。 5、有机溶剂的极性系数lgP 越小，表明其极性越强，对酶活性的影响越大。 6、lgP 越大，溶剂的疏水性越强；lgP 越小，溶剂的亲水性越强。 7、酶反应器的类型根据所使用的酶，分为溶液酶反应器、固定化酶反应器。
年级2001 专业生物技术 一名词解释（每题3分，共计30分） 1.酶工程 2.自杀性底物 3.别构酶 4.诱导酶 5.Mol催化活性 6.离子交换层析 7.固定化酶 8.修饰酶 9.非水酶学 10.模拟酶 二填空题(每空1分,共计30分) 1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是，二是 。 2.求Km最常用的方法是。 3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类，一类是，另一类是 。 4.可逆抑制作用可分为，，， 。 5.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是，二是能够利用廉价原料，发酵周期，产酶量，三是菌种不易，四是最好选用能产生酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。 6.酶活力的测定方法可用反应法和反应法。 7.酶制剂有四种类型即酶制剂，酶制剂，酶制剂和 酶制剂。 8.通常酶的固定化方法有法，法，法， 法。 9.酶分子的体外改造包括酶的修饰和修饰。 10.模拟酶的两种类型是酶和酶。 11.抗体酶的制备方法有法和法。 三问答题(每题10分,共计40分) 1.固定化酶和游离酶相比，有何优缺点 2.写出三种分离纯化酶蛋白的方法，并简述其原理。 3.为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料 4.下面是某人对酶测定的一些数据，据此求出该酶的最大反应速度和米氏常数。
10-6 10-6 10-5 10-5 10-5 10-4 10-4 10-2 酶工程试题（B） 一名词解释 1.抗体酶 2.酶反应器 3.模拟酶 4.产物抑制 5.稳定pH 6.产酶动力学 7.凝胶过滤 8.固定化酶 9.非水酶学 10.液体发酵法 二填空题(每空1分,共计30分) 值增加，其抑制剂属于抑制剂，Km不变，其抑制剂属于抑制剂，Km 减小，其抑制剂属于抑制剂。 2.菌种培养一般采用的方法有培养法和培养法。 3.菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素，除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响，发酵条件一般包括，，，， 和等。 4.打破酶合成调节机制限制的方有，，。 5.酶生物合成的模式分是，，， 。 6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有法，法和 法 7. 通常酶的固定化方法有法，法，法， 法。 8. 酶分子的体外改造包括酶的修饰和修饰。 9.酶与抗体的重要区别在于酶能够结合并稳定化学反应的，从而降低了底物分子的，而抗体结合的抗原只是一个态分子，所以没有催化能力 三问答题(每题10分,共计40分) 1.在生产实践中，对产酶菌有何要求 2.对酶进行化学修饰时，应考虑哪些因素 3.列出用共价结合法对酶进行固定化时酶蛋白上可和载体结合的功能团 4.某酶的初提取液经过一次纯化后，经测定得到下列数据，试计算比活力，回收率及纯化 倍数。
酶工程复习题 一、选择题： 1.下面关于酶的描述，哪一项不正确( ) （A）（答案）所有的蛋白质都是酶 （B）酶是在细胞内合成的，但也可以在细胞外发挥催化功能 （C）酶具有专一性 （D）酶是生物催化剂 2.下列哪一项不是辅酶的功能( ) （A）转移基团 （B）传递氢 （C）传递电子 （D）（答案）决定酶的专一性 3.下列对酶活力的测定的描述哪项是错误的( ) （A）酶的反应速度可通过测定产物的生成量或测定底物的减少量来完成 （B）需在最适pH条件下进行 （C）（答案）按国际酶学会统一标准温度都采用25℃ （D）要求[S]远远小于[E] 4.下列关于酶活性部位的描述，哪一项是错误的 （A）活性部位是酶分子中直接与底物结合，并发挥催化功能的部位 （B）活性部位的基因按功能可分为两大类：一类是结合基团，一类是催化基团（C）酶活性部位的集团可以是同一条肽链但在一级结构上相距很远的集团（D）（答案）不同肽链上的有关基团不能构成该酶的活性部位 5.酶的高效率在于 （A）增加活化能 （B）降低反应物的能量水平 （C）增加反应物的能量水平 （D）（答案）降低活化能
