标准操作程序
[目的]
保证检测结果准确可靠。
[该SOP变动程序]
本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经专业主管、科主任批准签字。
[标本的采取和保存]
采静脉血2ml，分离血清备用。也可以使用血浆标本进行检测。标本宜新鲜，无污染，避免溶血，避免反复冻融，不可用NaN3防腐。
[测定原理]
采用兔抗-人IgMu链包被反应被，加入待测标本，同时加入HA V Ag，抗HA V-HRP，如待测标本中含有抗-HA V-IgM时，就能与包被兔抗-人IgMu链结合，并且与HA V Ag,抗-HA V-HRP 结合成复合物，加TMB底物产生显色反应，反之则无显色反应。
[操作步骤]
1.将待测标本用生理盐水作（1：1000）稀释，每孔加入稀释标本100ul，设阴、阳性对照
各2空，每孔加入阴性对照（或阳性对照）100ul（或2滴），并设空白对照一孔，封板，置37度孵育20分钟。
2.洗板机洗板：选择洗涤5次程序洗板后拍干。手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各
空，静置5秒，甩干，重复三次后拍干。
3.每孔加入HA V Ag30ul（或一滴），酶结合物50ul（或一滴），（空白对照孔不加），充分混
匀，封板，置37度孵育20分钟。
4.洗板机洗板：选择洗涤5次程序洗板后拍干。手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各
空，静置5秒，甩干，重复三次后拍干。
5.每孔加显色剂A液、B液各50ul（或一滴），充分混匀，封板，置37度孵育10分钟。
6.每孔加入终止液50ul（或一滴），混匀。
7.用酶标仪读数，取波长450nm（建议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630nm），先
用空白孔校零，然后读取各孔OD值。
[结果判断]
样品OD值除以阴性对照平均OD值大于或等于2.1判断为阳性，否则为阴性
阴性对照OD值低于0.05作0.05计算，高于0.05按实际OD值计算
[临床意义]
血清中HA V—IgM在亚临床期即已出现，其滴度在感染后3个月维持在1000以上，早被公认为早期诊断甲型肝炎的依据。
[注意事项]
1．试剂使用前应摇匀，并弃去1~2滴后垂直滴加，注意均匀用力。
2．从冷藏环境中取出的试剂盒应置室温平衡30分钟再进行测试，余者应及时封存，置冰箱内储藏备用。
3．洗板时所用的洗水纸请勿反复。
4．不同批号试剂请勿通用。
5．结果判断须在10分钟内完成。
6．封片不能重复使用。
7．用本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程操作。
标准操作程序
[目的]
保证检测结果准确可靠。
[该SOP变动程序]
本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
[标本的采取和保存]
随机静脉血2ml，分离血清备用。也可以使用血浆标本进行检测。标本宜新鲜，无污染，避免溶血，避免反复冻融，不可用NaN3防腐。
[测定原理]
双抗体夹心法测HBsAg：抗S包被反应板，加入待测血清后，再加入酶标抗S，加底物显色为阳性，证明样本中含被测物，含量与显色程度成正比。
[操作步骤]
1．实验准备：从冷藏环境中取出试剂盒，在室温下平衡30分钟，同时将浓缩洗涤液作1：20稀释。
2．加待测标本：加入待测标本每孔0.05毫升，并设阳性对照2孔，阴性对照2孔，空白对照1孔。
3．加酶结合物：每孔0.05毫升，空白对照孔不加，充分混匀，置37℃孵育30分钟。4．洗板：
1）手工洗板：弃去反应板条孔内液体拍干；用洗涤液注满每孔，静置5~10秒，弃去孔内洗涤液拍干，如此反复5次，拍干。
2）洗板机洗板：选择洗涤5次的程序洗板，最后拍干。
5．加显色剂：先加显色剂A，每孔0.05毫升；再加显色剂B，每孔0.05毫升；充分混匀，放置37℃避光孵育15分钟。
6．终止反应：每孔加入终止液0.05毫升，混匀。
7．测定：用酶标仪读数，可选择波长450nm（以空白孔校零）或双波长450/630nm，读取各孔OD值。
[结果判断]
Cutoff值计算：COV=阴性对照平均OD值*2.1
