肝素钠检测试剂盒(天青A 比色法)
简介：
肝素钠是一种黏多糖，在多糖链上带有很多阴离子基团如磺酸基、羧基等，因此肝素具有强负电性，能与阳离子或带正电荷的分子结合，形成复合物。天青A 是一种碱性燃料，其正电荷与肝素的阴离子结合，生成肝素-天青A 复合物。即产生一种颜色反应，该反应程度与肝素的结合量具有一定比例关系，在505nm 处检测吸光度，在碱性条件下，肝素浓度与吸光度值符合郎伯-比耳定律，通过检查标准曲线，获得肝素(钠)的效价。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 稀释标准品。
2、 制作标准曲线：取干净离心管或试管，按下表进行操作，以0号管为空白对照，加入显
色液后均应混匀，检测505nm 处吸光度。可重复检测3次，测定结果求平均值，以效价为横坐标，吸光度为纵坐标作图得标准曲线。
0 1 2 3 4 5 肝素标准(1U/ml)
0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 蒸馏水/ml 2.0 1.6 1.2 0.8 0.4 0 Heparin 检测液/ml 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 天青显色液/ml
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
4、肝素钠测定：准确称取一定量的待测肝素钠样品，用蒸馏水溶解成1mg/ml 的溶液。检测之前，准确稀释成待测液。按下表进行操作，以蒸馏水为空白对照，加入显色液后均应混匀，检测505nm 处吸光度。
空白管 标准管 测定管 肝素标准/ml － X － 蒸馏水/ml 2.0 2.0-X － Heparin 检测液/ml 0.5 0.5 0.5 天青显色液/ml
0.5
0.5
0.5
编号 名称
TC1333 100T Storage
试剂(A): 肝素标准(100U/ml) 2ml -20℃ 避光 试剂(B): Heparin 检测液 50ml 4℃ 避光 试剂(C): 天青显色液 50ml
RT 避光 使用说明书
1份
计算公式：
肝素钠样品的效价(U/ml)=(P×V)/(m×V i)
注意事项：
1、上述低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。
2、待测样本如不能及时测定，应置于2~8℃保存，3天内稳定。
3、如果样品浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
CD4细胞内因子检测试剂盒步骤 一.样本收集准备 血样收集要使用肝素钠及其他抗凝剂以中和淋巴细胞作用。使用前可放于室温条件避免血小板活化，收集后8小时内使用！长时间存放可影响抗原提呈细胞功能，运输也可合并细胞功能丧失。 二.步骤 1.标记2只15ml聚丙烯活化试管： 1管：加入0.5ml肝素化全血，稀释后的刺激剂PMA（取5ul 8×分装以1×PBS 35ul稀释至总体积40ul）和INOMYCINE（取2ul 4×分装以1×PBS 6ul稀释至总体积8ul）各1ul，5ul CD28/CD49d单克隆抗体混合物。 2管：加入0.5ml肝素化全血，5ul CD28/CD49d单克隆抗体混合物。 轻轻振荡每只试管，然后37°孵化2小时。注意：离心管盖子拧松！！ 2.从冰箱取出一只分装好的BFA，以消毒的1×PBS 1:10稀释（加90ul1×PBS稀释至总体积100ul），每管加入稀释液10ul，振荡，然后37°孵化4小时。注意：离心管盖子拧松！！ 3.每管加50ulEDTA的PBS溶液，剧烈振荡，室温孵育15分钟，再次最高速振荡10秒。 4.如果细胞马上用来染色，可参照4a执行；如果是冻存待染，参照4b。 4a： ?标记4只聚苯乙烯试管 1管：活化的同种型对照（AIC） 2管：未刺激同种型对照（UIC） 3管：活化样本（AS） 4管：未刺激样本（US） ?往AIC管和AS管各分装100ul活化全血 ?往UIC管和US管各分装100ul未刺激全血 ?接第5步。 4b： ?每管0.5ml全血样本（已活化和未刺激）均加5ml 5 mL of 1X BD FACS Lysing Solution (使用前用去离子水1:10稀释) ?振荡，室温孵育10分钟，直接放入-80°冻存。 ?染色时，37°水浴箱简单溶解细胞，加入7ml wash buffer，500G室温离心10分钟。 ?去上清，以0.5mlwash buffer 重悬沉淀颗粒。 准备染色时 ?标记4只聚苯乙烯试管，此同4a操作。 ?接第7步。 5.每管加入1ml 1X BD FACS Lysing Solution (使用前用去离子水1:10稀释，每个样本需取 400ul 10×BD FACS Lysing Solution加去离子水3.6ml稀释至4ml)，轻轻混匀，室温孵育10分钟。