6.作为催化剂的酶分子，具有下列哪一种能量效应 （A）增高反应活化能 （B）（答案）降低反应活化能 （C）增高产物能量水平 （D）降低产物能量水平 二、填空题 1.酶和菌体固定化的方法很多。主要可分为吸附法、结合法、交联法和热处理法 2.系统命名法根据酶所催化的反应类型，将酶分为6大类。即1、氧化还原酶；2、转移酶； 3、水解酶； 4、裂合酶； 5、异构酶； 6、合成酶（或称连接酶）。 3.酶分子修饰中，经过修饰的酶的特性会改变，即可提高酶活力，增加稳定性或降低抗原性。 4.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是酶分子结构，二是反应条件。 5.酶的特点酶是生物催化剂；其反应条件温和、催化效率高；酶具有高的作用专一性；其化学本质具有蛋白质性质。 6.常用产酶菌有细菌（大肠杆菌）；霉菌（黑曲酶；青酶；木酶；根酶）；放线菌（链酶菌）；酵母等。 7.通常酶的固定化方法有吸附法共价键结合法交联法包埋法 8.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是致病菌，二是能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高，三是菌种不易退化，四是最好选用能产生胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。 9. 酶的生产方法有提取法，发酵法和化学合成法。 10. 借助双功能试剂使酶分子之间发生交联作用，制成网状结构的固定化酶的方法称为交联法。 11. 酶的分离纯化方法中，根据目的酶与杂质分子大小差别有凝胶过滤法，超滤法和超离心法三种。 12.酶的特点酶是生物催化剂；其反应条件温和、催化效率高；酶具有高的作用专一性；其化学本质具有蛋白质性质。 13.在酶的发酵生产中，培养基要从营养的角度考虑碳源、氮源、无机盐、生长因素的调
酶工程考试复习题及答案精编W O R D版 IBM system office room 【A0816H-A0912AAAHH-GX8Q8-GNTHHJ8】
酶工程考试复习题及答案 一、名词解释题 1.酶活力: 是指酶催化一定化学反应的能力。酶活力的大小可用在一定条件下，酶催化 某一化学反应的速度来表示，酶催化反应速度愈大，酶活力愈高，反之活力愈低。2.酶的专一性:是指一种酶只能对一种底物或一类底物起催化作用，对其他底物无催化 作用的性质，一般又可分为绝对专一性和相对专一性。 3.酶的转换数:是指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数，即是每摩尔酶每分钟催化 底物转变为产物的摩尔数，是酶的一个指标。 4.酶的发酵生产:是指通过对某些特定微生物进行发酵培养后，利用微生物生长发酵过程 中特定的代谢反应生成生产所需要的酶，最后通过提取纯化过程得到酶制剂的过程称为酶的发酵生产。 5.酶的反馈阻遏: 6.细胞破碎:是指利用机械、物理、化学、酶解等方法，使目标细胞的细胞膜或细胞壁得 以破坏，细胞中的目标产物得以选择性或全部释放便于后续收集和分离的过程称为细胞破碎。 7.酶的提取: 是指在一定的条件下，用适当的溶剂处理含酶原料，使酶充分溶解到溶剂 中的过程，也称作酶的抽提，是酶分离纯化过程常用的手段之一。 8.沉淀分离:是通过改变某些条件，使溶液中某种溶质的溶解度降低，从溶液中沉淀析 出，而与其他溶质分离的方法，常用语酶的初步提取与分离。
9.层析分离: 亦称色谱分离，是一种利用混合物中各组分的物理化学性质的差别，使各 组分以不同程度分布在两个相中，其中一个相为固定的(称为固定相)，另一个相则流过此固定相(称为流动相)并使各组分由于与固定相和流动相作用力的不同以不同速度移动，从而达到分离的物理分离方法。 10.凝胶层析: 又称为凝胶过滤，分子排阻层析，分子筛层析等。是指以各种多孔凝胶为 固定相，在流动相冲洗过程中混合物中所含各种组分的相对分子质量和分子大小不同，在固定相凝胶微孔中移动的距离不同，从而依次从层析柱中分离出来，达到物质分离的一种层析技术。 11.亲和层析: 是利用生物分子与配基之间所具有的专一而又可逆的亲和力，将混合物装 入层析柱中利用流动相的冲洗作用和目标分子与固定相配基亲和作用力不同而使生物分子分离纯化的技术。 12.离心分离: 借助于离心机旋转所产生的离心力，使不同大小、不同密度的物质分离的 技术过程。 13.电泳:带电粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的过程称为电泳。利 用不同的物质其带电性质及其颗粒大小和形状不同，在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同，故此可使它们分离，电泳技术是常用的分离技术之一。 14.萃取:是利用物质在两相中的溶解度不同而使其分离的技术。 15.双水相萃取:双水相是指某些高聚物之间或者高聚物与无机盐之间在水中以一定的浓度 混合而形各种不相溶的两水溶液相。由于溶质在这两相的分配系数的差异进行萃取的方法称为双水相萃取。
