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血小板聚集体计数在真性和假性血小板减少鉴别中的应用

50份真性血小板减少标本仪器法常规检测的PLT平均为(48士10)×109/L,人工法常规检测的PLT仍然低下,为(46±11)X109/L,显微镜下未发现血小板聚集现象,2种方法计数结果间差异无统计学意义(t=一1.26,P>0.05)。而更换柠檬酸盐抗凝复查发现,仪器法PLT平均计数为(49±9)X109/L,人工法为(46±13)×109/L,与常规检测的结果之间差异均无统计学意义(忙1.12、1.00,尸均>0.05)。结果见表l。

另外15份EDTA—PTCP标本经常规检测后,仪器法PLT平均为(48±12)×109/L,而显微镜下显示血小板聚集明显(图1,2),由于血小板聚集的干扰,未能得到人工法血小板计数结果。而更换柠檬酸盐抗凝复查发现,仪器法和人工法PLT均明显升高,前者PLT平均为(141±13)×10’/L,后者PLT平均为(134±17)×109/L,二者之间差异无统计学意义(忙一1.29,P>0.05)(表1),显微镜下血小板聚集现象消失。

圈1光学显微镜下观察到的血小板形态学变化。a图为EDTA?PTCP标本,箭头所示为聚集的血小板;b图为健康对照者标本,箭头所示为血小板(x40)

圈2外周血涂片显示的血小板形态学变化。a图为

EDTA—PI℃P标本,箭头所示为聚集的血小板;b图为健

康对照者标本。箭头所示为血小板(瑞氏染色x100)

2.血小板聚集体计数在PLT减少患者中的变化:健康对照组血小板聚集体计数的参考范围为90±11。对于真性血小板减少组,常规检测的血小板聚集体计数为86±15,与健康对照组之间差异无统计学意义(t=1.26,P>0.05),显微镜下也未发现血小板聚集;而更换柠檬酸盐抗凝复查后的血小板聚集体计数为80±13。常规检测结果与之比较差异无统计学意义(t=一1.31,P>0.05)。对于EDTA—PTCP组,常规检测的血小板聚集体计数明显升高,平均为840±184,所有15份EDTA—PTCP标本在显微镜下均发现有明显的血小板聚集现象;而更换柠檬酸盐抗凝复查发现,血小板聚集体计数明显减少,平均为75±12,常规检测与之比较差异有统计学意义(‘=一6.82,P<0.001),显微镜下也未见血小板聚集现象。

常规检测(EDTA抗凝)的血小板聚集体计数在

真性血小板减少组和EDTA—IyI℃P组之间具有显著

生堡捡墅医堂苤盍2Q塑生!旦筮!;鲞箜!捆£h也』!生丛型:丛盟!Q塑:∑吐丝:盟垒!

表1仪器法和人工法检测PLT结果比较(×109几,i±s)

注:“一”表示由于血小板聚集的干扰,未能得到人工法PLT结果;真性血小板减少组:仪器法检测PLT.EDTA抗凝与柠檬酸盐抗凝结果间

差异无统计学意义(t=1.12,P>O.05),人工法时差异亦无统计学意义(t=l-00,P).0.05);EDTA?PI℃P组:仪器法检测PLT,EDTA抗凝与柠檬酸盐抗凝结果间差异有统计学意义(t=5.47,P<O.001)

的统计学差异(t=7.11,P<0.001),而柠檬酸盐抗

凝测得的血小板聚集体计数在真性和假性血小板减少者之间差异无统计学意义(t=一1.38,P>0.05)。结果见表2。

EDTA—PTCP患者血小板聚集体分布图见图3。EDTA抗凝时,血小板聚集体计数高达917,而PLT仅为50×109/L;更换柠檬酸盐抗凝后,其血小板聚

集体计数降至99,而PLT高达136×109/L。

当临床实验室采用血细胞分析仪进行血常规检测时,常常出现PLT减低。PLT减少通常分为2类,即真性PLT减少和假性PLT减少。无论哪类PLT减少,根据血细胞分析仪复检规则【5剖,当PLT低于100×109/L或出现血小板聚集提示时,就需要仪器