茚三酮比色测定氨基酸含量 一、实验原理 氨基酸在碱性溶液中能与茚三酮作用，生成蓝紫色或黄色化合物（除脯氨酸外均有此反应），可用吸光光度法测定。生成的蓝紫色或黄色化合物颜色深浅与氨基酸含量成正比，其最大吸收波长分别为570nm或350nm，故据此可以测定样品中氨基酸含量。 二、实验试剂 （1）1.2%茚三酮溶液：称取茚三酮1g于盛有35mL热水的烧杯中使其溶解，加入40mg氯化亚锡（SnCl2?H2O），搅拌过滤（作防腐剂）。滤液置冷暗处过夜，加水至50mL，摇匀备用。 （2）pH 8.04磷酸缓冲液： Ⅰ、准确称取磷酸二氢钾（KH2PO4）4.5350g于烧杯中，用少量蒸馏水溶解后，定量转入500mL容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀备用。 Ⅱ、准确称取磷酸氢二钠（Na2HPO4）11.9380g于烧杯中，用少量蒸馏水溶解后，定量转入500mL容量瓶中，用水稀释到标线，摇匀备用。 Ⅲ、取上述配好的磷酸二氢钾溶液10.0mL与190mL磷酸氢二钠溶液混合均匀即为pH8.04的磷酸缓冲溶液。 （3）氨基酸标准溶液：准确称取干燥的氨基酸（如异亮氨酸）0.2000g于烧杯中，先用少量水溶解后，定量转入100mL容量瓶中，用水稀释到标线，摇匀，准确吸取此液10.0mL于100mL容量瓶中，加水到标线，摇匀，此为200μg/mL 氨基酸标准溶液。 三、实验方法及步骤 （1）标准曲线绘制 准确吸取200μg/mL的氨基酸标准溶液0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL （相当于0、100、200、300、400、500、600μg 氨基酸），分别置于25mL 容量瓶或比色管中，各加水补充至容积为 4.0mL，然后加入茚三酮溶液（20g/L）和磷酸盐缓冲溶液（pH为8.04）各1mL，混合均匀，于90℃水浴上加热至显色恒定为止（该加热过程至少需要25分钟），取出迅速冷至室温，加水至标线，摇匀。静置15min后，若生成蓝紫色化合物，在570nm波长下，以试剂空白为
茚三酮 中文名称：苯并戊三酮，茚三酮 英文名称：Ninhydrin 分子量：160.13 CAS RN：485-47-2 熔点：251℃ 密度: 0.86 性状：本试剂近似为白色结晶,或浅黄色结晶粉末,微溶于乙醚及三氯甲烷,100℃以上变为红色。 特性反应：跟酶类或者多肽在加热状况下发生显紫色反应。 作用 茚三酮是一个有机化合物，被广泛用于检测氨、一级和二级胺，尤其是氨基酸。氨基酸与茚三酮水合物在弱酸条件下共加热时，氨基酸被氧化脱氨、脱羧，而茚三酮水合物被还原，其还原物可与氨基酸加热分解产生的氨结合，再与另一分子茚三酮缩合成为蓝紫色化合物，称为罗曼紫（Ruhemann's purple）。此化合物最大吸收峰在570nm波长处。由于此吸收峰的大小与氨基酸释放的氨量成正比，因此可作为氨基酸的定量分析方法法医学上这个反应被用于鉴定指纹。 茚三酮反应（Kaiser鉴定）也可用来在固相接肽时检验脱保护基是否已经完成，鉴定和比色法分离氨基酸以及鉴定铵离子（呈紫色）。 茚三酮与氨基酸反应生成蓝紫色化合物，但pro，羟-pro反应时呈黄色。 茚三酮用于脯氨酸含量的测定 当用磺基水杨酸提取植物样品时，脯氨酸便游离于磺基水杨酸的溶液中，然后用酸性茚三酮加热处理后，溶液即成红色，再用甲苯处理，则色素全部转移至甲苯中，色素的深浅即表示脯氨酸的含量的高低。在520nm 的波长下比色，从标准曲线（用脯氨酸标准溶液制得）上查出(或用回归方程计算)脯氨酸的含量。 ①茚三酮
检出物：氨基酸、胺与氨基糖类。 溶液：本品O.2g溶于乙醇l00ml中。 方法：喷后于110oC加热。 结果：呈红紫色斑点。 茚三酮对一级二级的胺显色肯定没问题的，三级胺有些可以，酰胺应该也没问题的，配制：1.5g 茚三酮 + 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸；显色的时候板子浸湿，用纸擦一下多余液滴，再用电热枪（电吹风太弱了）吹出斑点，显色因为氨基酸的不同而显示不同的紫色黄色等等，你想检测伯胺的话，肯定没有问题的！ 配制方法：1.5g 茚三酮+ 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸 茚三酮不是太好溶解，需要多搅拌才行。 加醋酸只是给显色提供一个微酸性的环境。 配置好的茚三酮显色剂装在棕色瓶中避光保存，是可以多次使用的。
茚三酮比色法测定游离氨基酸含量 原理： 茚三酮与氨基酸的反应分两步进行，首先是氨基酸被氧化，产生二氧化碳?氨和醛，而水合茚三酮被还原成还原性茚三酮；第二步是所生成的还原性茚三酮与另一个水合茚三酮分子和氨缩合生成成为蓝紫色化合物，该化合物颜色的深浅与氨基酸的含量成正比? 磷酸缓冲液（pH.8.04）： 称磷酸二氢钾4.5350 g，定容500 ml。 称NAH2PO4·12H2O11.9380 g分别溶解定容500 ml。 取磷酸二氢钾10 ml与磷酸氢二钠190ml混合即为pH8.04的缓冲液 2％茚三酮溶液：称取水合茚三酮 2 g，加水溶解后定容至 100 mL。储成于棕色瓶中，避光保存。 0.25%抗坏血酸溶液：称取抗坏血酸 0.1 g，加水溶解后定容至 100 mL，现配现用，或者密封，冻存于-20 o C。 茚三酮反应液：取50 ml 2% 茚三酮，加入5 ml 0.25%的Vc，使用蒸馏水稀释到100 ml，密封储存在棕色瓶中。 亮氨酸标准液:称取 100 mg 亮氨酸（纯度不低于 99%）溶于 100 mL 水中，作为母液，此时亮氨酸的浓度为1 mg/mL。 茚三酮标准曲线制作 溶液中氨基酸的浓度如果低于20 μg/ml，茚三酮显色反应将不能发生，故先配制不同浓度的 氨基酸标准液，取十支试管，标号为1，2，3……10，按照下表配制 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1000 μg/ml 亮氨酸