第一章绪论 问题：试述木瓜蛋白酶的生产方法？ 答：木瓜蛋白酶可以采用提取分离法、基因工程菌发酵法、植物细胞培养法等多种方法进行生产。 (1)提取分离法：从木瓜的果皮中获得木瓜乳汁，通过各种分离纯化技术获得木瓜蛋白酶。 (2)发酵法：通过DNA重组技术将木瓜蛋白酶的基因克隆到大肠杆菌等微生物中，获得基因工程菌，在通过基因工程菌发酵获得木瓜蛋白酶。 (3)植物细胞培养法：通过愈伤组织诱导获得木瓜细胞，在通过植物细胞培养获得木瓜蛋白酶。 第二章微生物发酵产酶 1、解释酶的发酵生产、酶的诱导、酶的反馈阻遏(产物阻遏)、分解代谢物阻遏。诱导物的种类？ 答：酶的发酵生产：利用微生物的生命活动获得所需的酶的技术过程； 酶的诱导：加进某些物质，使酶的生物合成开始或加速的现象，称为诱导作用； 产物阻遏（反馈阻遏）：指酶催化反应的产物或代谢途径的末端产物使该酶的生物合成受到阻遏的现象。 分解代谢物阻遏（营养源阻遏）：是指某些物质经过分解代谢产生的物质阻遏其他酶合成的现象。 诱导物的种类：诱导物一般是酶催化作用的底物或其底物类似物，有的也是反应产物。2、微生物产酶模式几种？特点？最理想的合成模式是什么？ 答：（1）同步合成型特点： a.发酵开始，细胞生长，酶也开始合成，说明不受分解代谢物和终产物阻遏。 b.生长至平衡期后，酶浓度不再增长，说明mRNA很不稳定。 （2）延续合成型特点： a.该类酶一般不受分解代谢产物阻遏和终产物阻遏。 b.该酶对应的mRNA是相当稳定的。 （3）中期合成型特点： a.该类酶的合成受分解代谢物阻遏和终产物阻遏。 b.该酶对应的mRNA不稳定。 （4）滞后合成型特点： a.该类酶受分解代谢物阻遏和终产物阻遏作用的影响，阻遏解除后，酶才大量合成。 b.该酶对应的mRNA稳定性高。 选择：在酶的工业生产中，为了提高酶产率和缩短发酵周期，最理想的合成模式是延续合成型。 3、可以添加什么解除分解代谢物阻遏？表面活性剂的作用？ 答：（1）一些酶的发酵生产时要控制容易降解物质的量或添加一定量的cAMP，均可减少或解除分解代谢物阻遏作用。 （2）表面活性剂的作用：增溶、乳化作用、润湿作用、助悬作用、起泡和消泡作用、消毒和杀菌剂。 4、根据微生物培养方式不同，酶的发酵生产有几种类型？哪种是目前酶发酵生产的主要方式？按酶生物合成的速度把细胞中的酶分几类？酶的生物合成在转录水平的调节主要有哪三种模式？微生物细胞生长过程一般分为几个阶段？
酶工程试卷(A) 1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是酶分子结构，二是反应条件。 2.求KM最常用的方法是 双倒数作图法。 3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类，一类是序列机制，另一类是乒乓机制， 4.可逆抑制作用可分为竞争性，反竞争性，非竞争性，混合性； 5.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有：一是看它是不是致病菌，二是能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高；三是菌种不易退化；四是最好选用能生产胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。 6.酶活力的测定方法可用 终止反应法和连续反应法。 7.酶制剂有四种类型即液体酶制剂，固体酶制剂，纯酶制剂和固定化酶制剂。 8。通常酶的固定化方法有吸附法，包埋法，交联法，共价键法。 9.酶分子的体外改造包括酶的表面修饰和内部修饰。 10.模拟酶的两种类型是半合成酶和全合成酶。 11.抗体酶的制备方法有拷贝法和引入法。 1.为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料？ 解:1.微生物种类丰富，酶种丰富，且菌株易诱变，菌种多样。 2.微生物生长繁殖快，酶种提取，特别是胞外酶 3.来源广泛，价值便宜。 1）微生物易得，生长周期短 2）可以利用微电脑技术控制酶的发酵生产，可进行连续化，自动化，经济效益高。 3）可以利用以基因工程为主的分子生物学技术，选育和改造菌种，增加产酶率和开发新酶种。 酶工程试题（B） 1.Km值增加，其抑制剂属于竞争性抑制剂，Km不变，其抑制剂属于非竞争性抑制剂，Km调小，其抑制剂属于反竞争性抑制剂。 2.菌种培养一般采用的方法有固体培养法和液体培养法。 3.菌种的优劣是影响产酶的主要因素，除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响，发酵条件一般包括温度、PH、氧气、搅拌、湿度和泡沫等。 4.打破酶合成调节机制限制的方法有控制条件，遗传控制，其他方法。 5.酶生物合成的模式分别是同步合成型，延续合成型，中期合成型，滞后合成型。 6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有热变性法，酸碱变性法和表面变性法。 7.通常酶的固定方法有：交联法、包埋法、吸附法、共价结合法。