标本OD值大于COV为阳性，标本OD值小于COV为阴性
注：阴性对照OD值低于0.05按0.05计算，高于0.05按实际OD值计算。
[临床意义]
HbsAg在感染早期出现于患者血循环中，可持续数月，数年乃至终生，是诊断HBV感染最常用的指标。但所谓HBV感染的“窗口期”，HbsAg可以阴性，而抗HBc等其他HBV血清标志物则可阳性。
[注意事项]
1试剂使用前应摇匀，并弃去1~2滴后垂直滴加，注意均匀用力。
2从冷藏环境中取出的试剂盒应置室温平衡30分钟再进行测试，余者应及时封存，置冰箱内储藏备用。
3洗板时所用的洗水纸请勿反复。
4不同批号试剂请勿通用。
5结果判断须在10分钟内完成。
6封片不能重复使用。
7用本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程操作。
标准操作程序
[目的]
保证检测结果准确可靠。
[该SOP变动程序]
本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
[标本的采取和保存]
随机静脉血2ml，分离血清备用。也可以使用血浆标本进行检测。标本宜新鲜，无污染，避免溶血，避免反复冻融，不可用NaN3防腐。
[测定原理]
双抗原夹心一步法测HbsAb：S抗原反应包被板，加入待测血清后，再加入酶标抗S，加底物显色为阳性，证明样品中含被测物，含量与显色程度成正比。
[操作步骤]
1．实验准备：从冷藏环境中取出试剂盒，在室温下平衡30分钟，同时将浓缩洗涤液作1：20稀释。
2．加待测标本：加入待测标本每孔0.05毫升，并设阳性对照2孔，阴性对照2孔，空白对照1孔。
3．加酶结合物：每孔0.05毫升，空白对照孔不加，充分混匀，置37℃孵育30分钟。4．洗板：
a)手工洗板：弃去反应板条孔内液体拍干；用洗涤液注满每孔，静置5~10秒，弃去
孔内洗涤液拍干，如此反复5次，拍干。
b)洗板机洗板：选择洗涤5次的程序洗板，最后拍干。
5．加显色剂：先加显色剂A，每孔0.05毫升；再加显色剂B，每孔0.05毫升；充分混匀，放置37℃避光孵育15分钟。
6．终止反应：每孔加入终止液0.05毫升，混匀。
7．测定：用酶标仪读数，可选择波长450nm（以空白孔校零）或双波长450/630nm，读取各孔OD值。
[结果判断]
Cutoff值计算：COV=阴性对照平均OD值*2.1
标本OD值大于COV为阳性，标本OD值小于COV为阴性
注：阴性对照OD值低于0.05按0.05计算，高于0.05按实际OD值计算。
[临床意义]
抗—HBs为HBV的中和抗体，有清除HBV，防止在感染的作用，抗—HBs一般出现于乙肝患者恢复期，提示感染已终止。此外，注射过乙肝疫苗的人，抗—HBs阳性。
[注意事项]
1试剂使用前应摇匀，并弃去1~2滴后垂直滴加，注意均匀用力。
2从冷藏环境中取出的试剂盒应置室温平衡30分钟再进行测试，余者应及时封存，置冰箱内储藏备用。
3洗板时所用的洗水纸请勿反复。
4不同批号试剂请勿通用。
5结果判断须在10分钟内完成。
6封片不能重复使用。
7用本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程操作。
标准操作程序
[目的]
保证检测结果准确可靠。
[该SOP变动程序]
本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
[标本的采取和保存]
随机静脉血2ml，分离血清备用。也可以使用血浆标本进行检测。标本宜新鲜，无污染，避免溶血，避免反复冻融，不可用NaN3防腐。
[测定原理]
双抗体夹心法测HbeAg：抗e包被反应板，加入待测血清后，再加入酶标抗e，加底物显色为阳性，证明样本中含被测物，含量与显色程度成正比。
[操作步骤]
1．实验准备：从冷藏环境中取出试剂盒，在室温下平衡30分钟，同时将浓缩洗涤液作1：20稀释。
2．加待测标本：加入待测标本每孔0.05毫升，并设阳性对照2孔，阴性对照2孔，空白对照1孔。
3．加酶结合物：每孔0.05毫升空白对照孔不加，充分混匀，置37℃孵育30分钟。
4．洗板：
a)手工洗板：弃去反应板条孔内液体拍干；用洗涤液注满每孔，静置5~10秒，弃去
孔内洗涤液拍干，如此反复5次，拍干。
b)洗板机洗板：选择洗涤5次的程序洗板，最后拍干。