超纯水 ml 9.6 9.5 9.4 9.3 9.2 9.1 9 8.9 8.8 8.7 8.6 8.5 亮氨酸 终浓度μg/ml 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 使用螺旋盖（内垫）试管分别取上述浓度的氨基酸标准液1ml，空白对照使用1ml 超纯水替代氨基酸标准液，然后向各个试管中加入0.5 ml 的茚三酮反应液和0.5 ml 的磷酸缓冲液，盖好盖子悬紧，置于沸水浴中煮沸15 min，分别加入3 ml 的超纯水，斡旋混匀，测定吸光度，绘制标准曲线 取一支中等程度显色的试管进行紫外和可见波段的全波长扫描，结果如下图所示 300 400 500 600 700 800 0.0 0.10.20.30.40.5 0.60.7吸光度 波长（nm ） 403 nm 565 nm 选择565 nm 作为其最大吸收波长，测定各管的吸光度，弃去吸光度大于1的值 茚三酮终浓度（μg/mL） 565 nm 的吸光度 20 0.037 25 0.114 30 0.226 35 0.347 40 0.412 45 0.538 50 0.621
试剂溶解方法(供参考) 试剂名称 溶解方法 ABA 脱落酸 溶于碳酸氢钠水溶液、氯仿、丙酮、乙酸乙酯和乙醚，微溶于苯和水。 ACES 该品0.1ml/L水溶液（20℃），PH值为3.0－4.5 丫啶橙 溶于水和乙醇。水溶液带橙黄色荧光。PH值8.4－10.4（由无色至黄绿色） 丙烯酰胺 无色透明片状结晶。溶于水、乙醇、丙酮、乙醚和三氯甲烷，微溶于甲苯，不溶于苯和庚烷。 腺苷 溶于水，微溶于乙醇和乙醚。 ADP Na2 5′-二磷酸腺苷二钠 溶于水。 琼脂 缓溶于热水成湖状，呈中性。不溶于冷水和乙醇。 琼脂糖 溶于热水，遇冷凝结成胶 L-丙氨酸 溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙醚和丙酮。 卵清白蛋白 溶于水和缓冲液 BSA V 牛血清白蛋白V 溶于水、氯化钠溶液及缓冲液后，成澄清溶液。 过硫酸铵 溶于水，但能缓慢水解并生成过氧化氢，热至120℃开始分解。 苦杏苷 味苦，溶于水和乙醇，不溶于乙醚。
AMV反转录酶 溶于PH缓冲液中，一般试剂1ul含有10－100单位。 α-淀粉酶 溶于水 L-精氨酸 易溶于水，不溶于乙醇和乙醚。 L-精氨酸盐酸盐 溶于水，微溶于乙醇。 抗坏血酸（维生素C） 溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙醚、苯、三氯甲烷和石蜡醚等。 L-天门冬酰胺 无色或白色晶体。溶于酸和碱溶液，不溶于乙醇、乙醚和苯。 L-天门冬氨酸 溶于热水和稀酸，不溶于乙醇。 ATP Na2 溶于水。 BCIP 5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸 BCIP的钠盐用水溶，BCIP游离酸用DMSO溶。 6-BA 6-苄氨基嘌呤 溶于稀碱、稀酸溶液，不溶于乙醇。 BES 溶于水。 生物素 较易溶于热水和稀碱溶液，水溶液极易生长霉菌。 Bis-Tris 溶于水。 溴酚蓝 溶于乙醇、乙醚、苯和稀碱溶液，微溶于水。 CAPS 溶于水。
氨基酸(AA)检测试剂盒(茚三酮比色法) 简介： 氨基酸(Amino acid ，AA)是组成蛋白质的基本单位，也是蛋白质的分解产物。动物肝脏、肾脏是氨基酸代谢的主要器官，氨基酸(AA)检测试剂盒(茚三酮比色法)(Amino Acid Assay kit)检测原理是在弱酸条件下，氨基酸与茚三酮共热情况下，能定量的产生蓝紫色的二酮茚胺(又称Ruhemans 紫)，其吸收峰在波长570nm 处，在一定范围内颜色深浅(即吸光度)与氨基酸浓度成正比。该试剂盒主要用于检测血清、尿液、植物组织、食品、药品等中的总游离氨基酸含量。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、 准备样品： ①植物样品：取新鲜植物组织，清洗干净，擦干，切碎，迅速称取，按植物组织：AA Lysis buffer=的比例加入AA Lysis buffer 匀浆或研磨，用去离子水稀释至，混匀，用滤纸过滤，滤液即为氨基酸粗提液，4℃保存备用。 ②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃冻存，用于氨基酸的检测。 ③细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如有必要用AA Lysis buffer 进行适当匀浆，离心5min ，留取上清即为氨基酸粗提液，4℃保存备用，用于氨基酸的检测。 ④高活性样品：如果样品中含有较高浓度的氨基酸，可以使用AA Lysis buffer 进行恰当的稀释。 2、 配制茚三酮工作液: 取适量的茚三酮显色液、AAAssaybuffer ，按茚三酮显色液： AAAssaybuffer=的比例混合，即为茚三酮工作液。4℃避光密闭保存，2周有效。 3、 配制维生素C 工作液: 取出1支维生素C ，准确溶解于10ml 去离子水，混匀。4℃预 冷备用。-20℃保存1周有效。注意：该试剂盒提供的维生素C 及其配制的工作液为过 编号 名称 TC2153 100T Storage 试剂(A): 氨基酸标准(50μg/ml) 1ml 4℃ 试剂(B): AALysisbuffer 250ml RT 试剂(C): 茚三酮显色液 120ml RT 避光 试剂(D):AAAssaybuffer 10.5ml RT 试剂(E): 维生素C 2支 RT 使用说明书 1份