酶工程复习资料 名词解释 1、酶反应器：用于酶进行催化反应的容器和附属设备 2、pH记忆： 3、产物阻遏作用：又称酶生物合成的反馈阻遏作用，是指酶催化反应的产物或代谢途径末端的产物使该酶的生物合成受到阻遏现象。 4.1酶的延续合成型:酶的生物合成在细胞的生长阶段开始，在细胞生长进入平衡期后，酶还可以延续合成一段时间的生物合成模式。 4.2同步合成型：是指酶的生物合成与细菌生长同步进行的一种酶生物合成模式。 4.3中期合成型：酶在细胞生长一段时间后才开始合成，细胞进入生长平衡期后，酶的生物合成也随之停止。 4.4滞后合成型：酶是在细胞进入生长平衡期后才开始生物合成并大量积累， 5、固定化细胞——固定在载体上，并在一定空间范围内进行生命活动的细胞。 6、电场膜分离——是在半透膜的两侧分别装上正、负电极。在电场作用下，小分子的带电物质或离子向着与其本身所带电荷相反的电极移动，透过半透膜，而达到分离的目的。 7、催化周期：酶进行一次催化所需的时间。 8、固定化酶：固定在载体上并在一定空间范围内进行催化反应的酶称为固定化酶。 9、抗体酶：抗体酶又称为催化性抗体，是一类具有催化功能的抗体 10、立体异构专一性：当酶作用的底物含有不对称碳原子时，酶只能作用于异构体的一种，这种绝对专一性称为立体异构专一性。 11、微滤：又称为孔过滤，微滤介质截留的物质颗粒直径为0.2-2um，主要用于细菌、灰尘等光学显微镜可看到的颗粒物质的分离。 12、酶的比活力：是一个纯度指标，指特定条件下，单位质量的蛋白质或RNA所具有的酶活。 13、膜反应器：是将酶的催化反应和半透膜的分离作用组合在一起的反应器。 14、酶电极：是由固定化酶与各种电极密切结合的传感装置。 15、氨基酸置换修饰：将酶分子上的某一个氨基酸置换成另一个氨基酸的修饰方法。 16、盐析沉淀法：是利用不同蛋白质在不同盐溶度条件下溶解度不同的特性，通过在酶液中添加一定浓度的中性盐，使酶或杂质从溶液中析出沉淀，从而使酶与杂质分离的过程。 17、对映体选择性：又称为立体选择性或立体异构专一性，是酶在对成体外消旋化合物中，识别一种异构体的能力大小指标 18、竞争性抑制：是指抑制剂和底物竞争与酶分子结合而引起的抑制作用。 19、必需水：维持酶分子完整的空间构象所需的最低含水量。 20、溶解氧：指溶解在培养基中的氧气。 21、固定化原生质体：指固定在载体上并在一定空间范围内进行生命活动的原生质体。 22、酶合成的分解代谢物阻遏：是指某些物质分解代谢的产物阻遏某些生物合成的现象。 23、酶合成的诱导：加进某些物质，使酶的合成开始或加速的进行的现象。 24、酶工程：酶的生产与应用的技术过程称为酶工程。 25、反胶束萃取：是利用反胶束将酶或蛋白质从混合液分离出来的一种分离纯化技术
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酶工程期末复习材料 一.名词解释 1.绝对专一性：一种酶只能催化一种底物进行一种反应，这种高度专一性称 为绝对专一性。 2.相对专一性：一种酶能够催化一类结构相似的底物进行某种相同类型的反 应，这种专一性称为相对专一性。 3.酶的转换数：又称摩尔催化活性，是指每个酶分子每分钟催化底物转化的 分子数。 4.催化周期：是指酶进行一次催化所需的时间。 5.酶结合效率：又称酶的固定化率，是指酶与载体结合的百分率。 6.酶活力回收率：是指固定化酶的总活力与用于固定化酶的总酶活力的百分 率 7.沉淀分离：通过改变某些条件或添加某种物质，使酶的溶解度降低，而从 溶液中沉淀析出，与其他溶质分离的技术过程。 8.盐溶：一般在低盐浓度下，蛋白质的溶解度随盐的浓度升高而增加，这种 现象称为盐溶 9.盐析：盐浓度升高到一定浓度后，蛋白质的溶解度又随盐浓度的升高而降 低，结果使蛋白质沉淀析出，这种现象称为盐析。 10.差速离心：是采用不同的离心速度和离心时间，使不同沉降速度的颗粒分 批分离的方法。 11.密度梯度离心：是样品在密度梯度介质中进行离心，使沉降系数比较接近 的物质得以分离的一种区带分离方法。 12.等密度梯度离心：当欲分离的不同密度范围处于离心介质的密度范围时， 在离心力的作用下，不同浮力密度的颗粒或向下沉降，或向上漂浮，只要时间足够，就可以一直移动到与它们各自的浮力密度恰好相等的位置，形成区带，这种方法称为等密度梯度离心。