法或人工法复核确认。否则,假性PLT减少会造成

临床误诊。正如本研究结果所示,真性PLT减少经

仪器或人工镜检复核后,仍然表现为PLT减少;而

EDTA依赖性假性PLT减少经仪器复核后仍然表现为PLT减少,但人工镜检复核却发现血小板聚集现

象,当更换柠檬酸盐抗凝后,PLT明显升高,人工镜

检复核也未见血小板聚集现象。

EDTA抗凝剂引起血小板聚集而导致的EDTA.FFCP受到学者们的广泛关注"引。该疾病本身并无任何病理或生理意义,也无需治疗【9J。EDTA.PTCP的临床发生率约为0.09%一0.21%,多发生于某些

肿瘤、自身免疫性疾病、脓毒败血症、抗血小板药物

治疗或环境温度低等情况雎,4,7]。目前,EDTA.PTCP的发病机制尚不完全明了,可能与某些患者体内存

注:8图为EDTA抗凝;b图为柠檬酸盐抗凝;图中自色散点图区域为血小板聚集体分布区域圈3

EDTA—PTCP患者血小板聚集体在血细胞分析仪

上的分布图

表2真性血小板减少组和EDTA.PTCP组检测血小板聚集体计数结果比较(i

4-s)

血小板聚集体计数在真性和假性血小板减少鉴别中的应用

作者:吴卫, 崔巍, 李薇, 张硕, 郭野, WU Wei, CUI Wei, LI Wei, ZHANG Shuo, GUO Ye

作者单位:北京协和医院检验科,中国医学科学院,100730

刊名:

中华检验医学杂志

英文刊名:CHINESE JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE

年,卷(期):2009,32(5)

引用次数:0次

参考文献(10条)

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3.邢辉.吴健民EDTA-K3依赖性血小板假性减少症分析[期刊论文]-临床检验杂志 2004(4)

4.郑军EDTA依赖性假性血小板减少症的临床相关因素探讨[期刊论文]-中国医科大学学报 2007(4)

5.Barnes PW.McFadden SL.Machin SJ The international consensus group for hematology review:suggested criteria for action following automated CBC and WBC differential analysis 2005

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7.Yoshikawa T.Nakanishi K.Maruta T Anticoagulantinduced pseudothrombocytopenia occurring after transcatheter arterial embolization for hepatocellular carcinoma 2006

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10.Fiorin F.Steffan A.Pradella P IgG platelet antibodies in EDTA-dependent pseudothrombocytopenia bind to platelet membnme glycoptotein Ⅱb 1998

相似文献(9条)