依诺肝素钠注射液 警示语： 【药品名称】通用名称：依诺肝素钠注射液 汉语拼音：Yinuo Gansuna Zhusheye 【性状】本品为无色或淡黄色澄明液体。 【适应症】 2000AxaIU和4000AxaIU注射液 ·预防静脉栓塞性疾病（防止静脉内血栓形成），特别是与骨科或普外手术有关的血栓形成。6000AxaIU，8000AxaIU,和10000AxaIU注射液 ·治疗不稳定性心绞痛及非Q波心肌梗死，与阿司匹林同用。 ·治疗已形成的深静脉栓塞，伴或不伴有肺栓塞。 ·用于血液透析体外循环中，防止血栓形成。 【规格】（1）0.4ml:4000AxaIU；（2）0.6ml:6000AxaIU 【用法与用量】为预防及治疗目的而使用低分子肝素时应采用深部皮下注射给药，用于血液透析体外循环时为血管内途径给药。 本品为成人用药。 禁止肌肉内注射。 每毫升注射液含10000 AxaIU ，相当于100mg依诺肝素钠。每毫克（0.01ml）依诺肝素钠约等于100 AxaIU。 皮下用药须知：在注射之前不需排出注射器内的气泡。 预装药液注射器可供直接使用。应于患者平躺后进行注射。应于左右腹壁的前外侧或后外侧皮下组织内交替给药。注射时针头应垂直刺入皮肤而不应成角度，在整个注射过程中，用拇指和食指将皮肤捏起，并将针头全部扎入皮肤皱折内注射。 应严格遵循推荐剂量或遵医嘱。 在外科患者中，预防静脉血栓栓塞性疾病 当患者有中度血栓形成危险时（如腹部手术），本品推荐剂量为2000AxaIU（0.2ml）或4000AxaIU（0.4ml）每日一次皮下注射。在普外手术中，应于术前2小时给予第一次皮下注射。当患者有高度血栓形成倾向时（如矫形外科手术），本品推荐剂量为术前12小时开始给药，每日一次皮下注射4000AxaIU（0.4ml）。 在蛛网膜下腔/硬膜外麻醉及经皮冠脉腔内成形术时，应特别注意给药间隔，见特殊警告。依诺肝素治疗一般应持续应用7至10天。某些患者适合更长的治疗周期，若患者有静脉栓塞倾向，应延长治疗至静脉血栓栓塞消失且患者不需要卧床为止。在矫形外科手术中，连续3周每日一次给药4000AxaIU是有益的。 在内可治疗患者中，预防静脉血栓栓塞性疾病 依诺肝素钠推荐剂量为每日一次皮下给药4000AxaIU（0.4ml）。依诺肝素钠治疗最短应为6天直至患者不需卧床为止，最长为14天。 治疗伴有或不伴有肺栓塞的深静脉血栓 依诺肝素钠可用于为皮下每日一次注射150AxaIU/kg或每日两次100AxaIU/kg。当患者合并栓塞性疾病时，推荐每日两次100AxaIU/kg。依诺肝素钠治疗一般为10天。应该在适当时开始口服抗凝剂治疗，并应持续依诺肝素钠治疗直至到抗凝治疗效果（INR：2至3）。 治疗不稳定性心绞痛及非Q波心梗 皮下注射依诺肝素钠推荐剂量为每次100AxaIU/kg，每12小时给药一次，应与阿司匹林同用（每日一次口服100至325mg）。在以上患者中推荐疗程最小为2天，至临床症状稳定。一般疗程为2至8天。
WHO International Standard 2nd International Standard Low Molecular Weight Heparin for Molecular Weight Calibration NIBSC code: 05/112 Instructions for use (Version 3.0, Dated 14/05/2008) 1. INTENDED USE The 2nd International Standard Low Molecular Weight Heparin for Molecular Weight Calibration consists of ampoules, coded 05/112, containing aliquots of a freeze-dried material prepared from porcine mucosa. This preparation was established as the 2nd International Standard Low Molecular Weight Heparin for Molecular Weight Calibration by the Expert Committee on Biological Standardisation of the World Health Organisation in 2007 2. CAUTION This preparation