13.离子交换层析：利用离子交换剂上的可解离基团对各种离子的亲和力不同 而达到分离目的的一种层析分离方法 14.凝胶层析：又称凝胶过滤，分子排阻层析，分子筛层析等，是指以各种多 孔凝胶为固定相，利用流动相中所含各种组分的相对分子质量不同达到物质分离的一种层析技术。 15.超临界萃取：又称超临界流体萃取，利用遇分离物质与杂质在超临界流体 中的溶解度不同而达到分离的一种萃取技术。 16.超临界流体：当温度和压力超过其超临界点时，两相变为一相，这种状态 下的流体称为超临界流体。 17.表面活性剂：是由极性基团和非极性基团组成两性分子，有阳离子，阴离 子和非离子型表面活性剂。 18.酶分子修饰：通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的 催化特性的技术过程称为酶分子修饰。 19.酶的固定化：采用各种方法，将酶固定在水不溶性的载体上，制备固定化 酶的过程称为酶的固定化。 20.固定化酶：固定在载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶称为固 定化酶。 21.Ks分段盐析：在一定的温度和pH条件下，通过改变离子强度是不同的酶或 蛋白质分离的方法 22.β分段盐析：在一定盐和离子强度的条件下，通过改变温度和pH，使不同 的酶和蛋白质分离的方法。 23.酶的非水相催化：酶在非水介质中的催化作用称为酶的非水相催化。 24.离子液：由有机阳离子与有机阴离子构成的室温条件下呈液态的低熔点盐 类，挥发性低，稳定性好。 25.微水介质体系：是由有机溶剂和微量水组成的反应体系，是在有机介质酶 催化中广泛应用的一种反应体系
酶工程试题 一、名词解释 1.固定化酶 采用各种方法，将酶固定在水不溶性的载体上，制备成固定化酶的过程称为酶的固定化。固定在载体上，并在一定的范围内进行催化反应的酶称为固定化酶。 2.酶反应器 用于酶进行催化反应的容器及其附属设备称为酶反应器。 3.模拟酶 利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单，但具有催化作用的非蛋白质分子叫做模拟酶 4.抗体酶 又叫做催化抗体，是抗体的高度选择性和酶的高效催化能力巧妙结合的产物，是一类具有催化活力的免疫球蛋白，其可变区赋予了酶的属性 5.印迹酶 以一种分子充当模板，其周围用聚合物交联，当模板分子除去后，聚合物就留下了与此分子相匹配的空穴，若构建合适，这种聚合物就像锁一样，对钥匙具有选择性识别作用。这种技术称为分子印迹，该技术的酶产物称为印迹酶。 6.融合酶 将两个或者多个酶分子组合在一起形成的融合蛋白 7.定点突变 只在基因的特定位点引入突变，通过取代、插入或者删除已知DNA序列中特定的核苷酸序列来改变酶蛋白结构中某个或某些特定的氨基酸，以此来提高酶对底物的亲和力，增强酶的专一性等。
8.必需水 在有机介质中，酶分子需要一层水化层以维持其完整的空间构象，将对于维持酶活性所必需的最低水量为必需水，由于其与酶分子的结合十分紧密，又称结合水。 9.酶传感器 以酶作为分子识别元件上的敏感材料，同各种不同的转换器结合所构成的一类生物传感器。 10.酶的必需基团和活性中心 酶的必需基团是指酶分子中与酶的活性密切相关的基团，酶的活性中心是指与底物结合并催化反应的场所。 二、填空题 1.酶根据主要组分的不同可以分为：蛋白类酶和核酸类酶两大类，根据酶的作用的底 物和催化反应的类型进行分类可以分为：氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构酶、合成酶（连接酶）。（写出4种即可） 2.酶的活力是酶催化速度的度量指标，酶的比活力是酶纯度的度量指标，酶转换数是 酶催化效率的度量指标。 3.酶的生产方法有：提取分离法生产，发酵法生产，化学合成法生产，生物合成 法生产。 4.酶反应器类型有：搅拌罐式反应器，填充床式反应器，流化床反应器，鼓泡式 反应器，膜反应器，喷射式反应器。（写出3种即可） 5.可逆抑制作用可分为＿竞争性抑制作用、＿非竞争性抑制作用＿和＿反竞争性抑制作 用。 6.非竞争性抑制的特点是最大反应速度Vm降低，米氏常数Km不变。 7.细胞破碎的主要方法有：机械破碎，物理破碎，＿化学破碎＿和＿酶促破碎＿。
有毒环境等极端条件下，由于酶分子空间构象的改变而引起酶的特性和功能的变化情况。b 提 高酶的催化活性，增强酶的稳定性或者是酶的催化动力学特性发生某些改变。 1. 常用的固定化方法主要有哪些？
吸附法 2. 包埋法 3. 结合法 4. 交联法 5. 热处理法 2. 何谓固定化酶？经过固定化以后，酶的特性有哪些改变？ 固定化酶：固定在载体上，并在一定空间范围内进行催化反应的酶称为固定化酶。 改变有：稳定性：固相酶的稳定性比游离酶高，主要表现在： （ 1 ）热稳定性：固定化酶热稳定性较之天 然酶提高。