5．加显色剂：先加显色剂A，每孔0.05毫升；再加显色剂B，每孔0.05毫升；充分混匀，放置37℃避光孵育15分钟。
6．终止反应：每孔加入终止液0.05毫升，混匀。
7．测定：用酶标仪读数，可选择波长450nm（以空白孔校零）或双波长450/630nm，读取各孔OD值。
[结果判断]
Cutoff值计算：COV=阴性对照平均OD值*2.1
标本OD值大于COV为阳性，标本OD值小于COV为阴性
注：阴性对照OD值低于0.05按0.05计算，高于0.05按实际OD值计算。
[临床意义]
HBeAg是HBV的核心部分，故一般认为HBeAg阳性是具有传染性的标志，在乙肝潜伏期乃至整个病程中，HBeAg均可检出。抗HBe是HBeAg的相应抗体。一般认为HbeAg消失和抗HBe出现是病情趋向好转的征象。但并不意味着HBV DNA停止复制，或传染性消失。[注意事项]
1．试剂使用前应摇匀，并弃去1~2滴后垂直滴加，注意均匀用力。
2．从冷藏环境中取出的试剂盒应置室温平衡30分钟再进行测试，余者应及时封存，置冰箱内储藏备用。
3．洗板时所用的洗水纸请勿反复。
4．不同批号试剂请勿通用。
5．结果判断须在10分钟内完成。
6．封片不能重复使用。
7．用本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程操作。
标准操作程序
[目的]
保证检测结果准确可靠。
[该SOP变动程序]
本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
[标本的采取和保存]
随机静脉血2ml，分离血清备用。也可以使用血浆标本进行检测。标本宜新鲜，无污染，避免溶血，避免反复冻融，不可用NaN3防腐。
[测定原理]
竞争抑制一步法测HBeAb：抗e包被反应板，加入待测血清后，加入中和e抗原，再加入酶标抗e，加底物不显色的为阳性，证明样本含被测物，含量与显色程度成反比。
[操作步骤]
1．验准备：从冷藏环境中取出试剂盒，在室温下平衡30分钟，同时将浓缩洗涤液作1：20稀释。
2．加待测标本：加入待测标本每孔0.05毫升，并设阳性对照2孔，阴性对照2孔，空白对照1孔。
3．加中和试剂：每孔0.05毫升，空白对照孔不加。
4．加酶结合物：每孔0.05毫升空白对照孔不加，充分混匀，置37℃孵育30分钟。
5．洗板：
a)手工洗板：弃去反应板条孔内液体拍干；用洗涤液注满每孔，静置5~10秒，弃去
孔内洗涤液拍干，如此反复5次，拍干。
b)洗板机洗板：选择洗涤5次的程序洗板，最后拍干。
6．加显色剂：先加显色剂A，每孔0.05毫升；再加显色剂B，每孔0.05毫升；充分混匀，放置37℃避光孵育15分钟。
7．终止反应：每孔加入终止液0.05毫升，混匀。
8．测定：用酶标仪读数，可选择波长450nm（以空白孔校零）或双波长450/630nm，读取各孔OD值。
[结果判断]
Cutoff值计算：COV=阴性对照平均OD值*0.3
标本OD值大于或等于COV为阴性，标本OD值小于COV为阳性
注：非原倍血清样品（稀释血清、质控血清）COV=阴性对照*0.5
[临床意义]
抗HBe是HBeAg的相应抗体。一般认为HbeAg消失和抗HBe出现是病情趋向好转的征象。但并不意味着HBV DNA停止复制，或传染性消失。
[注意事项]
1试剂使用前应摇匀，并弃去1~2滴后垂直滴加，注意均匀用力。
2从冷藏环境中取出的试剂盒应置室温平衡30分钟再进行测试，余者应及时封存，置冰箱内储藏备用。
3洗板时所用的洗水纸请勿反复。
4不同批号试剂请勿通用。
5结果判断须在10分钟内完成。
6封片不能重复使用。
7用本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程操作。
标准操作程序
[目的]
保证检测结果准确可靠。
[该SOP变动程序]
本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
[标本的采取和保存]
随机静脉血2ml，分离血清备用。也可以使用血浆标本进行检测。标本宜新鲜，无污染，避免溶血，避免反复冻融，不可用NaN3防腐。
[测定原理]
竞争抑制一步法测HBcAb：抗c包被反应板，加入待测血清后，加入中和c抗原，再加入酶标抗抗c，加底物不显色的为阳性，证明样本含被测物，含量与显色程度成反比。
[操作步骤]