is not for administration to humans . The material is not of human or bovine origin. As with all materials of biological origin, this preparation should be regarded as potentially hazardous to health. It should be used and discarded according to your own laboratory's safety procedures. Such safety procedures should include the wearing of protective gloves and avoiding the generation of aerosols. Care should be exercised in opening ampoules or vials, to avoid cuts. 3. UNITAGE There is no assigned unitage associated with this standard. The standard was calibrated by 15 laboratories in 10 countries, against the 1st International Reference Reagent Low Molecular Weight Heparin for Molecular Weight Calibration (1). It is characterised by the Table in Appendix 1. 4. CONTENTS Country of origin of biological material: Denmark. In June 2005 , 251.3 mg bulk material was dissolved in 10 litres water for injection. The solution was distributed at 4°C into 10000 ampoules (CV for volume of fill 0.15% (n=136)), coded 05/112. The contents of the ampoules were then freeze-dried under the conditions normally used for international biological standards. The mean dry weight (n=6) of the freeze-dried plug was 23.5 mg, with a water content of 0.29%. 5. STORAGE Unopened ampoules should be stored in the dark at or below –20°C. 6. DIRECTIONS FOR OPENING DIN ampoules have an …easy -open? coloured stress point, where the narrow ampoule stem joins the wider ampoule body. Tap the ampoule gently to collect the material at the bottom (labeled) end. Ensure that the disposable ampoule safety breaker provided is pushed down on the stem of the ampoule and against the shoulder of the ampoule body. Hold the body of the ampoule in one hand and the disposable ampoule breaker covering the ampoule stem between the thumb and first finger of the other hand. Apply a bending force to open the ampoule at the coloured stress point, primarily using the hand holding the plastic collar. Care should be taken to avoid cuts and projectile glass fragments that might enter the eyes, for example, by the use of suitable gloves and an eye shield. Take care that no material is lost from the ampoule and no glass falls into the ampoule. Within the ampoule is dry nitrogen gas at slightly less than atmospheric pressure. A new disposable ampoule breaker is provided with each DIN ampoule. 