2 ）对蛋白酶水解作用稳定性：固相酶比天然酶有更强的抵抗蛋白酶水解作用的能力。 （ 3 ）对变性试剂作用的稳定性： 固相酶对各种蛋白变性剂的稳定性，一 般都比天然酶强。 （ 4 ）保藏稳定性：固相酶比天然酶保存的时间更长。 最适温度： (1) 固相酶的最适温度一般比天然酶高，个别会有所降低 (2) 同种酶，采用不同的方法或不同载体固定化后，其最适温度可能不同
最适 pH ：酶经固定化后，其作用的最适 pH 常会发生偏移影响固定化酶最适 PH 的因素主要有 两个。 (1) 载体性质对最适 pH 影响：用带负电荷载体制备的固定化酶，最适pH 比 游离酶最适 pH 高。用带正电荷载体制备的固定化酶，最适pH 比游离酶最适 pH
低。 用不带电荷载体制备的固定化酶，最适 pH 一般不改变。 (2) 产物性质对最适 pH 影 响；若酶催化反应产物为酸性时，固定化酶最适pH 比游离酶的最适 pH 要高。若酶 催化反应产物为碱性时，固定化酶最适 pH 比游离酶的最适 PH 要低。若酶催化反应 产物为中性时，固定化酶最适 pH 不变。
《科学与技术》期末复习（一） 绪论 （一）教学内容： 1.理解什么是科学、什么是技术、科学与技术的主要区别和联系。? 2.了解科学技术认识发展的动因、科学与生产实践、社会条件及与其他学科的关系。 3.了解高新技术的范围及概况。 4.了解创新是科学技术的发展的动力。 （二）例题： 1.18世纪末法国启蒙思想家狄徳罗指出：“技术是为了某一目的共同协作组成的各种工具 和_________ A规则体系B规章制度C评价体系D规定 答案：A 2.科学发展经历了不同的时代。16世纪是以科学家伽利略为代表的_________ 时代；17世纪是以 科学家牛顿为代表的皇家学会时代；18世纪到第二次世界大战前是以科学家爱迪生为代表的“实验工厂”时代。今天，科学已经进入了国际合作的_________ 时代 答案：个体活动跨国建制 3 ?高新技术 答案：通常是指具有突出的社会功能及极高的经济效益，以最新的科学发现为基础，具有重要价值的技术群。 4.科学发展的内部和外部因素是什么？ 答案： 要点一： 科学认识发生和发展的动因有两个方而，存在于科学外部的，是社会的经济发展需要；存在于科学内部的，是科学认识本身的逻辑；它们构成了科学认识发展的外部因素和内部因素。 要点二： 恩格斯曾经指出：“经济上的需要曾经是，而且愈来愈是对自然界的认识进展的主要动力。” 而经济上的需要，主要是通过生产实践来解决的，所以科学的发展与社会生产的发展状况有着密切的关系。在古代，科学、技术和生产之间的关系，往往是生产实际的需要刺激技术的进步，再促进科学的发展。它们之间的关系是生产一技术一科学，生产和技术的实践为科学理论的形成奠定基础。从十九世纪下半叶以来， 这种关系有了微妙的变化。科学理论不仅是处在技术和生产的前而，而且为技术和生产的发展开辟了各种可能的途径，形成了科学一技术一生产的发展顺序。这是由于工业和技术的长足发展，已经超出了人们熟悉的范围。 科学的任务，就是要在最短的时间内，跑完人类历史本身在利用其它比较简单的运动形式方而所走过的路程，尽快地为技术和生产的发展开拓出新的途径。这种变化并不是意味着“决定作用”已经由实践转向了理论，由生产和技术转向了科学。科学在今天之所以超前于技术和生产的发展，它止是以现代生产技术的发展为其条件的。不难理解，如果缺少现代生产技术所提供的强有力的实验手段，科学理想的实现，以及科学认识向宇观世界和微观世界的深入推进都是不可能的。所以，
(A) 正协同作用；(B) 负协同作用；(C) 无协同；(D) 激活作用 7、一个原体(蛋白)能同时结合几个同种配体，若有正协同作用，则原体饱和分数Y与配体浓度的关系曲线为C。 (A) 直线； (B) 双曲线；(C) S形曲线；(D) 抛物线 8、某代谢途径的终点产物对该途径的第一个酶的活性具有反馈抑制作用，这种活性调节方式为C。 (A) 竞争性抑制；(B) 非竞争性抑制；(C) 别构调节； (D) 共价结构改变调节 9、测定某种酶的活性时，实际上是设计一个该酶的反应体系，测定C，通过该指标反映酶的量。 (A) 底物的消耗总量；(B) 产物生成总量；(C) 反应的初速度；(D) 反应的平均速度 10、在测定酶活力时，一般要设置空白，下列哪一种最不可能是合适的空白D。 (A) 在反应体系中不加酶； (B) 在反应体系中加入失活的酶；(C) 控制反应体系的pH 为强酸性； (D) 在反应体系中加入已知活性的标准酶 11、进行酶法分析时，若使用动力学分析法，则应设计反应体系使 C 。 (A) 酶不足；(B) 底物过量； (C) 底物浓度小于0.1Km；(D) 产物过量 12、下列酶蛋白的分离纯化方法中，哪一种不属于根据电荷性质来进行纯化的 D 。 (A) 阴离子交换层析；(B) 阳离子交换层析；(C) 等电聚焦；(D) 超滤 13、根据介质孔径的不同，可以将过滤分为几种类型，其中用来分离酶蛋白和小分子杂质的过滤方法为C。 (A) 凝胶过滤；(B) 微滤；(C) 超滤；(D) 反渗透 14、下列哪一项不属于非水介质中酶催化反应的优势 C 。 (A) 酶的稳定性更好；(B) 底物的范围更广；(C) 酶活性中心的柔性更强；(D) 可减少由水引起的副反应 15、要在非水介质进行酶催化反应，需做到B。 (A) 非水介质中应完全无水；(B) 酶分子周围应有少量结合水；(C) 非水介质分散在酶的水溶液中；(D) 只在酶分子周围结合少量非水介质 16、经可溶性大分子修饰的酶，下列哪种性质最有可能提高？ A 。 (A) 稳定性；(B) 催化活性；(C) 抗原性；(D) 酶分子的柔性 17、可以选择性地对酶活性中心基团进行修饰的是 C 。 (A) 小分子修饰；(B) 大分子修饰；(C) 亲和修饰；(D) 金属离子修饰 18、RNase P由蛋白成分和RNA成分构成，Altman经过研究，最终发现RNA成分是A。 (A) 该酶的活性中心；(B) 辅助因子；(C) 结构稳定因子；(D) 与酶活无关 19、I型内含子的自我剪接通过三次B反应完成。 (A) 转氨反应；(B) 转酯反应；(C) 氧化还原反应；(D) 水解反应 20、迄今为止，核酶C。 (A) 都是天然存在的；(B) 都是人工合成的；(C) 既有天然的，也有人工合成的；(D) 只在真核生物中发现 21、环糊精之所以可以用来设计模拟酶，是因为其分子结构中有 A 。 (A) 疏水性孔穴；(B) 亲水性孔穴；(C) 糖环；(D) 糖苷键 22、利用环糊精设计模拟酶时，需向其分子结构中引入B。 (A) 底物结合基团；(B) 催化基团；(C) 氨基酸；(D) 小肽 23、下列哪种技术可用于酶分子的体外定向进化 D 。 (A) 诱变选育；(B) 自然选育；(C) 杂交育种； (D) 易错PCR 24、从对酶的结构与功能关系认识的角度而言，酶分子定向进化属于B。 (A) 酶分子的合理设计；(B) 酶分子的非合理设计；(C) DNA改组；(D) 易错PCR 25、下列哪一种定向进化策略属于无性进化 C 。 (A) DNA改组技术；(B) 交错延伸法；(C) 易错PCR；(D) 随机引物体外重组法 26、医疗或分析检测用酶通常要采用 C
酶工程复习提纲 第一章绪论 1. 酶及酶工程的概念。 酶：是生物体内一类具有催化活性和特殊空间构象的生物大分子物质。 酶工程：利用酶的催化作用，在一定的生物反应器中，将相应的原料转化成所需产品的一门工程技术。（名词解释） 2. 了解酶学的发展历史，尤其是一些关键事件。 1833年，Payen和Persoz发现了淀粉酶。1878年，Kuhne首次将酵母中进行乙醇发酵的物质称为酶。给酶一个统一 的名词，叫Enzyme，这个词来自希腊文，其意思“在酵母中”。 1902年，He nri提出中间产物学说。1913年，Michaelis and Men to n推导出酶催化反应的基本动力学方程，米氏方程： V=VmS/ （Km+S ）。1926年，Summer分离纯化得到脲酶结晶。人们开始接受“酶是具有生物催化功能的蛋白质”。Cech and Altman于1982和1983年发现具有催化活性的RNA即核酸类酶，1989年获诺贝尔化学奖。现已鉴定出5000 多种酶，上千种酶已得到结晶，而且每年都有新酶被发现。 3. 了解酶在医药、食品、轻工业方面的应用。 医药：（1）用酶进行疾病的诊断：通过酶活力变化进行疾病诊断，谷丙转氨酶/谷草转氨酶用于诊断肝病、心肌梗塞 等，酶活力升高；葡萄糖氧化酶用于测定血糖含量，诊断糖尿病。 （2）用酶进行疾病的治疗：来源于蛋清、细菌的溶菌酶用于治疗各种细菌性和病毒性疾病；来源于动物、蛇、细 菌、酵母等的凝血酶用于治疗各种出血病；来源于蚯蚓、尿液、微生物的纤溶酶用于溶血栓。 （3）用酶制造各种药物：来源于微生物的青霉素酰化酶用于制造半合成青霉素和头孢菌素；来源于动物、植物、 微生物的蛋白酶用于生产L-氨基酸。 食品：生产低聚果糖，原料为蔗糖，所需酶为果糖基转移酶、蔗糖酶 a （黑曲霉、担子菌）；生产低聚异麦芽糖， 原料为淀粉，所需酶为a-淀粉酶、3 -淀粉酶、真菌a -淀粉酶（米曲霉）、a -葡萄糖苷酶（黑曲霉）、普鲁兰酶、糖化型a -淀粉酶（枯草杆菌）。 轻工业：用酶进行原料处理；用酶生产各种轻工、化工产品；用酶增强产品的使用效果。