1.学位论文何伟锋慢性HBV感染者血小板减少的相关因素研究及其数学模型的建立2007

目的 1.探讨血小板相关抗体与HBV慢性感染患者血小板减少的关系。 2.探讨脾脏因素与HBV慢性感染患者血小板减少的关系。

3.探讨血小板生成素与HBV慢性感染患者血小板减少的关系。 4.对多个可能影响血小板计数的指标进行统计学多因素分析,建立其数学模型。 方法 1.血小板相关免疫球蛋白与血小板计数的关系连续收集2006年3月至2006年9月72例慢性HBV感染者,分为血小板计数正常组和血小板计数减少组,以脾脏厚度及促血小板生成素为组间均衡因素,选18例健康体检者为对照组。测量并比较各组的血小板相关免疫球蛋白(IgG、IgM和IgA三个亚型)、脾脏厚度、促血小板生成素水平;72例患者再按病情分慢乙肝轻中度、慢乙肝重度、肝硬化三组,选同样的18例健康体检者为对照组,测量并比较各组的血小板相关免疫球蛋白IgG亚型、血清总IgG水平;统计72例患者血小板相关免疫球蛋白各亚型与血小板计数的相关性。 2.血小板计数与脾脏厚度同样72例慢性HBV感染者,分为脾脏厚度正常组和脾脏厚度增大组,以促血小板生成素及血小板相关免疫球蛋白IgG型为组间均衡因素,选1 8例健康体检者为对照组。测量并比较各组的血小板计数、血小板相关免疫球蛋白IgG、促血小板生成素水平;统计脾脏厚度与血小板计数的相关性;另选2004年3月~2006年12月,11例和17例分别诊断为活动性肝硬化乙型失代偿期并脾功能亢进行部分脾脏栓塞术患者及活动性肝硬化乙型失代偿期并脾功能亢进行脾脏切除术患者,回顾性分析其术前及术后lO天血小板计数的变化。 3.血小板计数与促血小板生成素同样72例慢性HBV感染者,分为血小板计数正常组和血小板计数减少组,以脾脏厚度及血小板相关免疫球蛋白IgG型为组间均衡因素,选18例健康体检者为对照组。测量并比较各组的促血小板生成素、血小板相关免疫球蛋白Ig6水平及脾脏厚度;72例患者按病情分慢乙肝轻中度、慢乙肝重度、肝硬化三组,选同样的18例健康体检者为对照组,测量并比较各组的血小板计数及促血小板生成素水平;统计72例患者血小板计数与促血小板生成素的相关性; 4.影响血小板计数的多因素分析及数学模型的建立同样72例慢性HBV感染者,先将性别、年龄、病程、ALT、ALB、GLB、TBlL、PT、HBV-DNA定量、TPO、PAIgG及脾脏厚度等12个指标与血小板计数作简单相关分析,然后将有相关性的指标作为自变量(x),血小板计数作因变量(Y),采用多元线性逐步回归分析法,建立影响慢性HBV感染者血小板计数因素的数学模型。 结果 1.血小板计数与血小板相关免疫球蛋白的关系PAIgG均值在对照组、血小板正常组及血小板计数下降组分别为:(85.45±14.56)ng/10<'7>pA、(96.19±20.36)ng/10<'7>PA、(126.53±32.1 1)ng/10<'7>pA,组间均数差别有统计学意义;患者PAIgG与血小板计数的相关系数r==-0.17,P<0.05;肝硬化组PAIgG水平与正常组有统计学差异;IgA及IgM亚型在血小板正常组和血小板减少组间无统计学差异;IgA及IgM亚型与血小板计数的相关系数分别为:r=0.039,P=0.15、r=0.043,P=0.06。 2.血小板计数与脾脏厚度对照组、脾脏厚度正常组及增大组血小板均值分别(185+40)×10<'9>/L、(164±52)×10<'9>]L、(92±23)×10<'9>/L,组间差别有统计学意义;行脾脏栓塞术术前及术后10天血小板计数分

别为:(51±30)×10<'9>/L、(83±37)×10<'9>/L,P<0.001;行脾脏切除术术前及术后10天血小板计数分布为:(61±24)×10<'9>/L、

(130±45)×10<'9>/L,P<0.001;患者脾脏厚度与血小板计数相关系数r=-0.514,P<0.001。 3.血小板计数与促血小板生成素TPO在对照组、血小板正常计数组及血小板计数下降组分别为:(130.61±45.53)pg/ml、(138.14±33.65)pg/ml、(140.45±39.21)pg/ml,对照组与患者组的均数比较

,P<0.001,而患者组间均数比较,P>0.05。促血小板生成素与血小板相关系数r=0.04,P<0.054.影响血小板计数的多因素分析及数学模型的建立与血小板计数有相关性的指标分别为:年龄r=-0.399,P=0.016;ALBr=0.438,P=0.007;GLB r=0.142,P=0.023;PTr=-0.350,P=0.013;HBV-DNA定量

r=0.175,P=0.031;PAIgG r=-0.174,P=0.008;脾脏厚度r=-0.490 P=0.003。多因素分析拟合的数学模型为:Y=158.35-

33.10X<,6>+2.46X<,3>(X<,6>表示脾脏厚度、X<,3>表示白蛋白水平),方程检验统计量F=16.392,P=0.000;决定系数R<,2>=0.373。 结论