7. USE OF MATERIAL No attempt should be made to weigh out any portion of the freeze-dried material prior to reconstitution The calibrant is intended for use in the determination of the molecular weight distribution of low molecular weight heparins by size exclusion chromatography (SEC, also sometimes known as gel permeation chromatography (GPC)). It may be used to calibrate a chromatography system by broad standard calibration (as has been described for the previous calibrant (2)), using the molecular weight distribution information as listed in the table in Appendix 1. For each molecular weight (M) in the Table, the percent of sample above M (%>M) and the percent of sample below M (% 丙酮酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法) 简介： 丙酮酸(Pyruvic acid)又称2-氧代丙酸，是参与整个生物体基本代谢的中间产物之一，可通过乙酰CoA 和三羧酸循环实现体内糖、脂肪和氨基酸间的互相转化，丙酮酸在三大营养物质的代谢联系中起着重要的枢纽作用。 丙酮酸是糖无氧代谢的产物，科研工作者常将丙酮酸和乳酸一起研究，并用二者的比值推算循环衰竭的程度。丙酮酸检测可采用酶催化法，该发是使用乳酸脱氢酶(LDH)催化丙酮酸氧化，生成乳酸和NAD +，通过分光光度法或荧光光度法测定NADH 的减少量，进而计算出丙酮酸含量。 通过分光光度比色法(自动分析仪或分光光度计)测定340nm 处吸光度的下降速率，据此通过比色分析就可以计算出PA 水平。该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清等样品中内源性的丙酮酸含量。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、 准备样品： ① 血浆、血清、尿液及其他体液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于 本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-20℃冻存。 ② 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离 心取上清，-20℃冻存，用于PA 的检测。 ③ 高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的PA ，可以使用原有的裂解液或PBS 等进 行稀释，如鸡血清、血浆可稀释5～10倍后检测。 2、 配制标准品工作液：，即为标准品工作液-丙酮酸标准(0.5mmol/L)。4℃避光保存24h 编号 名称 TC0755 50T Storage 试剂(A): 丙酮酸标准(25mmol/L) 1ml 4℃ 避光 试剂(B): 丙酮酸标准稀释液 5ml RT 试剂(C): PA 显色液 C1: PA Assay buffer 90ml 4℃ 避光 临用前，按C1:C2=30ml:1支的比例混合，即为PA 显色液。 试剂(D): LDH solution 0.4ml -20℃ 避光 使用说明书 1份 一、肝素分类 肝素是哺乳动物体内含的一种粘多糖，它与蛋白质结合在一起存在于肠粘膜、肺、肝等器官内，肝素与蛋白质分离提取后，具有抗凝血、抗血栓、降血脂等多种生理活性，是防止动脉粥样硬化，心脑血管疾病的显效药物。 (1) 普通(标准)肝素是由猪或羊黏膜提取，平均分子量为15000，相当稳定。 (2) 通常把分子量小于6000的称为低分子肝素。低分子肝素与普通肝素比较，其半衰期较长，抗血栓效果好，而抗凝出血倾向较弱，有取代普通肝素的趋势。近年临床常用的有：达肝素钠(法安明)、依诺肝素钠(克赛)、低分子肝素钙(速避凝、那屈肝素钙)。 (3) 目前正在深入研究的肝素制剂中还有低抗凝活性肝素、改构型肝素、类肝素等, 这些药物特点是具有低抗凝、高抗栓、作用时间长和出血作用少的优点，很有开发前途。 