1．实验准备：从冷藏环境中取出试剂盒，在室温下平衡30分钟，同时将浓缩洗涤液作1：20稀释。
2．加待测标本：加入待测标本每孔0.05毫升，并设阳性对照2孔，阴性对照2孔，空白对照1孔。1）1：30稀释血清（血浆）检测结果代表临床意义，待检标本可用稀释后的洗涤液加以稀释2）原倍血清（血浆）检测结果代表流行病学意义。
3．酶结合物：每孔0.05毫升（抗—HBc1：30稀释血清代表临床意义，可用稀释后的洗涤液加以稀释；原倍血清代表流行病学意义），空白对照孔不加，充分混匀，置37℃孵育30分钟。
4．洗板：
a)手工洗板：弃去反应板条孔内液体拍干；用洗涤液注满每孔，静置5~10秒，弃去
孔内洗涤液拍干，如此反复5次，拍干。
b)洗板机洗板：选择洗涤5次的程序洗板，最后拍干。
5．加显色剂：先加显色剂A，每孔0.05毫升；再加显色剂B，每孔0.05毫升；充分混匀，放置37℃避光孵育15分钟。
6．终止反应：每孔加入终止液0.05毫升，混匀。
7．测定：用酶标仪读数，可选择波长450nm（以空白孔校零）或双波长450/630nm，读取各孔OD值。
[结果判断]
Cutoff值计算：原倍血清COV=阴性对照平均OD值*0.3
1：30稀释血清COV=阴性对照平均OD值*0.5
标本OD值大于或等于COV为阴性，标本OD值小于COV为阳性。
[临床意义]
抗HBc是HBeAg的相应抗体，也是HBV感染后血清中最早出现的HBV的标志性抗体。持续时间长，甚至终生存在。几乎所有个体在感染HBV后都能产生抗HBc，故它是乙肝流行病学调查的良好指标。在HBV感染的“窗口期”抗HBc常是唯一可测出的HBV血清标志物。
1试剂使用前应摇匀，并弃去1~2滴后垂直滴加，注意均匀用力。
2从冷藏环境中取出的试剂盒应置室温平衡30分钟再进行测试，余者应及时封存，置冰箱内储藏备用。
3洗板时所用的洗水纸请勿反复。
4不同批号试剂请勿通用。
5结果判断须在10分钟内完成。
6封片不能重复使用。
7用本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程操作。
标准操作程序
[目的]
保证检测结果准确可靠。
[该SOP变动程序]
本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
[标本的采取和保存]
随机静脉血2ml，分离血清备用。也可以使用血浆标本进行检测。标本宜新鲜，无污染，避免溶血，避免反复冻融，不可用NaN3防腐。
[测定原理]
用乙肝病毒Pre S1蛋白抗体和抗HBS分别用作酶标记抗体和包被抗体。采用ELISA双抗体夹心一步法检测标本中的乙肝病毒Pre S1蛋白。
[操作步骤]
1．将包被条固定于支架并编上序号。
2．设阳性对照2孔，每孔加入阳性对照50微升，阴性对照2孔，每孔加入阴性对照50微升，空白对照一孔，加入生理盐水100微升。然后，依次在反应孔内加入待测样品50微升，除空白孔外，每孔再加酶结合物50微升，置微型震荡器混匀5秒后，盖好封片放37℃孵育60分钟。
3．弃去反应孔内液体并拍干，用工作洗涤液（浓缩洗涤液1毫升加19毫升蒸馏水稀释后即为工作洗涤液）注满各孔，静置30秒，再拍干，重复洗涤5次。
4．每孔加入TMB显色剂A50微升，在加入TMB显色剂B50微升，37℃中显色10~15分钟。
5．每孔加入终止液50微升。
6．用酶标仪波长450nm读数，先用空白孔调零，然后读取各测定孔OD值。
[结果判断]
阴性对照A值*2.5=临界值
阴性对照小于0.05时，按0.05计算，高于0.05时按实际OD值计算。待测样本大于临界值即为阳性，待测样本小于临界值即为阴性。
[临床意义]
乙肝病毒Pre—S
1抗原（前s
1
抗原）主要存在于病毒完整颗粒中，表示病毒具有复制功能和传
染性。其敏感性好于HBeAg，可弥补由于HBeAg变异等造成的HBeAg阴性的临床“误导”。在
早期诊断上早于乙肝两对半和ALT。可与HBv—DNA取得几乎同样的敏感性。
[注意事项]
1．包被条需密封防潮，从冰箱取出后，在室温中平衡不少于15分钟。
2．保存在2~8度，在有效期内使用。
3．终止液终止后，需在30分钟内测定结果。
4．不同批号试剂请勿通用。。
5．用本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程操作。