1.血小板相关免疫球蛋白IgG亚型水平与血小板计数呈负相关,但关联性不强。 2.脾脏厚度与血小板计数呈较明显的负相关;脾脏栓塞术或切除术后,短期内血小板计数明显回升; 3.促血小板生成素水平与血小板计数几乎无关联,其对慢性HBV感染者血小板计数的影响作用有待进一步探讨; 4.通过多因素分析,本研究得到-数学模型:Y=158.35-33.10X<,6>+2.46X<,3>(X<,6>表示脾脏厚度、X<,3>表示白蛋白水平,它从一个新的角度进一步提示脾脏对慢性HBV感染者血小板计数相对重要的影响作用。而模型依然有不足,有必要进行更深入的大样本、多中心及设计更合理的研究

,以揭示慢性HBV感染者血小板减少症的发病机制。

2.期刊论文张素珍.师水生.刘俊慢性肝病患者血清血小板生成素与血小板计数的关系-临床医药实践2007,16(1) 目的:研究慢性肝病患者血清血小板生成素(TPO)的表达水平与循环血小板计数的关系,以明确肝病患者血小板减少的原因.方法:采用放射免疫竞争法测定血清TPO水平.结果:正常对照组、慢性肝炎组与肝硬化组的血清TPO水平比较,肝硬化组明显高于正常对照组,差异有显著性(P<0.01);外周血小板计数,肝硬化组明显低于慢性肝炎组与正常对照组(P<0.01).随着肝脏损伤的加重,血清TPO水平逐渐升高,血小板计数显著降低(P<0.01).肝硬化组中,血小板减少28 例(66.7%),血小板正常组和血小板减少组血清TPO水平无差异,血小板计数差异有显著性(P<0.01),而脾切除组与脾未切除组血清TPO水平无差异,血小板计数差异有显著性(P<0.05).结论:肝硬化时血小板减少不太可能用TPO不足解释,肿大的脾脏对血小板的瘀积和破坏还是主要原因.

3.期刊论文李君安.唐中.赖明希血小板计数假性减少的仪器检测法与镜检法比较-川北医学院学报2001,16(3)

目的:对患者血常规测定结果血小板值偏低现象进行正确分析;方法:使用SymexF-820型血细胞分析仪对患者血小板进行测定,对测定值

<100x1009/L者与传统的手工法计数相比较;结果:使用仪器法对患者进行血小板测定,血小板值<100×109/L者182例,其中测定值前面带有字母L、D、

M和U者共140例,与传统的手工法计数相比较,带有字母L、M和U者(P<0.05)有显著性差异,带有字母D和不含任何字母者(P>0.05)无显著性差异,表明仪器法和手工法血小板测定值基本一致.结论:Symex-F820血细胞分析仪检测血小板采用电阻法与显微镜观察不同,它不能识别血小板聚集而造成血小板数量假性减少,因此,临床检验工作者对仪器法计数血小板减少患者应结合临床的同时,时刻不容忽视传统的手工法进行复核,以免假性血小板减少造成临床误诊.

4.期刊论文刘玲玲.李瑞贤.赵路毅乙二胺四乙酸盐依赖性血小板计数假性降低一例-天津医药2007,35(6)

乙二胺四乙酸盐(EDTA)作为血常规检测的抗凝剂已被国际血液学标准委员会(ICSH)认定,并得到了广泛应用.但EDTA可导致血小板发生凝集,引起EDTA依赖性假性血小板减少(EDTA-dependent pseudothrombo cytopenia,EDTA-PTCP).最近,我院发现1例,现报告如下.

5.期刊论文廖清霞.董仁康.陈维萍计数血小板减少的仪器法与手工法结果比较-现代中西医结合杂志2007,16(1) 目的 观察比较仪器法测定血液分析中血小板值偏低现象与传统手工镜检法计数血小板的准确性.方法 用SysmexXT-2000i五分类全自动血液分析仪测定患者血小板计数,对176例测定值<100×109 L-1者与传统手工镜检法计数相比较.结果 仪器提示血小板聚集或者异常直方图39例与传统手工镜检法相比有显著性差异(P<0.05),对仪器提示血小板减少或无提示者137例与传统手工镜检法相比无显著性差异.讨论 SysmexXT-2000i全自动血液分析仪对血小板聚集或大血小板等不能完全识别,在工作中对仪器测得血小板减少者应结合临床同时进行手工复检,以避免血小板假性减少导致误诊.