二、肝素钠简介 拼音名：Gansuna 英文名：Heparin Sodium 本品系自猪的肠黏膜中提取的硫酸氨基葡萄糖的钠盐，属粘多糖类物质，通过激活抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)而发挥抗凝作用。它对凝血过程的三个阶段均有影响，在体内外均有抗凝作用，可延长凝血时间、凝血酶原时间和凝血酶时间。口服不吸收，皮下、肌肉或静脉给药均吸收良好。 三、肝素钠检测（药典版） 拼音名：Gansuna 英文名：Heparin Sodium 本品系自猪或牛的肠黏膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐，属黏多糖类物质，具有延长血凝时间的作用。按干燥品计算，每1mg 的效价不得少于150 单位。 【性状】本品为白色或类白色的粉末；有引湿性。本品在水中易溶。【比旋度】取本品，精密称定，加水溶解并稀释制成每1ml 中含40mg 的溶液，依法测定（附录Ⅵ E），比旋度应不小于＋35°。 【鉴别】 (1) 取本品与肝素标准品，分别加水制成每1ml 中含2.5mg 的溶液，照电泳法（附录Ⅴ F第三法）试验，供试品和标准品所显斑点的迁移距离之比应为0.9 ～1.1 。 (2) 本品的水溶液显钠盐的鉴别反应（附录Ⅲ）。 【检查】酸碱度取本品0.10g ，加水10ml溶解后，依法测定（附录Ⅵ H），pH 值应为5.0 ～7.5 。 溶液的澄清度与颜色取本品0.50g ，加水10ml溶解后，溶液应澄清无色；如显浑浊，照分光光度法（附录Ⅳ A），在640nm 的波长处测定，吸收度不得大于 0.018；如显色，与黄色1 号标准比色液（附录Ⅸ A 第一法）比较，不得更深。 吸收度取本品，加水制成每1ml 中含4mg 的溶液，照分光光度法（附录Ⅳ A）测定，在260nm 的波长处，其吸收度不得大于0.20；在280nm 的波长处，其吸收度不得大于0.15。 黏度精密称取本品（按实际测得的单位计算相当于40万单位），加水 游离氨基酸的测定——茚三酮比色法标准曲线绘制 1. 实验原理 游离氨基酸的游离氨基可与水合茚三酮作用，产生蓝紫色的化台物二酮茚一二酮茚胺，产物的颜色深浅与游离氨基酸含量成正比，用分光光度计在570nm 下测其含量。因蛋白质中的游离氨基酸也会产生同样反应，在测定前必须用蛋白质沉淀剂将其除掉。 2. 仪器与用具 100ml容量瓶；漏斗；三角瓶；研钵；刻度吸管：0.1ml×1、1ml×2、2ml×2、5ml×l；沸水浴；具塞刻度试管20 ml×10；分光光度计 3. 试剂 3.1.1 水合茚三酮称取0.6g重结晶的茚三酮放烧杯中，加入15ml 正丙醇、30ml正丁醇、60ml乙二醇及9 ml PH 4.54的醋酸盐缓冲液混匀，棕色瓶中冰箱内保存，10天内有效。 3.1.2 氨基酸标准液称取80℃烘干的亮氨酸23.4mg，以10%的异丙醇溶解定溶至50ml （含氮为50ug/ ml），取此液5ml，用水定容至50 ml，此为含氮量5ug/ ml工作液。 3.1.3 0.1%抗坏血酸称取0.1g抗坏血酸定容100 ml，随用随配 4. 实验方法 取6支20ml试管，按下表加剂： 管号 试剂 1 2 3 4 5 6 亮氨酸标准液(ml) 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 无氨蒸馏水(ml) 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 水合茚三酮(ml) 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 抗坏血酸(ml) 0.10.10.10.10.10.1氨基氮量（ug/管）0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 将各管溶液混合均匀，封口，在沸水中加热15min，取出后立即用冷水摇 动冷却，用60%乙醇定容至20 ml，摇匀。 0 0.025 0.055 0.099 0.146 0.186 λ=570nm处测定吸 光度 请仔细阅读说明书并在医师指导下使用 【药品名称】 通用名称：肝素钠注射液 英文名称：Heparin Sodium lnjection 汉语拼音：Gansuna Zhusheye 【成份】 本品主要成份为肝素钠。肝素钠系自猪或牛的肠黏膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐，属黏多糖类物质。 辅料为：苯酚、注射用水。 【性状】本品为无色至淡黄色的澄明液体。 【适应症】 用于防治血栓形成或栓塞性疾病（如心肌梗塞、血栓性静脉炎、肺栓塞等）；各种原因引起的弥漫性血管内凝血（DIC）；也用于血液透析、体外循环、导管术、微血管手术等操作中及某些血液标本或器械的抗凝处理。 【规格】2ml:12500单位 【用法用量】 （1）深部皮下注射：首次5000～10000单位，以后每8小时8000～10000单位或每12小时15000～20000单位；每24小时总量约30000～40000单位，一般均能达到满意的效果。 （2）静脉注射：首次5000～10000单位，之后，或按体重每4小时100单位/kg，用氯化钠注射液稀释后应用。 （3）静脉滴注：每日20000～40000单位，加至氯化钠注射液1000mI中持续滴注。