酶工程试题&答案 一、名词解释（6*3） 1.酶工程； 酶工程是酶的生产、改性与应用的技术过程。从应用的目的出发，将酶学理论与化学工程相结合来研究酶，并在一定的反应装置中利用酶的催化特性将原料转化为产物的一门新技术。 2.固定化酶； 固定化酶是指固定在不溶于水的载体上，并在一定空间范围内进行催化反应的酶。 3.酶分子修饰； 酶分子修饰是指通过各种方法使酶分子的结构发生某些变化，从而改变酶的催化特性的过程。 4.pH印记； 在有机介质反应中，酶所处的pH环境与酶在冻干或吸附在载体上之前所使用的缓冲液pH相同。这种现象称为pH印记，也称pH记忆。 5.定向进化； 定向进化是指模拟自然进化的过程，进行人工随机突变，并在特定的环境下进行选择，使进化朝着人们所需方向发展的技术过程。 6.酶反应器； 用于酶进行催化反应的容器及其附属设备称为酶反应器。按结构不同可分为搅拌罐式反应器（STR），鼓泡式反应器（BCR)，填充床式反应器(PCR)，流化床式反应器(FBR)，膜反应器(MR)等。 二、填空题（22*1） 1.与非酶催化作用相比，酶催化作用具有、、 等显著特点。（专一性强，催化效率高，作用条件温和） 2.酶的可逆性抑制作用可以分为、、 三种。（竞争性抑制，非竞争性抑制，反竞争性抑制） 3.按催化作用的类型，可将P酶分为：、转移 酶、、、异构酶、。（氧化还原酶，水解酶，裂合酶，合成酶） 4.酶生物合成的基本过程：、。（转录，翻译） 5.根据基因调节理论，在DNA分子中，与酶的生物合成有密切关系的基因有
、 、 、 。（调节基因，启动基因，操纵基因，结构基因） 6.微生物细胞生长过程一般经历 、 、 、 。（调整期，生长期，平衡期，衰退期） 7.细胞破碎方法可以分为机械破碎法、 、化学破碎法和 。（物理破碎法，酶促破碎法） 三、选择题（5*2） 1.酶生物合成的调节主要在（ ）上。B A.复制水平 B.转录水平 C.翻译水平 D.蛋白质加工水平 2.目前最常用的酶分子修饰方法是（ ）。C A.金属离子置换修饰 B.氨基酸置换修饰 C.大分子结合修饰 D.核苷酸有限水解修饰 3.下列不属于植物细胞培养基的是（ ）。C A.需要大量的无机盐 B.需要多种维生素 C.需要多种适量抗生素，以防止污染 D.氮源一般为无机氮，碳源一般为蔗糖 4.反竞争性抑制剂的特点是（ ）。A A.m K 和m V 同时减小 B.m K 和m V 同时增加
1、酶工程的定义，研究的主要内容 酶的生产、改性与应用的技术过程称为酶工程 研究的主要内容包括：微生物细胞发酵产酶，动植物细胞培养产酶，酶的提取与分离纯化，酶分子修饰，酶、细胞、原生质体固定化，酶非水相催化，酶定向进化，酶反应器和酶的应用等 酶工程的主要任务是经过预先设计，通过人工操作获得人们所需的酶，并通过各种方法使酶的催化特性得以改进，充分发挥其催化功能。 2、酶的基本特征，酶命名的方法有哪些，蛋白类酶的分类方法 基本特征：专一性强，催化效率高，作用条件温和等 每一种具体的酶都有其具体的推荐名和系统命名。推荐名是在惯用名称的基础上，加以选择和修改而成的。酶的推荐名由两部分组成，第一部分为底物名称，第二部分为催化反应的类型，后面加一个酶字，不管酶的催化是正反应还是逆反应，都用同一个名，如葡萄糖氧化酶，表明该酶的作用底物是葡萄糖催化反应类型是氧化反应。 酶的系统命名更加详细更准确地反映出该酶所催化的反应。系统命名包括了酶的作用底物酶作用的基团及催化反应的类型，如上述葡萄糖氧化酶的系统命名“β－D－葡萄糖：氧1-氧化还原酶”，表明该酶所催化的反应以β－D－葡萄糖为脱氢的供体，氧为氢受体，催化作用在第一个碳原子基团上进行，所催化反应属于氧化还原反应。 蛋白酶类的分类 1、按照酶催化作用的类型，将蛋白酶类分为六大类，氧化还原酶，转移酶，水 解酶裂合酶，异构酶，合成酶 2、每个大类中，按照酶作用的底物、化学键或者基团的不同，分为若干亚类 3、每一亚类再分为若干小类 4、每一小类包含若干个具体的酶、 3、酶的生产方法有哪些 酶的生产是指通过人工操作而获得所需的酶的技术过程 酶的生产方法分为提取分离法、生物合成法、化学合成法3种，其中提取分离法是最早采用并沿用至今的方法，生物合成法是20世纪50年代以来酶生产的主要方法，而化学合成法至今仍停留在实验室阶段 4、酶的生产合成调节理论，包括操纵子，诱导作用，阻遏作用 1、操纵子在原核基因组中,由几个功能相关的结构基因及其调控区组成的一个基因表达的协同单位. ①结构基因是决定某一多肽的DNA 模板，可根据其上的碱基顺序转录出相应的mRNA，然后再可通过核糖体转译出相应的酶 ②启动子：能被依赖于DNA的RNA聚合酶所识别的碱基顺序，是RNA聚合酶的结合部位和转录起点 ③操纵基因：位于启动基因和结构基因之间的一段碱基顺序，是阻遏蛋白的结合位点，能通过与阻遏物相结合来决定结构基因的转录是否能进行 ④调节基因：用于编码组成型调节蛋白的基因，一般远离操纵子,但在原核生物中,可以位于操纵子旁边,编码调节蛋白。 2、酶合成调节的类型：诱导和阻遏