6.期刊论文丁美桃EDTA依赖性血小板聚集阳性者血小板计数分析-实用中西医结合临床2005,5(4)

EDTA作为血常规检测的抗凝剂已被ICSH认定,并得到了广泛应用.但EDTA偶而可导致血小板发生聚集,引起EDTA依赖性假性血小板减少(EDTA-dependent pseudothrombocytopenia,PTCP),且这种聚集物不被溶血素所破坏.小的聚集,PLT一般为10~20个;更大的聚集,PLT有50个以上.而直接观察患者的末梢血涂片,PLT呈正常分布,散在,无聚集现象.用加入一定浓度的氟化钠EDTA抗凝剂测定同一标本,3h内其PLT计数与手工法相比无显著差异

(P>0.05).本文就EDTA-K3作为抗凝剂与EDTA-K3氟化钠作为抗凝剂对EDTA依赖性PLT聚集阳性者血标本进行分析比较.现报告如下:

7.期刊论文谢秀萍.张志.胡春梅6例血小板计数假性减少结果分析-国际检验医学杂志2006,27(6)

目的寻找EDTA-K2抗凝剂导致血小板计数假性降低的解决方法.方法对6例EDTA-K2抗凝剂导致血小板计数减少的标本,采用枸橼酸钠抗凝血重新测定、重采末稍血(不加抗凝剂)稀释后用BC-3000血细胞分析仪测定、用人工法(其结果作为参考值)计数血小板及白细胞,涂片染色观察血小板分布情况.结果

4种方法的结果分别是,白细胞:(11.97±9.77)×109/L、(11.40±9.53)×109/L、(10.92±9.15)×109/L、(10.85±9.13)×109/L;血小板

:(69.50±60.10)×109/L、(193.00±106.76)×109/L、(273±146.5)×109/L、(276.50±149.10)×109/L;与人工法比较,EDTA-K2抗凝血和枸椽酸抗凝血的白细胞及血小板计数结果差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05),预稀释法与人工法的计数结果基本一致(P>0.05).结论用EDTA-K2抗凝血作血细胞分析时,可导致少数标本的血小板结果假性降低,而白细胞结果假性升高,处理方法可采用预稀释(不加抗凝剂)重新测定,或用人工法重新计数血小板及白细胞后报告.

8.期刊论文许景艳.欧阳建.孙雪梅.陈军浩.方义才.范洵楠.张鹤云巨核细胞生长因子对实验性血小板减少小鼠的

外周血小板的影响-南京医科大学学报(自然科学版)2007,27(1)

目的:评估巨核细胞生长因子(MES)对实验性血小板减少小鼠的促血小板生成作用.方法:取雄性小鼠60只,按血小板数及体重均衡随机分6组.每组动物均腹腔注射给药连续8天,实验期间分别在0、5、9、14天测定各组动物的红细胞、血小板数目及血小板聚集实验,在15天测定网织血小板.结果:MES能使血循环中血小板数量升高,血小板聚集功能始终没有下降,网织血小板数升高.结论:MES这种巨核细胞生长因子能促血小板生成,且不引起血小板功能的变化.在血小板减少性疾病的治疗方面有着广阔的应用前景.

9.期刊论文曾素根.贾永前.朱新勤.郭曼英.李倚.左永太ITP病人血小板计数方法比较研究-华西医学2004,19(3) 目的:探讨实用于原发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)的血小板计数的方法.方法:用流式细胞技术半导体激光法、电阻抗法与手工方法比较.结果:血小板计数在(1~20)×109/L(治疗前)组,流式细胞技术半导体激光法与手工方法计数的结果没有显著性差异

(P>0.05),相关性较好,r=0.98,而电阻抗法与手工方法有显著性差异(P<0.05),相关性也较差,r=0.78.血小板在54~136×109/L(治疗有效)组,虽然三种方法之间没有显著性差异,但流式细胞技术半导体激光法与手工方法的相关性较电阻抗法好,其相关系数分别为0.97和0.80.结论:对ITP病人标本,XE-2100全自动血细胞分析仪的流式细胞技术半导体激光法计数血小板,较电阻抗法准确.

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