滴注前可先静脉注射5000单位作为初始剂量。 （4）预防性治疗：高危血栓形成病人，大多是用于腹部手术之后，以防止深部静脉血栓。在外科手术前2小时先给5000单位肝素皮下注射，但麻醉方式应避免硬膜外麻醉，然后每隔8～12小时5000单位，共约7日。 【不良反应】 毒性较低，主要不良反应是用药过多可致自发性出血，故每次注射前应测定凝血时间。如注射后引起严重出血，可静注硫酸鱼精蛋白进行急救。偶可引起过敏反应及血小板减少，常发生在用药初5～9天，故开始治疗1个月内应定期监测血小板计数。偶见 血栓弹力图(肝素酶杯)检测试剂盒（粘度测定法） 适用范围：与血栓弹力图仪配合使用，用于体外检测人全血的血凝时间（R）指标，用于评价肝素治疗前后全血的凝血功能。 1.1包装规格 5人份/盒、10人份/盒。 1.2主要组成成分 2.1 外观 试剂盒外观整洁，标识清晰。试剂盒内的各液体组分澄清透明，无沉淀或絮状物，无漏液。样品测定杯无破损，无变形。 2.2 有效性 用本试剂盒检测临床确定的3例无肝素残留的普通全血样本，用普通杯和肝素酶杯试剂分别测得的普通杯血凝时间（R1）、肝素酶杯血凝时间（R2），R1-R2＜1min；同时用本试剂盒检测临床确定的3例含有肝素的全血样本，用普通杯和 肝素酶杯分别测得的普通杯血凝时间（R1）、肝素酶杯血凝时间（R2），R1-R2≥1min。 2.3 批内精密度 将无肝素的质控血浆Level 2用同批试剂盒的普通杯和肝素酶杯各检测10次，计算血凝时间R1、R2的变异系数（CV），均应小于15%；将含有0.0033mg/mL 肝素钠的质控血浆Level 2用同批试剂盒的肝素酶杯检测10次，计算血凝时间（R）的变异系数（CV），均应小于15%。 2.4批间精密度 将无肝素的质控血浆Level 2用三个批次的试剂盒的普通杯和肝素酶杯各检测10次，计算血凝时间R1、R2的变异系数（CV），均应小于15%；将含有0.0033mg/mL肝素钠的质控血浆Level 2用不同三批试剂的肝素酶杯各检测10次，计算血凝时间（R），均应小于15%。 2.5 抗干扰性 含有0.0033mg/ml肝素钠的质控血浆Level 2中分别加入甘油三酯（终浓度 10mg/L）、胆红素（终浓度5mg/L）、血红蛋白（终浓度5mg/L），用肝素酶杯进行测定，血凝时间（R）应在质控血浆Level 2的质控范围内（2.0 min 茚三酮法测氨基酸 Document number：NOCG-YUNOO-BUYTT-UU986-1986UT 茚三酮显色法测定氨基酸的含量 一．原理：凡含有自由氨基的化合物，如蛋白质、多肽、氨基酸的溶液与水合茚三酮共热时，能产生紫色化合物，可用比色法进行测定。氨基酸与茚三酮的反应分两个步骤。第一步是氨基酸被氧化形成CO2、NH3和醛、茚三酮被还原成还原型茚三酮；第二步是所形成的还原型茚三酮与另一个茚三酮分子和NH3缩合生成有色物质。 二．仪器：721型分光光度计台天平减压蒸馏器干燥容量瓶移液枪烧杯试管架试管水浴锅。 三．药品：（1）标准氨基酸溶液：配制成L 溶液 （2），2mol/L 醋酸缓冲液：量取86mL 2mol/L 醋酸钠溶液，加入14mL 2mol/L 乙酸混合而成。用pH 检查校正。 （3）茚三酮显色液：称取170mg 茚三酮和30mg 还原茚三酮，用20mL 乙二醇甲醚溶解 （4）60％乙醇。 （5）样品液：每毫升含～50μg 氨基酸。 茚三酮若变为微红色，则需按下法重结晶：称取5g 茚三酮溶于15～ 25mL 热蒸馏水中，加入活性炭，轻轻搅拌。加热30min 后趁热过滤，滤液放入冰箱过夜。次日析出黄白色结晶，抽滤，用1mL 冷水洗涤结晶，置干燥器干燥后，装入棕色玻璃瓶保存。 还原型茚三酮按下法制备：称取茚三酮，用沸蒸馏水溶解，得黄色溶液。将维生素C 用25mL 温蒸馏水溶解，一边搅拌一边将维生素C 溶液滴加到茚三酮溶液中，不断出现沉淀。滴定后继续搅拌15min，然后在冰箱内冷却到4℃，过滤、沉淀用冷水洗涤3 次，置五氧化二磷真空干燥器中干燥保存，备用。 乙二醇甲醚若放置太久，需用下法除去过氧化物：在500mL 乙二醇甲醚中加入5g 硫酸亚铁，振荡1～2h，过滤除去硫酸亚铁，再经蒸馏，收集沸点为121～125℃的馏分，为无色透明的乙二醇甲醚。 四、操作步骤 1．标准曲线的制作 分别取L 的标准氨基酸溶液0，，，，，于试管中，用水补足至1mL。各加入1mL ，2mol/L 醋酸缓冲液；再加入1mL 茚三酮显色液，充分混匀后，盖住试管口，在100℃水浴中加热15min，用自来水冷却。放置5min 后，加入 3mL60％乙醇稀释，充分摇匀，用分光光度计测定OD570nm。（脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应呈黄色，应测定OD440nm）。 以OD570nm 为纵坐标，氨基酸含量为横坐标，绘制标准曲线。丙酮酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)
肝素钠生产工艺
茚三酮比色法测定游离氨基氮
肝素钠注射液说明书
血栓弹力图(肝素酶杯)检测试剂盒(粘度测定法)产品技术要求lepu
茚三酮法测氨基酸
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